CN1961912B

CN1961912B - 一种具有镇痛止血作用的中药组合物

Info

Publication number: CN1961912B
Application number: CN200510115903A
Authority: CN
Inventors: 阙文彬; 廖立东; 李育飞
Original assignee: YOUTA PHARM Manufacturing Co Ltd CHENGDU
Current assignee: Sichuan Hengkang Development Co., Ltd.
Priority date: 2005-11-11
Filing date: 2005-11-11
Publication date: 2010-05-05
Anticipated expiration: 2025-11-11
Also published as: CN1961912A

Abstract

本发明公开一种具有镇痛止血作用的中药组合物及其制备方法。该中药组合物由三七提取物和独一味提取物制成，其中三七提取物和独一味提取物的提取方法为中药领域内的常规方法。同时本发明也公开了提取三七提取物方法、独一味提取物的方法和该组合物制成各种剂型的制备方法。

Description

一种具有镇痛止血作用的中药组合物

技术领域

本发明涉及一种中药组合物及其制备方法，特别是涉及一种具有镇痛止血作用的中药组合物及其制备方法。

背景技术

中医理论认为，人体是由脏腑、气血、经络、皮肉、筋骨等共同组成的统一整体。机体的一切活动，都是脏腑功能的反映，其物质基础主要是气血津液。脏腑通过经络联系全身的皮肉筋骨等组织，各组织之间相互依存，相互制约，保持着相对的平衡，形成统一而复杂的生命活动。一旦外力戕伤，或施行外科手术，不仅皮肤、肌肉、筋骨受损，也同时导致脏腑、经络、气血的紊乱；此时，气血亏耗，抗御外邪之力亦随之降低，邪气容易从伤口内犯，引起局部红肿、肿胀或变生他证。正如《正体类要》所说：“肢体损于外，则气血伤于内，营卫有所不贯，脏腑由之不和。”即是说，损伤与气血阻滞的关系极为密切。当人体遭受外力或手术伤害后，无不伤及经络血脉，发生出血；或血行之道不得宜通，瘀血停积；或血液不能循环流注，离经妄行，往往出现“伤血”的病理变化。故素有“损伤一证，专从血论”的说法。

血液运行不畅，瘀积凝滞；或血溢脉外，离经之血停积于皮下、肌肤腠理之内，或蓄结于脏腑、体腔之中，即成为瘀血证。血为有形之物，故血溢于肌肉之间，则发为肿胀；停于肌肤之间，则局部出现瘀斑；瘀血不行，不通则痛，是以局部疼痛不止，且痛如针刺，固定不移，持续作痛；兼有外邪内犯者，局部还会出现红肿热痛，甚至全身发热。对此瘀血阻滞之证，治宜血活止痛，化瘀止血之法，方可全面切中病机，从而收到良好的愈伤疗效。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有镇痛止血作用的中药组合物；本发明的第二个目的是该组合物原料药的提取工艺和制备工艺。

中药组合物由如下原料药按重量份制成：

三七提取物∶独一味提取物是0.5～5∶1；其中三七提取物和独一味提取物的提取方法为中药领域内的常规方法。

上述原料药的最佳配比为：1∶1、2∶1、3∶1、4∶1、5∶2、或5∶3。

其中三七提取物中三七总皂甙含量不小于50％。

其中三七总皂甙中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1含量不少于50％。

其中独一味提取物中独一味黄酮不少于2.8％。

本发明提取物中提取物中三七提取物还可以选用如下提取方法中的一种：

A、将三七药材淋洗、切片、干燥后，加10～20倍量水，煎煮2～3次，每次0.5～2小时.合并煎煮液，浓缩至相对密度1～2.加乙醇，使溶液中乙醇含量达到60％，静置，滤过.加乙醇，使溶液中乙醇含量达到60％～70％，静置，滤过.加乙醇，使溶液中乙醇含量达到70％～80％，静置，滤过.回收乙醇.将溶液过树脂后加水冷藏12～50小时.将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6.浓缩，干燥，得三七总皂苷粉；

B、将三七药材淋洗、切片、干燥后，加15～70％乙醇回流提取1～2次，每次1～3小时，提取液回收乙醇后，浓缩，加水沉淀，过滤。取上清液过树脂后加水冷藏12～50小时。将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6。浓缩，干燥，得三七总皂苷粉；

其中独一味提取物的制备方法还可以选用如下方法中的一种：

A、将独一味药材，净选，切成1～2cm小段；加10～20倍量水，煎煮2～3次，每次0.5～2小时；合并煎煮液，浓缩至相对密度1～2；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到60％，静置，滤过；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到60％～70％，静置，滤过；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到70％～80％，静置，滤过；回收乙醇；将溶液过树脂后加水冷藏12～50小时；将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6.0；浓缩，干燥。

