CN1931259A - 从木瓜中提取有效成分的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从木瓜中提取有效成分的方法,包括如下步骤:将皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末置于萃取釜中,连续通入CO2进行萃取洗脱,收集萃取时间为0.5~5小时的流出萃取釜的CO2,卸压至常压,CO2放空或加压后回用,获得卸压后的残留物,即为木瓜有效成分,萃取釜中CO2为超临界状态。采用本发明的方法提取木瓜中有效成分,选择性高,能够满足有关方面的需要。
Description
技术领域
本发明涉及一种提取木瓜有效成分的方法。
背景技术
皱皮木瓜Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai[C.lagenaria(Loisel)Koidz],为蔷薇科木瓜属植物贴梗海棠的果实。
据现代医学论证,皱皮木瓜果实含有:皂甙、苹果酸、维生素、超氧化物歧化酶(简称SOD)及黄酮类等人体所需的营养成分。主要具有舒经活络、和胃化湿,增强集体的免疫功能;减轻肝细胞坏死、促进其修复,防止肝细胞肿胀、气球变样,并有显著降低血清丙氨酸转氨酶水平的作用;明显抑制抗肿瘤作用;对葡萄球菌有明显抑菌作用,此外对志贺痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌、宋内痢疾杆菌及其变种、致病性大肠杆菌、普通大肠杆菌、变形杆菌、肠炎杆菌、绿脓杆菌、甲型溶血性链球菌等均有抑制作用;对牛凝血酶引起的人血纤维蛋白酶凝聚时间有显著延长作用。
所说的皱皮木瓜指的是产地为安徽宣城、湖北资丘、浙江淳安、四川、湖南、陕西、山东、云南等地的木瓜。
从木瓜提取有效成分的方法很多,如中国专利CN86108630A公开的技术,但是上述专利公开的方法,提取率低,杂质多,选择性低,不能适应有关领域发展的需要。
发明内容
本发明需要解决的技术问题是提供一种从木瓜中提取有效成分的方法,以克服现有技术存在的纯化过程容易氧化的缺陷。
本发明的方法包括如下步骤:
将皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末置于萃取釜中,连续通入CO2进行萃取洗脱,收集萃取时间为0.5~5小时的流出萃取釜的CO2,卸压至常压,CO2放空或加压后回用,获得卸压后的残留物,即为皱皮木瓜有效成分。其中:
总黄酮:460.0mg/100g FW以上,Vc:209.0mg/100g FW以上,总皂甙:896.0mg/100g FW以上,齐墩果酸:62.0mg/100g FW以上。
萃取釜中CO2为超临界状态,优选的温度为32~65℃,压力为8~15MPa;
所说的超临界CO2环境指的是:温度为31℃以上,压力为7.2MPa以上;
以每公斤皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末计,CO2的通入量为2~25公斤/小时;
按照本发明优选的方法,在提取过程中,加入助剂,所说的助剂选自水或体积浓度为30~95%的乙醇,加入量为皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末重量的10~20%。
采用本发明的方法提取木瓜中提取有效成分,选择性高,能够满足有关方面的需要。
具体实施方式
实施例1
检测方法:
黄酮含量测定:
黄酮提取:称取0.5g左右干样,加入10ml 70%的乙醇浸泡,在70℃的条件下间歇振荡6h,G3砂心漏斗抽滤,加入10ml 70%的乙醇浸泡,在70℃的条件下间歇振荡6h,重复3次。合并滤液,定容至50ml,待测;
黄酮测定:制作标准曲线:取18个50ml容量瓶,分别吸取0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34ml 100ug/L芦丁溶液(30%乙醇配制),分别加入30%乙醇10ml,0.7ml 5%NaNO2,5min后加入10% Al(NaNO3)3,6min后加入5ml 40%NaOH,混匀,用30%乙醇定容至刻度,35℃水浴显色,10min后在510nm处测OD510nm,得回归方程:Y(100ug/ml)=0.5605+91.9819 OD510nm[r=0.99**],再转换计算黄酮百粉含量。
测定:取待测液5ml加入到25ml容量瓶中,显色测定同标准曲线。
Vc含量(AsA)的测定:
