CS251766B2 - Method of interferon production - Google Patents
Method of interferon production Download PDFInfo
- Publication number
- CS251766B2 CS251766B2 CS834518A CS451883A CS251766B2 CS 251766 B2 CS251766 B2 CS 251766B2 CS 834518 A CS834518 A CS 834518A CS 451883 A CS451883 A CS 451883A CS 251766 B2 CS251766 B2 CS 251766B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- cells
- interferon
- induction
- potentiating agent
- concentration
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 title description 7
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims abstract description 65
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims abstract description 64
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims abstract description 64
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims abstract description 43
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 42
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000000411 inducer Substances 0.000 claims abstract description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 8
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 claims description 33
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- AVQQQNCBBIEMEU-UHFFFAOYSA-N 1,1,3,3-tetramethylurea Chemical compound CN(C)C(=O)N(C)C AVQQQNCBBIEMEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- FZERHIULMFGESH-UHFFFAOYSA-N N-phenylacetamide Chemical compound CC(=O)NC1=CC=CC=C1 FZERHIULMFGESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- CPJSUEIXXCENMM-UHFFFAOYSA-N phenacetin Chemical compound CCOC1=CC=C(NC(C)=O)C=C1 CPJSUEIXXCENMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 7
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N Acetamide Chemical compound CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 6
- XUWHAWMETYGRKB-UHFFFAOYSA-N piperidin-2-one Chemical compound O=C1CCCCN1 XUWHAWMETYGRKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- GGYVTHJIUNGKFZ-UHFFFAOYSA-N 1-methylpiperidin-2-one Chemical compound CN1CCCCC1=O GGYVTHJIUNGKFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229960001413 acetanilide Drugs 0.000 claims description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 4
- 150000003672 ureas Chemical class 0.000 claims description 4
- CYSGHNMQYZDMIA-UHFFFAOYSA-N 1,3-Dimethyl-2-imidazolidinon Chemical compound CN1CCN(C)C1=O CYSGHNMQYZDMIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 3
- ILVXOBCQQYKLDS-UHFFFAOYSA-N pyridine N-oxide Chemical compound [O-][N+]1=CC=CC=C1 ILVXOBCQQYKLDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- BNQSTAOJRULKNX-UHFFFAOYSA-N N-(6-acetamidohexyl)acetamide Chemical compound CC(=O)NCCCCCCNC(C)=O BNQSTAOJRULKNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000003869 acetamides Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000008061 acetanilides Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000004191 (C1-C6) alkoxy group Chemical group 0.000 claims 1
- 150000008625 2-imidazolidinones Chemical class 0.000 claims 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 91
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 11
- SWEYNHYBJHPVJL-UHFFFAOYSA-N butanoic acid;sodium Chemical compound [Na].CCCC(O)=O SWEYNHYBJHPVJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- -1 Virology Chemical class 0.000 description 8
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 description 7
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 5
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 5
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 3
- 244000309466 calf Species 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMDCZENCAXMSOU-UHFFFAOYSA-N N-ethylacetamide Chemical compound CCNC(C)=O PMDCZENCAXMSOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XGEGHDBEHXKFPX-UHFFFAOYSA-N N-methyl urea Chemical compound CNC(N)=O XGEGHDBEHXKFPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OHLUUHNLEMFGTQ-UHFFFAOYSA-N N-methylacetamide Chemical compound CNC(C)=O OHLUUHNLEMFGTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 2
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 2
- OAERLTPBKQBWHJ-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylhexanamide Chemical compound CCCCCC(=O)N(C)C OAERLTPBKQBWHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 125000004209 (C1-C8) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- WEKQSZQVVIURQD-UHFFFAOYSA-N 1,1,3,3-tetramethylurea Chemical compound CN(C)C(=O)N(C)C.CN(C)C(=O)N(C)C WEKQSZQVVIURQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YBBLOADPFWKNGS-UHFFFAOYSA-N 1,1-dimethylurea Chemical compound CN(C)C(N)=O YBBLOADPFWKNGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWAVGZYKJNOTPX-UHFFFAOYSA-N 1,3-diethylurea Chemical compound CCNC(=O)NCC ZWAVGZYKJNOTPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZFPGARUNNKGOBB-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-2-pyrrolidinone Chemical compound CCN1CCCC1=O ZFPGARUNNKGOBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYECOJGRJDOGPP-UHFFFAOYSA-N Ethylurea Chemical compound CCNC(N)=O RYECOJGRJDOGPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 206010028470 Mycoplasma infections Diseases 0.000 description 1
- FQKKPLXFGDCBJT-UHFFFAOYSA-N N-(5-Acetamidopentyl)acetamide Chemical compound CC(=O)NCCCCCNC(C)=O FQKKPLXFGDCBJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 108010040201 Polymyxins Proteins 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 101100528457 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) RMP1 gene Proteins 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MNOILHPDHOHILI-UHFFFAOYSA-N Tetramethylthiourea Chemical compound CN(C)C(=S)N(C)C MNOILHPDHOHILI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000002269 analeptic agent Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940054066 benzamide antipsychotics Drugs 0.000 description 1
- 150000003936 benzamides Chemical class 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- DNSISZSEWVHGLH-UHFFFAOYSA-N butanamide Chemical compound CCCC(N)=O DNSISZSEWVHGLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000004836 hexamethylene group Chemical group [H]C([H])([*:2])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[*:1] 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002799 interferon inducing agent Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- VJPODIJDERZHMG-UHFFFAOYSA-N n-(6-hydroxyhexyl)acetamide Chemical compound CC(=O)NCCCCCCO VJPODIJDERZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQMWGNLDKKJHFU-UHFFFAOYSA-N n-(7-acetamidoheptyl)acetamide Chemical compound CC(=O)NCCCCCCCNC(C)=O ZQMWGNLDKKJHFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GYLDXXLJMRTVSS-UHFFFAOYSA-N n-butylacetamide Chemical compound CCCCNC(C)=O GYLDXXLJMRTVSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NCCHARWOCKOHIH-UHFFFAOYSA-N n-methylbenzamide Chemical compound CNC(=O)C1=CC=CC=C1 NCCHARWOCKOHIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- QLNJFJADRCOGBJ-UHFFFAOYSA-N propionamide Chemical compound CCC(N)=O QLNJFJADRCOGBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940080818 propionamide Drugs 0.000 description 1
- ZQZJKHIIQFPZCS-UHFFFAOYSA-N propylurea Chemical compound CCCNC(N)=O ZQZJKHIIQFPZCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- MFBOGIVSZKQAPD-UHFFFAOYSA-M sodium butyrate Chemical compound [Na+].CCCC([O-])=O MFBOGIVSZKQAPD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/555—Interferons [IFN]
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/811—Interferon
Description
251766 2
Vynález se týká zdokonaleného způsobu výroby interferonu. '
Interferon je bílkovina; která vykazuje virově nespecifickou antivirovou aktivitualespoň v homologických buňkách buněčnými metabolickými procesy, zahrnujícími syntézuRNK a bílkovin. Interferony jsou zajímavé jako potenciální antivirová a protirakovinováterapeutická činidla. Je známo mnoho typů interferonu, zejména W-(leukocytové,, /J-(fibro-blastové) a gama-(imunní) interferony. Tento vynález se týká výroby gí-interferonů.