B、取独一味药材，净选，粉碎。加15～70％乙醇回流提取1～2次，每次1～3小时，提取液回收乙醇后，浓缩，加水沉淀，过滤。取上清液过树脂后加水冷藏12～50小时。将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6。浓缩，干燥。

另外，三七提取物或独一味提取物采用如下提取方法：

有机溶剂提取：用有机溶剂甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚、氯仿、苯或石油醚提取。

浸渍法提取：药材处理后，将5～20倍量的溶剂在常温或温热60～80℃的情况下浸渍12-48小时以溶出其中成分。

渗漉法提取：中药粉碎成粗粉后，不断添加浸出溶剂使其渗过药粉，从渗漉筒下端出口流出浸出液。溶剂用量20-40倍，渗漉速度为3ml/min～10ml/min。

回流法提取：药材处理后，加入5～20倍量溶剂。加热回流10分钟-10小时。

本发明药物组合物可以按照常规方法制成各种口服制剂如：片剂，胶囊，软胶囊，滴丸，缓释片，口崩片或口服液等。

本发明药物组合物注射液的制备方法为：取制备的三七提取物和独一味提取物，加入注射用水，调PH到5.0～7.0，将所得溶液煮沸10～20分钟，加入活性炭0.25～0.5，用0.22μm微孔滤膜滤过，灌装于安瓿瓶中，灭菌，即得。

本发明药物组合物冻干粉针的制备方法为：取制备的三七和独一味提取物，加入注射用水，冷藏，过滤，滤液加入甘露醇、葡萄糖、氨基酸、乳糖、低分子右旋糖酐、氯化钠等药用辅料中的一种或几种及注射用水，搅拌溶解后用微孔膜过滤。滤液灌装于灭菌西林瓶中，冷冻干燥，压塞，即得。

本发明的的药物组合物三七与独一味从中医药理论分析二药的功用相似，将其组方同用，属于中药七情中的相须相使配伍关系，故可协同以增强作用，提高临床疗效。且两药中，三七偏于辛而微温，独一味辛而微寒，经配伍使用，全方药性趋于平和，临床应用无寒热致偏之虑，故其组方合理，符合中医药理论，又能与藏医药的应用经验合璧。

以下实验例用于进一步说明但不限于本发明。

实验例1对小鼠止血试验

1)对小鼠凝血时间的影响：

取20g左右健康小鼠30只(雌雄各半)，随机分为3组，称重后用不同颜色标记，三组均通过灌胃给药.分别给予生理盐水，三七提取物水浸液，独一味提取物水浸液.1小时后用毛细玻璃管旋转插入小鼠内呲静脉取血.自血流进入管内开始计时，至血柱达5cm取出毛细管平放于桌上，隔30s折断毛细管记录凝血时间，见表1.

表1三七提取物、独一味提取物对凝血时间的影响

2)对家兔血浆复钙时间的影响：

自家兔耳缘静脉取血1.8ml，放入加有枸橼酸钠溶液0.2ml的离心管重，混匀后以1000r/min的速度离心10分钟，分离血浆备用。

取试管5只，每管加入家兔血浆和生理盐水各0.1ml，放入37度水浴中温育1min，然后各加入氯化钙溶液0.1ml，混匀后水浴并开始计时。1min后每10s倾斜试管1次，记录自加入钙到出现凝胶状蛋白的时间为给药前复钙时间。

给家兔灌胃三七提取物及独一味提取物1小时后按照上法测定给药后复钙时间，见表2。

表2三七提取物，独一味提取物对血浆复钙时间的影响

分组动物	给药前(s)	给药后(s)
分组动物	给药前(s)	给药后(s)	生理盐水	120.4±15.3	127.3±26.0
三七提取物	123.6±21.6	76.3±18.2	生理盐水	120.4±15.3	127.3±26.0
三七提取物	123.6±21.6	76.3±18.2	独一味提取物	124.2±16.3	82.4±13.9

Ca是内源性凝血的关键因子，试验证明三七提取物和独一味提取物可以有效的缩短血浆复钙时间，促进内源性凝血。

实验例2对小鼠镇痛作用试验

1)热板法：取20g左右健康小鼠20只(雌雄各半)，随机分为2组，称重后用不同颜色标记，两组均通过灌胃给药。分别给予生理盐水，三七提取物和独一味提取物水浸液。给药后15、30、45、60、90min，分别将小鼠放于55摄氏度的热板上，以秒表来测定其痛觉反应时间(以舔后足为指标)，如在60s内无痛觉反应，以60s计算，计算痛阈，见表3.

