CN1883527A - 一种灵芝保健品及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有改善睡眠、增强免疫力功能的灵芝保健食品及其制备方法，本发明的灵芝保健食品按重量百分比计由：灵芝子实体提取物21.968％－25.968％、人参提取物10％－14％、糊精22％－26％、蔗糖38％－42％、维生素B10.016％、维生素B20.016％；制备本发明保健茶的方法包括配料、冲洗、粉碎、提取、制备混合微粒、包装消毒等步骤；本发明的灵芝保健品长期食用具有改善睡眠、增强人体的免疫力，且本发明的制备方法工艺简单、适于工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及保健食品，尤其涉及一种具有改善睡眠、提高人体免疫力功能的灵芝保健品及其制备方法。
背景技术
在现代的生活中，人们由于工作和生活的压力，导致精神经常处于一种高度紧张的状态中，因此经常会出现失眠和身体免疫力下降的现象。自古以来，灵芝被认为具有“扶正固本、滋补强身”的作用，《(本草纲目)》中也把灵芝作为上等药材，具有“无毒、补中气、增智慧；久食、轻身不老、延年益寿”之功效。灵芝的上述保健作用源于灵芝除了含有钙、镁、铁等元素以及十多种具有营养作用的氨基酸外，还含有有机锗、高分子多糖、腺嘌呤核苷、灵芝酸、生物碱等有效成分等，因而还具有辅助抑制肿瘤的作用，即提高人体免疫力，减少肿瘤发生几率的作用。人参也是我国名贵药材之一：含有二十多种皂甙活性物质、十多种氨基酸及微量元素具有益气活血，调节内分泌，促进新陈代谢的功效。
但由于未提取和加工的灵芝及人参，直接食用时，其有效成分不能充分被人体吸收及转化，因此开发一种能被人体有效吸收其有益成分并方便食用的灵芝保健品具有广阔的市场前景。
发明内容
有鉴于此，本发明的主要目的之一在于提供一种具有改善睡眠、提高人体免疫力功能的灵芝保健品。
为实现上述发明目的，本发明的灵芝保健品，由下列成分按重量比组成：灵芝子实体提取物21.968％-25.968％、人参提取物10％-14％、糊精22％-26％、蔗糖38％-42％、维生素B10.016％、维生素B20.016％。
进一步，由下列成分按重量比组成：灵芝子实体提取物23.968％、人参提取物12％、糊精24％、蔗糖40％、维生素B10.016％、维生素B20.016％。
本发明的另一目的在于提供一种制备上述灵芝保健品制备方法，包括以下步骤：
a原料检验
按配方取各原料根据质量指标进行检验，合格品移入洁净区备用。
b制备灵芝子实体提取物
按配方取8倍灵芝子提取物重量的灵芝子实体，洗净、粉碎过40目筛，将灵芝子实体粗粉加8倍重量的水浸泡12小时后，在100℃的温度下煎煮3次，并保持水量超过药材高度1cm-2cm，，3次煎煮时间分别是2小时、2小时、1小时；合并三次水提取液后过滤、浓缩、干燥得密度为1.1的浸膏，得率为12％；
c制备人参提取物
取5倍人参提取物重量的人参用清水洗净，在60℃条件下烘干12小时，粉碎过40目筛，将人参粗粉加8倍重量的水浸泡12小时后，在100℃的温度下煎煮3次，并保持水量超过药材1cm-2cm，，3次煎煮时间分别是2小时、2小时、1小时，合并三次水提取液后过滤、浓缩、干燥、粉碎后得密度为1.2的浸膏，得率为14％；
d将步骤b和c中所获得的灵芝提取物和人参提取物及维生素B1、维生素B2、糊精、蔗糖按配方比例混合并搅拌均匀，将混合物在搅拌机中匀搅拌3.5-4.5小时，制成干湿合适的软材；
e将步骤d所得混合料再过12-14目的摇摆式颗粒机中制粒，得混合颗粒软料；
f将混合颗粒软料置于烘箱中，在60℃条件下烘干3-5小时，使水分降至4％以下；
g将烘干后的混合微粒按需要分装成袋，并质检后，制得合格灵芝保健品。
进一步，所述步骤b-g在卫生洁净度为10万级的洁净车间内进行。
进一步，所述步骤d中混合物在搅拌机中的装量不超过搅拌机容积的三分之一。
本发明的灵芝保健品由于采用天然的植物和独特的配方，人长期食用后，无任何不良影响，并经功能性试验证明，长期食用具有改善睡眠、提高人体体免疫力的功能，使用方便；并且，本发明的制备工艺简单，适于产业化生产。
本发明的其他优点在某种程度上将在随后的说明书中进行阐述，并且在某种程度上，基于对下文的考察研究对本领域技术人员而言将是显而易见的，或者可以从本发明的实践中得到教导。本发明的目标和其他优点可以通过下面的说明书，权利要求书，以及附图中所特别指出的工艺流程图来实现和获得。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步的详细描述。
附图为本发明的生产工艺流程图。
具体实施方式
以下将参照附图，对本发明的优选实施例进行详细的描述。
实施例1制备10公斤具有改善睡眠、提高人体免疫力功能的灵芝保健品
a原料检验
在洁净区按配方取各原料根据质量指标进行检验，合格品移入备用。
b制备灵芝子实体提取物
取20372.8灵芝子实体，洗净、粉碎过40目筛，将灵芝子实体粗粉加8倍水浸泡12小时后，在100C°的温度下煎煮3次，并保持水量超过药材1cm-2cm，，3次煎煮时间分别是2小时、2小时、1小时；合并三次水提取液后过滤、浓缩、干燥得密度为1.1的浸膏，得率为12％；
c制备人参提取物
取6000克人参提取物的人参用清水洗净，在60℃条件下烘干12小时，粉碎过40目筛，将人参粗粉加8倍水浸泡12小时后，在100℃的温度下煎煮3次，并保持水量超过药材1cm-2cm，，3次煎煮时间分别是2小时、2小时、1小时，合并三次水提取液后过滤、浓缩、干燥、粉碎后得密度为1.2的浸膏，得率为14％；
d将步骤b和c中所获得的灵芝提取物和人参提取物及维生素B11.6克、维生素B21.6克、糊精2400克、蔗糖4000克混合并搅拌均匀，然后将混合物在搅拌机中匀搅拌3.5-4.5小时，制成干湿合适的软材；
e将步骤d所得混合料再过12-14目的摇摆式颗粒机中制粒，得混合颗粒软料；
