CS241478B2 - Carrier system's particles and method of their production - Google Patents

Carrier system's particles and method of their production Download PDF

Info

Publication number
CS241478B2
CS241478B2 CS809246A CS924680A CS241478B2 CS 241478 B2 CS241478 B2 CS 241478B2 CS 809246 A CS809246 A CS 809246A CS 924680 A CS924680 A CS 924680A CS 241478 B2 CS241478 B2 CS 241478B2
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
particles
carrier system
biologically active
solution
suspension
Prior art date
Application number
CS809246A
Other languages
English (en)
Other versions
CS924680A2 (en
Inventor
Zoltan Riedl
Laslo Sztankov
Istvan Horvath
Original Assignee
Human Oltoanyagtermelo
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Human Oltoanyagtermelo filed Critical Human Oltoanyagtermelo
Publication of CS924680A2 publication Critical patent/CS924680A2/cs
Publication of CS241478B2 publication Critical patent/CS241478B2/cs

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/585Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with a particulate label, e.g. coloured latex
    • G01N33/586Liposomes, microcapsules or cells
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • A61K9/1271Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes or liposomes coated or grafted with polymers
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • A61K9/1277Preparation processes; Proliposomes
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/26Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against hormones ; against hormone releasing or inhibiting factors
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/531Production of immunochemical test materials
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • External Artificial Organs (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Vynález se tyká částic z látek rozpustných v· lipoidech, prostředku tvořených těmito částicemi a biologicky aktivními látkami vázanými na uvedené částice a způsobu jejich výroby.
Při pokusech in vitro se к přípravě biologicky aktivních látek používá například latexu, tvořeného polystyrénovou suspenzí s vhodnou velikostí suspendovaných částic. Takové polystyrénové suspenze jsou popsány v Am. J. Med. 21, 888—892 (1956). Tato latexová suspenze se vyrábí ze styrenu. Jelikož je známo, že molekuly styrenu mají sklon к samovolné polymeraci, je třeba podrobit styren před vlastní přípravou latexu destilaci к získání styrenového monomeru, který se teprve potom polymeruje. Avšaik vzhledem к chemické struktuře styrenových molekul má i takto připravená latexová suspenze sklon к samovolné polymeraci. Proto částice uvedené suspenze během jejího skladování stárnou a takto zestárlá suspenze už není vhodná jato činidlo pro provádění srážecích reakcí [J. A. M. A. 163 (2), 180—181 (1958)].
Kromě toho se činidla na bázi latexového nosičového systému připravují alespoň ve dvou stupních. V prvém stupni se nejdříve připraví samotný nosičový systém, na který se teprve potom ve druhém stupni naváže biologicky aktivní látka. К přípravě takového činidla je zapotřebí mnoho času, přičemž toto činidlo je navíc vhodné pouze pro provádění pokusu in vitro, protože styren je рш živé organismy silně škodlivý.
Jakožto adjuvant in vivo se v široké míře používá Freundových adjuvant (Molecular Biologie 13, Biochemistry and Biophysics 1973 New York). Tato adjuvanta mohou být vzhledem к vedlejším účinkům, které znemožňují jejich použití v humánní terapii, použita i za kontrolovaných podmínek jen v omezené míre? Částice připravené způsobem. podle vynálezu mohou být také výhodněji použity než v humání terapii používaná kov - obsahující adjuvanta. (Molecular Biology 13, Biochemistry nad Biophysics, 1973 New York) a imunostimulátory typu saponin, které mění krevní obraz [Acta vet. seanci. 19, 7—40 (1978)].
V současné době probíhají pokusy použít při parenterální aplikaci jako nosiče pro biologicky aktivní látky liposom [Proč. Nat. Acad. Se. 72, 88—92 (1975)]. Liposomové částice jsou vytvořeny z cholesterolu a povrchově aktivní látky. Tyto částice se připraví z chloroformového roztoku uvedených látek; vytvoření podmínek pro vznik částic se dosáhne přídavkem fosfatidylcholinu. Chloroformová fáze se potom· vysuší к suchu, přičemž se na stěnách nádoby vytvoří vrstva lipidu. Ve druhém stupni se к této vrstvě na stěnách nádoby přidá roztok biologicky aktivní látky (britský patentový spis č. 28 131/74). Příprava tohoto systému neprobíhá kontinuálně a v jed né šarži se získá pouze malé množství požadovaného produktu. Navíc se velikost částic získaných tímto způsobem pohybuje v širokém rozsahu.
Cílem vynálezu je odstranit nedostatky latexových systémů používaných in vitro a ostatních systémů používaných in vivo (Freundovy adjuvanta, adjuvanta typu saponin, kov - obsahující adjuvanta a liposom) vyvinutím nosičového systému, který by byl použitelný pro rozsáhlou škálu medicinálních aplikací, který by neměl sklon к samovolné polymeraci, který by nebyl škodlivý pro živý organismus, a který by tedy byl použitelný v imunologii, biologii, humánní terapii a veterinární medicíně.
Vzhledem к funkčnímu charakteru tohoto* nosičového systému je vzhledem к výše uvedenému nezbytně žádoucí, aby na tento nosičový systém mohly být vázány biologicky aktivní látky.
Dalším cílem vynálezu je, aby vytvoření uvedených částic nosičového systému a navázání biologicky aktivní látky na tento nosičový systém proběhlo* v jediném stupni a aby výroba takto vzniklé kompozice mohla být prováděna kontinuálně. Vzhledem к tomu bude možné získat větší množství požadovaného; produktu, což bude činit tento způsob hospodárnějším než jsou výše uvedené známé způsoby.