表3

给药后可以明显提高小鼠的痛阈，延缓痛觉出现时间

2)扭体法：取20g左右健康小鼠20只(雌雄各半)，随机分为2组，称重后用不同颜色标记，两组均灌胃给药。分别给予生理盐水，三七提取物和独一味提取物水浸液。给药30min后给各组小鼠腹腔内注射0.6％醋酸溶液0.2ml/只，观察并记录注射醋酸溶液后20min出现的扭体反应的次数。并按照下式计算镇痛率，见表4.

表4

实验例3独一味水煎煮最佳条件的确定

独一味中所含主要化学成分为水溶性成分，这些化合物在水中溶解度大，独一味注射液是采用水煎煮法提取独一味中有效部分，精制后制成灭菌水溶液，为确定最佳提取工艺参数，选用正交实验法，考察加水量，浸泡时间、煎煮次数、煎煮时间4个因素，每个因素3个水平的实验方案，见表5。

表5因素水平表

注：加水量及煎煮时间括号内的数值分别为第二、第三次加水量及煎煮时间。

取独一味药材，切成段(1～2cm)，按上述实验设计方法提取，分别将各实验方法所得提取液过滤，浓缩，干燥，以每次实验的浸膏粉得率及木犀草的含量为考察指标，选L₉(3⁴)正交实验表进行实验，并对实验结果进行方差分析，结果见表3。

正交实验表明以浸膏粉得率为考察指标，A因素极差最大，其次为C因素，B因素及D因素，从K值分析A₂＞A₃＞A₁，B₃＞B₂＞B₁，C₃＞C₂＞C₁，D₁＞D₃＞D₂。以木犀草素含量为考察指标，A因素极差最大，其次是C因素、B因素及D因素，从K值分析A₂＞A₃＞A₁，B₂＞B₃＞B₁，C₃＞C₂＞C₁，D₃＞D₁＞D₂。

从方差分析结果可以看出，A因素有较显著性差异，其次是C因素，B因素及D因素影响差异不显著，结合表4可知，以干膏粉得率为考察指标，最佳工艺应为A₂B₃C₃D₁，以木犀草素含量为考察指标，最佳工艺为A₂B₂C₃D₃，B因素及D因素影响差异并不显著，有效成分的相对含量B₂＞B₃，D₃＞D₁，所以B因素选B₂，D因素选D₃。综上所述，本制剂最佳选择工艺为A₂B₂C₃D₃(加水煎煮三次，第一次加20倍的水，浸泡0.5小时，煎煮1小时，第二次、第三次各加15倍量水，分别煎煮1小时)。

实验例4三七的提取方法试验研究

本试验选择55％～95％乙醇作为提取溶剂，采用以下3种提取方法：

A、渗漉法：将三七粉碎成粗粉(20～40目)，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗照法(中国药典2005年版一部附录IO)，用溶媒浸渍24h后，以每公斤每分钟1～3ml速度缓缓渗漉，收集相当于三七选定倍量的渗漉液即得。

B、浸渍法：将三七粉碎成粗粉(20～40目)，用选定倍量的溶媒浸渍24h，时时摇动(室温25℃)，滤过，收集滤液即得。

C、水煎醇沉法：将三七粉碎成粗粉(20～40目)，用10倍量、5倍量的水煎煮两次(分别煎煮60，30min，保持微沸)，冷却后，离心分离，合并上清液，浓缩至1倍量体积。加入选定倍量的不同浓度乙醇，搅拌，静置，待沉降完全后，离心，取上清液，并加适量水至总量为选定倍量，见表6。

表6试验因素水平表

采用L₉(3⁴)正交表进行试验，以提取液中三七总皂苷的含量为考察指标，对结果进行统计学处理，结果说明各因素对提取效果的影响程度依次为B＞A＞C。B、A二项因素均有显著性差异，影响最大的是提取方法B(P＜0.05)；其次为乙醇浓度A(P＜0.01)；而乙醇用量C在所考察的范围内则影响很小。因此，各因素的最佳水平组合为A₂B₁C。

试验例5三七总皂甙含量测定试验

吸附树脂的制作：将大孔树脂用丙酮浸泡2d，加热回流12h，抽滤.用丙酮洗至滤液与水(1∶2)混合不产生混浊；用水漂洗除去杂质并洗至无丙酮昧，水浸泡备用。

用滴管吸取浸泡膨胀的树脂加入盛水的层析柱内.打开活塞，保持水向下流动.至装入树脂达6cm高.覆以脱脂棉少许，加中性氧化铝0.2g，再覆盖一层脱脂棉，压紧，用蒸馏水冲洗后备用。

