CN1890249A

CN1890249A - 作为ikk抑制剂的被取代的3－氨基－噻吩并[2,3－b]吡啶－2－羧酸酰胺化合物

Info

Publication number: CN1890249A
Application number: CNA2004800362007A
Authority: CN
Inventors: 陈志东; 皮尔·F·西里洛; 达伦·迪萨尔沃; 刘为民; 丹尼尔·R·马歇尔; 吴立芬; 埃里克·R·R·扬
Original assignee: Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2003-12-05
Filing date: 2004-12-02
Publication date: 2007-01-03
Also published as: PE20050591A1; UY28647A1; US20060270671A1; BRPI0417369A; US20050182053A1; JP2007513187A; RU2006123704A; TW200530252A; KR20070029643A; MXPA06005934A; JP4557984B2; AR047265A1; IL176117A0; WO2005056562A1; US7119102B2; US20080312185A1; AU2004297250A1; CA2548011A1; EP1692141A1

Abstract

公开了式(I)化合物：其中各变量R₁、R₂、R₃及Z在文中进行了描述，这些化合物可用作IκB激酶(IKK)复合物的激酶活性抑制剂。所以这些化合物可用于治疗IKK介导的疾病，包括自身免疫疾病、炎性疾病及癌症。也公开含这些化合物的药物组合物及制备这些化合物的方法。

Description

作为IKK抑制剂的被取代的 3-氨基-噻吩并[2，3-B]吡啶-2-羧酸酰胺化合物

相关申请案

本申请要求2003年12月5日提交的美国临时申请号60/527,522号的优先权。本申请也涉及美国专利申请号10/453,175和10/730,172。

发明的技术领域

本发明是关于可用作IκB激酶(IKK)的激酶活性抑制剂的被取代的3-氨基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺化合物。所以这些化合物可用于治疗IKK介导的疾病，包括自身免病疾病、炎性疾病及癌症。本发明也关于制备这些化合物及包含这些化合物的药物组合物的方法。

发明背景

NF-κB或称核因子κB是转录因子，其诱导多种促炎及抗凋亡(基因的表达。这些包括细胞因子，如IL-1、IL-2、TNF-α及IL-6，趋化因子，包括IL-8及RANTES，以及其他促炎分子，包括COX-2及细胞粘着分子如ICAM-1、VCAM-1及E-选择蛋白。NF-κB族包括由Rel系的员构成的同-及异-二聚体转录因子(见例如：P.A.Baeurle和D.Baltimore，Cell，1996，87，13)。在静息条件下，NF-κB是以与IκB形成的复合物形式存在于细胞溶胶内。蛋白的IκB族有NF-κB抑制剂的作用，干扰其核定位信号(nuclearlocalization signal)功能(见，例如，U.Siebenlist等，Ann.Rev.Cell Bio.，1994，10，405)。在细胞活化后IκB-NF-κB复合物破坏时，NF-κB移位至核并活化基因转录。IκB-NF-κB复合物的破坏及之后的NF-κB的活化是由IκB的降解开始。

在细胞由各种促炎刺激包括IL-1、TNF-α及LPS(细菌脂多糖)活化时，有二种特异IκB丝氨酸残基被磷酸化。磷酸化时，IκB进行多泛素化(polyubiquination)，继之被26S蛋白酶体降解(见，例如，V.J.Palombella等，Cell，1994，78，773)，释出NF-κB移位至核。IκB的磷酸化是被IκB激酶进行的(见例如，M.Karin和M.Delhase，Seminars in Immunology，2000，12，85的综述)。传统的IKK复合物包括至少三种亚单位，IKKα(也称作IKK-1)，IKKβ(或IKK-2)及IKKγ(或NEMO)，虽然涉及IKKα及IKKβ的其他有关复合物也可以存在。虽然一般认为IKKγ是调节亚单位，IKKα及IKKβ都是催化亚单位。IKKα及IKKβ都可使IκB磷酸化。就本发明目的而言，术语IKK或IKK复合物是指有由IKKα及/或IKKβ亚单位衍生的激酶活性的任何复合物。

在体内，IKK的活化出现于其催化亚单位的磷酸化时。IKKα及IKKβ都可在丝氨酸残基进行磷酸化，对于IKKβ的情形是出现于活化环(activation loop)的S177及S181，而对于IKKα的情形是出现于活化环的S176及S180。在177及181处以丙氨酸代替丝氨酸的IKKβ突变体防止IKKβ磷酸化及之后的以TNFα，IL-1及其它上游活化剂所致的IKK复合物的活化。这些结果支持在促炎刺激后IκB磷酸化中IKKβ所扮演的关键角色。

在细胞及动物中NF-κB途径受抑制而作的研究支持这样的观念，即抑制IκB磷酸化是治疗炎性、自身免疫病及其它疾病的可实行的途径。在这些研究中，通过不降解的IκB蛋白的表达防止NF-κB活化。抑制剂在来自类风湿关节炎病人的滑膜细胞的表达降低TNF-α、IL-6、IL-1β及IL-8的表达，而不影响抗炎分子IL-10、IL-lra及IL-11。基质金属蛋白酶(MMP1及MMP3)也调降(down-regulated))(J.Bonderson等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，1999，96，5668)。T细胞内IκB抑制剂的转基因表达导致小鼠胶原蛋白诱发的关节炎严重性及发生率的降低(R.Seetharaman等，J.Immunol.1999，163，1577)。这些实验显示，生病的关节内的NF-κB受抑制可降低RA的严重性及进展。在初级肠上皮细胞内，NF-κB抑制剂阻断IL-1、IL-8、iNOS及COX-2、在炎性肠疾病过程中上调(C.Jubin等，J.Immunol.，1998，160，410)介质的表达。在某些肿瘤细胞内该抑制剂的表达提高了由化学治疗剂所致的杀死这些细胞(A.A.Beg和D.Baltimore，science，1996，274，782)。

以患慢性阻塞性肺病(COPD)病人的肺所作的活组织检查分析发现与疾病严重性有关的NF-κB的表达增加(A.Di Stefano等，Eur.Resp.J.，2002，1，437)。以IKK-β抑制剂抑制NF-κB活化是被报告为潜在用于治疗COPD的抗炎途径之一(P.J.Barnes，Nature Rev.Drug Disc.，2002，1，437)。同样，抑制NF-κB活性也被提出是治疗气喘的途径(A.Pahl和I.Szelenyi，Infl.Res.，2002，51，273)。

最近的综述描述炎性介质在心血管疾病发展中的主要角色。据报告，炎性介质及其募集(recruite)的细胞在导致动脉硬化的脂条及噬斑的发展上扮演关键性角色。此外，据报告其在之后噬斑上形成的纤维帽(fibrous cap)的降解中也扮演关键性角色，导致破裂及血块形成。如果血块长到足够大，会导致心肌梗塞或中风。所以，能抑制这些介质的产生和之后这些细胞的募集和活化的抗炎药物在治疗这些疾病上当是有益的(P.Libby，ScientificAmerican，2002，46)。

许多研究显示，NF-κB的活化在癌的致病及发展上也扮演关键角色(见，例如，B.Haefner，Drug Disc.Today，2002，7，653及M.Karin等，Nat.Rev.Cancer，2002，2，301)。研究显示，NF-κB具组成性化活性的细胞对凋亡有抗性。通过预防已有染色体改变或损伤的细胞的死亡，这在致癌上会是有贡献的。此外，具组成性活化NF-κB的肿瘤细胞对包括化学治疗及放射治疗的抗癌治疗是有抗性的。进一步的研究已将活化的NF-κB与各种衍生自淋巴-、骨髓-、及上皮的恶性肿瘤相连，包括白血病、淋巴瘤、及乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌及胰腺癌。所以，有人建议NF-κB抑制剂，包括IKKα及IKKβ抑制剂，可单独或与其他抗癌治疗联用以治疗癌症。

总而言之，上述研究提出这样的支持论点，通过抑制IKK而抑制NF-κB功能，是治疗自身免疫及炎性疾病，心血管疾病及癌症的有用的治疗。

也在定向破坏的IKKβ基因的小鼠中作了研究。IKKβ基因的敲除导致因肝细胞凋亡而发生的胚胎致死。但IKKβ基因敲除而致的成纤维细胞在以IL-1或TNFα刺激时不进行IKK及NF-κB活化(Q.Li等，Science，1999，284，321)，这支持在炎性刺激后IKKβ在NF-κB活化上的关键角色。

通过表达肝特异性诱发的显性失活IκBα转基因产生有条件的基因敲除(I.Lavon等，Nature Medicine，2000，6，573)。这些小鼠可存活，无肝功能不良现象，甚至一年后仍如此，但确有免疫功能损坏。此研究支持抑制IKKβ会导致免疫受压抑而无肝损伤的观念。

IKKα基因敲除的小鼠出生不久即死亡，并有不同的骨缺陷及皮肤不正常。这些小鼠的成纤维细胞及胸腺细胞显示，在对TNFα、IL-1或LPS的反应上有正常IKK活化及IκB降解(Y.Hu等，Science，1999，284，316；K.Takeda等，Science，1999，284，313)。最近以基因敲除及基因敲入小鼠所作的研究显示IKKα在细胞发展及信号上有不同的功能。与以IKKα基因敲除小鼠所作的研究相反，有激酶不活化的IKKα基因敲入的小鼠是存活的及能育的，这显示见于IKKα基因敲除的小鼠的围生期致死性及异常并非由缺少激酶活性所致。但这些小鼠在B细胞成熟及次级淋巴器官的发育方面的确有缺陷(U.Senftleben等，Science，2001，293，1495)。此种表型似是由于在NF-κB2/p100蛋白变成p52的加工中的缺陷所致，p52是转录因子Rel系的该成员的DNA结合形式。依次，这又导致B细胞内的NF-κB靶基因亚群活化缺陷。此外，以相同小鼠所作的研究显示，在怀孕中哺乳动物上皮的NF-κB活化需IKKα激酶的活化(Cao，Y.，等，Cell，2001，107，763)。此途径是经由TNF受体系成员RANK特异性活化，需要规范的IKK底物IκBα的磷酸化，并达到细胞周期调节基因细胞周期蛋白D1的诱导顶点。

这些研究显示，IKKα激酶活性抑制剂可用于治疗伴有不适宜的B细胞活化的疾病，如狼疮(O.T.Chan等，Immunological Rev.，1999，169，107)及类风湿性关节炎(A.Gause和C.Borek，Biodrugs，2001，15，73)。此外，IKKα抑制剂可用于治疗乳腺癌，因为NF-κB对数种乳腺癌是具组成性的活性的，且多种这些肿瘤在增殖上是依赖细胞周期蛋白D1的。

据报告已有一些IKKβ抑制剂。例如WO 01/58890及WO 03/037886说明杂芳香族羧酰胺衍生物为IKKβ抑制剂。WO 01/68648说明被取代的β-咔啉有IKKβ抑制活性。WO 01/30774报告了有IKKβ抑制活性的被取代的吲哚。WO 01/00610说明了有NF-κB抑制活性的被取代的苯并咪唑。阿司匹林及水杨酸盐被报告结合于IKKβ并抑制IKKβ(M.Yin等，Nature，1998，396，77)。

US 2001/0020030 A1及A.O.Stewart等，J.Med.Chem.，2001，44，988报告被取代的噻吩并吡啶有细胞粘着抑制活性。US 6,313,301中报告了噻吩并吡啶表现促性腺素释放荷尔蒙拮抗活性。US 5,656,638揭示作为端粒酶抑制剂的被取代的噻吩并吡啶。

化学文献说明了数种4，6-二取代的噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺。实例包括3-氨基-4，6-二甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸二酰胺，3-氨基-4-甲基--6-苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酰胺，3-氨基-6-甲基-4-苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-6-(4-溴-苯基)-4-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-4-(4-溴-苯基)-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-丁基酰胺，3-氨基-6-呋喃-2-基-4-苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-6-呋喃-2-基-4-吡啶-3-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-4-(4-氯-苯基)-6-苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-4-(4-氟-苯基)-6-呋喃-2-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-4-(4-氯-苯基)-6-呋喃-2-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-4-(4-溴-苯基)-6-呋喃-2-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-4，6-双(4-氯-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-6-萘-2-基-4-吡啶-3-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-(2-羟基乙基)酰胺，3-氨基-6-甲基-4-哌啶-1-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺及3-氨基-4-甲基-6-羟基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酰胺，报告作为中间体用于合成三环杂环和评估抗过敏活性(G.Wagner等，Pharmazie，1990，45，102)。

其他实例包括3-氨基-4，6-二苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(A.M.Shestopalov等，J.Org.Chem.USSR，(英文译本)1984，20，1382)，3-氨基-6-甲基-4-吡啶-4-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺及3-氨基-6-甲基-4-吡啶-3-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(G.Wagner等，Pharmazie，1993，48，514)，3-氨基-4-甲氧基甲基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(E.I.Kaigorodova等，Chem.Heterocycl.Compd.(英文译本)，1996，32，1234)，3-氨基-6-甲基-4-噻吩-2-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-4-呋喃-2-基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，3-氨基-4-(4-氯-苯基)-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺及3-氨基-4-呋喃-2-基-6-苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(F.A.Attaby，Phosphorus，Sulfur，Silicon Relat.Elem.，1998，139，1)，3-氨基-6-(4-氯-苯基)-6-噻吩-2-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(Y.Sharanin等，J.Org.Chem.USSR，(英文译本)1996，32，1207)，3-氨基-6-苯基-4-吡啶-3-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(A.Krauze，Eur，J.Med.Chem.Chim.Ther.，1999，34，301)及3-氨基-6-噻吩-2-基-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(M.I.Abdel-Monem等，Pharmazie，2001，56，41)。

