CS256383B2 - Reagent for specific determination of pancreas alpha-amylase - Google Patents
Reagent for specific determination of pancreas alpha-amylase Download PDFInfo
- Publication number
- CS256383B2 CS256383B2 CS848967A CS896784A CS256383B2 CS 256383 B2 CS256383 B2 CS 256383B2 CS 848967 A CS848967 A CS 848967A CS 896784 A CS896784 A CS 896784A CS 256383 B2 CS256383 B2 CS 256383B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- amylase
- alpha
- pancreatic
- salivary
- reagent
- Prior art date
Links
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 title claims description 24
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 title claims description 24
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 title claims description 22
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims description 7
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 title description 2
- 108010029785 Pancreatic alpha-Amylases Proteins 0.000 claims description 12
- 102100026367 Pancreatic alpha-amylase Human genes 0.000 claims description 12
- 102100033770 Alpha-amylase 1C Human genes 0.000 claims description 10
- 108010026386 Salivary alpha-Amylases Proteins 0.000 claims description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 10
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 6
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 4
- 230000002183 duodenal effect Effects 0.000 claims description 4
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 3
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 3
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 claims description 2
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 claims description 2
- 108090001003 Beta-phosphoglucomutases Proteins 0.000 claims description 2
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 claims description 2
- 102100024295 Maltase-glucoamylase Human genes 0.000 claims description 2
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 claims description 2
- 125000006501 nitrophenyl group Chemical group 0.000 claims 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 27
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 27
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 27
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 27
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 description 23
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 12
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 12
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 7
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 6
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 6
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 230000037029 cross reaction Effects 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- FSRMLWKBCQFLJA-HTZQGQHSSA-N (2r,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3s,4r,5r,6r)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-(4-nitrophenoxy)oxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-4,5-dihyd Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@H](O[C@@H]3[C@H](O[C@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H](O[C@@H]5[C@H](O[C@H](O[C@@H]6[C@H](O[C@H](OC=7C=CC(=CC=7)[N+]([O-])=O)[C@H](O)[C@H]6O)CO)[C@H](O)[C@H]5O)CO)[C@H](O)[C@H]4O)CO)[C@H](O)[C@H]3O)CO)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FSRMLWKBCQFLJA-HTZQGQHSSA-N 0.000 description 2
- KFTBCJUZVUOWRL-UHFFFAOYSA-N 1-fluoro-2,3-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC(F)=C1[N+]([O-])=O KFTBCJUZVUOWRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003392 amylase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710171801 Alpha-amylase inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 241000588832 Bordetella pertussis Species 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004411 aluminium Substances 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 238000009655 industrial fermentation Methods 0.000 description 1
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000019426 modified starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M potassium bisulfate Chemical compound [K+].OS([O-])(=O)=O CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000001120 potassium sulphate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/40—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving amylase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/962—Prevention or removal of interfering materials or reactants or other treatment to enhance results, e.g. determining or preventing nonspecific binding
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/824—Immunological separation techniques
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/828—Protein A
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/808—Materials and products related to genetic engineering or hybrid or fused cell technology, e.g. hybridoma, monoclonal products
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/808—Materials and products related to genetic engineering or hybrid or fused cell technology, e.g. hybridoma, monoclonal products
- Y10S530/809—Fused cells, e.g. hybridoma
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Cephalosporin Compounds (AREA)
Description
Vynález se týká reakčního činidla pro specifické stanovení pankreatické alfa-amylázy.
