CN102784157A - 纤细薯蓣皂苷的用途以及含有纤细薯蓣皂苷的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及纤细薯蓣皂苷的用途以及含有纤细薯蓣皂苷的药物组合物。所述用途包括纤细薯蓣皂苷用于制备预防和/或治疗急性或慢性炎症的用途，例如可用于治疗妇科炎症。本发明还涉及纤细薯蓣皂苷作为菝葜有效活性成分的用途。本发明还涉及纤细薯蓣皂苷的制备方法。

Description

纤细薯蓣皂苷的用途以及含有纤细薯蓣皂苷的药物组合物

技术领域

本发明涉及菝葜活性成分纤细薯蓣皂苷的用途，以及含有纤细薯蓣皂苷的药物组合物。

背景技术

菝葜，是百合科植物菝葜Smilax chinaL.的根茎，在我国主要分布于长江以南地区，资源丰富。《中国药典》2005年版Ⅰ部有收载，为较常用中药材，具有祛风利湿，解毒散瘀之功效，主要用于妇科多种炎症，疗效显著。中药制剂“金刚藤胶囊”，临床用于治疗妇科炎症疾患，疗效显著。但该中药制剂为传统生产工艺制备，其抗炎物质基础尚不清楚。有研究通过比较菝葜总皂苷和总黄酮的血液流变学结果和大鼠子宫炎症评价，证明菝葜中的皂苷类成分是菝葜治疗慢性盆腔炎的有效部位之一；而黄酮类成分的治疗效果并不显著。随着对菝葜研究的深入，越来越多的研究致力于将菝葜的有效活性部位或活性成分进行提取、分离、纯化，减少无效杂质，以期达到提高生物利用度和药效的目的。但是，菝葜的确切有效部位或有效成分至今仍未有定论。

发明内容

本发明的目的是分离纯化菝葜的有效成分、验证其活性，并制备含有其有效成分的药物组合物。本发明还涉及其有效成分的分离纯化方法。

本发明的一个方面涉及纤细薯蓣皂苷用于制备预防和/或治疗急性或慢性炎症或者镇痛的药物的用途。

在本发明中，所述炎症可以为变质性炎、渗出性炎或增生性炎。

在本发明的一个实施方案中，所述炎症为急性炎症。在本发明的一个实施方案中，所述炎症为慢性炎症。

在本发明的一个实施方案中，所述炎症为妇科炎症，例如为盆腔炎、附件炎或附件炎性包块。在本发明的一个实施方案中，所述妇科炎症为盆腔炎，例如为慢性盆腔炎。

本发明的第二方面涉及纤细薯蓣皂苷作为菝葜有效活性成分的用途。

在本发明中，所述有效成分是指具有一定生物活性，具有治疗作用，可以用分子式和结构式表示，并具有一定物理常数（如熔点，沸点，旋光度，溶解度等）的单体化合物。

本发明的第三方面涉及一种药物组合物，其包括治疗有效量的纤细薯蓣皂苷，任选地，以及一种或多种药用辅料。

在本发明中，所述药用辅料包括但不限于粘附剂、分散剂或表面活性剂等。

在本发明中，纤细薯蓣皂苷可以作为单一有效成分做成制剂，也可以与其他药用或非药用成分配合使用。将纤细薯蓣皂苷利用粘附剂、润湿剂和分散剂等合适的药剂学辅料使其在体液中可以高效的润湿、分散，从而得到纤细薯蓣皂苷的制剂等技术均在本发明申请保护的范围内。在实际应用中，还可以根据需要加入其他常规辅料及成型剂，比如淀粉、糊精、预胶化淀粉、微晶纤维素、羟丙基纤维素、壳聚糖、卡波姆、羧甲基纤维素钠、聚维酮、聚乙二醇、交联聚维酮、微粉硅胶、枸橼酸、甘露醇等。