没有将这些化合物描述为具有抑制IKKα或IKKβ的能力的情形。

发明概述

所以本发明目的在提供根据式(I)的新颖化合物：

其中各变量R₁、R₂、R₃及Z如此处所述，这些化合物抑制IKK。本发明另一目的在提供治疗由IKK加重的疾病及病症方法，如，但不限于，自身免疫疾病、炎性疾病及癌症。本发明又一目的是提供制备上述新颖化合物的新颖方法。

发明详述

本发明第一方面包括通过给药式(I)的新颖并已知的分子来治疗炎性或自身免疫疾病的方法：

其中：

R₁是

(a)苯基或选自呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、咪唑基及苯并呋喃基的杂芳基，任选地被一至二个R₄取代，

(b)选自1-哌啶基、1-哌嗪基、1-吡咯烷基及4-吗啉基的杂环基，任选地被一至二个选自C_1-6烷基、-CO₂C_1-5烷基、苯基、苄基、-OH及-C(O)杂芳基的基团取代，其中杂芳基是选自呋喃基、噻吩基、吡啶基及吡咯基，

(c)R₇(CH₂)_mO-，

(d)R₇OCH₂-，

(e)R₇(CH₂)_mNH-，

(f)R₇(CH₂)_p(CH＝CH)_m-，

(g)C_1-6烷基，任选地部分或(of)全部卤化并任选地被一至二个R₈取代，

(h)C_1-8烷氧基，任选地部分或全部卤化并任选地被一至二个R₈取代，

(i)C_1-8烷基S(O)_n-，任选地部分或全部卤化并任选地被一至二个R₈取代，

(j)-N(R₅)(R₆)，或

(k)-C(O)NHR′，其中R′是R₇、吡啶基、或-CH₃；

R₂是杂芳基，选自呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、四唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、中氮茚基、吲哚基、异吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并唑基、嘌呤基、喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、2，3-二氮杂萘基、喹唑啉基、喹喔啉基、1，5-二氮杂萘基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、及吩嗪基，任选地被一至三个R₄取代；

R₃是-OH或-H；

R₄选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷基、卤素、-CN、-CO₂H、-CO₂C_1-6烷基、-S(O)_nC_1-6烷基、-S(O)_n-对-甲苯基、-NO₂、-OH、-CF₃、-N(R₅)(R₆)、-NHC(O)NHC_1-6烷基、-C(O)N(R₅)(R₆)、任选地被卤素、C_1-6烷基、-CN、或C_1-6烷氧基取代的苯基，及选自R₉的杂芳基；

R₅及R₆是独立选自H、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基、-SO₂C_1-6烷基、苯基、吡啶基、苄基、哌啶基、苯基乙基及(CH₃)₃COC(O)-；

R₇是苯基，任选被一或二个选自卤素、C_1-6烷基、-CN、-CO₂C_1-6烷基、-C(O)NR₅R₆、-SO₂NH₂、-NO₂、-OH、-NH₂、-CF₃及C_1-6烷氧基的基团取代，或R₇是C_3-6环烷基、-CH₂OH、萘-2-基、萘-1-基、吡啶基或噻吩基；

R₈是选自氧代、-OH、-NR₄R₅、-CO₂H及C_1-6烷氧基；

R₉是杂芳基，选自呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、四唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、中氮茚基、吲哚基、异吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并唑基、嘌呤基、喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、2，3-二氮杂萘基、喹唑啉基、喹喔啉基、1，5-二氮杂萘基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、及吩嗪基和甲基咪唑基、carbanomethylsulfanyl、甲氧基哌啶基、甲氧基吡啶基、溴代吡啶基和甲氧基嘧啶基；

m是0或1；

n是0、1或2；

P是0，1，2或3；

Z是键或-O-CH₂-；

及其药学上可接受的盐、酯、互变异构体、单独异构体及异构体混合物。

第二方面，本发明提供上述式(I)的新颖化合物

其中：

R₁是

(a)R₇(CH＝CH)-；

(b)C_1-6烷基，

(c)-C_2-3烷基OH，

(d)-CF₃；

(e)-C_1-6烷氧基，任选地部分或全部卤化，

(f)-OC_2-3烷基OH，

(g)-C_1-6烷硫基，或

(h)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₂是杂芳基，选自呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、中氮茚基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并唑基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基及1，5-二氮杂萘基，任选地被一至三个R₄取代；

R₃是-OH或-H；

R₄是选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷基、卤素、-CN、-CO₂H、-CO₂C_1-6烷基、-S(O)_nC_1-6烷基、-S(O)_n-对-甲苯基、-NO₂、-OH、-CF₃、-N(R₅)(R₆)、-NHC(O)NHC_1-6烷基、-C(O)N(R₅)(R₆)、任选地被卤素、C_1-6烷基、-CN或C_1-6烷氧基取代的苯基，及选自R₉的杂芳基；

R₇是苯基，任选地被一或二个选自卤素、C_1-6烷基、-CN、-CO₂C_1-6烷基、-C(O)NR₅R₆、-SO₂NH₂、-NO₂、-OH、-NH₂、-CF₃及C_1-6烷氧基的基团取代，或R₇是C_3-6环烷基、-CH₂OH、萘-2-基、萘-1-基、吡啶基或噻吩基；

n是0、1或2；

Z是键或-O-CH₂-；

在另一本发明具体实施方式中提供上述式(I)新颖化合物，

其中：

R₁是

(a)R₇(CH＝CH)-；

(b)C_1-6烷基，

(c)-CF₃；

(d)-C_1-6烷氧基，任选地部分或全部卤化，

(e)-C_1-6烷硫基，或

(f)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₃是-OH；

R₄是选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷基、卤素、-CN、-CO₂H、-CO₂C_1-6烷基、-S(O)_nC_1-6烷基、-S(O)_n-对-甲苯基、-NO₂、-OH、-CF₃、-N(R₅)(R₆)、及-C(O)N(R₅)(R₆)；

n是0、1或2；

Z是键或-O-CH₂-；

在另一本发明具体实施方式中提供上述式(I)新颖化合物，

其中：

R₁是

(a)R₇(CH＝CH)-；

(b)C_1-6烷基，

(c)-CF₃；

(d)-C_1-6烷氧基，任选地部分或全部卤化，

(e)-C_1-6烷硫基，或

(f)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₂是杂芳基，选自噻吩基、噻唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基及异喹啉基；任选地被一至三个R₄取代；

R₃是-OH；

R₅及R₆是独立选自H、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基、-SO₂C_1-6烷基、苯基、吡啶基、苄基、哌啶基及苯基乙基；

n是0、1或2；

Z是键或-O-CH₂-；

在又一本发明具体实施方式中提供上述式(I)新颖化合物，

其中：

R₁是

(a)R₇(CH＝CH)-；

(b)C_1-6烷基，

(c)-CF₃；

(d)-C_1-6烷氧基，任选地部分或全部卤化，

(e)-C_1-6烷硫基，或

(f)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₂是杂芳基，选自3-噻吩基、2-噻唑基、2-咪唑基、2-，3-及4-吡啶基、4-嘧啶基、2-吡嗪基、2-吲哚基、2-苯并噻吩基、2-苯并咪唑基、2-苯并噻唑基、2-，3-，4-及6-喹啉基及1-及3-异喹啉基；任选地被一至三个R₄取代；

R₃是-OH；

n是0、1或2；

Z是键或-O-CH₂-；

在又一本发明具体实施方式中提供上述式(I)新颖化合物，

其中：

R₁是

(a)C_1-3烷基，

(b)-CF₃，或

(c)-OCH₂CF₃

R₃是-OH；

n是0、1或2；

Z是键；

在又一本发明具体实施方式中提供如下化合物

结构

名称

及其药学上可接受的盐、酯、互变异构体、单独异构体、及异构体混合物。

对于本申请中公开的所有化合物，在其命名与结构冲突时，应了解到这些化合物是以其结构所界定。

本发明包括式(I)化合物的药学上可接受的衍生物。“药学上可接受的衍生物”是指本发明化合物的药学上可接受的酸、盐或酯，或是任何其他化合物，其在给药病人时能提供(直接或间接地)本发明化合物，其具药理活性的代谢物或药理活性的残基。

本发明化合物的药学上可接受的盐包括衍生自药学上可接受的无机及有机酸及碱的那些。适宜的酸的实例包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸、甲苯-对-磺酸、酒石酸、乙酸、柠檬酸、甲基磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸、及苯磺酸。其他的酸，如草酸，虽然其本身并非药学上可接受的，也可用于制备成作为中间体的盐以制得本发明化合物及其药学上可接受的加成盐。由适宜的碱衍生的盐包括碱金属(如钠)盐，碱土金属(如镁)盐，铵及N-(C₁-C₄烷基)₄ ⁺盐。

此外，本发明化合物包括式(I)化合物的前药。前药包括这样的化合物，其经过简单转变，修饰成产生本发明化合物。简单的化学转变包括水解、氧化及还原，这些转变以酶、代谢或其他方式出现。具体地，在本发明前药给药病人时，前药即转变成式(I)化合物，从而发生所需的药理效果。

含一或多个不对称碳原子的任何本发明化合物可以外消旋物及外消旋混合物、单一对映体、非对映异构体混合物及单独非对映异构体出现。这些化合物的所有这些异构体形式确切地包括于本发明内。每一产生立体的碳可以是R或S构型，或此种构型的组合。

有些本发明化合物可以一种以上的互变异构体形式存在。本发明包括所有这些互变异构体。

本发明化合物只是那些认作是“化学上稳定的”，此为本领域技术人员所知。例如，具有“悬空价”(dangling valency)或是“负碳离子的”(carbanion)的化合物不视作是本发明化合物。

文中使用如下缩写：

DMF二甲基甲酰胺；

DMSO二甲基亚砜；

EtOAc乙酸乙酯；

EtOH乙醇；

HPLC高效液相色谱法；

MeOH甲醇；

THF四氢呋喃；

TLC薄层色谱法。

文中没有特别界定的术语应是本领域技术人员根据该公开及上下文所了解的意义。例如，“C_1-6烷氧基”即为有终端氧的C_1-6烷基，如甲氧基，乙氧基，丙氧基，戊氧基及己氧基。所有的烷基，烯基或炔基，除非另有说明，应理解为支链的，非支链的。其他具体定义如下：

术语“烷基”，除非另有说明，意指含一至十个碳原子的饱和的脂肪族基团或是含二至十二个碳原子的单-或多不饱和的脂肪族烃基。单-或多不饱和的脂肪族烃基分别含至少一个双或三键。“烷基”是指支链的及非支链的烷基。“烷基”的实例包括直链的有一至八个碳原子的烷基及含三至十个碳原子的直链烷基。其他的实例包括低级烷基，其是含一至六个碳原子的直链烷基及含三至六个碳原子的支链烷基。应了解到，有字头“烷”(“alk”)或“烷基”(“alkyl”)的组合术语是指如上定义的“烷基”的类似物。例如，术语“烷氧基”、“烷硫基”是指经由氧或硫原子连到第二基团的烷基。“烷酰基”是指连到羰基(C＝O)上的烷基。应理解到此处所述各烷基或烷基类似物任选地部分或全部卤化。

术语“环烷基”是指上述烷基的环形类似物。环烷基的实例是饱和的或不饱和的有三至八个碳原子的非芳香族环烷基，其他的实例包括有三至六个碳原子的环烷基。

术语“杂环烷基”是指稳定的4-8员的(但优选是5或6员的)单环或8-11员的双环杂环基团，其可以是饱和的或不饱和的，且是非芳香族的。每一杂环含碳原子及1至4个选自氮、氧及硫的杂原子。杂环可通过环原子相连形成稳定的结构。“杂环烷基”的实例包括如吡咯啉基，吡咯烷基，吡唑啉基，吡唑烷基，哌啶基，吗啉基，硫代吗啉基，哌嗪基，二氢吲哚基，氮杂环丁基，四氢吡喃基，四氢硫代吡喃基，四氢呋喃基，六氢嘧啶基，六氢哒嗪基，二氢-唑基，1，2-噻嗪基(thiazinanyl)-1，1-二氧化物，1，2，6-噻二嗪-1，1-二氧化物，异噻唑烷基-1，1-二氧化物及咪唑烷基-2，4-二酮。

术语“卤素”是指溴、氯、氟或碘。

术语“芳基”应理解成意指6-12员的芳香环，其可为单环或稠合一起或共价相连的多环。术语“芳基”包括，例如，苯基及萘基；其他含“芳基”的术语对于芳基部分有相同的意义，这些基团的实例包括：芳基烷基，芳氧基或芳硫基。

