CN1931173A - 薯蓣皂苷元在制备具有增效减毒作用的药物中的应用 - Google Patents
薯蓣皂苷元在制备具有增效减毒作用的药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1931173A CN1931173A CN 200610017243 CN200610017243A CN1931173A CN 1931173 A CN1931173 A CN 1931173A CN 200610017243 CN200610017243 CN 200610017243 CN 200610017243 A CN200610017243 A CN 200610017243A CN 1931173 A CN1931173 A CN 1931173A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dio
- diosgenin
- tumor
- chemotherapeutics
- dosage
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明涉及一种薯蓣皂苷元在制备对化疗药物具有增效减毒作用的药物中的应用。属于薯蓣皂苷元的新的药物用途。薯蓣皂苷元在化疗药物对人黑色素瘤、人宫颈癌、人胃癌、人乳腺癌的治疗中具有增效减毒作用。薯蓣皂苷元与化疗药配合使用，具有抗肿瘤作用增强和较强的减毒、增效作用。不仅降低了化疗药的用量，也意味着在某种程度上降低了化疗药对肿瘤患者产生的毒副作用。由此可扩大应用人群，进而产生较好的社会效益和经济效益。
Description
技术领域
本发明属于薯蓣皂苷元的新的药物用途。
背景技术
薯蓣皂苷元(Diosgenin，简称Dio)是从薯蓣科植物穿龙薯蓣(Dioscoreanipponica Makino)的根茎中提取的有效成分。近些年来，国内外已有许多学者报告薯蓣皂苷有抗肿瘤作用。
化疗是目前治疗恶性肿瘤主要手段之一，五氟尿嘧啶(5-Fu)、紫杉醇(Paclitaxel)、替加氟片(FT-207)为常用的化疗药物。
5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil 5-Fu)，剂型，针剂，用于消化道肿瘤、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、宫颈癌等。用法：静注，静滴，有口腔溃疡和腹泻等副作用。
替加氟，(Tegafur，喃氟啶，呋喃氟尿嘧啶，方克)，剂型，片剂、针剂，用于胃癌、乳腺癌、肠癌等消化道肿瘤的治疗。也用于合并化疗，防止肿瘤术后复发和维持治疗。用法，口服，静滴。
优福定(UFT)，剂型：片剂：62mg(替加氟50mg，尿嘧啶12mg)，用于胃癌、肠癌、胰腺癌等消化道癌，也用于乳腺癌、鼻咽癌、肺癌和肝癌，手术前后用药防止癌的复发、扩散和转移。用法，口服。
紫杉醇，剂型，针剂，主要用于卵巢癌、乳腺癌的治疗，对肺癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤、脑瘤也有效。用法：临床按如下程序使用：(1)询问有无过敏史，并查看白细胞及血小板数据，有过敏史及白细胞、血小板低下者慎用；(2)此药可致过敏反应，在给药前12小时和6小时前服用地塞米松20mg，给药前30～60分钟给予苯海拉明50mg口服及西米替丁30mg静脉注射；(3)常用紫杉醇的剂量为135～175mg/m2，应先将注射液加于生理盐水或5％葡萄糖500～1000ml中需用玻璃或聚乙烯输液器输液。应用特制胶管及0.22μm的微孔膜滤过；(4)滴注后每15分钟应测血压、心率、呼吸，一般滴注3小时。本品常规与顺铂、卡铂、异环磷酰胺、氟尿嘧啶等联用。
多西紫杉醇(Docetaxel，多西他赛，艾素，泰索帝TAXOTERE，多帕菲，希存)，用于局部晚期或转移性乳腺癌、局部晚期或转移性非小细胞肺癌。用法，静注。与铂类联用，可作为非小细胞肺癌的一线治疗药物；单药使用，是含铂类方案失败的非小细胞肺癌的二线治疗药物；和蒽环类、卡培他滨等联用，作为晚期或转移性乳腺癌的一线、二线治疗方案；TAC方案(多西他赛+阿霉素+环磷酰胺)，可作为早期淋巴结阳性乳腺癌患者术后辅助治疗药物；尚可用于卵巢癌、晚期胃癌、前列腺癌等。注意使用时产生骨髓抑制；部分病人可能发生过敏反应。
机体的免疫功能低下可导致多种疾病的发生，临床所见的多种肿瘤多伴有免疫功能低下，许多药物尤其是肿瘤化疗药物常因免疫功能降低而限制其应用.放化疗作为恶性肿瘤的主要治疗手段，坚持按时、足量是治疗的一个重要因素，而由化疗引起的副反应如白细胞下降、免疫功能降低、在抑制或杀伤肿瘤细胞的同时，也给机体带来了较大的毒性作用，最常见的是胃肠道反应和骨髓抑制，往往影响治疗限制全程剂量而影响疗效。中药对机体的免疫调节和扶正抗癌作用已越来越受到人们的重视。许多恶性肿瘤患者，免疫功能的降低是主要表现特征，难以承受放化疗对机体的影响。因此，加用一些能改善患者症状并恢复免疫功能的药物具有重要意义。
发明内容
本发明提供一种薯蓣皂苷元在制备对化疗药物具有增效减毒作用的药物中的应用。
本发明一个目的在于，薯蓣皂苷元在化疗药物对人黑色素瘤的治疗中具有增效减毒作用。
本发明一个目的在于，薯蓣皂苷元在化疗药物对人宫颈癌的治疗中具有增效减毒作用。
本发明一个目的在于，薯蓣皂苷元在化疗药物对人胃癌的治疗中具有增效减毒作用。
本发明一个目的在于，薯蓣皂苷元在化疗药物对人乳腺癌的治疗中具有增效减毒作用。
本发明一个目的在于，薯蓣皂苷元在化疗药物对小鼠肉瘤(S180)、小鼠前胃癌(MFC)、小鼠肝癌实体瘤(H22)、小鼠肝癌腹水瘤(Hep-A-22)的治疗中具有增效减毒作用。
本发明中，化疗药物为嘧啶类抗癌药或紫杉类化合物抗肿瘤药。
本发明中，化疗药物为五氟尿嘧啶、替加氟、优福定、紫杉醇或多西紫杉醇。
一种药物组合物，包括薯蓣皂苷元和化疗药物。
所述的药物组合物，化疗药物为五氟尿嘧啶、紫杉醇或替加氟。
薯蓣皂苷元和化疗药物的配比为按重量份数比1∶(0.1～3)。
本发明药物可根据本领域已知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将活性成分与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人药使用的适当施用形式或剂量形式。本发明的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等。
本发明的药物或其药物组合物的给药途径可为注射给药。注射包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射、皮内注射和穴位注射等。给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。如液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂等。
本发明的药物或其组合物可以制成普通制剂、也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。
例如，将本发明的药物或其组合物制成注射用制剂，如溶液剂、混悬剂溶液剂、乳剂、冻干粉针剂，这种制剂可以是含水或非水的，可含一种和/或多种药效学上可接受的载体、稀释剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂。如稀释剂可选自水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、PH调节剂等。这些辅料是本领域常用，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。
本发明药用组合物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者的性别、年龄、体重、性格及个体反应，给药途径、给药次数等，因此本发明的治疗剂量可以有大范围的变化。一般来讲，本发明中药学成分的使用剂量是本领域技术人员公知的。可以根据本发明药用组合物中最后的制剂中所含有的实际有效药物数量，加以适当的调整，以达到其治疗有效量的要求，完成本发明的增效减毒目的。通常对体重约70公斤患者，所给薯蓣皂苷元的日剂量为1～30mg/kg体重。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药，这受限于给药医生的临床经验以及包括运用化疗、放疗手段的给药方案。