在本发明中，粘附剂优选淀粉浆、聚维酮和干淀粉，对于不溶于体液的药物不仅具有良好的粘附作用而且聚维酮不仅溶于水而且易溶于乙醇，易于纤细薯蓣皂苷的溶出。表面活性剂可以使用壳聚糖、泊洛沙姆和卵磷脂，因其对纤细薯蓣皂苷有表面润湿作用，降低表面张力，可以增加脂溶性成分纤细薯蓣皂苷的溶解度，促进其分散吸收，利于纤细薯蓣皂苷更好的发挥药效。微晶纤维素、微粉硅胶、聚乙二醇等作为分散剂，本身具有亲水性，利于纤细薯蓣皂苷的润湿、分散，可以增强药物的稳定性。将本发明的纤细薯蓣皂苷与上述辅料配合使用，充分混合均匀，制成的片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂，可以增强纤细薯蓣皂苷的分散性，润湿性，提高其生物利用度。

在本发明的药物组合物中，纤细薯蓣皂苷的含量大于等于60%（重量百分比）。

在本发明的实施方案中，所述的药物组合物的组成为（重量份）：

本发明的第四方面涉及纤细薯蓣皂苷的制备方法，其包括以下步骤：

（1）菝葜生药以60%～80%乙醇提取1～3次，收集提取液；

（2）步骤（1）得到的提取液合并后上聚酰胺柱，流速约3～8BVh，以水洗柱，并收集水洗液；

（3）将步骤（2）的水洗液调pH值至4～5，加氯化钠至1-2mol/L，上非极性大孔吸附树脂柱（例如D101），水洗至洗出液为中性；以60%～80%乙醇，流速约3～8BVh冲洗，收集洗脱液，回收后得总皂苷；

（4）将步骤（3）得到的总皂苷进行硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇-水梯度洗脱，分份收集，得到纤细薯蓣皂苷。

发明的有益效果

本发明分离纯化得到菝葜的有效成分纤细薯蓣皂苷，并制得以纤细薯蓣皂苷为活性成分并包括其它药用辅料的组合物，用实验证明其治疗妇科炎症效果确切，是菝葜的有效成分之一。

由于纤细薯蓣皂苷的脂溶性较强，难溶于水，因而将其制剂应用于人体后，主要药效成分纤细薯蓣皂苷不易被润湿和溶出，如果不能解决这一问题，会影响纤细薯蓣皂苷的吸收。根据纤细薯蓣皂苷的这一特点，本发明将药剂学辅料的应用考虑到其中。通过添加粘附剂、润湿剂、分散剂、表面活性剂等辅料，增强了纤细薯蓣皂苷的分散性，润湿性，提高了其生物利用度。

菝葜具有软化组织，减轻粘连及包块，利尿，解毒等药理作用，临床上多用于治疗外科急性感染、妇科炎症、治疗风湿性关节炎等疾病，本发明证明纤细薯蓣皂苷是菝葜的有效活性部位，为纤细薯蓣皂苷用于治疗上述疾病提供了依据，具有良好的应用前景。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例1纤细薯蓣皂苷、薯蓣皂苷和原薯蓣皂苷的制备