f将混合颗粒软料置于烘箱中，在60℃条件下烘干3-5小时，使水分降至4％以下；
g将烘干后的混合微粒按每袋5克分装成袋，并质检后，制得合格灵芝保健品。
所述步骤b-g在卫生洁净度为10万级的洁净车间内进行。
所述步骤d中混合物在搅拌机中的装量不超过搅拌机容积的三分之一。
使用方法：取茶包内1小袋放入杯中，用开水冲泡3-10分钟后趁热饮用，成人每日2袋，克反复冲泡，少儿及孕妇用量酌减，饭后饮用效果更佳。
实验结果：
安全性实验
检验样品：实施例1制备的灵芝保健品2.5公斤
检验单位：四川大学华西公共卫生学院分析测试中心
检验依据：《保健品检验与评价技术规范》(2003版)
1、急性毒性实验
昆明种小鼠(体重18g-22g)和SD大鼠(体重180g-220g)各20只，雌雄各半。大、小鼠均设10g/kg.bw一个剂量组，按3ml/100g.bw于动物空腹状态下经口灌胃，灌胃后观察两周内死亡动物数及一般健康情况，求出LD50，判定毒性分级。
实验数据：
表1 灵芝保健食品对大小鼠的经口急性病毒
| 动物品系 | 性别 | 数量(只) | 剂量(g/kg.bw) | 死亡动物数(只) | LD50(g/kg.bw) | 结论 |
| 昆明种小鼠 | 雄 | 10 | 10 | 0 | ＞10 | 实际无毒 |
| 雌 | 10 | 10 | 0 | ＞10 | 实际无毒 | |
| SD大鼠 | 雄 | 10 | 10 | 0 | ＞10 | 实际无毒 |
| 雌 | 10 | 10 | 0 | ＞10 | 实际无毒 |
由上表可见，受检灵芝保健食品10g/kg.bw剂量一次经口染毒后，两周内未见动物死亡，亦无明显的中毒症状或不良反应，结果见表1.1。即本检品对雌、雄性昆明种小鼠和SD大鼠的急性经口LD50均大于10g/kg.bw，属实际无毒类。
2、遗传毒性试验
(1)Ame s试验：采用经鉴定符合要求的TA 97、TA 98、TA 100和TA 102菌株，进行加与不加大鼠肝S9的标准平皿掺入法试验。样品用蒸馏水配制和稀释，设五个灵芝保健食品剂量：8、40、200、1000和5000ug/皿，同时设自发对照和阳性对照。不加S9试验的阳性对照为0.2ug/皿的2，4，7-三硝基-9-芴酮(TA97、TA98)，1.5ug/皿的叠氮化钠(TA100)，0.5ug/皿的丝裂霉素C(TA 102)：加S9试验的阳性对照为10ug/皿的2-氨基芴(TA97、TA98、TA100)和50ug/皿的1，8-二羟基蒽醌(TA102)。每个试验剂量作三个平行皿，重复试验一次。
从表2和3中可见，Ame s试验种，无论加与不加S9的试验，自发对照组的每皿平均回变菌落数均在正常值范围内，而阳性对照组诱发的每皿平均回变菌落数均为自发对照组二倍以上，呈明显阳性反应。灵芝保健品各剂量组的平均回变菌落数均未超过自发对照组的一倍，呈阴性反应，即本灵芝保健品无诱导试验菌株回复突变的作用。
小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：
(2)小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验
取昆明种小鼠(体重25g-30g)随机分为5组，每组10只，雌雄各半。一个阴性对照组、一个阳性对照组(环磷酰胺40mg/kg.bw)以及三个本灵芝保健品试验组，剂量分别为2.5、5.8和8.3g/kg.bw(分别相当于人体推荐剂量的30倍、70倍和100倍)。受试动物分别于第0小时和第24小时按3ml/100g.bw经口灌胃，第30小时处死小鼠，按推荐程序制片，油镜下观察每只动物1000个嗜多染红细胞(PCE)，记录带微核的细胞数，计算微核率(％)。
小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果，从表4中可见。阳性对照组雌、雄动物的微核率均显著高于阴性对照组(P＜0.01)，而本灵芝保健品各组的微核率与阴性对照组比较均无显著性差异(P＞0.05)。提示本灵芝保健品在小鼠骨髓细胞微核试验中为阴性结果。
(3)小鼠精于畸形试验：昆明种雄性小鼠(体重25g-35g)随机分为5组，每组5只。试验设一个阴性对照组，一个阳性对照组(环磷酰胺40mg/kg.bw)和三个灵芝颗粒剂量组，即2.5、5.8和8.3g/kg.bw(分别相当于人体推荐剂量的30倍、70倍和100倍)。每日按3ml/100g.bw经口灌胃动物，连续5天。于首次灌胃后第35天处死动物，取双侧附睾，按标准程序制片，每只动物观察1000个完整精于，记录各类畸形精于数。
小鼠精于畸形试验由表5可见，阳性对照组的精于畸形率显著高于阴性对照组(P＜0.01)，本灵芝保健品各剂量组的精于畸形率与阴性对照组比较均无显著性差异(P＞0.05)。提示本灵芝保健品在小鼠精于畸形试验中为阴性结果。
3、大鼠30天喂养试验
断乳sD大鼠适应性喂养一周后，按体重随机分为四组，每组20只，雌雄各半。试验设一个阴性对照组和三个受试物剂量组，即2.5、5.8和8.3g/kg.bw(分别相当于人体推荐剂量的30倍、70倍和100倍)。按动物体重的10％计算拌食量，各剂量组饲料中受试物浓度分别为25g/k、58g/kg和83g/kg(饲料)，自由摄食，连续30天。每周称一次动物体重、两次给食量和剩食量，并计算摄食量，连续饲养30天后处死动物，进行血液学、血清生化学及组织病理学检查和脏器系数测定，分别按周增重及周摄食量计算周食物利用率(％)，同时计算总食物利用率(％)。
阴性对照组和3个剂量组动物在30天喂养期间，摄食、饮水、大小便正常，生长发育情况和一般表现良好，未观察到明显异常、行为改变和中毒症状。
对体重和食物利用率的影响：各实验组在整个试验期间的体重和食物利用率结果见表6和7。受试物各剂量组的动物周摄食量、周增重、周食物利用率和总食物利用率与阴性对照组比较均无显著性差异(/)0.05)。表明该受试物对机体生长发育无不良影响