本发明的有益效果是，我们通过对荷瘤小鼠骨髓造血功能，提高血白细胞总数，调节化疗药对荷瘤小鼠免疫机能实验，证明薯蓣皂苷元与FT-207合用大剂量具有保护免疫功能和其他脏器功能，薯蓣皂苷元可以减轻化疗的毒副反应。近些年来，国内外已有许多学者报告薯蓣皂苷有抗肿瘤作用。我们做了薯蓣皂苷元的整体抗肿瘤的减毒、增效作用的研究。实验结果表明两药合用MFC抑瘤率高达72.2％，而单用FT-207体重减轻，免疫力低下，合用之后对体重有所改善而且免疫力方面也有所提高。通过生命延长实验也说明两药合用作用增强并具有较好的抗肿瘤作用和较强的减毒、增效作用。
还有通过5-Fu或紫杉醇与薯蓣皂苷元联合应用，其对肿瘤细胞的抑制作用远远大于二者单独应用。在5-Fu或紫杉醇同等剂量的情况下加入薯蓣皂苷元，对肿瘤细胞的生长抑制明显增强，薯蓣皂苷元与上二药联合使用后可大大降低二药的用量，并且产生超过二药单独应用几倍甚至十几倍的效力。尤其对人黑色素瘤、人宫颈癌有良好的疗效。薯蓣皂苷元与上二药联合应用，不仅降低了上二药的用量，也意味着在某种程度上降低了上二药对肿瘤患者产生的毒副作用。由此可扩大应用人群，进而产生较好的社会效益和经济效益。
下面通过具体实验例进一步验证本发明，其中薯蓣皂苷元简称为狄奥宁片或Dio。
实验例1薯蓣皂苷元增效减毒作用研究
以五氟尿嘧啶(5-Fu)、紫杉醇(Paclitaxel)为主化疗药物，对比研究薯蓣皂苷元(Dio)与此两种药物联合作用或单独作用48小时对A375-S2(人黑色素瘤细胞)，Hela(人宫颈癌细胞)，MGC-803(人胃癌细胞)，MCF-7(人乳腺癌细胞)，SGC-7901(人胃癌细胞)的抑制率及半数抑制浓度IC50值(μg/ml)以考查薯蓣皂苷元的增效减毒作用。
1材料与方法
1.1材料与试剂人胃低分化粘液腺癌细胞(MGC-803)、人宫颈癌细胞(HeLa)、人黑色素瘤细胞(A375-S2)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人胃癌细胞(SGC-7901)等五种肿瘤细胞系均引自吉林省肿瘤医院。Diosgenin、MTT((噻唑蓝)和DMSO购自美国Sigma公司；RPMI-1640为美国GIBCOBRL产品；胎牛血清为北京元亨圣马生物技术研究所产品；胰蛋白酶为Difco进口，长春宝泰克生物科技公司分装。5-氟尿嘧啶(5-FU，批号：010114)上海旭东海普药业有限公司。紫杉醇(批号：0403012)北京四环制药厂。
1.2方法
1.2.1细胞培养五种肿瘤细胞均培养于RPMI1640，补充10％热灭活胎牛血清，2μmol/L谷氨酰胺，105U/L青霉素，100mg/L链霉素，置5％体积CO2培养箱中饱和湿度下培养。取对数生长期细胞用于实验。
1.2.2四唑蓝(MTT)比色实验将处于对数生长期的以上5种肿瘤细胞分别消化处理，调整细胞密度为1×108个/L接种于96孔培养板，每孔100μl，培养24h，实验组分别加入不同浓度的5-氟尿嘧啶和Dio或加入不同浓度的紫杉醇和Dio，另设对照组(只加5-氟尿嘧啶或紫杉醇，不加Dio)和空白组(只有培养基)，每组处理均设4个复孔，培养48h，加入20μl MTT(5g/L)，继续培养4h后弃上清，每孔加入150μl DMSO，避光振荡10min，用全自动酶联免疫检测仪于570nm处测定吸光度值。以上实验均重复3次。
2.结果
表1.5-Fu或Paclitaxel单独作用或与Dio联合作用的IC50值
表2.5-Fu单独作用或与Dio联合作用对A375-S2增殖的影响
表3.5-Fu单独作用或与Dio联合作用对Hela增殖的影响
表4.5-Fu单独作用或与Dio联合作用对MGC-803增殖的影响
表5.5-Fu单独作用或与Dio联合作用对MCF-7增殖的影响
表6.5-Fu单独作用或与Dio联合作用对SGC-7901增殖的影响
表7.Paclitaxel单独作用或与Dio联合作用对A375-S2增殖的影响
表8.Paclitaxel单独作用或与Dio联合作用对Hela增殖的影响
表9.Paclitaxel单独作用或与Dio联合作用对MGC-803增殖的影响
表10.Paclitaxel单独作用或与Dio联合作用对MCF-7增殖的影响
表11.Paclitaxel单独作用或与Dio联合作用对SGC-7901增殖的影响
*P＜0.05，**P＜0.01：***P＜0.001
由表可以看出5-Fu或紫杉醇与Dio联合应用，其对肿瘤细胞的抑制作用远远大于二者单独应用。在5-Fu或紫杉醇同等剂量的情况下加入Dio，对肿瘤细胞的生长抑制明显增强，Dio与上二药联合使用后可大大降低二药的用量，并且产生超过二药单独应用几倍甚至十几倍的效力。尤其对人黑色素瘤、人宫颈癌有良好的疗效。Dio与上二药联合应用，不仅降低了上二药的用量，也意味着在某种程度上降低了上二药对肿瘤患者产生的毒副作用。
实验例2狄奥宁片(Dio)对化疗药物替加氟片(FT-207)抑瘤增效作用的实验研究材料与方法
动物ICR小鼠，20±2g，购自吉林大学基础医学部实验动物中心动物合格证号：SCXK-(吉)2003-0001
瘤株小鼠肉瘤(S180)、小鼠前胃癌(MFC)、小鼠肝癌实体瘤(H22)、小鼠肝癌腹水瘤(Hep-A-22)，瘤株购自吉林省肿瘤研究所。
药品及试剂薯蓣皂苷元(Diosgenin，Dio)，白色粉末，规格：纯度为95.69％，批号30000126，由吉林天药科技股份有限公司天然药物研究所中药化学室提供；替加氟片(FT-207)，规格：50mg/片，批号：040201，上海华联制药有限公司产品；羧甲基纤维素钠(CMC)
仪器CK2型倒置显微镜(日本Olimpars公司)；SB-JB-1B型超净工作台(上海博迅实业有限公司医疗设备厂产品)万分之一电子天秤厂家：北京赛多利斯天平公司型号：Bs210s
方法实验动物随机分为对照(CMC 20ml/kg)、FT-207(200mg/kg、100mg/kg和50mg/kg)三个剂量组；Dio(50mg/kg、25mg/kg和12.5mg/kg)三个剂量组：FT-207+Dio(200mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(100mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(100mg/kg+12.5mg/kg)；FT-207+Dio(50mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(50mg/kg+12.5mg/kg)。共12组，每组10只。根据移植性肿瘤研究法，选取移植肿瘤7天左右，肿瘤生长良好，腹部膨隆明显的小鼠，在超净工作台内进行腹部皮肤消毒，用一次性无菌采血器经腹壁刺入腹腔，抽取腹水，放入无菌烧杯中以生理盐水稀释使细胞呈混悬状态，镜下调整细胞浓度为2×107/ml。①实体瘤移植及观测方法于每只实验小鼠右腋窝皮下接种0.2ml。各组动物于接种肿瘤次日随机分组并开始灌胃给药，每日1次，隔日称重，连续给药10天。给药结束后，将动物称重后脱臼处死，剥离出皮下肿块称重，比较各组肿瘤生长情况。②腹水癌生命延长移植及观测方法镜下调整细胞浓度为2×107/ml每只小鼠腹腔接种0.2ml，各组动物于接种肿瘤次日随机分组并开始给药，记录动物自腹腔接种肿瘤起所能存活的天数，比较各组存活时间及生命延长率。
统计学处理方法
抑瘤率(％)＝对照组瘤重-实验组瘤重/对照组瘤重×100％
生命延长率(％)＝给药组动物平均存活天数-对照组动物平均存活天数/对照组动物平均存活天数×100％。
两药合用后是否增效，按下式计算q值：q＝EAB/EA+(1-EA)EB。式中的EA为A药的抑瘤率，EB为B药的抑瘤率，EAB是两药合用的抑瘤率，q＝0.85～1.15为两药作用相加，q＞1.15为两药作用增强(或协同)，q＜0.85为两药拮抗。
所列实验数据以均数加减标准差(
x±s)表示，统计学处理方法采用组间t-检验。
结果与讨论Dio对FT-207抑瘤、生命延长时间及生命延长率作用结果见表1～表8。
表1.Dio对FT-207抑制小鼠肉瘤(S180)作用的影响(