菝葜生药1kg以75％乙醇水浴回流2h，收集醇提液。经3次醇提后，合并醇提液。回收乙醇后上聚酰胺柱（30～60目），流速约5BV(聚酰胺的体积)h。以蒸馏水洗柱，并收集水洗液。然后以95％乙醇，流速约2.5BVh。冲洗聚酰胺柱，收集洗脱液。将上述收集的水洗液用NaHCO3调pH值至4～5，加氯化钠至1.5mol／L，上大孔树脂柱（D101，天津农药股份有限公司树脂分公司，批号：20020407），水洗至洗出液至中性。以75％乙醇，流速约2.5BVh。冲洗，收集洗脱液，经旋转蒸发仪回收乙醇得总皂苷。取总皂苷进行硅胶柱（青岛海洋化工厂生产）色谱，氯仿－甲醇－水梯度(50:1:0.1→5:l:0.1→5:l:0.1→60:35:10→5:5:2)洗脱，分份收集，每份100ml，共160份分别合并93-94，98-99流份，减压回收溶剂，无水乙醇重结晶，得到无色结晶薯蓣皂苷390mg（93-94流份），和纤细薯蓣皂苷504mg(98-99流份)。其中薯蓣皂苷的结构为薯蓣皂苷元－3－O－{〔α－L－吡喃鼠李糖基(1→2)〕α－L－吡喃鼠李糖基(1→4)}－β－D－吡喃葡萄糖苷；纤细薯蓣皂苷的化学结构为薯蓣皂苷元-3－O－{〔α－L－吡喃鼠李糖基(1→3)〕－β－D－吡喃葡萄糖基(1→3)}－β－D－吡喃葡萄糖苷。将122-125流分经制备高效液相色谱分离(50%乙腈水溶液作流动相)，得化合物原薯蓣皂苷98mg。以上化合物经过红外光谱/液质联用鉴定。

实施例2含有纤细薯蓣皂苷制剂的制备（1）

取按照实施例1方法制备的纤细薯蓣皂苷80g，加入泊洛沙姆5g，聚维酮2.5g，卵磷脂2.5g，微晶纤维素5g。将以上成分充分混匀，加入粘合剂10％淀粉浆5g，然后制粒，干燥，整粒，共制备200片，包衣。

实施例3含有纤细薯蓣皂苷制剂的制备（2）

取按照实施例1方法制备的纤细薯蓣皂苷60g，加入泊洛沙姆10g，聚维酮5g，卵磷脂5g，微晶纤维素10g。将以上成分充分混匀，加入粘合剂10％淀粉浆10g，然后制粒，干燥，整粒，压200片，包衣。

实施例4含有纤细薯蓣皂苷制剂的制备（3）

取按照实施例1方法制备的纤细薯蓣皂苷90g，加入壳聚糖1g，卡波姆1g，泊洛沙姆1g，卵磷脂1g，聚维酮1g，将以上药材充分混合均匀，加入10％淀粉浆5g，然后制粒，干燥，整粒，最后分装成200粒胶囊。

实施例5纤细薯蓣皂苷的药效学实验

本试验中纤细薯蓣皂苷组的药物为实施例2中的制剂，由南方医院药学部实验室制备。

模型的建立：按向海燕在《金刚藤分散片对大鼠慢性盆腔炎的药效学研究》（“中药材”2007年第4期）中的方法。以液化苯酚5mL，西黄耆胶1L，甘油4mL，加蒸馏水至20mL，配成25％的苯酚胶浆。大鼠按45mg／kg腹腔注射4％水合氯醛(300mg/kg)进行麻醉，腹部常规消毒，在下腹正中切口3cm，暴露子宫，用4号针头在大鼠子宫右侧进针，向卵巢方向注入苯酚胶浆0.05mL，诱发慢性盆腔炎模型，最后分层缝合腹壁及皮肤。

目前，建立慢性盆腔炎模型的方法一般分为两种：化学性烧伤致炎和生物性因子致炎。化学性烧伤致炎一般采用苯酚胶浆，生物性因子致炎一般采用大肠杆菌。本实验选择化学性烧伤致炎的造模方法。其原因之一是：盆腔炎患者无论急性还是慢性，其血液均处于高凝状态。我们从预实验结果来看，以苯酚胶浆致炎，大鼠在全血粘度各项指标的改变均较大肠杆菌致炎的大鼠显著。原因之二是治疗慢性盆腔炎目前一般采用中西医结合或者物理化学结合的方法。这是因为盆腔慢性炎症导致组织增厚，疤痕粘连，阻碍了抗生素的进入，不能彻底消灭残余的致病菌，令病情反复，难以根治。菝葜的作用应该在于软化组织，减轻粘连及包块。因此，选择化学性烧伤致炎所致的大鼠盆腔水肿、粘连更适合用于筛选菝葜的有效部位。在炎症时血液处于高凝状态，因此血液粘度的改变可以作为评价盆腔炎的指标之一。

