CS239242B1 - Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-760 - Google Patents
Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-760 Download PDFInfo
- Publication number
- CS239242B1 CS239242B1 CS844359A CS435984A CS239242B1 CS 239242 B1 CS239242 B1 CS 239242B1 CS 844359 A CS844359 A CS 844359A CS 435984 A CS435984 A CS 435984A CS 239242 B1 CS239242 B1 CS 239242B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- strain
- penicillin
- penicillium chrysogenum
- fermentation
- mikroorganism
- Prior art date
Links
- 241000228150 Penicillium chrysogenum Species 0.000 title abstract description 6
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract 2
- 229930195708 Penicillin V Natural products 0.000 claims description 2
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 claims description 2
- 229940056367 penicillin v Drugs 0.000 claims description 2
- BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N phenoxymethylpenicillin Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)COC1=CC=CC=C1 BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N 0.000 claims description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 abstract description 15
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 abstract description 15
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 abstract description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 13
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 abstract description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 abstract description 2
- 150000002960 penicillins Chemical class 0.000 abstract 1
- ZRKWMRDKSOPRRS-UHFFFAOYSA-N N-Methyl-N-nitrosourea Chemical compound O=NN(C)C(N)=O ZRKWMRDKSOPRRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 4
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 4
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 4
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 4
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 3
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 101001126435 Arabidopsis thaliana Pyrophosphate-fructose 6-phosphate 1-phosphotransferase subunit alpha 1 Proteins 0.000 description 2
- 101000999896 Arabidopsis thaliana Pyrophosphate-fructose 6-phosphate 1-phosphotransferase subunit beta 1 Proteins 0.000 description 2
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 101100351256 Caenorhabditis elegans ccm-3 gene Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010028400 Mutagenic effect Diseases 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000243 mutagenic effect Toxicity 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 238000005527 soil sampling Methods 0.000 description 1
- 230000028070 sporulation Effects 0.000 description 1
- 239000007362 sporulation medium Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum
CCM F-760, produkující penicilín
G a V. Tento kmen umožňuje zvýšenou produkci
penicilinů při submersní fermentaci,
je odolný vůči mechanickému namáhání, rychle
roste na tuhých i kapalných mediích
a ja vysoce stabilní v následných sporových
generacích.
Description
Vynález se týká kmene mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM produkujícíh® penicilín G a V.
Přesto, že výroba penicilinu probíhá ve výrobních fermentačních tancích více než 30 let, dochází k neustálému zvyšování objemu vyrobeného penicilinu. Celkové zvýšení výroby může být dosaženo buď zvětšováním výrobní kapacity, nebo zvýšením výtěžku penicilinu při jeho výrobě. V současné době je druhý způsob jedinou možnou cestou zvýšení výtěžku, kde hlavním přínosem je zlepšení produkčních vlastností kmene. Tyto kmeny jsou získávány řadou zavedených postupů v dlouhodobých šlechtitelských programech. Výsledné kmeny vykazují pak řadu významných odlišných vlastností, z nichž nej důležitější jsou ty vlastnosti, které se projevují ve zvýšené produkci penicilinu ve velko objemových fermentorech.
Kmen Pěnic i llium chrysogenum CCM 3?- Wo.
byl získán působením mutagenů a opakovanými.
pasivními selekcemi na výchozí kmen N 9541· Způsob šlechtění kmenů je znázorněn na následujícím schématu, kde je uvedena genealogická linie vedoucí ke kmeni, na nějž je uplatňován patentový nárok.
Penicillium chrysogenum N 9541 ψ PS
9541-16 ý UV 1
UV 1/47 f PFP 1
PFP 1/17
I
- 2 ψ ps
ΡΡΡ 1/17-30 | NMU 1
NMU 1/27 | NMU 2
NMU 2/40 239 242
Zkratky: PS - pasivní selekce - selekce bez působení mutagenu UV - působení UV- záření
PPP - působení parafluorofenylalaninu NMU - působení nitrosometylmočoviny.
Poslední mutagenní působení bylo na kmen interního označení NMU 1/27. Použitý mutagen NMU byl aplikován v koncentraci 6 mg/ ml směsi pufrované c-itr^tf osfátovým pufrem. Během působení byla mutagenní směs míchána na elektromagnetickém míchadle při 25eC, V časových intervalech byly odebírány vzorky a ředěny až ha neúčinnou koncentraci.