x±s，n＝10)第一批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 动物体重(g) | 瘤肿重量(g) | 抑瘤率(％) | |
| 给药前 | 给药后 | ||||
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 20.2±1.2520.0±1.2519.8±1.1419.7±0.1519.7±0.9519.7±0.9519.6±0.8419.6±0.8419.5±1.0819.6±0.8419.3±1.0619.1±1.20 | 28.0±1.5625.0±2.7126.5±2.7627.6±2.1728.0±2.4528.4±1.5127.6±2.5026.2±3.0126.9±2.0327.3±2.2128.0±1.8327.3±2.31 | 1.30±0.260.66±0.16***0.79±0.13***1.27±0.120.93±0.19*81.01±0.26*1.24±0.140.42±0.16***▲▲0.65±0.17***▲0.82±0.19***1.17±0.411.24±0.15 | 49.239.22.328.522.34.667.750.036.910.04.6 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.00与阳性对照组等剂量组比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
表2.Dio对FT-207抑制小鼠肉瘤(S180)作用的影响(
x±s，n＝10)第二批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 动物体重(g) | 瘤肿重量(g) | 抑瘤率(％) | |
| 给药前 | 给药后 | ||||
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 19.2±1.3219.6±1.1719.5±1.3519.2±1.4819.2±1.1419.2±1.1419.1±0.7419.2±1.1419.5±0.8519.2±0.7919.1±0.7419.0±0.67 | 28.1±2.7725.2±1.4826.7±2.7127.6±2.0728.1±2.5625..6±2.7227.5±4.1227.1±1.6626.7±2.1127.2±2.1027.4±3.1027.3±2.06 | 1.42±0.30.65±0.12***0.72±0.15***1.21±0.130.92±0.18***1.09±0.22*1.31±0.140.51±0.18***▲0.55±0.17***▲0.74±0.17***1.16±0.14*1.24±0.22 | 54.249.314.835.223.27.864.161.347.918.312.7 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量组比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01：▲▲▲P＜0.001。
表3.Dio对FT-207抑制小鼠前胃癌(MFC)作用的影响(
x±s，n＝10)第一批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 动物体重(g) | 瘤肿重量(g) | 抑瘤率(％) | |
| 给药前 | 给药后 | ||||
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 20.4±1.3520.3±1.1620.2±1.0320.1±1.1020.2±1.0320.0±0.9420.1±0.8820.1±0.8820.0±0.9420.0±0.9420.0±0.8220.0±0.94 | 29.8±2.9024.1±2.0326.9±3.0729.3±2.2129.3±2.0029.0±2.8329.3±3.7126.5±2.1227.9±1.9728.7±1.8928.2±2.3929.5±3.10 | 1.36±0.360.57±0.12***0.72±0.19***1.09±0.230.89±0.20**0.95±0.49*1.09±0.500.42±0.17***▲0.52±0.21***▲0.73±0.20***0.93±0.15***1.02±0.40 | 58.147.119.934.630.219.969.161.846.331.625.0 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量组比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
表4.Dio对FT-207抑制小鼠前胃癌(MFC)作用的影响(
x±s，n＝10)第二批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 动物体重(g) | 瘤肿重量(g) | 抑瘤率(％) | |
| 给药前 | 给药后 | ||||
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 21.3±1.4921.8±1.3221.6±1.2721.7±1.3421.9±1.2921.6±1.2721.8±1.4022.2±1.2321.8±1.1421.8±1.3221.8±1.2322.2±0.92 | 29.9±27.724.9±2.0326.5±1.1828.4±2.5926.6±2.9127.9±3.3228.8±2.2528.4±1.4328.1±1.7927.1±3.7828.0±2.8929.3±1.16 | 1.40±0.420.66±0.35***0.76±0.15***1.09±0.180.80±0.14***1.07±0.13*1.14±0.310.39±0.16***▲0.60±0.16***▲0.74±0.14***0.89±0.221.12±0.17 | 52.945.722.242.923.618.972.257.247.236.420.0 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001与阳性对照组等剂量组比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
表5.Dio对FT-207抑制小鼠肝癌实体瘤(H22)作用的影响(
x±s，n＝10)第一批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 动物体重(g) | 瘤肿重量(g) | 抑瘤率(％) | |
| 给药前 | 给药后 | ||||
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 21.6±0.7021.0±1.16221.0±1.0521.1±0.9920.9±1.1921.0±1.0520.9±0.9921.1±0.9920.9±0.8820.8±1.1421.1±0.5720.7±1.25 | 29.6±3.4124.6±1.6526.3±2.0027.3±2.3127.8±2.3527.7±1.4928.8±2.7427.0±3.5927.7±2.9828.5±1.5828.1±2.3327.7±3.62 | 1.40±0.230.56±0.12***0.90±0.33***1.28±0.341.07±0.29**1.14±0.23*1.24±0.150.37±0.19***▲0.63±0.17***▲0.64±0.24***1.07±0.30*1.09±0.33* | 6035.78.623.618.611.473.655.054.323.622.1 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量组比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
表6.Dio对FT-207抑制小鼠肝癌实体瘤(H22)作用的影响(