脏器系数测定结果：表8显示受试物各剂量组的重要脏器系数(脏器湿重/体重×1000)，由表8可见各剂量组重要脏器系数与阴性对照组比较均无显著性差异(P＞0。05)
末期血液学检验结果：表9显示试验末期的常规血液学指标(红细胞、血红蛋白、白细胞及分类)测定结果。从表可见受试物各剂量组雌、雄鼠的测定指标与空白对照组比较均无显著性差异(P＞0.05)
末期生化指标检验结果：表10显示受试物各剂量组的肝功、肾功、血脂和血糖等生化指标。从表可见：除雄性动物各剂量组的CHO显著低于对照组(P＜0.05)外，其余各剂量组雌、雄动物的所测指标与空白对照组比较均无显著性差异(P＞0.05)
组织学检查结果：试验结束时大体检查各剂量组动物未发现明显病变，因此仅对样品高剂量组和对照组的肝、肾、脾脏、胃肠、睾丸和卵巢等进行组织病理学检查。对照组有1例动物出现脾淤血和1例动物有肾局灶性间质炎，样品高剂量组有2例动物脾淤血，其余未见异常，结果见表11-表17。故认为所观察到的异常变化属动物的自发病变，即受试物高剂量亦未引起实验动物中毒性损伤改变
结论：本检品对大、小鼠的急性经口LD50均大于109/k9.bw，判属实际无毒类。Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精于畸形试验等三项遗传毒性试验均为阴性结果，表明该受试物无致突变作用。在大鼠30天喂养试验中未见动物健康状况、生化、血液学指标和器官组织形态的异常变化，据此初步估计该产品的最大无作用剂量大于8.3g/吨.bw(人体推荐摄入量的100倍)
功能试验
改善睡眠作用试验
样品：上述实施例制备的灵芝保健品颗粒
人体推荐摄入量为：1袋(5g)/人/日，送检样品外观为棕黄色颗粒，灌胃液使用蒸馏水配制。
试验动物：清洁级昆明种雌性小鼠，体重18-22g，
饲养条件：SPF级动物房。
剂量分组及受试样品给予时间：小鼠适应性喂养3天后随机分为4组，即阴性对照组和灵芝保健品颗粒0.83g/吨.Bw、1.67g/kg.Bw、2.5g/kg.Bw三个剂量组(分别相当于人体推荐摄入量3.6g/人/日的10、20、30倍)。灵芝保健品颗粒水溶液按2％体积每天灌胃一次，连续30天。阴性对照组使用蒸馏水灌胃。
实验数据统计：采用医学百科全书统计软件包(PEMS 3.0)进行组间差异的统计分析。睡眠发生率使用卡方检验；睡眠时间、睡眠潜伏期和体重使用方差分析，方差不齐者使用秩和检验。
实验方法
直接睡眠试验：
观察各组动物在给予受试样品或蒸馏水后，是否出现睡眠现象(睡眠以翻正反射消失为指标)，各组动物在给予受试样品后均未出现睡眠现象，即本品无直接睡眠作用。
延长戊巴比妥钠睡眠时间试验：
末次灌胃受试样品或蒸馏水30分钟后给各组动物腹腔注射戊巴比妥钠55mg/kg.Bw，观察并记录注射后动物的睡眠(即失去翻正反射)持续时间。分别计算各组动物的平均睡眠时间。见表18，灵芝保健品颗粒各剂量组小鼠的平均睡眠时间与对照组比较无显著差异(p＞0.05)，即本检验品对戊巴比妥钠诱导的小鼠平均睡眠时间无明显影响。
戊巴比妥钠阈下剂量催眠试验：
末次灌胃受试样品或蒸馏水30分钟后，按28mg/11吕Bw剂量给各组动物腹腔注射戊巴比妥钠生理盐水溶液，观察注射后30分钟内的入睡动物数(以翻正反射消失超过1分钟为判断入睡的标准)。分别计算各组动物的睡眠发生率。见表19灵芝保健品颗粒中、高剂量组小鼠的睡眠发生率显著高于对照组(P＜0.05；P＜0.01)，即本检品有增加低剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠发生率的作用。
巴比妥钠睡眠潜伏期试验：
末次灌胃受试样品或蒸馏水30分钟后给各组动物腹腔注射巴比妥钠240mg/kg.Bw，观察并记录注射后动物的入睡时间。分别计算各组动物的平均睡眠潜伏期(即入睡时间一注射巴比妥钠时间)。见表20。灵芝颗粒各剂量组小鼠的平均睡眠潜伏期与对照组比较均有显著缩短(P＜0.05：P＜0.01)，即本检品有缩短巴比妥钠诱导小鼠睡眠潜伏期的作用。
灵芝保健品颗粒对小鼠体重的影响：
见表21-13。方差分析表明试验中期和试验结束时灵芝保健品颗粒各剂量组动物平均体重与对照组比较无显著差异(P＞0.05)，表明本检品对小鼠生长发育无不良影响。
结论：
受检灵芝保健品颗粒改善睡眠功能检验结果表明，本检品对小鼠生长发育无不良影响，且无直接睡眠作用。中、高剂量组小鼠的睡眠发生率显著高于对照组，三个剂量组小鼠的平均睡眠潜伏时间显著短于对照组。按评价标准，本检品具有改善睡眠功能。
增强免疫功能试验
试验样品：按上述实施制备的灵芝保健品颗粒
试验动物：雌性Balb/c小鼠，体重18g-22g。
剂量选择：动物领回，基础饲料喂饲3天后，按随机分组原则分0.42g/kg.bw组、0.83g/吨.bw组和1.67g/吨.bw组(分别相当于送检方推荐的日服用建议剂量的5倍、10倍和20倍：及对照组。实验组以J；目应剂量的样品灌胃，对照组以蒸馏水灌胃，灌胃量为20ml/kg.bw，每天一次，连续灌胃30天。
根据表24-35，经口给予小鼠(Balb/c)0.42g/kg.bw、0.83g/kg.bw和1.67g/kg.bw剂量(分别相当于推荐日服用建议剂量的5倍、10倍和20倍)的灵芝保健品颗粒30天，经测试，抗原攻击后24小时，1.67g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，足跖肿胀度有显著性差异(P＜0.05)。在小鼠脾淋巴细胞转化实验中，0.83g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，光密度差值有显著性差异(P＜0.05)；1.67g/kebw剂量组与对照组小鼠相比，光密度差值有显著性差异(P＜0.01)。在血清溶血素试验中，1.67g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，抗体积数有显著性差异(P＜0.01)。在抗体生成细胞检测试验中，0.83g/吨.bw和1.67g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，抗体生成细胞数/10(脾细胞)均有显著性差异(P＜0.01)。在小鼠碳廓清实验中，1.67g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，吞噬指数a有显著性差异(P＜0.01)。据评价标准可认为该检品具有增强免疫力功能。
