CN1987450A - 一种大豆籽粒维生素e的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于农业生产技术领域。是一种大豆籽粒维生素E含量超声萃取、定性定量检测方法。本发明在传统维生素E检测方法的基础上，改进了维生素E的提取方法和液谱检测的流动相等，同时结合大豆籽粒的微量取样方法，实现了单个大豆籽粒维生素E含量的微量测定，在高维生素E大豆育种和品种改良上具有极其重要的现实意义。
Description
技术领域
本发明属于农业生产技术领域。是一种大豆籽粒维生素E含量超声萃取、定性定量检测方法。
技术背景
维生素E是大豆种子中的重要功能性成分之一，其含量与组成随品种和生长环境的不同而存在差异。据报道，作物种子中维生素E不仅是人类获得天然维生素E的重要来源，在对人体防衰老、抗疾病等方面也具有显著作用，故而引起人们广泛的关注。测定种子中的维生素E不仅关系到衡量营养指标，而且关系到资源的开发利用。当代农作物的育种已进人了生化工程时代，依靠正确的生化测定来筛选现有种质资源中品质状况，具有非常重要的现实意义。
由于维生素E结构复杂，异构体种类多，分析测定困难，多年来许多科学家致力于其分析测定的研究，取得了很大的进展，主要分析方法包括双波电压法、示波法、薄层色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法、荧光分光光度法、高效液相色谱法等。从近年发展看，利用荧光分光光度法测定各类作物中维生素E较多见。它能直观地测出各类作物种子中维生素E的含量，还在于免除了一般分光光度法干扰因素较多、准确性稍差的缺点，又比色谱法步骤简便。可是，目前应用仍不够广泛，主要原因在于试样分离提取时需要通入高纯氨气保护维生素E免受氧化破坏，因而装置复杂，费用较贵。并且，分离提取过程耗时长达16-18小时，使种子中的维生素E难免有所损失，因此在大批量样品的分析测试时，困难较大、经费较多，影响了普遍运用。
高效液相色谱法(HPLC)是近三十年迅速发展的一种分离分析技术，用来分析维生素E能极大地简化样品预处理步骤，与其它方法相比具有干扰小，灵敏度高、快速等优点，是目前较为理想的检测技术。但是，该方法目前只能测定大豆油中的维生素E组分含量，而且不能实现单个籽粒维生素E组分含量的检测，在大豆资源筛选和品种改良上仍存在一定的不足。
为此，我们针对上述缺陷，对大豆籽粒维生素E提取方法、色谱检测流动相等进行改进，同时结合大豆籽粒的微量取样方法，研究出本发明。
发明内容
本发明从以上技术背景出发，对大豆籽粒中的维生素E总量进行超声萃取，把得到的四种不同结构的维生素E混合物离心后，取上清液在液相色谱上进行定性和定量检测。具体提取和检测程序如下：
a.前期准备
药品准备：80％乙醇；1μg/ml母育酚的80％乙醇溶液；
样品准备：单个籽粒编号后，用壁纸刀片在豆粒的远脐端多次切取薄薄的碎片(注意不要超过籽粒的1/3)，用天平称取10-12毫克，放入编好号的带盖的塑料试管中；
b.维生素E的提取
每个样品中加入1ml母育酚乙醇溶液→匀质器混匀10秒→超声波萃取15分钟→室温静止15分钟→匀质器混匀10秒→超声波萃取15分钟→用离心机以13000转/分钟离心15分钟→将上清液移入ep管→用离心机以13000转/分钟离心5分钟→吸取500μl于2ml顶空瓶中，准备分析；
c.维生素E的检测
高效液相色谱(HPLC)的检测条件：用长2m，直径3mm的填充柱，检测波长295nm，柱温40℃；流动相为乙氰和甲醇，分流比为9∶1；流速为0.5ml/min；进样量为30μl；重复次数为3次，检测时间为25-30分钟；
维生素E的定性方法：
根据文献报道的各组分保留时间与实验所得的保留时间判定。在本检测中α、β、γ、δ-维生素E的保留时间分别在18-19、14-15、15-16和12-13分钟之间；
维生素E的定量方法：
本检测采用内标法对各种维生素E组分进行定量，大豆籽粒中各种维生素E组分含量由对应的峰面积与内标物的峰面积的比值求得。
本发明的优点是可以实现单个籽粒样品(10-12毫克左右)的检测，不影响大豆籽粒的继续生长和发育，可以在资源筛选及品种改良的任意阶段进行鉴定和评价，对高维生素E大豆育种和改良提供了有利的技术支撑。
具体实施方式
本发明在中国科学院东北地理与农业生态研究所的“大豆功能营养资源拓宽与改良”课题中得到了应用。在课题实施过程中采用本发明对200多份东北大豆资源进行了分析和评价，得到了2份α-维生素E和3份总维生素E含量较高的大豆遗传材料，对于本课题的完成和高维生素E大豆育种都起到了有效的技术支撑。下面列出了部分大豆资源籽粒中维生素E含量的检测结果：
部分大豆资源籽粒中维生素E含量的检测结果(mg/100g)
| 资源序号 | α-维生素E | β-维生素E | γ-维生素E | δ-维生素E | 总含量 |
| 12345678910 | 3.84±0.184.32±0.344.66±0.413.11±0.213.36±0.182.89±0.130.96±0.114.12±0.350.59±0.312.56±0.26 | 1.26±0.311.44±0.281.61±0.251.04±0.211.12±0.290.98±0.220.73±0.191.22±0.340.56±0.230.85±0.32 | 5.81±0.252.74±0.104.31±0.176.05±0.225.98±0.146.14±0.166.44±0.195.54±0.226.95±0.156.22±0.21 | 3.25±0.111.98±0.151.21±0.083.34±0.182.24±0.094.72±0.165.36±0.191.68±0.126.01±0.214.58±0.23 | 14.16±0.8610.48±0.9410.99±0.5913.54±1.0112.70±0.7314.73±1.1513.49±0.8212.56±1.2114.11±1.1814.21±1.34 |