标准曲线的制备精密称取在60℃减压干燥至恒重的人参皂苷Rg对照品适量，加甲醇制成每毫升含1mg的对照品溶液。精密量取10，20，40，60，80，100μl分置于10ml具塞试管中.水浴挥干溶剂，加入新配制的5％香草醛冰醋酸溶液0.2ml、高氯酸0.8ml，于60℃水浴中保温15min，立即置于冰水中玲却5min，加冰醋酸5mL，摇匀，放置10min，以试剂空白作参比，照分光光度法(中国药典1995年版一部附录V)，在545nm波长处立即测定吸光度A，各浓度(c)相应的吸光度A经统计处理，求得回归方程为：C＝200.76A+2.022，r＝0.9999。

对供试品含量测定：其中提取液中三七总皂苷含量测定：精密量取3项下提取液3ml，于水浴上挥至近干，用水溶解并移入10ml量瓶中，定容至刻度。精密量取2ml溶液移入处理好的D₁₀₁大孔树脂柱中，先用15ml水洗涤(流速0.4～0.5ml/min)，弃水洗液，继以70％乙醇25ml洗脱，收集洗脱液于水浴上挥干，残渣用甲醇溶解，混匀。精密量取该供试品溶液40μl置10mI具塞试管中，于水浴中挥干溶剂，照标准曲线制备项下方法自“加入新配制的5％香草醛冰醋酸溶液0.2mL”起，依法测定吸光度，并用回归方程计算即得。

其中药材中三七总皂苷含量测定：取三七适量.碎成细粉.精密称取约1g，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞称定重量，室温冷浸24h后，超声波处理(功率110W，频率33kHz)10min，放冷，补足甲醇至原称定重量，摇匀，静置.精密量取上清液2mL，挥去甲醇，残渣用2ml水定量移入已处理好的大孔吸附树脂柱中，依上法测定.

本发明具体实施例如下：

实施例1：

取三七药材7Kg，淋洗、切片、干燥后，加10～20倍量水，煎煮2～3次，每次0.5～2小时；合并煎煮液，浓缩至相对密度1～2；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到60％，静置，滤过；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到60％～70％，静置，滤过；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到70％～80％，静置，滤过；回收乙醇；将溶液过树脂后加水冷藏12～50小时；将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6；浓缩，干燥，得三七总皂苷粉0.5Kg；

将独一味药材7Kg，净选，切成1～2cm小段；加10～20倍量水，煎煮2～3次，每次0.5～2小时；合并煎煮液，浓缩至相对密度1～2；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到60％，静置，滤过；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到60％～70％，静置，滤过；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到70％～80％，静置，滤过；回收乙醇；将溶液过树脂后加水冷藏12～50小时；将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6.0；浓缩，干燥，得独一味提取物0.2Kg；

将三七总皂苷粉0.5Kg和独一味提取物0.2Kg制备成口服液1000支，每支10ml，患者日服用量30ml。

实施例2：

按照上述方法提取三七和独一味提取物，取三七提取物1Kg，独一味提取物1Kg，加入淀粉等常规辅料，制成片剂1000片，每片重0.4g。患者每日服用12片。

实施例3：

将三七7kg药材淋洗、切片、干燥后，加15～70％乙醇回流提取1～2次，每次1～3小时，提取液回收乙醇后，浓缩，加水沉淀，过滤。取上清液过树脂后加水冷藏12～50小时。将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6。浓缩，干燥，得三七总皂苷粉0.5kg。

取独一味药材7kg，净选，粉碎。加15～70％乙醇回流提取1～2次，每次1～3小时，提取液回收乙醇后，浓缩，加水沉淀，过滤。取上清液过树脂后加水冷藏12～50小时。将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6。浓缩，干燥，得独一味提取物0.2kg。

取三七提取物2Kg，独一味提取物1Kg，加入淀粉等常规辅料，制成硬胶囊1000粒，每粒重0.4g，患者每日服用12粒。

实施例4：

按照上述方法提取三七和独一味提取物，取三七提取物3Kg，独一味提取物1Kg，加入大豆油、蜂蜡等常规辅料，压制成软胶囊1000粒，每粒重0.6g，患者每日服用6粒。

实施例5：

取独一味药材7kg，净选，粉碎.加15～70％乙醇回流提取1～2次，每次1～3小时，提取液回收乙醇后，浓缩，加水沉淀，过滤.取上清液过树脂后加水冷藏12～50小时.将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6.浓缩，干燥，得独一味提取物0.2kg.