Alfa-amyláza (E. C. 3. 2. 1. 1) odbourává oligosacharidy a polysacharidy spojené
1,4-d-glykosidickou vazbou převážně přes hydrolýzu 1,4-alfa-glykosidických vazeb za vzniku maltózy a malto-oligosacharidů. Tento enzym má kromě použití při průmyslových fermentacích také význam v klinické analýze a diagnostice. U celé řady onemocnění se mění obsah alfa-amylázy v tělesných tekutinách, jako je sérum, moč nebo dvanáctníková šťáva. V lidském těle však dochází к výskytu dvou alfa-amyláz, a to pankreatického enzymu a enzymu ze slinných žláz. Diagnostický význam má pouze pankreatický enzym, takže vzniká potřeba od sebe odlišit analyticky obě tyto alfa-amylázy, které se vyskytují vedle sebe a mimoto bývají znečištěny pouze malým množstvím dalších isoenzymů. Obtíž spočívá v tom, že tyto enzymy jsou imunologicky totožné a vytvářejí podobné produkty, jak bylo popsáno v publikaci K. Lorentz, Laboratoriumsblátter 32, str. 118 (1982).
К vyloučení účinnosti enzymu ze slinných žláz je možno použít adsorpce na aniontoměniči, blokování enzymu pšeničnou bílkovinou nebo elektroforézy, například elektrofokusací. Tyto postupy jsou bučí nedostatečné anebo jsou příliš náročné pro běžnou diagnostiku. Z popsaných způsobů se pro diagnostiku běžným způsobem hodí pouze způsob, popsaný v publikaci Clin. Chem. 28/7, 1 525 až 1 527 (1982), při němž se enzym slinných žláz vyřazuje inhibitorem z pšeničných klíčků, avšak selektivita tohoto postupu není dostatečná. I při optimální koncentraci inhibitoru zbývá ještě 13 % účinnosti enzymu slinných žláz, zatímco účinnost pankreatického enzymu se snižuje na hodnotu přibližně 81 %.
Vynález si klade za úkol odstranit tuto nevýhodu a navrhnout činidlo, které by dovolovalo rychlé, jednoduché a snadno dostupné stanovení pankreatické alfa-amylázy za přítomnosti alfa-amylázy ze slinných žláz v tělesných tekutinách. Vynález si rovněž klade za úkol navrhnout Činidlo к provádění tohoto způsobu.
Při specifickém stanovení pankreatické alfa-amylázy za přítomnosti alfa-amylázy ze slinných žláz v tělesných tekutinách, zejména v krevním séru, dvanáctníkové šťávě nebo moči reakcí systému к průkazu alfa-amylázy za přítomnosti inhibitoru alfa-amylázy ze slinných žláz se postupuje tak, že se jako inhibitor užije monoklonální protilátka se zkříženou účinností nejvýše 5 % proti pankreatické alfa-amyláze.
Monoklonální protilátky, užité při stanovení, byly uloženy v NCACC (National Collection of Animal Cell Cultures, Porton Down, Velká Británie), pod následujícími čísly:
klon 79 pod číslem NCACC 84111305, klon la813cl0 pod číslem NCACC 84111304, klon Ia814a7 pod číslem NCACC 84111303, klon 32c516c3 pod číslem NCACC 84111302 a klon 32c518fll pod číslem NCACC 84111301.
Monoklonální protilátky je možno užít jako takové nebo jejich fragmenty Pc-fragmenty, které si uchovávají odpovídající imunologické vlastnosti. Pod pojmem monoklonální protilátky se tedy rozumí také tyto fragmenty. Jak úplně protilátky, tak také jejich fragmenty mohou být použity na nosiči.
Monoklonální protilátky mají zkříženou účinnost proti pankreatické alfa-amyláze nejvýše %, což je velmi překvapující, často je tato účinnost pouze 1 %. Tyto protilátky se tedy hodí pro použití místo známých inhibitorů z pšeničných klíčků a usnadňují tak stanovení pankreatické alfa-amylázy.
Stanovení alfa-amylázy se provádí známým způsobem. Protože monoklonální protilátky selektivně inhibují alfa-amylázu ze slinných žláz, odpovídá získaná hodnota alfa-amylázy za přítomnosti monoklonálních protilátek účinnosti pankreatického enzymu.
