CS267395B1 - Method of digalacturonic acid preparation - Google Patents
Method of digalacturonic acid preparation Download PDFInfo
- Publication number
- CS267395B1 CS267395B1 CS885612A CS561288A CS267395B1 CS 267395 B1 CS267395 B1 CS 267395B1 CS 885612 A CS885612 A CS 885612A CS 561288 A CS561288 A CS 561288A CS 267395 B1 CS267395 B1 CS 267395B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- acid
- immobilized
- digalacturonic acid
- digalacturonic
- preparation
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- SKNUPXIXICTRJE-UHFFFAOYSA-N 1-butyl-4-chlorobenzene Chemical compound CCCCC1=CC=C(Cl)C=C1 SKNUPXIXICTRJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 16
- IGSYEZFZPOZFNC-UHFFFAOYSA-N 4-O-alpha-D-Galactopyranuronosyl-D-galacturonic acid Natural products OC1C(O)C(O)OC(C(O)=O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C(O)=O)O1 IGSYEZFZPOZFNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 16
- XFXIJSRNFKHZFW-UHFFFAOYSA-N [Na].CCCCCCCC Chemical compound [Na].CCCCCCCC XFXIJSRNFKHZFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 8
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 abstract description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 abstract description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 abstract description 3
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 abstract 1
- 108010092086 exo-poly-alpha-galacturonosidase Proteins 0.000 abstract 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- AEMOLEFTQBMNLQ-BKBMJHBISA-N alpha-D-galacturonic acid Chemical compound O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-BKBMJHBISA-N 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 4
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000002351 pectolytic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(4-bromopyrazol-1-yl)ethyl]isoindole-1,3-dione Chemical compound C1=C(Br)C=NN1CCN1C(=O)C2=CC=CC=C2C1=O WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 239000000061 acid fraction Substances 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 238000007738 vacuum evaporation Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Description
CS 267 395 B1 1
Vynález sa týká spósobu přípravy kyselinydigalakturónovej účinkom imobilizovanej D--galakturonandigalakturonohydrolázy na pek-tan sodný.
Kyselina digalaktorónová sa doteraz prie-myselne nevyrába a pieto nic je dostupná nasvetovom trhu. Bola připravená v niekoFkýchlaboratóriách a to cestou parciálnej kyslej hy-drolýzy: Rexová-Benková L. Chem. Zvěsti 21,58 (1970), alebo enzymovou hydrolýzou D-ga-Iakturonanu účinkom endo-D-galakturonanáz:Demain A. L, Phaff H. J.: Arch. Biochem. Bio-phys. 51, 114 (1967), Hatanaka Ch., Ozawa J.Agr. Chem. Soc. Japan 40, 421 (1968), Nagel C.W., Wilson T. M.: J. Chromatogr. 41, 110 (1968)7Voragen A. G., Pilník W.: Ztsch. Lebensm. Un-tersuch, Forsuch. 142 370 (1970), HeinrichovaK.: Biológia (Bratislava) 38, 335 (1983), Heinri-chová K.: AO 209874 (1982). Ku príprave oligo-galakturónových kyselin sa použili i mobilizo-vané endo-D-galakturonanázy: Van Hounden-hoven E. A., De Vitt I. G., Visser J.: Carbohydr.Res. 34, 233 (1972), Bock W., Krause M., Goe-bel H., Anger H., Schwaller J., Fleming H. A.,Gabert A.: Nahrung 22, 183 (1978), Rexová-Benková L, Omelková J., Kubánek V.: AO218198 (1983). Postup přípravy kyseliny diga-lakturónovej účinkom imobilizovanej D-galak-turonandigalakturonohydrolázy doteraz nebolpopísaný. Všetky doteraz popísané (hoře uve-dené postupy) sa týkajú přípravy viac alebornenej heterogennej zmesi oligogalakturóno-vých kyselin s rozdielným zastúpením kyselinydigalakturónovej. Spoločným rysom uvede-ných postupov je, že vedú k malým výťažkomkyseliny digalaktorónovej, popři výťažku ostat-ných oligogalakturónových kyselin. Izoláciakyseliny digalakturónovej zo zmesi oligogalak-turónových kyselin má mnohé nevýhody, prác-nosť, časovú náročnost’ a viacstupňové deleniena molekulových sitách a biogéloch.
