CS273186B2

CS273186B2 - Method of spiroimidazolidinedione production

Info

Publication number: CS273186B2
Application number: CS591188A
Authority: CS
Inventors: Steven W Goldstein; Reinhard Sarges
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1987-09-04
Filing date: 1988-09-02
Publication date: 1991-03-12
Also published as: JPH0583554B2; IL87590A; EP0306251A2; AU2184188A; YU46863B; PT88407A; IL87590A0; KR890005112A; MY103765A; ZA886507B; WO1989001775A1; PL156798B1; EP0306251A3; DK488688D0; AU595467B2; PH24957A; HUT56106A; DD273381A5; PT88407B; NO901016D0

Description

Způsob výroby spiro-imidazolidindionů (57) Způsob výroby spiro-imidazolidindionů obecného vzorce I, kde X je vodík, fluor, chlor, brom, nitroskupina, trifluormethyl, alkyl, C^^-alkoxyl nebo C^-alkylthioskupina, Y je kyslík nebo síra, R je vodík nebo C^_^-alkyl a -A=B-D=E- znamená seskupení -N=CH-CH=CH-, -CH=N-CH=CH-, -CH=0H-N=CH- nebo -CH=CH-CH=N-, jejioh N-oxidů a solí s bázemi obsahujícími farmakologicky přijatelný kation, při němž se vychází z příslušně substituované cyklické karbonylové sloučeniny obecného vzoroe II, která se kondenzuje s kyanidem alkalického kovu a uhličitanem amonným, načež se popřípadě získaná halogenovaná sloučenina dehalogenuje a/nebo se získaný produkt oxiduje na N-oxid a výsledná sloučenina obecného vzoroe I se popřípadě převede na sůl s bází. Vyráběné sloučeniny působí jako inhibitory aldosreduktasy a lze je používat k prevenci nebo léčbě určitých chronických komplikací diabetů.

(IX)

3·

CS 273 186 B2

Vynález se týká nových imidazolidindionů zajímavých pro pracovníky v oblasti medicinální chemie a chemoterapie. Vynález zejména popisuje řadu spiro-imidazolidindionů odvozených od 2,3-dihydropyrano 2,3-b^ pyridinového oykliokého systému. Tyto nové sloučeniny jsou terapeuticky užitečné pro kontrolu určitých chronických komplikací diabetů, jako je například diabetická katarakta, retinopathie a neuropathie.

Dřivéjší pokusy o získání nových a lepších orálně aplikovatelných antidiabetických látek spočívaly ve většině případů ve snaze o syntézu novýoh sloučenin snižujících hladinu cukru v krvi. V poslední době bylo provedeno několik studií zabývajících se účinností různých organických sloučenin na prevenoi nebo zastavení určitých chronických komplikací diabetů, jako je diabetická katarakta, neuropathie a retinopathie a podobně. Tak například K. Sestanj a spol. v americkém patentovém spisu č. 3 821 383 popisují, že určité inhibitory aldosreduktasy, jako 1,3-dioxo-1H-benz£d,e]isochinolin-2(3H)-octová kyselina a některé její úzce příbuzné deriváty, lze k těmto účelům používat i přesto, že nejsou známé jako hypoglykemicky účinné látky. Tyto sloučeniny působí tak, že inhibují aktivitu enzymu aldosreduktasy, který je primárně odpovědný za katalysu redukce aldos (jako glukosy a galaktory) v těle člověka na odpovídající polyoly (jako sorbitol a galaktitol). Tímto způsobem se předchází nebo snižuje nežádoucí akumulace galaktitolu v očních čočkách pacientů trpíoíoh galaktosemií a sorbitolu v čočkách, sítnici, periferním nervovém systému a ledvinách diabetiků. Výsledkem potom je, že zmíněné sloučeniny potlačují určité chronické komplikace diabetů, včetně komplikací oční povahy, protože je již známo, že přítomnost polyolů v očníoh čočkách vede ke vzniku katarakty provázené ztrátou čirosti očníoh čoček.

Vynález popisuje nové spiro-imidazolidindiony užitečné jako inhibitory aldosreduktasy pro léčbu určitých chronických komplikací vyskytujícíoh se u diabetiků. Konkrétně je možno tyto nové sloučeniny podle vynálezu popsat obecným vzorcem I

ve kterém

X představuje atom vodíku, fluoru, chloru nebo bromu, nitroskupinu, trifluormethylovou skupinu, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkylthioskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

Y představuje kyslík nebo síru,

R znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a

-A=B-D=E- znamená seskupení -IT=CH-GH=CH-, -CH=H-CH=CH-, -CH=GH-NÓH- měno -GH=GH-CH=N, který zahrnuje i příslušné H-oxidy a soli s bázemi obsahujícími farraakologioky přijatelné kationty.

Shora uvedené nové sloučeniny jsou inhibitory aldosreduktasy a jsou tedy schopny snižovat nebo inhibovat tvorbu sorbitolu v očních čočkáoh, sítnici, ledvinách a periferních nervech diabetiků.

Jednu ze zvláší zajímavých sloučenin podle vynálezu tvoří ty látky shora uvedeného obecného vzorce I, ve kterém X, Y a R mají shora uvedený význam. Mezi výhodné sloučeniny z této skupiny náležejí ty látky, ve kterých X znamená atom vodíku, fluoru, chloru nebo

CS 273 136 B2 bromu, Y představuje kyslík a R znamená vodík nebo methylovou skupinu. Zvláší výhodné potom jsou ty látky, ve kterých X znamená chlor něho hrom a R představuje methylovou skupinu.

Další zajímavou skupinu sloučenin podle vynálezu tvoří látky shora uvedeného obecného vzorce I, ve kterém X znamená atom vodíku, fluoru, chloru něho hromu, Y představuje kyslík, R má shora uvedený význam a -A=B-D=E- představuje N-oxidový derivát skupiny -N=CH-CH=CH-. Mezi výhodné sloučeniny z této skupiny náležejí ty látky, ve kterých atom chloru a R znamená vodík něho methylovou skupinu.

Zvláší zajímavé potom jsou takové typické a výhodné sloučeniny podle vynálezu, jako (±)-cis-6'-chlor-2', 3-dihydro-2'-methylspiro[imidazolidin-4,4^Z-4^Z fl-pyrano ridinj-2,5-dion (kde ois znamená, Se 2'-methylová skupina a 4'-NH se naoháze; že straně pyranového kruhu).

2>3-b]p.yí na té(±)-trans-6'-chlor-2^z, 3-dihydro-2'-methylspiro imidazolidin-4,4'-4'H-pyrano [2,3-b]pyridinj-2,5-dion (kde trans znamená, že 2^,-methylová skupina a 4'-NH se nacházejí na opačných stranách pyranového kruhu), (±)-ois-6 '-£luor-2', 3 '-dihydro-2 '-methylspiro [imidazolidin-4,4 '-4 'H-pyrano j*2,3 —bjpyridinj-2,5-dion, (+)-ois-6'-brom-2', 3'-dihydro-2'-methylspiro ridinj-2,5-dion, t

(4's)(2'R)-6*-ohlor-2', 3'- dihydro-2 '-methylspiro pyridin] -2,5-dion a (4 's)(2'R)-6'-chlor-2^#, 3 '-dihydro-2'~ methylspiro {imidazolidin-4,4 '-4'H-pyrano [2,3-b] pyridin]-2,5-dion-8'-oxid.

Jiraidazolidin-4,44'H-pyrano^2,3-hJpy[imidazolidin-4,4 '-4 'H-pyrano[2,3-b

Tyto klíčové sloučeniny jsou účinnými inhibitory aldosreduktasy a mimoto vykazují výraznou účinnost co do snižování hladiny sorhitolu v sedacím nervu, sítnici a očních čočkách diabetiků.

Podle vynálezu se nové sloučeniny obecného vzorce I připravují tak, že se příslušné substituovaná karbonylová sloučenina obecného vzorce II

ve kterém

X, Y a R mají shora uvedený význam, .

kondenzuje s kyanidem alkalického kovu (například s kyanidem sodným nebo kyanidem draselným) a uhličitanem amonným za vzniku žádaného finálního spiro-imidazolidindionu shora uvedeného strukturálního vzorce.

Tato reakce se normálně provádí v přítomnosti inertního polárního organického rozpouštědla, ve kterém jsou jak reakčni složky, tak reakčni činidla mísitelná, Mezi výhod ná organická rozpouštědla použitelná k tomuto účelu náležejí cyklické ethery, jako dioxan a tetrahydrofuran, nižší alkylenglykoly, jako ethylenglykol a triraethylenglykol,

CS 273 186 B2 a vodou mísitelné .nižší alkanoly, jako methanol, ethanol a isopropanol, jakož i Ν,Ν-di (nižší alkyl)(nižší)alkanamidy, jako N,N-di-methylaoetamid a podobné, kromě odpovídajících nesubstituovaných alkanaraidů obsahujících 1 až. 4· atomy uhlíku, jako jsou formamid, acetamid a podobně. Obecně se reakce provádí při teplotě pohybující se zhruba od 25 °C do 150 °C, po dobu asi 2 hodin zhruba do 4 dnů. I když používaná množství reakční složky a reakčnich činidel se mohou v určitém rozmezí měnit, je výhodné použít alespoň malý molární nadbytek jak kyanidu alkalického kovu, tak uhličitanu amonného oproti výchozí cyklické karbonylové sloučenině, aby se dosáhlo maximálního výtěžku.

Po ukončení reakce se žádaný produkt normálně izoluje běžným způsobem, například nejprve zředěním reakční směsi vodou s ledem s následujícím okyselením, čímž se získá žádaný spiro-imidazolidindion v takové formě, kterou je možno z reakční směsi snadno izolovat. Produkt je možno dále čistit kromě standardního překrystalování také na příklad chromatografií na sloupci silikagelu a podobně.

Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu, ve kterém X představuje hydroxylovou skupinu, lze snadno připravit z odpovídajících sloučenin, ve kterých X znamená methoxyskupinu, jednoduchou dealkylací prováděnou standardními technikami známými v daném oboru. Tak například 6-raethoxyaubstituovaná sloučenina podle vynálezu se za použití bromidu boritého snadno převede na odpovídající 6-hydroxysloučeninu. Mimoto lze určité sloučeniny podle vynálezu, nesoucí na kruhu substituent (X) tvořený nižší alkoxyskupinou s více než jedním atomem uhlíku, alternativně připravit z odpovídajících methoxysloučenin tak, že se tyto methoxysloučeniny nejprve převedou na odpovídající hydroxyderiváty, které se potom alkylují například ethyljodidera nebo isopropylbromidem způsobem známým v daném oboru. Navíc potom určité sloučeniny podle vynálezu, které na kruhu nesou jako substituent (X) halogen (jak je definován výše) nebo nitroskuplnu, je možno alternativně připravit z odpovídajících nesubstituovaných sloučenin, ve kterých X znamená vodík, přímou halogenací nebo nitrací za použití technik, které jsou pracovníkům v oboru syntetické organické chemie dobře známé. Naopak zase halogensubstituovanou sloučeninu připravenou základním způsobem podle vynálezu, jako 6-chlorsloučeninu, lze snadno převést na odpovídající nesubstituovanou sloučeninu (tj. 6-dehalogenderivát) za použití standardních technik používaných v daném oboru k provádění hydrogenolýzy, jako je například katalytická hydrogenace. Tímto způsobem se (±)-cis-6'-chlor-2', 3'-dihydro-2'-methylspiro^imidazolidin-4,4'-4'H-pyranoj^2,3-bJpyridin^-2,5-dion snadno převede na odpovídající 6-dechlorderivát.

N-oxidové deriváty základních sloučenin podle vynálezu je možno snadno připravit známou oxidací těchto základních sloučenin, prováděnou postupy o nichž je známo, že jimi lze analogické konverze provádět, jako je například oxidace 30% peroxidem vodíku nebo benzoylperoxidem a podobně. Podle jednoho z těchto postupů se oxidace s výhodou uskutečňuje za použití 30% vodného peroxidu vodíku v kyselém rozpouštědle, jako v přítomnosti kyseliny octové, při teplotě zhruba od 0 do 100 °C, s výhodou zhruba od 80 do 90 °C a trvá asi 16 hodin.

Výchozí ketony (tj. cyklické karbonylové sloučeniny obecného vzorce II) potřebné k výrobě žádaných finálních produktů obecného vzorce I způsobem podle vynálezu jsou z větší části nové (tj. v případě, že X má jiný význam než vodík) a účelně se připravují ze snadno dostupných organických látek vícestupňovými sledy reakcí. Tak například nové 2,3-dihydro-4H-pyrano[2,3-b]pyridin-4-ony obecného vzoroe II, ke kterému Y znamená kyslík, so elegantním způsobem připravují ze známé 2-mothoxynikotlnové kyseliny několikastupňovým sledem reakcí popsaným v experimentální části tohoto textu (viz například přípravy A - Y). Obdobně je možno z 2-methylthionikotinové kyseliny připravit odpovídající 2,3-dihydro-4H-thiopyrano^2,3-b]pyridin-4-ony obecného vzorce II, v.e kterém Y znamená síru.

Protože sloučeniny podle vynalezu vesměs obsahují alespoň jedno centrum asymetrie,

CS 273 186 B2 mohou existovat v různých stereoisomerníoh formách. Tak například sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R znamená atom vodíku, obsahují jedno centrum asymetrie, zatímco ty, ve ktorýoh R představuje alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, obsahují dvě centra asymetrie. Zmíněné sloučeniny tedy mohou existovat v oddělených opticky aktivních ( + )- a (-)- formách, jakož i v raoemiokých směsích nebo v (-t-)-směsích a ty sloučeniny, které obsahují dvě centra asymetrie, mohou kromě toho existovat jako diastereomery. Vynález zahrnuje všechny tyto formy. Diastereomery je možno dělit známými metodami, například frakění krystalizaci a podobně, zatímco opticky aktivní isomery lze získat jodnoduchým rozštěpením raoemátů pomocí standardních technik, které jsou detailněji popsány v experimentální části tohoto textu (v tomto ohledu viz příklady 10 až 13).

I

Jako házická činidla používaná při práoi způsobem podle vynálezu k přípravě shora zmíněných farmaceuticky přijatelnýoh solí s bázemi se používají chemické báze, tvořící s popisovanými spiroheteroazolony, například s (4^zS)(2^zR)-6^z-ohlor-2^z, 3^z-dihydro-2^z-methyl3piřo[imidazolidin-4,4^z-4^,H-pyrano^2,3-b^pyridinj-2,5-dionem, netoxioké soli s bázemi. Mezi tyto konkrétní netoxioké soli s bázemi náležejí soli obsahující takové farmakologicky přijatelné kationty jako kationty sodné, draselné, vápenaté, hořečnaté a podobné. Tyto soli lze snadno připravit jednoduchou reakcí shora uvedeného spiroimidazolidindionu s vodným roztokem obsahujícím žádaný farmakologicky přijatelný kationt a odpařením výsledného roztoku k suchu, s výhodou za sníženého tlaku. Alternativně je možno tyto soli také připravit smísením roztoku kyselé sloučeniny v nižším alkanolu s žádaným alkoxidem alkalického kovu a odpařením výsledného roztoku stejným způsobem jako výše. V každém z těchto případů se k zajištění úplného proběhnutí reakce a k dosažení maximálního výtěžku žádaného finálního produktu s výhodou používají stechiometrioká množství reakoních složek.

Jak již bylo uvedeno výše, je možno sloučeniny podle vynálezu snadno upravit pro terapeutické použití jako inhibitory aldosreduktasy ke kontrole určitých chronických komplikací diabetů, protože tyto sloučeniny jsou schopny statisticky významným způsobem snižovat hladinu sorbitolu v očních čočkách a periferních nervech diabetiků. Tak například bylo zjištěno, že (4^zS)2^zR)-chlor-2^z, 3^z-dihydro-2^z-methylspiro[imidazolidin-4,4^z-4^zH-pyrano^2,3-bjpyridin^-2,5-dion, který je typick.ou a výhodnou látkou podle vynálezu, irihibuje vytváření vyšších koncentrací sorbitolu jak v sedacím nervu, tak v očních čočkách diabetických krys statistioky velmi významným způsobem, je-li podáván orálně v dávkách pohybujících se od 0,1 do 10,0 mg/kg.

Popisované sloučeniny podle vynálezu je možno aplikovat orálně, místně nebo parenterálně. Obecně se tyto sloučeniny běžně aplikují v dávkách pohybujících se v rozmezí zhruba od 0,05 mg do 10 mg/kg tělesné hmotnosti denně i když se pochopitelně vyskytují odchylky závisející na hmotnosti a stavu pacienta a na zvolené aplikační cestě

Sloučeniny podle vynálezu je možno aplikovat buS samotné, nebo v kombinaci s farmaceuticky přijatelnými nosiči libovolnou z různých cest uvedených shora, přičemž může jít o aplikaci jednorázovou nebo vícenásobnou. Sloučeniny podle vynálezu lze aplikovat v široké paletě různých lékových forem, tzn., že je lze kombinovat s různými farmaceuticky přijatelnými inertními nosiči a zpracovávat na tablety, kapsle, pastilky, trocheje, tvrdé· bonbóny, prášky, spre’je, vodné suspenze, injekční roztoky, elixíry, sirupy a podobně. Mezi výše zmíněné nosiče náležejí pevná ředidla nebo plnidla, sterilní vodné prostředí a různá netoxioká organická rozpouštědla. Obecně jsou sloučeniny podle vynálezu v těchto lékových formách přítomny v koncentraci pohybující se zhruba od 0,5 % do 90 % hmot., vztaženo na celkovou hmotnost výsledné žádané dávkovači jednotky.

K orálnímu podání je možno používat tablety obsahující různé pomocné látky,, jako citronan sodný, uhličitan vápenatý a fosforečnan vápenatý, spolu s různými desintegrač nimi činidly, jako je škrob, s výhodou bramborový nebo tapiokový škrob, alginová

273 186 B2 kyselina a některé komplexní silikáty, a pojidly, jako jsou polyvinylpyrrolidon, želatina a arabská guma· K výrobě tablet se velmi často používají také kluzné látky, jako stearát horečnatý, natriura-lauryl-sulfát a mastek. Pevné prostředky analogického typu lze také používat k plnění měkkých a tvrdých želatinovýoh kapslí - v tomto případe obsahují výhodné prostředky také polyethylenglykoly o vysoké molekulové hmotnosti.

Ve vodných suspenzích nebo elixírech určených k orálnímu podání může být základní účinná složka kombinována s různými sladidly a aromatickými přísadami, barvivý a popřípadě emulgátory a/nebo suspendačními činidly, přičemž jako ředidla se používají voda, ethanol, propylenglykol, glycerin a jejich různé kombinace.

K parenterální aplikaci je možno používat roztoky sloučenin podle vynálezu v sesamovém nebo podzemnicovém. oleji nebo ve vodném propylenglykolu nebo H,K-dimethylformamidu, jakož i sterilní vodné roztoky odpovídajících ve vodě rozpustných solí těchto látek s alkalickými kovy nebo kovy alkalických zemin, jak byly uvedeny shora. Tyto vodné roztoky se v případě potřeby vhodně pufrují a vodné ředidlo se nejprve isotonisuje přídavkem chloridu sodného nebo glukosy. Tyto konkrétní vodné roztoky jsou zvláší vhodné k intravenosním, intramuskulárním, subkutánním a intraperitoneálním injekcím. Používané sterilní vodné prostředí se připravuje standardními technikami dobře známými v daném oboru. Dále je také možno aplikovat shora popsané sloučeniny místně za použití vhodného oftalmologického roztoku k aplikaci kapáním do oka, obsahujícího účinnou látku v koncentraci 0,5 až 2,0 %.

Aktivita sloučenin podle vynálezu jako látek pro kontrolu chronických komplikací diabetů se zjišíuje tak, že se zkoumá, zda testovaná látka vyhoví požadavkům jednoho nebo několika následujících farmakologiokých testů:

(1) měření schopnosti testované látky inhibovat enzymatickou aktivitu isolované aldosreduktasy;

(2) měření schopnosti testované látky snižovat nebo inhibovat akumulaci sorbitolu v sedacím nervu a očních čočkách akutně streptozotooinovaných (tj. diabetických) krys;

(3) měření schopnosti testované látky zvrátit již zvýšenou hladinu sorbitolu v sedacím nervu a očních čočkách krys s chronickým diabetem vyvolaným podáváním streptozotocinu;

(4) měření schopnosti testované látky preventivně zamezovat nebo inhibovat tvorbu galaktitolu v očních čočkách akutně galaktosemických krys?