Předmětem vynálezu je tedy reakční činidlo pro specifické stanovení pankreatické alfa-amylázy za přítomnosti alfa-amylázy ze slinných žláz v tělesných tekutinách, zejména v séru, dvanáctníkové šťávě, plasmě nebo moči, obsahující systém pro stanovení alfa-amylázy a inhibitor pro alfa-amylázu ze slinných žláz, vyznačující se tím, že jako inhibitor obsahuje monoklonální protilátku se zkříženou účinností nejvýše 5 % proti pankreatické alfa-amyláze, že jako systém pro stanovení alfa-amylázy obsahuje maltopolyózu se 4 až 7 glukózovými zbytky, malózofosforylázu, beta-fosfoglukomutázu, glukózo-6-fosfátdehydrogenázu a NAD, a jako systém pro stanovení alfa-amylázy obsahuje nitrofenylmaltopolyózu se 4 až 7 glukózovými jednotkami a alfa-glukosidázu.
Výhodným systémem pro stanovení alfa-amylázy je systém, který obsahuje modifikované škroby. Jde o škroby, které jsou modifikovány stanovitelnými skupinami, (například produkt Phadebas firmy Pharmazia, švédsko), nebo může jít o produkt, popsaný v DOS 2 812 154 nebo o produkt, který obsahuje škroby, pozměněné odbouráním, například s obsahem karboxymethylových skupin nebo některé dextriny. Všechny systémy jsou známé a nebudou proto blíže popisovány.
Zkušební vzorek se smísí s protilátkou, s výhodou ve formě suspenze, nerozpustný podíl se popřípadě po krátkém odstředění oddělí a supernatant se užije ke stanovení alfa-amylázy,
Monoklonální protilátka, popřípadě ve formě svých fragmentů se může nacházet také na nosiči, například na imunosorpcním papíru nebo na povrchu zkumavek nebo trubiček z plastické hmoty. Při tomto provedení se alfa-analýza ze slinných žláz váže na pevnou fázi a v kapalné fázi se pak stanoví zbývající účinnost, která náleží pankreatickému enzymu.
Zvláště dobré výsledky je možno získat tak, že se užije preparát monoklonální protilátky, který je směsí monoklonálních protilátek z různých klonů.
Protože komplex monoklonálních protilátek a jejich antigenu, tj. alfa-amylázy ze slinných žláz, je rozpustný v případě, že monoklonální protilátka není užita na nosiči, spočívá další možnost oddělení v tom, přidat do reakční směsi ještě činidlo, které vysráží monoklonální protilátku nebo přidat protilátky, které vznikají v pokusných zvířatech při imunizaci. Tímto způsobem může vzniknout nerozpustný komplex, který obsahuje alfa-amylázu ze slinných žláz, monoklonální protilátky a srážecí činidla.
Jako srážecí činidlo se s výhodou užije protilátka proti monoklonální protilátce, kterou je možno získat imunizací pokusných zvířat získanou protilátkou. Jde tedy o protilátku proti protilátce. Další možnost spočívá v přidání bílkoviny A, s výhodou v imobilizované formě.
Účelný způsob provedení spočívá v tom, že se nejprve vysráží komplex monoklonální protilátky a protilátky proti této protilátce a tento komplex se pak přidá ke zkoumanému roztoku, který obsahuje alfa-amylázu. Je také možno nejprve přidat monoklonální protilátku a po inkubaci s alfa-amylázou ze slinných žláz teprve přidat protilátku proti protilátce za vzniku nerozpustného komplexu.
К provádění tohoto způsobu se zásadně hodí jakékoliv protilátky, vytvořené pokusnými zvířaty proti monoklonální protilátce. Výhodnými pokusnými zvířaty pro toto použití jsou myši nebo krysy, sérum s obsahem alfa-amylázy ze slinných žláz s výhodou pochází z ovcí.
