CN1883500A - 低分子柑桔果胶用于增强免疫功能的应用 - Google Patents

低分子柑桔果胶用于增强免疫功能的应用 Download PDF

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CN1883500A CNA2006100508033A CN200610050803A CN1883500A CN 1883500 A CN1883500 A CN 1883500A CN A2006100508033 A CNA2006100508033 A CN A2006100508033A CN 200610050803 A CN200610050803 A CN 200610050803A CN 1883500 A CN1883500 A CN 1883500A
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俞仲华
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Abstract

本发明涉及一种低分子柑桔果胶的新用途,尤其涉及低分子柑桔果胶用于制药、食品和保健品中的应用。低分子柑桔果胶分子量明显小于天然果胶,分子结构因甲基减少得到改变,容易被肠道吸收而进入血液循环。它能明显改善食欲,增加免疫功能和调节免疫紊乱;能降低胆固醇预防动脉粥样硬化。进入血液循环后能帮助人体排除有毒的重金属。因此,低分子柑桔果胶用于制备增强免疫功能的药品、食品和保健品。

Description

低分子柑桔果胶用于增强免疫功能的应用
                          技术领域
本发明专利涉及一种低分子柑桔果胶的新用途,尤其涉及低分子柑桔果胶用于制药、食品和保健品中的应用。
                          背景技术
天然柑桔果胶是一种多糖复合物(长链碳水化合物),也是一种膳食纤维。它由天然柑桔水果如柠檬、柚子、桔子和桔的果皮和果肉中提取获得。这种多聚糖的长链产物有许多分枝,具有很强的粘附功能。天然果胶是可溶性纤维,食用后不能被肠道吸收。尽管有一些在大肠内发酵,但天然柑桔果胶对于人体没有非常有效的功用。
低分子柑桔果胶结构图:
低分子柑桔果胶是从天然果胶产物中提取得到的一种以半乳糖为主要成份的多糖,分子量小,无抗原性,水溶性好,容易被胃肠道吸收而进入血液循环。处理后的果胶分子量明显小于天然果胶,分子结构也因甲基减少得到改变。它具有与恶性表型细胞亲和,粘附特性,特异地杀伤已突变细胞的功能,使突变细胞在未形成之前即被清除。这种较小的多糖基团还能够紧紧地结合在癌细胞膜表面上能与半乳糖结合的特定部位,形成一种特异的复合体,并阻止突变细胞间的聚集及突变细胞粘附到邻近的细胞和组织。因此,具有预防多种疾病的功能,特别对癌细胞清除和控制能力有特异功能。
                              发明内容
为了进一步开发低分子柑桔果胶的用途,本发明的目的在于提供低分子柑桔果的新应用。
具体的说,是涉及低分子柑桔果胶用于制备增强免疫功能的药品中的应用。
涉及低分子柑桔果胶用于制备增强免疫功能的食品中的应用。
涉及低分子柑桔果胶用于制备增强免疫功能的保健品中的应用。
低分子柑桔果胶不但具有防治癌症的功效,而且还能增强人体免疫功能。经过特殊技术处理的10KD纯小分子柑桔果胶粉。特制后的果胶分子量明显小于天然果胶,分子结构因甲基减少得到改变,容易被肠道吸收而进入血液循环。它能明显改善食欲,增加免疫功能和调节免疫紊乱;能降低胆固醇预防动脉粥硬样化。进入血液循环后能帮助人体排除有毒的重金属。
通过大量的动物试验及临床观察,本发明创造性的发现低分子柑桔果胶由于分子量较低,容易被吸收进入血液循环,刺激体内免疫系统寻找破坏突变细胞。抑制(Th2),对抗过敏源,控制病毒细菌的传染。帮助(Th1)清除有毒物质及突变细胞,维持一个平衡的免疫系统。低分子柑桔果胶具有增强人体免疫功能,调节和增加单核细胞细胞毒作用,它的成分rhamnogalacturonan能提高CD3+T细胞和NK细胞的细胞毒活性,增强T细胞的活动能力。
为了进一步说明低分子柑桔果胶的增强免疫功能的作用,下面对低分子柑桔果胶粉对小鼠免疫功能的影响做了动物实验。
一、低分子柑桔果胶粉对小鼠细胞免疫功能的影响
表1  低分子柑桔果胶粉对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响( x±SD)
  剂量组(g/kg BW)   动物数(只)   足跖肿胀度(mm)   P值
  0.0000.1001.0003.000   15151515   0.30±0.220.33±0.180.44±0.200.52±0.24** 0.6370.0700.005
**P<0.01
经口给予小鼠不同剂量的低分子柑桔果胶粉30d,原始数据进行方差齐性检验后,符合方差齐的要求,用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表1可见,在其余各剂量组与3.000g/kgBW组间比较,差异有极显著性(P<0.01),在其余各剂量组与0.000g/kg BW组间比较,差异均无显著性(P>0.05),即低分子柑桔果胶粉在3.000g/kg BW组能提高小鼠的迟发型变态反应能力。