实验方法：按前述的模型建立方法进行造模

7天后将48只模型大鼠按体重随机分为：生理盐水组（即模型组）、金刚藤胶囊组（湖北福人药业股份有限公司）、总皂苷组、纤细薯蓣皂苷组、薯蓣皂苷组、原薯蓣皂苷组（其中总皂苷、薯蓣皂苷和原薯蓣皂苷按照实施例1方法制备），每组8只。分别以生理盐水、金刚藤胶囊混悬液(0．54g／kg)、总皂苷、纤细薯蓣皂苷、薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷溶液(以上四种成分的使用剂量均为0.065g／kg)灌胃，每天1次，连续14天。正常对照组（8只正常大鼠）给予等量生理盐水，其他条件与前面六组一致。第15天，腹主静脉取血，送南方医院检验科检测血粘度，处死大鼠取其子宫，除去脂肪，左右两侧子宫分别用分析天平称重。

统计方法：采用SPSS 13．0的单因素方差分析(One-WayANOVA)，以及配对t检验。两者检验水准均为0.05。

实验结果：

1.血液流变学结果

在对各组样本进行方差齐性检验(Levene检验)后,发现各方差齐性。随后进行方差分析,发现各样本均数差异有统计学意义(P<0.000),遂应用LSD检验进行多重比较。模型组与正常对照组比较，全血高切、中切、低切均有差异(P<0.001)；金刚藤胶囊组作为阳性对照药，其全血粘度的各项指标较模型组均有显著差异(P<0.05)。模型组、正常对照组和阳性对照组，三者在全血粘度指标上的改变，说明了全血粘度作为指标能够客观、明显的反映出血液在不同生理条件下的改变，同时也说明了模型建立的可靠性。

总皂苷组、纤细薯蓣皂苷组、薯蓣皂苷组和原薯蓣皂苷组的大鼠经过治疗，与模型组比较，血瘀状态得到显著改善，各项指标存在统计学差异（P<0.05）。多重比较结果显示，在全血中切（100mps／s）时，纤细薯蓣皂苷组和金刚藤胶囊组同正常对照组均无统计学差异（P>0.05）,在全血中切（30mps／s）时，纤细薯蓣皂苷组同正常对照组无统计学差异（P>0.05）。可见，在全血中切（30mps／s）时，纤细薯蓣皂苷组疗效最明显，而全血中切（100mps／s）时，纤细薯蓣皂苷组和金刚藤胶囊组的疗效相同。

除在全血高切情况下，总皂苷组与薯蓣皂苷组无统计学差异（P>0.05）外，金刚藤胶囊组、总皂苷组、纤细薯蓣皂苷组、薯蓣皂苷组和原薯蓣皂苷组两两比较均存在统计学差异。其中，金刚藤胶囊组和纤细薯蓣皂苷组相比，所有血液流变状态下均存在统计学差异（P<0.05），且所有全血粘度指标后者均小于前者，由此推断在改善血瘀状态效果上，后者优于前者；纤细薯蓣皂苷组和总皂苷组相比，所有血液流变状态下均存在统计学差异（P<0.05），说明两者在改善血瘀状态上有差异，从全血粘度指标来看，纤细薯蓣皂苷组的效果整体优于皂苷组。薯蓣皂苷组、原薯蓣皂苷组分别和纤细薯蓣皂苷组相比，所有血液流变状态下均存在统计学差异（P<0.05），且所有全血粘度指标纤细薯蓣皂苷组均小于薯蓣皂苷组（或原薯蓣皂苷组），由此推断，在改善血瘀状态效果上,纤细薯蓣皂苷组效果优于前两组（P<0.05）（结果见表1）。