Vynález zajišťuje jednoduché a rychlé stanovení pankreatické alfa-amylázy za přítomnosti alfa-amylázy ze slinných žláz. Stanovení je vysoce specifické a zlepšuje možnosti klinické diagnostiky.
Vynález bude osvětlen následujícími příklady:
Příklad 1
A) Myši Balb/c se imunizují 100 pg lidské alfa-amylázy ze slinných žláz na hydroxidu hlinitém spolu s Bordetella pertussis. Po přibližně osmitýdenních intervalech se provádí další imunizace při použití 50 ^Lig téže amylázy ve stejném pomocném činidle, a to třikrát nebo čtyřikrát. Čtyři dny před fúzí se provede poslední imunizace při použití 50 yug téže amylázy ve fyziologickém roztoku nitrožilně.
B) Fuze slezinových buněk s Ag8.653 (ATCC CRL 1 580) nebo SP2/0 (ATCC CRL 1 581) myolomovými buňkami se provádí běžným způsobem podle publikace J. of Imm. Meth. sv. 39, strana
285 až 308. Poměr slezinných buněk к buňkám myclomu je 5:1. Produkt fuze se uloží do deseti misek s 24 vyhloubeními (Costar) a do každého vyhloubení se uloží 5 x 104 buněk peritoneálního výpotku. Positivní primární kultury (podrobněji popsané v příkladu 3) se klonují po 3 až 4 týdnech pomocí fluorescenčního rozdělení buněk. Buňky se uloží jednotlivě na plotny s 96 vyhloubeními a do každého vyhloubení se přidá 2 x 10 buněk peritoneálního výpotku.
Příklad 2
Modifikace alfa-amylázy dinitrofluorbenzolem yumol amylázy ze slinných žláz/litr a 20 mmol dinitrofluorbenzolu/litr (v roztoku v malém množství ethanolu) se smísí a inkubuje 10 minut při teplotě· místnosti. Roztok se pak dialyzuje 20 hodin proti fosfátovému pufru o koncentraci 50 mmol/1 při pH 6,8 v lednici. Dialyzát má pak v diferenčním spektru zvýšenou extinkci 0,070 při vlnové délce 360 nm. Roztok se zarazí až do imunizace. Koncentrace bílkovin dialyzátu je 15 ^imol/litr.
Takto získanou modifikovanou alfa-amylázou se imunizují myši podle příkladu 1. Po druhé imunizaci'všechny myši uhynou. Buňky ze slezin těchto myší se proto po druhé imunizaci přenesou do kultury a pak se ještě jednou imunizují způsobem podle publikace Luben (Molec. Immunology sv. 17, 1980, str. 635 až 639) ještě 4 dny za přítomnosti 100 yug antigenu ve 30 ml prostředí. Po 4 dnech se buňky podrobí fúzi stejně jako v příkladu 1 a stejným způsobem se také dále zpracovávají.
Příklad 3
Aby bylo možno zjistit koncentraci a specifičnost protilátek, které váží amylázu v séru imunizovaných myší nebo v supernatantu kultur hybridních buněk nebo v peritoneálním výpotku, bylo užito systému ELISA. К tomuto účelu byly převrstveny plotny ELISA s 96 vyhloubeními (NUNC) ovčími protilátkami proti myším Fc. Ke snížení nespecifické vazby se pak materiál převrství ještě 2% albuminem z hovězího séra ve fyziologickém roztoku. Pak se inkubuje vzorek s obsahem protilátky v různém ředění.
Pak se provádí inkubace s konjugátem peroxidázy (POD) a amylázy ze slinných žláz nebo s konjugátem POD a amylázy z pankreatu. Účinnost vázané POD se stanoví pomocí ABTS (2,2'-azinodi[3-ethylbenzthiazolinsulfonát-6]) o pH 4,4 a extinkce se přímo užije jako míra vázané protilátky proti myším. Ke stanovení zkřížené reakce se pro každý vzorek odděleně stanoví vazba amylázy ze slinhých žláz a z pankreatu na POD a extinkce, získaná pro amylázu ze slinných žláz, se považuje za 100 %. Současně získaná extinkce pro amylázu pankreatu udává procento extinkce při zkřížené reakci.
