CS227700B2 - Production of narasine antibiotic - Google Patents
Production of narasine antibiotic Download PDFInfo
- Publication number
- CS227700B2 CS227700B2 CS823250A CS325082A CS227700B2 CS 227700 B2 CS227700 B2 CS 227700B2 CS 823250 A CS823250 A CS 823250A CS 325082 A CS325082 A CS 325082A CS 227700 B2 CS227700 B2 CS 227700B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- culture
- narasin
- agar
- atcc
- streptomyces
- Prior art date
Links
- VHKXXVVRRDYCIK-CWCPJSEDSA-N Narasin Chemical compound C[C@H]1C[C@H](C)[C@H]([C@@H](CC)C(O)=O)O[C@H]1[C@@H](C)[C@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](CC)[C@@H]1[C@@H](C)C[C@@H](C)[C@@]2(C=C[C@@H](O)[C@@]3(O[C@@](C)(CC3)[C@@H]3O[C@@H](C)[C@@](O)(CC)CC3)O2)O1 VHKXXVVRRDYCIK-CWCPJSEDSA-N 0.000 title claims abstract description 25
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 title claims abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 13
- VHKXXVVRRDYCIK-UHFFFAOYSA-N Narasin Natural products CC1CC(C)C(C(CC)C(O)=O)OC1C(C)C(O)C(C)C(=O)C(CC)C1C(C)CC(C)C2(C=CC(O)C3(OC(C)(CC3)C3OC(C)C(O)(CC)CC3)O2)O1 VHKXXVVRRDYCIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 229960001851 narasin Drugs 0.000 claims abstract description 24
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 16
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 abstract description 20
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 abstract description 12
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 abstract 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 abstract 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 21
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 21
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 21
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 14
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 13
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 10
- SWGJCIMEBVHMTA-UHFFFAOYSA-K trisodium;6-oxido-4-sulfo-5-[(4-sulfonatonaphthalen-1-yl)diazenyl]naphthalene-2-sulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].C1=CC=C2C(N=NC3=C4C(=CC(=CC4=CC=C3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=CC=C(S([O-])(=O)=O)C2=C1 SWGJCIMEBVHMTA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 10
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 8
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 5
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 241000544912 Melanoides Species 0.000 description 4
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 4
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 4
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 4
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 4
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 4
- SRBFZHDQGSBBOR-SOOFDHNKSA-N D-ribopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 3
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 235000015113 tomato pastes and purées Nutrition 0.000 description 3
- GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 2,6-diaminopimelic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC(N)C(O)=O GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000187217 Streptomyces griseoruber Species 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- NOOLISFMXDJSKH-UTLUCORTSA-N (+)-Neomenthol Chemical compound CC(C)[C@@H]1CC[C@@H](C)C[C@@H]1O NOOLISFMXDJSKH-UTLUCORTSA-N 0.000 description 1
- DDUHZTYCFQRHIY-UHFFFAOYSA-N 7-chloro-3',4,6-trimethoxy-5'-methylspiro[1-benzofuran-2,4'-cyclohex-2-ene]-1',3-dione Chemical compound COC1=CC(=O)CC(C)C11C(=O)C(C(OC)=CC(OC)=C2Cl)=C2O1 DDUHZTYCFQRHIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010023063 Bacto-peptone Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000003712 Complement factor B Human genes 0.000 description 1
- 108090000056 Complement factor B Proteins 0.000 description 1
- 101710128746 Cytochrome b6-f complex iron-sulfur subunit 1 Proteins 0.000 description 1
- NOOLISFMXDJSKH-UHFFFAOYSA-N DL-menthol Natural products CC(C)C1CCC(C)CC1O NOOLISFMXDJSKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 1
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 241000186984 Kitasatospora aureofaciens Species 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004721 Polyphenylene oxide Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 241000970978 Streptomyces griseoaurantiacus Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- HIYSWASSDOXZLC-UHFFFAOYSA-N Undecylprodigiosin Natural products CCCCCCCCCCCc1ccc(C=C2N=C(C=C2OC)c2ccc[nH]2)[nH]1 HIYSWASSDOXZLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 239000007613 bennett's agar Substances 0.000 description 1
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- HDRTWMBOUSPQON-ODZAUARKSA-L calcium;(z)-but-2-enedioate Chemical compound [Ca+2].[O-]C(=O)\C=C/C([O-])=O HDRTWMBOUSPQON-ODZAUARKSA-L 0.000 description 1
- XPTCDNRQXYTORI-UHFFFAOYSA-K calcium;sodium;carbonate;chloride Chemical compound [Na+].[Cl-].[Ca+2].[O-]C([O-])=O XPTCDNRQXYTORI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000035425 carbon utilization Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 229940041616 menthol Drugs 0.000 description 1
- GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N meso-2,6-diaminopimelic acid Chemical class [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CCC[C@@H]([NH3+])C([O-])=O GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 239000006877 oatmeal agar Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920000570 polyether Polymers 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 description 1
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000001044 red dye Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000028070 sporulation Effects 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HIYSWASSDOXZLC-MOHJPFBDSA-N undecylprodigiosin Chemical compound N1C(CCCCCCCCCCC)=CC=C1\C=C/1C(OC)=CC(C=2NC=CC=2)=N\1 HIYSWASSDOXZLC-MOHJPFBDSA-N 0.000 description 1
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/01—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing oxygen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu výroby narasinu mikrobiologickou cestou.
Neresin je známé «ntibioiiUm polyeterového typu. Výroba narasinu fermen^ací Streptomyces aureofaciens NRRL 5758 nebo Streptomyces aureofaeiens NRRL 8092 byla popsána Bergem a dalšími v US patentu δ. 4 038 384 z 26. července 1977. Popis tohoto způsobu je podán také v publikaci· Berg a další J. Attbiot. 31. 1 až 6 (1978).