Zdrojem oc-interferonů byly primárně lidské leukocyty, ty však nemohou sloučit jakozdroj velkých množství oC-interferonu, požadovaných ke klinickým účelům. V poslední dóběbyly popsány způsoby výroby OC-interferonu z transformovaných lidských buněk, zejménalymfoblastoidních buněk. (Advances in Experimental Medicine and Biology 1978, 110, 61-74; J. Clinical Microbiology 1978, 7,.44-51) a v poslední době bylo docíleno výrobyoC-inter-feronu ve velkém měřítku (Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1979, 15, 420 - 427;
Texas Report. Biol. Med., 1981-82, 41, 175-178).
Způsob výroby oc-interferonu z lidských lymfoblastoidních buněk zahrnuje stupněrůstu lymfoblastoidních buněk ve vhodném médiu, přičemž buňky se indukují pro výrobuinterferohu zavedením induktoru, inkubaci buněk po indukci a izolaci vzniklého interferonu.,
Za účelem zvýšení výtěžku interferonu z takových způsobů byla popsána řada technik.
Podle jedné takové techniky se působí na lymfoblastoidní buňky po určitou dobu předindukcí činidlem předběžné úpravy nebo stimulátorem. Tak například Evropský patentč. 0 000520 popisuje způsob zvyšování výtěžku interferonu předběžnou úpravou karboxylovoukyselinou nebo její solí, zejména sodnou solí kyseliny máselné. Taková předběžná úpravabyla v literatuře popsána s množstvím dalších sloučenin (například Virology, 1979, 99,158-166; Evropský patent č. 0 008 391).
Podle takového způsobu je charakteristické, že se působí na buňky po určitou dobu,například asi po dobu 48 hodin před indukcí, přičemž činidlo předběžné úpravy se odstraňujepřed indukcí. Při alternativní technice se dociluje zvýšení výtěžku interferonu snížením teplotykultivovaných buněk, před, během nebo po indukci (například Proč. Nat. Acad. Sci. USA; 1973, 70, 3909-3913, Japanese J. Microbiology 1974, 18, 217-222; Microbiol. Immunol. 1980, 24, 907-914; J. Gen. Virology, 1981, 56, 163-17-4). V literatuře bylo dříve uvedeno, že přidání "stimulátorů" (uvedených výše) běhemnebo po indukci má negativní vliv na výtěžek interferonu produkovaného buňkami. Je totak zejména v případě karboxylových kyselin (například Virology, 1979, 99, 158-166; Bióčhem.Biophys. Res. Commun., 1981, 103, 806-812).
Nyní bylo nalezeno, že přidání některých sloučenin (dále označovaných jako "potenciačníčinidla", v době indukce nebo krátce po indukci lymfoblastoidních buněk, vede ke zvýšenivýtěžku interfcíxuiiu.
Vynálezem je tedy způsob výroby interferonu zahrnující přidáváni induktoru k lymfo-blastoidním buňkám, které jsou schopné indukce za tvorby interferonu, jehož podstataspočívá v tom, že běh_... xnaun.ce ueoo krátce po indukci se na buňky působí potenciačnímčinidlem vybraným ze skupiny sloučenin, která zahrnuje N-acetyl-p-aminofenol, acetamid,/C^-Cg-alkyl/acetamidy, acetanilid, /C^-Cgalkoxy/acetanilidy, alkylen-bisacetamidy, N,N--dimetyl-hexanamid, dimetylsulfoxid, C^-Cg-alkylamidy, /Cj-Cg-alkyl/benzamidy, ZCj-Cg--alkylZ-2-imidazolidiriony, l-ZC^-Cg-alkylZ-2-pyrrolidony, 2-piperidon, l-ZC^-Cg-alkylZ--2-piperidony, pyridin-N-oxidové a močovinové deriváty, N-acetyl-p-aminofenol, N,N-dimetyl-acetamid, 1,3-dimetyl-2-imidazojidinon, dimetylsulfoxid, p-etoxyacetanilid, hexametylen- 3 251766 -bisacetamid, 1-metylpiperidon a tetrametylmočovinu, přičemž se působí potenciačním činidlemv koncentraci 0,1 až 500 mM. Výhodně se působí potenciačním činidlem v koncetraci 1 až 200 mM, zejména pak 5 až50 mM.