Byly nalezeny 4 klony, při nichž vůbec nedošlo к vazbě pankreatické alfa-amylázy a POD a 5 klonů se zkříženou reakcí v rozmezí 1,5 až 5 %. Tyto klony byly pomnoženy.
Prostředí RPMI je popsáno v J. A. M. A. 199 (1957) 519 a běžně se dodává.
Příklad 4
Imobilizace monoklonální protilátky (MAK) působením ovčí protilátky proti myším s následnou vazbou amylázy ze slinných žláz.
Myší peritoneální výpotek
Ovčí protilátka proti myším (IgGFc gamma): 19 g/litr fosfátový pufr o pH 7,0: 0,05 mol/litr, fosfátový pufr o pH 7,0: 0,05 mol/litr s 2 % sérového albuminu skotu amyláza z lidských slinných žláz: 1 000 jednotek/litr (^umol substrátu/ml/min při 37 °C a 4-nitrofenylmaltoheptaosid jako substrát) amyláza z lidského pankreatu: 1 000 jednotek/litr kyselina octová: 0,5 mol/litr roztok hydrogensíranu draselného: 2 mol/litr
Monoklonální protilátky z peritoneálního výpotku se smísí s ovčími protilátkami proti myším v poměru 1:100. Tato směs se zředí fosfátovým pufrem v poměru 1:2 a protřepává se 15 minut při teplotě 37 °C. Vzniklá sraženina se dvakrát promyje pufrem a pak se rozpustí v 1/5 počátečního objemu kyseliny octové. Po 5 minutách třepání se přidá hydrogenfosforečnan draselný v poměru 1:2. Vznikne sraženina, která se dvakrát promyje fosfátovým pufrem se sérovým alguminem skotu a pak ještě dvakrát čistým pufrem. Pak se sraženina uvede do suspenze v 1/5 počátečního objemu. 50 yul sraženiny se přidá к 50 yul amylázy ze slinných žláz nebo z pankreatu a směs se inkubuje vždy 15 minut při teplotě místnosti. Pak se sraženina odstředí a supernatant se zpracovává způsobem podle příkladu 7. Kontrolou je vzorek amylázy, která se zpracovává s 50 ^ul pufru místo se sraženinou.
Příklad 5
Vazba monoklonální protilátky na amylázu ze slinných žláz s následným vysrážením ovčí protilátkou proti myším
Peritoneální výpotek s obsahem monoklonální protilátky se zředí pufrem v poměru 1:50.
Д11 tohoto roztoku se protřepává 15 minut při teplotě místnosti s 50 Д11 amylázy ze slinných žláz nebo z pankreatu. Jako kontrola slouží na jedné straně směs výpotku s pufrem (slepá zkouška pro výpotek) a na druhé straně směs amylázy a pufru. (Kontrola účinnosti amylázy). Pak se přidá 50 yul protilátky proti protilátce. Po 10 minutách při teplotě místnosti se vzniklá sraženina oddělí odstředěním a supernatant se zpracovává podle příkladu 7.
Příklad 6
Imobilizace monoklonální protilátky ovčí protilátkou proti myším a následná vazba amylázy ze slinných žláz ze směsi amylázy ze slinných žláz a z pankreatu
Podle příkladu 5 se inkubuje vždy 1 000 jednotek/litr amyl 'izy ze slinných žláz a z pankreatu s předem připravenou sraženinou. Po odstředění se supernatant. zpracovává způsobem podle příkladu 7. .