Nyní bylo nově zjištěno, že vytvoření částic nosičového systému a navázání částic biologicky aktivní látky na částice nosičového systému může proběhnout v jediném stupni. Toho se dosáhne následujícím způsobem. Rozpustí se cholesterol a povrchově aktivní látka, například vaječný lecitin, v absolutním alkoholu. Současně se připraví., směs biologicky aktivní látky, jakou jsou například bakterie, viry, jejich buněčné , frakce nebo produkty jejich látkové výměny, rozličné hormony, antibiotika a haťteny, které samy o, sobě vykazují jen velmi nedostatečný imunobiologický účinek, s vodným elektrolytickým roztokem. Potom se uvedený alkoholový roztok smísí s uvedenou vodnou fází. Při tom se dosáhne vytvoření nosičového* systému částic a navázání biologicky aktivní látky na tyto částice nosičového systému v jediném stupni.
Způsob podle vynálezu může být proveden také ve dvou stupních. V tomto případě se v alkoholu rozpustí částice - tvorná látka a takto vzniklý roztok se potom smísí s vodnou elektrolytickou fází. Tímto způsobem se získají „prázdné“ částice nosičového systému, na které může být teprve později navázána biologicky aktivní látka.
V obou výše uvedených případech se získaná suspenze odstředí, supernatant se dekantuje a na dně usazená sedlina se potom suspenduje ve vodě nebo ve vodném elektrolytickém roztoku a zpracuje ultrazvukem. Skladování vzniklé suspenze se
241473 provádí buď po předcházející lyofilizaci nebo za chlazení. Lyofilizovaná látka se ještě sterilizuje ozářením.
Vynález se týká částic nosičového systému na bázi látek rozpustných v lipoidech používaných к navázání biologicky aktivních látek. Částice jsou podle vynálezu tvářeny fo-sfolipidy, s výhodou vaječným lecitinem, nebo cholesterolem, a popřípadě povrchově aktivní látkou.
Způsob výroby těchto částic spočívá v tom, že se roztok částicetvorné fosfolipidní látky v rozpouštědle, s výhodou v alkoholu, smísí s vodou nebo vodným roztokem elektrolytu s hodnotou pH v rozmezí 2 až 10 při objemovém poměru alkoholické a vodné fáze 0,1 až 900 : 100. Vyloučené částice se oddělí, s výhodou odstředěním, a popřípadě se suspendují ve vodě nebo ve vodném roztoku elektrolytu s hodnotou pH 2 až 10. Vzniklá suspenze se lyofilizuje.
Částice podle vynálezu a prostředky podle vynálezu se vyrábějí tak, že roztok částice - tvorné látky, rozpustné v lipoidech, v alkoholu nebo v jiném vhodném rozpouštědle, které také obsahuje povrchově aktivní látku,
a) a biologicky aktivní látka ve vodě nebo ve vodném elektrolytickém roztoku s hodnotou pH 2 až 10 se vloží do nádoby, vybavené míchadlem, přičemž objemový po'měr alkoholické a vodné fáze je v rozmezí 0,1 až 900 : 100, načež se získaná reakční směs míchá alespoň po dobu jedné minuty a nechá stát nejvýše sedm dní, načež se oddělí vyloučené částice, nebo
b) se roztok částice - tvorné látky, smísí s vodou nebo vodným elektrolytickým roztokem s hodnotou pH v rozmezí 2 až 10 při dosažení objemového poměru alkoholické a vodné fáze 0,1 až 900 : 100, načež se vyloučené částice oddělí a případně suspendují ve vodě nebo ve vodném elektrolytickém roztoku s hodnotou pH v rozmezí 2 až 10 a vzniklá suspenze se lyofilizuje, nebo
c) se roztok částice - tvorné látky smísí s vodou nebo vodným elektrolytickým roztokem s hodnotou pH v rozmezí 2 až 10 při dosažení objemového poměru alkoholické a vodné fáze 0,1 až 900 : 100, vyloučené částice se oddělí, tyto částice se přidají к biologicky aktivní látce ve vodě nebo ve vodném elektrolytickém roztoku s hodnotou pH v rozmezí 2 až 10 a takto získaná reakční směs se míchá alespoň jednu minutu a potom nechá stát nejvýše sedm dní, načež se vytvořené částice oddělí, nebo
d) se částice podle varianty b) přidají к biologicky aktivní látce ve vodě nebo vodném elektrolytickém roztoku s hodnotou pH v rozmezí 2 až 10 a potom suspendují a produkt získaný podle variant a) a
c) se případně lyofilizuje a je-li to žádoucí také sterilizuje ozářením.
Způsobem podle vynálezu byl takto splněn požadavek, aby způsob přípravy uve- dené suspenze mohl být prováděn kontinuálně a aby tato suspenze mohla být získána ve větším množství.
Vynález přináší následující výhody:
1) při způsobu podle vynálezu dochází к vytvoření částic nosičového systému а к vázání biologicky aktivní látky na tyto částice v jediném stupni;
2. způsob podle vynálezu probíhá kontinuálně, takže mohou být částice nosičového systému z látky rozpustné v lipoidech připraveny ve velkém množství;
3) částice nosičového systému jsou pro živý organismus neškodné;
4) vzhledemi к bodům 1 a 2 je zřejmé, že způsob podle vynálezu je hospodárný;
5. způsobem podle vynálezu může být nový nosičový systém připraven ve velkém měřítku, přičemž tento nosičový systém je vhodný jako činidlo pro provádění rychlých imunodiagnostických vyšetření in vitro, například jako
a) diagnostikům pro rychlé kvantitativní stanovení revmatoidní arthritidy a
b) další činidla pro rychlá imunodiagnostická stanovení;
6) rychlé imunodiagnostické reakce mohou být s imunodiagnostickými činidly v souladu s bodem 5 prováděny jako kapkové reakce, přičemž požadovaný výsledek stanovení může být získán již během několika minut;
7) vzhledem к tomu, že částice nosičového systému podle vynálezu nejsou pro živý organismus škodlivé, je možné těchto částic použít к zavádění biologicky aktivních látek do živého organismu, přičemž