(5) měření schopnosti testované látky oddálit tvorbu šedého zákalu očního (katarakty) a brzdit zakalování očních čoček u chronicky galaktosemických krys.

Vynález ilustrují následující přípravy a příklady provedení, kterými se však rozsah vynálezu v žádném směru neomezuje.

Příprava A

K míchané suspenzi 35 g (0,22 mol) 2-ohlornikotinové kyseliny (lonza lne., Pair lawn, Nevr Jersey) ve 400 ml methanolu se přidá 25,4- g (0,47 mol) metoxidu sodného. Hethoxid sodný se přidává po částech. Směs se míchá až do vzniku čirého roztoku, který se přenese do ocelového autoklávu a zhruba 16 hodin (tj. přes noo) se zahřívá na 125 °C. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti (cca 20 °C), zfiltruje se a filtrační koláč se promyje methanolem. Organický filtrát se spojí s methanolem z promývání a zahustí se ve vakuu. Získá se bílý pevný materiál, který se rozpustí ve vodě. Vodný roztok se 6N kyselinou chlorovodíkovou okyselí na pH 3 a Ihned se zfiltruje k izolaci vysráženého pevného produktu, který se vysuší na vzduchu do konstantní hmotnosti (coa 16

CS 273 186 B2 hodin, tj. přes noo). Tímto způsobem se získá 21,8 g (64 %) čisté 2-methoxynikotinové kyseliny o teplotě tání 147 až 148 °C (literatura udává 144 až 146 °C{ viz D.E. Kuhla a spol. v americkém patentovém spisu δ. 3 879 403). čistý produkt se dále charakterizuje pomocí NMR spektroskopie.

Příprava B

Do reakční baňky, opatřené mechanickým míchadlem a chladičem chlazeným pevným oxidem uhličitým se předloží 25,5 g (0,166 mol) 2-methoxynikotinové kyseliny (produkt z přípravy A) a 1 500 ml vody. Směs se začne míchat a do vzniklé suspenze se až do nasycení uvádí plynný chlor, což trvá 30 minut, Reakční směs se zhruba 16 hodin (tj, přes noc) míchá při teplote místnosti (cca 20 °C) a potom se zfiltruje k izolaci surového produktu. Tento materiál se promyje vodou, vysuší se .na vzduchu a rozpustí se v chloroformu. Chloroformový roztok se jednou promyje nasyoeným roztokem chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým, sušicí činidlo se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Získá se 26,2 g (84 %) čisté 5-chlor-2-methoxynikotinové kyseliny ve formě bíle pevné látky tající při 149 až 151 °C (literatura udává teplotu tání 149 až 150 °G; viz D.E. Kuhla a spol. v americkém patentovém spisu č, 3 879 403). čistý produkt se dále charakterizuje pomocí NMR spektroskopie.

Příprava C

Do 2,5 litru intensivně míchaného 5% vodného roztoku chlornanu sodného, ochlazeného na 10 °C se po částech přidá 217 g (1,42 mol) 2-methoxynikotinové kyseliny (produkt z přípravy A). Během přidávání se teplota reakční směsi chlazením udržuje pod 28 °C. Po skončeném přidávání se směs zhruba 16 hodin (tj. přes noc) míchá při teplotě místnosti (cca 20 °C), potom se koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou okyselí na pH 2,0. Vysrážený pevný produkt se odsaje, dvakrát se trituruje vždy s 500 ml hexanu, potom se vysuší ve vysokém vakuu. Z£ská se 201 g (75 %) čisté 5-chlor-2-methoxynikotinové kyseliny, která je v každém ohledu identická s produktem získaným v přípravě B, což dokazuje zejména NMR spektroskopie.

Příprava D

Směs tvořená 100 g (0,533 mol) 5-ohlor-2-methoxynikotinové kyseliny (produkt z přípravy 0) suspendované v 500 ml methanolu obsahujících ooa 3,0 ml koncentrované kyseliny sírové se v jednolitrové reakční baňce s kulatým dnem 3 hodiny zahřívá za míchání k varu pod zpětným chladičem. Po ukončení tohoto zahřívání se reakční směs za míchání ochladí na teplotu místnosti (cca 20 °C) a potom se při teplotě místnosti zhruba 16 hodin míchá (přes noc). Vysrážený krystalický produkt se z reakční směsi odsaje a shromážděné krystaly se promyjí čerstvým methanolem. Získá se 59,5 g (55 %) čistého methyl-5-chlor-2-methoxýnikotinátu o teplotě tání 86 až 87 °C. Z matečných louhů se získá druhý podíl stejně čistého produktu, o hmotnosti 18,4 g (17 %). Celkový výtěžek čistého produktu činí 72 % teorie. Čistý produkt se dále charakterizuje pomocí NMR spektroskopie.

Ί

CS 273 186 Β2

Příprava Β

Do tříhrdlé banky s kulatým dnem, opatřené mechanickým míchadlem a uváděčkou dusíku, se v atmosféře suchého dusíku předloží 63,0 g (0,312 mol) methyl-5-chlor-2-metho~ xynikotinátu (produkt z přípravy D) ve 300 ml suchého tetrahydrofuranu a k této směsi se za neustálého míchání přidá 27,9 ml (0,373 mol) acetonu a 20,1 g (0,373 mol) methoxidu sodného. Výsledná reakční směs se ooa 20 hodin míchá při teplotě místnosti (zhruba 20 °C), potom se zfiltruje pomocí filtrační nálevky opatřené fritou (25 až /um). Odfiltrovaný produkt se promyje 100 ml ethylacetátu a vysuší se ve vakuu do konstantní hmotnosti. Získá se 72,65 g (92 %) 3-acetonyl-karbonyl-5-chlor-2-methoxypiridinu ve formě sodné soli. Produkt je tvořen žlutavě bílým nehygroskopickým práškem tajícím nad 250 °C.

Příprava B

Do reakční baňky se předloží roztok 44,5 g (0,177 mol) sodné soli 3-acetonylkarbonyl-5-chlor-2-methoxypyridinu (produkt z přípravy B) v 650 ml ledové kyseliny octové, který se na olejové lázni o teplotě 115 °0 zahřeje na 100 °C a přidá se k němu 65 ml 48% kyseliny bromovodíkové. Teplota olejové lázně se ze 115 °C zvýší na 130 °C a reakční směs se 15 minut míchá, přičemž se hloubka ponoru baňky do olejové lázně reguluje tak, aby se vnitřní teplota reakční směsi během tohoto finálního zahřívání udržela na 100 °C. Po ukončení tohoto zahřívání se reakční směs v ledu rychle ochladí na 24 °C a vylije se do 2 litrů, vody s ledem. Výsledný vodný roztok se extrahuje třikrát vždy 250 ml raethylenchloridu, spojené organické vrstvy se postupně promyjí nejprve dvakrát vždy 250 ml vody a potom se promývají 2% vodným roztokem hydroxidu sodného v dávkách po 250 ml tak dlouho, až si vodné vrstvy uchovají zásaditou reakci. Promytá organická vrstva se vysuší bezvodým síranem horečnatým, sušioí činidlo se odfiltruje a čirý filtrát se k izolaci produktu zahuetí ve vakuu. Získá se 19,3 g (56 %) čistého 6-ohlor-2-methyl-4H-pyrano^2,3-bjpyridin-4-onu. čistý produkt byl charakterizován pomocí NMR spektroskopie.

Příprava G

Směs tvořená 15,0 g (0,0767 mol) 6-chlor-2-methyl-4H-pyrano^2,3-bJpyridin-4-onu suspendovanými ve 250 ml tetrahydrofuranu (výchozí látkou je produkt z přípravy B) se za míchání ochladí v pevném oxidu uhličitém (-78 °C) na -72 °C a během 10 minut se k ní po částech přidá 3,06 g (0,080 mol) lithiumaluminiumhydridu. Po skončeném přidávání se směs 14 hodin míchá při teplotě -78 °C (teplota lázně), potom sa k ní takovým způsobem, aby se teplota uvnitř reakční směsi během přidávání udržela pod -45 °C, za míchání přidá 19,5 ml ledové kyseliny octové (4,44 ekvivalentu) rozpuštěné ve 25 ml tetrahydrofuranu. Výsledná směs se nechá znovu ochladit na -70 °C, potom se vylije do 1 litru studené vody a extrahuje se třikrát vždy 300 ml diethyletheru. Spojené organické extrakty se postupně promyjí 500 ml vody, 200 ml 2% vodného roztoku hydroxidu sodného a znovu dvakrát vždy 200 ml vody, organický roztok se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a zfiltruje se. Po odpaření čirého filtrátu za sníženého tlaku se získá 7,51 g (50 %) čistého 6-chlor-2,3-dihydro-2-methyl-4H-pyrano [2,3-b]pyridin-4-onu o teplotě tání 84 až 86 °C. Tento čistý produkt byl dále charakterizován pomocí hmotové spektroskopie a NMR spektroskopie.

A

CS 273 186 B2 o

Příprava H

Do suché dvoulitrové baňky s kulatým dnem, opatřené teploměrem, mechanickým míohadlem a přikapávaoí nálevkou, se předloží 25»13 g (0*128 mol) 6-chlor-2-methyl-4H-pyrano [2,3-bJpyridin-4-onu (produkt z přípravy P) a pomoci přikapávaoí nálevky se přidá směs 615 ml methylenchloridu a 154 ml tetrahydrofuranu. Výsledný roztok se za míchání ochladí ve směsi acetonu a pevného oxidu uhliěitého na teplotu cca -70 °C, potom se k němu z přikapávaoí nálevky zaěne postupně přidávat 166 ml 1M roztoku diisobutylaluminiumhydridu (0,166 mol) v toluenu. Toto přidávání trvá 20 minut, během kterých dojde k mírnému vzestupu teploty (ooa 5 °0) uvnitř reakční směsi. Po čtyřhodinovém míchání při teplotě lázně -78 °C se k reakční směsi přidá roztok 15,04 g (0,250 mol) ledové kyseliny octové v 15 ml tetrahydrofuranu, výsledná směs se nechá postupně ohřát na teplotu místnosti (coa 20 °0), vylije se do 1 litru vody a vodná vrstva se přídavkem zředěné kyseliny chlorovodíkové okyselí na pH 2,0. Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje 500 ml methylenchloridu. Spojené organické vrstvy se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a po filtraci se filtrát odpaří ve vakuu. Získá se 23,42 g (93 %) čistého 6-chlor-2,3-dihydro-2-methyl-4H-pyrano[2,3-Vjpyridin-4-onu ve formě světle hnědé pevné látky. Tento materiál je v každém ohledu identický s produktem z přípravy 0, což potvrzují zejména údaje TOR spekter.