x±s，n＝10)第二批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 动物体重(g) | 瘤肿重量(g) | 抑瘤率(％) | |
| 给药前 | 给药后 | ||||
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 21.0±1.1621.2±0.7920.9±1.1020.8±1.2320.9±1.1021.0±1.1620.7±1.2520.6±1.0820.8±1.0320.9±1.1020.9±0.9920.80±1.03 | 30.2±3.0824.1±1.9127.7±1.8328.6±2.8027.3±2.0628.2±3.0129.6±2.4126.6±2.7227.5±2.9527.8±2.2029.6±3.4429.4±2.50 | 1.37±0.240.59±0.16***0.81±0.15***1.18±0.151.05±0.23**1.14±0.16*1.31±0.310.40±0.15***▲0.63±0.19***▲0.68±0.16***1.23±0.361.34±0.25 | 56.940.913.923.416.84.470.854.050.410.22.2 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量组比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01：▲▲▲P＜0.001。
表7.Dio对FT-207延长肝腹水癌(Hep-A-22)小鼠存活时间的影响(
x±s，n＝10)第一批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 存活时间(天) | 生命延长率(％) |
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 12.0±0.8216.0±1.05***15.2±1.99***13.9±1.45**15.1±1.60***13.1±1.29*13.4±1.43*18.5±2.32***▲▲17.2±1.14***▲17.1±1.97***▲14.5±1.56***14.1±1.29*** | 33.326.715.825.89.211.754.243.342.520.817.5 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量组比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
表8.Dio对FT-207延长肝腹水癌(Hep-A-22)小鼠存活时间的影响(
x±s，n＝10)第二批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 存活时间(天) | 生命延长率(％) |
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 11.9±0.7416.0±1.05***15.1±1.29***14.8±1.03***15.1±1.45***13.1±0.88**13.2±1.32*18.1±2.96***▲16.6±1.51***▲16.1±1.79***14.2±1.81**14.7±1.57*** | 34.526.924.426.910.110.952.139.535.319.323.5 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量组比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
不同剂量的Dio与FT-207配伍使用均能明显提高抑瘤率，Dio与FT-207对小鼠移植性肿瘤肉瘤(S180)、前胃癌(MFC)、肝癌实体瘤(H22)肝腹水癌(Hep-A-22)的抑瘤率与单用比较有明显的抑瘤和生命延长作用，说明Dio明显增强化疗药FT-207对小鼠移植肿瘤抑瘤效果。
实验例3狄奥宁片(Dio)对化疗药物替加氟片(FT-207)减毒作用的实验研究
1.狄奥宁片(Dio)与化疗药物替加氟片(FT-207)配伍使用对荷瘤小鼠外周血象及其免疫器官脏器指数的影响
材料与方法
动物ICR小鼠，体重，20±2g，购自吉林大学基础医学部实验动物中心动物合格证号：SCXK-(吉)2003-0001
瘤株小鼠前胃癌(MFC)，瘤株购自吉林省肿瘤研究所。
药品及试剂薯蓣皂苷元(Diosgenin，Dio)，白色粉末，规格：纯度为95.69％，批号30000126，由吉林天药科技股份有限公司天然药物研究所中药化学室提供；替加氟片(FT-207)，规格：50mg/片，批号：040201，上海华联制药有限公司产品；
仪器CK2型倒置显微镜(日本Olimpars公司)；SB-JB-1B型超净工作台(上海博迅实业有限公司医疗设备厂产品)；万分之一电子天秤厂家：北京赛多利斯天平公司型号：Bs210s动物血液分析仪生产厂家：美国型号：HEMAVET950
方法实验动物随机分为对照(CMC 20ml/kg)、FT-207(200mg/kg、100mg/kg和50mg/kg)三个剂量组；Dio(50mg/kg、25mg/kg和12.5mg/kg)三个剂量组；FT-207+Dio(200mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(100mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(100mg/kg+12.5mg/kg)；FT-207+Dio(50mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(50mg/kg+12.5mg/kg)。共12组，每组10只，均灌胃给药。根据移植性肿瘤研究法，选取移植肿瘤7天左右，肿瘤生长良好，腹部膨隆明显的小鼠，在超净工作台内进行腹部皮肤消毒，用一次性无菌采血器经腹壁刺入腹腔，抽取腹水，放入无菌烧杯中以生理盐水稀释使细胞呈混悬状态，镜下调整细胞浓度为2×107/ml。于每只实验小鼠右腋窝皮下接种0.2ml。各组动物于接种肿瘤次日随机分组并开始给药，每日1次，隔日称重，连续给药10天.给药结束次日，自小鼠眼眶静脉丛取血，测血象，指标为白细胞总数(WBC)，红细胞(RBC)，血小板(PLT)计数。称重后处死动物，剖取脾脏、胸腺，计算脏器指数。
统计学处理方法
胸腺指数(mg/10g)＝胸腺重量(mg)/体重(g)×10g体重；脾脏指数(mg/10g)＝脾脏重量(mg)/体重(g)×10g体重。实验数据以均数加减标准差(
x±s)表示，统计学处理方法采用组间t-检验。
结果与讨论
表9.Dio与FT-207配伍应用对荷瘤小鼠外周血象的影响(
x±s，n＝10)第一批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | WBC(×109/L) | RBC(×1012/L) | PLT(×109/L) |
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 6.45±1.232.50±1.52***4.08±0.80***5.57±1.165.37±0.84*6.16±0.856.25±1.854.67±1.66*▲▲5.37±0.93*▲▲5.28±1.25*▲6.15±1.066.19±1.21 | 7.21±0.796.45±0.60*6.59±0.536.80±1.016.74±0.737.05±0.677.07±0.977.06±0.806.77±0.496.62±0.526.83±0.836.90±0.74 | 1029.5±86.22833.9±74.78***904.7±84.78**945.9±88.53*972.5±138.96988.6±94.80991.6±257.5897.2±76.46931.8±47.12**915.2±100.52*962.0±87.28985.2±110.24 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001；与阳性对照组等剂量比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