? Boček a další popisují podrobně . toto antibiotkum v publikaci ”Nsa*asin, A New Polyeter j АНЫоtic: D-scovery and Pe^eena^^ Studies kapitola 38, str. 471 až 485, sv. . 18, | Developmmnts In Induusrial Microbiology [Publication of the Society for Induutrial Microi biology (1977)].
, Naaasin je účinný proti gramcc^^^^ bakteriím, anaerobním bakteriím a houbám a mimoto je anttiticidiálním prostřddkem a dále zvyšuje vyiUití krm Iv v přežvýkavců.
Vynález se týká nového způsobu výroby шпИИ^С-Ов narasinu tak, že se pěstuje nový kmen Streitomnces granulo™^^ NRRL 12389 v živném prostředí s obsahem využitelných zdrojů uhlíku, dusíku a anorganických solí v submmrzní kultuře za aerobních podmínek do nahromadění dostatečného nerazinu, načež se antilioiiUm ze živného prostředí izoluje.
Pěstováni se tedy provádí při pouUžtí biologicky čisté kultury · mikroorganismu Strepto' myces granul^u^г NRRL 12389, využitelných ·zdrojů uhlíku, dusíku a anorganických solí.
Nový mikroorganismus, užívaný k převádění způsobu podle vynálezu je · biologicky čistou kULturou, získanou ze vzorku půdy, který byl odebrán . v blízkosti Su^nam Rivenr, SurinEm,
Jižní Amerika. Kultura byla pro identifikaci označena číslem A-39912 s uložena ve sbírce pod číslem NRRL 12389.
KRtun A-39912 je možné klasifikovat jako Streptomyces granHoruber, podkladem tito klasifikace bylo současné pěstování Strepoomyces rubra, Strepoomyces grisscruber a - Straptomyyes grii^^an-tiscus při pouHtí způsobů o prostředí, doporučených v publikaci Shirling a Goolieb Mehods of Chiarakteization of Strepoomyces species, Int. BUL. of Systematic Bacteeiol. 16, 313 až 340 (1966), mimoto byly provedeny ještě některé doplňkové zkoušky* KRtuTa A-39912 byla - také srovnávána s popisem Str^^myc^ ltogisptrtruber, tak jak byl podán v publikaci Gerber J. An^bot. 28, 194 až 199 (1975).
Kuutura A-39912 se liší od Strepoomyces rubra produkcí granul, kterými jsou krysta- * ly undeeylprodigininu, purpurově červeného barviva, tím, že produkuje purpurově červené až černé vegetativní mnoHom a mimoto kultura redukuje dusičnany. &utura A-39912 produkuje červené a šedé mysliím na vzduchu na rozdíl - od šedého у^Пс Streptomyces gri- seoruber.- Purpurově červené až černé vegetativní ^ιοΙ!^,· produkované kulturou A-39912 se rovněž liší od žlutohnědého až červenooramžového vegetativního m^ceia Streptoyytes gris^eoruber. Strepoomyces grisrtauicntiacur neprodukuje odlišitelné purpurově červené až černé vegetativní myelium, jako tomu je u kultury A-39912. Ani Strepoomyces griseoruberani Strepoomyces gri8ctcurcnticcus neprodukuj purpurově červená krystaly undecylprodigininu jako kultura A-39912.
Při srovnání kultury A-39912 se shora uvedenými kulturami je tedy možno prokázat podstatné rozdíly. Kuutura byla tedy považována za nový druh, který byl nazván Streptomrces granu^^be^
Vlastnooti kmene, pгodulklítího narasin
Morfologie
Kuutura produkuje spirální sporofory. Spory jsou při pozorování elekroonovým mikroskopem hladké- a tvar ssCí vejčitý až válcovitý. Rozměry spor jsou v průměru 1,3 x 2,015 /im při rozmezí 1 ,3 x 1 ,3 až 2,6/tm.
Vlastnooti kultury
Růstové vlastnosti Streptomyces granuloruber na různých živných prostředcích jsou uvedeny v následnici tabulce I.
Jména barev byla užita v - souladu a metodou ISCC-NBS podle publikace Κ. K. Kelly a D. B. Judd, - The ISCC-NBS Methode of D^e^i^jp^i^iti^ng Colors and a Dieílona^ o^ Color Name, U. S. Dep^rtmenb o^ Coummece Circ. 553, 1955, Wachingtro, D. C.) Čísla v závorkách odpo- vídají číslům -barev, kterými jaou jednotlivě barvy označeny v pubbikaci H. D. Treaner a E. J. Badma, Syetem Color Whels for Streptomrcete Taxmorny, Appp. Miirobiol.
, 335-338 (1956)- Označení barev podle - běžně užívaných tabulek - je podtrženo. Označenío barevných bloků podle publikace A. Merz a M. -R. Paul, ЫсО^огг, o^ CCoor, - McGGaw.-Hill ' '
Book Co., lne., New York N. - Ϊ., (1950), - jsou uvedena v hranatých závorkách. 0 - - ' .
* ' e ..
W ..