术语“杂芳基”是指稳定的5-8员的(但优选是5或6员的)单环或8-11员的双环芳香族杂环基团。每一杂环含碳原子及1-4个选自氮、氧及硫的杂原子。杂芳基可以通过环上任何原子相连，形成稳定结构。“杂芳基”的实例包括如呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、四唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、中氮茚基、吲哚基、异吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并唑基、嘌呤基、喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、2，3-二氮杂萘基、喹唑啉基、喹喔啉基、1，5-二氮杂萘基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、及吩嗪基。

术语“任选的”或“任选地”意指后述事情或环境可以发生或者可以不发生，该描述包括这样的事情或环境发生的情况和不发生的情况。例如，“任选地被取代的芳基”意指芳基可以是也可以不是被取代的，该描述包括被取代的芳基及未被取代的芳基。

术语“被取代的”意指基团或基团的原子上的一或多个氢原子，不论是否指明，被选自所述取代基的基团代替，条件是不超过原子的正常价，而且取代会生成稳定的化合物。如果连到取代基上的键显示跨越连接环上二个原子的键，则此取代基可键合于环上任一原子。当所列出的取代基未指明该取代基通过哪个原子键合到化合物其他部分时，那么该取代基可以通过该取代基中的任何原子进行键合。例如，在取代基为哌嗪基、哌啶基、或四唑基时，除非另有说明，这些哌嗪基、哌啶基、或四唑基可以通过这些哌嗪基、哌啶基、或四唑基内的任何原子键合于本发明化合物上。一般而言，在任何取代基或基团于任何取代基或化合物中出现一次以上时，每次出现时其定义都是独立的。因此，例如，如果一基团是以0至2个R取代，则此基团任选地是被至多二个R基团取代，而每次出现的R是独立选自可能的R的列出定义。但这些取代基的组合及/或变体只有在这些组合生成稳定的化合物时才是被容许的。

如以上及本申请书内所述，“氮”及“硫”包括任何氮及硫的氧化形式及碱性氮的四级化形式。

治疗用途的方法

根据本发明，提供使用本发明式(I)化合物的新方法。本发明化合物在抑制IKKβ及/或IKKα活性上是有效的。具体地说，这些化合物是用于阻断B细胞活性中IKKβ介导的NF-κB活化及IKKα活化或细胞周期调节基因细胞周期蛋白D1所加剧的疾病过程。在阻断NF-κB活化方面，本发明化合物有效地阻断编码以下基因的转录：炎性细胞因子包括IL-1、IL-2、IL-6、IL-8、TNFα，趋化因子包括IL-8及RANTES以及其他促炎分子包括COX-2及细胞粘着分子如ICAM-1、VCAM-1及E-选择蛋白。这些中介蛋白在炎性、自身免疫及心血管疾病及癌症的病原学上扮演关键角色。预防这些中介蛋白的产生是治疗这些疾病上需要的手段。因此提供使用本发明化合物治疗这些疾病的方法。这些炎性及自身免疫疾病包括，但不限于，骨关节炎，再灌注(reperfusion)损伤，气喘，慢性阻塞性肺病(COPD)，多发性硬化，吉巴综合征，克隆病，溃疡性结肠炎，牛皮癣，移植物对抗宿主病，系统性红斑狼疮，类风湿性关节炎，阿尔茨海默氏病，中毒性休克综合征，胰岛素依赖性糖尿病，急性及慢性痛，热损伤，成人呼吸窘迫综合征(ARDS)，外伤后多发性器官损伤，急性肾小球性肾炎，具急性炎性部分的皮肤病、急性化脓性脑膜炎或其他中枢神经系统疾病，格雷夫斯病，重症肌无力，硬皮病及特应性皮炎。这些心血管疾病包括，但不限于，动脉粥样硬化，心肌梗塞及中风。这些癌症包括，但不限于，淋巴、骨髓及上皮恶性肿瘤包括白血病，淋巴瘤及乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、及胰腺癌。本发明化合物也可用于治疗其他与以上发明背景列出的或讨论过的疾病无关的伴有NF-κB IKK活化的疾病。例如，本发明化合物也可通过提高化学治疗剂的有效性而用于治疗癌症。所以，本发明也提供治疗炎性及自身免疫疾病及其它疾病包括癌症的方法，此法包括给药需治疗的病人药学有效量的本发明化合物。

对于治疗用途，本发明化合物可以任何常规剂型及常规给药方式给药。给药途径包括，但不限于，静脉内、肌肉内、皮下、滑膜内、输液、舌下、经皮、经口、局部或吸入给药。优选的给药方式是经口及静脉内给药。以上述每一途径给药的含本发明化合物的组合物对于本领域技术人员是明白的。本发明还提供含治疗有效量的本发明化合物的药物组合物。这些药物组合物可含药学上可接受的载体及下述佐剂。

本发明化合物可单独给药或与包括其他活性成分的佐剂联用，这些佐剂增强抑制剂稳定性，便于具体实施方式中的含这些化合物的药物组合物的给药，提供增加的溶出性或分散性，增加抑制活性，提供辅助治疗等。有益的是，这些联用治疗使用低剂量常规治疗剂，从而避免单独使用这些药物作为治疗剂时可能的中毒及副作用。本发明化合物可与常规的治疗剂或其他佐剂进行物理组合制成单一药物组合物。有益的是，这些化合物可以在单一剂型中一起给药。在某些具体实施方式中，含这些化合物的组合的药物组合物含有至少约15％，更优选是至少约20％的本发明化合物(w/w)或其组合。或者是，这些化合物也可分开给药(先后或同时给药)。分开给药在给药方案中有较大伸缩性。

如前所述，本发明化合物的剂型包括本领域普通技术人员已知的药学上可接受的载体及佐剂。这些载体及佐剂包括，例如，离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，血清蛋白，缓冲物质，水，盐或电解质及以纤维素为基础的物质。优选剂型包括片剂、胶囊、胶囊形片剂(caplet)、液体、溶液、悬浮液、乳剂、锭剂、糖浆、可再分散的粉末、颗粒、栓剂及透皮贴剂。制备这些剂型的方法是已知的(见，例如，H.C.Ansel和N.G.Popovish，Pharmaceutical Dosage Forms和Drug Delivery Systems，第5版，Lea和Febiger(1990))。剂量水平及需要量是此本领域熟知的，可由本领域普通技术人员从已知方法及技术中选择适合于具体病人的。在某些具体实施方式中，对于70kg病人，剂量水平为约10-1000mg/剂量。虽然每天一个剂量可足够，也可每天至多给5个剂量。对于经口给药，要求每天至多2000mg/天。本领域技术人员会了解，剂量的高、低是取决于具体因素。例如，具体剂量及治疗方案应取决多种因素，如病人的一般健康，疾病的严重性及过程，及主治医生的判断。

一般合成方法

本发明尚提供式(I)化合物的制备方法。本发明化合物可如一般方法及下述实例及本领域普通技术人员所知方法制备。此方面可参考美国申请10/453,173，其全部内容在此引入作为参考。适宜的反应条件及反应时间可根据所用具体反应物决定。除非另有说明，溶剂、温度、压力、及其它反应条件可由本领域普通技术人员容易地选择。在合成实施例部分提供具体方法。反应的进行可以常规方法如薄层色谱法(TLC)监测。中间体及产物可用本领域已知方法纯化，包括柱色谱法，HPLC或重结晶。下述方案中所用中间体可以本领域周知方法或如下述合成实施例中描述的方法容易地制备。

式I化合物可用方案I所述方法制备。

方案I

如上图示，哌啶酮中间体I可与胺中间体III在还原胺化反应中合并生成所需式I化合物。在另一方案II所述方法中，将带有离去基X如卤素或三氟甲基磺酰基的中间体IV与中间体V在有适宜的碱的存在下反应，生成所需式I化合物。在有关方法中，V可与带有二个离去基如卤素或三氟甲基磺酰基的中间体VI反应制得VII。之后，再将VII与巯基乙酰胺在有适宜的碱的存在下反应制得所需式I化合物。

方案II

合成实例

实施例1：3-氨基-6-[4-(2-苯并[b]噻吩-2-基-2-羟基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基噻唑并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将苯并噻吩(671.5mg，5.00mmol)溶于10mL无水THF内，并冷至-78℃。于其中再滴加1.7M t-BuLi(3.00mL，5.10mmol)。将此反应物搅拌1小时。滴加在2.5mL无水THF内的[(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-甲基氨基甲酸叔-丁基酯(545.6mg，2.50mmol)。将此反应物搅拌2小时，加温至-40℃，再加15mL饱和NH₄Cl停止反应。此混合物以2×20mLEtOAc萃取，有机相用1×20mL盐水洗。有机相以MgSO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物溶于CH₂Cl₂内，以SiO₂柱纯化(0-10％EtOAc/己烷)，得554mg，74.7％，(2-苯并[b]噻吩-2-基-2-氧代-乙基)-氨基甲酸叔-丁基酯。

将(2-苯并[b]噻吩-2-基-2-氧代-乙基)-氨基甲酸叔-丁基酯(544mg，1.867mmol)溶于30mLEtOAc内，加10mL二烷内的4.0M HCl。将此混合物搅拌过夜生成白色沉淀。沉淀物用3×10mLEtOAc研磨，真空干燥，得400mg，94.7％，粗制2-氨基-1-苯并[b]噻吩-2-基-乙酮HCl盐。此物料直接使用不必纯化。

将上述2-氨基-1-苯并[b]噻吩-2-基-乙酮HCl盐(400.0mg，1.757mmol)溶于3mLMeOH中。将混合物于湿冰浴中冷却，一次加NaBH₄(128.6mg，3.400mmol)，导致H₂形成。30分钟后，将混合物于旋转蒸发器上浓缩至干，得油体。将此物质悬浮于6mLCH₂Cl₂/己烷内，浓缩至干。重复该循环至得到胶样固体的2-氨基-1-苯并[b]噻吩-2-基-乙醇。

将上述2-氨基-1-苯并[b]噻吩-2-基-乙醇(57.9mg，0.300mmol)，3-氨基-6-(4-氧代-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(50.0mg，0.15mmol)，MP-硼氢化物(100mg)及醋酸(0.075mL，1.31mmol)在THF(4mL)中于2-英钱(dram)小瓶内混合，于室温摇动21小时过夜。将反应物过滤，用MeOH冲洗硼氢化物树脂，再过滤。合并的过滤物于旋转蒸发器上浓缩，得粗制产物。将残余物溶于最少量的MeOH内，载于1毫米制备板(Merck)上，用5％MeOH/CH₂Cl₂及1％NH₃洗脱，得21.3mg，27.9％，标题化合物。ES⁺510.1m/z(MH⁺)。

下列化合物也可以如实施例1所述反应在适宜的胺与3-氨基-6-(4-氧代-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺制得：

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-噻唑-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺460.8m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺455.4m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺455m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-4-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺455.4m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-[4-(2-苯并[b]噻吩-3-基-2-羟基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺510.6m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺458.7m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-[4-(2-苯并噻唑-2-基-2-羟基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺511.1m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[1-(甲苯-4-磺酰基)-1H-吲哚-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺647.0m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(1-甲基-1H-吲哚-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺507.7m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺508.4m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(1H-苯并咪唑-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺494.1m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-{4-[2-(1H-咪唑-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺444.4m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-{4-[2-(2，3-二氯-吡啶-4-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺523.1m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺469.6m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[4-苯基-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H咪唑-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺650.8m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(5-甲基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺469.4m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-4-丙基-6-[4-(2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺439.7m/z(MH⁺)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-4-丙基-6-[4-(2-吡啶-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES^-437.3m/z(M-1)是如实施例1及方案II所述方法制备。

3-氨基-4-丙基-6-[4-(2-吡啶-4-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES^-437.3m/z(M-1)是如实施例1及方案II所述方法制备。

实施例2：3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-噻吩-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将3-噻吩甲醛(0.438mL，5.000mmol)溶于无水CH₂Cl₂内，置于氩气下。向其中加三甲基甲硅烷基氰化物(0.933mL，7.000mmol)及三乙基氨基(0.070mL，0.500mmol)。将此反应混合物搅拌4小时。将混合物于旋转蒸发器上浓缩至干，得噻吩-3-基三甲基硅烷基氧基-乙腈，为澄清油体。

将上述噻吩-3-基三甲基硅烷基氧基-乙腈溶于5mL无水THF内。其内加1.0M的BH₃/THF溶液(7.00mL，7.00mmol)。将反应物搅拌过夜。混合物于旋转蒸发器上浓缩。将残余物溶于10mLMeOH内，在加热下于旋转蒸发器上浓缩。该循环重复4次。将所得粗制胺以实施例1所述方法制得标题化合物。ES⁺460.2m/z(MH⁺)。

实例3：3-氨基-6-{4-[2-(5-氰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以方法6，方法1制备，[2-(5-氰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯是以如下方式制备。