Způsob podle vynálezu se. výhodně provádí tak, že potenciační činidlo se přidáváběhem indukce, a to zvlášt výhodně v době dvou hodin po indukci.
Způsob podle vynálezu lze výhodně provádět tak, že na buňky před indukcí se působístimulátorem.
Jako výhodným stimulátorem se působí alkanovou kyselinou s přímým řetězcem o 1 až6 atomech uhlíku nebo její solí; zvláště výhodnou alkanovou kyselinou je kyselina máselná.
Lymfoblastoidní buňky pro produkci interferonu se volí podle požadavku, zda je interferonurčen k humánnímu použití, potom se obvykle volí buňky lidského typu. Užívané buňky jsous výhodou buňky Namalwa nebo jiné vhodné lymfostoidní buňky. Linie lymfoblastoidníchbuněk, které lze pěstovat sériově v kultuře, jsou snadno získatelné z kultur leukocytů,periferní lidské krve dobře známými způsoby (viz. například J. H. Hope, Μ. K. Horné, W. Svott., Int. J. Cancer 3, str. 857-866 (1978),.J. H. Hope, Μ. K. Horné, W. Scott.,
Int. J. Cancer, 4, str. 255-260 (1969) R. S. Chang, H. D. Golden, Nátuře 234. str. 359-360(1971). -Leukocyty lze získat od normálních i nemocných jedinců a mohou být získány "spon-tánně", jestliže jsou buňky již indikovány virem Epstein-Barr (EBV), nebo je lze získatz kultru leukocytů, které nejsou infikovány EBV, například leukocity umbilikální srdečníkrve, ke kterým byl přidán EBV.
Lymfoblastoidní buněčné linie lze získat snadno z buněk pacientů s Burkittovým lymfomem,když jsou již infikovány RBV. Jedna linie Namalwa byla připravena ve Stockholmu profesoremG. Kleinem (O. Nyormoi, G. Klein, A. Adams, L. Dambos, Int. J. Cancer 12, str. 396-408(1973)) z buněk získaných od africké dívky téhož jména. O buňkách této linie bylo zjištěno,že produkují velká množství interferonu, jsou-li vhodně stimulovány (H. Strander, K. H. Mo-gesen, K. Cantell., J. Clin. Microbiol., 1, str. 116-117, (1975)); G. J. Christophinis, C. M. Steel, N. B. Finter., J. Gen. Virol., 1981, 52, 169-171).
Subkultura této linie byla získána Dr. Ionem Gresserem (Villejuif, Francie) v lednu1975. V této době byla linie adaptována k růstu na médiu RMPl 1 640 s 10 % séra telecíhoplodu. U Wellcome Research Laboratories byly buňky adaptovány k růstu na témže médiudoplněném 5 až 7 % séra získaného od telat starých 6 až 8 měsíců a byly subkultivovány2 až 3x týdně během osmnáctiměsíční periody. V bance byly tyto buňky označeny jako Namal-wa/WRL a byly uloženy v množství ampulek, které jsou uskladněny v tekutém dusíku. Byloprokázáno, že tyto buňky jsou prosté mykoplasmových infekcí a vzorky byly deponoványv American Type Culture Collection (7. července 1978 pod č. CRL 1 432).
Namálwa/WRL buňky byly užity v popisovaných příkladech vynálezu, lze však použíti jiných sublinií Namalwa buněk a.dalších vhodných lymfoblastoidních buněk. Název "potenciační činidlo" zde používaný, se týká kterýchkoli látek, které po přidáníběhem, indukce nebo krátce po indukci vedou k podstatnému zvýšení výtěžku interferonuve srovnání s výtěžkem docíleným bez přidání tohoto činidla.
Bylo zjištěno, že velké množství chemicky odlišných látek je účinné jako potenciačníčinidlo. Mezi tato činidla patří mnoho takových látek, které byly dříve popsány jakostimulátory pro předchozí zpracování buněk před indukci. Avšak výhodné stimulátory, alkan-kyseliny (zejména kyselina máselná), a jejich soli a steroidy (například dexametanson),nejsou potenciační činidla a vedou ke sníženému výtěžku interferonu, jsou-li přítomnyběhem indukce nebo po indukci. 251766 4
Sloučeniny, které byly nalezeny jako efektivní potenciační činidla, jsou účinnéi při diferenciaci Friendových buněk (ačkoli všechny látky odlišující Friendovy buňkynejsou efektivní jako potenciační činidla).
Efektivní potenciační činidla zahrnují: N-acetyl-praminofenol;’
Acetamid a nižší alkyacetamidy (například N-metylacetamid·, N,N-dimetylacetamid,N-etylacetamid, Ν,Ν-dietylacetamid, N-butylacetamid, N-acetyl-6-hydroxyhexylamin): acetanilid a nižší alkoxyacetanilidy (například p-etoxyacetanilid); alkylen-bisacetamidy (zejména C^-Cg alkylenacetamidy, například hexametylen-bisacet-amid, pentametylen-bisacetamid, heptametylen-bisacetamid); N,N-dimetylhexanamid; dimetylsulfoxid; nižší alkylamidy (například propionamid, butyramid); nižší alkybenzamidy (například N-metylbenzamid); nižší alkyl-2-imidazolidinony (například l,3-dimetyl-2-imidazolidinony); ' nižší alkyl-2-pyrrolidóny (například l-metyl-2-pyrrolidon, l-etyl-2-pyrrolidop); 2-piperidon a nižší l-alkyl-2-piperidony (například lrmetyl-2-piperidon) ; pyridin-N-oxid; a deriváty močoviny (například tetrametylthiomočovina; nižší alkysubstituované močoviny,(například 1-metylmočovina, 1-etylmpčovina, 1-propylmočovina, 1,1-dimetylmočovina, 1,3-dietylmočovina).