* - 0
N
Tabulka I
Vlastnosti kultury na různých Živných prostředcích
| Prostředí | Vlastnosti |
| Agar s rajským protlakem a ovesnou moukou | Růst je bohatý, zadní strana kultury purpurově černá [56E8], mycelium na vzduchu je průměrně vyvinuté, spory (GY) světle šedohnědé až červenavé až (R) 5dc Šedožlutorůžové. Pigment se netvoří nebo se tvoří nepatrné množství hnědého Ve vodě rozpustného pigmentu· |
| Agar s glycerolem a gycínem | Růst bohatý, zadní strana kultury tmavě purpurově červená [55H4] , průměrné mycelium na vzduchu a spory (R) 5dc šedožlutavě růžové, rozpustný pigment se nevytváří |
| Agar s extraktem z kvasnic a sladů (ISP prostředí 2) | Bohatý růst, zadní strana kultury černá až černavě červená, [46Cl] až [56Н12]. Bohaté vzdušné mycelAum a spory (W) b bílé až (GY) £ světle šedé, rozpustný pigment se netvoří nebo se tvoří nepatrné množství hnědého, ve vodě rozpustného pigmentu· |
| Agar s ovesnou moukou (ISP prostředí 3) | Bohatý růst, zadní strana kultury červenavé hnědá [7J7j , mycellum na vzduchu je dobře vyvinuté, spory ' (GY) & světle šedé, tvoří se malé množství hnědého, ve vodě rozpustného pigmentu· |
| Agar se škrobem a anorganickými solemi (ISP prostředí 4) | Bohatý růst, zadní strana kultury mírně Červenavě hnědá [7J9], mycelium na vzduchu je bohaté a spory (E) 5dc šedavé žlutavě růžové, rozpustný pigment ve vodě se nevytváří» |
| Agar s glycerolem a asparaginem (ISP prostředí 5) | Bohatý růst, zadní strana kultury středně červenavě hnědá [6G9] , dobře vyvinuté mycelium na vzduchu a spory, (R) 5dc šedavé žlutavě růžové. Ve vodě rozpustný pigment se nevytváří. |
| Živný agar | Průměrný růst, zadní strana kultury šedavé Žlutá [l2B2], vzdušné mycelium ani spory se netvoří, ve vodě rozpustný pigment se nevytváří. |
| Agar s tryptonem a extraktem z kvasnic | Průměrný růst, zadní strana kultury šedavé žlutá [12B2], mycelium na vzduchu ani spó у se.netvoří, ve vodě rozpustný pigment ae netvoří. |
| Agar 3 maleinanem vápenatým | Průměrný růst, zadní strana kultury bledě žlutá [J 0B2]. Průměrně vyvinuté mycelium na vzduchu a spory (GY) světle olivově hnědé. Va vodě rozpustný pigment se nevytváří. |
Pokračování tabulky I
| Prostředí | Vlastnosti |
| Emersonův agar | Bohatý růst, zadní strana kultury mírně žlutohnědá [13H7J, netvoří se vzdušné mycellum ani spory, ve vodě rozpustný pigment se nevytváří. |
| Agar s glukózou a | к/ · Růst dobrý až bohatý, zadní strana kultury černavě |
| aaparaginem | červená [56Л0], mycellum na vzduchu dobře vyvinuté áž bohaté a spory (GY) 5fe světle šedavé červenavě hnědé, tvoří se malé množství hnědého, ve vodě rozpustného pigmentu. |
| Bennettův agar | Dobrý růst, zadní strana kultury šedavé žlutá [l2J5j, mycellum na vzduchu ani spáry se netvoří, ve vodě rozpustný pigment se netvoří. |
| Agar s tyroainem | Bohatý růst, zadní strana kultury tmavě purpurově červená [5EJ6], průměrně až dobře vyvinuté vzdušné mycellum a spáry (W) b bílé až (R) бес Šedavé žlutavě růžové. Vytváří se hnědavý, ve vodě rozpustný pigment. |
| Czapkův agar | Průměrný růst, zadní strana kultury bledě oranžově žlutá 9B2 , průměrně vyvinuté vzdušné mycelium a spory (GY) 2dc žlutavě šedé. Vytváří se malé množství hnědého, ve vodě rozpustného pigmentu· |
Mikroorganismus byl sledován к zjištění některých fyziologických vlastností v souladu se standardními postupy. Pozorované vlastnosti tohoto mikroorganismu jsou uvedeny v následující tabulce II.
Tabulka II t
Fyziologické vlastnosti A-39912
Tvorba melanoidního pigmentu na následující prostředí:
| 1. Bujón s tryptonem a extraktem z kvasnic (ISP 1) | Melanoidní pigment se nevytváří |
| 2. šikmý agar s peptonem, extraktem z kvas- | |
| nic a železem (ISP 6) | Melanoidní pigment se nevytváří |
| 3. (šikmý agar s tyrosinem (ISP 7) | Melanoidní pigment se nevytváří |
| Redukce dusičnanu | Pozitivní reakce |
| Zkapalnění želatiny | Pozitivní reakce - 100 % za 14 dní |
| Bramborový blok | Kultura neroste |
| Mrkvový blok | Kultura neroste |
Pokračování tabulky II
Hfdrolýza škrobu, užito prostředí IPS 4 s anorganickými solemi a škrobem
TepPotní požadavky
OddStředěné mléko
Tolerance NaCl
Rozmezí pH
Škrob je hydrolyzován
Bohatý růst a sporulace při teplotním rozmezí 25 až 43 °C, kuLtura neroste při teplotě nižší než 25 a vyšší než 43 °C.
Dooliází k peptonizaci
-3,5 % až <4,0 %
Kultura rosta v rozmezí pH 5,5 až 9,5.
Vyyžití uhlíku bylo stanoveno na základním prostředí podle Pridhtma a Gootlieba, k němuž byly přidávány zdroje uhlíku do konečné koncentrace 1,0 %, jak je popsáno ve shora uvedené publikaci Shirlinga a Gootlieba. Zdroje byly před přidáním k živnému pro středí δΙοιΊϋζονέ^· Výsledek byl odečítán po S a po 14 ' dnech inkubace při 30 °C. Tabulka obsahuje konečnou hodnotu.