表1试验药物对大鼠血粘度的影响

其中SD为标准差（Std.Deviation），下同。

2．大鼠子宫炎症评价

通过比较两侧子宫重量对大鼠子宫炎症进行评价，从表2可见，模型组各实验大鼠，右侧子宫(致炎)重于左侧子宫(未致炎)的重量，经配对t检验处理，其差异有统计学意义(P<0.05)。其余各组差异并不显著。

表2试验药物对大鼠子宫炎症的影响

以上实验结果表明，纤细薯蓣皂苷的纯化提取物的抗炎效果优于菝葜总皂苷提取物，与菝葜皂苷中其它成分薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷相比亦有明显的抗炎优势。由此可知菝葜中纤细薯蓣皂苷是菝葜治疗盆腔炎的有效成分之一。

实施例6纤细薯蓣皂苷的药效学实验

本试验中纤细薯蓣皂苷组的药物为实施例2中的制剂，由南方医院药学部实验室制备。

1.二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型的制作及药效学实验

将48只昆明鼠：生理盐水组（空白对照组）、金刚藤胶囊组（湖北福人药业股份有限公司）、纤细薯蓣皂苷低剂量组、纤细薯蓣皂苷中剂量组、纤细薯蓣皂苷高剂量组和强的松组，每组10只，进行灌胃（具体剂量参见表3），每天1次，连续7天。

于末次灌胃给药后60min，以微量注射器将二甲苯涂于小鼠右耳前后两面相同部位，每面各0.01ml，每鼠共0.02ml，左耳做空白对照，4h后颈椎脱臼处死小鼠，沿耳廓基线剪下双耳，用直径8mm打孔器将左右两耳廓相同部位等面积取下两圆耳片，用电子天平准确称出其质量。计算公式：

耳廓肿胀度（mg）＝右耳片重量－左耳片重量

实验结果见表3。

表3纤细薯蓣皂苷对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响（

n＝10）

与空白组比较：*P<0.05

实验结果具体为：小鼠耳廓平均肿胀度进行单向方差分析，F=3.039，P=0.017，表示各组之间差异有显著性。纤细薯蓣皂苷中剂量组耳廓平均肿胀度与空白对照组比较，有显著性差异（P=0.003）；金刚藤胶囊组与空白对照组比较（P=0.319），差异无显著性；在相同剂量下纤细薯蓣皂苷对小鼠耳廓肿胀抑制率明显优于原剂型阳性对照药金刚藤胶囊组（分别是36.92%、12.31%）。金刚藤胶囊组与强的松组比较有显著性差异（P=0.035）。强的松组小鼠耳廓平均肿胀度与空白组比较有显著性差异（P=0.003）。

药物对小鼠耳廓肿胀抑制率分别是：强的松组>纤细薯蓣皂中剂量组>纤细薯蓣皂苷低剂量组>纤细薯蓣皂苷高剂量组＞金刚藤胶囊组。

以上实验结果表明，纤细薯蓣皂苷对急性炎症具有较好的抑制作用。

2．蛋清致大鼠足跖肿胀模型的制作及药效学实验

实验分组、给药方法同实施例6中的1，，每组10只，进行灌胃（具体剂量参见表4、5），每天1次，连续7天。实验前将每只大鼠左后足踝关节处正面上端用圆珠笔作一清晰横线，用排水法足容积测定装置测量各组大鼠左后踝关节下相同位置致炎前的足跖体积，于末次给药后1小时，用0.25ml注射器吸取刚配制好的100％新鲜鸡蛋清，用4号针头注入大鼠左后足跖皮下（自足跖中部向下和向上各注入一部分），0.05ml/爪，测致炎后5分钟、30分钟、1、2、4、6小时的大鼠足跖体积，为了尽可能减少误差，每只鼠每次连续测两遍，取平均值。观察大鼠足跖肿胀到达高峰时间和消退时间。计算公式：