表10.Dio与FT-207配伍应用对荷瘤小鼠免疫器官脏器指数的影响(
x±s，n＝10)第一批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 动物体重(g) | 胸腺指数(mg/10g体重)) | 脾脏指数(mg/10g体重) | |
| 给药前 | 给药后 | ||||
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 20.4±1.3520.3±1.1620.2±1.0320.1±1.1020.2±1.0320.0±0.9420.1±0.8820.1±0.8820.0±0.9420.0±0.9420.0±0.8220.0±0.94 | 29.8±2.9024.1±2.0326.9±3.0729.3±2.2129.3±2.0029.0±2.8329.3±3.7126.5±2.1227.9±1.9728.7±1.8928.2±2.3929.5±3.10 | 28.97±7.7314.11±4.98***21.91±6.29*23.71±4.0522.48±4.09*25.48±4.4626.55±4.4620.25±6.78*▲28.34±6.61▲21.62±4.67*22.37±4.34*26.71±3.16 | 90.32±16.2658.08±9.51***68.26±15.16**83.96±9.9385.56±11.5983.36±15.6478.62±18.2476.28±19.49▲81.12±9.92▲85.02±14.24▲88.83±20.4089.52±13.53 |
注：与对阳性等剂量组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
表11.Dio与FT-207配伍应用对荷瘤小鼠外周血象的影响(
x±s，n＝12)第二批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | WBC(×109/L) | RBC(×1012/L) | PLT(×109/L) |
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 7.64±1.273.48±1.01***4.78±1.01***6.29±1.596.04±1.61*6.81±0.986.89±1.045.78±2.19*▲▲6.11±1.69*▲6.11±1.53*▲6.63±1.257.42±1.16 | 7.23±0.996.42±0.36*6.54±0.526.66±0.506.85±0.497.03±0.627.07±0.546.70±0.546.80±0.526.94±0.736.96±1.036.99±0.92 | 1343.1±213.351026.5±261.50**1166.9±157.39*1260.7±182.871272.8±195.601286.3±271.231295.9±202.301123.1±242.74*1238.5±149.981288.7±160.601305.0±199.271321.5±227.86 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
表12.Dio与FT-207配伍应用对荷瘤小鼠免疫器官脏器指数的影响(
x±s，n＝10)第二批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 动物体重(g) | 胸腺指数(mg/10g体重) | 脾脏指数(mg/10g体重) | |
| 给药前 | 给药后 | ||||
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 21.3±1.4921.8±1.3221.6±1.2721.7±1.3421.9±1.2921.6±1.2721.8±1.4022.2±1.2321.8±1.1421.8±1.3221.8±1.2322.2±0.92 | 29.9±27.724.9±2.0326.5±1.1828.4±2.5926.6±2.9127.9±3.3228.8±2.2528.4±1.4328.1±1.7927.1±3.7828.0±2.8929.3±1.16 | 27.99±3.0913.93±3.72***19.87±6.18**22.39±6.09*20.46±3.75***22.93±6.95*25.29±4.6217.85±2.50***▲24.35±3.20*24.66±2.36*▲24.50±4.3124.64±4.10 | 89.72±11.0758.95±23.91**67.35±20.81**84.84±13.4083.87±11.5084.08±11.8477.91±14.1681.07±11.77▲83.50±11.96▲84.19±14.43▲86.29±16.5586.91±10.67 |
注：与对阳性等剂量组比较，*P＜0.05；**P＜0.01：***P＜0.001。与阳性对照组等剂量比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
从表9～表12Dio与FT-207配伍使用对FT-207所至荷瘤小鼠白细胞减少和免疫器官萎缩有明显的保护作用，与单用FT-207比较，白细胞200mg/kg+25mg/kg剂量组提高▲▲P＜0.01而100mg/kg+25mg/kg也提高到▲P＜0.05，红细胞，血小板与阳性等剂量组比无统计意义与对照组比较虽然不能使其完全恢复到正常水平，但均有明显保护作用。
2.狄奥宁片(Dio)对化疗药物替加氟片(FT-207)所致荷瘤小鼠骨髓抑制的影响材料与方法
动物ICR小鼠，20±2g，购自吉林大学基础医学部实验动物中心动物合格证号：SCXK-(吉)2003-0001。
瘤株小鼠肝癌实体瘤(H22)，瘤株购自吉林省肿瘤研究所。
药品及试剂薯蓣皂苷元，白色粉末，规格：纯度为95.69％，批号30000126，由吉林天药科技股份有限公司天然药物研究所中药化学室提供；替加氟片(FT-207)，规格：50mg/片，批号：040201，上海华联制药有限公司产品；氯化钙(CaCl2)生产厂家：北京市江星化工厂批号：871106-1高氯酸(HClO4)生产厂家：天津市光复精细化工研究所批号：20050402
仪器酶标仪，型号：SPECTRAFLUOR PLUS，厂家：澳地利TECAN公司产品；离心机：LPZ5-2产地：北京；电热恒温水浴锅生产厂家：北京长源实验设备厂型号：HH.SY21-NL
方法实验动物随机分为对照(CMC 20ml/kg)、FT-207(200mg/kg、100mg/kg和50mg/kg)三个剂量组；Dio(50mg/kg、25mg/kg和12.5mg/kg)三个剂量组；FT-207+Dio(200mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(100mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(100mg/kg+12.5mg/kg)；FT-207+Dio(50mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(50mg/kg+12.5mg/kg)。共12组，每组10只，均灌胃给药。根据移植性肿瘤研究法，选取移植肿瘤7天左右，肿瘤生长良好，腹部膨隆明显的小鼠，在超净工作台内进行腹部皮肤消毒，用一次性无菌采血器经腹壁刺入腹腔，抽取腹水，放入无菌烧杯中以生理盐水稀释使细胞呈混悬状态，镜下调整细胞浓度为2×107/ml。于每只实验小鼠右腋窝皮下接种0.2ml。各组动物于接种肿瘤次日随机分组并开始给药，每日1次，隔日称重，连续给药10天。停药后次日，脱颈椎处死动物，取一侧完整股骨，除净软组织，用0.5mmol/L CaCl2 10ml将全部骨髓冲入离心管中，置4℃冰箱30min，2500rpm离心15min，弃上清，将沉淀物加0.2mol/L HClO4 5ml充分混合，90℃加热15min，冷却，过滤，滤液用酶标仪在268nm波长处测定吸光度OD值。用下式计算每根股骨所含DNA(ug)＝40×5×OD值。