a) mohou při vyvolání imunity působením virů zvýšit účinnost živých nebo usmrcených virů při tvorbě protilátek;
b) nebo jsou vhodné při vyvolání imunity působením bakterií ke stimulaci imunobiologické odezvy na přítomnost živých nebo usmrcených bakterií, jejich buněčných frakcí, produktů jejich látkové výměny a jejich derivátů;
c) nebo jsou vhodné ke zvýšení imunity vyvolané plísňovými frakcemi;
8) na částice nosičového systému podle vynálezu mohou být vázány také takové biologicky aktivní látky, které samy o sobě indukují v organismu pouze nepatrnou imunologickou odezvu avšak ve spojení s částicemi nosičového systému podle vynálezu dochází ke zvýšení imunologické odezvy vyvolané těmito látkami. Použitím částic nosičového systému podle vynálezu může být tedy dosaženo adjuvančního účinku (například u haptenů, hormonů, enzymů a histaminu).
Výhoda parenterálního očkování za použití částic nosičového systému podle vynálezu spočívá v tom, že v tomto případě nedochází к poškození organismu ani v místě očkování, ani v* žádném jiném místě. Lát241478 ka se plnou měrou vsaje a nezpůsobuje žádný vedlejší škodlivý účinek;
9) pomocí částic nosičové ho systému podle vynálezu mohou být vytvořeny také kompozice těchto částic s takovými biologicky aktivními látkami, které se z organismu rychle vylučují v důsledku jejich malých molekul; ve spojení s částicemi nosičového systému se uvedené molekuly ,^větší“ a lze předpokládat, že jejich vylučování z organismu v této zvětšené podobě bude probíhat pomaleji, čímž se vlastně dosáhne požadovaného prolongovaného' účinku léčiva.
V následující části popisu bude způsob podle vynálezu popsán detailněji. Při způsobu podle vynálezu se směšuje alkoholická fáze nebo jiná organicko-rozpouštědlová fáze s vodnou fází v objemovém poměru 0,1 až 900 : 100. Tím se získá optimální velikost částic nosičového systému a ideální adsorbcvatelnost biologicky aktivních látek na těchto’ částicích.
Varianta a)
Způsob podle vynálezu se při této variantě provádí v zařízení zobrazeném na připojeném obrázku 1. Do nádrže 1 se naplní roztok lecitinu a cholesterolu v absolutním alkoholu. Do nádrže 2 se předloží biologicky aktivní látka ve vodném elektrolytickém roztoku s hodnotou pH 2 až 10. Potom se spustí míchadlo 3 a do nádoby 4 s míchadlem 3 se nechá téci, kapat nebo rozstřikovat -obsah nádrží 1 a 2. Takto získaná reakční směs se míchá po dobu jedné minuty rychlostí 50 otáček za minutu, načež se nechá přetéci pomocí přetokového potrubí 5 do sběrného^ zásobníku 6. Zde se reakční směs míchá tak dlouho, až se získá dostatečné množství částic. Takto získaný produkt se potom inkubuje při teplotě 37 eC po dobu 5 až 10 minut, načež se odstřeďuje rychlostí 6 000 otáček za minutu po dobu 30 minut a supernatant nad získanou sedlinou se odlije.
V případě, že má být produkt bezprostředné použit, vyjme se sedlina fyziologickým roztokem chloridu sodného·, suspenze se homogenizuje a zpracuje ultrazvukem. V případě, že má být získaný produkt použit až později, vyjme se sedlina destilovanou vodou, suspenze se homogenizuje, dávkuje, lyofilizuje a nakonec sterilizuje ozářením.
Varianta b)
I tato varianta způsobu podle vynálezu se provádí v zařízení zobrazeném na připojeném obrázku 1. Do nádrže 1 se naplní roztok lecitinu a cholesterolu v absolutním alkoholu. Do nádrže 2 se naplní vodný elektrolytiícký roztok s hodnotou pH v rozmezí 2 až 10. Potom se spustí míchadlo 3 a do nádoby 4 s míchadlem 3 se nechá té ci, kapat nebo rozstřikovat obsah nádrží 1 a 2. Po promísení přeteče získaná suspenze z nádoby 4 přetokovým potrubím 5 do sběrného zásobníku 6. Zde se reakční směs míchá tak dlouho, až se získá dostatečné množství suspenze částic.
Získaná suspenze se potom odstřeďuje po dobu 30 minut rychlostí 6 000 otáček za minutu (4 000—6 000 g), načež se supernatant nad sedlinou odlije. Získaná sedlina se rozmíchá v destilované vodě, homogenizuje a zpracuje ultrazvukem. Po dávkování se produkt sterilizuje ozářením. Takto získané prázdné částice v lyofilizované formě obsahují v jednotkovém množství (částicová jednotka) 11,2 mg sušiny, což odpovídá počtu částic 1,5 až 2,5 x 1Ó8.
Varianta c)
Rovněž tato varianta způsobu podle vynálezu se provádí v zařízení zobrazeném na připojeném obrázku 1. Do nádrže 1 se naplní roztok lecitinu a cholesterolu v absolutním alkoholu. Do’ nádrže 2 se naplní vodný elektrolytický roztok s hodnotou pH v rozmezí 2 až 10. Potom se spustí míchadlo 3 a dO’ nádoby 4 se nechá téci, kapat nebo rozstřikovat obsah nádrží 1 a 2, Po promíšení přeteče reakční směs z nádoby 4 přetokovým potrubím 5 do sběrného zásobníku 6. Zde se reakční směs míchá tak dlouho, až se získá požadované množství suspenze částic.
Suspenze se potom odstřeďuje po dobu 30 minut rychlostí 6 000 otáček za minutu, načež se supernatant nad vzniklou sedlinou odlije. V případě okamžitého použití se biologicky aktivní látka převede do fyziologického roztoku chloridu sodného a v takto získaném roztoku se suspenduje výše uvedeným způsobem získaná sedlina částic nosičového systému podle vynálezu. Suspenze se potom homogenizuje a zpracuje ultrazvukem. V případě, že má být nosič ového systému použito až později, přidá se к sedlině biologicky aktivní látka v destilované vodě nebo ve vodném elektrolytickém roztoku s hodnotou pH v rozmezí 2 až 10. Získaná reakční směs se dokonale homogenizuje a zpracuje ultrazvukem, načež se inkubuje po dobu 5 až 10 minut při teplotě 37 °C, dávkuje a sterilizuje ozářením.
Varianta d)