Obzvláště výhodné sloučeniny zahrnují: N-acetyl-p-aminofenol ; N,N-dimeťylacetamid ·,> 1,3-dimetyl-2-imidazolidinon; dimetylsulfoxid; p-etoxyacetanilid; hexametylen-bi sacetamid; N-metylacetamid; 1-metylpiperidon; 5 251766 l-metyl-2-pyrrolidon, a tetrametylmočovinu.
Nižší alkylové skupiny zde používané se týkají alkylových zbytků obsahujících 1 až6, s výhodou 1 až 4 uhlíkové atomy. S cílem vyrábět interferon, musí vybrané buňky růst za podmínek, které jsou vhodnéa obvyklé pro jednotlivý typ buňky nebo kmen, jak jsou dokumentovány literaturou. Napříkladlidské lymfoblastoidní buňky, jako Namalwa buněčná linie, rostou snadno v suspenzi v kul-'tivačním médiu, na příklad,RPMI .1 640 (G. E. Moore se spol., J. Amer. Med. Assoc. 199,519-524), doplněném sérem například telecím nebo koňským sérem, obvykle 5 až 10 % obj./obj.
Pro výrobu interferonu z lymfoblastoidních buněk, například z Namalwa buněk, rostoubuňky nejprve v'suspenzi až se dosáhne přiměřené koncentrace. Koncentrace, podmínky atd.,požadované pro výrobu interferonu, jsou dobře známé a budou jasné odborníkům z oboru. V tomto stádiu se přidá potenciační činidlo. Ideálně se činidlo přidává v době indukce(tj. když se indukující látka, například virus Sendai, přidává k indukci výroby interferonujinými slovy, stupňující činidlo může být inkorporováno do média pro buněčnou suspenzibezprostředně před indukcí nebo se přidává k buněčné suspenzi bezprostředně po indukci.Avšak výhod vynálezu lze docílit ještě i tehdy, přidá-li se potenciační činidlo někdypo indukci, například až po 2 hodinách.
Množství použitého potenciačního činidla je limitováno jeho toxicitou k buňkám,avšak bude přítomno v množství efektivním pro zvýšení produkce interferonu. Optimálníkoncentrace pro rovnováhu mezi toxicitou a zvýšenou produkcí interferonu .se bude lišitu jednotlivých činidel, bude však obecně taková, aby vedla ke konečné* koncentraci od0,1 do 500 mM, s výhodou 1 až 200 mM, obzvláště výhodně asi od 5 do 50 mM.
Podmínky indukce a následující inkubace k výrobě interferonu lze uskutečnit kterýmkoliznámým způsobem pro takový proces. Buňky mohou být například znovu suspendovány v médiuRPMI 1 640, neobsahujícím sérum nebo doplněném až do 5 % obj./obj. sérem, za vzniku konečnébuněčné koncentrace asi od 0,25 až do 6xlOb buněk/ml, s výhodou 0,5 až 3x10 buněk/ml.Vhodný induktor, například virus, zejména Sendai virus (viz. M. D. Johnoston., J. Gen. Viol1981, 56, 175-184), se přidává k buněčné suspenzi za vzniku konečné koncentrace od 5 do2 000 jednotek hemaglutinace v mililitru (HAU/ml), s výhodou 20 až 50 HAU/ml. Po
Po pečlivém promíchání se buněčná suspenze inkubuje po dobu 12 až 48 hodin při teplotěod 34 do 37 °C. Buněčná kultura může být při teplotě, 37 °C výhodně inkubována' přes noc,během kteréžto doby se interferon uvolňuje z buněk do média. Po inkubaci jsou buňky odstra-něny, například odstředěním, přičemž se získává supernatant obsahující surový interferon,který lze, je-li to požadováno, čistit známým způsobem. • Zvýšený výtěžek, kterého lze dosáhnout použitím· potenciačního činidla zde definova-ného, může být podstatný, přičemž se dosahuje až 5x vyššího výtěžku než ve srovnánís výtěžkem bez takového (činidla.
Mechanismus, kterým potenciační činidlo působí, není zatím zcela jasný. Ukazujese však, že míra produkce interferonu roste po delší dobu než v případe nepřítomnostipotenciačního činidla. Předpokládá se, že je to důsledkem prodloužené doby, po kterouje interferon přepisován mRNK, tj. pravé superindukce. Vynález obsahuje alternativníznak, způsob výroby interferonu, vyznačující se přidáním interferonového induktoruk lymfoblastoidním buňkám, které jsou schopné indukce za tvorby interferonu, přičemž .podstata spočívá v tom, že po indukci doba růstu produkce interferonu získávaného obvykleje podstatně prodloužena.. 251766 6 Výrazem "obvykle získávaný" je míněno to, co se získává, když se připravuje interferonz lymfoblastoidijích buněk způsoby dobře známými z oboru a bez jakéhokoli zásahu do změnydoby, po kterou stoupá výtěžnost interferonu.
Prodlouženi doby pro stoupání výtěžnosti interferonu lze docílit prodloužením doby,po kterou je interferon přepisován mRNK, tj. superíndukcí. Prodloužení doby lze docílitvýhodně pomocí potenciačního činidla za podmínek podle vynálezu. Vynález se týká tedyprostředku ke zvyšování doby produkce interferonu nad dobu, po kterou buňky produkujíinterferon za inkubačních podmínek známých z oboru.
Vynález lze výhodně kombinovat se způsoby známými z oboru pro zvyšování výtěžkuinterferonu z lymfoblastoidních buněk. Takže způsoby snižování teploty a předchozíhoošetření stimulátorem před indukcí lze kombinovat se způsoby zde popsanými vedoucímik vyšším výtěžkům interferonu než lze získat pomocí některé techniky samotné.