肿胀度＝致炎后足跖容积－致炎前足跖容积

具体实验结果见表4、表5。

表4纤细薯蓣皂苷对蛋清致大鼠足跖肿胀度的影响（

n＝10）

与空白组比较：*P<0.05；与强的松组比较：△P<0.05

表5纤细薯蓣皂苷对蛋清致大鼠足跖肿胀的抑制率（n＝10）

实验结果具体为：大鼠致炎前、后5分钟足跖肿胀度统计学分析无显著性（P=0.330，P=0.271），说明数据恰当，真实可信，并说明致炎前足跖容积不是协变量，对致炎后足跖肿胀度无影响。

大鼠致炎后30min（F=4.918，P=0.001）、1h（F=5.387，P=0.000）、4h（F=4.515，P=0.002）、6h（F=3.673，P=0.031），表明各组之间差异有显著性。大鼠足跖致炎30min后各时间段肿胀度空白对照组与强的松组比较有显著性差异（除6h的P=0.001，余P值均为0.000）。

纤细薯蓣皂苷中、高剂量组与空白对照组比较差异显著，30min（P值均为0.001，），1h（P=0.005，P=0.001），4h（P=0.025，P=0.007），6h（P=0.033，P=0.029）。纤细薯蓣皂苷低剂量组与空白对照组比较差异无显著性，30min（P=0.342），1h（P=0.259），4h（P=0.268），6h（P=0.206）。

大鼠足跖肿胀度曲线呈抛物线状，致炎后5min立即升高，致炎后1h左右达高峰，致炎后6h后逐渐下降，纤细薯蓣皂苷组大鼠致炎后足跖肿胀度曲线呈抛物线状，且随剂量的增大峰值下移。最高峰值分别是：空白对照组>金刚藤胶囊组>纤细薯蓣皂苷低剂量组>纤细薯蓣皂苷中剂量组>纤细薯蓣皂苷高剂量组>强的松组。

纤细薯蓣皂苷组对大鼠足跖肿胀抑制作用在致炎后5min立即起效，在致炎后6h后逐渐下降。纤细薯蓣皂苷中、高剂量组对大鼠足跖肿胀抑制率均大于30％。

以上实验结果表明，纤细薯蓣皂苷对急性炎症具有较好的抑制作用。

3．大鼠棉球肉芽肿模型的制作与取出及药效学实验

大鼠棉球肉芽肿模型的制作：将大鼠以戊巴比妥钠30mg/kg麻醉，剪除大鼠下腹中部毛，碘酒酒精消毒，正中轻轻切开腹部皮肤约2cm（注意勿伤及腹壁肌层），从切口向两侧腹股沟皮下分别塞入高压灭菌棉球各1个（每个重50mg±1mg，各加入氨苄青霉素1mg/0.1ml浸泡，分别放入高压灭菌青霉素粉针瓶中，50℃烘箱烤干备用），缝合腹壁皮肤，消毒术区，纱布覆盖。将清醒后的造模大鼠随机分组，灌胃给药。实验分组同实施例6中的1，每组10只，进行灌胃（具体剂量参见表6），每天1次，连续7天。

大鼠棉球肉芽肿的取出：于造模术后第8天称大鼠体重，颈椎脱臼处死大鼠，无菌操作从原切口取出棉球，分别放入高压灭菌青霉素粉针瓶中，在60℃烤箱放置12小时后用电子天平精密称重，减去原棉球重量即为肉芽肿净重。动物摄食量的降低或体重减轻亦可降低肉芽肿重量，故按mg（肉芽肿）/100g（体重）表示。计算公式：

肉芽肿净重＝棉球肉芽肿重量－植入棉球重量

结果见表6。

表6纤细薯蓣皂苷对大鼠棉球肉芽肿的影响（

n=10）

与空白组比较：*P<0.05；与强的松组比较：△P<0.05

实验结果具体为（见表6）：各组大鼠棉球肉芽肿净重单向方差分析（F=2.668，P=0.032）,表明各组差异有显著性。空白对照组大鼠棉球肉芽肿模型肉芽肿净重与强的松组比较有非常显著性差异（P＝0.001）。

