CN1032951C - 龟和鳖的组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及含有龟和鳖的组合物及其制备方法,该组合物具有增强人体免疫力,调节人体中枢神经系统,心血管和内分泌系统的功能、抗衰老、增加癌症化疗患者的白细胞数量的功效。
Description
本发明涉及龟和鳖组合物,其制备方法,及其在人体上广泛的有益用途。
在现代社会中,人们的生活节奏越来越快,繁忙的工作使人们的身心承受巨大压力,导致人们机体免疫力下降,体内各种生理调节系统失调,从而使人们易产生疲劳及各种疾病,另外,老年人口所占社会人数的比例也愈来愈高,老年人的身体保健及延年益寿也成为一个日益突出的问题。因此,寻找一种对人体有广泛有益作用且使用方便的产品是十分迫切的。
在中国传统医学中,龟和鳖作为有效的药用成分均有记载。但长期以来,龟和鳖仅是少数人在患病或身体不适时使用、或在餐馆做为菜肴使用,使用时基本上是将它们在沸水中蒸煮并配上佐料食用,这一方面使它们的有效成分不能充分利用,另一方面也极大限制了它们的使用范围。目前,人们已开发出含鳖的口服液,含龟胶囊,及含鳖食品(见日本专利特公昭No58-5020)。在这些产品中,含鳖的口服液采用的是用酶水解法来提取鳖中有效成分,故无法将鳖甲中的矿物元素及蛋白质微粉化,使有用的鳖甲被弃掉;在含龟的胶囊剂中,由于制备过程中采用传统中药工艺,故在制备中无法避免地使龟中蛋白质完全碳化,使其营养成分损失很大。在日本特公昭No57-1980中,披露了用液氮冻结粉碎法得到鳖粉末的制造方法;在日本特公昭No58-5020中披露了以鳖粉末为主要成分的胶囊剂、粒剂及片剂等营养强化食品,但这些产品仅仅限于鳖的使用。因此,寻找新的对人体有益的产品仍是十分必要的。
本发明的目的在于开发一种鳖、龟本身具有的营养成分不受任何损失的含鳖和龟组合物,从而将鳖和龟的对人体的有益作用充分结合起来,使它们对人体发挥出更佳作用。
本发明者经广泛深入地研究,现已发现将整个鳖和龟在液氮下冷冻粉碎成粉末,然后按常规方法将所得鳖龟粉末制成各种剂型,如胶囊,最后辐射灭菌。由此得到的鳖龟组合物对人体显示出广泛而良好的生理活性,如增强人体抵抗力、调节人体中枢、心血管及内分泌系统、抗衰老、对肿瘤有抑制作用等。本发明基于上述工作得以完成。
本发明第一个目的涉及的是鳖龟组合物,其包括5-95%(重量)鳖和95-5%(重量)龟。
本发明第二个目的涉及的是制备鳖龟组合物的方法,其包括将活鳖和活龟分别在液氮低温下冷冻粉碎成颗粒,将所得鳖、龟颗粒通过冷冻干燥或其他干燥方法脱水,干燥后的鳖颗粒和龟颗粒混合并在液氮下粉碎成粉末,然后将所得粉末按常规方法脱脂,或先将鳖龟粗干燥品脱脂,然后再于液氮下粉碎成粉末,最后辐射灭菌。
本发明第三个目的涉及的是鳖龟组合物在提高人体机能上的广泛用途,其包括:例如作为人体增强剂,人体各种功能调节剂,及加入到食品中作为营养补强剂等。
本发明的鳖龟组合物的优点在于:其保留了鳖和龟本身固有的全部营养成分,本发明的鳖龟组合物不含任何添加剂,属纯天然产品。实验表明,本发明的鳖龟组合物含有丰富的人体各种所必需氨基酸和人体所必需的各种微量元素,其具体含量如下所示:
氨基酸含量:
分析结果:(单位:%)
1.天门冬氨酸(ASP)4.193 | 10.蛋氨酸(MET)0.614 |
2.苏氨酸(THR)1.628 | 11.异亮氨酸(ILE)1.552 |
3.丝氨酸(SER)2.049 | 12.亮氨酸(LEU)3.026 |
4.谷氨酸(GLU)6.327 | 13.酪氨酸(TYR)1.768 |
5.脯氨酸(PRO)4.113 | 14.苯丙氨酸(PHE)1.862 |
6.甘氨酸(GLY)7.157 | 15.组氨酸(HIS)1.337 |
7.丙氨酸(ALA)3.335 | 16.赖氨酸(LYS)2.448 |
8.胱氨酸(CYS)/ | 17.氨(NH3) |
