CN1876641B

CN1876641B - 一种提取纯化丹酚酸b的方法

Info

Publication number: CN1876641B
Application number: CN 200610200682
Authority: CN
Inventors: 修志龙; 郭永学; 李晓晖; 张代佳
Original assignee: Dalian University of Technology
Current assignee: Dalian University of Technology
Priority date: 2006-07-13
Filing date: 2006-07-13
Publication date: 2013-06-05
Anticipated expiration: 2026-07-13
Also published as: CN1876641A

Abstract

本发明属于天然产物的提取与分离纯化技术领域，涉及从鼠尾草属植物中提取纯化丹酚酸B的方法，特别涉及从丹参中提取纯化丹酚酸B的方法。其特征是首先丹参鲜药材置于微波场中处理1~10min后，按一定的料液比加水浸提，离心去除沉淀，然后经聚酰胺层析，依次用水和20~50％的乙醇洗脱除杂，再用60~80％的乙醇洗脱丹酚酸B，合并含丹酚酸B的洗脱液，经减压浓缩、冷冻干燥后得纯度大于95％的丹酚酸B。本发明的效果和益处是工艺简单，设备投资少，成本低，产品中丹酚酸B纯度高，质量稳定，适合大规模工业化生产。

Description

一种提取纯化丹酚酸B的方法

技术领域

本发明属于天然产物的提取与分离纯化领域，涉及从鼠尾草属植物中提取纯化丹酚酸B的方法，特别涉及从丹参中提取纯化丹酚酸B的方法。

背景技术

丹参为唇形科植物丹参(Salviamiltiorrhiza bunge)干燥的根及根茎，为多年生草本植物，是我国传统医学中的常用药之一，具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦之功效。丹参临床主要用于治疗肾病、肝病、心脑血管疾病等，有着广泛的应用领域。

丹酚酸B(SalvianolicacidBorLithospermicacid B)在丹参干药材中含量约为2~8％，是丹参主要水溶性有效成分之一。药理研究表明，丹酚酸B在清除氧自由基、保护心脑缺血再灌注损伤和保肝护肾等方面具有较强的药理作用。其分子式为C₃₆H₂₈O₁₈，结构式为：

丹酚酸B在C-9和C-9′位存在两个酯键，在水中不稳定，易降解。同时水溶性丹酚酸类化合物在结构和理化性质上具有很大的相似性，要大规模地分离出高纯度的丹酚酸B非常困难。

现有技术中从丹参中提取丹酚酸B的方法主要有：①用水浸取、渗滤提取、超声破碎提取或微波辅助提取丹参酚酸，提取液经酸化后，用多种填料(如大孔树脂类、离子交换树脂、SephadexLH-20凝胶、C18键合相或C8键合相等)的柱层析法纯化制备丹酚酸B(中国专利CN02160771)；②用水提取后，再用壳聚糖絮凝，醇沉、有机溶剂萃取，经硅胶柱纯化制备丹酚酸B(中国专利CN03151476)；③用60~80％丙酮水或60~80％的C₁~C₅低级醇等有机溶剂为提取剂取代热水浸提丹参粉末，经大孔树脂和聚酰胺二步纯化制取丹酚酸B镁盐(中国专利CN02137375)。

现有技术的不足是，用水提取时间长，丹酚酸B降解较多，并且长时间地用水浸泡，容易染菌，并有可能产生有毒物质。有机溶剂的大量使用存在溶剂残留问题，难以保证用药安全，而且分离工艺步骤越多，成本越高，收率越低。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种工艺简单、收率较高、适于工业生产，而且成本低廉的提取纯化丹酚酸B的方法。

本发明的技术方案包括用微波处理和聚酰胺层析两部分，具体步骤为：

(1)微波对丹参鲜药材的处理

取丹参鲜药材(丹参鲜药材的概念等同于含水量20~65％的药材)，均匀地铺成5~20mm的厚度，置于微波场中处理1~10min，使药材中的水份汽化率达到90~99％。然后晒干，或直接按1∶5~15物料比加水进行提取。提取液经纱布过滤后，在1000~5000rpm下离心除去沉淀；

(2)聚酰胺柱纯化

离心后的上清液经聚酰胺柱层析，依次用5~15倍柱体积的水、1~2倍柱体积20％~50％的乙醇洗脱除杂，然后再用60％~80％的乙醇洗脱丹酚酸B，合并含有丹酚酸B的洗脱液，经减压浓缩、冷冻干燥后，得到纯度大于95％的丹酚酸B。

在步骤(1)中水用有机酸或无机酸将pH值调节至1~4，例如用盐酸调pH2.0。在步骤(2)的聚酰胺层析过程中，可以通过薄层层析或高效液相色谱分析检测方法，检测洗脱液中丹酚酸B的含量。

本发明的效果和益处是：①丹参鲜药材经微波处理后，有杀菌作用，减少了药材在晾晒、存储过程中的霉变；②丹参鲜药材经微波处理后，由于细胞内水份受热迅速汽化，使细胞壁破裂，从而明显加快丹酚酸B的浸出速度；③用聚酰胺作填料一步层析，减少工艺步骤，节约生产成本；④以食品级乙醇作洗脱剂，排除有毒物质的残留，保证药用安全；⑤工艺简单，设备投资少，成本低廉，丹酚酸B纯度高，容易实现工业化。

具体实施方式

以下结合技术方案，详细叙述本发明的实施例。

取丹参鲜药材150g(切片长度3cm左右)，在频率为2450Hz的微波场中用中火处理8min。晒干得丹参80g，加入800ml水浸提，提取液用纱布过滤后，在3000rpm下离心除杂，离心液上聚酰胺柱(25×600mm)，树脂床体积为250ml，先用750ml水、250ml 20％的乙醇和375ml50％的乙醇洗脱除杂，然后再用375ml 70％的乙醇洗脱丹酚酸B，收集含丹酚酸B的洗脱液，经减压浓缩、冷冻干燥后，得到纯度为98.5％的丹酚酸B。

Claims

1. 一种提取纯化丹酚酸B的方法，其特征在于：先用微波提取，后用聚酰胺层析纯化丹酚酸B，具体步骤包括：

（1）微波对丹参鲜药材的处理：取含水量20~65%的丹参鲜药材，均匀地铺成5~20mm的厚度，置于微波场中处理1~10min，然后晒干；或直接按1：5~15物料比加水进行提取，提取液经纱布过滤后，在1000~5000rpm下离心除去沉淀；

（2）聚酰胺柱层析：上清液经聚酰胺柱层析，依次以水，20~50%的乙醇洗脱除杂，用60~80%的乙醇洗脱丹酚酸B，合并含有丹酚酸B的洗脱液，减压浓缩回收乙醇后，浓缩液冷冻干燥。

2.根据权利要求1所述的一种提取纯化丹酚酸B的方法，其特征在于，提取剂水用无机酸或有机酸将 pH调至1~4。

3.根据权利要求1所述的一种提取纯化丹酚酸B的方法，其特征在于，用20%和50%的乙醇除杂，用70%的乙醇洗脱丹酚酸B。

4.根据权利要求2所述的一种提取纯化丹酚酸B的方法，其特征在于，提取剂水用盐酸调pH2。