结果与讨论
Dio对FT-207所致荷瘤小鼠骨髓抑制的影响详见表13、14。
表13.Dio对FT-207所致荷瘤小鼠骨髓抑制的影响(
x±s，n＝10)第一批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 股骨DNA含量(μg) | 抑制率(％) |
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 102.5±25.3760.3±28.57**72.9±12.22**84.9±22.2280.9±11.63*84.2±13.3195.8±12.6487.4±26.43▲88.7±17.64▲93.7±25.47▲89.9±20.4888.6±13.79 | 41.228.917.221.117.96.514.713.58.612.313.6 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
表14.Dio对FT-207所致荷瘤小鼠骨髓抑制的影响(
x±s，n＝10)第二批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 股骨DNA含量(μg) | 抑制率(％) |
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 96.4±9.0667.3±12.08***72.9±18.12**85.9±32.4779.4±21.0383.4±19.4684.9±18.3582.8±16.15*▲87.6±10.86▲82.9±20.388.7±17.4687.0±14.12 | 30.224.410.917.613.511.914.19.114.08.09.8 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
FT-207明显降低荷瘤小鼠骨髓DNA含量，与对照组比较FT-207含量下降可达30.2％～41.2％而Dio与对照组无显著性差异，与阳性等剂量组比较200mg/kg+25mg/kg与100mg/kg+25mg/kg合用组比有提高骨髓DNA含量▲P＜0.05，其他组有趋势但无统计学意义，说明Dio对FT-207至骨髓的抑制具有明显的拮抗作用。
3.狄奥宁(Dio)对化疗药物替加氟片(FT-207)所致荷瘤小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响
材料与方法
动物ICR小鼠，20±2g，购自吉林大学基础医学部实验动物中心动物合格
证号：SCXK-(吉)2003-0001。
瘤株小鼠肝癌实体瘤(H22)，瘤株购自吉林省肿瘤研究所。
药品及试剂薯蓣皂苷元，白色粉末，规格：纯度为95.69％，批号30000126，由吉林天药科技股份有限公司天然药物研究所中药化学室提供；替加氟片(FT-207)，规格：50mg/片，批号：040201，上海华联制药有限公司产品；印度墨水厂家：北京市西中化工厂批号：980301；Na2CO3厂家：天津市塘沽化学试剂厂
仪器紫外可见分光光度计厂家：北京普析通用仪器有限责任公司型号：TU-1800S
方法实验动物随机分为对照(CMC 20ml/kg)、FT-207(200mg/kg、100mg/kg和50mg/kg)三个剂量组；Dio(50mg/kg、25mg/kg和12.5mg/kg)三个剂量组；FT-207+Dio(200mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(100mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(100mg/kg+12.5mg/kg)；FT-207+Dio(60mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(50mg/kg+12.5mg/kg)。共12组，每组10只，均灌胃给药。根据移植性肿瘤研究法，选取移植肿瘤7天左右，肿瘤生长良好，腹部膨隆明显的小鼠，在超净工作台内进行腹部皮肤消毒，用一次性无菌采血器经腹壁刺入腹腔，抽取腹水，放入无菌烧杯中以生理盐水稀释使细胞呈混悬状态，镜下调整细胞浓度为2×107/ml。于每只实验小鼠右腋窝皮下接种0.2ml。各组动物于接种肿瘤次日随机分组并开始给药，每日1次，隔日称重，连续给药10天。末次给药后1h，根据0.1ml/10g体重尾静脉注射20％(V/V)印度墨水，分别于注射2min和10min后从小鼠眼眶静脉丛取血20ul，移入含2ml，0.1％的Na2CO3溶液的试管中，摇匀后用紫外分光光度计于680nm处测吸光度(OD)值(以下分别用OD2和OD10来表示2min和10min所取样品的吸光度值)。并按下式计算出吞噬指数K及吞噬系数α
K＝(lgOD2-IgOD10)/(T10-T2)
α＝(3√K×体重)/(肝重+脾重)
OD2，OD10分别是2min和10min吸光度值，T10-T2两时间点血样的时间差
结果与讨论
Dio对FT-207所致荷瘤小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响详见表15、16。
表15 Dio对FT-207所致荷瘤小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响(
x±s，n＝10)第一批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 吞噬指数(K) | 吞噬系数(α) |
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 0.042±0.0170.062±0.015**0.057±0.011*0.054±0.0080.057±0.012*0.059±0.018*0.053±0.0160.067±0.005***▲0.068±0.009***▲0.062±0.017*0.052±0.0110.051±0.012 | 4.60±0.906.31±1.24**5.81±0.95**4.99±0.825.44±0.72*4.77±0.494.72±0.406.35±0.57***6.19±0.64**5.45±0.65*5.03±0.544.99±0.58 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
表16.Dio对FT-207所致荷瘤小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响(
x±s，n＝10)第二批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 吞噬指数(K) | 吞噬系数(α) |
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 0.040±0.0120.056±0.009**0.054±0.013*0.047±0.0060.053±0.014*0.054±0.014*0.051±0.0180.068±0.014***▲0.057±0.007**0.059±0.019*0.051±0.0130.050±0.012 | 4.56±0.805.70±0.92**5.64±0.20*5.12±0.765.30±0.72*5.27±0.965.21±0.785.79±0.82**5.79±0.85**5.28±0.65*5.20±0.945.15±0.44 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量比较，▲p＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
巨噬细胞的吞噬率反映着机体的非特异性免疫功能。非特异性免疫是特异性免疫的基础，特异性免疫所产生的免疫物质又能增强非特异性免疫的作用，因此，增强机体的非特异性免疫对提高机体的整个免疫功能意义重大。从表15、16得出使用药组小鼠K值呈剂量依赖性升高，但同对照组相比，(*P＜0.05、***P＜0.001)。表明对网状内皮吞噬系统功能有一定增强作用趋势，但α值与阳性对照组等剂量比较无显著性差异。