Tieto nedostatky odstraňuje spósob přípravykyseliny digalakturónovej účinkom imobilizo-vanej D-galakturonandigalakturonohydrolázy,ktorého podstata spočívá v tom, že sa na pek-tan sodný pósobí mobilizovaným selektívnedegradujúcim pektolytickým enzýmom - D-ga-lakturonandigalakturonohydrolázou pri teplote30 až 40 "C a pH 6,8 až 7,2, pričom jedinýmproduktom enzýmom katalyzovanej reakcie jekyselina digalakturónová, ktorá sa oddělí nakolóne Sephadexu G-10 a efluent sa odpaří,alebo vysuší mrazovou sublimáciou. Ďalšou vý-hodou tohoto postupu je kontinuálně a viacná-sobné využitie preparátu mobilizovaného en-zýmu v reakcii, čo oproti aplikácii rozpustnéhoenzýmu vedie k značným úsporám na nákla-doch.
Kyselina digalakturónová je látka dóležitáz hladiska teoretického štúdia pektínových lá-tok a pektolytických enzýmov a pre charakteri-záciu v priemysle používaných pektináz. Je do-teraz jediným substrátom na základe ktoréhoje možné identifikovat’ a stanovit’ aktivitu exo--D-galakturonáz v komplexe pektolytickýchenzýmov. 2
Spósob přípravy imobilizovanej D-galaktu-ronandigalakturonohydrolázy je predmetomčs. autorského osvedčenia číslo 263 186 (Hein-richové 1986).
Příklad I 100 ml 0,7 % roztoku pektanu sodného v 0,1molu . I' fosfátovom tlmivom roztoku pH 7,0 saperkoluje temperovanou (30 °C) kolonou imo-bilizovanej D-galakturonandigalakturonohy-drolázy. Prietok kolonou, 10 ml/h je udržiavanýperistaltickou pumpou. Úplná limitovaná kon-verzia substrátu prebehne za 20 hodin. Efluentz kolóny sa zahustí vákuovým odpařováním pri40 °C, alebo vysuší mrazovou sublimáciou. Hy-drolyzát sa nanesie na štipec Sephadexu G-10,kde sa oddělí kyselina digalakturónová od po-lymérneho zvyšku za súčasného odsolenia pro-duktu. Frakcie s kyselinou digalakturónovou saspoja a vysušia mrazovou sublimáciou. Výťažok kyseliny digalakturónovej je 54 %.Příklad 2
Suspenzia kovalentnou vazbou imobilizo-vanej D-galakturonandigalakturonohydrolázyv tlmivom roztoku o pH 6,8 až 7,2 sa naplní dokolóny, ktorou preteká 0,75 % roztok pektanusodného (prietok 20 ml/h) do vtedy kým sa ne-dosiahne 54 % konverzia substrátu. Enzýmomkatalyzovaná reakcia pri 40 °C. Efluent z koló-ny sa odpaří mrazovou sublimáciou a spracujeďalej podFa příkladu 1. Výťažok kyseliny digalakturónovej je 54 %.Příklad 3 50 ml 1 %-ného roztoku pektanu sodnéhov 0,05 molu. I' tlmivom roztoku pH 6,8 sa inku-buje so suspenziou D-galakturonandigalaktu-ronohydrolázy kovalentne viazanej na nosičpolyakrylamidového typu. Enzýmom katalyzo-vaná reakcia prebieha za miešania v tempero-vanej nádobě s dvojitým plášťom pri 35 °C.Reakcia sa ukončí odsátím imobilizovanéhoenzýmu skleněnou fritou. Ďalšie spracovaniehydrolyzátu podFa příkladu 1.
