CN1957927B - 三萜皂苷及其衍生物的脂微球制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种三萜皂苷及其衍生物类药物的脂微球制剂及其制备方法。本制剂是以三萜皂苷及其衍生物类药物为活性成分，加以药学上可接受的注射或口服用油、乳化剂、辅助乳化剂、稳定剂、等渗剂、抗氧化剂、注射用水或制药用水制备而成的脂微球制剂，其中三萜皂苷及其衍生物类药物浓度为0.001～10W/V％。

Description

三萜皂苷及其衍生物的脂微球制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种三萜皂苷及其衍生物的脂微球制剂及其制备方法。

背景技术

三萜皂苷分布于五加科、桔梗科、远志科、豆科、伞形科等植物中，许多中药如人参、柴胡、甘草等都含有三萜皂苷。经药理和临床证明，三萜皂苷具有免疫、防治心血管疾病、抗肿瘤等多方面的生物活性和药理作用。

例如，七叶皂苷(escin)是七叶树科欧马栗或中药娑罗子的主要活性成分，属于三萜皂苷类药物。七叶皂苷及其衍生物具有抗水肿、抗炎和抗静脉紧张性作用，能恢复毛细血管的正常通透性，增加静脉张力，改善微循环，临床上用于各种病因引起的脑水肿及伴发的脑功能失调、创伤或手术后引起的炎症与肿胀、静脉回流障碍性疾病、脊椎综合症等的治疗。经实验表明，七叶皂苷及其衍生物除具有抗炎、抗水肿和增强静脉张力作用外，还具有抑制胃酸分泌和抑制胃排空作用、清除活性氧作用、协同抗肿瘤作用、抑制乙醇吸收作用及降糖活性。七叶皂苷及其衍生物药理作用的多样性使得其已经广泛应用于临床，近几年，其药理作用机制亦逐渐被认识，被认为是无明显激素副作用的新型激素。

由于七叶皂苷不溶于水，临床上多用其钠盐。目前上市的有七叶皂苷钠片(商品名：欧开)、七叶皂苷钠肠溶胶囊、复方七叶皂苷钠凝胶(商品名：欧莱)、七叶皂苷钠注射液(商品名：麦通纳)。现阶段临床上使用最广泛的制剂为七叶皂苷钠注射液，临床应用结果显示，七叶皂苷钠注射液疗效确切，但临床副作用较大，如血管痉挛、静脉炎、用药部位疼痛等。

又如，三七总皂苷(total saponins of panax notognseng，PNS)是五加科人参属植物三七的主要有效活性成分，含有多种单体皂苷。具有扩张血管，降低心肌耗氧量，抑制血小板凝集，延长凝血时间，降血脂，清除自由基，抗炎，抗氧化等药理作用，临床上主要用于心脑血管疾病的治疗，如：缺血性脑血管疾病(脑动脉粥样硬化、脑血栓、脑栓塞、短暂性脑缺血)脑出血后遗症；心血管疾病(心绞痛、冠心病、心肌梗塞)；周围血管管流障碍性疾病(血栓闭塞性脉管炎、血稠等)。也可用于视网膜血管阻塞、玻璃体出血、挫伤性出血等。近年来随着对其研究的不断深入，又发现了PNS许多新的药理作用，包括缺血再灌注损伤的保护作用、对心肌的保护作用、对神经细胞损伤的保护作用、抗炎作用、促进造血细胞生长作用、对脊髓损伤早期的保护作用、抗纤维化作用等。

PNS中包括人参皂苷Rb1和人参皂苷Rg1等多种活性单体，Rb1和Rg1在PNS中含量最高，各占PNS的30％左右。目前有关三七总皂苷的制剂有片剂、软胶囊、注射液、鼻腔用制剂、脂质体等。动物实验显示，Rb1在大鼠体内的口服绝对生物利用度仅为4.35％，且极易为肠道细菌和酶所降解；Rg 1的口服生物利用度为18.40％，且在血中消除很快，因此三七总皂苷口服制剂的生物利用度差。而注射液的不良反应(如过敏反应)日益增多也给其使用带来不便。另外，脂质体制剂制备工艺复杂，且成本较高，因此不利于大规模应用。