表2 灵芝保健品颗粒Ames试验结果(第一次)(个/皿)
| 化合物 | 剂量(μg/皿) | S9 | 每皿回变菌落数(个/皿， X±S) | |||
| TA97 | TA98 | TA100 | T102 | |||
| 碧生源牌灵芝颗粒自发对照阳性对照 | 84020010005000 | ------- | 112.7±10.1118.3±10.4132.0±11.1134.7±10.6157.0±12.8105.7±16.31420.0±80.0 | 38.3±4.541.0±4.444.0±6.046.0±7.046.0±5.337.3±4.51890.0±98.5 | 170.0±13.1177.0±9.6187.3±12.5194.7±13.3205.7±11.6161.0±15.51363.3±92.9 | 292.0±10.1302.3±15.7302.3±11.4312.3±18.9324.0±14.9283.3±12.51503.3±107.9 |
| 碧生源牌灵芝颗粒自发对照阳性对照 | 84020010005000 | +++++++ | 130.7±17.0141.7±12.0128.7±20.4143.7±10.6151.3±13.3125.7±11.01536.7±102.1 | 39.0±4.642.0±7.038.0±5.343.7±4.044.0±4.636.3±4.21836.7±94.5 | 174.3±12.5181.0±16.8197.0±13.7207.7±14.8202.3±14.6166.7±16.81360.0±90.0 | 287.3±12.1286.7±20.2297.7±12.2313.7±16.0320.3±16.3278.3±15.5920.0±80.0 |
表3 灵芝保健品颗粒Ames试验结果(第二次)(个/皿)
| 化合物 | 剂量(μg/皿) | S9 | 每皿回变菌落数(个/皿， X±S) | |||
| TA97 | TA98 | TA100 | TA102 | |||
| 碧生源脾灵芝颗粒自发对照阳性对照 | 84020010005000 | ------- | 126.0±9.6135.7±16.0143.0±14.5138.3±13.6156.7±13.0113.0±9.81500.0±111.4 | 38.7±4.742.0±3.640.3±6.538.3±4.944.3±5.136.0±3.61846.7±107.9 | 167.3±13.3177.3±15.4186.3±13.5197.0±12.3203.0±16.5156.7±14.01343.3±89.0 | 285.0±8.0290.7±18.1301.3±18.3300.0±19.1313.7±13.5272.7±12.21500.0±81.9 |
| 碧生源牌灵芝颗粒自发对照阳性对照 | 84020010005000 | +++++++ | 129.7±12.5135.3±13.3135.7±9.3148.3±17.2161.0±15.5121.0±14.51473.3±120.9 | 41.7±3.537.7±5.040.0±4.643.3±4.945.7±4.738.0±6.11843.3±92.9 | 174.7±9.1182.0±10.5190.7±13.0205.3±11.2217.0±19.2167.7±15.91296.7±116.8 | 285.0±14.8296.3±13.1309.7±13.4318.0±17.1329.7±17.8279.3±11.7933.3±96.1 |
表4 灵芝保健品颗粒对小鼠骨髓细胞微核发生率的影响
| 性别 | 剂量(g/kg·bw) | 动物数(只) | 观察细胞数(个) | 微核细胞数(个) | 微核率(‰) |
| 雄 | 02.55.88.3环磷酰胺 | 55555 | 1000×51000×51000×51000×51000×5 | 13111214121 | 2.6±2.072.2±1.642.4±1.142.8±2.1724.2±5.07* |
| 雌 | 02.55.88.3环磷酰胺 | 55555 | 1000×51000×51000×51000×51000×5 | 1391314122 | 2.6±0.891.8±1.922.6±1.522.8±0.4524.4±6.54* |
注：与阴性对照比较 *，P＜0.01，剂量“0”为阴性对照。
表5 灵芝保健品颗粒对小鼠精子畸形试验结果
| 组别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 观察精子数(个) | 畸形精子数(个) | 精子畸形率(％) |
| 阴性对照受试物环磷酰胺 | 02.55.88.30.04 | 55555 | 1000×51000×51000×51000×51000×5 | 64707675326 | 1.28±0.411.40±0.161.52±0.521.50±0.606.52±0.59* |
注：与阴性对照比较 *，P＜0.01。
表6 灵芝保健品颗粒对大鼠体重的影响(
X±S)
| 性别 | 剂量(g/kg·bw) | 动物数(只) | 始重(g) | 第1周(g) | 第2周(g) | 第3周(g) | 第4周(g) |