表2  低分子柑桔果胶粉对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验的影响( x±SD)
  剂量组(g/kg BW)   动物数(只)   淋巴细胞增殖能力(OD差值)   淋巴细胞增殖能力秩次转换值 P值
  0.0000.1001.0003.000   14151514   0.265±0.0630.354±0.1100.338±0.1780.274±0.084   23.3±13.738.4±17.0*31.2±17.924.3±15.5 0.0150.1910.871
*P<0.05
经口给予小鼠不同剂量的低分子柑桔果胶粉30d,原始数据方差不齐,经过对数和平方根转换后,仍不满足方差齐的要求,在经过秩次转换后,符合方差齐的要求,用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。有表2可见,在0.100g/kg BW组与0.000g/kg BW组间比较,差异有显著性(P<0.05),在其余各剂量组与0.000g/kg BW组间比较,差异均无显著性(P>0.05),即低分子柑桔果胶粉在0.100g/kg BW组能提供ConA诱导小鼠淋巴细胞转化能力。
由表1、2可见,低分子柑桔果胶粉小鼠细胞免疫功能测定结果阳性。
二、低分子柑桔果胶粉对小鼠体液免疫功能的影响
表3  低分子柑桔果胶粉对小鼠抗体生成细胞数的影响( x±SD)
  剂量组(g/kg BW)   动物数(只)   溶血空斑数(×103/全脾)   P值
  0.0000.1001.0003.000   15131513   101±51179±95**165±61*158±68* 0.0050.0140.030
*P<0.05
**P<0.01
经口给予小鼠不同剂量的低分子柑桔果胶粉30d,原始数据进行方差齐性检验后,符合方差齐的要求,用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表3可见,在0.100g/kg BW组与0.000g/kg BW组间比较,差异均有显著性(P<0.05)。即低分子柑桔果胶粉在各剂量组均能增加小鼠控体生成细胞数。
表4  低分子柑桔果胶粉对小鼠半数溶血值(HC50)的影响( x±SD)
  剂量组(g/kg BW)   动物数(只)   样品半数溶血值   P值
  0.0000.1001.0003.000   15131515   280±56321±58259±99268±60 0.1360.4180.622
经口给予小鼠不同剂量的低分子柑桔果胶粉30d,原始数据进行方差齐性检验后,符合方差齐的要求,用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。有表4见,在各剂量组与0.000g/kg BW组间比较,差异均无显著性(P>0.05)。即低分子柑桔果胶粉对小鼠的半数溶血值无影响。
有表3、4可见,低分子柑桔果胶粉小鼠体液免疫功能测定结果阳性。
三、低分子柑桔果胶粉对小鼠单核一巨噬细胞吞噬功能的影响
表5  低分子柑桔果胶粉对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力的影响( x±SD)
  剂量组(g/kg BW)   动物数(只)   吞噬指数(a)   P值
  0.0000.1001.0003.000   15141515   5.09±0.975.79±0.73*5.01±0.875.04±0.78 0.0300.8100.866
*P<0.05
经口给予小鼠不同剂量的低分子柑桔果胶粉30d,原始数据进行方差齐性检验后,符合方差齐的要求,用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表5可见,在0.100g/kg BW组与0.000g/kg BW组间比较,差异有显著性(P<0.05),在其余各剂量组与0.000g/kgBW组间比较,差异均无显著性(P>0.05)。即低分子柑桔果胶粉在0.100g/kg BW组能提高小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力。
表6  低分子柑桔果胶粉对小鼠巨噬细胞鸡红细胞吞噬率的影响( x±SD)
  剂量组(g/kg BW)   动物数(只)   吞噬率(%)   吞噬率平方根反正弦转换值 P值
  0.0000.1001.0003.000   15151515   35±1235±1146±1352±9   36±736±742±8*46±5** 0.9460.0150.000
*P<0.05
**P<0.01
经口给予小鼠不同剂量的低分子柑桔果胶粉30d,原始数据进行平方根反正弦转换后,经过方差齐性检验,符合方差齐的要求,用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表6可见,在1.000g/kg BW组与0.000g/kg BW组间比较,差异有显著性(P<0.05),在3.000g/kg BW组与0.000g/kg BW组间比较,差异有极显著性(P<0.01),在0.100g/kg BW组与0.000g/kg BW组间比较,差异无显著性(P>0.05)。即低分子柑桔果胶粉在1.000g/kg BW组、3.000g/kg BW组能提高小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率。