Příklad 7
Stanovení zbývající pankreatické amylázy
К 50 Д11 supernatantu z příkladů 4 až 6 se přidá 1 ml běžného reakčního činidla pro stanovení alfa-amylázy s 4-nitrofenylmaltoheptaosidem jako substrátem (Boehringer). Účinnost supernatantu se stanoví při teplotě 37 °C. Zbývající účinnost se určuje jako procento účinnosti, vztaženo na kontrolu. Zbývající účinnost v příkladu 4 byla pro amylázu ze slinných žláz 0 až 5 % a pro pankreatickou amylázu 70 až 95 %. V příkladu 5 byla zbývající účinnost amylázy ze slinných Žláz O až 5 % a pankreatické amylázy 80 až 95 %. I v příkladu 6 při současné přítomnosti obou enzymů došlo к selektivnímu vysrážení amylázy ze slinných žláz, aktivita pankreatické amylázy zůstala 80 až 95 %.
Claims (2)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU1. Reakční činidlo pro specifické stanovení pankreatické alfa-amylázy za přítomnosti alfa-amylázy ze slinných žláz v tělesných tekutinách, zejména v séru, dvanáctníkové šťávě, plasmě nebo moči, obsahující systém pro stanovení alfa-amylázy a inhibitor pro alfa-amylázu ze slinných žláz, vyznačující se tím, že jako inhibitor obsahuje monoklonální protilátku se zkříženou účinností nejvýš 5 % proti pankreatické alfa-amyláze, že jako systém pro stanovení alfa-amylázy obsahuje maltopolyózu se 4 až 7 glukózovými zbytky, maltózofosforylázu, beta-fosfoglukomutázu, glukózo-6-fosfátdehydrogenázu a NAD, a jako systém pro stanovení alfa-amylázy obsahuje nitrofenylmaltopolyózu se 4 až 7 glukózovými jednotkami a alfa-glukosidázu.
- 2. Reakční činidlo podle bodu 1, vyznačující se tím, že jako systém pro stanovení alfa-amylázy obsahuje škrob, modifikovaný stanovitelnými skupinami, například nitrofenylovými skupinami.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19833342736 DE3342736A1 (de) | 1983-11-25 | 1983-11-25 | Hybridoma-antikoerper |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS896784A2 CS896784A2 (en) | 1987-08-13 |
| CS256383B2 true CS256383B2 (en) | 1988-04-15 |
Family
ID=6215298
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS848967A CS256383B2 (en) | 1983-11-25 | 1984-11-22 | Reagent for specific determination of pancreas alpha-amylase |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4939082A (cs) |
| EP (1) | EP0150309B1 (cs) |
| JP (2) | JPS60155134A (cs) |
| AT (1) | ATE44320T1 (cs) |
| AU (1) | AU550266B2 (cs) |
| CA (1) | CA1313150C (cs) |
| CS (1) | CS256383B2 (cs) |
| DD (1) | DD233142A5 (cs) |
| DE (2) | DE3342736A1 (cs) |
| DK (2) | DK162727C (cs) |
| ES (1) | ES8507568A1 (cs) |
| FI (1) | FI83669C (cs) |
| YU (1) | YU45971B (cs) |
| ZA (1) | ZA849140B (cs) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4757001A (en) * | 1984-02-16 | 1988-07-12 | Fujirebio Kabushiki Kaisha | Method of measuring biological ligand by utilizing amylase |
| DE3500526A1 (de) * | 1985-01-09 | 1986-07-10 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Spezifisch hemmender s-amylase-mak |