将2-(5-溴-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯(310mg，0.977mmol)，三二亚苄基双钯(22.9mg，0.025mmol)，1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁(DPPF)(27.1，0.049mmol)及氰化锌(274mg，2.34mmol)置于微波管内，以3mL无水DMF密封。此管于Smith Synthesizer^TM(Personal Chemistry)内于180℃加热10分钟。冷却后，反应混合物用30mLEtOAc稀释。有机相用2×20mLH₂O及1×20mL盐水洗，用MgSO₄干燥，过滤，浓缩。将残余物溶于CH₂Cl₂内，用SiO₂柱纯化(25-50％EtOAc/己烷)，得152.1mg，52％，[2-(5-氰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯。

用上述胺以实施例1所述方法制得3-氨基-6-{4-[2-(5-氰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺。ES⁺480.3m/z(MH⁺)。

实例4：3-氨基-6-{4-[2-(6-氰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将2-(6-溴-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯(447.0mg，1.504mmol)，三二亚苄基双钯(33.9mg，0.037mmol)，DPPF(41.1，0.075mmol)及氰化锌(423.0mg，3.61mmol)置于微波管内，以3mL无水DMF密封。此管于Smith Synthesizer^TM(Personal Chemistry)内于180℃加热10分钟。冷却后，反应混合物用30mLEtOAc稀释。有机相用2×20mLH₂O及1×20mL盐水洗，用MgSO₄干燥，过滤，浓缩。将残余物溶于CH₂Cl₂内，用SiO₂柱纯化(25-50％EtOAc/己烷)，得147.5mg，37.2％，[2-(6-氰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯及126.0，28％，[2-(6-氨基甲酰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯。

如实施例1所述将[2-(6-氨基甲酰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯用酸处理去保护。以实施例1所述方法制得3-氨基-6-{4-[2-(6-氰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺。ES⁺480.3m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-{4-[2-(6-氰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是通过[2-(6-氨基甲酰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯的去保护以及再进行如实施例1所述方法的反应而制备。ES⁺498.3m/z(MH⁺)。

实例5：3-氨基-6-{4-[2-(5-苄基氨基甲酰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

向10mL无水THF内的6-碘-烟酸甲基酯于-40℃滴加2M异丙基氯化镁(i-propylmagnesium chloride)的溶液(4.33mL，8.60mmol)。使反应物搅拌1小时，加温至0℃。将烧瓶冷至-40℃，一次加入[(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-氨基甲酸叔-丁基酯。反应混合物3小时加热至室温并再搅拌1小时。加饱和NH₄Cl停止反应，再加50mLEtOAc。有机相用2×20mLH₂O及1×20mL盐水洗，干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。将残余物溶于CH₂Cl₂内，用SiO₂柱纯化(0-20％EtOAc/己烷)，得132.7mg 6-(2-叔-丁氧基羰基氨基-乙酰基)-烟酸甲基酯及烟酸甲基酯(3.2/0.18)混合物。

将6-(2-叔-丁氧基羰基氨基-乙酰基)-烟酸甲基酯(132.7mg，0.451mmol)溶于3mLMeOH内。于其中一次加硼氢化钠(18.96mg，0.50mmol)。0.5小时后将反应混合物于旋转蒸发器上浓缩。将残余物溶于20mLEtOAc内。有机相用2×20mLNH₄Cl及1×20mL盐水洗，干燥(MgSO₄)过滤并浓缩，得133mg，99.5％，6-(2-叔-丁氧基羰基氨基-1-羟基-乙基)-烟酸甲基酯。

将6-(2-叔-丁氧基羰基氨基-1-羟基-乙基)-烟酸甲基酯(137.3mg，0.450mmol)溶于3mLMeOH内。于其内加LiOH单水合物(56.5，1.350mmol)。反应物于室温搅拌过夜。再将反应混合物于旋转蒸发器上浓缩，溶于2mL水内，用AcOH将pH调整至4。将此混合物用3×10mLEtOAc萃取，合并有机部分。有机相用2×20mLH₂O及1×20mL盐水洗，干燥(MgSO₄)过滤并浓缩，得130mg6-(2-叔-丁氧基羰基氨基-1-羟基-乙基)-烟酸。

将6-(2-叔-丁氧基羰基氨基-1-羟基-乙基)-烟酸(130mg，0.461mmol)，二异丙基乙基氨基(DIPEA)(0.426mL，2.44mmol)，四氟硼酸[(苯并三唑-1-基氧基)-二甲基氨基-亚甲基]-二甲基-铵(319mg，1.00mmol)，及苄基氨基(0.246mL，2.30mmol)溶于3mL无水DMF内，搅拌过夜。LC-MS显示有偶合产物生成。此混合物用30mLEtOAc稀释，有机相用2×20mLH₂O及1×20mL盐水洗，干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。将残余物溶于CH₂Cl₂内，用SiO₂柱纯化(10-30％EtOAc/己烷)得47.8，27.9％，[2-(5-苄基氨基甲酰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯。

将[2-(5-苄基氨基甲酰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯(47.0mg，0.129mmol)溶于2mLEtOAc内，添加在二烷内的4.0N HCl(1.0mL，4mmol)。使反应物搅拌过夜。所得沉淀物用3×5mLTHF研磨，于旋转蒸发器上浓缩至干，得43mg6-(2-氨基-1-羟基-乙基)-N-苄基-烟酰胺2HCl。

使用上述的胺以实施例1所述方法制得3-氨基-6-{4-[2-(5-苄基氨基甲酰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺。ES⁺588.3m/z(MH⁺)。

实例6：3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(2-甲基甲硫基-嘧啶-4-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将2-氨基-1-(2-甲基甲硫基-嘧啶-4-基)-乙醇二盐酸盐(0.339克，1.83mmol)溶于最少量的MeOH内，以10mLTHF稀释。于其内加叔-丁基-4-氧代-1-哌啶羧酸酯(0.478克，2.40mmol)，AcOH(0.458mL，8.00mmol)及三乙酰氧基硼氢化钠(1.696克，8.00mmol)，使此反应物搅拌过夜。LC-MS分析显示起始物质已消耗完。将混合物于旋转蒸发器上浓缩，残余物溶于CH₂Cl₂内，以SiO₂柱纯化(0-10％MeOH/CH₂Cl₂)得511.0mg，57.8％收率，4-[2-羟基-2-(2-甲基甲硫基-嘧啶-4-基)-乙基氨基]-哌啶-1-羧酸叔-丁基酯。

将4-[2-羟基-2-(2-甲基甲硫基-嘧啶-4-基)-乙基氨基]-哌啶-1-羧酸叔-丁基酯(510.0mg，1.387mmol)溶于3mLEtOAc内，加3mL在二烷内的4.0M HCl。使此混合物搅拌过夜，有白色沉淀生成。沉淀物用3×10mLEtOAc研磨，真空干燥，得441.4mg，93.2％，粗制1-(2-甲基甲硫基-嘧啶-4-基)-2-(哌啶-4-基氨基)-乙醇二盐酸盐。此物质直接使用不必纯化。

将上述氨基醇二盐酸盐(268.36mg，0.700mmol)，DIPA(0.610mL，3.50mmol)及三氟甲磺酸盐(triflate)(200mg，0.586mmol)溶于10mL二烷内，于80℃加热2小时。于此反应混合物内加5mL2.5M的Na₂CO₃溶液。将此混合物回流过夜。冷却后反应混合物以100mLEtOAc稀释。有机相用2×50mLH₂O及1×50mL盐水洗，干燥(Mg₂SO₄)，过滤并浓缩得褐色残余物，再以3×10mLEtOAc研磨，得153.2mg，52％，标题化合物。ES⁺502.4m/z(MH⁺)。

实例7：3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将2，6-二氯-4-三氟甲基-烟腈(nicotinonitrile)(277mg，1.15mmol)溶于10mL纯EtOH内，于湿冰浴内冷却。于其内加DIPEA(1.74mL，10mmol)及1-(1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2-(哌啶-4-基氨基)-乙醇二盐酸盐(400mg，1.15mmol)。将此混合物搅拌2小时，LC-MS分析显示产物已生成。将反应混合物于旋转蒸发器上浓缩，残余物溶于CH₂Cl₂内，于SiO₂柱上纯化(0-10％MeOH/CH₂Cl₂)得油体，仍有DIPEA污染。以EtOAc研磨得344mg，62.4％，6′-氯-4-[2-羟基-2-(1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基氨基]-4′-三氟甲基-3，4，5，6-四氢-2H-[1，2′]联吡啶基-5′-腈。

将6′-氯-4-[2-羟基-2-(1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基氨基]-4′-三氟甲基-3，4，5，6-四氢-2H-[1，2′]联吡啶基-5′-腈(344.0mg，0.718mmol)溶于2mL无水DMF内。于其内加巯基乙酰胺的1.09M MeOHic溶液(1.00mL，1.09mmol)及1M MeOHic NaOMe溶液(2.87mL，2.87mmol)。此反应混合物于60℃加热2小时。LC-MS显示已完全转化成巯基乙酰胺加合物。再将反应物于80℃加热过夜。反应混合物于旋转蒸发器上浓缩，同时加热至70℃，得暗橘色油体。将此油体溶于最少量MeOH内，用SiO₂柱纯化，以0-10％MeOH/CH₂Cl₂及0-10％MeOH/CH₂Cl₂-1％NH₃洗脱，得213.7mg，55.8％，标题化合物。ES⁺534.3m/z(MH⁺)。

下列化合物也使用在该实施例中描述的方法制备：

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(2-甲基甲硫基-嘧啶-4-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺528.5m/z(MH⁺)是以实施例6及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺495.3m/z(MH⁺)是以实施例6及方案II所述方法制备。

实例8：3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

向氢化钠(矿物油内60％，480mg，12mmol)在无水DMSO(5mL)内的悬浮液中于室温缓慢加碘化三甲基锍(2.66克，13mmol)于12mL无水DMSO内的溶液。于室温搅拌5分钟后，添加3-喹啉甲醛(300mg，1.91mmol)于7mLDMSO内的溶液。加完醛后，溶液由无色变黄色，再转成褐绿色。以LC-MS跟踪反应进行。于室温过1.5小时后，加冰水停止反应，用CH₂Cl₂萃取三次。合并的有机萃取物用盐水洗二次，干燥(Na₂SO₄)并过滤。真空除去溶剂得棕色油体，于SiO₂上进行快速柱色谱法纯化，用MeOH/CH₂Cl₂作洗脱液，得190mg无污染的环氧化物(1.11mmol，理论的58％)，为浅黄色油体。

将上面所得喹啉环氧化物(190mg，1.11mmol)溶于5mL无水CH₃CN内。加4-氨基-哌啶-1-叔-丁基-羧酸酯(238mg，1.19mmol)及高氯酸锂(127mg，1.19mmol)。所得悬浮液进一步用10mLCH₃CN稀释，于室温搅拌过夜，再于60℃油浴内搅拌41小时。真空除去溶剂，将残余物于EtOAc及水间分配。水层用EtOAc萃取一次，合并的有机物用盐水洗，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空浓缩。粗制产物于SiO₂上作快速柱色谱法纯化，用MeOH/CH₂Cl₂混合物作洗脱液，得无色油体，再溶于5mLMeOH内，用5mL二烷内的4N HCl处理。2小时后TLC显示起始物质已完全消耗。真空除去溶剂，得265mg二盐酸盐(0.77mmol，理论值的69％)，为浅黄色泡沫。

以实例6所述方法制得3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(熔点213-216℃，ES⁺505m/z(MH⁺))。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-4-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例8及方案II所述方法由4-喹啉-甲醛制备。熔点170-172℃，ES⁺505m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例8及方案II所述方法由2-喹啉-甲醛制备。熔点159-161℃，ES⁺505m/z(MH⁺)。

实例9：3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

于圆底烧瓶内将2-(3-吡啶基)-2-羟基-1-乙基氨基(1.516克，10.98mmol)分散于40mL无水二氯乙烷内。向此悬浮液内加4-氧代-哌啶-1-羧酸叔-丁基酯(1.822克，9.14mmol)及冰醋酸(1.57mL，27.5mmol)。此混合物于室温搅拌20分钟。然后加三乙酰氧基硼氢化钠(12.111克，57.14mmol)。此混合物用10mLCH₃CN稀释，于室温搅拌二天。

以饱和NaHCO₃溶液停止混合物反应，搅拌30分钟。然后用水稀释，用CH₂Cl₂萃取三次。合并的有机萃取物用盐水洗，干燥(MgSO₄)，过滤，真空除去溶剂。将残余物溶于CH₂Cl₂内，载于快速硅胶色谱柱上。用MeOH/CH₂Cl₂混合物作洗脱液纯化，得1.017克经Boc保护的哌啶，为黄色油体(理论的35％)。

将Boc保护的哌啶(1.017克，3.16mmol)溶于圆底烧瓶内的30mLMeOH内。向其中加10mL二烷内的4N HCl(40mmol)，此混合物于室温搅拌35分钟。以TLC(10％MeOH/二氯甲烷)跟踪反应进行。真空除去溶剂，得1.07mg粉红色泡沫，直接使用不必纯化。

