CN1863780A - 蛋白激酶抑制剂及其应用 - Google Patents

Abstract

这里公开的化合物是有用的具有式(I)和(V)的蛋白激酶抑制剂或其药学上可接受的盐，其中环B、Z¹、Z²、U、T、m、n、p、Q、Q′、R¹、R²、R^X、R³和R⁶如说明书所定义。这些化合物和其药学上可接受的组合物可用于治疗或缓解多种疾病的严重程度，包括中风、炎症、自身免疫病(例如系统性红斑狼疮和银屑病)、增殖病(例如癌症)和与器官移植相关的疾病。

Description

蛋白激酶抑制剂及其应用

技术领域

本发明属于药物化学领域，涉及嘧啶类化合物(蛋白激酶抑制剂)、含有这类化合物的组合物及其使用方法。该化合物可以用于治疗癌症、神经障碍、自身免疫病和其它能用蛋白激酶抑制剂减轻症状的疾病。

背景技术

近年来，对与目标疾病相关的酶和其它生物分子的结构的更好理解已经极大地辅助了新型治疗剂的研究。一类已经成为广泛研究的对象的重要酶是蛋白激酶。

蛋白激酶包括一大家族结构上相关的酶，它们负责控制细胞内的多种信号转导过程。(参见，Hardie，G.and Hanks，S.(1995)TheProtein Kinase Facts Book，I and II，Academic Press，San Diego，CA)。由于它们结构和催化功能的保守，认为蛋白激酶从共同遗传基因发展而来。几乎所有的激酶都含有相似的250-300个氨基酸的催化域。根据它们磷酸化的底物(例如，蛋白-酪氨酸、蛋白-丝氨酸/苏氨酸、类脂等)，可以将激酶分类为家族。已经鉴别出通常与这些激酶家族中的每一个相对应的序列基序。(参见，例如，Hanks，S.K.，Hunter，T.，FASEB J.，9：576-596(1995)；Knighton等，Science，253：407-414(1991)；Hiles等，Cell，70：419-429(1992)；Kunz等，Cell，73：585-596(1993)；Garcia-Bustos等，EMBO J.，13：2352-2361(1994))。

通常，蛋白激酶通过实现从三磷酸核苷酸向参与信号传递途径的蛋白受体的磷酰转移来介导细胞间的信号传递。这些磷酸化事件起分子开关的作用，可以调控或调节目标蛋白的生物功能。细胞外的和其它的刺激导致最终触发这些磷酸化事件。这种刺激的实例包括环境信号和化学压力信号(例如，渗透压震扰、热波动、紫外线辐射、细菌内毒素和H₂O₂)、细胞因子(例如，白细胞介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α))、生长因子(例如，粒细胞巨嗜细胞-集落刺激因子(GM-CSF)和成纤维细胞生长因子(FGF))。细胞外的刺激可能影响一种或多种与细胞生长、迁移、分化、激素分泌、转录因子的活化、肌肉收缩、葡萄糖代谢、蛋白合成的控制和细胞周期的调节相关的细胞反应。

许多疾病与蛋白激酶介导的事件所触发的异常细胞反应有关。这些疾病包括自身免疫病、炎症、骨病、代谢病、神经学疾病和神经退化病、癌症、心血管病、过敏症和哮喘、阿尔茨海默氏病和激素相关疾病。因此，在药物化学领域已经进行了实质性的努力来寻找能够有效地用作治疗剂的蛋白激酶抑制剂。但是，考虑到目前缺少可获得的用于大多数与蛋白激酶相关的疾病的治疗选择，仍然非常需要能抑制这些蛋白目标的新治疗剂。

哺乳动物细胞通过激活信号传递级联来对胞外刺激作出反应，该信号传递级联由有丝分裂原激活的蛋白(MAP)激酶家族成员介导，其包括胞外信号调节的激酶(ERK)、p38 MAP激酶和c-Jun N-端激酶(JNK)。MAP激酶(MAPK)能被多种信号激活，包括生长因子、细胞因子、紫外辐射和应激诱导剂。MAPK是丝氨酸/苏氨酸激酶，它们能被激活环中的Thr-X-Tyr区段处的苏氨酸和酪氨酸的双磷酸化所激活。MAPK能磷酸化包括转录因子在内的多种底物，这反过来调节特定基因组的表达，从而介导对刺激的特定反应。