Příprava I

Do jednolitrové reakční baňky a kulatým dnem, obsahující intensivně míchanou suspenzi 4,5 g (0,0294 mol) 2-methoxynikotinové kyseliny (produkt z přípravy A) v 500 ml destilované vody, se v jediné dávce vnese 4»7 kg (0,0294 mol) bromu a výsledná směs se zhruba 16 hodin (tj. přes noc) míchá při teplotě místnosti (20 °C). Vzniklá světle žlutá suspenze se zfiltruje a izolovaný pevný produkt se na filtrační nálevce vysuší na vzduchu. Získá se 4,64 g surového materiálu ve formě světle žluté pevné látky, která po překrystalování z ethylacetátu poskytne 3,47 g (51 %) čisté 5-brom-2-methoxynikotinové kyseliny o teplotě tání 15θ až 160 °C, ve formě ohmýřitých bílých jehliček. Čistý produkt byl dále charakterizován TOR spektroskopií.

Příprava J

Do reakční baňky s kulatým dnem, o objemu 50 ml, opatřené michadlem a zpětným chladičem, se předloží 1,0 g (0,0043 mol) 5-brora-2-methoxynikotinové kyseliny (produkt z přípravy I) a 10 ml methanolu, a potom 50/ul koncentrované kyseliny sírové. Reakční směs se zhruba 16 hodin (tj. přes noc) zahřívá k varu pod zpětným chladičem, potom se ochladí na teplotu místnosti (cca 20 °C), zfiltruje se a izolovaná sraženina se vysuší do konstantní hmotnosti. Získá se 695,8 mg (66 %) čistého methyl-5-brom-2-methoxynikotinátu o teplotě táni 90 až 101 °0, ve formě ohmýřité bílé pevné látky, čistý produkt byl dále charakterizován pomocí TOR spektroskopie.

Příprava K

Do suché tříhrdlé baňky o obsahu 25 ml, opatřené uváděčkou dusíku, gumovou přepážkou a skleněným uzávěrem, se předloží 2,1 g (0,00795 mol) methyl-5-brom-2-methoxynikotinátu (produkt z přípravy J), 700/ul (0,00954 mol) acetonu a 15 ml suchého tetrahydrofuranu a k směsi se v atmosféře suchého dusíku za míchání v jediné dávoe >ϊ

CS 273 186 Β2 přidá 515,3 mg (0,00954· mol) suchého methoxidu sodného. Reakční směs se zhruba 16 hodin (tj. přes noc) míchá při teplotě místnosti (oca 20 °C), potom se vysrážený pevný produkt odfiltruje. Tímto způsobem se po následujícím vysušení ve vakuu získá 1,72 g (73,5 %) natrium-2-acetonylkařbonyl-5-bromnikotinátu ve formě špinavě bílé pevné látky.

Příprava L

Do tříhrdlé reakční baňky s kulatým dnem, o obsahu 100 ml, opatřené magnetickým míchadlem, zpětným chladičem, uváděčkou dusíku, skleněnou zátkou a gumovou přepážkou, se předloží 1,72 g (0,00585 mol) natrium-2-aoetonylkarbonyl-5-bromnikotinátu (produkt z přípravy R) rozpuštěných ve 25 ml ledové kyseliny octové. Všechny operaoe se provádějí v atmosféře suchého dusíku. Baňka s obsahem se ponoří do olejové lázně předehřáté na 100 °C. Po 5 minutách se pomocí injekční stříkačky přidá 2,5 ml 48% kyseliny bromovodíková a reakční směs se 30 minut míohá při teplotě 100 °C. Po ukončení reakce se směs za pomoci chladicí lázně tvořené vodou s ledem ryohle ochladí na teplotu místnosti (cca 20 °C) á zředí se 25 ml vody. Výsledný vodný roztok se extrahuje třikrát vždy 20 ml chloroformu, spojené organické vrstvy se postupně promyjí dvakrát vždy 10 ml 0,5N vodného roztoku hydroxidu sodného, jednou 10 ml vody a jednou 10 ml roztoku chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a k odstranění sušicího činidla se zfiltrují. Z čirého filtrátu Se odpařením ve vakuu izoluje 880 mg (63 %) čistého 6-brom-2-methyl-4H-pyranoj2,3-bJpyridin-4-onu ve formě žluté pevné látky. Čistý produkt byl charakterizován pornooí BMR spektroskopie.

Příprava M

Do tříhrdlé baňky s kulatým dnem, o objemu 35 ml, opatřené magnetickým míchadlem, uváděčkou dusíku a skleněnou zátkou, se v atmosféře suchého dusíku předloží 116,1 mg (0,00305 mol) lithiumaluminiumhydridu a 3,0 ml suchého tetrahydrofuranu, výsledná suspenze se za míchání ochladí na -78 °0 a opatrně se k ní přikape 700 mg (0,00291 mol) 6-brom-2-methyl-4H-pyrano |2,3-b^pyridin-4-onu /produkt z přípravy L) v 10 ml tetrahydrofuranu. Po skončeném přidávání se reakční směs cca 16 hodin míchá při teplotě -78 °C, potom se k ní opatrně přidá 721/ul ledové kyseliny octové. Výsledná směs se ještě dalších 10 minut míchá při teplotě -78 °C, potom se k ní přidá 10 ml nasyceného vodného roztoku vinanu sodnodraselného a 10 ml methylenchloridu. Výsledná směs se 3 hodiny míohá při teplotě místnosti (coa 20 °C), potom se filtrací zbaví žlutého pevného materiálu. Methylenchloridová vrstva filtrátu se promyje vždy 10 ml vody a jednou 10 ml roztoku chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem horečnatým, sušicí činidlo se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Získá se 467,3 mg surového produktu ve formě žluté pevné látky, která se čistí velmi rychlou ohromatografií na eloupci oxidu hlinitého (20 mm x 175 mm), za použití 30% ethylacetátu v hexanu jako elučního činidla. Odebírají se frakoe o objemu 5 ml. Tímto způsobem se získá 185,8 mg (26 %) čistého 6-brom-2,3-dihydro-2-methyl-4H-pyrano [2,3-bJpyridin-4-onu ve formě světle žluté pevné látky. Čistý produkt byl dále charakterizován HMR spektroskopií.

Příprava N

Do tříhrdlé reakční banky s kulatým dnem, opatřené mechanickým míchadlem a uváděčkou dusíku, se v dusíkové atmosféře předloží 17,13 g (0,085 mol) methyl-p-nhlnr-2-methoxynikotinátu (produkt z přípravy D) v coa 100 ml suchého tetrahydrofuranu,

CS 273 186 B2 potom se za neustálého míchání přidá 12,5 ml (0,1275 mol; 1,5 ekvivalentu) q 6,0 g (0,1105 mol; 1,3 ekvivalentu) methoxidu sodného. Reakční směs se 3 hodiny zahřívá k varu pod zpětným ohladiěem, potom se k ní přidá 6 ml (0,061 mol) ethylacetátu a 3,0 g (0,05525 mol) methoxidu sodného. Výsledná směs se ještě 6 hodin míchá za varu pod zpětným chladičem, potom se ochladí na teplotu místnosti (oca 20 θθ) a zfiltruje se přes odsávací nálevku se skleněnou fritou (25 až 50/um). Izolovaný pevný materiál se rozpustí ve 100 ml vody a roztok se okyselí na pH 1,0. Vodná vrstva se extrahuje dvakrát vždy 50 ml diethyletheru, etherioké extrakty se spojí a po vysušení bezvodým síranem hořečnatým se zfiltrují. Rozpouštědlo z filtrátu se odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá 11,73 g (57 %) čistého 5-ohlor-3-methoxykarbonylacetyl-2-methoxypyridinu o teplotě tání 59 až 61,5 °C. Čistý produkt byl dále charakterizován za pomoci NMR spektroskopie.

Příprava 0

755 mg (0,003125 mol) 5-ohlor-3-methoxykarbonylaoetyl-2-methoxypyridÍnu (produkt z přípravy N) v 10 ml 1N vodného roztoku hydroxidu sodného se 1 hodinu zahřívá k varu pod zpětným chladičem a potom se 16 hodin míchá při teplotě místnosti (cca 20 °C). Reakční směs se za míchání okyselí 1N kyselinou chlorovodíkovou na pH 1,0 a extrahuje se třikrát vždy 15 ml methylenohloridu. Spojené organické vrstvy se postupně promyjí 2% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou a vysuší se bezvodým síranem horečnatým, Sušicí činidlo se odfiltruje a rozpouštědlo z filtrátu se odpaří za sníženého tlaku. Získá se 580 mg (71 %) čistého 3-acetyl-5-ohlor-2-methoxypyridinu ve formě žlutého olejovitého zbytku, čistý produkt byl charakterizován pomocí NMR spektroskopie

Příprava P

Do tříhrdlé reakční baňky s kulatým dnem, opatřené mechanickým míchadlem a uváděčkou dusíku, se v atmosféře suchého dusíku předloží 4,60 g (0,0248 mol) 3-acetyl-5-chlor-2-methoxypyridinu (produkt z přípravy 0) v 50 mo suchého tetrahydrofuranu, potom se za neustálého míchání přidají nejprve 3 ekvivalenty (6,0 ml) ethyl-formiátu a potom po částech 1,2 ekvivalentu 50% natriumhydridu (1,43 g). Reakční směs se zhruba 64 hodiny míohá při teplotě místnosti (cca 20 °C), potom se zfiltruje přes odsávací nálevku se skleněnou fritou (25 až 50/um. Odfiltrovaný produkt se promyje 20 ml ethylacetátu a vysuší se ve vakuu do konstantní hmotnosti. Získá se 5,37 g (94 %) sodné soli 3-formylmethylkarbonyl-5~chlor-2-methoxypyridinu ve formě nažloutlého prášku tajícího nad 250 °C.