将如上述制备的得的被取代的4-氨基-哌啶二盐酸盐(931mg，3.16mmol)于0℃分散于40mLEtOH内。加2，6-二氯-3-氰基-5-三氟甲基-吡啶(763mg，3.16mmol)，再滴加Hunig′s碱(2.21mL，12.66mmol)。此混合物于0℃搅拌1小时。TLC显示已完全转化。真空除去溶剂，残余物载于快速硅胶色谱柱上。用MeOH/二氯甲烷混合物作洗脱纯化，得709mg所需单氯-吡啶，为橘色泡沫(理论的53％)。

于圆底烧瓶内将上述制备的氯吡啶(709mg，1.67mmol)溶于7mL DMF内。向其中加2-巯基乙酰胺(于甲醇氨内10％的溶液，3.0mL，3.33mmol)及6.7mL 0.5M的NaOMe于MeOH内的溶液(3.4mmol)。于室温搅拌1小时，然后再加另一次6.7mL 0.5M的NaOMe于MeOH内的溶液(3.4mmol)，于60℃油浴内搅拌过夜。高真空除溶剂，加水，以EtOAc萃取三次。合并有机物以盐水洗，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空除去溶剂。残余物用热MeOH研磨，用Buchner漏斗过滤。粗制产物于SiO₂快速柱色谱法纯化，用MeOH/二氯甲烷混合物作洗脱液。得305mg(理论的38％)标题化合物，为亮黄色固体。熔点：179-181℃，ES⁺481m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用实施例9及方案II所述方法以2-(2-吡啶基)-2-羟基-1-乙基胺起始制备。熔点201-202℃，ES⁺481m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-4-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用实施例9及方案II所述方法以2-(4-吡啶基)-2-羟基-1-乙基胺起始制备。熔点217-220℃，ES⁺481m/z(MH⁺)。

实施例10：3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

向氢化钠(矿物油内60％，800mg，20.0mmol)于无水DMSO(5mL)内的悬浮液中于室温缓慢加碘化三甲基锍(4.428克，21.7mmol)于21mL无水DMSO内的溶液。搅拌5分钟后，于此溶液内加2-喹啉-甲醛(500mg，3.18mmol)于7mLDMSO内的溶液。混合物颜色由无色变黄，然后变成绿色。以LC-MS追踪反应进程，40分钟后用冰水停止反应。水层用CH₂Cl₂萃取三次，合并有机物用盐水洗，得绿色溶液。干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空除去溶剂。残余物溶于CH₂Cl₂内，于SiO₂上以快速柱色谱法纯化，用MeOH/二氯甲烷作洗脱液。制得232mg所需环氧化物，为黄色油体(理论的42.6％)。

将上述制备的2-喹啉环氧化物(232mg，1.36mmol)溶于圆底烧瓶内的4mL无水CH₃CN内。然后加4-氨基-哌啶-1-叔-丁基-羧酸酯(290mg，1.45mmol)，继之加LiClO₄(154mg，1.45mmol)。颜色由黄变橘时即表示加入完成。此混合物再以4mL无水CH₃CN稀释，于60℃油浴内搅拌过夜，再以水稀释，用EtOAc萃取三次。合并有机物用盐水洗，干燥(Na₂SO₄)，过滤。真空除去溶剂，残余物于SiO₂上以快速柱色谱法纯化，用MeOH/二氯甲烷混合物作洗脱液。制得纯的被取代的氨基-哌啶，为黄色油体，368mg(理论的73％)。

将上述制备的Boc-保护的哌啶(368mg，0.991mmol)溶于10mLMeOH内。向此溶液中加5mL二烷内的4N HCl，使混合物于室温搅拌过夜。真空除去溶剂得386mg二盐酸盐，为黄色泡沫，直接用于下一步骤不必纯化。

将上述制备的哌啶二盐酸盐(341mg，0.991mmol)分散于20mL纯EtOH内。将混合物冷至0℃，用二氯吡啶(239mg，0.991mmol)处理，于生成的溶液中滴加Hunigs碱。1小时后，真空除去溶剂，得浅黄色固体。于CH₂Cl₂内研磨，继之过滤，得414mg单氯-吡啶，为白色固体(理论的88％)。

将上述制备的单氯-吡啶(412mg，0.866mmol)分散于圆底烧瓶内的7mLDMSO内。于此混合物中加巯基-乙酰胺(于甲醇氨内的10％溶液，0.95mL，1.04mmol)，继之加2.1mL MeOH内的0.5M的甲氧化钠。此混合物于室温搅拌3小时，再于搅拌下于60℃油浴内加热。再加另一份甲氧化钠溶液(2.1mL)，继续于60℃搅拌过夜。高真空除去溶剂，得亮黄色固体，再以热MeOH研磨。用真空Buchner漏斗过滤，得209mg纯标题化合物(理论的46％)。熔点198-201℃，ES⁺531m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例10及方案II所述方法用3-喹啉-甲醛起始制备。ES⁺531m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-4-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例10及方案II所述方法用4-喹啉-甲醛起始制备。ES⁺531m/z(MH⁺)。

实施例11：3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-异喹啉-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将3-异喹啉羧酸甲酯(1.50克，8.01mmol)置于60mL无水甲苯内并冷至0℃。此溶液用1M DIBAL于甲苯内的溶液(8.2mL，8.2mmol)滴加处理。滴加过程中溶液逐渐由无色变黄再变橘色。2小时后，再加2mL 1M DIBAL于甲苯内的溶液，使混合物于0-10℃再搅拌1小时。加酒石酸钠钾水溶液使混合物停止反应，搅拌15分钟，再以盐水及EtOAc稀释。分离各层，水层用EtOAc萃取二次。合并的有机物用盐水重复洗(乳化)，干燥(MgSO₄)，过滤，真空除去溶剂。将所得橘色油体于SiO₂上作快速柱色谱法纯化，用CH₂Cl₂/MeOH混合物作洗脱液。分离出所需异喹啉甲醛，为黄色固体，420mg(理论的33％)。

向氢化钠(矿物油内60％，0.792克，19.8mmol)于无水DMSO(18mL)内的悬浮液中于室温缓慢加碘化三甲基锍(4.3克，21.1mmol)于25mL无水DMSO内的溶液。搅拌5分钟后，于此溶液内加上述制备的异喹啉-甲醛(520mg，3.31mmol)于2mLDMSO内的溶液。混合物于室温搅拌1小时，然后倒于冰水上，用CH₂Cl₂萃取三次。合并有机物用盐水洗，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空除去溶剂。粗制产物于SiO₂上以快速柱色谱法纯化，用于二氯甲烷中的MeOH作洗脱液。制得319mg所需环氧化物，为暗黄色油体。

将上述制备的异喹啉环氧化物(319mg，1.86mmol)及4-氨基-哌啶-1-叔-丁基-羧酸酯(373mg，1.86mmol)与7mL无水乙腈内合并，用高氯酸锂固体(198mg，1.86mmol)处理。使混合物于室温搅拌1天并于60℃搅拌过夜。溶液最终成橘色。此混合物用NaHCO₃稀水溶液停止反应，用EtOAc萃取三次。合并的有机物用盐水洗，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空除去溶剂，得橘色泡沫。该粗制产物于SiO₂上以快速柱色谱法纯化，用MeOH和二氯甲烷的混合物作洗脱液。分离出的被取代的氨基-Boc-保护的哌啶(375mg)为黄色泡沫。¹H NMR与所需区域异构体(regioisomer)一致。

将上述制备的Boc-哌啶(375mg，1.01mmol)溶于30mLMeOH内，于室温以1，4-二烷内的4M HCl(8.75mL)处理。使此混合物于室温搅拌过夜。真空除去溶剂，得二盐酸盐，为灰黄色泡沫，439mg。直接用于下一步骤，不必纯化。

将上述制备的异喹啉基-乙基氨基-哌啶二盐酸盐(160mg，0.52mmol)分散于4mL无水1，4-二烷内。加三乙基胺(0.73mL，5.2mmol)，将此混合物搅拌5分钟。加三氟甲磺酸吡啶(250mg，0.65mmol)，此混合物再以4mL二烷稀释。将反应试管置于70℃油浴内搅拌过夜。将反应混合物冷却，用2M Na₂CO₃水溶液处理。再将试管封闭，于100℃将2-相混合物强烈搅拌7小时。冷却后，加水，混合物用EtOAc萃取三次。合并的有机物用盐水洗，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空除去溶剂。得黄棕色油体315mg。粗制产物于SiO₂上以快速柱色谱法纯化，用MeOH在二氯甲烷中的混合物作洗脱液，得98mg褐色泡沫。用热MeOH研磨，得标题化合物，为白色固体，62mg(理论的24％)。熔点：213-215℃(分解)，ES⁺505m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-异喹啉-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例11及方案II所述方法用甲基-3-异喹啉羧酸酯起始制备。熔点：169-172℃，ES⁺531m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-异喹啉-1-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例11及方案II所述方法用甲基-1-异喹啉羧酸酯起始制备。熔点：＜150℃，ES⁺505m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-异喹啉-1-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例8、实施例3及方案II所述方法用甲基-1-异喹啉羧酸酯起始制备。ES⁺531m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-6-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例11及方案II所述方法用甲基-6-喹啉羧酸酯起始制备。ES⁺505m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-6-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例11及方案II所述方法用甲基-6-喹啉羧酸酯起始制备。熔点：217-219℃，ES⁺531m/z(MH⁺)。

实施例12：3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡嗪-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

向圆底烧瓶内加10mL硝基甲烷内的2-吡嗪甲醛(770mg，7.12mmol)，继之加三乙基胺(721mg，7.12mmol)。此反应混合物于室温搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩。残余物载于快速色谱柱上。此柱用0-5％MeOH/CH₂Cl₂洗脱。收集产物级分并浓缩，得1124mg(93.3％)2-硝基-1-吡嗪-2-基-乙醇。(TLC：Rf＝0.2，5％MeOH/CH₂Cl₂，UV)。

向圆底烧瓶内加2-硝基-1-吡嗪-2-基-乙醇(1012mg，6mmol)，甲酸铵(1886mg，30mmol)及于40mLMeOH内的10％钯/碳(220mg)及40mLTHF内。反应混合物于室温搅拌18小时。反应混合物用硅藻土过滤，真空浓缩。残余物载于快速色谱柱上。此柱用0-5％MeOH/CH₂Cl₂内的2M NH₃洗脱。收集产物级分并浓缩，得480mg(57.7％)2-氨基-1-吡嗪-2-基-乙醇。(TLC：Rf＝0.15，5％于MeOH/CH₂Cl₂内的2M NH₃，UV)。MH⁺＝140.3。用上述制备的中间体以实施例6所述方法制成终化合物。MH⁺＝456.42

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡嗪-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用实施例12及方案II所述方法制备。ES⁺482.41m/z(MH⁺)。

实施例13：三氟-甲基磺酸6-氨基甲酰基甲基甲硫基-5-氰基-4-环丙基-吡啶-2-基酯

向环丙基乙炔(10.0克，148mmol)于50mL乙醚内的溶液中于-78℃在氩气下加入甲基锂(1.4M于乙醚内的溶液，107mL，150mmol)。此溶液于-78℃搅拌1小时。加氯甲酸甲酯(12.0mL，154mmol)。将反应混合物在2h内加温至室温，以水停止反应。分离有机层。水层用乙醚(50mL×3)萃取。合并的有机层于硫酸钠上干燥并蒸发，得环丙基-丙酸甲基酯，为黄色油体(13.25克，72％)。

向环丙基-丙酸甲基酯1(13.25克，0.107摩尔)于300mL纯EtOH内的溶液中于室温在氩气下加吗啉(9.7mL，0.11摩尔)。将此溶液于45℃加热40分钟。加2-氰基硫代乙酰胺(11.36克，0.110摩尔)。此混合物于60℃加热1.5小时。生成黄色沉淀。于室温静置16小时后，过滤收集3-氰基-4-环丙基-6-氧代-1，6-二氢-吡啶-2-硫醇(thiol)吗啉盐(15.02克，50％)，用EtOH洗，然后于室温真空干燥20小时。

将3-氰基-4-环丙基-6-氧代-1，6-二氢-吡啶-2-硫醇吗啉盐(15.00克，53.69mmol)悬浮于15mL无水DMF内。加2-溴乙酰胺(7.74克，55.0mmol)。此混合物于室温搅拌30分钟，以水停止反应。过滤收集所得固体，用水洗，高真空干燥24小时，得2-(3-氰基-4-环丙基-6-氧代-1，6-二氢-吡啶-2-基甲硫基)-乙酰胺，为灰色固体(13.32克，99％)。

将2-(3-氰基-4-环丙基-6-氧代-1，6-二氢-吡啶-2-基甲硫基)-乙酰胺(13.22克，53.03mmol)及N-苯基三氟甲基磺酰亚胺(sulfonimide)(20.00克，55.42mmol)悬浮/溶于100mL二氯甲烷内。加二异丙基乙基胺(10.00mL，56.83mmol)。此混合物于室温搅拌4小时。过滤收集标题化合物，用二氯甲烷洗。收率：17.80克，88％。(ES⁺382m/z(MH⁺))。