脂微球(lipid microsphere，LN)是以植物油为基质，外包以磷脂的纳米球，粒径在200nm左右，是20世纪80年代末上市的新型靶向给药系统的载体，它可选择性蓄积于炎症及肿瘤部位，使药物在靶区浓度超出传统制剂的数倍至数百倍，明显提高治疗效果、减少不良反应，达到高效低毒的作用。此外，脂微球制备工艺简单，药物包封率高，安全性及稳定性好。日本在此领域的研究处于领先水平，Marianna大学的水岛裕教授所在的研究组从1980年起经8年研究开发了LN制剂，目前在日本上市的LN产品有：地塞米松棕榈酸酯(商品名：Limethason)、前列腺素E1(商品名：Palux)、氟吡咯芬(商品名：Lipfen)、乙氧基乙酯(商品名：Ropion)，其它进入临床研究的药物有：前列腺素E1(PGE1)类似物AS013，前列环素(PGI2)甲酯衍生物。目前在我国上市的LN产品为PGE1注射液(商品名：凯时)，是将PGE1封入直径为0.2μm的脂微球中，由于脂微球对病变血管有特殊亲和性，因此可将PGE1运送到特定的病变部位；同时在脂微球的屏障保护下，PGE1在肺部的失活率明显降低。凯时的给药剂量仅为PGE1粉针剂的1/10，从而极大地降低了副作用。迄今为止，国内外未见三萜皂苷及其衍生物脂微球制剂的文献及专利报道。

发明内容

本发明的技术方案提供了一种三萜皂苷及其衍生物脂微球制剂，它可作为临床治疗的药物制剂。本发明还提供了该脂微球制剂的制备方法。

本发明涉及一种三萜皂苷及其衍生物脂微球制剂，其包括作为活性成分的三萜皂苷及其衍生物为活性成分，药学上可接受的注射或口服用油、乳化剂、辅助乳化剂、稳定剂、等渗剂、抗氧剂、水，其中三萜皂苷及其衍生物浓度为0.001～10W/V％。

其中所述的脂微球制剂为静脉给药脂微球制剂、口服脂微球制剂。

本发明中所述的三萜皂苷及其衍生物选自①七叶皂苷或七叶皂苷氨基酸盐或七叶皂苷碱金属盐，其中优选七叶皂苷；②三七总皂苷或单体三七皂苷，其中优选人参皂苷Rb1或人参皂苷Rg1；③人参皂苷；④绞股兰皂苷；⑤柴胡皂苷；⑥甘草皂苷等。

本发明中所述的注射或口服用油选自大豆油、芝麻油、橄榄油、玉米油、麻油、棉籽油、蓖麻油、茶油、红花油、中长链脂肪酸酯中的一种或两种或两种以上的混合物，其中优选大豆油、芝麻油。

本发明中所述的乳化剂选自天然磷脂、合成磷脂、胆固醇、泊洛沙姆、聚氧乙烯脂肪醇醚类、聚氧乙烯脂肪酸酯类、蔗糖脂肪酸酯类、单硬脂酸甘油酯中一种或两种或两种以上的混合物，其中优选天然磷脂、泊洛沙姆。

本发明中所述的辅助乳化剂选自12～20个碳链的高级脂肪酸及其盐，其盐为生理上可接受的盐。

本发明中所述的稳定剂选自白蛋白、胶原、环糊精及其衍生物、PVP、PVA、聚乙二醇、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、吐温、司盘、右旋糖苷、甘露醇中一种或两种或两种以上的混合物。

本发明中所述的等渗剂选自甘油、葡萄糖、氯化钠中一种或两种或两种以上的混合物。

本发明中所述的抗氧剂选自V_c、V_E、安息香酸、枸橼酸及其盐、山梨醇、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠中一种或两种或两种以上的混合物。