Příprava Q

5,37 g (0,233 mol) sodné soli 3-formylmethylkarbonyl-5-ohlor-2-methoxypyridinu (produkt z přípravy P) se při teplotě 100 °G rozpustí v 73 ml ledové kyseliny octové a k roztoku se za míchání při shora uvedené teplotě přidá 7,3 ml 48% kyseliny bromovodíkové. Reakční směs se 15 minut míohá při teplotě 100 °C, potom se v ledu ochladí na teplotu místnosti (oca 20 °C), vylije se do 100 ml vody a extrahuje se třikrát vždy 50 ml methylenohloridu. Organické extrakty se spojí, promyjí se 50 ml 2% vodného roztoku hydroxidu sodného a 50 ml vody a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Sušicí činidlo se odfiltruje a rozpouštědlo z filtrátu odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá 1,70 g (40 %) žádaného čistého 6-ohlor-4H-pyrano ^2,3-1^ pyridin-4-onu.

CS 273 186 B2

Čistý produkt byl charakterizován pomocí NMR spektroskopie.

Příprava R

K roztoku 1,0 g (0,0055 mol) 6-chlor-4H-pyrano[2,3-b]pyridin-4-onu (produkt z přípravy Q) v 18 ml tetrahydrofuranu a 36 ml toluenu se při teplotě -78 °C za míohání přidá 6,0 ml 1M roztoku diisobutylaluminiumhydridu v toluenu. Výsledná směs se 2,5 hodiny míchá při teplote -7θ °0, potom se k ní přidá 0,51 ml ledová kyseliny octové rozpuštěné ve 3 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se nechá postupně ohřát na teplotu místnosti (cca 20 °C), vylije se do 100 ml vody a vodná vrstva se zředěnou kyselinou chlorovodíkovou okyselí na pH 2,0. Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje dvakrát vždy 75 ml methylenchloridu. Spojené organické vrstvy se vysuší bezvodým síranem. hořečnatýra, zfiltrují se a filtrát se odpaří ve vakuu. Získá se 715 mg (71 %) čistého 6-chlor-2,3-dihydro-4H-pyrano^2,3-bJpyridin-4-onu ve formě pevného produktu o teplotě tání 120 až 123 °0. čistý produkt byl dále charakterizován pomocí NMR spektroskopie.

Příprava S

Postup popsaný v přípravě D k výrobě methyl-5-chlor-2-methoxynikotinátu se opakuje a tím, že se jako výohozí materiál použije namísto 5-chlor-2-methoxynikotinové kyseliny 2-methoxynikotinová kyselina (viz D,B, Euhla a spol., americký patentový spis č. 3 879 403), přičemž se pracuje se stejnými molárními podíly reakčních složek jako výše. Jako finální produkt se získá methyl-2-methoxynikotinát identický se sloučeninou, kterou popsali Kitagawa a spol., v Chem. Pharm. Bull., 26, 1403 (1978).

Příprava T

K roztoku 8,6 g (0,050 mol) methyl-2-methoxynikotinátu (produkt z přípravy S) ve 25 ml anhydridu trifluoroctové kyseliny se za míohání po částech přidá 6,0 g (0,075 mol) dusičnanu amonného. Výsledná směs se 2 hodiny míohá při teplotě místnosti (cca 20 °C) a potom se vylije do 30 ml vody s ledem. Vyloučené žluté krystaly se odsají a rozpustí se v chloroformu. Vodná vrstva se oddělí a organický roztok se vysuší bezvodým síranem horečnatým. Sušicí činidlo se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Jako zbytek se získá 6,5 g (60 %) čistého methyl-5-nitro-2-methoxynikotinátu o teplotě tání 98 až 99,5 °C. Čistý produkt byl charakterizován pomocí NMR spektroskopie.

Příprava U

Směs 1,08 g (0,005 mol) methyl-5-nitro-2_methoxynikotinátu (produkt z přípravy T) a 5,64 g (0,0025 mol) dihydrátu ohloridu cínatóho v 10 ml ethylacetátu se 20 minut zahřívá k varu pod zpětným ohladičem. Reakční směs se vylije do 50 ml vody s ledem a pH roztoku se hydrogenuhličitanem sodným upraví na hodnotu 7,0. Výsledný vodný roztok se extrahuje třikrát vždy 50 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty se promyjí 50 ml vody a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Sušicí činidlo se odfiltruje a rozpouštědlo z filtrátu se odpaří za sníženého tlaku. Získá se 800 mg (86 %) čistého methyl-5-amino-2_methoxynikotinátu o teplotě tání 109 až 110,5 °C. Čistý produkt byl charakOS 273 186 B2 terizován pomocí TOR spektroskopie.

Příprava V

K míchanému roztoku 1,5 g (0,00806 mol) methyl-5-amino-2-methoxynikotinátu (produkt z přípravy U) ve 25 ml ethanolu se přidá 12 ml 23% fluorokřemičité kyseliny. ReakČní směs se ochladí v ledu a vylouěená hílá sůl se odsaje. Tento materiál se suspenduje ve 25 ml ledové kyseliny octové a k suspenzi se přikapává butylnitrit až k úplnému rozpuštění soli. Výsledný roztok se zředí 40 ml diethyletheru a ochladí se na 0 °C. Žádaná diazoniová sůl, která se vylouěí ve formě oleje, se shromáždí a suspenduje se ve 20 ml ethanolu, přičemž se vytvoří nová bílá sůl. Tento pevný materiál se odsaje v dusíkové atmosféře, promyje se třikrát vždy 10 ml diethyletheru a vysuší se ve vysokém vakuu. Získá se 550 mg (20 %) 3-methoxykarbonyl-2-methoxypyridin-5~diazonium-hexafluorosilikátu tajícího za rozkladu při 124 až 127 °C.

550 mg (0,0016 mol) shora připravené diazoniové 3oli se suspenduje v 10 ml xylenu a suspenze se zahřeje v olejové lázni na teplotu 130 °C, kdy se začne vylučovat dusík a reakčni směs dostane olejovitý vzhled. Teplota lázně se zvýší .na 140 °C a v zahřívání směsi se pokračuje ještě 15 minut. Výsledná směs se nechá zchladnout na teplotu místnosti (cca 20 °0) a zfiltruje se přes vrstvu skleněné vaty. Zahuštěním filtrátu za sníženého tlaku k suchu se získá 293 mg žádaného 5-fluorderivátu, který se dále čistí radiální ohromatograíií na silikagelu, za použití 15% ethylacetátu v hexanu jako elučního činidla. Získá se 210 mg (68 %) čistého methyl-5-fluor-2-methoxynikotinátu. Celkový výtěžek čistého produktu, vztažený na výchozí methyl-5-amino-2-methoxynikotinát, činí 14 % teorie, čistý produkt byl charakterizován pomocí TOR spektroskopie.

Příprava W

K roztoku 2,0 g (0,0106 mol) methyl-5-fluor-2-methoxynikotinátu (produkt z přípravy V) ve 20 ml suchého tetrahydrofuranu se v atmosféře suchého dusíku přidá nejprve 0,91 ml (1,3 ekvivalentu) acetonu a potom v jediné dávce 670 mg (1,3 ekvivalentu) suchého methoxidu sodného. Reakčni směs se zhruba 16 hodin míchá pri teplotě místnosti (oca 20 °0) a potom se zahustí za sníženého tlaku na hustý olejovitý zbytek. Tento materiál se zředí 20 ml 1H kyseliny chlorovodíkové a vzniklý kyselý vodný roztok se extrahuje třikrát vždy 20 ml diethyletheru. Btherické extrakty se spojí, vysuší se bezvodým síranem horečnatým, sušicí činidlo se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří zn sníženého tlaku. Získá se 1,94 g (87 %) 3-aoetonylkarbonyl-5-fluor-2-methoxypyridinu ve formě hnědého oleje. Produkt byl charakterizován pomooí TOR spektroskopie.

Příprava X

K roztoku 1,94 g (0,00928 mol) 3-acetonylkarbonyl-5-fluor-2-methoxypyridinu (produkt z přípravy W) ve 30 ml ledové kyseliny octové se při teplotě 100 °0 přidá 3,0 ml 48% kyseliny bromovodíkové a směs se 20 minut míchá. Reakčni směs se potom ochladí na teplotu místnosti (coa 20 °C) a vylije se do 100 ml vody. Vzniklý vodný roztok se extrahuje třikrát vždy 30 ml methylenchloridu, spojené organické vrstvy se prorayjí jednou 50 ml vody a jednou 50 ml 2% vodného roztoku hydroxidu sodného, vysuší se bezvodým síranem horečnatým a filtrací se zbaví sušicího činidla. Čirý filtrát se zahustí ve vakuu, čímž se získá 645 mg 6-fluor-2-methyl-4H-pyrano [2,3-bJpyridin-4-onu. Radiální chromatografii tohoto materiálu na silikagelu, za použití 1% methanolu v ohloro13

CS 273 186 B2 formu jako elučního činidla, se potom získá 440 mg (26 %) čistého 6-fluor-2-methyl-4H-pyrano ^2,3-bJpyridin-4-onu. Čistý produkt byl charakterizován pomocí HMR spektroskopie·.

Příprava Y

K míchanému roztoku 440 mg (0,00246 mol) 6-fluor-2-methyl-4H-pyranoj2,3-b]pyridin-4-onu (produkt z přípravy X) v 5,0 ml tetrahydrofuranu a 10 ml toluenu se při teplote -78 °C přidá 3,0 ml 1M roztoku diisobutylaluminiumhydridu v toluenu. Výsledná směs se 2,5 hodiny míchá při teplotě -78 °C, potom se k ní přidá 0,25 ml ledové kyseliny octové, směs se neohá postupně ohřát na teplotu místnosti (coa 20 °C), vylije se do 20 ml vody a vodná směs se přidáním zředěné kyseliny ohlorovodíkové okyselí na pH 3,0. Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje třikrát vždy 20 ml diethyletheru. Spojené organické vrstvy se vysuší bezvodým síranem hořečnatým, zfiltrují se a filtrát se zahustí ve vakuu. Ve formě olejovitého zbytku se získá 110 mg (25 %) čistého 6-fluor-2,3-dihydro-2-methyl-4H-pyrano 2,3-b pyridin-4-onu, Čistý produkt byl dále charakterizován pomocí NMR spektroskopie.