Výsledky pokusů na využití uhlíkových zdrojů při použžtí kultury A-39912 jsou uvedeny v následnicí tabulce III.
Tabulka III
Využií uhlíkových zdrojů
Suustřát: Zdroje uhlíku, přidané k základnou prostředí podle · Pridhama a GootliYa
Reakce kultury A-39912 po 14 dnech
| L-arabinoza | ♦+ |
| D-fruktóza | ++ |
| D-glukOza | |
| ivinositol | ++ |
| D-mannitol | - |
| ^-гпГЗДп^п | |
| Ь-НпшпОхп | ++ |
| aacharOza | + |
| D-xyloza | ++ |
| D-geCLaktOza | ++ |
| kontrola - uhlík | . - |
x
Zlroje uhlíku odpoovddjí International Streptomyces Project (Shrling a GGotlieb supra.)
Vysvětlivky к tabule·:
♦♦ a Silně pozitivní Využití * » pozitivní využití t a pochybně využití
- a negativní využití
Vlastnosti buněčné stěny
Při použití hydrolyzovaných celých buněk mikroorganismu byla stanovena přítomnost určitých cukrů· Izolované buněčné stěny byly užity ke stanovení isomerů kyseliny diaminopimelové·
Cukry v buněčné stěně byly stanoveny při použití modifikace způsobu, uvedeného v publikaci Μ. P. Lechavalier Chemieal Methoda ae Criteria for the Separation of Actinomycetea Into Genera”· Tyto metody byly vyvinuty v laboratořích, dotovaných Subcommittee én Actionomycetes of the Američan Society of Microbiology, /Dr. Thomas G. Pridham, Convenor), laboratoře se nacházejí v Institute of Microbiology, Rutgers University, The Statě University of New Jeraey, New Brunawick, N. J., (1971). Isomery kyseliny diaminopimelové byly stanoveny při použití metody, uvedené v publikaci Becker e delší., Appl. Mikrobiol. Ц, 421 až 423 (1964)· Věechny plotny byly odečítány po 6 až 14 dnech při teplotě 30 °C. Výsledky těchto pokusů jsou dále uvedeny,
Pokus
Výsledek
Teat na isomery kyseliny
2,6-diaminopimelové
Teat na cukry
LL-isomer glukóza, ribóza
Mimoto bylo srovnáváno využití uhlíkových zdrojů kmene A-39912 a Streptomyces (chainia) rubra ATCC 17755, Streptomyces griseoruber ATCC 23919, a Streptomyces griaeoaurantiacus ATCC 19840, výsledky jsou uvedeny v následující tabulce IV.
Tabulka IV
Využití uhlíkových zdrojů kmene A-39912, Streptomyces (Chainia) rubra ATCC 17755, Střeptemyče a griseoruber ATCC 23919 a Streptomyces griaeoaurantiacus ATCC 19840
| Zdroj uhlíku | A-39912 | ATCC 17755 | ATCC 23919 | ATCC 19840 |
| D-glukóza | ++ | |||
| L-arabinóza | ♦ | - | ||
| aacharóza | ♦ | ♦ | - | - |
| S-xylóza | +♦ | ♦ | ++ | Ή- |
| inoaitol | +♦ | ♦ | ♦♦ | ♦♦ |
| D-fruktóza | ♦+ | ♦ | ||
| D-mannitol | - | - |
22ΊΊ00
Pokračování tabulky IV
Zdroj uhlíku A-39912
ATCC 17755
ATCC 23919
ATCC 19840 rhemnóza
+ +4++ raffinóza
Vysvětlivky . k tabulce:
++ = dobré vyižití + 3 pozitivní vyžití i = pochybné vybití
- = negativní vybití
Srovnání podobnootí a rozdílů mezi kmeny A-39912 a Streptomyces (cheinia) rubra ATCC 17755, Strepoomyces griseoruber ATCC 23919 a Strepoomyces griseoaurantiacus ATCC 19840 je uvedeno v následující tabulce V.
TabuukaV
Srovnání vlastností kmenů A-39912, Streptomyces (chainia) ^ubra ATCC 17755, Strepoomyces griseoruber ATCC 23919 a Streptomyces griseoaurantiacus ATCC 19840
| Vlastnost | A-39912 | ATCC 17755 S. (ch&Lnia) rubra | ATCC 23919 S. griseoruber | ATCC 19840 S. giseoaur srntiacus |
| Moofologie spor | spirální | spirální | spirální | spirální |
| Povrch spor | hladký | hladký | hladký | hladký |
| Barva vegetativního myyeeia | purpurově | žlutohnědá | žluto hnědá | žlutohnědá |
| červená až | hnědavě oranžová | červehavě | olivově šedá | |
| černá červe- | oranžová | až červenavě | ||
| navě hnědá | hnědé | |||
| Barva vzdušného myceia | červená až Sádá | červená | šedá | šedá |
| Zkapalnění želatiny | 4· | 4- | - | + |
| Redukce dusičnanu | - ‘ | 4· | ||
| Oddtředěné mléko | pepIonizace | hydrolýza | peptonizace | peptonizace |
| Produkce meeanoid- | ||||
| ního pigmentu | - ’ | - | - | - |
Potaračovifaí' tabulky V
| Vlastnost | A-39912 | ATCC 17755 | ATCC 23919 | ATCC 19840 |
| S. (cha^ia) rubra | S. rii8eoiubei | S. griseo лгопtiacus |
Tvorba toyetalů na:1
ISP prostředí' 24
1SP prostřádí 3 *
Agar a protlakem z rajčat a ovosnou
Mukou * isomer kyseliny 2,6diaminopimelové LL
LL
LL
LL 1 ) Kyyialy undeeyl^edigintau
Celá řada moorologických a fyziologických vlastnosti uvedených'čtyř kmenů se shoduje, rozdíky jsou v barvě vegetativního media, 'vzduSného media a v tvorbě granul na různých živných prostředích, jak je uvedené v tabulce V.