| DE3508384A1 (de) * | 1985-03-08 | 1986-11-06 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Hemmung humaner speichel- und pankreasamylase durch monoklonale antikoerper |
| DE3525926A1 (de) | 1985-07-19 | 1987-01-29 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren und reagenz zur spezifischen bestimmung von pankreas-alpha-amylase |
| JPS63500421A (ja) * | 1985-07-26 | 1988-02-18 | ザ ユニバ−シイテイ オブ バ−ジニア アルミニ パテンツ フアンデ−シヨン | 人のアミラ−ゼアイソチ−ムの免疫化学検定法及び関連する単クロ−ン抗体、ハイブリド−マ細胞系及びそれらの製造方法 |
| DE3903114A1 (de) * | 1989-02-02 | 1990-08-09 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur bestimmung eines enzyms aus einem isoenzymgemisch sowie hierfuer geeigneter testtraeger und dessen verwendung |
| DE3929355A1 (de) * | 1989-09-04 | 1991-03-07 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur spezifischen bestimmung von pankreas-(alpha)-amylase |
| JPH085919B2 (ja) * | 1989-11-10 | 1996-01-24 | 日本商事株式会社 | 唾液―α―アミラーゼ活性阻害モノクローナル抗体およびそれを用いる膵臓―α―アミラーゼの分別定量法 |
| GB9024970D0 (en) * | 1990-11-16 | 1991-01-02 | Genzyme Uk Ltd | Assay |
| KR20030079382A (ko) * | 2002-04-04 | 2003-10-10 | 최태부 | 소화 효소-지방산 복합체를 항원으로하여 생산된 항체 및이의 이용 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2258822A1 (de) * | 1972-12-01 | 1974-06-06 | Merck Patent Gmbh | Verfahren und mittel zur analyse von isoenzymmustern |
| JPS58183098A (ja) * | 1982-04-20 | 1983-10-26 | Wako Pure Chem Ind Ltd | アイソザイム分別定量法 |
| DE3245665A1 (de) * | 1982-05-04 | 1983-11-10 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur herstellung permanenter tierischer und humaner zellinien und deren verwendung |
| US4474892A (en) * | 1983-02-16 | 1984-10-02 | Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Two-site immunoassays using monoclonal antibodies of different classes or subclasses and test kits for performing same |
| DE3508384A1 (de) * | 1985-03-08 | 1986-11-06 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Hemmung humaner speichel- und pankreasamylase durch monoklonale antikoerper |
-
1983
- 1983-11-25 DE DE19833342736 patent/DE3342736A1/de not_active Ceased
-
1984
- 1984-11-21 ES ES537835A patent/ES8507568A1/es not_active Expired
- 1984-11-22 JP JP59246409A patent/JPS60155134A/ja active Granted
- 1984-11-22 YU YU196984A patent/YU45971B/sh unknown
- 1984-11-22 DK DK555584A patent/DK162727C/da not_active IP Right Cessation
- 1984-11-22 CA CA000468445A patent/CA1313150C/en not_active Expired - Fee Related
- 1984-11-22 CS CS848967A patent/CS256383B2/cs unknown
- 1984-11-22 DD DD84269782A patent/DD233142A5/de not_active IP Right Cessation
- 1984-11-23 EP EP84114172A patent/EP0150309B1/de not_active Expired
- 1984-11-23 AT AT84114172T patent/ATE44320T1/de not_active IP Right Cessation
- 1984-11-23 FI FI844608A patent/FI83669C/fi not_active IP Right Cessation
- 1984-11-23 ZA ZA849140A patent/ZA849140B/xx unknown
- 1984-11-23 DE DE8484114172T patent/DE3478821D1/de not_active Expired
- 1984-11-26 AU AU35874/84A patent/AU550266B2/en not_active Ceased