Zejména použití stimulátoru k předchozímu ošetření buněk před indukcí (jak je topopsáno v evropském pat. spise 0 000 391 a 0 008 391, které jsou zde citovány) bylo nale-zeno výhodným. V případech, kdy stimulátor působí jako potenciačni činidlo lze k oběma funkcímpoužít stejné látky. Je však výhodné provádět předchozí působení podle evropského patentovéhospisu č. 0 000 520, tj. pomocí alkankyseliny nebo její soli, zejména kyseliny máselnénebo sodné soli kyseliny máselné.
Vynález se týká v dalším znaku způsobu výroby interferonu, zahrnující přidání induktoruk lymfoblastoidním buňkám, které jsou schopné po indukci vytvářet interferon, přičemžbuňky byly inkubovány v médiu obsahujícím účinné netoxické množství stimulátoru předindukcí a kde vpředu definované potenciačni činidlo se přidává simultánně nebo krjitcepo indukci. V alternativním provedeni se vynález týká i způsobu výroby interferonu, zahrnujícího,přidání induktoru k lymfoblastoidním buňkám schopným vytvářet po indukci interferon,přičemž buňky jsou inkubovány před indukcí v médiu obsahujícím efektivní netoxické množstvístimulátoru a kde doba po indukci, během níž se zvyšuje produkce interferonu, se podstatněprodlouží.
Vynález je ilustrován následujícími příklady, které neomezují rozsah vynálezu. Přikladl ' '
Vliv potenciačního činidla na výtěžek interferonu V sériích pokusů rostly buňky Namalwa/WRL v suspenzi v RPMI 1 640 médiu obsahujícím 5 %hovězího séra, polymyxin a neomycin a hydrogenuhličitan sodný pro kontrolu hodnoty pH.
Když počet buněk dosáhl koncentrace 2x10® buněk/ml, byla část kultury odebrána a zředěnave stejném prostředí na 1x10® buněk/ml. Byla přidána sodná sůl kyseliny máselné na koncen-traci 1 mM a buňky byly za míchání při teplotě 37 °C inkubovány po dobu 48 hodin.
Po této inkubační periodě byly buňky odstředěny při 800 x.g. Buněčné pelety bylysuspendovány znovu v médiu RPMI 1 640 obsahujícím 2 % hovězího séra a upraveny na 3x10® bu-něk/ml. Byl přidán virus Sendai na 10 hemaglutinačních jednotek/ml k indukcí tvorby-inter- 2 feronu. Indukované buňky byly rozděleny v objemech po 10 ml do 25 cm tkáňových kultivačníchbaněk z plastu. Do každé baňky bylo přidáno jiné potenciačni činidlo, jak je uvedenov tabulce 1 v udané koncetraci. U dvou baněk bylo přidání vynecháno. 7 251766
Interferon b.yl izolován po uplynutí doby 24 hodin odstředěním buněk při 800 x gpo dobu 5 minut. Čirý supernatant obsahující interferon byl okyselen na hodnotu pH 2a udržován při teplotě 4 °C po dobu 24 hodin před analýzou interferonu. Zvýšeni interferonového titru proti standardu (kde nebylo přidáno žádné 'potenciační činidlo) bylo stanovenopro každé potenciační činidlo. Výsledky jsou uvedeny v tabulce I níže.
Tabulkal
Potenciální činidlo přidané ' Konečná koncentrace poten- Zvýšení interferonového k indukované kultuře ciačního činidla titru ve srovnání (mM) s kontrolou acetamid acetanilid N-acety1-6-hydroxyhexylamin N-butylacetamid butyramid N,N-dietylacetamid 1.3- dietylmočovinaN,N-dimetylacetamidN,N-dimetylhexanamid 1.3- dimetyl-2-imidazolidindimetylsulfoxid 1,1-dimetylmočovina 1.3- dimetylmočovinap-etoxyacetánilidN-etylacetamidN-etylpyrrolidinonetylmočovinahexametylenbisacetamidp-hydroxyacetanilidN-metylacetamidN-metylbenzamidN-metyl-2-piperidonN-metyl-2-pyrrolidinonmetylmočovina2-piperidonpropionamidpropylmočovina pyridin-N-oxid tetrametylthiomočovina tetrametylmočovina Příklad 2 20 2 2 2 5 3 5 . 5 10 ' 3 10 4 5 3 5 2 3 2 2 3 140 4 10 2 5 3 2 2 10 3 5 3 20 3 5 7 5 3 10 2 4 3 5 3 10 4 50 2 25 2 20 3 10 3 50 4 5 4 8,4 6
Vliv potenciačního činidla na výtěžek interferonu v přítomnosti i nepřítomnosti sodnésoli kyseliny máselné
Buňky Namalwa/WRL kultivované tak, jak je to popsáno v příkladu 1, byly zředěnyna 1x10° buněk/ml. Kultura byla rozdělena rovnoměrně do dvou odstředovacích baněk. Dojedné baňky byla přidána sodná sůl kyseliny máselné v koncentraci 1 mM. Ve druhé bylpřídavek vynechán. Obě kultury byly inkubovány za míchání po dobu 38 hodin. Buňky bylyindukovány virem Sendai, jak je to popsáno v příkladu 1. Jak je uvedeno v tabulce IIníže, potenciační činidla byla přidána k indukovaným kulturám s přídavkem a bez přídavkusodné soli kyseliny máselné. Interferon byl izolován a připraven pro stanovení, jak jepopsáno v příkladu 1 a bylo stanoveno zvýšené výtěžku interferonu ve srovnání se standardníkontrolou. Získané výsledky jsou uvedeny v tabulce II níže. 251766 8
Koncentrace po- Zvýšeni titru tenciačního či- interferonu nidla (mM) vzhledem ke kontrole