Kmen ' Streptomyces grandoruber, který produkije narasin byl uložen do veřejné sbírky kultur Northern Regional Research Center, U. S. Department of Agriculture. Aricultural Research Service, Peofria, Illinois, 6160-4, odkud je možno jej běžně získat pod - číslem NRRL 1238*9.
Stejně jako je tomu u jiných mikroograňismů, některé vlastnosti kmen Streptomyces granuloruber, NRRL 12389 mohou podléhat variacím, Je tedy například - možno užít při provádění - způsobu.podle vynálezu mittoity, a to spontánní a/nebo vyvolanét transkonjuganty a rekombinaity včetně rekombinait DNA na plaemidech kmene NRRL 12389 nebo odvozených od tohoto kmene, pokud pro&ukj antibietitom narasin.
ИЧ pěstování kmene Streptomyces granuloruber za účelem získání narasinu je možno užít celou řadu živných prostředí. Teto prostředí mají obsahovat využitelné zdroje uhlíku, dusíku a anorganických solí. Vhodným. zdroji uhlíku jsou například glukóza, Škrob a dextrin. Mezi vhodnými zdroji dusíku je možno uvést pepton, enzymaaicky hydrolyzovaný kasein, mouku z bavlníkových semen a pepton z masa.
Základní stopové prvky, které jsou nutné pro růst a - vývoj produkčního organismu se mohou vyskytovat jako nečistoty v jiných složkách živného prostředí v Dmnoství» které je dostatečné pro růst a- biosyntetické požadavky organismu. Mlže však být vhodné včlenit do živného přoatředí dděí rozpustné anorganické soli s obsahem sodíku, draslíku, hořčíku., vápníku, amowých - iontů, iontů chloridových, uh-ičiLan^ových, fosforečnanových, síranových, dusičnanových a podobně.
Při výrobě větěích množtví narasinu při pouHtí kmene NRRL 12389 je vhodné tento kmen pěstovat . v submerzní kUtuře za aerobních podmínek ve větěích tancích. Malá množtví narasinu je možno získat ve třepacích lahvích. V případě fermentace v tanku je výhodné užít vege '.at víť očkovací materiál. Vegetativní očkovací materiál je možno získat tak, že se naočkuje malé možství živného prostředí sporami, mceeia nebo lyofilZzovnými pelet®!, organismu, čímž se získá čerstvá, aktivně rostoucí kULtura organismu. Takto získaný vegetativní očkovací Μθ^ιΤάΙ se pak přenese do většího tanku, v němž je možno získat po dooř antibiotium narasín v optimálním výtěžku.
Fekud Jde o hodnoty pH, liší se pH oroaočkooaoého fermentačního prostředí od pH při produkci a1rn.iЫotiit, vždy se však pohybuje pH feimentačního prostředí v rozmezí 6,5 až 7,5. .
produkující narasin . je možno pěstovat v teplotním rozmezí 25 až 43 °C.
K optimální produkci narasinu při pouužtí kmene NRRL 12389 dochází přibližně při teplotě 30 °C.
Jak je to ' ; řžné při pěstování mikroorganismu v submerzní kultuře ze aerobních podmínek, disperguje se v živném prostředí v průběhu fermentace sterilní vzduch. K dostavenému růstu mikroorganismu se pohybuje objem vzduchu při produkci v tanku v rozmezí 0,25 až 1,0 objemu vzduchu na 1 objem živného prostředí za minutu. Optimmání hodnota pro nádobu o obsahu 10 litrů je 0,2 objemu vzduchu na objem prostředí za minutu při míchání běžným způsobem rychlostí 400 otáček za· minutu. Mi že . být zapotřebí přidat malé mnžsSví, například 0,2 ml/1 tгjtipšn.ioéhj činidle, například propylenglykolu, zejména v případě většího fermentačního . ínožsSví, kdy může dojít k příliš velkému p$n<^]^2í.
Produkci narasinu je možno v průběhu fermentace sledovat difúzí na agaru nebo zákalovými zkouškami. Mitooorganismy, vhodnými pro toto použití jsou například.Stathcloeoeeus aurnu, ВиШ^ s^bstHs a Mi^rococcus totežs.
K nahromadění antibiotika dochází obvykle přibližně po 40 hodinách a jeho rninoství se zvyšuje ještě alespoň dva nebo více dnů. K nejvýšší produkci antibiotika dochází v rozmezí 2 až 4 dnů od počátku fermentace.
лсШЬ^И.® narasin Je možno izolovat z živného prostředí známým způsobem, například způsobem·, který byl popsán Bergem a dalšími v US patentu č. 4 038 384.
Nový mikroorganismus Serrpjoíycrs granuloruber,. NRRL 12389, produtožící narasin produkuje převážně množiv! faktoru A narasinu a mimoto malá minŽžtví faktoru B a D narasinu. Tyto složky Je v případě potřeby možno získat jako jedno tlivá antibiotika dalším čištěním komp^pexTu, například ehrjmítegrraií na sloupci. Uvedené faktory byly popsány v US patentu č. 4 038 384.
Vdález bude osvětlen následujícími příklady, v nichž jsou užita různá fermentační prostředí.