实施例14：三氟-甲基磺酸6-氨基甲酰基甲基甲硫基-5-氰基-4-乙基吡啶-2-基酯

向异丁酸乙酯(12.0克，15.1mmol)于15mL无水DMF内的溶液中加2-氰基硫代乙酰胺(7.76克，15.2mmol)，继之加叔-丁氧化钾(9.00克，76.2mmol)。此混合物于80℃在氩气下加热4小时，然后冷至室温。加2-溴乙酰胺(10.6克，75.3mmol)。所得悬浮液于室温搅拌30分钟。加水。过滤收集2-(3-氰基-4-异丙基-6-氧代-1，6-二氢-吡啶-2-基甲硫基)-乙酰胺，并用MeOH重结晶(4.62克，24％)。

将2-(3-氰基-4-异丙基-6-氧代-1，6-二氢-吡啶-2-基甲硫基)-乙酰胺(4.62克，18.4mmol)及N-苯基三氟甲烷磺酰亚胺(7.00克，19.4mmol)悬浮/溶于100mL二氯甲烷内。加二异丙基乙基氨基(4.00mL，22.7mmol)。此混合物于室温搅拌4小时。过滤收集三氟-甲基磺酸6-氨基甲酰基甲基甲硫基-5-氰基-4-异丙基-吡啶-2-基酯，用二氯甲烷洗，得4.64克(66％)。(ES⁺384m/z(MH⁺))。此标题化合物是用类似实施例13所述方法制备。

实施例15：3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-异丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将2-氨基-1-吡啶-2-基-乙醇(0.700克，5.07mmol)及N-boc-哌啶酮(1.20克，5.90mmol)溶于5mL1，2-二氯乙烷内。加冰醋酸(0.40mL，7.0mmol)，再加三乙酰氧基硼氢化钠(2.00克，8.97mmol)。此混合物于室温在氩气下搅拌16小时。真空除去溶剂，残余物作快速色谱纯化(硅胶12克，以二氯甲烷、MeOH、及氢氧化铵100至95∶4.9∶0.1洗脱)，得4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-羧酸叔-丁基酯，为棕色油体(1.46克，90％)。

将4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-羧酸叔-丁基酯(1.46克，4.54mmol)溶于5mLMeOH内。加1，4-二烷内的HCl(4.0M，5mL，20mmol)。此溶液于室温搅拌40分钟。真空除去溶剂。残余物用醚研磨，得2-(哌啶-4-基氨基)-1-吡啶-2-基-乙醇二盐酸盐，为棕色固体(1.314克，88％)。

将上述固体(265mg，0.801mmol)及三氟-甲基磺酸6-氨基甲酰基甲基甲硫基-5-氰基-4-异丙基-吡啶-2-基酯(310mg，0.809mmol)溶于/悬浮于10mL二烷内。加三乙基胺(0.56mL，4.0mmol)。此反应混合物于80℃加热2小时。加叔-丁氧化钾(230mg，1.95mmol)。将此反应混合物于80℃加热4小时。真空除去溶剂，残余物用硅胶快速色谱纯化，用二氯甲烷内的0-5％氨/MeOH(0.1％氨)洗脱，得标题化合物，为结晶产物。收率：143mg，39％。ES⁺455m/z(MH⁺)。

3-氨基-4-环丙基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例13及方案II所述方法制备(ES⁺453m/z(MH⁺))。

3-氨基-4-乙基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例14及方案II所述方法制备(ES⁺441m/z(MH⁺))。

实施例16：3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-(2，2，2-三氟乙氧基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

向2，2-二甲基-1，3-二烷-4，6-二酮(60.0克，416mmol)于DMSO(150mL)内的溶液中加二硫化碳(25mL，420mmol)及三乙基胺(116mL，832mmol)。此混合物于室温搅拌1小时，然后冷至0℃，加52mL(830mmol)碘甲烷。使反应混合物缓慢升至室温，搅拌15小时。将混合物倒入冰-H₂O混合物内，搅拌溶液产生固体沉淀。过滤收集固体，用1∶1石油醚∶Et₂O混合物洗，真空干燥，得29.7克(28.8％)5-(双-甲基甲硫基-亚甲基)-2，2-二甲基-[1，3-]二烷-4，6-二酮，为橘色固体。

向乙氧化钠(40.0mL，123mmol)于EtOH(150mL)内的溶液中加氰基硫代乙酰胺(12.5克，122mmol)。此混合物于室温搅拌15分钟，然后以EtOH(100mL)内的溶液形式加上述制备的二酮30.0克(121mmol)。将此悬浮液加热至回流15小时。再将混合物冷至室温，过滤收集固体。此物质用EtOH洗，减压干燥，得12.5克(52.2％)2-巯基-4-甲基甲硫基-6-氧代-1，6-二氢-吡啶-3-腈，为黄色固体。

向冷至0℃的上述制备的2-巯基-4-甲基甲硫基-6-氧代-1，6-二氢-吡啶-3-腈(12.5克，63.0mmol)于DMF(300mL)内的溶液中加入60％矿物油分散体形式的氢化钠(2.60克，65.0mmol)。此混合物于0℃搅拌30分钟，然后一次加2-溴乙酰胺(8.80克，63.8mmol)固体。使混合物缓慢升至室温并搅拌15小时。将混合物倒入冰-H₂O内，搅拌至所有冰已熔化，此期间溶液有固体沉淀。用2N HCl将混合物酸化，再冷至0℃，过滤收集固体。此物质用Et₂O洗，再用己烷洗，得11.2克(69.9％)2-(3-氰基-4-甲基甲硫基-6-氧代-1，6-二氢-吡啶-2-基甲硫基)-乙酰胺，为褐色固体。

向2-(3-氰基-4-甲基甲硫基-6-氧代-1，6-二氢-吡啶-2-基甲硫基)-乙酰胺(11.2克，44.1mmol)于DMF(300mL)内的冷至0℃的溶液中，加60％矿物油分散体形式的氢化钠(3.60克，90.0mmol)。此混合物于0℃搅拌30分钟，加N-苯基三氟甲基磺酰亚胺(15.8克，44.2mmol)于DMF(100mL)内的溶液。使混合物缓慢升至室温并搅拌15小时。将混合物倒于H₂O内，导致溶液有固体生成。过滤收集固体，用H₂O洗，减压干燥，得8.95克(52.4％)三氟-甲基磺酸3-氨基-2-氨基甲酰基-4-甲基甲硫基-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-基酯，为黄色粉末。

向上述三氟-甲基磺酸3-氨基-2-氨基甲酰基-4-甲基甲硫基-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-基酯(8.95克，23.1mmol)于H₂O与MeOH 1∶1混合物(200mL)内的冷至0℃的悬浮液中一次加入oxzone(17.0克，27.7mmol)固体。使反应混合物缓慢升至室温并搅拌6小时。LC-MS显示有痕量所需产物存在，在质谱404.08[M+H]⁺有峰。过滤收集黄色固体，用H₂O洗。残余物以EtOAc洗纯化并减压干燥，得3.00克(32.2％)三氟-甲基磺酸3-氨基-2-氨基甲酰基-4-甲基亚磺酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-基酯，为黄色粉末。

向三氟-甲基磺酸3-氨基-2-氨基甲酰基-4-甲基亚磺酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-基酯(3.00克，7.44mmol)于DMF(100mL)内的溶液中加1，4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]-癸烷(2.20克，15.4mmol)固体。将此混合物加热至70℃1小时。再将混合物冷至室温，以H₂O稀释，用CH₂Cl₂洗。合并的有机相于无水Na₂SO₄上干燥，减压浓缩。残余物用快速硅胶色谱法纯化，得1.25克(42.2％)3-氨基-6-(1，4-二氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基)-4-甲基亚磺酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，为黄色粉末。

向30mL冷至0℃的2，2，2-三氟乙醇中以小量份加入新切开的并以己烷洗过的钠金属(0.60克，15mmol)。使混合物升至室温并搅拌至所有钠金属已反应。于此混合物内一次加3-氨基-6-(1，4-二氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基)-4-甲基亚磺酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(1.30克，3.28mmol)固体。将此混合物加热至70℃15小时。将混合物冷至室温并以H₂O稀释。此混合物用CH₂Cl₂洗，合并的有机相于无水Na₂SO₄上干燥，减压浓缩。残余物用快速硅胶色谱法纯化，得0.940克3-氨基-6-(1，4-二氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基)-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，为白色粉末。

将3-氨基-6-(1，4-二氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基)-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺白色粉末(0.940克，2.17mmol)于醋酸∶H₂O 4∶1混合物(20mL)内的溶液加热至80℃4小时，然后冷至室温，加饱和NaHCO₃水溶液使成碱性以致有固体从溶液沉淀出。过滤收集固体，减压干燥，得0.680克(80.5％)3-氨基-6-(4-氧代-哌啶-1-基)-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，为澄清油体。

标题化合物是由上述制备的中间体以类似实施例1所述方法制备。ES⁺511.22m/z(MH⁺)。

实施例17：3-氨基-6-{4-[2-羟基-3-(吡啶-4-基氧基)-丙基氨基]哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

向圆底烧瓶内加4-羟基吡啶(250mg，2.63mmol)，缩水甘油(194.74mg，2.63mmol)及20mL无水THF内的三苯基膦(758.45mg，2.89mmol)，然后加偶氮二羧酸二乙酯(503.6mg，2.89mmol)。将反应混合物于室温搅拌18小时。将反应混合物真空浓缩。残余物用CH₂Cl₂稀释。有机相用饱和NaHCO₃溶液及盐水洗。有机相于无水Na₂SO₄上干燥，过滤并浓缩。将残余物载于快速色谱柱上。此柱用0-5％MeOH/CH₂Cl₂洗脱。收集产物级分，浓缩，得80mg(20.1％)4-环氧乙烷基甲氧基-吡啶。(TLC：Rf＝0.4，5％MeOH/CH₂Cl₂，UV)。MH⁺＝152.31。

向密封的试管内加入于4mLDMF内的4-环氧乙烷基甲氧基-吡啶(80mg，0.529mmol)，再加4-氨基-1-N-boc-哌啶(148mg，0.739mmol)。此反应混合物于80℃搅拌48小时。将反应混合物真空浓缩。残余物载于快速色谱柱上。此柱用MeOH/CH₂Cl₂内的0-5％2M NH₃洗脱。收集产物级分，浓缩，得68mg(36.6％)4-[2-羟基-3-(吡啶-4-基氧基)-丙基氨基]-哌啶-1-羧酸叔-丁基酯，为浅棕色油体。(TLC：Rf＝0.15，MeOH/CH₂Cl₂内的5％2M NH₃，UV)。ES⁺352.43m/z(MH⁺)。

向圆底烧瓶内加5mLHCl(4.0M于1，4-二烷内的溶液)内的4-[2-羟基-3-(吡啶-4-基氧基)-丙基氨基]-哌啶-1-羧酸叔-丁基酯(68mg，0.194mmol)及5mLMeOH。此反应混合物于室温搅拌3小时。再将反应混合物高真空泵浓缩，得69mg(98.9％)灰白色固体产物1-(哌啶-4-基氨基)-3-(吡啶-4-基氧基)-丙-2-醇3HCl盐。ES⁺252.41m/z(MH⁺)。

向密封的试管内加4mL无水DMF内的三氟甲基磺酸6-氨基甲酰基甲基甲硫基-5-氰基-4-丙基-吡啶-2-基酯(66.7mg，0.174mmol)，继之加1-(哌啶-4-基氨基)-3-(吡啶-4-基氧基)-丙-2-醇三盐酸盐(69mg，0.191mmol)及N-N-二异丙基乙基胺(180mg，1.39mmol)。此反应混合物于70℃搅拌2小时。真空除去DMF。将残余物溶于5mLMeOH内，再加入于MeOH溶液内的0.5M甲氧化钠(1.74mL，0.86mmol)。此反应混合物于70℃搅拌2小时。将反应混合物真空浓缩。残余物载于快速色谱柱上。此柱用MeOH/CH₂Cl₂内的0-5％2M NH₃洗脱。收集产物级分，浓缩并在高真空泵下干燥，得24mg(28.5％)标题化合物，为淡棕色固体产物。(TLC：Rf＝0.4，于MeOH/CH₂Cl₂内的2M NH₃，UV)。ES⁺485.29m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-3-(喹啉-4-基氧基)-丙基氨基]哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例17及方案II所述方法制备。ES⁺535.44m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-3-(异喹啉-5-基氧基)-丙基氨基]哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例17及方案II所述方法制备。ES⁺535.44m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-3-(喹啉-5-基氧基)-丙基氨基]哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例17及方案II所述方法制备。ES⁺535.30m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-3-(喹啉-6-基氧基)-丙基氨基]哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例17及方案II所述方法制备。ES⁺535.33m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[(S)-2-羟基-3-(喹啉-6-基氧基)-丙基氨基]哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例17及方案II所述方法制备。ES⁺561.31m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[(R)-2-羟基-3-(喹啉-6-基氧基)-丙基氨基]哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例17及方案II所述方法制备。ES⁺561.31m/z(MH⁺)

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-嘧啶-5-基-乙基氨基)哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺ES⁺482.30m/z(MH⁺)是以实施例8及方案II所述方法制备。