Tabulka II
Koncentrace sodné solikyseliny máselné užiták předběžnému ošetřeníNamalwa buněk (mM) Pótenciační činidlo při-dané při indukci 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 Příklad 3 žádné acetanilid Ν,Ν-dimetylacetamid dimetylsulfoxid N-metylbenzamid tetrametylmočovína žádné acetanilidN.N-dimetylacetamiddimetylsulfoxidN-metylbenzamidtetrametylmočovína . 2 5 140 8,4 2 5 140 4 8,4 1 3 3 2 3 6 1 2 2 2 3 3
Použití dimetylsulfoxidu jako stimulátoru i potenciačního činidla
Buňky Namalwa/WRL pěstované tak, jak je popsáno v příkladu 1, byly zředěny čerstvýmmédiem na koncentraci 1x10® buněk/ml. Kultura byla rozdělena rovnoměrně do dvou odstředo-vacích baněk. Do jedné baňky byl do koncentrace 140 mM přidán dimetylsulfoxid. Do druhébaňky nebylo přidáno nic. Obě kultury byly inkubovány za míchání po dobu 48 hodin. Buňkybyly odstředěny při 800 x g, znovu suspendovány v čerstvém médiu do koncentrace 3x10® bu-něk/ml a indukovány na interferon jak je popsáno v příkladu 1. Dimetylsulfoxid byl přidándo koncentrace 140 mM k jedné indukované kultuře připravené z bu»ěk ošetřených předemdimetylsulfoxidem a rovněž přidán ve stejné koncentraci k jedné z indukovaných kultur,připravené z buněk neošetřených předem dimetylsulfoxidem. Po uplynutí doby 24 hodin bylinterferon izolován a připraven ke stanovení jak je popsáno v příkladu 1.
Koncentrace dimetylsulfoxidu uži-tého k předběžnému působení nabuňky Namalwa (mM)
Koncentrace dimetylsulfoxidu Titr interferonupřidaného k indukci (mM) (log^g jedn./ml) 0 0 3,55 140 0 4,0 0 140 3,9 140 140 4,3 Příklad 4
Kinetika produkce interferonu V přítomnosti i nepřítomnosti potenciačního činidla a bezpředběžného působení sodné soli kyseliny máselné a s ním
Buňky Namalwa/WRL pěstované tak, jak je popsáno v příkladu 1, byly zředěny čerstvýmmédiem do koncentrace 1x10®. Kultura byl rozdělena do dvou odstředovacích baněk. Do jednébaňky byla přidána sodná sůl kyseliny máselné do koncentrace 1 mM; ve druhé baňce bylopřidání vynecháno, obě kultury byly inkubovány za míchání po dobu 48 hodin. Buňky bylyodstředěny při 800 x g, znovu suspendovány v čerstvém médiu do koncentrace 3x10® buněk/mla indukovány k tvorbě interferonu,· jak je to popsáno v příkladu 1. Tetrametylmočovínabyla přidána do koncentrace 8,4 mM k polovině indukovaných kultur, připravených z buněkpředem ošetřených sodnou solí kyseliny máselné a rovněž byla přidána ve stejné koncentraci 9 251766 k druhé polovině indukovaných kultur připravených z buněk neošetřených sodnou soli kyselinymáselné. Do zbývajících kultur nebyla tetrametylmočovina přidána. Byly čtyři skupinyindukovaných buněk, které obsahovaly buňky ošetřené předem sodnou solí kyseliny máselnéa ke kterým byla přidána nebo nebyla přidána tetrametylmočovina v době indukce interferonupomocí Sendai viru a buňky neošetřené sodnou solí kyseliny máselné, ke kterým byla přidánanebo nebyla přidána tetrametylmočovina v době indukce virem Sendai. V intervalech 2 hodin,jedna kultura z každé ze čtyř skupin byla odstředěna při 800 x g. Médium bylo odstraněno a buněčné peletky pečlivě odvodněny. Buňky byly suspendoványznovu do původního objemu čerstvého média, ke kterému byla potom přidána tetrametylmočovina,pokud byla přítomna v médiu před odstředěním. Po dalších dvou hodinách inkubace byl izolováninterferon ve stejných kulturách, jako je popsáno v příkladu 1.
Titr interferonu (log^g referenční jednotky/ml)
Buňky Namalwa předem neošetřené Buňky Namalwa ošetřené předem 1 mMsodnou solí kyseliny máselné Doba, kdy byl bez potenciač- k indukci při- k indukci nepři- k indukci přidá- interferon ního Činidla dáno 8,4 mM te- dáno potenciační dáno 8,4 mM po indukci izo-lován (hodiny) k indukci tetrametylmočo- viny činidlo tetrametylmočo- viny 0-2 0,75 0,75 1,05 1,05 2-4 0,75 0,75 2,6 2,7 4-6 1,8 1,7 4,05 4,2 6-8 2,55 2,9 4,25 4,65 8-10 2,7 3,5 4,1 4,9 10-12 2,8 3,7 3,95 4,65 12-14 2,6 3,75 ' 3,55 4,5 14-16 2,6 3,7 3,25 4,1 16-18 2,45 3,55 3,15 3,95 Příklad 5
Vliv přidáni sodné soli kyseliny máselné v indukci v přítomnosti a nepřítomnosti předchozíhoošetření sodnou solí kyseliny máselné
Buňky Namalwa pěstované tak, jak je popsáno v příkladu 1, byly odstraněny při 800 x g,znovu suspendovány do čerstvého média na koncentraci 3x10° buněk/ml indukovaných na inter-feron jako v příkladu 1. Bezprostředně po indukci buněk virem Sendai byla přidána sodnásůl kyseliny máselné do koncentrace uvedené v tabulce níže. Po 24 hodinách inkubacev médiu byl interferon izolován jako v příkladu 1.