9.缬氨酸(VAL)1.762 | 18.精氨酸(ARG)3.806 |
氨基酸总量:46.976 |
备注:
仪器型号:贝克曼System 6300氨基酸分析仪。
维生素含量:(mg/100g)
VB1: 11.9
VB2: 1.76
VE: 3.2
微量元素含量:
Fe(μg/g): 188.4
Mn(μg/g): 9.99
Cu(μg/g): 2.81
Ca(%): 15.02
Mg(μg/g): 1862.5
K(%): 0.31
Cr(μg/g): 9.29
Sr(μg/g): 95.84
Na(%): 0.53
Zn(μg/g): 137.42
所用分析仪器:日本岛津AA-670原子吸收仪。
在制备本发明鳖龟组合物的方法中,所使用的鳖为中华鳖,使用的龟为乌龟和/或陆龟。该方法的具体步骤如下:将体重1kg以下的活鳖和体重1kg以下的活龟禁食至少7天,然后将它们清肠处死,分别用-195℃液氮浸渍冷冻所得鳖和龟,从而使它们在该超低温下完成脆化,然后粉碎成1cm以下的颗粒,随后在负压下通过冷冻干燥或其它干燥手段将所得的鳖龟颗粒脱水,使它们的水分降至4%以下,随后按鳖与龟的重量比5-95%∶95-5%的比例,将经干燥的鳖和龟混合均匀,通过液氮浸渍、喷淋,在6000转/分重锤式粉碎机作用下粉碎成100目以上的粉末,然后按常规方法将所得粉末进行脱脂;或将干燥的鳖龟先进行脱脂,然后再于液氮下通过上述重锤式粉碎机分别粉碎成100目以上粉末,接着将所得鳖粉和龟粉按重量比5-95%∶95-5%混合均匀,最后辐射灭菌。
本发明鳖龟组合物可按本领域常规方法制成口服液、片剂、胶囊等。另外,其也可加入到食品中作为营养补强剂。实验证明,本发明鳖龟组合物对人体有广泛的有益作用,如增强人体抵抗力,调节中枢、心血管和内分泌系统,消除疲劳,抗衰老,提高人体的造血机能,对癌症患者化疗的增强作用等。本发明将通过下面的生物实验进一步说明本发明鳖龟组合物对人体的有益作用。
实验用材料
本发明鳖龟组合物粉剂由海南省养生堂补品有限公司提供。粉剂以0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)配制成浓度为5%、10%和20%的混悬剂,小鼠灌胃给药(ig),体积为0.6ml/20g;另配浓度为7.5%、15%、30%的混悬液,大鼠ig,体积为2ml/100g。
安定片:2.5mg/片,江苏省常州市第四制药厂,批号921029。
戊巴比妥钠粉剂:进口分装,上海化学试剂采购供应站分装。
盐酸左旋咪唑片:25mg/片,浙江省新昌制药厂,批号921110。
醋酸地塞米松片:0.75mg/片,芜湖市第三制药厂,批号921005。
注射用环磷酰胺(Cy):200mg/瓶,上海第十二制药厂,批号880405。
植物凝血素(PHA):广州医药工业研究所,批号860718。
3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR):8.14×1011/mM,中国科学院上海原子核研究所,批号911217。
黄芪水提液:黄芪(市售),剪碎,水煎煮3次,每次1小时,过滤,合并滤液缩至100%的浓度。(即每ml含生药1g)。
丙酸睾丸素注射液:25mg/ml上海第九制药厂,批号851004。
戊酸雌二醇注射液:10mg/ml上海第九制药厂,批号810501。
XZ-4型小鼠自由活动计数器:中国医学科学院药物研究所生产。
IRIC ARB-2050CA液闪仪:美国制造
DYQ01细胞收集仪:浙江绍兴坡塘医疗仪器厂
动物:NIH种小鼠,Wistar种大鼠,均由浙江省实验动物中心提供,批号(浙医实验动字910002号)。
二.方法与结果
(一)对中枢神经系统的影响
1.对小鼠自发活动的影响