Příklad 1
Kužtura Serrpjoíccrs granuloruber NRRL 12389 byla připravena nejprve na šilmaém agaru následujícího složení:
| Složka | Moosíví (g/1) |
| bramborový dextrin | 10,0 |
| enzy^8^a^:icky hydrolyzovemý | |
| kasein1 | 2.0 |
| extrakt z hovězího masa | ' - 'o |
| extrakt z kvasnic | 1,0 |
| agar | 2,0 |
| Czapkův zásobní roztok | |
| ano^anl.cký^ solí2 | 2,0 m./1 |
| deionizovaná voda do | 1 ,0 litru |
N-Z-amin A (Humko dheefield Chemieal Co., Memphia, Term.) o
Czapkův zásobní roztok anorganických solí je síísí složek, uvedených v následující tabulce.
Složka MoOství g/100 ml
KC110,0
MgSO4.7 H2O10,0
FeS04.7 H200,2 deionizovaná voda do 100 ml
Spora Strepoomyces granuloruber NRRL 12389 se naočkují na Si^lmý agar shora uvedeného složení a takto naočkovaný Sidmý agar se inkubuje 7 dni při teplotě 30 °C. Zralá kultura na Silmém agaru se pak převrství vodou a uvolní sterinnm nástroem k získání spor a my celia. 1 ml výsledné suspenze spor se užije k naočkování 100 ml vegetativního živného prostředí následujícího složeni:
Složka
Možství (g/1)
| dextróza sójová mouka k^Jtadřičný výluh uhličitan vápenatý chlorid- sodný Czapkův zásobní roztok anorganických solí deionizovaná voda do | 15,0 15',.0 5,0 2,0 5,0 2,0 m./1 1 ,0 litru |
Vegeeativní očkovací maaeeiál se inkubuje v Erlenmeyrově baňce o objemu 500 ml se Sioo!ým hrdlem při teplotě 30 °C přibližně 40 hodin na třepačce s výkyvem ' 5 cm při 106 výkyvech za minutu. Takto inkubované živné prostředí se užije bud k naočkování mmeních fermentačních nádob (očkovací mmatelál tvoří přibližně 1 % objemu fermentoru) nebo - k naočko vání druhého stupně za účelem získání většího objemu mcceia.
200 ml produkčního prostředí se vloží do Erlermeyerovy baňky o objemu 1,0 litru a sterilizuje se při teplotě 121 °C přibližně 30 minut. Produkční prostředí má následnicí složení.
1
Složka dextróza poživatelná melasa Bacto pepton uhličitan vápenatý Czapkův zásobní roztok anorganických látek deionizovaná voda do
Množství (g/1)
10,0
20,0
5,0
2,0
2,0 ml/1
1,0 litru
Po zchlazení a· baňky naočkují 5 % vegetativního očkovacího materiálu. Kultura se inkubuje na třepačce o 108 výkyvech za minutu při velikosti výkyvu 5 cm. Na konci 72 hodin fermentace je pH fermentačního prostředí 7,5· Fermentace probíhá při teplotě JO °C.
Příklad 2
Narasin se produkuje při použití sterilního produkčního prostředí následujícího slo- * žení:
Množství (g/1)
Složka
| protipěnivé činidlo | |
| silikonového typu | 0.2 |
| glukóza | 10,0 |
| melasa | 20,0 |
| pepton (Difco) | 5.0 |
| uhličitan vápenatý | 2,0 |
| deionizovaná voda do | 9,0 litru |
1 Dow-Corning Antifoam A
Toto produkční prostředí o pH 6,8 se sterilizuje 30 minut při teplotě 121 °C při tlaku přibližně 0,01 až 0,012 MPa· Sterilizované živné prostředí má pH 6,9. Sterilizované živné prostředí se naočkuje 2,0 % očkovacího materiálu z druhého stupně, který se získá způsobem podle příkladu 1. Naočkované produkční prostředí se fermentuje ve fermentačním tanku o objemu 10 litrů 3 dny při teplotě 30 °C. Fermentační prostředí se provzduěňuje sterilním vzduchem rychlostí 0,2 objemu na objem živného prostředí za minutu a míchá se běžným způsobem rychlostí 400 otáček za minutu.
Příklad 3
Izolace a čiětění litrů fermentačního živného prostředí se upraví na pH 3 přidáním vodného roztoku kyseliny sírové o koncentraci 1 N a míchá se hodinu. Pak se směs zfiltruje při použití pomocného prostředku (Hyflo Supercel- infusoriové hlinky produkované Johns-Manville Corporation) a filtrační koláč se promyje vodou. Pak se filtrační koláč extrahuje 9 litry metanolu s obsahem 3 % hydrogenuhličitanu draselného tak, že se koláč s tímto roztokem míchá a pak se směs znovu zfiltruje. Pak se filtrační koláč ještě jednou extrahuje 9 litry metanolu.
Mentolové extrakty se slijí a zahustí na objem 2 - litry, načež se pH upraví na 7,5 přidánín vodného roztoku kyseliny sírové o koncentraci 1 N. Směs se extrahuje dvakrát vždy 2 litry etylacetátu· Extrakty se slijí a ve vakuu se odpiOř na odparek, který se rozpustí ve 150 ml acetonu· K acetonovému roztoku se přidá 150 П vody a pH ae upraví na 3,0 vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové o pH 1 N. Směs se hodinu míchá a vzniklé olejovité krystaly se odfiltrují . a rozpuutí ve 150 ml acetonu, načež se přidá 150 ml vody· Rostok se nechá stát přes noc při teplotě mííttinoti, vzniklé krystaly se odddlí filtrací, promni vodou a usuší ve vakuu, čímž se získají krystaly s olejoviým fibnem.