4.狄奥宁(Dio)对化疗药物替加氟片(FT-207)荷瘤小鼠血清溶血素抗体生成的影响
动物ICR小鼠，20±2g，购自吉林大学基础医学部实验动物中心动物合格证号：SCXK-(吉)2003-0001。
瘤株小鼠前胃癌(MFC)，瘤株购自吉林省肿瘤研究所。
药品及试剂薯蓣皂苷元(Diosgenin，Dio)，白色粉末，规格：纯度为95.69％，批号30000126，由吉林天药科技股份有限公司天然药物研究所中药化学室提供；替加氟片(FT-207)，规格：50mg/片，批号：040201，上海华联制药有限公司产品；绵羊红细胞(SRBC)；都氏试剂：碳酸氢钠1.0g，高铁氰化钾0.2g，氰化钾0.05g，蒸馏水1000ml；补体：新鲜豚鼠血清绵羊红细胞用生理盐水稀释浓度达到10％。
仪器酶标仪，型号：SPECTRAFLUOR PLUS，厂家：澳地利TECAN公司产品；离心机：LPZ5-2产地：北京；电热恒温水浴锅厂家：北京长源实验设备厂型号：HH.SY21-NL
方法实验动物随机分为对照(CMC 20ml/kg)、FT-207(200mg/kg、100mg/kg和50mg/kg)三个剂量组；Dio(50mg/kg、25mg/kg和12.5mg/kg)三个剂量组；FT-207+Dio(200mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(100mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(100mg/kg+12.5mg/kg)；FT-207+Dio(50mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(50mg/kg+12.5mg/kg)。共12组，每组10只，均灌胃给药。根据移植性肿瘤研究法，选取移植肿瘤7天左右，肿瘤生长良好，腹部膨隆明显的小鼠，在超净工作台内进行腹部皮肤消毒，用一次性无菌采血器经腹壁刺入腹腔，抽取腹水，放入无菌烧杯中以生理盐水稀释使细胞呈混悬状态，镜下调整细胞浓度为2×107/ml。于每只实验小鼠右腋窝皮下接种0.2ml。各组动物于接种肿瘤次日随机分组并开始给药，每日1次，连续8d，于给药第2d，腹腔注射20％绵羊细胞悬液0.2ml/只免疫，继续给药6d，于末次给药后次日，从眼眶取血于离心管内，2000rpm离心10分钟，取血清，用生理盐水500倍稀释，样品管中依次加入稀释血清1ml与10％绵羊红细胞(SRBC)悬液0.5ml，10％的补体1ml，然后置于37℃水浴中温育10分钟，在冰浴中终止反应，2000rpm离心10分钟，取上清液1ml，加都氏试剂3ml摇匀，放置10min后，于酶标仪540nm波长处比色，测定吸收度。羊红细胞半数溶血时吸光度的测定：取0.25ml5％绵羊细胞悬液，加都氏试剂至4ml，摇匀，放置10分钟后，于酶标仪540nm波长处比色，HC50＝样品吸光度值/羊红细胞半数溶血时吸光度值×稀释倍数实验结果以均数加减标准差表示，统计学处理方法采用组间t-检验
结果与讨论
Dio对FT-207荷瘤小鼠血清溶血素抗体生成的影响详见表17、18。
表17 Dio对FT-207荷瘤小鼠血清溶血素抗体生成的影响(
x±s，n＝10)第一批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 溶血值HC50 |
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 177.1±47.84226.1±44.22*216.4±33.66*185.3±36.92224.1±40.94*192.4±46.08183.4±32.24241.9±28.56**235.7±34.0**219.8±39.18*190.6±40.85188.2±48.83 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
表18.Dio对FT-207荷瘤小鼠血清溶血素抗体生成的影响(
x±s，n＝10)第二批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 溶血值HC50 |
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 182.6±48.13233.3±46.20*223.7±37.49*192.1±39.93230.8±51.82*198.1±53.84189.3±31.59248.8±47.53**243.2±33.65**226.2±40.20*196.7±46.24195.7±47.48 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
6.狄奥宁片(Dio)对替加氟片(FT-207)SRBC所致荷瘤小鼠迟发型超敏反应的影响
材料与方法
动物ICR小鼠，20±2g，购自吉林大学基础医学部实验动物中心动物合格证号：SCXK-(吉)2003-0001。
瘤株小鼠肉瘤(S180)，瘤株购自吉林省肿瘤研究所。
药品及试剂薯蓣皂苷元，白色粉末，规格：纯度为95.69％，批号30000126，由吉林天药科技股份有限公司天然药物研究所中药化学室提供；替加氟片(FT-207)，规格：50mg/片，批号：040201上海华联制药有限公司产品；绵羊红细胞(SRBC)
方法实验动物随机分为对照(CMC 20ml/kg)、FT-207(200mg/kg、100mg/kg和50mg/kg)三个剂量组；Dio(50mg/kg、25mg/kg和12.5mg/kg)三个剂量组；FT-207+Dio(200mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(100mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(100mg/kg+12.5mg/kg)；FT-207+Dio(50mg/kg+25mg/kg)；FT-207+Dio(50mg/kg+12.5mg/kg)。共12组，每组10只，均灌胃给药。根据移植性肿瘤研究法，选取移植肿瘤7天左右，肿瘤生长良好，腹部膨隆明显的小鼠，在超净工作台内进行腹部皮肤消毒，用一次性无菌采血器经腹壁刺入腹腔，抽取腹水，放入无菌烧杯中以生理盐水稀释使细胞呈混悬状态，镜下调整细胞浓度为2×107/ml。于每只实验小鼠右腋窝皮下接种0.2ml。各组动物于接种肿瘤次日随机分组并开始给药，每日1次，给药第三天，小鼠左后足垫皮下注射20％的SRBC生理盐水悬液50ul致敏，于末次给药后，右后足垫皮下注射同样剂量的SRBC攻击，左后足垫皮下注射同样剂量的生理盐水对照，24h后，用千分尺测量左右足垫的厚度差，比较两组之间的差值观察受试药对迟发超敏反应的影响。
实验数据以均数加减标准差(
x±s)表示，统计学处理方法采用组间t-检验。
结果与讨论
Dio对FT-207 SRBC诱导的荷瘤小鼠迟发型超敏反应的影响详见表19、20
表19.Dio对FT-207 SRBC诱导的荷瘤小鼠迟发型超敏反应的影响(
x±s，n＝10)第一批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 肿胀度(mm) |
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 0.41±0.150.25±0.09**0.26±0.11*0.35±0.160.38±0.200.39±0.140.36±0.180.34±0.10▲0.37±0.13▲0.38±0.110.36±0.150.39±0.16 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
表20.Dio对FT-207 SRBC诱导的荷瘤小鼠迟发型超敏反应的影响(
x±s，n＝10)第二批
| 组别 | 给药量(mg/kg) | 肿胀度(mm) |