Příklad 1

Směs 2,3 g (0,0116 mol) 6-chlor-2,3-dihydro-2-methyl-4H-pyrano^2,3-b3pyridin-4-onu (produkt z přípravy G), 1,5 g (0,0232 mol) kyanidu draselného, 6,6 g (0,0686 mol) uhličitanu amonného a 1,2 g (0,0116 mol) hydrogensiřičitanu sodného ve 100 ml 50% vodného methanolu se za míchání zhruba 16 hodin (tj. přes noo) zahřívá v uzavřené bance na 80 až 90 °C, Reakční směs se vylije do směsi vody a ethylacetátu a okyselí se 6ΤΓ kyselinou ohlorovodíkovou. Výsledný vodně organický roztok se několikrát extrahuje ethylacetátem, organické extrakty se spojí, promyjí se nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Sušicí činidlo se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá žlutý olejovitý zbytek, který po dvojnásobné krystalizací z chloroformu obsahujícího malé množství methanolu poskytne 13 mg čistého (±)-cis-6'-chlorů*, 3^/-<iihydro-2^,-methylspiro[imidazolidin-4>4^,-4' H-pyrano]2,3-b3pyridin}-2,5-dionu tajícího nad 250 °C.

Analýza: pro C^H^gClN^O^ vypočteno: 49,36 % C nalezeno: 49,15 % C

3,76 % H 3,78 % H

15,70 % U 15,49 % N.

Příklad 2

Směs 500 mg (0,0025 mol) 6-chlor-2,3-dihydro-2-methyl-4H-pyrano^2,3-b^jpyridin-4-onu (produkt z přípravy G), 325 mg (0,.0050 mol) kyanidu draselného, 1,7 g (0,0175 mol) uhličitanu amonného a 2,5 g (0,042 mol) acetamidu se v uzavřené baňce za mlnhenl zhruba 16 hodin (tj. přes noo) zahřívá na 80 °C. Po ochlazení na teplotu místnosti (cca 20 °C) přejde reakční směs na pevnou hmotu, která se potom roztřepe mezi ethylacetat a vodu s následujícím okyselením 6ΗΓ kyselinou ohlorovodíkovou. Okyselený vodné organický roztok se rozmíchá s aktivním uhlím, směs se zfiltruje a čirý vodný filtrát se extrahuje ethylacetátem. Spojené organické extrakty se promyjí roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Sušioí činidlo se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá tmavě hnědý olejovitý

CS 273 186 B2 zbytek, který po krystalizaci ze směsi chloroformu a methanolu (95 : 5 objemově) poskytne 20 mg (3 %) čistého (±)-ois-6'-chlor-2', 3'-dihydro-2'-methylspiro[imidazolidin-4,4'-4'H-pyrano[2,3-b]pyridin]-2,5-dionu tajícího nad 250 °0, Tento produkt je identický s produktem z příkladu 1, jak potvrzují zejména výsledky ohromatografie na tenké vrstvě.

Příklad 3

Směs 5,0 g (0,025 mol) 6-ohlor-2,3-dihydro-2-methyl-4H-pyrano [2,3-bJpyridin-4-onu (produkt z přípravy G), 3,25 g (0,050 mol) kyanidu draselného, 16,8 g (0,175 mol) uhličitanu amonného a 2,6 g (0,025 mol) hydrogensiřičitanu sodného v 50 ml formamidu se vnese do nerezového autoklávu a 4 dny se zahřívá na teplotu 40 °0. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti (oca 20 °C), vylije se do vody a 6N kyselinou chlorovodíkovou se okyselí na pH 3,0. Vysrážený produkt se odsaje a vysuší se na vzduchu do konstantní hmotnosti. Získá se 3,3 g surového materiálu, ktorý po překrystalování ze 125 ml směsi chloroformu a methanolu (9 : 1 objemově) poskytne 2,25 g (34 %) čistého (±)-cis-6'-ohlor-2*, 3'-dihydro-2'-methylspirol[iraidazolidin-4>4*-4'H-pyrano [2,3-b3pyridinJ-2,5-dionu tajícího nad 250 °C. Z matečných louhů se získá druhý podíl téhož čistého krystalického produktu, o hmotnosti 600 mg (9 %)· Celkový výtěžek čistého produktu činí 43 % teorie. Tento produkt je v každém ohledu identický s produktem z příkladu 1. Produkt je také identický s produktem z příkladu 2.

Příklad 4

A. Do nerezového autoklávu se předloží směs 39,3 g (0,20 mol) 6-chlor-2,3-dihydro-2-methyl-4H-pyrano^2,3-bJpyridin-4-onu (produkt z přípravy H), 26 g (0,40 mol) kyanidu draselného, 134,4 g (0,40 mol) uhličitanu amonného a 25 g (0,024 mol) hydrogensiřičitanu sodného ve 400 ml formamidu a autokláv se 3 dny zahřívá na teplotu 50 °0. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti (coa 20 °C), zředí se vodou na objem 3500 ml a filtrací se zbaví malého množství nerozpustného materiálu. Filtrát se koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou okyselí na pH 2,5 a při teplotě místnosti se 30 minut míchá. Vysrážený produkt se odsaje a vysuší se na vzduchu do konstantní hmotnosti, čímž se získá 33 g surového materiálu, který po překrystalování z ί 200 ml směsi chloroformu a methanolu (9 : 1 objemově), který se provádí tak, že se nejprve celkový objem sníží na 600 ml a výsledný roztok se zhruba 16 hodin míchá při teplotě místnosti, poskytne 15,4 g (29 %) čistého (±)-ci3-6'-chlor-2', 3'-dihydro-2'-methylspirol[imidazolidin-4,4'-4'H-pyra.no[2,3-b]pyridinj-2,5-dionu tajícího nad 250 °C, který je v každém ohledu identický s produktem z předcházejících příkladů (jak vyplývá zejména z údajů získaných při NMR spektroskopii). Z matečného louhu se potom získá ještě druhý a třetí podíl téhož čistého produktu o hmotnosti 9.1 kg (17 %) a 2,1 g (4 %). Celkový výtěžek čistého produktu (2'-CH₃, 4'-MH cis; 2'R, 4'S/2'S, 4'R) činí 50 % (26,6 g).

B. Matečný louh také obsahuje malé množství transisomeru, který se izoluje preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií [na sloupci Zorboy Silioa Prep (21,2x x25 cm)J za použití vícenásobného nástřiku a eluce 5% methanolem v chloroformu. Ze shromážděných polárnějších frakcí se získá 40 mg surového trans-isomeru, který po překrystalování ze směsi ethylaoetátu a hexanu poskytne 26,5 mg čistého (±)-trans-6'-ohlor-2,' 3 '-dihydro-2'-methylspiro [imiďazolidin-4,4 '-4 'H-pyra.no [2,3-bj pyridin] -2,5-dionu tajícího nad 250 °C.

CS 273 186 B2

Příklad. 5

100 mg (0,00037 mol) (í)-oia-6'-ohlor-2', 3'-dihydro-2'-methylspiro[imidazoliďin_4,/}.''-4'H-pyrano[2,3-bj-pyridinJ-2_l5-dionu (produkt z příkladu 4A), 3,0 ml ledové kyseliny octové a 1,0 ml 30% peroxidu vodíku se za míchání zhruba 16 hodin (tj. přes noc) zahřívá na teplotu 85 °C. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti (cca 20 °C), zředí se vodou a vyloučená sraženina se odfiltruje. Po vysušení izolovaného produktu na vzduchu do konstantní hmotnosti se získá 30 mg (28 %) čistého (í)-cis-6-ohlor-2 , '-dihydro-2 '-methylspiro ^imidazolidin-4,4 *-4 ^H-pyrano ^2,3-b]pyridin*j-2,5-dion-8 -oxidu tajícího nad 250 °C.

Analýza: pro ^σΐ1^Η10^θ11ί3°4 vypočteno: 46,58 % C 3,55 % K 14|81 % N nalezeno: 46,42 % C 3,56 % Η 14»67 % N.

Příklad 6

Do haňky s kulatým dnem, o objemu 100 ml, opatřené upevnitelným uzávěrem a magnetickým michadlem, se předloží smšs 360,6 mg (0,00149 mol) 6-brom-2,3-dihydro-2-methyl-4H-pyrano[2,3-bJpyrid.in-4-ottu (produkt z přípravy M), 194,1 mg (0,00298 mol) kyanidu draselného, 1,0 g (0,0105 mol) uhličitanu amonného s 154»8 mg (0,00149 mol) hydrogensiřičitanu sodného v 10 ml formamidu, která se zhruba 16 hodin (tj, přes noc) za míchání zahřívá na 40 až 45 °C. Jantarově zbarvený reakční roztok se neohá zchladnout na teplotu místnosti (oca 20 °C) a zředí se 10 ml vody (roztok má nyní pH asi 9 až 10). Hodnota pH se přikapáním 6IT kyseliny chlorovodíkové upraví na 2 až 3 a výsledný roztok se 1,5 hodiny míchá při teplotě místnosti. Vysrážený bílý pevný produkt se odsaje a vysuší se na vzduchu do konstantní hmotnosti. Získá se 176,7 mg surového materiálu, který po překrystalování ze směsi isopropylalkoholu a isopropyletheru poskytne 115,5 mg (25 %) čistého (±)-cis-6^,-brom-2^,, 3^,-dihydro-2^#-methylspiro[imidazolidin-4>4'~4·' H-pyrano^2,3-b3pyridinJ~2,5-dionu tajícího nad 250 °C.

Analýza: pro Ο^Η^ΒγΝ^Ο^ vypočteno: 42,32 % C 3,23 % H 13,45 % N nalezeno: 41,95 % 0 3,25 % H 13,18 % N.