根据检测结果可以看出，东北大豆资源在维生素E组分含量及总量上都存在很大的遗传变异。比较而言，γ-维生素E和δ-维生素E含量较多，而α-维生素E含量较少，β-维生素E含量更少。这些检测结果与文献报道的基本上是一致的，可见本方法不仅是可行的，而且还在高维生素E大豆育种和改良上具有绝对的优势。
Claims (1)
1.一种大豆维生素E的检测方法，其特征在于先对大豆籽粒中的维生素E总量进行超声萃取，再把得到的四种不同结构的维生素E混合物离心后，取上清液在液相色谱以上进行定性和定量检测，提取和检测程序如下：
a.样品准备
单个籽粒编号后，用壁纸刀片在豆粒的远脐端多次切取薄薄的碎片(注意不要超过籽粒的1/3)，用天平称取10-12毫克，放入编好号的带盖塑料试管中；
b.维生素E的提取
每个样品中加入1ml母育酚乙醇溶液→匀质器混匀10秒→超声波萃取15分钟→室温静止15分钟→匀质器混匀10秒→超声波萃取15分钟→用离心机以13000转/分钟离心15分钟→将上清液移入ep管→用离心机以13000转/分钟离心5分钟→吸取500μl于2ml顶空瓶中，准备分析；
c.维生素E的检测
高效液相色谱(HPLC)的检测条件：用长2m，直径3mm的填充柱，检测波长295nm，柱温40℃；流动相为乙氰和甲醇，分流比为9∶1；流速为0.5ml/min；进样量为30μl；重复次数为3次，检测时间为25-30分钟；在检测中α、β、γ、δ-维生素E的保留时间分别在18-19、14-15、15-16和12-13分钟之间，实现了维生素E的定性检测；本发明采用内标法对各种维生素E组分进行定量，大豆籽粒中各种维生素E组分含量由对应的峰面积与内标物的峰面积的比值求得。
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Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102507809A (zh) * | 2011-11-30 | 2012-06-20 | 河北科星药业有限公司 | 测定亚硒酸钠维生素e注射液中维生素e含量的方法 |
| CN103940654A (zh) * | 2014-05-06 | 2014-07-23 | 山东师范大学 | 从废白陶土中提取维生素e的方法及薄层层析检测方法 |
| CN104297242A (zh) * | 2014-11-03 | 2015-01-21 | 北京市药品检验所 | 快速检测维生素e或含维生素e制剂的方法 |
| CN104914182A (zh) * | 2015-05-29 | 2015-09-16 | 安徽古井贡酒股份有限公司 | 一种利用超高效合相色谱同时快速检测白酒中4种维生素e的方法 |
| CN105510454A (zh) * | 2015-11-24 | 2016-04-20 | 威海百合生物技术股份有限公司 | 一种快速检测保健品中维生素e的方法 |
| CN112444569A (zh) * | 2019-08-28 | 2021-03-05 | 深圳奥萨制药有限公司 | 一种测定复杂组分中维生素e的高效液相色谱分析方法 |
-
2006
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Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102507809A (zh) * | 2011-11-30 | 2012-06-20 | 河北科星药业有限公司 | 测定亚硒酸钠维生素e注射液中维生素e含量的方法 |
| CN103940654A (zh) * | 2014-05-06 | 2014-07-23 | 山东师范大学 | 从废白陶土中提取维生素e的方法及薄层层析检测方法 |
| CN103940654B (zh) * | 2014-05-06 | 2016-08-24 | 山东师范大学 | 从废白陶土中提取维生素e的方法及薄层层析检测方法 |
| CN104297242A (zh) * | 2014-11-03 | 2015-01-21 | 北京市药品检验所 | 快速检测维生素e或含维生素e制剂的方法 |
| CN104297242B (zh) * | 2014-11-03 | 2016-09-07 | 北京市药品检验所 | 快速检测维生素e或含维生素e制剂的方法 |
| CN104914182A (zh) * | 2015-05-29 | 2015-09-16 | 安徽古井贡酒股份有限公司 | 一种利用超高效合相色谱同时快速检测白酒中4种维生素e的方法 |
| CN105510454A (zh) * | 2015-11-24 | 2016-04-20 | 威海百合生物技术股份有限公司 | 一种快速检测保健品中维生素e的方法 |
| CN112444569A (zh) * | 2019-08-28 | 2021-03-05 | 深圳奥萨制药有限公司 | 一种测定复杂组分中维生素e的高效液相色谱分析方法 |
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