Částice vyrobené podle varianty b) mo·hou být použity u biologicky aktivních látek jako adjuvanta.
V následující části popisu bude vynález blíže objasněn formou příkladů provedení.
Příklad 1
Příprava séra proti hepatitidě
Živé a usmrcené viry hepatitidy se naváží na částice nosičového systému podle vynálezu tak, že se k částicové jednotce lyofilizovaných částic (vyrobených podle varianty b) způsobu podle vynálezu] přidá 10° virových částic. Použitím takto získaného; sé.ra se dosáhne vyvolání vyššího· stupně imunity, než jaký je dosud popsán v literatuře.
Příklad 2
Ochranný účinek vyvolaný inaktivovanými myxomatózovými vakcínami
Ve veterinárním lékařství se k vyvolání imunity vůči virům myxomatózy s úspěchem používá pouze takové očkovací látky, která byla připravena z živých virů. Při prokázání výše uvedeného; účinku se skupina zajíců očkuje inaktivovanoou myxomatózovou vakcínou, přičemž koncentrace virových tělísek činí 108 virových tělísek na 1 mililitr injekčního roztoku. Králíci byli očkováni vždy 1 . ml uvedené vakcíny, ke které byla přidána jedna částicová jednotka (viz varianta b] způsobu podle vynálezu částic nosičového systému podle vynálezu. Z kontroly infekce, která byla provedena třicátý den po očkování, vyplývá, že takto připravená a použitá vakcína poskytuje dokonalou ochranu i proti 100 infekčním dávkám živých virů.
V případě, že se použije částic nosičovéЬю systému, připravených podle varianty a) způsobu podle vynálezu, potom získaná vakcína poskytuje za jinak stejných očkovacích podmínek ochranu proti 10 infekčním dávkám.
P říkla.d 3
Imunita proti treponematóze
Z rozrušených buněk mikroorganismů kmene Treponema pallidum Budapest (107 /ml.) byl pomocí ultrazvuku získán antigen. Takto získaný antigen byl vázán na lyolifilizované. .částice nosičového systému podle vynálezu, přičemž bylo· použito na dvě lyofilizované částicové jednotky částic nosičového systému podle vynálezu 1 ml antigenu. Získanou očkovací látkou byla potom očkována pokusná zvířata- každý týden celkem šestkrát, přičemž bylo použito 1 ml antigenu a intramuskulární, intravenózní a subkutánní injikace. U očkovaných zvířat bylo tímto způsobem dosaženo vyššího stupně imunity, než jaký byl dosud popsán v literatuře.
Příklad 4
Vyvolání imunity proti tetanu
a) Na jednu částicovou jednotku (viz varianta b) způsobu podle ' vynálezu) částic nosičového systému podle vynálezu se naváže jednotkové množství tetanového toxoidu a takto získaná kompozice se potom zlyoiilizuje. Před vlastním použitím se lyofilizovaný produkt opětovně suspenduje ve fyziologickém roztoku chloridu sodného, přičemž objem použitého- fyziologického roztoku kuchyňské soli odpovídá objemu kompozice před ziyo'filizováním. Účinnost získaného séra byla stanovena pokusy s morčaty, popsanými v americké, britské a maďarské lékařské literatuře (United States Pharmacopeae, British Pharmacopeae, Ph.armacopea Hungaricae).
Ze získaných výsledků vyplývá, že takto· připravené sérum za použití částic nosičového systému podle vynálezu vyvolává vyšší stupeň specifické imunity proti tetanu, než jaký byl dosud popsán v literatuře. Byl rovněž zkoumán imunologický účinek . sér, připravených použitím částic nosičového· systému podle vynálezu, připravených podle variant a) a c) způsobu podle vynálezu, přičemž bylo zjištěno, že i v· těchto- případech se dosahuje stojných výsledků jako při použití částic, připravených podle varianty b) způsobu podle vynálezu.
b) K jedné částicové jednotce (varianta b způsobu podle vynálezu) částic nosičového· systému podle vynálezu se přidají rozličná množství tetanového toxoidu a takto získané materiály se zlyofilizují. Po- lyofilizaci se lyofilizované materiály opětovně suspendují ve fyziologickém roztoku chloridu sodného, přičemž objem fyziologického roztoku chloridu sodného odpovídá objemu suspenze částic s vázaným tetanovým toxoidem před lyofilizací. Účinnost získaných sér se potom stanoví pokusy s morčaty stejným způsobem, jaký byl popsán v předcházejícím příkladu 3, přičemž bylozjištěno, že byl vyvolán vyšší stupeň imunity, než jaký byl dosud popsán, a že vyvolaná protilátková odezva organismu je úměrná použité antigenové dávce.
c) K rozličným množstvím částic (varianta b) způsobu podle vynálezu) nosičového systému, podle vynálezu se přidá vždy stejné množství tetanového toxoidu. Po zlyofilizování se lyofilizovaný materiál opětovně resuspenduje ve fyziologickém roztoku chloridu sodného, přičemž tento objem fyziologického· roztoku odpovídá objemu suspenze částic s vázaným-· -tetanovým toxoidem před lyofilizací. Účinnost takto získaných sér byla stanovena způsobem, popsaným ve výše uvedeném příkladu 3, přičemž bylo zajištěno, že protilátková odezva organismu na injikovaný antigen v každém případě převyšuje dosud popsané odezvy.
Příklad 5
Vyvolání imunity kombinovaným bakteriálním antigenem
Na jednu částicovou jednotku (varianta bj způsobu podle vynálezu] částic nosičovéh-o- systému podle vynálezu ' se naváže kombinace difteriálního a bakteriálního antigenu. Po zlyofilizování této suspenze- se lyofilizovaný produkt opětovně suspenduje ve fyziologickém· roztoku chloridu sodného, přičemž objem tohoto fyziologického roztoku -odpovídá- objemu uvedené suspenze před lyofilizací. Účinnost takto získaného antigenového přípravku se potom stanoví způsobem, popsaným ve výše uvedeném příkladu 3. Stanovení se provádí s morčaty, přičemž získaný stupeň imunity přesahuje stupeň imunity, který byl dosud popsán v lékařské literatuře.
Příklad 6
Příprava anti-HCG-séra