3-氨基-6-{4-[2-(6-溴-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺m/z(MH⁺)是以实施例8及方案II所述方法制备。ES⁺559.08/562.07

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6-羟基-吡啶-2-基)-乙基氨基]哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用6-叔-丁氧基-吡啶-2-甲醛以实施例8及方案II所述方法制备。ES⁺497.58m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6-羟基-吡啶-2-基)-乙基氨基]哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用6-叔-丁氧基-吡啶-2-甲醛以实施例8及方案II所述方法制备。ES⁺471.35m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-(6-氯-吡啶-3-基)-2-羟基-乙基氨基]哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用实施例8及方案II所述方法制备。ES⁺515.49/517.49m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-乙基氨基]哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用实施例8及方案II所述方法制备。ES⁺511.45m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-乙基氨基]哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用实施例1及方案II所述方法制备。ES⁺484.23m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(2-甲基-3H-咪唑-4-基)-乙基氨基]哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用实施例12及方案II所述方法制备。ES⁺484.13m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(2-羟基-吡啶-4-基)-乙基氨基]哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用2-羟基-吡啶-4-甲醛以实施例12及方案II所述方法制备。ES⁺497.37m/z(MH⁺)

2-羟基-吡啶-2-甲醛是如J.Am.Chem.Soc.1997 115，3619所述用4-甲基-吡啶-2-醇制得。

实施例18：3-氨基-6-[4-(2-[3，3′]联吡啶基-6-基-2-羟基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将N₂冲洗(purged)过的[2-(5-溴-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基]-氨基甲酸叔-丁基酯(460mg，1.45mmol)，四(三苯基膦)-钯(O)(168mg，0.145mmol)，碳酸钾(401mg，2.90mmol)，及吡啶-3-硼酸(207mg，1.60mmol)于无水DMF(15mL)及水(3mL)内的悬浮液密封加热至85℃18小时。用100mL水停止反应，用3×150mL醋酸乙酯萃取。合并的有机相用Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。将残余物溶于少量DMF内，应用到才利特塞(celite plug)，以SiO₂色谱法纯化(0-100％EtOAc/CH₂Cl₂，然后0-25％MeOH/EtOAc)，得442mg，87.0％，(2-[3，3′]联吡啶基-6-基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔-丁基酯ES⁺316.5m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-[4-(2-[3，3′]联吡啶基-6-基-2-羟基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以方案II所述方法制备。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(5-喹啉-3-基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例18及方案II所述方法制备。ES⁺608.6m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(5-苯基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例18及方案II所述方法制备。ES⁺557.7m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-(6′-二甲基氨基-[3，3′]联吡啶基-6-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例18及方案II所述方法制备。ES⁺601.9m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(5-嘧啶-5-基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例18及方案II所述方法制备。ES⁺559.9m/z(MH⁺)

3-氨基-6-[4-(2-[3，3′]联吡啶基-6-基2-羟基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例18及方案II所述方法制备。ES⁺558.9m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(5-喹啉-8-基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例18及方案II所述方法制备。ES⁺608.9m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(5-异喹啉-4-基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例18及方案II所述万法制备。ES⁺608.8m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-(5-溴-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例1及方案II所述方法制备。ES⁺559.6/561.6m/z(MH⁺)

实施例19：3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[5-(3-甲基磺酰基-苯基)-吡啶-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将N₂冲洗过的3-氨基-6-{4-[2-(5-溴-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(60mg，0.107mmol)，(3-甲基磺酰基苯基)硼酸(24mg，0.118mmol)，四(三苯基膦)-钯(O)(19mg，0.016mmol)，及碳酸钾(30mg，0.214mmol)于无水DMF(4mL)及水(1mL)内的悬浮液密封加热至85℃18小时。此粗制反应混合物用于才利特塞上以SiO₂色谱法纯化(0-25％MeOH/CH₂Cl₂，含1％NH₄OH)。集中含产物的级分并浓缩。将固体黄色残余物溶于1mLDMF内，应用到2毫米制备板(Merck)，用内含1％NH₄OH的10％MeOH/CH₂Cl₂洗脱二次。将收集的黄色残余物溶于0.5mL水，2mLMeOH，10mLCH₂Cl₂，及10mLEtOAc内，通过加入50mL己烷结晶，得29.0mg，42.3％，3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[5-(3-甲基磺酰基-苯基)-吡啶-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺产物。ES⁺635.1m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[5-(3-羟基-苯基)-吡啶-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺573.1m/z(MH⁺)

3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[5-(3-甲基磺酰基氨基-苯基)-吡啶-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺650.2m/z(MH⁺)

3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[5-(3-羟基甲基-苯基)-吡啶-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺587.3m/z(MH⁺)

3-氨基-6-(4-{2-[5-(3-氨基-苯基)-吡啶-2-基]-2-羟基-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺572.4m/z(MH⁺)

3-氨基-6-(4-{2-[5-(3-二甲基氨基-苯基)-吡啶-2-基]-2-羟基-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺600.2m/z(MH⁺)

3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[5-(3-甲基氨基甲酰基-苯基)-吡啶-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺614.3m/z(MH⁺)

3-氨基-6-(4-{2-[5-(3-二甲基氨基甲酰基-苯基)-吡啶-2-基]-2-羟基-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺628.3m/z(MH⁺)

6-(4-{2-[5-(3-乙酰基氨基-苯基)-吡啶-2-基]-2-羟基-乙基氨基}-哌啶-1-基)-3-氨基-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺614.3m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-(6′-氨基-[3，3′]联吡啶基-6-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺573.3m/z(MH⁺)

3-氨基-6-(4-{2-[5-(3-氨基甲酰基-苯基)-吡啶-2-基]-2-羟基-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺600.3m/z(MH⁺)

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-{5-[3-(吗啉-4-羰基)-苯基]-吡啶-2-基}-乙基氨基}-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺670.4m/z(MH⁺)

3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[5-(2-甲氧基-嘧啶-5-基)-吡啶-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺589.3m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6′-甲氧基-[3，3′]联吡啶基-6-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺588.4m/z(MH⁺)

实施例20：3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[5-(2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-6-基)-吡啶-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将N2冲洗过的3-氨基-6-{4-[2-(5-溴-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(150mg，0.268mmol)，双(pinacolato)二硼(153mg，0.590mmol)，[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)-CH₂Cl₂复合物(33mg，0.040mmol)，及醋酸钾(133mg，1.34mmol)于无水DMF(4mL)内的悬浮液于80℃加热2.5小时。此粗制反应混合物用注射器于室温直接加于搅拌的及以N₂冲洗的6-溴-2-羟吲哚(65mg，0.295mmol)，四(三苯基膦)钯(0)(47mg，0.040mmol)及碳酸钾(74mg，0.536mmol)于无水DMF(6mL)及水(2mL)的悬浮液中。此密封混合物加热至85℃4小时。将此粗制反应物直接用于SiO₂柱上纯化(0-25％MeOH/CH₂Cl₂，含NH₄OH)。集中含产物的级分并浓缩。将黄色残余物溶于2mLDMF内，应用到2毫米制备板(Merck)，用10％MeOH/CH₂Cl₂，内含1％NH₄OH，洗脱。黄色产物在起点结晶，杂质通过跑板而除去。将收集的黄色残余物溶于1mLDMF，2mLMeOH，5mLEtOAc，及5mL CH₂Cl₂内，通过加入30mL己烷结晶，得20.5mg，11.9％，3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[5-(2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-6-基)-吡啶-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺产物。ES⁺612.4m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[5-(2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-吡啶-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例20及方案II所述方法制备。ES⁺612.5m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(5-噻唑-2-基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例20及方案II所述方法制备。ES⁺564.4m/z(MH⁺)

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-8-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例8及方案II所述方法制备。ES⁺505.60m/z(MH⁺)

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2喹啉-8-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例8及方案II所述方法制备。ES⁺531.64m/z(MH⁺)

实施例21：3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(2-苯基-1H-苯并咪唑-5-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将3，4-二氨基-苯甲酸甲基酯(2克，12.035mmol)分散于40mLDCM内。加Hunig碱(2.516mL，14.442mmol)并于室温搅拌至所有物质都溶解。于此混合物内滴加苯甲酰氯(1.397mL，12.035mmol)，于室温搅拌1小时。加饱和NaHCO₃水溶液于此反应混合物内。用DCM萃取三次。合并所有有机萃取物，用盐水洗。于Na₂SO₄上干燥。过滤，真空除去溶剂。以快速色谱法纯化，用10％MeOH/DCM作洗脱液。将4-氨基-3-苯甲酰基氨基-苯甲酸甲基酯于热醋酸乙酯内研磨，得1.667克(51.2％)白色固体。

用Tetrahedron 2001，57(9)，1793-1799所述方法环化成苯并咪唑。

将2-苯基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(1.178克，4.67mmol)溶于20mLTHF内。冷至0℃，然后加LAH(886mg，23.35mmol)。将此混合物加热至50℃过夜。加0.9mL水，0.9mL15％NaOH水溶液，再加3mL水。于室温搅拌30分钟。用才利特过滤，此才利特以醋酸乙酯洗。用盐水洗滤液。于Na₂SO₄上干燥。过滤，真空除去溶剂。得783mg(74.8％)(2-苯基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲醇，为灰白色泡沫。

将(2-苯基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲醇(783mg，3.49mmol)溶于20mLTHF内。加MnO₂(3.035克，34.91mmol)并于室温搅拌1小时。用才利特过滤，真空除去溶剂。得769mg(99.1％)2-苯基-1H-苯并咪唑-5-甲醛，为浅黄色泡沫。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(2-苯基-1H-苯并咪唑-5-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是以实施例2及方案II所述方法制备。ES⁺570.57m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(2-苯基-1H-苯并咪唑-5-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用实施例21、实施例2及方案II所述方法制备。ES⁺596.54m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(2-异丙基-1H-苯并咪唑-5-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用实施例21、实施例2及方案II所述方法制备。ES⁺562.54m/z(MH⁺)

实施例22：3-氨基-6-[4-((R)-2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

此2-氯-6-(R)-环氧乙烷基-吡啶的对映选择性合成是用(+)-DIP氯化物根据Merck and Co.，美国专利5,561,142号，1996年10月1日，所述方法以6-羟基吡啶甲酸完成，对映体89％ee。

用叔-丁基-4-氨基-1-哌啶-羧酸酯在有高氯酸锂的存在下打开2-氯-6-(S)-环氧乙烷基-吡啶(见以上方案)。

所得4-[(R)-2-(6-氯-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-羧酸叔-丁基酯是通过从甲酸铵及10％钯/碳转移氢化而脱氯化，收率70％。

然后将哌啶如前所述以在1，4-二烷/甲醇内的HCl处理去保护，定量收率。3-氨基-6-[4-((R)-2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺95.0％ee，熔点：165-167℃，是如方案II所述方法制备。ES⁺481m/z(MH⁺)

3-氨基-6-[4-((S)-2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺95.4％ee，熔点：165-167℃，是如实施例22及方案II所述方法制备。ES⁺481m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4[(S)-2-(6-氯-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例22及方案II所述方法制备。ES⁺489.56m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[(R)-2-(6-氯-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例22及方案II所述方法制备。ES⁺489.54m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[(S)-2-(6-氯-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例22及方案II所述方法制备。ES⁺515.37/517.37m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[(R)-2-(6-氯-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是如实施例22及方案II所述方法制备。ES⁺515.33/517.33m/z(MH⁺)

实施例23：3-氨基-6-{4-[(R)-2-羟基-2-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将2-甲基-6-环氧乙烷基-吡啶(9.49克，70.29mmol)溶于50mLCH₃CN内。于其内加叠氮化钠(5.53克，85.00mmol)及高氯酸锂(9.043克，85.00mmol)。将此混合物搅拌过夜。LC-MS分析显示反应已完全。将混合物浓缩成稠油体。溶于CH₂Cl₂内，在SiO₂柱上纯化(20％EtOAc/己烷)，得5.00克2-叠氮基-1-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙醇。

将2-叠氮基-1-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙醇(4.300克，24.130mmol)溶于200mL甲苯内。于其内加乙烯基乙酸酯(9.22克，100.00mmol)及LipasePS-CII(4.00克)。此混合物于室温搅拌4.5小时，以¹H NMH监测。反应混合物用才利特床过滤，用100mL甲苯冲洗。真空浓缩过滤物。将残余物溶于CH₂Cl₂内，在SiO₂柱上纯化(5-30％EtOAc/己烷)，得2.20克醋酸(R)-2-叠氮基-1-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙基酯及2.11克(S)-2-叠氮基-1-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙醇，ee％＞99。

将(R)-2-叠氮基-1-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙基酯(2.20克，9.90mmol)溶于50mL MeOH内。于其内加K₂CO₃(1.50克)并将该异质混合物搅拌2小时。LC-MS分析显示反应已完全。将该混合物浓缩并加入100mL H₂O。混合物用2×100mL的CH₂Cl₂萃取，MgSO₄干燥，过滤并浓缩，得到1.78克的(R)-2-叠氮基-1-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙醇。ee％＞99。