方法〔1〕:小鼠75只,雌雄兼用,体重18-22g,随机分5组,每组15只。给药组分别ig给予本发明鳖龟组合物1.5、3、6g/kg,对照组给予等容积的生理盐水,连续10天,每日一次,安定组在第十天ig给予安定2.5mg/kg,第10天给药30分钟后,将小鼠单独置于小鼠自由活动计数仪中,观察小鼠5分钟内活动次数,并进行组间对照统计处理。
结果,本发明鳖龟组合物3、6g/kg组与生理盐水对照组比较,能明显减少小鼠的自发活动次数,见表1。
表1 本发明鳖龟组合物(A)对小鼠自发活动的抑制作用
组别 n 剂 量 活动次数
(g/kg)×d (5分钟)对照组 15 等量生理盐水 143.6±51.1△A 15 1.5×10 110.4±39.0
15 3.0×10 103.6±19.9*
15 6.0×10 104.5±36.6*安定 15 2.5mg×1 50.1±25.7***△平均值±标准差,下表相同于此表。*P<0.05,***P<0.001;t检验
2.对小鼠戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠率的影响
方法〔2〕:小鼠80只,雄性,体重18-22g,随机分5组,本发明鳖龟组合物,生理盐水和安定ig给药剂量同前,在第10天ig给药后30分钟,各组小鼠分别腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠(30mg/kg)观察各组小鼠入睡只数,以翻正反射消失1分钟以上为入睡指标,与对照组比较处理。
结果:本发明鳖龟组合物3和6g/kg组与生理盐水组统计处理比较,能明显增加阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠入睡率,见表2。表2 本发明鳖龟组合物(A)对戊巴比妥钠
诱导小鼠入睡率的增强作用
组别 n 剂量 入睡数(只) 入睡率(%)
(g/kg)×d对照组 16 等量生理盐水 1 6.3A 16 1.5×10 3 18.8
16 3.0×10 7 43.8*
16 6.0×10 9 56.3**安定 16 2.5mg/kg×1 15 93.8***P<0.05,**P<0.01;t检验或X2检验
(二)对免疫系统的影响
1.对未成年小鼠免疫器官的影响
方法:小鼠59只,雌性,体重10-13g,随机分5组,本发明鳖龟组合物和生理盐水ig剂量同前,黄芪组ig给予20g/kg,每日一次,连续10天。第10天给药30分钟后,处死小鼠,称取体重,解剖后取脾脏和胸腺称湿重:计算出指数。并与对照组比较显著性差异。
结果:本发明鳖龟组合物能非常显著地增加小鼠免疫器官的重量(P分别<0.05-0.01),见表3。
表3 本发明鳖龟组合物(A)对未成年小鼠免疫器官的增重作用
组别 n 剂量 胸腺指数 脾脏指数
(g/1g)×d (mg/kg) (mg/kg)对照组 12 等量生理盐水 42.43±4.90 62.57±5.16A 12 1.5×10 49.45±7.30* 77.69±17.72*
11 3.0×10 49.64±5.54** 79.74±15.18**
12 6.0×10 49.58±5.21** 83.70±8.00***黄芪组 12 20.0×10 49.34±5.53** 80.42±8.00***t检验,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001;
2.对大鼠淋巴细胞转化的影响
方法〔3〕:大鼠50只,雄性,150-235g,随机分5组,每组10只,本发明鳖龟组合物,生理盐水及黄芪水提液ig给药剂量同前。第10天给药30分钟后,大鼠在无菌条件下,断尾取血0.5ml(肝素抗凝)。取0.1ml抗凝血,加入1640培养液3ml(pH8.0,含PHA100μg/ml,青霉素、链霉素各100u/ml)的培养管中,混匀后置37℃水浴中培养72小时。培养56小时后,掺入3H-TdR 3.7×107Bq,继续培养72小时(以上操作均在无菌条件下进行)。培养结束后,取出培养管,用细胞收集仪将3H-TdR掺入的T淋巴细胞收集在滤膜内,用5%三氯醋酸固定,无水乙醇漂白,置80℃烘箱内0.5小时,烘干冷却,置PPO-POPOP闪烁液内,以液体闪烁仪计数1分钟的脉冲数(cpm)。每个样本做2支复管,取平均cpm值,与对照组比显著性差异。