表7  低分子柑桔果胶粉对小鼠巨噬细胞鸡红细胞吞噬指数的影响( x±SD)
  剂量组(g/kg BW)   动物数(只)   吞噬指数   P值
  0.0000.1001.0003.000   15151515   0.49±0.180.47±0.170.63±0.17*0.69±0.17** 0.6700.0290.003
*P<0.05
*P<0.01
经口给予小鼠不同剂量的低分子柑桔果胶粉30d,原始数据进行平方根反正弦转换后,符合方差齐的要求,用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表7可见,在1.000g/kg BW组与0.000g/kg BW组间比较,差异有显著性(P<0.05),在3.000g/kg BW组与0.000g/kgBW组间比较,差异有极显著性(P<0.01),在0.100g/kg BW组与0.000g/kg BW组间比较,差异无显著性(P>0.05)。即低分子柑桔果胶粉在1.000g/kg BW组、3.000g/kg BW组均能提高小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数。
由表5、6、7可见,低分子柑桔果胶粉小鼠单核-巨噬细胞功能测定结果阳性。
四、低分子柑桔果胶粉对小鼠NK细胞活性的影响
表8  低分子柑桔果胶粉对小鼠NK细胞活性的影响( x±SD)
  剂量组(g/kg BW) 动物数(只) NK细胞活性(%)   NK细胞活性平方根反正弦转换值 P值
  0.0000.1001.0003.000   14151514   54.9±11.367.7±8.168.5±7.665.1±8.4   47.9±6.755.6±5.3**56.0±4.6**54.0±5.3** 0.0000.0000.006
**P<0.01
经口给予小鼠不同剂量的低分子柑桔果胶粉30d,原始数据进行平方根反正弦转换后,经过方差齐性检验,符合方差齐的要求,用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表8可见,在各剂量组与0.000g/kg BW组间比较,差异均有极显著性(P<0.01),即低分子柑桔果胶粉在各剂量组均能提高小鼠NK细胞活性,即小鼠NK细胞活性测定结果阳性。
综上所述,经口给予小鼠不同剂量的低分子柑桔果胶粉30d,小鼠的细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能、NK细胞活性测定结果均为阳性。对小鼠的体重增长、胸腺体重比值、脾脏体重比值均无影响。因此,低分子柑桔果胶粉具有增强免疫力的功能。
                          具体实施例
下面对本发明的具体实施例做进一步说明。
实施例1
1、柑桔果胶生产工艺流程(酸解法提取柑桔果胶):
首先将干柑桔皮冲洗去杂、浸泡、沥干后,粉碎成2-4mm的小颗粒,然后在10倍于干柑桔桔皮重量的稀盐酸(浓度为1%,由31%的食品级盐酸加水稀释而成)的催化下在90±2℃下搅拌2小时提取果胶。经板框过滤,取得滤液。过滤液用4M的氢氧化钠溶液(由食品级氢氧化钠配制)中和至pH=5后,减压浓缩(真空度为660毫米水银柱,温度为50±2℃,浓缩比为4∶1)。浓缩液用96%的食品级乙醇沉淀(乙醇浓缩液为2∶1),经板框过滤,取得沉淀物。沉淀物再用96%的食品级乙醇进一步清洗纯化。取得纯化物,经12小时真空干燥(真空度为200毫米水银柱,温度为85±2℃)、无菌密闭研磨器研磨后,过35目筛成柑桔果胶(得率为10%)。
2、低分子柑桔果胶生产工艺流程:
先将柑桔果胶在氢氧化钠和氢氧化钾得催化下在水中(25±2℃,果胶的浓度为5%,用3M氢氧化钠/氢氧化钾的混合液(摩尔比1∶5),由食品级的氢氧化钠和食品级的氢氧化钾配制而成把果胶溶液的pH调至10)进行酯的水解(去甲基)和果胶解聚1小时,然后在盐酸的催化下(25±2℃,用3M盐酸(食品级)把果胶溶液的pH调至3)进行酯的水解(去甲基)和果胶解聚10小时。水解液用3M的氢氧化钠/氢氧化钾的混合液(摩尔比1∶5,由食品级的氢氧化钠和食品级的氢氧化钾配制而成)进行部分中和至pH=6。水解液用96%的食品级乙醇沉淀(乙醇∶浓缩液为3∶1),经板框过滤,取得沉淀物。沉淀物再用96%的食品级乙醇进一步清洗纯化。取得纯化物,经12小时真空干燥(真空度为200毫米水银柱,温度为85±2℃)、无菌密闭研磨器研磨,过35目筛成低分子柑桔果胶(得率为20%)。
低分子柑桔果胶粉由低分子柑桔果胶直接研磨制得,制得后的低分子柑桔果胶粉可直接包装成食品食用。
实施例2
将实施例1得到的低分子柑桔果胶作为食品添加成分,加入到日常食用的食品中,制得含低分子柑桔果胶的食品。
实施例3
将实施例1得到的低分子柑桔果胶添加常规辅料,制成口服液、胶囊、片剂等保健品形式服用。
实施例4
将实施例1得到的低分子柑桔果胶添加常规辅料,制成口服液、胶囊、片剂等作为增强人体免疫功能的药品服用。

Claims (3)

1.低分子柑桔果胶用于制备增强免疫功能的药品中的应用。
2.低分子柑桔果胶用于制备增强免疫功能的食品中的应用。
3.低分子柑桔果胶用于制备增强免疫功能的保健品中的应用。
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