| 雄 | 02.55.88.3 | 10101010 | 81.9±7.682.3±4.883.5±5.080.4±5.9 | 113.5±11.510.8±7.6115.5±9.0111.2±8.3 | 145.2±18.5145.5±11.3148.8±16.8143.9±10.2 | 176.6±26.1176.5±17.6180.2±21.2178.2±15.4 | 208.4±31.6210.5±20.4211.1±25.3211.6±18.9 |
| 雌 | 02.55.88.3 | 10101010 | 82.4±6.079.8±4.680.1±5.982.4±4.4 | 106.9±7.7105.2±5.8102.9±6.9104.8±4.8 | 129.6±8.3128.0±8.9123.5±8.4127.6±5.2 | 154.4±12.9152.6±13.9147.1±10.5152.5±7.2 | 178.6±15.4176.7±17.5171.0±12.9175.5±8.8 |
注：剂量“0”为阴性对照。
表7 灵芝保健品颗粒大鼠食物利用率(％)的影响
| 性别 | 剂量(g/kg·bw) | 周次 | 动物数(只) | 体重增重(g) | 摄食量(g) | 食物利用率(％) |
| 雄 | 0 | 1234总 | 1010101010 | 31.6±8.331.7±8.631.4±8.831.8±7.0126.5±27.9 | 84.2±10.6102.6±15.5120.6±19.8139.3±22.0446.7±65.7 | 36.1±6.330.4±4.425.8±3.922.7±2.428.2±2.3 |
| 2.5 | 1234总 | 1010101010 | 28.5±4.634.7±5.631.0±7.934.0±4.7128.2±17.8 | 80.3±7.3102.7±9.3118.2±14.3139.5±13.6439.7±41.4 | 35.9±3.533.6±2.925.9±3.624.4±2.129.1±1.6 | |
| 5.8 | 1234总 | 1010101010 | 32.0±7.333.3±8.631.4±7.230.9±5.3127.6±24.6 | 84.1±8.9103.7±14.2120.7±15.3137.8±16.9449.3±52.5 | 37.7±5.131.7±4.425.8±3.822.4±2.028.5±2.5 | |
| 8.3 | 1234总 | 1010101010 | 30.8±5.833.3±6.533.7±7.033.4±6.2131.2±19.9 | 80.9±7.3101.3±8.6120.8±12.2139.8±13.6442.8±38.3 | 37.9±4.132.7±4.427.7±3.523.9±3.329.4±2.3 | |
| 雌 | 0 | 1234总 | 1010101010 | 24.5±3.122.7±4.924.8±5.624.2±4.996.2±14.4 | 81.5±6.194.4±7.2111.2±11.4125.8±11.8412.9±32.3 | 29.8±2.323.8±4.122.1±3.119.1±2.823.2±2.4 |
| 2.5 | 1234总 | 1010101010 | 25.4±5.722.8±4.424.0±5.524.7±5.796.9±18.4 | 80.9±7.193.6±7.9109.1±11.4124.9±14.0408.5±37.9 | 31.2±5.024.1±3.121.7±3.219.6±2.823.6±2.9 | |
| 5.8 | 1234总 | 1010101010 | 22.8±4.820.6±4.223.6±3.723.9±5.090.9±11.6 | 78.1±6.589.3±7.0104.9±7.3120.9±10.2391.5±31.1 | 28.9±4.322.9±3.622.2±2.419.6±3.022.9±1.8 | |
| 8.3 | 1234总 | 1010101010 | 22.4±5.222.8±3.324.9±4.123.0±3.593.1±8.9 | 78.9±5.693.3±4.5110.0±6.4123.0±7.1405.2±19.2 | 28.4±4.724.2±2.622.5±2.618.7±1.923.0±1.3 |
注：剂量“0”为阴性对照。
表8 灵芝保健品颗粒对大鼠脏器系数(％)的影响(
X±S)
| 性别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 肝脏 | 脾脏 | 肾脏 | 睪丸 |
| 雄 | 02.55.88.3 | 10101010 | 31.8±3.5233.2±3.5532.2±3.5231.7±3.13 | 4.80±0.675.03±0.615.07±0.964.75±1.00 | 8.23±1.138.23±0.928.28±1.088.74±1.26 | 11.9±0.7811.5±1.0511.8±0.8111.1±0.88 |
| 雌 | 02.55.88.3 | 10101010 | 31.7±2.2533.4±3.8133.8±2.8432.8±2.79 | 5.16±1.565.37±1.145.07±1.054.79±1.02 | 7.95±1.038.49±0.767.83±1.038.21±0.95 | ---- |
注：剂量“0”为阴性对照。
表9 灵芝保健品颗粒对大鼠血液学指标的影响(
X±s)
| 性别 | 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | RBC(1012/L) | Hb(g/L) | WBC(×109/L) | DC(％) | |
| GR | LY | ||||||
| 雄 | 02.55.88.3 | 10101010 | 8.0±0.77.8±0.87.2±0.67.8±0.9 | 154.8±8.3i42.6±14.0149.1±18.8140.7±10.9 | 9.0±1.89.7±1.510.4±2.110.1±2.6 | 20.5±2.918.8±4.617.2±3.817.1±4.5 | 78.6±2.880.1±5.778.9±4.179.5±4.9 |