Tyto olejovité krystaly se rozpuatí v 5 ml benzenu a nanesou se na vrchol sloupce n rozměrech 1,8 ' x 40 cm s obsahem sililagelu (Grece Grade 62) v benzenu· Sloupec se postupné promtvá 250 ml benzenu, smésí benzenu a etylacetátu v poměrech 9:1, 4:1, 7:3 a'1:1 a nakonec etylacetátra, přičemž se odebíraaí frakce o objemu 20 až 25 m.· Vyutfvvbní účinné složky se sleduje biologicky a také chromaaogrrafí na tenké vrstvě silkkagelu při použití etylacetátu jako rozpouštědla· .
K detekci se užije postřiku kyselinou sírovou s vaniinnem a jako detekční organismus se užije Badlks zubiHs· Frakce s obsahem pouze jediné složky narasinu se slijí a odpróí do sucha ve vakuu· Odjparek se rozpuutí v 50 ml acetonu, přidá se 50 OL vody a roztok se nechá stát ' při teplotě místno o ti ke kryssalizaci· VznnkLé krystaly se zfiltrují a usuší ve vakuu, čímž se získá 172 mg bílých krystalků o teplotě tání 75 až 78 °C·
Kyytalky jsou totožné s narasinem, jak je možno prokázat srovnáním NMR spektra, spektra v infračerveném a ultrlflaOovéa světle, hmotového spektra a ch^am^e^a^ na . tenké vrstvě a na papíře· Také biologické lntialkroOíální a antikokecdiální účinnost ' je totožná s účinnootí narasinu,
K identifikaci purpurově červených krystalů, produkovaných kmenem A-39912 bylo užito postupu, uvedeného v příkladu 4·
Příklad 4
Unneeclprrdiginin - výroba a průkaz
Clh,omaloggrlkické plotny z plastické hmoty o rozměrech 23 x 45 cm s hranou vysokou 10 mm a obsahem 250 ml agaru s rajském protlakem a ovesnou moukou, připraveného způsobem podle publikace Pridham a daaší, АО1ЬШ( Ann. 1956 až 1957, str· -947 až 953 se naočkují 48 hodin starým očkovacím aaleriálea př bujónu s tryptonem a extraktem z kvasnic podle shora uvedené publikace Shirlinga a Got^lieba· Bujón s tryptonem a extraktem z kvasnic má následnici složení:
Složka
Moožsví (g/1) trypton (Difco) extrakt z kvasnic destioovaná veda do
5,0
3,0
1,0 litru
Bujón má pH 7,0 - až 7,2 před sterilizací v autoklávu· Po naočkování, se plotny inkubují 14 dní při teplotě 30 °C, po této době je možno - pozorovat v agaru krystaly purpurově červené barvy·
Agar s obsahem purpurově červených krystalů se vyřízne po obvodu kULtury a extrahuje čtyřikrát vždy 500 ml směsi chloroformu a metanolu v poměru 4:1 při míchiání 15 minut na parní lázni. Extrakty se slijí a odp^ďí se ve vakuu do sucha. OJpprek se rozpustí ve 12 ml chlorofomu a chromaáografuje na sloupci o rozměrech 1,2 x 52 cm s náplní silikagelu (Orace 62) v chloroformu. Sloupec se vymývá chlorffrrmem a ode&írají se frakce po 10 m. Po frakci 34 se eluční rozpouštědlo změní na směs chloroformu a metanolu v pommru 95:5·
Frakce se sledují chromatoorafií na tenké vrstvě silikagelu při použití chloroformu a ιτίβηοΐύ v poměru 9:1, pozoorijí se purpurově zbarvené skvrny. Frakce 9 ai 14, které oíseanijí rrtoeiál s nejintenzívnějším purpurovým zbarvením, (jediná skvrna při chrom^tojgrafii na tenké vrstvě) se slijí a ^^j^íť^rí do sucha. Oddarek se rozpustí v dtoxanu a lyofflizuje,'čími se získá 10,3 mg purpurového prášku.
Tento purpurový prášek při hmotové spektromettii má rolelkU.Lá'ní ion o hmoonooti 393,27764 a empirický vzorec C25H35N3°· T^t0 údaje spolu se srovnáním spektra v ultrafiaocvém a iof*račevvonér světle a s Nffi-saiktrer iodecylprodirioinu způsobem podle ^ЬИkace Agr. Biol. Chem, 31 4β1 (1967) a J. Antbiot. 28, 194 (1975) prokazují, ie purpurovým práškem je undecppoddginin.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUZpůsob výroby antibiotika narasinu, vyznaluící se tím, ie s® pěstuje Strepoomyces rrtnuloruíer NRRL 12389 v iivném prostředí s obsahem využitelných zdrojů uhlíku,·dusíku a anorganických solí v subrrrzní kultuře za aerobních podmínek, načei se tntiíioiiUlm ze iivného prostředí izoluje.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/261,068 US4342829A (en) | 1981-05-06 | 1981-05-06 | Process for preparing narasin |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS227700B2 true CS227700B2 (en) | 1984-05-14 |
Family
ID=22991818
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS823250A CS227700B2 (en) | 1981-05-06 | 1982-05-05 | Production of narasine antibiotic |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4342829A (cs) |
| EP (1) | EP0064409B1 (cs) |
| JP (1) | JPS57202291A (cs) |
| KR (1) | KR850001230B1 (cs) |
| AR (1) | AR227589A1 (cs) |
| AT (1) | ATE10289T1 (cs) |
| AU (1) | AU557316B2 (cs) |
| CA (1) | CA1177425A (cs) |