| 对照FT-207FT-207FT-207DioDioDioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+DioFT-207+Dio | -20010050502512.5200+25100+25100+12.550+2550+12.5 | 0.40±0.110.24±0.12**0.28±0.14*0.33±0.180.37±0.130.37±0.130.38±0.170.35±0.11▲0.36±0.130.38±0.110.35±0.090.37±0.12 |
注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照组等剂量比较，▲P＜0.05；▲▲P＜0.01；▲▲▲P＜0.001。
具体实施方式
实施例1本发明胶囊剂的制备
取薯蓣皂苷元100克，按按制备胶囊剂常规方法制成。
实施例2本发明片剂的制备
取薯蓣皂苷元100克，按按制备片剂常规方法制成。
实施例3本发明和五氟尿嘧啶组合物的制备
取薯蓣皂苷元100克，五氟尿嘧啶100克，将薯蓣皂苷元制片剂，五氟尿嘧啶为注射剂。
实施例4本发明和紫杉醇组合物的制备
取薯蓣皂苷元100克，紫杉醇10克，将薯蓣皂苷元制片剂，紫杉醇为注射剂。
实施例5本发明和替加氟组合物的制备。
取薯蓣皂苷元100克，替加氟300克，按制备片剂常规方法制成片剂。
实施例5本发明和优福定组合物的制备。
取薯蓣皂苷元100克，优福定50克，按制备片剂常规方法制成片剂。
实施例6本发明和多西紫杉醇组合物的制备。
取薯蓣皂苷元100克，多西紫杉醇200克，将薯蓣皂苷元制片剂，多西紫杉醇为注射剂。
Claims (10)
1、薯蓣皂苷元在制备对化疗药物具有增效减毒作用的药物中的应用。
2、如权利要求1所述的应用，薯蓣皂苷元在化疗药物对人黑色素瘤的治疗中具有增效减毒作用。
3、如权利要求1所述的应用，薯蓣皂苷元在化疗药物对人宫颈癌的治疗中具有增效减毒作用。
4、如权利要求1所述的应用，薯蓣皂苷元在化疗药物对人胃癌的治疗中具有增效减毒作用。
5、如权利要求1所述的应用，薯蓣皂苷元在化疗药物对人乳腺癌的治疗中具有增效减毒作用。
6、如权利要求1所述的应用，薯蓣皂苷元在化疗药物对小鼠肉瘤(S180)、小鼠前胃癌(MFC)、小鼠肝癌实体瘤(H22)、小鼠肝癌腹水瘤(Hep-A-22)的治疗中具有增效减毒作用。
7、如权利要求1所述的应用，化疗药物为嘧啶类抗癌药或紫杉类化合物抗肿瘤药。
8.如权利要求7所述的应用，化疗药物为五氟尿嘧啶、替加氟、优福定、紫杉醇或多西紫杉醇。
9、一种药物组合物，包括薯蓣皂苷元和化疗药物。
10、根据权利要求9所述的药物组合物，化疗药物为五氟尿嘧啶、紫杉醇或替加氟。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2006100172431A CN100562321C (zh) | 2006-10-13 | 2006-10-13 | 薯蓣皂苷元在制备具有增效减毒作用的药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2006100172431A CN100562321C (zh) | 2006-10-13 | 2006-10-13 | 薯蓣皂苷元在制备具有增效减毒作用的药物中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1931173A true CN1931173A (zh) | 2007-03-21 |
| CN100562321C CN100562321C (zh) | 2009-11-25 |
Family
ID=37877295
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB2006100172431A Expired - Fee Related CN100562321C (zh) | 2006-10-13 | 2006-10-13 | 薯蓣皂苷元在制备具有增效减毒作用的药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN100562321C (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101511368B (zh) * | 2006-08-03 | 2012-10-03 | 肿瘤学研究国际有限公司 | 用于促进抗癌疗法活性的组合物 |
| CN106309484A (zh) * | 2015-07-02 | 2017-01-11 | 聊城市奥润生物医药科技有限公司 | 硫(硒)代磷酸环二核苷酸cGAMP在治疗肿瘤联合用药中的应用 |
-
2006
- 2006-10-13 CN CNB2006100172431A patent/CN100562321C/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101511368B (zh) * | 2006-08-03 | 2012-10-03 | 肿瘤学研究国际有限公司 | 用于促进抗癌疗法活性的组合物 |
| CN106309484A (zh) * | 2015-07-02 | 2017-01-11 | 聊城市奥润生物医药科技有限公司 | 硫(硒)代磷酸环二核苷酸cGAMP在治疗肿瘤联合用药中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN100562321C (zh) | 2009-11-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1622814A (zh) | 抗肿瘤活性吲哚并吡咯并咔唑衍生物和其它抗肿瘤药物的联合应用 | |
| CN1668325A (zh) | 乳铁蛋白在治疗恶性肿瘤及其它过度增生性疾病中的用途 | |
| CN1063957C (zh) | 一种金荞麦制剂的制备方法 | |
| CN1813868A (zh) | 一种治疗和改善慢性疲劳综合症的组合物及其制备方法 | |
| CN1284587C (zh) | 一种治疗消化道肿瘤的中药制剂 | |
| CN1931173A (zh) | 薯蓣皂苷元在制备具有增效减毒作用的药物中的应用 | |
| CN1681489A (zh) | 增加抗肿瘤活性的化疗药物的联用 | |
| CN1957956A (zh) | 一种具抗肿瘤和免疫调节作用的多菌组合物及其制备方法与用途 | |
| CN106420618A (zh) | 一种由Anti‑CA Ⅸ修饰的去甲斑蝥素胶束纳米粒的制备方法 | |
| CN1207030C (zh) | 一种具有抗肿瘤、抗自由基损伤和调节免疫的天然生物反应调节剂 | |
| CN1283300C (zh) | 一种治疗糖尿病的中药组合物及其制备方法 | |
| CN1931314A (zh) | 一种药物及其制备方法 | |
| CN1957944A (zh) | 红豆杉多糖在制药中的应用 | |
| CN1298379C (zh) | 一种治疗前列腺癌、肝癌、肉瘤等恶性肿瘤的药物 | |
| CN1418633A (zh) | 一种以20(s)－原人参二醇为有效成分的抗癌辅助药物及应用 | |
| CN1211110C (zh) | 一种治疗肿瘤的中药组合物及其制备方法 | |
| CN101077873A (zh) | 新的neo－克罗烷型二萜化合物及其应用 | |
| CN101045721A (zh) | 蛇葡萄素不饱和钠盐的制剂及其应用 | |
| CN1546533A (zh) | 猴头菌硫酸酯蛋白多糖、其制备方法和以该化合物为活性成分的药物组合物 | |
| CN1486692A (zh) | 一种用于治疗癌症的植物提取物 | |
| CN1114896A (zh) | 一种抗癌中药制剂及其制备方法 | |
| CN1623554A (zh) | 一种以c－k为有效成分的抗癌辅助药物及其应用 | |
| CN1850107A (zh) | 一种用于恶性胸腹腔积液的脂肪乳组合物及其制备方法 | |
| CN101073663A (zh) | 一种用于治疗恶性肿瘤的中药组合物及其制备方法 | |
| CN1092680A (zh) | 中药抗癌粉针剂 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20091125 Termination date: 20121013 |