| 雌 | 02.55.88.3 | 10101010 | 8.4±1.08.1±0.48.3±0.77.9±0.8 | 155.1±8.5155.3±9.9160.4±12.3156.2±18.4 | 9.0±1.69.5±2.010.5±1.29.5±2.7 | 18.2±5.816.8±6.117.6±6.816.8±4.0 | 77.3±6.579.6±7.578.5±7.880.3±5.5 |
注：RBC为红细胞，Hb为血红蛋白，WBC为白细胞，GR为中性粒细胞，LY为淋巴细胞。
剂量“0”为阴性对照。
表10 灵芝保健品颗粒对大鼠血清生化指标的影响(
X士S)
| 性别 | 剂量(g/kg.bw) | ALT(U/L) | AST(U/L) | TP(g/L) | ALB(g/L) | BUN(mmol/L) | CR(μmol/L) | GLU(mmol/L) | CHO(mmol/L) | TG(mmol/L) |
| 雄 | 02.55.88.3 | 42.4±8.536.8±5.934.8±6.446.6±10.7 | 211.5±33.4209.3±33.3185.1±14.3214.0±29.3 | 71.8±5.474.9±4.475.3±4.575.5±4.6 | 30.9±2.430.9±2.330.3±3.230.8±1.4 | 7.2±1.68.4±1.58.2±1.37.8±1.0 | 61.6±4.460.1±5.463.3±6.660.3±6.0 | 4.09±1.043.39±0.833.57±0.923.66±0.97 | 1.76±0.271.47±0.22*1.49±0.20*1.46±0.15* | 1.43±0.671.53±0.691.50±0.511.39±0.30 |
| 雌 | 02.55.88.3 | 30.7±7.037.4±10.235.8±10.636.3±7.7 | 189.9±24.2185.3±18.9184.0±15.9177.4±23.7 | 73.9±3.474.0±2.475.9±4.475.5±3.6 | 32.1±2.331.7±3.532.1±2.431.2±1.8 | 9.0±1.28.3±1.28.2±1.29.3±1.5 | 63.9±8.160.8±7.363.0±5.661.7±6.4 | 4.09±0.843.70±0.624.12±1.053.76±0.28 | 1.87±0.171.78±0.181.78±0.231.98±0.23 | 1.49±0.511.15±0.361.26±0.451.50±0.57 |
注：ALT是谷丙转氨酶，AST为谷草转氨酶，TP为总蛋白，ALB为白蛋白，BUN为尿素氮，CR为肌酐，GLU为血糖，CHO为胆固醇，TG为甘油三脂。剂量“0”为阴性对照。
*与对照组比较，差异有显著性(P＜0.05)。
表11 灵芝保健品颗粒对试验动物肝脏组织学观察结果
| 病理改变(例) | 阴性对照组(N＝20) | 样品高剂量组(N＝20) |
| 被膜的改变肝小叶散在点状坏死肝小叶出血肝小叶水样变肝小叶炎症细胞浸润肝轴管区炎症细胞浸润 | 000000 | 000000 |
表12 灵芝保健品颗粒对试验动物脾脏组织学观察结果
| 病理改变(例) | 阴性对照组(N＝20) | 样品高剂量组(N＝20) |
| 红髓扩张白髓萎缩髓外造血灶炎细胞浸润色素沉着其它 | 110000 | 2220000 |
表13 灵芝保健品颗粒对试验动物肾脏组织学观察结果
| 病理改变(例) | 阴性对照组(N＝20) | 样品高剂量组(N＝20) |
| 被膜改变肾小球细胞变性、炎细胞浸润肾小管近曲管、近直管变性肾小管近曲管、近直管坏死肾小管远曲管、远直管变性肾小管远曲管、远直管坏死肾间质局灶炎细胞浸润肾小管局灶细胞变性个别肾小管扩张 | 000000101 | 000000000 |
表14 灵芝保健品颗粒对试验动物卵巢组织学观察结果
| 病理改变(例) | 阴性对照组(N＝10) | 样品高剂量组(N＝10) |
| 各级卵泡数目异常各级卵泡细胞变性各级卵泡细胞坏死炎细胞浸润 | 0000 | 0000 |
表15 灵芝保健品颗粒对试验动物睾丸组织学观察结果
| 病理改变(例) | 阴性对照组(N＝10) | 样品高剂量组(N＝10) |
| 生精上皮细胞减少生精上皮细胞变性生精上皮细胞坏死多核巨细胞间质出血间质水肿 | 000000 | 000000 |
表16 灵芝保健品颗粒对试验动物胃的组织学观察结果
表17 灵芝保健品颗粒对试验动物的空肠组织学观察结果
| 病理改变(例) | 阴性对照组(N＝20) | 样品高剂量组(N＝20) |
| 粘膜上皮变性、坏死粘膜上皮肠化固有层炎细胞浸润粘膜下层充血水肿肌层及外膜炎细胞浸润 | 00000 | 00000 |
| 病理改变(例) | 阴性对照组(N＝20) | 样品高剂量组(N＝20) |
| 粘膜上皮变性、坏死绒毛轴心炎细胞浸润粘膜下层充血水肿肌层及外膜炎细胞浸润 | 0000 | 0000 |
表18 灵芝保健品颗粒对戊巴比妥钠睡眠时间的影响
| 剂量(g/kg.BW) | 戊巴比妥钠剂量(mg/kg.BW) | 动物数(只) | 入睡动物数(只) | 睡眠发生率(％) | P值* |
| 00.831.672.50 | 28282828 | 15151515 | 2379 | 13.3320.0046.6760.00 | ＞0.05＜0.05＜0.01 |
*与对照组比较
表19 灵芝保健品颗粒对阈下剂量戊巴比妥钠诱导睡眠发生率的影响
| 剂量(g/kg.BW) | 戊巴比妥钠剂量(mg/kg.BW) | 动物数(只) | 睡眠时间(分)( X±S) | P值* |