Pro výrobu antihormonů se provádí pokusy s lidským- choriogonadotropinem (HCG). V současné době je obecně známá nedostatečná stimulace uvedené látky použitím olejového Freundova adjuvans.
Za použití stimulace podle vynálezu se 3 000 jednotek/mg lidského- choriogonadotropinu naváže na jednu částicovou jednotku (varianta b způsobu podle vynálezu).
Takto získanou očkovací látkou se očkuje skupina NZW-králí.ků s průměrnou tělesnou hmotností 2,5 kg každé dva týdny, a to subkutánně. Stupeň vyvolání tvorby protilátek se stanoví po sedmé injekci, přičemž bylo- zjištěno, že vyvolaná imunita je vyšší než u- kontrolní skupiny.
Očkování kontrolní skupiny králíků bylo provedeno za použití stejného* množství lidského -choriogonadotropinu, který však byl stimulován použitím Freundova adjuvans. Zatím-co u této· -kontrolní -skupiny byly pozorovány nežádoucí vedlejší účinky, nebyly tyto vedlejší účinky pozorovány u skupiny králíků, očkovaných za použití částic nosičového systému podle vynálezu. Po uplynutí výše uvedené -očkovací periody byli pokusní králíci usmrceni, přičemž při mikroskopickém a histologickém vyšetření nebyly -u těchto- králíků shledány žádné pathologické změny ledvin, jater a plic.
Příklad - 7
Příprava antihistaminového séra
2,7 mg detoxikovaného histaminu (p-aminobenzoazohystamin) se naváže na dvě částicové jednotky lyofilizovaných částic -nosičového systému podle vynálezu- (varianta b) způsobu podle vynálezu a takto získaným sérem se -očkuje skupina králíků každý druhý den. Po 20. injekci lze pozorovat vysokou odezvu -organismu při tvorbě protilátek proti histaminu.
Příklad 8
Příprava gama-globulinového činidla, ve kterém je gama-globulin vázán na částice látky rozpustné v lipoidech
Podle varianty a) způsobu podle vynálezu se smísí 2,5 ml 0,25% gama-globulinového roztoku -v pufru s hodnotou pH 6 a roztok látky rozpustné v lipoidech v absolutním - alkoholu, který obsahuje 0,01 až 0,6 - % vaječného lecitinu a 0,1 až 2 - % cholesterolu. Získaná sedlina se suspenduje v 5 1 fyziologického' elektrolytického roztoku (obvyklého pro zřeďování krevního séra), promísí se a zpracuje ultrazvukem.
Příklad 9
Použití gama-globulinového činidla, připraveného- způsobem podle vynálezu, ke kvantitativnímu stanovení revmatoidní arthritidy
Při onemocnění revmatoidní arthritidou jsou v organismu přítomny imunokomplexy, které reagují s normálním lidským imunoglobulinem. Na této skutečnosti je založeno- stanovení uvedených- specifických imunokomplexů a rozpoznání a identifikace tohoto- typu onemocnění. Stanovení uvedených specifických imunokomplexů se může provést rozličnými reakcemi, jako* například reakcí za použití latexových částic nebo citlivou Waaler-Rosovou reakcí.
Latexový nosičový systém byl již popsán v předcházejícím- textu.
Waaler-Rosova reakce je pasivní hemaglutinační metodou, k jejímuž provedení je zapotřebí hodně času.
Krevní sérum vyšetřovaného1 člověka -se při těmito stanovení zahřívá na teplotu 56 stupňů Celsia po dobu 30 minut -a potom se skladuje až doi okamžiku provedení vlastního- testu při teplotě- 4 °C.
Pracuje se pokud možno s čerstvým -krevním sérem, jehož stáří by nemělo přesáhnout dobu jednoho- týdne.
Na podložní sklíčko, které se obvykle používá pro aglutinační reakce bakterií, se nakapou kapky (0,5 ml) zkoumaného krevního séra zředěného - fyziologickým roztokem chloridu -sodného v rozličných koncentracích. K těmto zředěným krevním sérům se potom přidá po- 0,01 ml gamaglobulinového- činidla, připraveného- způsobem podle vynálezu. Od okamžiku přidání činidla- ke krevnímu séru se měří průběh aglutinační reakce. Činidlo se- přikape ke krevnímu séru v době pokud možno, co -nejkratší. Pohybováním podložního sklíčka a mícháním skleněnou - tyčinkou se obě složky promísí. Vyhodnocení aglutinační reakce se děje- za použití lupy pozorováním· okem. 'Stupeň aglutinace se hodnotí klasifikační stupnicí
4 1 4 7 8 od 0 do ++O znamená, že během 5 minut nedošlo к aglutinaci. Pozitivní aglutinační reakce se označuje křížky a je tím výraznější, čím větším počtem křížků je označena. Označení ++++ znamená, že vznikly veliké agregáty, okolo kterých je čistá tekutina. Jakožto kontrolní vzorek slouží kapka fyziologického roztoku chloridu sodného, použitého při stanovení ke zředění krevního séra, ke kterému se přidá 0,01 ml výše uvedeného gama-globulinového činidla. V tomto případě nedošlo během zkušebního času 5 minut к žádné aglutinaci.
Tvorba makroagregátů může být také pozorována mikroskopem. V tomto případě se reakce provádí přímo na podložním sklíčku mikroskopu. Pozorování se provádí za použití 40 x zvětšujícího objektivu a 7x zvětšujícího okuláru.
V případě, že při stanovení jde pouze oto určit, zda uvedená reakce je pozitivní nebo negativní, potom se toto stanovení provádí s nezředěným krevním sérem. Tato· reakce se provede výše popsaným způsobem a je pozitivní, jestliže к aglutinaci dojde během jedné minuty, nebo negativní, jestliže к aglutinaci během tohoto času nedojde.
Z výsledků uvedených v následující tabulce 1 zřejmé, že prostředek podle vynálezu je vhodný к provádění rychlých sériových vyšetření.
Tabulka 1
Titr činidla (GLT) připraveného z částic rozpustných v lipoidech a gama-globulinu vázaného na tyto částice.
Zředění krevního Titr Waaler-Rosovy reakce (WRT)
séra 0 32 64 128 256 512 1024
Koncentrované + ++++ ++++ + +++ ++++ ++++ ++++
2 +;++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++
4 :+ ++ +++ ++++ ++++ ++++
8 ± +i ++ +++ Ί—НН—H +'+'++
16 + + +++ 4—H+ +'+++
32 ± ++ +++ +++
64 + + ++’+
128 + +
pRedmEt vynalezu