结果:本发明鳖龟组合物(A)3和6g/kg均能明显提高大鼠淋巴细胞的转化能力,见表4。
表4本发明鳖龟组合物(A)对正常大鼠淋巴细胞
转化的增强作用
组别 n 剂量 平均CMP值/0.1
(g/kg)×d mi全血对照组 10 等量生理盐水 62219±17706A 10 1.5×10 89866±11419**
10 3.0×10 86705±16729**
10 6.0×10 82312±19662*黄芪组 10 20.0×10 99054±20873***t检验,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001
3.对Cy引起的大鼠淋巴细胞转化能力降低的影响
方法:大鼠60只,雄性,180-230g,随机分6组,每组10只。本发明鳖龟组合物(A),生理盐水和黄芪水提液剂量同前。第七天除对照组外,均腹腔注射Cy 75mg/kg(15mg/ml浓度,0.5ml/100g体重),于末次给药后30分钟,无菌条件下,每只动物尾静脉取血0.5ml(以肝素抗凝),测定大鼠淋巴细胞转化能力,操作方法同前。
结果:本发明鳖龟组合物6g/kg能对抗Cy引起的大鼠淋巴细胞转化能力下降(P<0.01),见表5。表5 本发明鳖龟组合物(A)对Cy引起的
大鼠淋巴细胞转化率降低的影响
组别 n 剂量 cpm/0.1ml全血
(g/kg)×d对照组 10 / 86480±29134Cy组 10 75mg/kg×1 4866±1821△△△黄芪+Cy组 10 20.0×10 11816±4006***A+Cy 10 1.5×10 5033±1866
10 3.0×10 5470±1586
10 6.0×10 7568±1819**Cy于给药后第七天ip给药75mg/kg×1,△△△与对照组比较P<0.001**与Cy组比较P<0.01,t检验。
4.对正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
方法〔4〕:小鼠70只,雄性,体重18-22g,随机分5组。每组10只。本发明鳖龟组合物1.5、3.0、6.0g/kg,左旋咪唑2.5mg/kg及对照组等量生理盐水ig给药,每日一次,连续10天。于末次给药30分钟后每只小鼠ip给予2%鸡红细胞0.5ml,2小时后,处死小鼠,ip 0.9%NaCl,轻柔腹部1分钟,剖开腹腔,吸取腹腔液体涂片,涂片置于湿纱布上在37℃孵育0.5小时,然后用0.9%NaCl漂洗,吹干,用4%Giernsa-wright染色5分钟。油镜下计数100个巨噬细胞中吞噬百分率(吞噬RBC的巨噬细胞数/100个巨噬细胞×100%)和吞噬指数(被吞噬的RBC数/100个巨噬细胞)。用药组与生理盐水比较显著性差异。
结果:本发明鳖龟组合物1.5、3和6g/kg均能非常显著地增加小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数(P<0.001),见表6。表6 本发明鳖龟组合物(A)对正常小鼠腹腔巨噬细胞
吞噬功能增强作用
组别 n 剂量 吞噬率% 吞噬指数
(g/kg)×d对照组 12 等量生理盐水 13.71±3.81 0.21±0.07A 10 1.5×10 33.21±8.82*** 0.52±0.12**
10 3.0×10 32.69±7.17*** 0.49±5.12**
10 6.0×10 48.54±8.97*** 0.74±0.11**黄芪组 10 20.0×10 86.75±9.85*** 1.76±0.22**t检验,***P<0.001