| CS (1) | CS227700B2 (cs) |
| DD (1) | DD202589A5 (cs) |
| DE (1) | DE3261230D1 (cs) |
| DK (1) | DK201682A (cs) |
| EG (1) | EG15730A (cs) |
| ES (1) | ES511916A0 (cs) |
| FI (1) | FI70595C (cs) |
| GB (1) | GB2097794B (cs) |
| GR (1) | GR76520B (cs) |
| HU (1) | HU189578B (cs) |
| IE (1) | IE52295B1 (cs) |
| IL (1) | IL65691A (cs) |
| PH (1) | PH17799A (cs) |
| PL (1) | PL129644B1 (cs) |
| PT (1) | PT74842B (cs) |
| RO (1) | RO84111B (cs) |
| ZA (1) | ZA823056B (cs) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4513086A (en) * | 1981-10-15 | 1985-04-23 | Eli Lilly And Company | Cloning vectors for use in streptomyces and related organisms |
| US5444043A (en) * | 1994-02-18 | 1995-08-22 | The Regents Of The University Of California | Cyclic heptapeptide anti-inflammatory agent |
| TWI656872B (zh) | 2014-11-13 | 2019-04-21 | 美商益農美國公司 | 甲基鹽黴素於豬飼料中之抗病毒效果 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4038384A (en) * | 1974-06-10 | 1977-07-26 | Eli Lilly And Company | Antibiotic a-28086 and process for production thereof |
| US4309504A (en) * | 1980-01-28 | 1982-01-05 | Eli Lilly And Company | Process for preparing narasin |
-
1981
- 1981-05-06 US US06/261,068 patent/US4342829A/en not_active Expired - Fee Related
-
1982
- 1982-05-03 AR AR289283A patent/AR227589A1/es active
- 1982-05-03 RO RO107423A patent/RO84111B/ro unknown
- 1982-05-03 FI FI821548A patent/FI70595C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-05-04 ZA ZA823056A patent/ZA823056B/xx unknown
- 1982-05-04 KR KR8201940A patent/KR850001230B1/ko not_active Expired
- 1982-05-04 ES ES511916A patent/ES511916A0/es active Granted
- 1982-05-04 PT PT74842A patent/PT74842B/pt unknown
- 1982-05-04 CA CA000402224A patent/CA1177425A/en not_active Expired
- 1982-05-04 JP JP57075045A patent/JPS57202291A/ja active Pending
- 1982-05-04 DD DD82239578A patent/DD202589A5/de unknown
- 1982-05-04 PL PL1982236281A patent/PL129644B1/pl unknown
- 1982-05-04 EG EG255/82A patent/EG15730A/xx active
- 1982-05-04 PH PH27233A patent/PH17799A/en unknown
- 1982-05-04 HU HU821397A patent/HU189578B/hu unknown
- 1982-05-05 IE IE1067/82A patent/IE52295B1/en unknown
- 1982-05-05 AU AU83412/82A patent/AU557316B2/en not_active Ceased
- 1982-05-05 GR GR68070A patent/GR76520B/el unknown
- 1982-05-05 CS CS823250A patent/CS227700B2/cs unknown
- 1982-05-05 DE DE8282302277T patent/DE3261230D1/de not_active Expired
- 1982-05-05 DK DK201682A patent/DK201682A/da not_active Application Discontinuation
- 1982-05-05 AT AT82302277T patent/ATE10289T1/de not_active IP Right Cessation
- 1982-05-05 EP EP82302277A patent/EP0064409B1/en not_active Expired
- 1982-05-05 GB GB8212984A patent/GB2097794B/en not_active Expired
- 1982-05-05 IL IL65691A patent/IL65691A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SU1151218A3 (ru) | Способ получени антибиотика-макролида | |
| JPH05130860A (ja) | Ｆｋ−５０６の新規な製造方法 | |
| Boeck et al. | NEW AZASTEROIDAL ANTIFUNGAL ANTIBIOTICS FROM GEOTRICHU FLAVO-BRUNNEUM I. DISCOVERY AND FERMENTATION STUDIES | |
| US5563054A (en) | Process for preparation of benzo[B]thiophene glucuronides | |
| EP0547898B1 (en) | Microbial process for the production of trans-4-hydroxy-L-proline | |
| US4384043A (en) | Process for producing the antibiotic nosiheptide | |
| KR870001987B1 (ko) | 엔듀라시딘의 제조방법 | |
| US4973552A (en) | Staurosporine fermentation process | |
| CS227700B2 (en) | Production of narasine antibiotic | |
| JP2711198B2 (ja) | 新規ラパマイシン生産菌 | |
| US4440751A (en) | Broad spectrum antibiotic complex produced by a novel micromonospora | |
| US4309504A (en) | Process for preparing narasin | |
| CA1340204C (en) | Microbiological process for making uk-61,689 and microorganisms useful therefor | |
| JP3107455B2 (ja) | 新規抗生物質ｍｉ４８１−４２ｆ４−ａ及びその製造方法 | |
| US4608343A (en) | Biologically pure culture of Streptomyces majorciensis Labeda | |
| US2996435A (en) | Process for producing azaserine | |
| US4352934A (en) | Antibiotic X-14885A | |
| JPH04261180A (ja) | １３β−１３−デオキシ−２２，２３−ジヒドロアベルメクチン−Ｂｌａ／Ｂｌｂアグリコンの微生物学的製造 | |
| US4830967A (en) | Process for producing antibiotic A80438 | |
| US4447533A (en) | Process to produce antibiotic X-14885A | |
| JPH0625095B2 (ja) | 抗生物質ｓｆ−２４１５物質およびその製造法 | |
| JPH0639480B2 (ja) | 新規マクロライド系抗生物質ｍ１１９ | |
| EP0180045A2 (en) | Benzanthrin compounds | |
| KR20000049023A (ko) | Ｆｒ900482 및 유사 화합물의 신규한 제조방법 | |
| JPH05168488A (ja) | マクロライド系抗生物質の製造法 |