Claims (4)

  1. pRedmEt vynalezu
    1. Částice nosičového systému na bázi látek rozpustných v lipoidech к navázání biologicky aktivních látek, vyznačující se tím, že jsou tvořeny fosfolipidy, s výhodou vaječným lecitinem nebo cholesterolem, a popřípadě povrchově aktivní látkou.
  2. 2. Způsob výroby částic podle bodu 1, vyznačující se tím;, že se roztok částicetvorné fosfolipidní látky v rozpouštědle, výhodně v alkoholu, který přídavně obsahuje povrchově aktivní látku, smísí s vodou nebo vodným roztokem elektrolytu s hodnotou pH v rozmezí 2 až 10 při objemovém poměru alkoholické a vodné fáze 0,1 až 900 : 100, načež se vyloučené částice oddělí a popřípadě suspendují ve vodě nebo ve vodném roztoku elektrolytu s hodnotou pH 2 až 10 a vzniklá suspenze se lyofilizuje.
  3. 3. Způsob podle bodu 2, vyznačující se tím, že se jako částicetvorn-á látka použije vaječný lecitin, nebo cholesterol.
  4. 4. Způsob podle bodů 2 nebo 3, vyznačující se tím, že se částice oddělí odstředěním.
CS809246A 1979-12-27 1980-12-23 Carrier system's particles and method of their production CS241478B2 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU79HU299A HU184141B (en) 1979-12-27 1979-12-27 Adjuvant particles compositions containing said particles and biologically active substances adsorbed thereon and a process for the preparation thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS924680A2 CS924680A2 (en) 1985-07-16
CS241478B2 true CS241478B2 (en) 1986-03-13