| 00.831.672.50 | 55555555 | 13131313 | 48.35±9.6046.70±11.7340.54±11.5147.26±11.12 | ＞0.05＞0.05＞0.05 |
*与对照组比较
表20 灵芝保健品颗粒对戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠潜伏期的影响
| 剂量(g/kg.BW) | 巴比妥钠剂量(mg/kg.BW) | 动物数(只) | 睡眠潜伏时间(分)( X±S) | P值* |
| 00.831.672.50 | 240240240240 | 13131313 | 32.48±7.7727.08±3.0624.58±5.8824.07±4.49 | ＜0.05＜0.01＜0.01 |
*与对照组比较
表21 灵芝保健品颗粒对小鼠体重的影响(睡眠时间测定)
| 剂量(g/kg.BW) | 动物数(只) | 初始体重(g) | 中期体重(g) | 结束体重(g) |
| 00.831.672.50 | 13131313 | 20.69±0.4820.85±0.3820.69±0.4820.69±0.48 | 27.46±2.6326.69±1.7026.23±1.6427.31±2.21 | 29.54±3.1529.00±2.7428.69±2.7830.54±3.10 |
表22 灵芝保健品颗粒对小鼠体重的影响(入睡率测定)
| 剂量(g/kg.BW) | 动物数(只) | 初始体重(g) | 中期体重(g) | 结束体重(g) |
| 00.831.672.50 | 15151515 | 18.73±0.8018.73±0.8018.73±0.8018.67±0.72 | 24.67±1.8026.87±1.9224.80±1.5226.13±2.03 | 26.73±2.7929.67±3.2427.73±2.5829.33±3.58 |
表23 灵芝保健品颗粒对小鼠体重的影响(睡眠潜伏期测定)
| 剂量(g/kg.BW) | 动物数(只) | 初始体重(g) | 中期体重(g) | 结束体重(g) |
| 00.831.672.50 | 13131313 | 22.08±0.2722.08±0.2721.92±0.2721.92±0.27 | 27.31±1.8427.23±2.3526.62±1.7627.38±2.50 | 30.23±2.9430.31±2.5931.08±2.5030.92±3.30 |
表24 灵芝保健品颗粒对小鼠体重的影响(血清溶血素与迟发型变态
反应测定组)
| 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 初始体重(g)( X±S) | 中期体重(g)( X±S) | 结束体重(g)( X±S) | 增长值(g)( X±S) |
| 对照组0.420.831.67 | 11111111 | 19.85±0.6719.80±0.6919.74±0.7519.99±0.92 | 21.16±1.0821.04±1.0720.95±1.1421.02±1.23 | 22.71±0.9622.55±0.9022.59±1.1022.74±1.31 | 2.85±0.772.75±0.902.85±0.662.75±0.65 |
表25 灵芝保健品颗粒对小鼠体重的影响(吞噬鸡红细胞与淋转测定
组)
| 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 初始体重(g)( X±S) | 中期体重(g)( X±S) | 结束体重(g)( X±S) | 增重(g)( X±S) |
| 对照组0.420.831.67 | 10111111 | 19.79±0.7419.96±0.6819.53±0.9920.00±1.04 | 20.85±1.0920.91±0.9821.28±1.0721.34±0.94 | 22.86±0.8622.95±1.0822.48±0.8722.75±1.01 | 3.07±0.812.98±0.802.94±0.612.75±0.77 |
表26 灵芝保健品颗粒对小鼠体重的影响(NK细胞活性测定组)
| 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 初始体重(g)( X±S) | 中期体重(g)( X±S) | 结束体重(g)( X±S) | 增重(g)( X±S) |
| 对照组0.420.831.67 | 11111110 | 19.59±0.7019.52±0.7319.97±0.8019.68±0.75 | 21.27±0.9220.85±0.9020.85±1.0720.62±1.21 | 22.47±0.6922.31±0.8222.85±0.6222.67±1.06 | 2.88±1.082.79±0.862.87±0.832.99±1.08 |
表27 灵芝保健品颗粒对小鼠体重的影响(炭廓清测定组)
| 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 初始体重(g)( X±S) | 中期体重(g)( X±S) | 结束体重(g)( X±S) | 增重(g)( X±S) |
| 对照组0.420.831.67 | 10111010 | 19.72±0.6719.79±0.6419.63±0.7719.97±0.67 | 21.55±0.8921.85±0.9821.56±0.9721.87±0.81 | 22.57±0.8422.55±0.7822.31±0.8722.82±0.86 | 2.85±0.702.75±0.792.68±0.812.85±0.78 |
表28 灵芝保健品颗粒对小鼠脏器/体重比值的影响
| 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 脾脏/体重比值(mg/10g)( X±S) | 胸腺/体重比(mg/10g)( X±S) |