Koncentrace sodné soli kyseliny máselné přidané Titr interferonu log^p referenční k indukované kultuře (mM) jednotky/ml 4,38 4.32 4.334,274,174,143,933,83 0 0,1 0,2 0,5 1 2 5 10
Claims (8)
- 251766 10 PŘEDMĚT VYNALEZU1. Způsob výrobu interferonu zahrnující přidávání induktoru k lymfoblastoidním buňkám,které jsou schopné indukce za tvorby interferonu, vyznačující se tím, že během indukce nebo krátce po indukci se na buňky působí potenciačním činidlem vybraným ze skupiny sloučenin,která zahrnuje N-acety1-p-aminofenol, acetamid, /C^-Cg-aikyl/acetamidy, acetanilid, /C^-Cg--alkoxy/acetanilidy, alkylen-bisacetamidy, Ν,Ν-dimety-hexanámid, dimetylsulfoxid, C^-Cg--alkylamidy, /C^-Cg-alkyl/benzamidy, /C|-Cg-alkyl/-2-imidazolidinony, l-/C^-Cg-alkyl/-2--pyrrolidony, 2-piperidon, l-ZCj^-Cg-alkyiy-ž-piperidony, pyridin-N-oxidové a močovinovéderiváty, N-acetyl-p-aminofenol, Ν,Ν-dimetylacetamid, 1,3-dimetyl-2-imidazolidinon, dimetyl-sulfoxid, p-etoxyacetanilid, hexametylen-bisacetamid, 1-metylpiperidon a tetrametylmočovinu,přičemž se působí potenciačním činidlem v koncentraci 0,1 až 500 mM.
- 2. Způsob podle bodu 2, vyznačující se tím,'že se působí potenciačním činidlem v kon-centraci 1 až 200 mM.
- 3. Způsob podle bodu 2, vyznačující se tím, že se působí potenciačním činidlemv koncentraci 5 až 50 mM.
- 4. Způsob podle kteréhokoli z bodů 1 až 4, vyznačující se tím, že potenciační činidlose přidává během indukce.
- 5. Způsob podle některého z bodů 1 až 4, vyznačující se tím, že potenciační činidlose přidává v době dvou hodin po indukcí.
- 6. Způsob podle některého z bodů 1 až 6, vyznačující se tím, že na buňky před indukcíse působí stimulátorem.
- 7. Způsob podle bodu 7, vyznačující se tím, že jako stimulátorem se působí alkanovoukyselinou s přímým řetězcem o 1 až 6 atomech uhlíku nebo její solí.
- 8. Způsob podle bodu 8, vyznačující se tím, že alkanovou kyselinou je kyselina máselná.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB8217884 | 1982-06-21 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS451883A2 CS451883A2 (en) | 1986-12-18 |
| CS251766B2 true CS251766B2 (en) | 1987-08-13 |
Family
ID=10531183
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS834518A CS251766B2 (en) | 1982-06-21 | 1983-06-20 | Method of interferon production |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4780413A (cs) |
| EP (1) | EP0097353B1 (cs) |
| JP (1) | JPH0636751B2 (cs) |
| AT (1) | ATE55620T1 (cs) |
| AU (1) | AU572783B2 (cs) |
| CA (1) | CA1211397A (cs) |
| CS (1) | CS251766B2 (cs) |
| DE (1) | DE3381805D1 (cs) |
| DK (1) | DK283683A (cs) |
| ES (1) | ES8504934A1 (cs) |
| FI (1) | FI832252L (cs) |
| GB (1) | GB2122207B (cs) |
| HU (1) | HU189706B (cs) |
| IL (1) | IL69027A (cs) |
| IT (1) | IT1172270B (cs) |
| PL (1) | PL141593B1 (cs) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2572093A1 (fr) * | 1984-10-22 | 1986-04-25 | Anda Biolog | Nouveau milieu de culture cellulaire contenant des cellules de rate humaine, procede de culture utilisant ce milieu de culture, lignees de cellules lymphoblastoides obtenues, application a la production d'interferon, procede de preparation d'interferon et interferon ainsi produit |
| US5681718A (en) * | 1986-03-14 | 1997-10-28 | Celltech Limited | Methods for enhanced production of tissue plasminogen activator in cell culture using alkanoic acids or salts thereof |
| US6656466B1 (en) | 1995-06-06 | 2003-12-02 | Genetech, Inc. | Human tumor necrosis factor—immunoglobulin(TNFR1-IgG1) chimera composition |
| US5721121A (en) * | 1995-06-06 | 1998-02-24 | Genentech, Inc. | Mammalian cell culture process for producing a tumor necrosis factor receptor immunoglobulin chimeric protein |
| US5705364A (en) | 1995-06-06 | 1998-01-06 | Genentech, Inc. | Mammalian cell culture process |
| US6855519B2 (en) * | 1995-08-22 | 2005-02-15 | The Regents Of The University Of California | Methods for enhancing the production of interferon in cell culture |
| US5840565A (en) | 1995-08-22 | 1998-11-24 | The Regents Of The University Of California | Methods for enhancing the production of viral vaccines in PKR-deficient cell culture |
| SE513313C2 (sv) * | 1998-12-29 | 2000-08-21 | Bionative Ab | Modifierad interferonproduktion |
| AU2004234377A1 (en) * | 2003-04-25 | 2004-11-11 | Immunex Corporation | Inducers of recombinant protein expression |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3773924A (en) * | 1970-12-24 | 1973-11-20 | M Ho | Interferon production |
| CS215108B2 (en) * | 1977-07-15 | 1982-07-30 | Wellcome Found | Method of making the interferrone |