Spory pro pasivní selekci byly suspendovány v destilované vodě, ředěny ředící řadou s faktorem 10 a očkovány na Petriho misky se sporulační půdou. Po. 14denní inkubaci při teplotě 2í/*C byly izoláty vysporulovány a bylo možné je přeočkovat na šikmé agary. Inkubace tohoto základního sporulacního materiálu probíhala při téže teplotě 9 dnů.
Výše uvedeným způsobem aplikace mutagenů a pasivních selekcí byl získán izolát NMU 2/40. Izoláty byly hodnocenypdle následujícího schématu:
šikmý agar
Ý vegetativní inokulum ý vlastni fermentace
Izoláty byly hodnoceny ve 2 pokusech před lyofilizací a ve 3 pokusech po lyofilizací· Lyěfilizované konzervy slouží k dlouhodobému uchovávání sporováho materiálu a umožňují zachování vhodných růstových a produkčních vlastností kmene.
Stanovení účinnosti penicilinu bylo prováděno automatizovaným systémem při použití hydroxamátové kolorimetrické metody.
239 242
Kmen tvoří při monosporickém rozsevu na sporulační půdě typu glycerin-melasa kolonie velikosti 20-22 mm se zvýšeným střed,ním válem o průměru 5 <rfí 6 mm během 7 áž 10 dnů kultivace při 25 Směrem od válu k okraji kolonie se vytvářejí nepravidelné radiální vrásy. Na minimální půdě typu Czapek-Dox se vytvářejí kolonie o velikosti až 25 mm, kde střední část tvořená válem je průměru 3 až 5 mm. Na okraji kolonie i na této půdě se vytvářejí radiální vrásy, které nejsou tak zřetelné jako na 3porulační půdě typu glycerin-melasa. Barva vysporulované kolonie je na sporulační půdě béžová, starší kolonie začínají tmavnout, na minimální půdě Czapek-Dox jsou kolonie bílé a při stárnutí se směrem do středu projevuje odstín béžové. Kmen patří mezi kmeny rychle rostoucí při všech používaných teplotách pro kmeny druhu Penicillium chrysogenum, a to jak na tuhých, tak v kapalných médiích.
Předností kmene je vysoká stabilita v následných sporových generacích. Tento kmen bez jakéhokoliv výrazného produkčního po» klesu snáší přeočkování až do 4.generace.
Kmen je tolerantní ke zvýšeným koncentracím penicilinu přidá ného do média na počátku fermentace.
Vhodnou vlastností kmene je zlepšená konteerze hlavního zdroje uhlíku - sacharózy na penicilín.
Další významnou vlastností kmene je jeho tolerance k mechanickéůu namáhání, kterému je kultura podrobena během míchání ve fermentační nádobě. Při vysokém mechanickém namáhání dochází u tohoto kmene k minimálnímu poškození vláken mycelia. Tato výhoda je uplatněna speciálně při velkoobjemových fermeníacích. Hlavní a nej významnější vlastností kmene Penicillium chrysogenum CCM P- je zvýšená produkce penicilinu při submersní fermentaci.
Příklad 1 v
Fermentace v bankách na rotačních třepačkách.
Vegetativní inokulum bylo připravováno submersně v 500 ml varných bankách se 40 ml inokulační půdy (zdroj uhlíku sacharoza, dusíku kukuřičný výluh, síran amonný a anorganické sole). Půda pro přípravu vegetativního inokula byla zaočkována kličkou spor ze šikmého agaru a inkubována na rotačním třepacím stroji 30 až 40 hodí n.
- 4 239 242
Takto připraveným vegetativním inokulem byly očkovány fermentační baňky obsahu 500 mlj objem fermentační půdy 40 ml (zdroj uhlíku laktoza a glukóza, zdroj dusíku kukuřičný výluh, sojóvá mouka a amonná sůl, prekurzor postranního řetězce, anorganické sole, uhličitan vápenatý a zdroj síry)· Permentače probíhaly 9 dnů, maximální produkce bylo zpravidla dosahováno v 8.dnu kultivace· Produkce penicilinu za výše uvedených podmínék dosahovala 25 000 j./ml.