| 对照组0.420.831.67 | 11111111 | 41.03±3.1341.70±5.0541.39±4.7540.56±3.77 | 16.38±1.9816.11±2.3515.98±1.8616.37±1.34 |
表29 灵芝保健品颗粒对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响
| 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 足跖肿胀度(mm)( X±S) |
| 对照组0.420.831.67 | 11111111 | 0.20±0.070.24±0.090.24±0.060.30±0.08* |
*表示与对照组相比P＜0.05
表30 灵芝保健品颗粒对小鼠淋巴细胞转化的影响
| 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 光密度差值( X±S) |
| 对照组0.420.831.67 | 10111111 | 0.503±0.0380.556±0.0610.570±0.075*0.638±0.060** |
*表示与对照组相比P＜0.05，**表示与对照组相比P＜0.01
表31 灵芝保健品颗粒对小鼠血清溶血素抗体积数的影响
| 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 抗体积数( X±S) |
| 对照组0.420.831.67 | 11111111 | 174.91±11.70179.00±8.25193.00±13.94180.82±11.94** |
**表示与对照组相比P＜0.01
表32 灵芝保健品颗粒对小鼠抗体生成细胞的影响
| 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 抗体生成细胞数/106(脾细胞)( X±S) |
| 对照组0.420.831.67 | 11111111 | 132.27±57.68147.27±55.51246.82±75.11**213.64±45.67** |
**表示与对照组相比P＜0.01
表33 灵芝保健品颗粒对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响
| 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 吞噬百分率(％)( X±S) | 吞噬指数( X±S) |
| 对照组0.420.831.67 | 10111111 | 29.62±4.1728.00±4.6929.36±6.2628.25±4.55 | 0.91±0.140.90±0.171.01±0.210.89±0.13 |
表34 灵芝保健品颗粒对小鼠炭廓清的影响
| 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | 吞噬指数a( X±S) |
| 对照组0.420.831.67 | 10111010 | 5.20±0.435.31±0.625.30±0.406.00±0.64** |
**表示与对照组相比P＜0.01
表35 灵芝保健品颗粒对小鼠NK细胞活性的影响
| 剂量(g/kg.bw) | 动物数(只) | NK细胞活性率(％)( X±S) |
| 对照组0.420.831.67 | 11111111 | 20.48±5.9620.49±4.6519.28±4.9021.37±5.14 |
Claims (5)
1.一种灵芝保健品，其特征在于由下列成分按重量百分比组成：灵芝子实体提取物21.968％-25.968％、人参提取物10％-14％、糊精22％-26％、蔗糖38％-42％、维生素B10.016％、维生素B20.016％。
2.根据权利要求1的所述的灵芝保健品，其特征在于由下列成分按重量比组成：灵芝子实体提取物23.968％、人参提取物12％、糊精24％、蔗糖40％、维生素B10.016％、维生素B20.016％。
3.制备权利要求1所述的灵芝保健品的制备方法，包括以下步骤：
a原料检验
按配方取各原料根据质量指标进行检验，合格品移入洁净区备用。
b制备灵芝子实体提取物
按配方取8.5倍灵芝子实体提取物量的灵芝子实体，洗净、粉碎过40目筛，将灵芝子实体粗粉加8倍水浸泡12小时后，在100℃的温度下煎煮3次，并保持水量超过药材1cm-2cm，，3次煎煮时间分别是2小时、2小时、1小时；合并三次水提取液后过滤、浓缩、干燥得密度为1.1的浸膏，得率为12％；
c制备人参提取物
取5倍量人参提取物的人参用清水洗净，在60℃条件下烘干12小时，粉碎过40目筛，将人参粗粉加8倍水浸泡12小时后，在100℃的温度下煎煮3次，并保持水量超过药材1cm-2cm，，3次煎煮时间分别是2小时、2小时、1小时，合并三次水提取液后过滤、浓缩、干燥、粉碎后得密度为1.2的浸膏，得率为14％；
d将步骤b和c中所获得的灵芝提取物和人参提取物及维生素B1、维生素B2、糊精、蔗糖按配方比例混合并搅拌均匀，将混合物在搅拌机中匀搅拌3.5-4.5小时，制成干湿合适的软材；
e将步骤d所得混合料再过12-14目的摇摆式颗粒机中制粒，得混合颗粒软料；
f将混合颗粒软料置于烘箱中，在60℃条件下烘干3-5小时，使水分降至4％以下；
g将烘干后的混合微粒按需要分装成袋，并质检后，制得合格灵芝保健品。
4、根据权利要求4的所述的灵芝保健品的制备方法，其特征在于：所述步骤b-g在卫生洁净度为10万级的洁净车间内进行。
5、根据权利要求3的所述的灵芝保健品的制备方法，其特征在于：所述步骤d中混合物在搅拌机中的装量不超过搅拌机容积的三分之一。
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