-
1989
- 1989-03-21 US US07/326,885 patent/US4939082A/en not_active Expired - Lifetime
-
1990
- 1990-10-25 DK DK257690A patent/DK257690A/da not_active Application Discontinuation
-
1991
- 1991-06-07 JP JP3136054A patent/JPH05232117A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS896784A2 (en) | 1987-08-13 |
| EP0150309B1 (de) | 1989-06-28 |
| ATE44320T1 (de) | 1989-07-15 |
| DK162727C (da) | 1992-05-11 |
| ZA849140B (en) | 1985-07-31 |
| AU3587484A (en) | 1985-05-30 |
| JPS60155134A (ja) | 1985-08-15 |
| DK257690D0 (da) | 1990-10-25 |
| AU550266B2 (en) | 1986-03-13 |
| YU196984A (en) | 1989-12-31 |
| DK555584D0 (da) | 1984-11-22 |
| ES537835A0 (es) | 1985-09-16 |
| DK162727B (da) | 1991-12-02 |
| US4939082A (en) | 1990-07-03 |
| FI83669C (fi) | 1991-08-12 |
| FI83669B (fi) | 1991-04-30 |
| DE3342736A1 (de) | 1985-06-05 |
| JPH0436343B2 (cs) | 1992-06-15 |
| YU45971B (sh) | 1992-12-21 |
| CA1313150C (en) | 1993-01-26 |
| FI844608L (fi) | 1985-05-26 |
| ES8507568A1 (es) | 1985-09-16 |
| JPH05232117A (ja) | 1993-09-07 |
| DD233142A5 (de) | 1986-02-19 |
| DE3478821D1 (en) | 1989-08-03 |
| DK555584A (da) | 1985-05-26 |
| FI844608A0 (fi) | 1984-11-23 |
| DK257690A (da) | 1990-10-25 |
| EP0150309A2 (de) | 1985-08-07 |
| EP0150309A3 (en) | 1985-08-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1160566A (en) | Immunological determination method | |
| JP3431140B2 (ja) | 抗体およびその使用方法 | |
| US4863851A (en) | Monoclonal antibody to prostate secretory protein | |
| CS256383B2 (en) | Reagent for specific determination of pancreas alpha-amylase | |
| EP2141180B1 (en) | Antibody recognizing canine CRP and human CRP | |
| JPH0710238B2 (ja) | α−アミラ−ゼの測定法及び測定用試薬 | |
| JP2959837B2 (ja) | 癌関連ハプトグロビン | |
| JP2012082210A (ja) | Ａｄａｍｔｓ１３活性検定用抗体及び活性検定方法 | |
| JP2925117B2 (ja) | 体液中の唾液アルファアミラーゼを除く膵液アルファアミラーゼを特異的に定量する方法および試薬 | |
| JPH05508835A (ja) | 慢性関節リウマチの免疫診断検定法 | |
| US5573918A (en) | Process and reagent for specific determination of pancreatic alpha amylase | |
| NO172084B (no) | Monoklonalt antistoff, anvendelse derav samt reagenssystem for immunologisk bestemmelse av fritt protein s og c4bp-protein s kompleks | |
| US5858685A (en) | Prostate specific antigen from benign prostatic hyperplasia and its use in diagnosis | |
| JPH0198968A (ja) | ヒス・インスリンの測定方法 | |
| JP2868808B2 (ja) | 活性化血小板抗原測定試薬 | |
| JP3451783B2 (ja) | コリンエステラーゼの測定法及び肝硬変と肝炎の識別法 | |
| Strobel | Purification and immunochemical characterization of ecto-ATP-diphosphohydrolase from chicken oviduct and liver | |
| JPH0346116B2 (cs) | ||
| JPS63151856A (ja) | ヒトプロテインｓに対するモノクローナル抗体を用いた免疫学的測定試薬及びキット | |
| WO1992016846A1 (en) | Collagen assaying method and kit | |
| JPH0827282B2 (ja) | ヒト・プロテインｃの免疫学的測定法，測定試薬およびそのキット | |
| JPH03183953A (ja) | ヒト膵臓α―アミラーゼの測定方法 | |
| JPH06141883A (ja) | 上皮化生に対するモノクローナル抗体およびそれを生産するハイブリドーマ | |
| JPH0560760A (ja) | 癌関連ヒト由来ガラクトース転移酵素標準液 | |
| EP0506682A1 (en) | Method of determining anti-xanthine oxidase antibody |