10g果肉加入冰冷的10ml三氯乙酸(5%(w/v)),研磨匀浆,纱布过滤,4℃下16000g离心10min。上清夜用作AsA和DHA测定。
AsA分析:反应体系包含0.1mL提取样品,0.5mL无水乙醇,0.6M三氯乙酸。3mM bathophenanthroline,8mM H3PO4,0.17mM FeCl3.最后总体积1.5mL,反应混合物在30℃水浴90min,检测534nm处的吸光值。按照此方法绘制1-10μmol AsAd标准曲线,根据标准曲线计算AsA的含量(X)。
皂甙含量测定
30g样品粉末,乙醚回流脱脂,过滤,挥发乙醚,烘干。称取样品2g,乙醇回流提取4小时,提取液过滤,滤液水浴浓缩干燥,加8ml甲醇溶解,然后加入80ml丙酮,沉淀过滤,滤渣烘干后用甲醇溶解,并定容至50ml,得皂甙溶液。取1ml溶液于试管中,在60℃水浴中蒸干溶剂,加入新鲜配制的5%香草醛-冰乙酸溶液0.2ml,高氯酸0.8ml。60℃水浴15min,流水冷却,加冰乙酸5ml,摇匀,待测。以齐墩果酸为标准品绘制标准曲线进行测定。
齐墩果酸含量的性测定
取0.5g粉末样品,加入20ml乙醇,30℃下浸泡2h,35℃超声波水浴提取30min,重复提取两次,合并滤液,35℃减压蒸干,蒸干的固体溶解到1ml甲醇中,转到1.5mL Eppendorf管中离心去掉沉淀,用针头式微孔过滤器(φ13,有机系,孔径0.30μm)过滤,取少量滤液进行HPLC分析。HPLC分析条件:流动相为甲醇(A)和0.03mol/L磷酸缓冲液(pH 2.8)(B),体积比为85∶15(A∶B,V/V),流速为1ml/min,检测波长为210nm,在室温下进行。
实施例2
将1公斤皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末置于萃取釜中,以2公斤/小时的速度连续通入CO2进行萃取洗脱,收集萃取时间为0.5小时的流出萃取釜的CO2,卸压至常压,获得卸压后的残留物,即为皱皮木瓜有效成分。
萃取釜中CO2的温度为32℃,压力为8~15Mpa。
采用实施例1的方法进行检测,其中:
总黄酮:460.25mg/100g FW,Vc:209.35mg/100g FW,总皂甙:896.44mg/100g FW,齐墩果酸:62.15mg/100g FW。
实施例2
将1公斤皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末置于萃取釜中,以25公斤/小时的速度连续通入CO2进行萃取洗脱,同时加入体积浓度为35%的乙醇水溶液10公斤,收集萃取时间为5小时的流出萃取釜的CO2,卸压至常压,获得卸压后的残留物,即为皱皮木瓜有效成分。
萃取釜中CO2的温度为65℃,压力为8~15Mpa。
采用实施例1的方法进行检测,其中:
总黄酮:46.30mg/100g FW,Vc:209.40mg/100g FW,总皂甙:896.45mg/100g FW,齐墩果酸:62.22mg/100g FW。
Claims (5)
1.从木瓜中提取有效成分的方法,其特征在于,包括如下步骤:
将皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末置于萃取釜中,连续通入CO2进行萃取洗脱,收集萃取时间为0.5~5小时的流出萃取釜的CO2,卸压至常压,CO2放空或加压后回用,获得卸压后的残留物,即为木瓜有效成分,萃取釜中CO2为超临界状态。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,萃取釜中CO2的温度为32~65℃,压力为8~15Mpa。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,以每公斤皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末计,CO2的通入量为2~25公斤/小时。
4.根据权利要求1、2或3所述的方法,其特征在于,在提取过程中,加入助剂,所说的助剂选自水或体积浓度为30~95%的乙醇。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,助剂加入量为皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末重量的10~20%。
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