Příklad 7

Do baňky a kulatým dnem, o objemu 65 ml, opatřené upevnitelným uzávěrem, se předloží směs 715 mg (0,00389 mol) 6-ohlor-2,3-dihydro-4H-pyrano[2,3-b] pyridin-4-onu (produkt z přípravy R), 500 mg (0,00128 mol) kyanidu draselného, 2,58 g (0,027 mol) uhličitanu amonného a 400 mg (0,00386 mol) hydrogensiřičitann sodného v 7,0 ml formamidu, která se za míchání 15 hodin zahřívá na teplotu 52 °C. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti (nad 20 °C) a zředí se 30 ml vody. Výsledný vodný roztok se koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou okyselí na pH 3,0 a vysrážený produkt se odsaje. Po promyti tohoto materiálu na filtru a vysušení ve vysokém vakuu do konstantní hmotnosti se získá 848 mg (84 %) surového produktu’, který po překrystalování z 60 ml směsi chloroformu a methanolu (9 : 1 objemově) poskytne 752 mg (52 %) čistého (t)-6-chlor-2', 3'-dihydrospiro(imidazoliďin-4,4'-4'-H-pyrano^2,3-b^pyridinJ-2,5-dionu ve formě chloCS 273 186 B2 roformového solvátu o teplotě tání 265 až 266 °C.

Analýza: pro Ο^ΗθΟΙΝ^Ο^ , CHCl^ vypočteno: 35,42 % C 2,43 % H 11,26 % N nalezeno: 35,84 % C 2,51 % H 11,55 % H,

Příklad 8

V reakčni baňoe se v dusíkové atmosféře smísí 500 mg (0,0018 mol) (t)-cls-6'-chlor -2', 3 '-dihydro-2 '-methylspiro[imidazolidin-4,4 '-4 'H-pyrano [2,3-bjpyridin] 2,5-dionu (produkt z příkladu 4A) a 50 mg 10% paladia na uhlí jako katalyzátoru v 10 ml methanolu obsahujícího 377 mg (0,05 mlj 0,0036 mol) triethylaminu a výsledná suspenze se při teplotě místnosti (00a 20 °C) zhruba 16 hodin (tj. přes noc) hydrogenuje za atmosférického tlaku. Po této době již nedochází k spotřebovávání vodíku. Reakčni roztok obsahující finální produkt se z baňky odlije, zbaví se katalyzátoru filtrací přes vrstvu křemeliny a zbytek na filtru se promyje malým množstvím methanolu. Filtrát se spojí s promývaoími kapalinami a zahustí se ve vakuu. Bílý pěnovitý zbytek poskytne po trituraci s chloroformem bílý pevný produkt, který se odsaje a vysuší se na vzduchu do konstantní hmotnosti. Získá se 450 mg (86 %) čistého (±)-ois-2', 3*-dihydro-2-methylspiro[imidazolidin-4,4'-4'H-pyrano^2,3~b^pyridin]-2,5-dionu tajícího za rozkladu při

150 °C.
Analýza: pro	^C11^H11^N3°3 '	O,4CHC1₃
vypočteno:	48,73 % C	4,09 % H	14,95 N
nalezeno:	49,01 % C	4,12 % H	15,10 % N.

Příklad 9

Do baňky s kulatým dnem, o objemu 6 ml, opatřené upevnitelným uzávěrem, se předloží směs 110 mg (0,0061 mol) 6-fluor-2,3-dihydro-2-methyl-4H-pyrano [2,3-bJpyridin-4-onu (produkt z přípravy Y), 78 mg (0,00075 mol) kyanidu draselného, 400 mg (0,00512 mol) práškového uhličitanu amonného a 62 mg (0,00061 mol) hydrogensiřičitanu sodného v 1,0 ml formamidu a za míchání se 24 hodiny zahřívá na 51 °C. Reakčni směs se ochladí na teplotu místnosti (00a 20 °0), při této teplotě se 5 dnů míchá, potom se zředí 10 ml vody. Výsledný vodný roztok se zředěnou kyselinou ohlorovodíkovou okyselí na pH 3,Ů a extrahuje se třikrát vždy 10 ml ethylaoetátu. Spojené organické vrstvy se vysuší bezvodým síranem hořečnatým, zřiltrují se a filtrát se zahustí ve vakuu, Olejovitý zbytek se trituruje s 3,0 ml horké směsi chloroformu a methanolu (9 : 1 objemově). Po ochlazení na teplotu místnosti se získá 42 mg žlutého krystalického prášku, který po překrystalování z 00a 7,0 ml směsi chloroformu a ethanolu (9 ; 1 objemově) poskytne 28 mg (16 %) čistého (±)-ois-6'-fluor-2', 3'-dihydro-2'-methylspiro^imidazolidin-4,4'-4 H-pyranojj>,3-b]pyridin]-2,5-dionu obsahujícího 1/3 mol krystalového chloroformu, ve formě malých bílých šupinek o teplotš 231 až 232,5 °0.

Analýza: pro . _Oi33CHCl3 vypočteno: 46,78 % C 3,58 % H 14,43 % N nalezeno: 46,98 % 0 3,80 % H 14,33 % N.

CS 273 186 B2

Příklad 10

A. K roztoku 1,18 g (0,0036 mol) oinchonin-methohydr oxidu ve 24 ml vody [připraven podle metody, kterou, popsali R.T, Major a spol. v Journal of the American Chemical Society, sv. 63, str. 1368 (1941)] se přidá 965 mg (0,0036 mol) ois-isomeru (t)-6'-chlor-2', 3 '-dihydro-2'-raethylspiro[imidazolidin-4,4'-4 H-pyrano [2,3-bJpyridin]-2,5-dionu. Výsledná směs se odpaří ve vakuu a zbytek se krystaluje ze směsi isopropanolu a isopropyletheru. Získá se 919 mg bílé pevné látky, která se odsaje a mateěný louh se uschová. Takto získaný pevný materiál poskytne po překrystalování z isopropanolu 680 mg (65 %) čisté (4'S)(2*R)-soli neobsahující jiný enantiomer. Ka 400 mg této soli se působí 17 ml 1K kyseliny chlorovodíkové a vzniklý roztok se extrahuje třikrát vždy 10 ml ethylacetátu. Bthylaoetátové extrahty se spojí, vysuší se a odpaří se. Získá se 172 mg bílé pevné látky, která po překrystalování ze směsi ethylacetátu a hexanu poskytne 129 mg (70 %) čistého (4'S)(2'R)-6'-chlor-2', 3'-dihydro-2'-mθthylspiro]imidazolidin-4,4^,-4'H-pyrano 2,3-b pyridin -2,5-dionu tajícího nad 250 °0. Produkt má optickou rotaci = +235,7 ⁰ (c = 1, methanol).

Analýza: pro C^H^qOIK^O^ vypočteno: 49,36 % C 3,76 % H 15,70 % K nalezeno: 49,00 % C 3,85 % H 15,34 % K.

B. Uschované matečné louhy z výše popsané krystalizace se zahustí ve vakuu na bílý pevný zbytek o hmotnosti 990 mg. Ka 890 mg tohoto materiálu se působí 10 ml 1K kyseliny chlorovodíkové a výsledný roztok se extrahuje třikrát vždy 15 ml ethylacetátu. Ethylacetátové extrakty se spojí, vysuší se a zahustí se ve vakuu téměř k suchu. Ze zbytku se po zpracování směsí ethylacetátu a hexanu získá 120 mg racemického podílu. Matečný louh se zahustí a zbytek se krystaluje ze směsi ethylacetátu a hexanu, čímž se získá 142,6 mg čistého (2's)(4'R)-6'-chlor-2'_t 3'-dihydro-2'-methylspiro [imidazolidin-4,4'-4'H-pyrano [2,3-b]pyridin]-2,5-dionu tajícího nad 250 °C, o optické rotaci = -226,3 ⁰ (c = 1, methanol).

Analýza: pro Ο^Η^θΟΙΚ^Ο^ vypočteno: 49,36 % C 3,76 % H 15,70 % K nalezeno: 49,15 % C 3,84 % H 15,37 % K.

Příklad 11

2,67 g (0,01 mol) ois-isomeru (±)-6'-chlor-2'_f 3'-dihydro-2'-methylspiro[imidazolidin-4,4 '-4'H-pyrano[2,3-b]pyridin]-2,5-dionu se spolu s 15,8 g (0,05 mol) oktahydrátu hydroxidu barnatého ve 100 ml vody 4 dny zahřívá k varu pod zpětným chladičem. Po ochlazení na teplotu místnosti (coa 20 °C) se výsledná vodná směs zředí vodou a přikape ae fc m roztok 4,8 g (0,05 mol) uhličitanu amonného. Vyloučený pevný materiál se odfiltruje, promyje se vodou a filtrát se zahustí ve vakuu na odparek, který po krystalizaci z methanolu poskytne první podíl (1,4 gj 58 %) čisté cis-4-amino-6-ohlor-2,3-dihydro-2-methyl-4H-pyrano[2,3-b]pyridin-4-karboxylové kyseliny o teplotě tání 200 až 203 °C.

Hmotové spektrum: m/e 242.

273 186 B2

Analýza: pro C^H^OlNgO^ , 0,75HgO vypočteno: 46,87 % 0 4,92 % H 10,94 % N nalezeno: 46,89 % 0 4,62 % H 10,89 % W.

Příklad 12

Roztok 1,0 g (0,004 mol) cis-4-amino-6-chlor-2,3-dihydro-2-methyl-4H-pyrano[2,3-b3 pyridin-4-karboxylové kyseliny (produkt z příkladu 11) ve 220 ml vody se 1N kyselinou chlorovodíkovou upraví na pH 5,0 a po částech se k němu během 1 hodiny přidá 640 mg (0,008 mol) kyanatanu draselného, přičemž se za pomoci 1N kyseliny chlorovodíkové udržuje pH neustále na hodnotě 5,0. Výsledná směs se přes noo zhruba 16 hodin míchá, potom se její pH (které mezitím vystoupilo na 8,0) přidáním 1N kyseliny chlorovodíkové upraví na 3,0. Vysrážený pevný materiál se shromáždí, promyje se vodou a vysuší se na vzduchu do konstantní hmotnosti. Získá se 570 mg (50 %) čisté ois-6-chlor-2,3-dihydro-2-methyl-4-ureido-4H-pyrano[2,3-b]pyridin-4~karboxylové kyseliny o teplotě tání 209 až 210 °C.

Hmotové spektrum: m/e 285.

Analýza: pro . 0,5H₂0 vypočteno: 44,83 % C 4,44 % H nalezeno: 44,54 % 0 4,13 % H

14,26 % N 14,23 % N.