Family

ID=10997378

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS809246A CS241478B2 (en) 1979-12-27 1980-12-23 Carrier system's particles and method of their production

Country Status (21)

Country Link
US (1) US4396630A (cs)
JP (1) JPS57112334A (cs)
BE (1) BE886884A (cs)
CA (1) CA1165237A (cs)
CH (1) CH655246A5 (cs)
CS (1) CS241478B2 (cs)
DD (1) DD158738A5 (cs)
DE (1) DE3048815A1 (cs)
DK (1) DK160288C (cs)
ES (1) ES8201316A1 (cs)
FR (1) FR2472386B1 (cs)
GB (1) GB2066203B (cs)
HU (1) HU184141B (cs)
IT (1) IT1150073B (cs)
NL (1) NL8007041A (cs)
PL (1) PL228755A1 (cs)
PT (1) PT72261B (cs)
RO (1) RO81371A (cs)
SE (1) SE453537B (cs)
SU (1) SU1487802A3 (cs)
YU (1) YU44413B (cs)

Families Citing this family (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4598051A (en) * 1980-03-12 1986-07-01 The Regents Of The University Of California Liposome conjugates and diagnostic methods therewith
US4806466A (en) * 1981-10-29 1989-02-21 The Regents Of The University Of California Cell agglutination reagent comprising conjugates of antibody covalently bound to liposomes
FR2521565B1 (fr) * 1982-02-17 1985-07-05 Dior Sa Parfums Christian Melange pulverulent de constituants lipidiques et de constituants hydrophobes, procede pour le preparer, phases lamellaires lipidiques hydratees et procede de fabrication, compositions pharmaceutiques ou cosmetiques comportant des phases lamellaires lipidiques hydratees
DD247570A3 (de) * 1983-01-14 1987-07-15 Univ Berlin Humboldt Vesikulaeres trenn-, fuell- und traegermaterial
US4515736A (en) * 1983-05-12 1985-05-07 The Regents Of The University Of California Method for encapsulating materials into liposomes
US5059591B1 (en) * 1983-05-26 2000-04-25 Liposome Co Inc Drug preparations of reduced toxicity
US4708861A (en) * 1984-02-15 1987-11-24 The Liposome Company, Inc. Liposome-gel compositions
US5916588A (en) * 1984-04-12 1999-06-29 The Liposome Company, Inc. Peptide-containing liposomes, immunogenic liposomes and methods of preparation and use
US6090406A (en) * 1984-04-12 2000-07-18 The Liposome Company, Inc. Potentiation of immune responses with liposomal adjuvants
GB2160312B (en) * 1984-04-13 1987-09-16 South African Inventions Adjuvant for immunisation
PT78628B (en) * 1984-05-02 1986-06-18 Liposome Co Inc Pharmaceutical composition with reduced toxicity
US4619904A (en) * 1984-10-29 1986-10-28 General Electric Company Agglutinating immunoassay using protein-coated liquid droplets
US4857319A (en) * 1985-01-11 1989-08-15 The Regents Of The University Of California Method for preserving liposomes
US5266329A (en) * 1985-10-31 1993-11-30 Kv Pharmaceutical Company Vaginal delivery system
ATE68686T1 (de) * 1985-10-31 1991-11-15 Kv Pharm Co System zum freigeben von stoffen in der vagina.
US4790987A (en) * 1985-11-15 1988-12-13 Research Corporation Viral glycoprotein subunit vaccine
CA1338736C (fr) * 1986-12-05 1996-11-26 Roger Baurain Microcristaux comportant une substance active presentant une affinite pour les phospholipides, et au moins un phospholipide, procede de preparation
US4748024A (en) * 1987-04-06 1988-05-31 Endocon, Inc. Flash flow fused medicinal implants
US5688519A (en) * 1987-04-06 1997-11-18 Leonard; Robert J. Flash-flow fused medicinal implants
WO1990001947A1 (en) * 1988-08-25 1990-03-08 The Liposome Company, Inc. Affinity associated vaccine
DE3852950T2 (de) * 1988-12-22 1995-06-14 Baxter Diagnostics Inc Lipohaptene und Verwendung trägergebundener Lipohaptene im Immuntest.
US5100662A (en) * 1989-08-23 1992-03-31 The Liposome Company, Inc. Steroidal liposomes exhibiting enhanced stability
JPH07113641B2 (ja) * 1989-11-17 1995-12-06 積水化学工業株式会社 梅毒診断試薬の製造方法
NL9000207A (cs) * 1990-01-29 1991-08-16 Duphar Int Res
HU220136B (hu) * 1990-06-29 2001-11-28 Chiron Corp. Eljárás liposzómákat tartalmazó vakcinakészítmény előállítására
US5709879A (en) * 1990-06-29 1998-01-20 Chiron Corporation Vaccine compositions containing liposomes
IE912535A1 (en) * 1990-07-27 1992-01-29 Res Dev Foundation Liposomes that Provide Thymic Dependent Help to Weak Vaccine¹Antigens
WO1992004887A1 (en) * 1990-09-25 1992-04-02 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Induction of cytotoxic t cell
US6048531A (en) * 1991-04-15 2000-04-11 Albany Medical College Immunogenic composites capable of stimulating production of anti-peptide antibodies, pharmaceutical compositions employing these composites and methods of selectively inducing production of anti-peptide antibodies
US5336507A (en) * 1992-12-11 1994-08-09 Sterling Winthrop Inc. Use of charged phospholipids to reduce nanoparticle aggregation
GB9320668D0 (en) 1993-10-07 1993-11-24 Secr Defence Liposomes containing particulare materials
AUPM500494A0 (en) * 1994-04-12 1994-05-05 Minister For Agriculture & Rural Affairs For The State Of New South Wales, The Composition for use in increasing mucosal immunity
CZ20031515A3 (cs) * 2000-11-09 2003-09-17 Neopharm, Inc. Komplexy SN-38 s lipidem a způsob jejich použití
WO2003030864A1 (en) * 2001-05-29 2003-04-17 Neopharm, Inc. Liposomal formulation of irinotecan
WO2003075889A1 (en) * 2002-03-05 2003-09-18 Transave, Inc. An inhalation system for prevention and treatment of intracellular infections
WO2004035032A2 (en) * 2002-08-20 2004-04-29 Neopharm, Inc. Pharmaceutical formulations of camptothecine derivatives
US20060030578A1 (en) * 2002-08-20 2006-02-09 Neopharm, Inc. Pharmaceutically active lipid based formulation of irinotecan
DK1581236T3 (da) * 2002-10-29 2013-12-02 Insmed Inc Opretholdt afgivelse af antiinfektionsmidler
US7879351B2 (en) * 2002-10-29 2011-02-01 Transave, Inc. High delivery rates for lipid based drug formulations, and methods of treatment thereof
US7718189B2 (en) 2002-10-29 2010-05-18 Transave, Inc. Sustained release of antiinfectives
KR100651728B1 (ko) * 2004-11-10 2006-12-06 한국전자통신연구원 정착기를 갖는 전자 소자용 화합물 및 이를 포함하는 전자소자와 이들의 제조 방법
JP5114628B2 (ja) * 2005-02-25 2013-01-09 国立大学法人三重大学 リポソームワクチンの作製法
DK1962805T3 (en) 2005-12-08 2016-09-26 Insmed Inc Lipid-based compositions of the anti-infective agents for the treatment of lung infections
US20100196455A1 (en) 2007-05-04 2010-08-05 Transave, Inc. Compositions of Multicationic Drugs for Reducing Interactions with Polyanionic Biomolecules and Methods of Use Thereof
US9119783B2 (en) 2007-05-07 2015-09-01 Insmed Incorporated Method of treating pulmonary disorders with liposomal amikacin formulations
US9114081B2 (en) 2007-05-07 2015-08-25 Insmed Incorporated Methods of treating pulmonary disorders with liposomal amikacin formulations
US9333214B2 (en) 2007-05-07 2016-05-10 Insmed Incorporated Method for treating pulmonary disorders with liposomal amikacin formulations
PT2852391T (pt) 2012-05-21 2022-02-18 Insmed Inc Sistemas para tratamento de infeções pulmonares
CA2891487A1 (en) 2012-11-29 2014-06-05 Insmed Incorporated Stabilized vancomycin formulations
EP4122470B1 (en) 2014-05-15 2024-03-20 Insmed Incorporated Methods for treating pulmonary non-tuberculous mycobacterial infections
EP3773505A4 (en) 2018-03-30 2021-12-22 Insmed Incorporated PROCESSES FOR THE CONTINUOUS MANUFACTURE OF LIPOSOMAL DRUG PRODUCTS