5.对地塞米松引起的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能下降的影响
方法:小鼠72只,雄性,体重18-22g,随机分6组。每组12只。本发明鳖龟组合物,左旋咪唑和对照组生理盐水ig给药剂量同前,第7、8、9天,除对照组外,分别ig给予地塞米松混悬液15mg/kg。末次给药30分钟后,每只小鼠ip 2%鸡红细胞0.5ml,5小时后,处死小鼠。其余实验操作同前。地塞米松组与对照组比较显著性差异,给药组与地塞米松组比较显著性差异。
结果:地塞米松15mg/kg ig给药3天可引起小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能明显下降(P<0.001)。本发明鳖龟组合物1.5、3和6g/kg非常显著地对抗地塞米松引起的腹腔巨噬细胞吞噬功能降低(P<0.001)。
表7 本发明鳖龟组合物(A)对地塞米松引起的腹腔巨噬细胞
吞噬功能的影响
组别 n 剂量 吞噬率% 吞噬指数
(g/kg)×d对照组 12 等量生理盐水 54.82±4.62 1.19±0.17DM 12 1.5mg/kg×3 37.27±5.84△△△ 0.66±0.11△△△A+DM 12 1.5×10 58.10±7.40*** 1.11±0.15***
10 3.0×10 57.80±5.80*** 1.20±1.14***
10 6.0×10 67.40±12.50*** 1.46±0.25***左旋咪唑+DM 10 20.0×10 73.91±6.47*** 1.40±0.15***△△△与对照组比较P<0.001,***与DM组比较P<0.001DM:地塞米松15mg/kg×3天ig
二.对造血系统的作用
1.对环磷酰胺所致大鼠造血系统毒性的影响
方法:大鼠60只,雄性,体重180-230g,随机分6组。每组10只。本发明鳖龟组合物1.5、3和6g/kg,黄芪水提液20g/kg,Cy组和对照组给予等量生理盐水,均ig给药,每日一次,连续10天。第七天除对照组外,分别ip Cy 75mg/kg,于末次给药30分钟后,断尾取血,作白细胞和血小板计数。Cy组与对照组比较显著性差异,用药组与Cy组比较显著性差异。
结果:Cy 75mg/kg ip可使大鼠的白细胞和血小板数目显著下降(P均为P<0.001)。本发明鳖龟组合物6g/kg可明显保护Cy引起的白细胞减少(P<0.05),但对血小板减少作用不明显,见表8。
表8 本发明鳖龟组合物(A)对Cy所致大鼠血液系统毒性的保护作用
组别 n 剂量 白细胞 血小板
(g/kg)×d (×109/L) (×109/L)对照组 12 等量生理盐水 14.05±2.55 890±182Cy 12 1.5mg/kg×3 3.82±1.45△△△ 569±113△△△A+Cy 12 1.5×10 4.73±1.86 579±101
10 3.0×10 5.16±1.43 623±80.4
10 6.0×10 5.28±1.30* 635±140黄芪+Cy 10 20.0×10 6.09±1.08** 731±161*△△△与对照组比较P<0.001,*与Cy组比较P<0.05,**与Cy组比较P<0.01,t检验
四.对性器官和性功能的作用
方法:小鼠60只,雄性,体重10-13g,随机分5组。本发明鳖龟组合物1.5、3和6g/kg,和对照组等体积生理盐水ig给药,丙酸睾丸素(2.5mg/kg)皮下注射,每日一次,连续10天。于末次给药30分钟后,处死小鼠,解剖出睾丸和贮精囊称湿重,计算出指数,用药组与生理盐水对照组比较显著性差异。
结果:本发明鳖龟组合物3和6g/kg能明显增加雄性未成年小鼠的睾丸和贮精囊的重量,见表9。
表9 本发明鳖龟组合物(A)对雄性未成年小鼠器官的增重作用
组别 n 剂量 睾丸指数 贮精囊指数