纤细薯蓣皂苷中、高剂量组肉芽肿净重与空白对照组比较有显著性差异（P=0.034，P=0.020），而金刚藤胶囊组肉芽肿净重与空白对照组比较无显著性差异（P=0.130）。药物对大鼠棉球肉芽肿的抑制率高低分别是：强的松片组>纤细薯蓣皂苷高剂量组>纤细薯蓣皂苷中剂量组>纤细薯蓣皂苷低剂量组>金刚藤胶囊组>空白对照组。

以上实验结果表明，纤细薯蓣皂苷对慢性炎症具有较好的抑制作用。

4.醋酸致小鼠扭体实验

实验分组及给药方法同实施例6中的1，其中将强的松组改为双氯芬酸组，具体剂量见表7。于末次给药后60分钟后，分别给予每鼠腹腔注射0.6％冰醋酸溶液0.2ml/只昆明鼠，立即观察并记录15分钟内小鼠扭体反应情况（腹部内陷、躯干与后腿伸张、臀部抬高），对各组抑制率进行比较。计算公式：

结果见表7。

表7纤细薯蓣皂苷对醋酸致小鼠扭体试验的影响（x+s，n＝10）

与空白组比较：*P<0.05；与双氯芬酸钠组比较：△P<0.05

实验结果具体为（见表7）：小鼠扭体次数进行单向方差分析（F=3.151，P=0.014），各组之间有显著性差异。空白对照组小鼠扭体均数与双氯芬酸钠肠溶片组比较有显著性差异（P＝0.001）。

纤细薯蓣皂苷组随剂量增加，小鼠扭体次数逐渐减少，纤细薯蓣皂苷中、高剂量组与空白对照组比较有显著性差异（P=0.012，P=0.004），金刚藤胶囊组与空白对照组比较（P=0.017），有显著性差异。

各组小鼠扭体抑制率分别是：双氯芬酸钠肠溶片组>纤细薯蓣皂苷高剂量组>纤细薯蓣皂苷中剂量组>金刚藤胶囊组>纤细薯蓣皂苷低剂量组>空白对照组。

结果显示纤细薯蓣皂苷各组扭体抑制率随剂量增加而逐渐增高，纤细薯蓣皂苷中、高剂量组的扭体抑制率（分别是59.34%、69.23%）均大于50％，与阳性对照原剂型药金刚藤胶囊（56.04%）相当，但低于双氯芬酸钠肠溶片组（81.32%）。

以上实验结果表明，纤细薯蓣皂苷具有较好的镇痛作用。

尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。

Claims (8)

1.纤细薯蓣皂苷用于制备预防和/或治疗急性或慢性炎症或者镇痛的药物的用途。

2.权利要求1的用途，其中所述的炎症为妇科炎症。

3.权利要求2的用途，其中所述的妇科炎症为盆腔炎、附件炎或附件炎性包块。

4.纤细薯蓣皂苷作为菝葜有效活性成分的用途。

5.药物组合物，其包括治疗有效量的纤细薯蓣皂苷，任选地，以及一种或多种药用辅料。

6.权利要求5的药物组合物，其中所述药用辅料包括分散剂、润湿剂、粘附剂和表面活性剂。

7.权利要求5或6的药物组合物，其中纤细薯蓣皂苷的含量大于等于60%（重量百分比）。

8.纤细薯蓣皂苷的制备方法，其包括以下步骤：

（1）菝葜生药以60%～80%乙醇提取1～3次，收集提取液；

（2）步骤（1）得到的提取液合并后上聚酰胺柱，流速约3～8BVh，以水洗柱，并收集水洗液；

（3）将步骤（2）的水洗液调pH值至4～5，加氯化钠至1-2mol/L，上非极性大孔吸附树脂柱（例如D101），水洗至洗出液为中性；以60%～80%乙醇，流速约3～8BVh冲洗，收集洗脱液，回收后得总皂苷；

（4）将步骤（3）得到的总皂苷进行硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇-水梯度洗脱，分份收集，得到纤细薯蓣皂苷。