Příklad 13

K suspenzi 2,5 g (0,00875 mol) cis-6-ohlor-2,3-dihydro-2-methyl-4-ureido-4H-pyrano-j2,3-bJpyridin-4-karboxylové kyseliny (produkt z příkladu 12) ve 25 ml methanolu se přidá 1,85 g (0,00875 mol) S-(-)»N-be.nzyl-<X-methylbenzylaminu a výsledný roztok se nechá pomalu odpařovat při teplotě místnosti (ooa 20 °0) až do vzniku krystalů.

Tyto krystaly se odsají a-po promytí methanolem poskytnou 2,1 g (97 %) surové soli (4S)(2R)-hydantové kyseliny, tajíoí za rozkladu při 168 až 170 °0. Matečný louh (A) se uschová. Po překrystalování pevného materiálu o teplotě tání 168 až 170 °0 z .methanolu se jako první podíl získá 1,0 g (46 %) čisté S-(-)-N-benzyl-pt-methylbenzylamoniové soli (4S)(2R)-6~chlor-2,3-dihydro-2-methyl-4-ureldo-4H-pyrano[2,3-b]pyridln-4-karboxylové kyseliny tajíoí za rozkladu při 175 až 177 °0, o optické rotaci =+58,7° (o·« 1, methanol).

Analýza: pro C^H^CIN^ . C^H^N . o,25H₂O vypočteno: 62,27 % C 5,93 % H 11,17 nalezeno: 62,33 % C 5,87 % H 11,17 % N.

500 mg (0,001 mol) shora připravené čisté soli se rozpustí v 5,0 ml ledové kyseliny octové a roztok se 4 hodiny zahřívá na 90 °0. Po ochlazení na teplotu místnosti (oca 20 °0) se reakční směs zředí vodou a extrahuje se ethylacetátem. Ethylaoetátový extrakt se vysuší a odpaří se ve vakuu, čímž se získá 260 mg (97 %) čistého (4's) (2'R)-6'-ohlor-2', 3'-dihydro-2'-methylspiro[imidazolidin-4,4'-4'H-pyrano ^2,3-bj pyridin^-R,5-dioňu o optické rotaci Γχ]²⁰ ° = +205,4 ⁰ (o = 1, methanol).

CS 273 186 B2

Uschovaný matečný louh (A), získaný v prvním stupni, se nechá 3 dny stát při teplotě místnosti, přičemž se z něj usadí 87 mg čisté (S)(-)-N-benzyl-oC~methylbenzylamoniové soli (4R)(2S)-6-chlor-2,3-dihydro-2-niethyl-4-ureido-4H-pyrano^2,3-b]pyridin-4-karboxylové kyseliny o teplotě tání 164 sž 165 °O a optické rotaoi ° = = 67,6 ⁰ (c » 1, methanol). Rentgenografická analýza potvrzuje 4R, 2S-konfiguraci této sloučeniny.

Analýza: pro C^H^gClH^O^ . C^H^ylí . CH^OH vypočteno: 61,30 % C 6,29 % H 10,59 % N nalezeno: 61,04 % 0 6,24 % H 10,57 % K.

Příklad 14

Směs 100 mg (0,00037 mol) (4's)(2'R)-6'-ohlor-2^,I 3'-dihydro-2'-methylspiro£imidazolidin-4,4'-4'H-pyrano[2,3-b]pyridin]-2,5-dionu ^(4*S)(2R)-produkt z příkladu 1OAj, 3,0 ml ledové kyseliny octové a 1,0 ml 30% peroxidu vodíku se zhruba 16 hodin (tj. přes noc) zahřívá na 80 až 90 °C, přičemž se neustále míchá. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti (cca 20 °C) a zředí se vodou. Vysrážený produkt se odfiltruje, důkladně se promyje vodou a vysuší se nejprve na vzduchu do konstantní hmotnosti a potom přes noc ve vakuu. Získá se 40 mg’(40 %) čistého (4'3)(2^zR)-6'-chlor-2', 3'-dihydro-2'-methylspiro{imidazolidin-4,4 *-4'H-pyrano ^2,3-bJpyridinJ-2,5-dion-8'-oxidu tajícího nad 250 °C.

Analýza: pro Ο^Η^θΟΙΚ^Ο^ vypočteno: 46,58 % C 3,55 % H 14,81 % H nalezeno: 46,37 % C 3,52 % H 14,17 % N.

Příklad 15

Sloučeniny z příkladů 4A, 4B, 6 až 9, 10A, 10B a 14 byly testovány oo do schopnosti snižovat nebo inhibovat enzymatickou aktivitu aldosreduktasy, a to postupem, který popsali S, Hayman a spol. v Journal of Biological Chemistry, sv. 240, str. 877 (1965) a modifikovali K. Sestanj a spol. v americkém patentovém spisu Č. 3 821 383.

V každém z testů se jako substrát používá částečně vyčištěný enzym aldosreduktasa získaný z lidské placenty. Výsledky dosažené s jednotlivými sloučeninami jsou uvedeny v následujícím přehledu jako inhibioe aktivity enzymu v procenteoh při zvolené koncentraci 10“5m.

testovaná látka produkt z příkladu 41 produkt z příkladu 4B produkt z příkladu 6 produkt z příkladu 7 produkt z příkladu 8 produkt z příkladu 9 produkt z příkladu 10A produkt z příkladu 10B produkt z příkladu 14 inhibioe (%) při koncentraci

10-5m

100

i.

CS 273 186 B2 2(

Příklad 16

Sloučeniny z příkladů 4A, 4B, 6 a 10A byly testovány oo do schopnosti snižovat nebo inhibovat akumulaci sorbitolu v sedacím nervu a očních čočkách streptozotooinizovaných (tj, diabetických) krys, a to za použití postupu, který je v podstatě popsán v americkém patentovém spisu č. 3 821 383· Při tomto testu se za 27 hodin po vy volání diabetů u každého zvířete zjistí množství sorbitolu shromážděného v sedacím nervu a očních čočkách. Testované sloučeniny se aplikují v uvedených dávkách za 4, a 24 hodiny po podání streptozotooinu. Výsledky dosažené při tomto testu jsou uvedeny níže jako procentická inhibice, kterou způsobují testované sloučeniny v porovnání se stavem v pokusu, při kterém nebyla aplikována žádná účinná látka (tj. se sta· vem u neošetřených zvířat, kde hladiny sorbitolu během testu trvajícího 27 hodin nor· málně vzrostou z cca 50 až 100 mM/g tkáně až na 400 mM/g tkáně).

testovaná látka dávka inhibice v % (mg/kg) _3ed_aoj: nerv oční čočky

produkt	z příkladu 4A	5,0	98	89
produkt	z příkladu 4A	0,25	34	22
produkt	z příkladu 4B	0,25	13	32
produkt	z příkladu 6	• '1,0	73	67
produkt	z příkladu 10A	1,0	78	73
produkt	z příkladu 10A	0,1	43	33

PŘEDMĚT VYNÁLEZU

Claims

1. Způsob výroby spiro-imidazolidindlonů obecného vzoroe I ve kterém

X představuje atom vodíku, fluoru, chloru nebo bromu, nitroskuplnu, trifluormethylovou skupinu, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu a 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkylthioskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

Y představuje kyslík nebo síru,

R znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a -A=B-D=E- znamená seskupení -N=CH-CH=CH-, -CH=N-CH=CH, -CH=CH-N=CH- nebo -CH=CH-CH=Njejioh N-oxidů a jejich solí s bázemi obsahujícími farmakologioky přijatelný kationt, vyznačující se tím, že se příslušně substituovaná cyklická karbonylová sloučenina obecného vzoroe II

CS 273 186 B2 ve kterém

X, Y, R a -A=B-D=E- mají shora uvedeny význam, kondenzuje s kyanidem alkalického kovu a uhličitanem amonným, potom se popřípadě vzniklá sloučenina obecného vzorce I, kde X je atom fluoru, chloru nebo bromu, převede na odpovídající dehalogenovanou sloučeninu, ve které X znamená atom vodíku, a/nebo se získaný produkt obecného vzorce I oxiduje na odpovídající N-oxid a výsledný spiro-imidazolidindion shora uvedeného obecného vzoroe I se popřípadě převede na sůl s bází obsahující farmakologioky přijatelný kationt.

2, Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použijí výchozí karbonylová sloučenina obecného vzoroe II, kyanid alkalického kovu a uhličitan amonný v molárním poměru od 1,0 : 2,0 : 3,5 do 1,0 ; 2,0 ; 7,0.

3. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se kondenzační reakce provádí v přítomnosti inertního polárního organického rozpouštědla při teplotě od 25 °0 do 150 °C.

4-. Způsob podle bodu 3, vyznačující se tím, že se jako organické rozpouštědlo použije nesubstituovaný alkanamid s 1 až 4 atomy uhlíku.

5. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se dehalogenaoe na kruhu provádí tak, že se halogenovaná sloučenina obeoného vzorce I, .ve kterém X znamená atom fluoru, chloru nebo bromu a zbývající obecné symboly mají shora uvedený význam, hydrogenolyzuje katalytickou hydrogenaoí za vzniku odpovídající dehalogenované sloučeniny, ve které X znamená atom vodíku a zbývající obeoné symboly mají shora uvedený význam.

6. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se oxidace na N-oxid provádí působením 30% vodného peroxidu vodíku v kyselém rozpouštědle při teplotě od 0 °C do 100 °C.

7. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použijí odpovídající výchozí látky, za vzniku sloučeniny obeoného vzoroe I, ve kterém Y představuje kyslík, -A=B-D=Eznamená skupinu -lT=>CH-CHaCH- a zbývající obeoné symboly mají shora uvedený význam.

8. Způsob podle bodu 7, vyznačující se tím, že se použijí odpovídající výchozí látky, za vzniku sloučeniny definované v bodu 7, ve které X znamená atom fluoru, chloru nebo bromu a R představuje alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a zbývající obecné symboly mají význam jako v bodu 7.

9. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použijí odpovídající výchozí látky, za vzniku (±)-ois-6'-chlor-2',3'-dihydro-2'-methylspiro [imidazolidin-4,4 '-4 'H-pyrano [2,3-bjpyridinj-2,5-dionu.

10. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použijí odpovídající výchozí látky, za vzniku (í)-cis-6 -brom-2', 3'-dihydro-2'-methylspiro[imidazolidin-4,4'-4'H-pyrano [2,3-bjpyridinJ-2,5-dionu.