(g/kg)×d (mg/10g) (mg/10g)对照组 12 等量生理盐水 5.70±0.53 0.82±0.37A 12 1.5×10 6.01±1.14 0.97±0.43
12 3.0×10 6.10±0.40* 1.18±0.34*
12 6.0×10 6.48±0.67** 1.23±0.19*丙酸睾丸素 10 2.5mg/kg×10 6.79±0.84*** 1.54±0.46***t检验,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001
2.对未成年雌性小鼠子宫的影响
方法:小鼠58只,雌性,体重10-13g,随机分5组。本发明鳖龟组合物和对照组给药方法和剂量同上,戊酸雌二醇皮下注射50μg/kg,每日一次,连续10天。末次给药30分钟,处死小鼠,解剖取子宫称湿重,并计算出指数,用药组与生理盐水对照组比较显著性差异。
结果:本发明鳖龟组合物3和6g/kg能明显增加未成年雌性小鼠子宫的重量(P分别<0.05和<0.01),见表10。
表10 本发明鳖龟组合物(A)对未成年雌性小鼠子宫的影响
组别 n 剂 量 子宫指数
(g/kg)×d (mg/10g)对照组 12 等量生理盐水 9.52±2.05A 12 1.5×10 10.73±1.96
11 3.0×10 11.36±2.44*
12 6.0×10 12.40±2.55**戊酸雌二醇 10 50μg/kg×10 62.98±12.29***t检验,*P<0.05,**P<0.01***P<0.001
五.抗应激作用
1.对小鼠游泳试验的影响
方法:小鼠90只,雄性,17-22g,随机分4组。本发明鳖龟组合物1.5、3和6g/kg,对照组给予等体积的生理盐水,每日一次,连续10天,于末次给药30分钟后,将小鼠放入水温14±1℃的水池(长×宽×高=60×30×16cm)中游泳,以小鼠无力浮起,头部完全浸入5秒以上者为指标,记录游泳时间。用药组与生理盐水对照组比较显著性差异。
结果:本发明鳖龟组合物3和6g/kg能明显延长小鼠游泳时间(P均<0.05)见表11。
表11 本发明鳖龟组合物(A)对小鼠游泳时间的延长作用
组别 n 剂 量 游泳时间
(g/kg)×d (分钟)对照组 25 等量生理盐水 6.67±2.38A 23 1.5×10 8.21±3.78
23 3.0×10 8.60±3.35*
23 6.0×10 9.18±3.59*t检验,*P<0.05
2.对小鼠耐缺氧试验的影响
方法:小鼠51只,雌雄兼用,随机分4组。本发明鳖龟组合物1.5、3和6g/kg,对照组给予等体积生理盐水,每日一次,连续10天,于末次给药30分钟后,将小鼠放入真空干燥器中,逐渐减压至700mm Hg,维持2.25分钟,记录各组小鼠死亡数。用药组与生理盐水对照组比较显著性差异。
结果:本发明鳖龟组合物6g/kg可明显提高小鼠的减压耐缺氧能力(P<0.05),1.5和3.0g/kg作用不明显,见表12。
表12 本发明鳖龟组合物(A)对小鼠减压耐缺氧的影响
组别 n 剂量 死亡数 死亡率
(g/kg)×d (只) %对照组 14 等量生理盐水 93.1A 12 1.5×10 10 83.3
12 3.0×10 53.8
13 6.0×10 3 25.0**P<0.05与对照组比较,U-检验或X2检验。
3.对耐热试验的影响
方法:小鼠47只,随机分4组。本发明鳖龟组合物1.5、3.0、6g/kg,对照组给予等容积生理盐水ig给药,每日一次,连续10天,末次给药30分钟后,将小鼠放入46±1℃的恒温箱内,持续42分钟,记录各组小鼠死亡数,进行X2检验。
结果:本发明鳖龟组合物呈剂量反应提高小鼠的耐热时间,见表13。
表13 本发明鳖龟组合物(A)对小鼠耐热试验的影响
组别 n 剂量 死亡数 死亡率
(g/kg)×d (只) %对照组 等量生理盐水 12 100.0A 1.5×10 10 83.3A 11 3.0×10 6 54.5*A 12 6.0×10 3 25.0***X2检验,*P<0.05,***P<0.001与对照组比较