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3265629A (en) * 1958-12-22 1966-08-09 Ncr Co Coating by phase separation
DE2249552A1 (de) * 1971-10-12 1973-05-30 Inchema S A Verfahren zur inkapsulation von insbesondere wasserloeslichen verbindungen
GB1502774A (en) * 1974-06-25 1978-03-01 Nat Res Dev Immunological preparations
JPS5126213A (ja) * 1974-08-21 1976-03-04 Tanabe Seiyaku Co Johoseibiryushiseizaino seiho
GB1564500A (en) * 1975-09-29 1980-04-10 Wellcome Found Biological preparations
GB1523965A (en) * 1976-03-19 1978-09-06 Ici Ltd Pharmaceutical compositions containing steroids
GB1575343A (en) * 1977-05-10 1980-09-17 Ici Ltd Method for preparing liposome compositions containing biologically active compounds
IT1110989B (it) * 1979-01-19 1986-01-13 Erba Farmitalia Forme farmaceutiche costitutite da liposomi e procedimenti relativi
FR2416008A1 (fr) * 1978-02-02 1979-08-31 Oreal Lyophilisats de liposomes
US4235871A (en) * 1978-02-24 1980-11-25 Papahadjopoulos Demetrios P Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles
JPS55118415A (en) * 1979-02-28 1980-09-11 Pii Papahadojiyopo Dometoriosu Method of encapsulating biologically active substance in lipoid cell

Also Published As

Publication number Publication date
SU1487802A3 (ru) 1989-06-15
FR2472386A1 (cs) 1981-07-03
ES498048A0 (es) 1981-12-16
DK552280A (da) 1981-06-28
CH655246A5 (de) 1986-04-15
PT72261B (en) 1981-11-05
PT72261A (en) 1981-01-01
YU329080A (en) 1984-04-30
RO81371A (ro) 1984-04-02
CA1165237A (en) 1984-04-10
FR2472386B1 (cs) 1985-08-23
NL8007041A (nl) 1981-07-16
HU184141B (en) 1984-07-30
JPS57112334A (en) 1982-07-13
DD158738A5 (de) 1983-02-02
IT1150073B (it) 1986-12-10
DK160288C (da) 1991-08-05
GB2066203A (en) 1981-07-08
IT8026950A0 (it) 1980-12-24
BE886884A (fr) 1981-06-29
ES8201316A1 (es) 1981-12-16
GB2066203B (en) 1984-01-11
DK160288B (da) 1991-02-25
US4396630A (en) 1983-08-02
CS924680A2 (en) 1985-07-16
SE8009068L (sv) 1981-06-28
RO81371B (ro) 1983-11-02
YU44413B (en) 1990-08-31
JPH0314814B2 (cs) 1991-02-27
SE453537B (sv) 1988-02-08
DE3048815A1 (de) 1981-09-10
PL228755A1 (cs) 1982-02-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CS241478B2 (en) Carrier system's particles and method of their production
US5420253A (en) Method for purifying egg yolk immunoglobulins
EP0238657B1 (en) Antiviral immunotherapeutic agent and preparation thereof
CA1337047C (en) Gamma inulin compositions
US4845042A (en) Adjuvant for immunization
Sharp et al. Isolation and characterization of influenza virus B (Lee strain)
US4994496A (en) Use of milk globules as carriers for drugs
CN108948185B (zh) 蒜氨酸抗原及其免疫应答获得的家兔蒜氨酸抗体
Sumner et al. Nucleic acid studies in experimental cardiomegaly
CN101862456A (zh) 治疗药
US3470294A (en) Vaccine for immunization of dogs and foxes against distemper,hepatitis contagiosa and leptospirosis and process for preparing it
EP0306971A2 (en) Use of milk fat globules as carriers for drugs and as microflotation devices in immunoassays and cell/molecular fractionation
Kossovsky et al. Preservation of surface‐dependent properties of viral antigens following immobilization on particulate ceramic delivery vehicles
CN116271003A (zh) 一种基于脂质体的疫苗免疫佐剂组合物及其应用
Arstila et al. Hemagglutinin of vesicular stomatitis virus
US3098011A (en) Process of producing a vaccine against distemper
CA2171317C (en) Method for purifying egg yolk immunoglobulins
Mannick Inhibition by RNA of the transfer reaction following homograft sensitization
US7528240B2 (en) Method for producing human anti-thymocyte immunoglobulins
Nakajima et al. Preparation of equine infectious anemia virus antigen for immunodiffusion test
YUNIS et al. Cell antigens and cell specialization. III. On the H antigen receptors of human epidermal cells
CN120305400A (zh) 他米巴罗汀和Toll样受体激动剂在制备疫苗佐剂中的应用
JP3359411B2 (ja) 抗リン脂質抗体測定用試薬の製造方法
RU2062111C1 (ru) Способ получения диагностикума эритроцитарного сыпнотифозного антигенного сухого
Paradise A Study of the Antigenic Components of Gardner Lymphoblastoma 6c3hed