Schopnosť imobilizovaného enzýmu kataly-zovať zmienenú degradáciu pektanu sodnéhoje závislá od obsahu D-galakturonandigalaktu-ronohydrolázy na nosiči a relatívnej aktivitěpreparátu ako i od reakčných podmienok uve-dených v príkladoch 1 až 3. Preparáty použitév príkladoch 1 až 3 pri štiepení glykozidickýchvázieb pektanu sodného vykazovali 23 až 30 %z aktivity volného enzýmu. Okrem uvedenéhovýťažok kyseliny digalakturónovej je závislýi od obsahu neutrálnych sacharidov v reťazcipolygalakturonanu. V naších pokusoch použitýpektan sodný obsahoval 1,8 % ramnózy a preto54 %-ný výťažok kyseliny digalakturónovejpředstavuje úplnú limitovanú degradáciu poly-méru.
Claims (1)
- CS 267 395 B1 3 4 PREDMET VYNÁLEZU Spósob přípravy kyseliny digalakturónovejvyznačený týni, že sa na pcktan sodný posobíiinobilizovanou D-galakturonandigalakturono- hydrolázou pri pH 6,8 až 7,2 a teplote 30 až40 °C počas 10 až 20 hodin, za vzniku kyselinydigalakturónovej.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS885612A CS267395B1 (en) | 1988-08-15 | 1988-08-15 | Method of digalacturonic acid preparation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS885612A CS267395B1 (en) | 1988-08-15 | 1988-08-15 | Method of digalacturonic acid preparation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS561288A1 CS561288A1 (en) | 1989-06-13 |
| CS267395B1 true CS267395B1 (en) | 1990-02-12 |
Family
ID=5401308
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS885612A CS267395B1 (en) | 1988-08-15 | 1988-08-15 | Method of digalacturonic acid preparation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS267395B1 (cs) |
-
1988
- 1988-08-15 CS CS885612A patent/CS267395B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS561288A1 (en) | 1989-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100775805B1 (ko) | 당쇄 아스파라긴 유도체의 제조 방법 | |
| EP0096547B1 (en) | Process for preparing uridine diphosphate-n-acetylgalactosamine | |
| EP0307158B1 (en) | Process for the preparation of branched fructooligosaccharides | |
| Orth et al. | Carrier‐Bound Biologically Active Substances and Their Applications | |
| JP2815023B2 (ja) | セロビオースの製造方法 | |
| JPH05246860A (ja) | 大腸ガン予防剤 | |
| CS267395B1 (en) | Method of digalacturonic acid preparation | |
| RU2295538C2 (ru) | Способ получения гепаринов с низкой молекулярной массой | |
| SU1232148A3 (ru) | Способ получени инсулина человека | |
| US4100028A (en) | Method for purification of proteolytic enzymes | |
| DE3626915A1 (de) | Verfahren zur enzymatischen synthese eines n-acetylneuraminsaeure-haltigen trisaccharids | |
| US4532214A (en) | Method for isolation of aminoacylase | |
| JP2001112496A (ja) | セロオリゴ糖の製造法 | |
| JPS63132898A (ja) | 蛋白質の分離精製方法 | |
| EP4151742B1 (en) | Transgenic cell line and genetically engineered bacterium expressing fructosamine deglycase, and use of fructosamine deglycase | |
| JP2001292792A (ja) | Ｎ−アセチルグルコサミンの回収方法 | |
| CS263588B1 (cs) | Spdsob přípravy kyseliny D-galaktopyranurónovej | |
| EP0059182B1 (en) | A process for isolating aminoacylase enzyme from a mammal kidney extract | |
| JP3482454B2 (ja) | 高純度キシログルカンオリゴ７糖の製造方法 | |
| JP4280390B2 (ja) | アルギン酸分解酵素 | |
| JPH07274990A (ja) | 環状イヌロオリゴ糖の精製方法 | |
| KR0130938B1 (ko) | 고농도 갈락토올리고당의 제조방법 | |
| Walker et al. | The hydrolysis of wheaten hay hemicellulose by a purified enzyme from rumen microorganisms. | |
| JPS58190388A (ja) | ビフイドバクテリウム菌の増殖促進物質の製造法 | |
| SU924101A1 (ru) | Способ получения дезокситимидинтрифосфата1 |