六.对60Co所致低白细胞的影响
方法:小鼠接种S180细胞悬液24小时后,随机分组,10只/组,同时服用本发明鳖龟组合物(6.0g/kg、3.0g/kg),3天后接受60Co照射,于照射后4天、8天、12天进行白细胞计数,结果见表14。试验结果表明,荷瘤小鼠服用本发明鳖龟组合物后提高了对抗60Co照射引起的低白细胞,减毒作用非常显著(P<0.05-0.01)。
表14 对60Co所致荷S180小鼠低白细胞的影响
组别(g/kg) | 动物数(只) | 正常鼠值 | WBC总数×103/mm3(X±SD) | ||
60Co照射后天数 | |||||
4天 | 8天 | 12天 | |||
40 Co330拉德A6.0+60Co330拉德A3.0+60Co330拉德+60Co165拉德A6.0+60Co165拉德A3.0+60Co165拉德荷S180小鼠 | 10101010101010 | (20)9.55±0.89 | 2.49±0.693.6±1.28*3.12±0.774.12±1.077.28±1.93***5.25±0.96*9.54±0.73 | 3.83±0.805.69±1.78**4.77±1.405.88±0.697.43±1.74*6.34±1.399.60±0.94 | 4.16±0.726.29±1.76**5.4±1.57*6.03±0.957.67±1.68*7.22±1.739.96±0.72 |
2.*<0.05,**<0.01
本发明鳖龟组合物给予人体后无任何毒副作用,其通过胃内给予小鼠的最大耐受量>52.5g/kg。
本发明将通过下面的制备实施例进一步来说明,但应意识到这不意味着对本发明的任何限制。
制备实施例
将60kg活鳖、40kg活龟在清水中禁食7天后,清除它们体内污物。处理后的鳖和龟浸渍于-195℃液氮中,分别进行粉碎,得小于1cm的颗粒,所得颗粒经脱水干燥得含水4%以下的粗品,其中鳖为16.4kg,龟为12.5kg。将上面得到的16.4kg鳖和12.5kg龟混合均匀,然后喷淋液氮并粉碎,得100目以上的鳖龟混合物。所得鳖龟混合物按常规方法脱脂,得鳖龟组合物26.7kg。最后将26.7kg鳖龟组合物用胶囊填充机制成胶囊,然后辐照灭菌。
Claims (6)
1.全鳖和全龟的组合物,其包括5-95%重量的鳖和95-5%重量的龟,其特征在于:该全鳖和全龟组合物是用物理方法处理得到的。
2.权利要求1的全鳖和全龟的组合物,其包括5-95%重量的鳖和95-5%重量的龟,其特征在于:该全鳖和全龟组合物是用冷冻粉碎方法处理得到的。
3.权利要求1的全鳖和全龟的组合物,其包括5-95%重量的鳖和95-5%重量的龟,其特征在于:该全鳖和全龟组合物是用如下方法制备的:
1)将至少禁食7天的活鳖和活龟在清除其肠内污物后,于液氮下分别粉碎成小于1cm的颗粒;
2)将所得颗粒通过冷冻干燥,得含水4%以下的颗粒;
3)将干燥的鳖和龟的颗粒混合均匀,然后喷淋液氮并粉碎至100目以上;
4)将上述所得鳖龟混合物粉末按常规方法脱脂,最后将脱脂后的鳖龟混合物粉末灭菌。
4.权利要求1-3任一的全鳖全龟组合物,其可按本领域常规方法制成口服液、胶囊或其它适宜剂型。
5.权利要求1-3中任一所要求的全鳖和全龟组合物,其包括60%重量的鳖和40%重量的龟。
6.制备权利要求1鳖龟组合物的方法,其包括:
1)将至少禁食7天的活鳖和活龟在清除其肠内污物后,于液氮下分别粉碎成小于1cm的颗粒;
2)将所得颗粒通过冷冻干燥,得含水4%以下的颗粒;
3)将干燥的鳖和龟的颗粒混合均匀,然后喷淋液氮并粉碎至100目以上;
4)将上述所得鳖龟混合物粉末按常规方法脱脂,最后将脱脂后的鳖龟混合物粉末灭菌。
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