本发明提供了三萜皂苷及其衍生物脂微球制剂的制备方法，包括如下步骤：

a.将三萜皂苷或其衍生物加入注射用油中，混合均匀，再加入乳化剂，混合均匀，制成油相；

b.将乳化剂、其他附加剂及注射用水用高速混合器混合均匀，制成水相；

c.将水相加入油相或将油相加入水相，粗乳化；

d.用均质机进行细乳化；

e.取上述脂微球制剂灌封于安瓿或输液瓶中，充氮气，105℃灭菌45分钟。

附图说明：

图1七叶皂苷脂微球制剂的粒径及其分布

具体实施方式：

以下实施例旨在具体说明本发明，但不限定本发明的保护范围。

实施例1：七叶皂苷的脂微球

称取七叶皂苷5mg，加入无水乙醇200μl溶解，与大豆油10g混合均匀，加入注射用蛋黄卵磷脂(磷脂酰乙醇胺含量约2％)1.2g，混合均匀。将浓甘油1.5g、油酸0.1g(纯度99％，相当于总量的0.2％)，加入87ml蒸馏水中，混合均匀。在5℃下，将油、水两相用高速混合器粗乳化(10000rpm，20分钟)。随后，用均质机进行细乳化(于40℃以下、0.22μm滤膜、反复20次)。得到75g白色脂质微球，平均粒径186nm。取上述脂微球制剂灌封于安瓿或输液瓶中，充氮气，105℃灭菌45min。

实施例2：实施例1脂微球粒径测定

将实施例1脂质微球稀释后，用激光散射粒径分析仪测定脂微球制剂的粒径及分布，结果见图1。

由图1可见，实施例1脂质微球的粒径大小符合正态分布，10％的粒径小于147nm，50％的粒径小于182nm，90％的粒径小于219nm。

实施例3：实施例1脂微球稳定性检测

将实施例1脂微球制剂分别于4℃、25℃、45℃放置6个月，脂微球制剂的外观、粒径等理化性质及含量均未发生明显变化，表明该制剂稳定。

实施例4：实施例1脂微球制剂包封率的测定

将实施例1脂微球制剂置于离心管中，10000rpm，离心30min，取上清液，用甲醇溶液溶解，HPLC法测定七叶皂苷含量，确定被包封的七叶皂苷的量W_包。脂微球制剂中七叶皂苷的总量为W_总。按下式计算包封率：

Q％＝W_包/W_总×100％

实施例1脂微球制剂包封率大于98％。

实施例5：实施例1脂微球制剂无菌检查

取实施例1脂微球制剂，按照无菌检查法检查(中国药典2005版附录)，以实施例1脂微球制剂无菌检查合格。

实施例6：实施例1脂微球制剂热原检查

取实施例1脂微球制剂，按照热原检查法检查(中国药典2005版附录)，实施例1脂微球制剂热原检查合格。

Claims (4)

1.一种脂微球制剂，其包括作为活性成分的三萜皂苷及其衍生物，药学上可接受的注射或口服用油、乳化剂、辅助乳化剂、稳定剂、等渗剂、抗氧剂、水，其中三萜皂苷及其衍生物浓度为0.001～10W/V％，脂微球的粒径分布范围在50～1000nm；其中，

所述的三萜皂苷及其衍生物选自①七叶皂苷或七叶皂苷氨基酸盐或七叶皂苷碱金属盐，和②甘草皂苷；并且

每100ml脂微球制剂含三萜皂苷及其衍生物1～10000mg、注射或口服用油为1～50ml、乳化剂为0.01～5g、辅助乳化剂为0.01～2g、稳定剂为0.01～5g、等渗剂为0.01～8g、抗氧剂为0.01～3g，其余为注射用水或制药用水。

2.权利要求1的脂微球制剂，其中所述的三萜皂苷及其衍生物是七叶皂苷。

3.权利要求1或2的脂微球制剂，其为静脉注射用脂微球制剂、口服脂微球制剂。

4.权利要求1至3任一项脂微球制剂的制备方法，其包括如下步骤：

a.将三萜皂苷及其衍生物加入注射用油中，混合均匀，再加入乳化剂，混合均匀，制成油相；

b.将乳化剂、其它附加剂及注射用水用高速混合器混合均匀，制成水相；

c.将水相加入油相或将油相加入水相，粗乳化；

d.用均质机进行细乳化；

e.取上述脂微球制剂灌封于安瓿或输液瓶中，充氮气，105℃灭菌45分钟。

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