| DE2961658D1 (en) * | 1978-05-17 | 1982-02-18 | Thomae Gmbh Dr K | Process for preparing human interferon |
| DE2821466A1 (de) * | 1978-05-17 | 1979-11-29 | Thomae Gmbh Dr K | Verbessertes verfahren zur herstellung von humaninterferon |
| ES482789A0 (es) * | 1978-08-25 | 1980-12-01 | Thomae Gmbh Dr K | Procedimiento para la preparacion de nuevos bencimidazoles sustituidos en posicion 5 o 6 con un anillo de piridazinona |
| EP0014050A3 (en) * | 1979-01-16 | 1980-10-01 | Beecham Group Plc | Interferon production |
| EP0030094A1 (en) * | 1979-11-30 | 1981-06-10 | Beecham Group Plc | Calcium enhanced interferon production process |
-
1983
- 1983-06-20 GB GB08316758A patent/GB2122207B/en not_active Expired
- 1983-06-20 DK DK283683A patent/DK283683A/da not_active Application Discontinuation
- 1983-06-20 PL PL1983242612A patent/PL141593B1/pl unknown
- 1983-06-20 EP EP83106006A patent/EP0097353B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-06-20 IL IL69027A patent/IL69027A/xx unknown
- 1983-06-20 AU AU15935/83A patent/AU572783B2/en not_active Expired - Fee Related
- 1983-06-20 ES ES523424A patent/ES8504934A1/es not_active Expired
- 1983-06-20 IT IT48536/83A patent/IT1172270B/it active
- 1983-06-20 AT AT83106006T patent/ATE55620T1/de not_active IP Right Cessation
- 1983-06-20 DE DE8383106006T patent/DE3381805D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1983-06-20 HU HU832194A patent/HU189706B/hu unknown
- 1983-06-20 CA CA000430775A patent/CA1211397A/en not_active Expired
- 1983-06-20 JP JP58110756A patent/JPH0636751B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1983-06-20 FI FI832252A patent/FI832252L/fi not_active Application Discontinuation
- 1983-06-20 CS CS834518A patent/CS251766B2/cs unknown
-
1985
- 1985-08-26 US US06/769,670 patent/US4780413A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL242612A1 (en) | 1984-08-13 |
| GB2122207A (en) | 1984-01-11 |
| DE3381805D1 (de) | 1990-09-20 |
| FI832252L (fi) | 1983-12-22 |
| PL141593B1 (en) | 1987-08-31 |
| AU572783B2 (en) | 1988-05-19 |
| GB2122207B (en) | 1986-02-12 |
| ES523424A0 (es) | 1985-04-16 |
| HU189706B (en) | 1986-07-28 |
| IT8348536A0 (it) | 1983-06-20 |
| CS451883A2 (en) | 1986-12-18 |
| IL69027A (en) | 1988-08-31 |
| JPS596896A (ja) | 1984-01-13 |
| ATE55620T1 (de) | 1990-09-15 |
| DK283683A (da) | 1983-12-22 |
| AU1593583A (en) | 1984-01-05 |
| FI832252A0 (fi) | 1983-06-20 |
| IT1172270B (it) | 1987-06-18 |
| EP0097353A3 (en) | 1987-08-05 |
| DK283683D0 (da) | 1983-06-20 |
| ES8504934A1 (es) | 1985-04-16 |
| IL69027A0 (en) | 1983-10-31 |
| EP0097353A2 (en) | 1984-01-04 |
| CA1211397A (en) | 1986-09-16 |
| GB8316758D0 (en) | 1983-07-20 |
| EP0097353B1 (en) | 1990-08-16 |
| US4780413A (en) | 1988-10-25 |
| JPH0636751B2 (ja) | 1994-05-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4216203A (en) | Process for producing interferon | |
| Langford et al. | Biological effects of staphylococcal enterotoxin A on human peripheral lymphocytes | |
| EP0053135B1 (en) | Production of ifn-gamma | |
| JPH11511324A (ja) | 細胞培養でインターフェロン産生を高める方法 | |
| US5554515A (en) | Preparation of a monoclonal antibody specific to human myelomonocyte interferon-gamma | |
| CS251766B2 (en) | Method of interferon production | |
| FI72143B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av maenniskointerferon | |
| Burke | The status of interferon | |
| EP0254593A2 (en) | Preparation and uses of interferon-gamma | |
| JPS58502032A (ja) | ヒトｒ−インタ−フェロンの製造方法 | |
| US4480032A (en) | Natural mixture of Type I and Type II interferons | |
| US4433052A (en) | Process for producing interferon | |
| Maehara et al. | Enhanced Production of Virus‐Inhibiting Factor (Interferon) in Human Diploid Cells by Ultraviolet Irradiation and Temperature Shift‐Down after Stimulation with Newcastle Disease Virus | |
| Sugama et al. | 2‐Mercaptoethanol acts at the restricted stage of interleukin‐2 dependent lymphocyte proliferation | |
| EP0945463B1 (en) | Process for the preparation of human leukocyte [alpha] interferon | |
| Zenobia et al. | Interferon: Its Induction and Antiviral Activity | |
| KR830001817B1 (ko) | 타이프ⅱ 인터페론의 제조방법 | |
| DE2946275A1 (de) | Verbessertes verfahren zur herstellung von humaninterferon aus lymphoblastoiden zellen | |
| JPS63152993A (ja) | γ―インターフェロンの製造方法 | |
| Srivastava et al. | Polyribosomes and Protein Synthesis in «Tribolium Confusum» Duval (1) | |
| Lebedeva | Changes in the physicochemical and enzymic properties of myosin during ontogeny | |
| JPS6158594A (ja) | インタ−フエロン−αの製造方法 | |
| JPH0123119B2 (cs) | ||
| JPS6323176B2 (cs) | ||
| JPH0724595B2 (ja) | サイトカインを製造する方法 |