Příklad 2
Permentače v poloprovozních fermentorech·
Permentače v poloprovozních fermentorech objemu 250 1 byla třístupňová· Předočkovací půda obsahovala jako zdroj uhlíku sacharózu, zdrojem dusíku byly kukuřičný výluh, bavlníková mouka a anorganický zdroj, dalšími složkami půdy byly rozpustné sole a uhličitan vápenatý· Očkovací půda mela stejné složení. Permentační půda obsahovala sacharózu, kukuřičný výluh, bavlníkovou ůouku, prekurzor postranního řetězce a další sole·
Permentační tank byl plněn 150 1 půdy a inokulován 10 % objemovými z očkovacího fermentoru',' fermentační teplota 25°C, míchání 300 až 320 ot./min., vzdušnění 150 až 180 1 /min.,'doba fermentace 200'hodin. Průběh fermentace byl řízen dávkováním zdrojů uhlíku, dusíku, fosforu a prekurzoru.
Zvětšující se objem fermentační půdy a růst kultury byly kompenzovány a udržovány pomocí odběrů půdy a příslušným ředěním.
Takto řízenou fermentací bylo ve fermentoru dosaženo ve 174.hodině hladipy penicilinu 38 OOO j./ml, ekonomický koeficient dosáhl hodnoty 0,140 mia/m?.hód. a bylo dosaženo velmi příznivých parametrů konverze sacharózy na penicilin (5,8 kg/kg).
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU239 242Kmen mikroorganismu. Pěni cil lium chrysogenum CCM P— Ho produkující penicilín V a G·
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS844359A CS239242B1 (cs) | 1984-06-08 | 1984-06-08 | Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-760 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS844359A CS239242B1 (cs) | 1984-06-08 | 1984-06-08 | Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-760 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS435984A1 CS435984A1 (en) | 1985-05-15 |
| CS239242B1 true CS239242B1 (cs) | 1986-01-16 |
Family
ID=5386140
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS844359A CS239242B1 (cs) | 1984-06-08 | 1984-06-08 | Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-760 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS239242B1 (cs) |
-
1984
- 1984-06-08 CS CS844359A patent/CS239242B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS435984A1 (en) | 1985-05-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Khokhlov et al. | Effect of A‐factor on the growth of asporogenous mutants of Streptomyces griseus, not producing this factor | |
| US20090145023A1 (en) | Artificial cultivating method of fruiting body of antrodia camphorata | |
| US4245049A (en) | Preparation of 2-keto-L-gulonic acid | |
| EP1070136A1 (en) | Strain of the microorganism penicillium oxalicum var. armeniaca and its application | |
| CS239242B1 (cs) | Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-760 | |
| US4514501A (en) | Method for cultivation of microorganism | |
| US6716617B1 (en) | Fermentation method with continuous mass cultivation of ciliates (protozoa) for producing biogenous valuable substances | |
| SU1731809A1 (ru) | Способ получени кормовой биомассы фототрофных бактерий | |
| US3005757A (en) | Preparation of chlorogenicase | |
| SU1440914A1 (ru) | Питательна среда дл выращивани мицели дереворазрушающих грибов в глубинной культуре | |
| AU634148B2 (en) | Use of cellulase preparations in the cultivation and use of cellulose-producing microorganisms | |
| SU562205A3 (ru) | Способ получени алкалоидов спорыньи | |
| Willershausen et al. | Production of ligninases in stirred tank fermentors | |
| SU287650A1 (ru) | Патентно-техн^^нескаябиблиотека | |
| SU1423550A1 (ru) | Штамм актиномицета FRаNкIа Sp.дл получени препарата,стимулирующего рост облепихи | |
| CS235447B1 (cs) | Kmen mikroorganismu Peniciliium chrysogenum CCM F-747 | |
| SU411753A1 (ru) | Способ получени фузидина | |
| KR930008970B1 (ko) | 반코마이신을 생산하는 미생물 | |
| SU410082A1 (cs) | ||
| SU1713929A1 (ru) | Способ получени L-аспарагиназы | |
| SU179427A1 (ru) | СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА р-КАРОТИНА | |
| SU1495370A1 (ru) | Способ получени культуры проте в О-форме | |
| RU1837071C (ru) | Способ культивировани бактерий вида BacILLUS аNтнRасIS | |
| KR810001113B1 (ko) | 담자균류의 증식방법 | |
| CS220217B1 (cs) | Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM F-713 |