取三七提取物4kg，独一味提取物1kg，按照滴丸制备常规方法，滴制成滴丸10000粒，患者每日服用60粒。

实施例6：

取三七提取物4kg，独一味提取物1kg，按照常规制备方法，制成颗粒剂1000袋，每袋10g，患者每日服用30g。

实施例7：

按照实施例3的制备方法得到三七和独一味提取物，取三七提取物500g，独一味提取物200g，加入注射用水，调PH到5.0～7.0，将所得溶液煮沸10～20分钟，加入活性炭0.25～0.5，用0.22μm微孔滤膜滤过，灌装于安瓿瓶中，灭菌，制得注射液1000支。

实施例8：

取三七和独一味药材各7kg，粉碎成粗粉后，加入70％乙醇使其渗过药粉，从渗漉筒下端出口流出浸出液。溶剂用量20～40倍，渗漉速度为3ml/min～10ml/min。回收渗漉液，过滤后过大孔树脂。用70％乙醇洗脱。收集洗脱液过滤干燥后得三七和独一味提取物共700g。加入注射用水，冷藏，过滤，滤液加入甘露醇等药用辅料，搅拌溶解后用微孔膜过滤。滤液灌装于灭菌西林瓶中，冷冻干燥，压塞，制得冻干粉针1000支。

Claims

1.一种具有镇痛止血作用的中药组合物，其特征在于该组合物由如下原料药按重量份制成：三七提取物∶独一味提取物为0.5～5∶1，其中三七提取物和独一味提取物的提取方法为中药领域内的常规方法。

2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该组合物中三七提取物与独一味提取物的重量比为：1∶1、2∶1、3∶1、4∶1、5∶2、或5∶3。

3.如权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于该组合物的三七提取物中的三七总皂甙含量不小于50％。

4.如权利要求3所述的中药组合物，其特征在于其中的三七总皂甙中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1含量不少于50％。

5.如权利要求1、2或4所述的中药组合物，其特征在于其中独一味提取物中独一味黄酮不少于2.8％。

6.如权利要求3所述的中药组合物，其特征在于其中独一味提取物中独一味黄酮不少于2.8％。

7.如权利要求1、2、4或6所述的中药组合物，其特征在于其中三七提取物选用如下提取方法中的一种：

A、将三七药材淋洗、切片、干燥后，加10～20倍量水，煎煮2～3次，每次0.5～2小时；合并煎煮液，浓缩至相对密度1～2；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到60％，静置，滤过；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到60％～70％，静置，滤过；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到70％～80％，静置，滤过；回收乙醇；将溶液过树脂后加水冷藏12～50小时；将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6；浓缩，干燥，得三七总皂苷粉；

B、将三七药材淋洗、切片、干燥后，加15～70％乙醇回流提取1～2次，每次1～3小时，提取液回收乙醇后，浓缩，加水沉淀，过滤；取上清液过树脂后加水冷藏12～50小时；将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6；浓缩，干燥，得三七总皂苷粉。

8.如权利要求1、2、4或6所述的中药组合物，其特征在于其中独一味提取物的制备方法可以选用如下方法中的一种：

A、将独一味药材，净选，切成1～2cm小段；加10～20倍量水，煎煮2～3次，每次0.5～2小时；合并煎煮液，浓缩至相对密度1～2；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到60％，静置，滤过；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到60％～70％，静置，滤过；加乙醇，使溶液中乙醇含量达到70％～80％，静置，滤过；回收乙醇；将溶液过树脂后加水冷藏12～50小时；将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6.0；浓缩，干燥；

B、取独一味药材，净选，粉碎；加15～70％乙醇回流提取1～2次，每次1～3小时，提取液回收乙醇后，浓缩，加水沉淀，过滤；取上清液过树脂后加水冷藏12～50小时；将溶液微孔滤膜过滤后，调节PH后至4.8～6；浓缩，干燥。

9.如权利要求1、2、4或6所述的中药组合物，其特征在于其中三七提取物或独一味提取物采用如下提取方法：

有机溶剂提取：用有机溶剂甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚、氯仿、苯或石油醚提取；

浸渍法提取：药材处理后，将5～20倍量的溶剂在常温或温热60～80℃的情况下浸渍12～48小时以溶出其中成分；

渗漉法提取：中药粉碎成粗粉后，不断添加浸出溶剂使其渗过药粉，从渗漉筒下端出口流出浸出液；溶剂用量20～40倍，渗漉速度为3ml/min～10ml/min；

回流法提取：药材处理后，加入5～20倍量溶剂；加热回流10分钟～10小时。

10.如权利要求1、2、4或6所述的中药组合物在制备具有镇痛或止血作用药物中的应用。