将10％Pd/C(0.50克)在氩气下悬浮于100mLEtOH内。于其内加(R)-2-叠氮基-1-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙醇(3.57克，20.74mmol)。将此反应物置于H₂氛围下12小时。LC-MS分析显示尚有残留叠氮化物。再充H₂气氛并再搅拌12小时。LC-MS分析显示反应已完全。混合物用才利特床过滤。才利特用100mLEtOAc冲洗。将滤液浓缩得2.99克(R)-2-氨基-1-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙醇。

3-氨基-6-{4-[(S)-2-羟基-2-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用实施例6及方案II所述方法制备。ES⁺495.54m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[(S)-2-羟基-2-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用实施例6及方案II所述方法由(S)-2-叠氮基-1-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙醇制备。ES⁺495.24m/z(MH⁺)

3-氨基-6-{4-[2-(2-苄基-1H-苯并咪唑-5-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是用实施例21、实施例2及方案II所述方法制备。ES⁺610.5m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[5-(3-甲基-3H-咪唑-4-基)-吡啶-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺使用实施例20及方案II所述方法制备。ES⁺608.4m/z(MH⁺).ES⁺561.4m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6-苯基-吡啶-3-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺使用实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺557.5m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-[4-(2-[2，3′]联吡啶基-5-基-2-羟基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺使用实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺558.5m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6-嘧啶-5-基-吡啶-3-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺使用实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺559.5m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[6-(2-甲氧基-嘧啶-5-基)-吡啶-3-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺使用实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺589.5m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6′-甲氧基-[2，3′]联吡啶基-5-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺使用实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺588.5m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6-喹啉-8-基-吡啶-3-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺使用实施例19及方案II所述方法制备。ES⁺608.4m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-{4-[2-(6-溴-吡啶-3-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺使用实施例8及方案II所述方法制备。ES⁺608.4m/z(MH⁺).ES⁺559.3/561.3m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-{4-[2-(6-氨基甲酰基甲基甲硫基-吡啶-3-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺是本实施例的副产物。ES⁺570.5m/z(MH⁺)。

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺使用实施例1及方案II所述方法制备。ES⁺511.3m/z(MH⁺)。

生物学性质评估

本发明化合物对IKKα及IKKβ的抑制是根据测定被各自的激酶磷酸化IκBα底物而分析。用于此分析的酶是N-端加入标记(N-terminally flag-taggedversion)的人IKKβ或IKKα，所用底物是有IκBα的GST融合蛋白(氨基酸1-54)。

反应混合物(60μL)含20mM HEPES pH7.5，10mM MgCl₂，2mM MnCl₂，100mM NaCl，100μM Na₃VO₄，20mMβ-磷酸甘油，1mM DTT，2％DMSO，250nM ATP，0.4nM[³³P]ATP(比活性，3000Ci/mmol)，IκBα底物，IKK酶及受试化合物。反应混合物内含3.6μg/mL IKKα及245μg/mL IκBα或者含0.9μg/mL IKKβ及53μg/mLIκBα。

将IκBα底物及ATP的溶液加于以受试化合物预先培养5分钟的含IKK酶的聚丙烯板内开始反应。然后将反应混合物于25℃培养1小时，置于冰上通过加150μL 10％的三氯醋酸及5％焦磷酸二钠停止反应。混合后，将整个停止反应的反应混合物移入预湿的Packard UniFilter过滤板，抽吸并用250μL ddH₂O洗6次，使用Packard Filtermate Harvester。然后将过滤板风干，补充40μL Microscint 20闪烁液，使用Packard TopCount闪烁计数器定量³³P-标记的反应产物。

化合物以三倍系列稀释而受试，达50％酶活性被抑制(即IC₅₀)的抑制剂浓度是得自使用SAS软件(SAS Institute，Cary NC)所作的剂量-反应曲线。以Hill方程式为基础所作的非线性回归分析用于抑制百分比与浓度数据的比较。在所有情况中，化合物浓度都以HPLC确证。

本发明的详细说明部分的表内的化合物都作了IKKβ抑制分析评估，其IC₅₀值约为1μM或更低。

这些化合物也作了对IKKα抑制的分析评估，其IC₅₀值约20μM或更低。

Claims

1.式(I)化合物及其药学上可接受的盐、酯、互变异构体、单独异构体及异构体混合物

其中：

R₁是

(b)选自1-哌啶基、1-哌嗪基、1-吡咯烷基及4-吗啉基的杂环基，任选地被一至二个选自C_1-6烷基、-CO₂C_1-5烷基、苯基、苄基、-OH及-C(O)杂芳基的基团取代，其中所述杂芳基选自呋喃基、噻吩基、吡啶基及吡咯基，

(c)R₇(CH₂)_mO-，

(d)R₇OCH₂-，

(e)R₇(CH₂)_mNH-，

(f)R₇(CH₂)_p(CH＝CH)_m-，

(g)C_1-6烷基，其任选地部分或全部卤化并任选地被一至二个R₈取代，

(h)C_1-8烷氧基，其任选地部分或全部卤化并任选地被一至二个R₈取代，

(i)C_1-8烷基S(O)_n-，其任选地部分或全部卤化并任选地被一至二个R₈取代，

(j)-N(R₅)(R₆)，或

(k)-C(O)NHR′，其中R′是R₇、吡啶基、或-CH₃；

R₃是-OH或-H；

R₄选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷基、卤素、-CN、-CO₂H、-CO₂C_1-6烷基、-S(O)_nC_1-6烷基、-S(O)_n-对-甲苯基、-NO₂、-OH、-CF₃、-N(R₅)(R₆)、-NHC(O)NHC_1-6烷基、-C(O)N(R₅)(R₆)、任选地被卤素、C_1-6烷基、-CN、或C_1-6烷氧基取代的苯基、以及R₉；

R₅及R₆独立选自H、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基、-SO₂C_1-6烷基、苯基、吡啶基、苄基、哌啶基、苯基乙基及(CH₃)₃COC(O)-；

R₇是苯基，任选被一或二个选自卤素、C_1-6烷基、-CN、-CO₂C_1-6烷基、-C(O)NR₅R₆、-SO₂NH₂、-NO₂、-OH、-NH₂、-CF₃及C_1-6烷氧基的基团取代，或者R₇是C_3-6环烷基、-CH₂OH、萘-2-基、萘-1-基、吡啶基或噻吩基；

R₈选自氧代、-OH、-NR₄R₅、-CO₂H及C_1-6烷氧基；

m是0或1；

n是0、1或2；

p是0、1、2或3；

Z是键或-O-CH₂-。

2.根据权利要求1的化合物及其药学上可接受的盐、酯、互变异构体、单独异构体及异构体混合物，其中：

R₁是

(a)R₇(CH＝CH)-，

(b)C_1-6烷基，

(c)-C_2-3烷基OH，

(d)-CF₃，

(e)-C_1-6烷氧基，任选地部分或全部卤化，

(f)-OC_2-3烷基OH，

(g)-C_1-6烷硫基，或

(h)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₃是-OH或-H；

n是0、1或2；

Z是键或-O-CH₂-。

3.根据权利要求1的化合物及其药学上可接受的盐、酯、互变异构体、单独异构体及异构体混合物，其中：

R₁是

(a)R₇(CH＝CH)-，

(b)C_1-6烷基，

(c)-CF₃，

(d)-C_1-6烷氧基，任选地部分或全部卤化，

(e)-C_1-6烷硫基，或

(f)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₂是杂芳基，选自呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、中氮茚基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并唑基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、及1，5-二氮杂萘基，任选地被一至三个R₄取代；

R₃是-OH；

R₄选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷基、卤素、-CN、-CO₂H、-CO₂C_1-6烷基、-S(O)_nC_1-6烷基、-S(O)_n-对-甲苯基、-NO₂、-OH、-CF₃、-N(R₅)(R₆)、及-C(O)N(R₅)(R₆)；

n是0、1或2；

Z是键或-O-CH₂-。

4.根据权利要求1的化合物及其药学上可接受的盐、酯、互变异构体、单独异构体及异构体混合物，其中：

R₁是

(a)R₇(CH＝CH)-，

(b)C_1-6烷基，

(c)-CF₃，

(d)-C_1-6烷氧基，任选地部分或全部卤化，

(e)-C_1-6烷硫基，或

(f)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₂是杂芳基，选自噻吩基、噻唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基及异喹啉基，任选地被一至三个R₄取代；

R₃是-OH；

R₅及R₆独立选自H、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基、-SO₂C_1-6烷基、苯基、吡啶基、苄基、哌啶基及苯基乙基；

n是0、1或2；

Z是键或-O-CH₂-。

5.根据权利要求1的化合物及其药学上可接受的盐、酯、互变异构体、单独异构体及异构体混合物，其中：

R₁是

(a)R₇(CH＝CH)-，

(b)C_1-6烷基，

(c)-CF₃，

(d)-C_1-6烷氧基，任选地部分或全部卤化，

(e)-C_1-6烷硫基，或

(f)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₂是杂芳基，选自3-噻吩基、2-噻唑基、2-咪唑基、2-，3-及4-吡啶基、4-嘧啶基、2-吡嗪基、2-吲哚基、2-苯并噻吩基、2-苯并咪唑基、2-苯并噻唑基、2-，3-，4-及6-喹啉基及1-及3-异喹啉基，任选地被一至三个R₄取代；

R₃是-OH；

n是0、1或2；

Z是键或-O-CH₂-。

6.根据权利要求1的化合物及其药学上可接受的盐、酯、互变异构体、单独异构体及异构体混合物，其中：

R₁是

(a)C_1-3烷基，

(b)-CF₃，或

(c)-OCH₂CF₃

R₃是-OH；

R₅及R₆独立选自H、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基、-SO₂C_1-6烷基、苯基、吡啶基、苄基、哌啶基、及苯基乙基；

n是0、1或2；

Z是键。

7.选自以下的化合物：

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-4-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-4-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-异喹啉-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-异喹啉-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-异喹啉-1-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-4-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-异喹啉-1-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡嗪-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡嗪-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-异丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-环丙基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-乙基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-(2，2，2-三氟乙氧基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-噻吩-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-噻唑-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-苯并[b]噻吩-2-基-2-羟基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-苯并[b]噻吩-3-基-2-羟基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-苯并噻唑-2-基-2-羟基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[1-(甲苯-4-磺酰基-1H-吲哚-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(1-甲基-1H-吲哚-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-(1H-苯并咪唑-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(1H-咪唑-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-(2，3-二氯-吡啶-4-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-{2-羟基-2-[4-苯基-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑-2-基]-乙基氨基}-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-吡啶-4-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-(5-氰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-(5-苄基氨基甲酰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-(6-氰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-(6-氨基甲酰基-吡啶-2-基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(5-甲基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-6-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-喹啉-6-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-丙基-6-[4-(2-吡啶-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-丙基-6-[4-(2-吡啶-3-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-丙基-6-[4-(2-吡啶-4-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-3-(吡啶-4-基氧基)-丙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-3-(喹啉-4-基氧基)-丙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-3-(异喹啉-5-基氧基)-丙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-3-(喹啉-5-基氧基)-丙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-3-(喹啉-6-基氧基)-丙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[(S)-2-羟基-3-(喹啉-6-基氧基)-丙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；和

3-氨基-6-{4-[(R)-2-羟基-3-(喹啉-6-基氧基)-丙基氨基]-哌啶-1-基}-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺。

8.包含治疗有效量的根据权利要求1的化合物的药物组合物。

9.治疗炎性或自身免疫疾病病症的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的病人治疗有效量的根据权利要求1的化合物。

10.根据权利要求9的方法，其中所述炎性或自身免疫疾病或病症选自骨关节炎、再灌注损伤、气喘、多发性硬化症、吉-巴综合征、克隆病、溃疡性结肠炎、牛皮癣、移植物抗宿主病、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、阿尔茨海默氏病、中毒性休克综合征、胰岛素依赖性糖尿病、急性及慢性痛、热损伤、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、慢性阻塞性肺病(COPD)、外伤后多发性器官损伤、急性肾小球性肾炎、具急性炎性部分的皮肤病、急性化脓性脑膜炎或其他中枢神经系统疾病、格雷夫斯病、重症肌无力、硬皮病及特应性皮炎。

11.根据权利要求9的方法，其中所述炎性或自身免疫疾病或病症选自骨关节炎、类风湿性关节炎、克隆病、溃疡性结肠炎、气喘、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)及慢性阻塞性肺病(COPD)。

12.治疗动脉粥样硬化、心肌梗塞或中风的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的病人治疗有效量的根据权利要求1的化合物。

13.治疗选自以下癌症的方法：衍生于淋巴、骨髓及上皮的恶性肿瘤、白血病、淋巴瘤、乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、及胰腺癌，所述方法包括给药于需要该治疗的病人治疗有效量的根据权利要求1的化合物。

14.制备式(I)化合物的方法：

其中R₁，R₂，R₃及Z如权利要求1所限定，该方法包括：

使式II化合物与式III的胺在还原胺化的条件下反应生成所需式I化合物：

15.制备式(I)化合物的方法：

其中R₁，R₂，R₃及Z如权利要求1所限定，该方法包括：

将式IV化合物，其中X是离去基，与式V化合物在有适宜的碱的存在下反应，生成所需式I化合物：