ERK2是广泛分布的蛋白激酶，当Thr183和Tyr185都被上游的MAP激酶MEK1磷酸化时，它达到最大活性(Anderson等，1990，Nature 343，651；Crews等，1992，Science 258，478)。激活后，ERK2能磷酸化许多调节蛋白，包括蛋白激酶Rsk90(Bjorbaek等，1995，J.Biol.Chem.270，18848)和MAPKAP2(Rouse等，1994，Cell 78，1027)以及转录因子，例如ATF2(Raingeaud等，1996，Mol.Cell Biol.16，1247)、Elk-1(Raingeaud等1996)、c-Fos(Chen等，1993Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90，10952)和c-Myc(Oliver等，1995，Proc.Soc.Exp.Biol.Med.210，162)。ERK2还是Ras/Raf依赖性的途径的下游目标(Moodie等，1993，Science 260，1658)，并且转递来自这些潜在的致癌蛋白的信号。已经证实ERK2在乳腺癌细胞的阴性生长对照中起作用(Frey和Mulder，1997，Cancer Res.57，628)，还已经报道了ERK2在人乳腺癌中的过量表达(Sivaraman等，1997，J Clin.Invest.99，1478)。激活的ERK2还已经参与了内皮缩血管肽刺激的气管平滑肌细胞的增殖，这表明该激酶在哮喘中起作用(Whelchel等，1997，Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.16，589)。

受体酪氨酸激酶(例如EGFR和ErbB2)的过量表达(Arteaga CL，2002，Semin Oncol.29，3-9；Eccles SA，2001，J Mammary GlandBiol Neoplasia 6：393-406；Mendelsohn J和Baselga J，2000，Oncogene 19，6550-65)和Ras GTP酶蛋白中的激活突变(Nottage M和Siu LL，2002，Curr Pharm Des 8，2231-42；Adjei AA，2001，J NatlCancer Inst 93，1062-74)或B-Raf突变(Davies H.等，2002，Nature417，949-54；Brose等，2002，Cancer Res 62，6997-7000)在人肿瘤中起主要作用。这些遗传性的改变与不良的临床预后相关，并且能激活广范围的人肿瘤中的Raf-1/2/3-MEK1/2-ERK1/2信号转导级联。激活的ERK(即ERK1和/或ERK2)是已经与增殖、分化、不依赖贴壁的细胞存活和血管生成的控制相关联的中央信号传递分子，并且参与恶性肿瘤的形成和发展的许多重要过程。这些数据表明，ERK1/2抑制剂会发挥多效活性，包括凋亡前的(proapoptotic)、抗增殖的、抗转移的和抗血管生成作用，并且提供了针对非常广范围的人肿瘤的治疗机会。

越来越多的证据涉及选择肿瘤的致癌行为中的ERK MAPK途径的构成性激活。在约30％全部肿瘤中发现了Ras的激活突变，还有一些(例如胰腺(90％)和结肠(50％))肿瘤具有特别高的突变率(ref)。还已经在9-15％黑色素瘤中鉴别出Ras突变，但是引起构成性激活的B-Raf体细胞错义突变更常见，并且在60-66％恶性黑色素瘤中有发现。Ras、Raf和MEK的激活突变能致癌地体外转化成纤维细胞，与肿瘤抑制基因(例如p16INK4A)的缺失相关联的Ras或Raf突变会体内地造成自发的肿瘤发展。已经在这些模型中证实了增强的ERK活性，还已经在适当的人肿瘤中广泛地报道。关于黑色素瘤，已经很好地记载了B-Raf或N-Ras突变或自分泌生长因子激活导致的高基础ERK活性，并且已经与快速的肿瘤生长、增强的细胞存活和对细胞凋亡的抗性相关联。另外，认为ERK激活是黑色素瘤的高度地转移行为的主要驱动力，该转移行为与降解胞外基质的蛋白酶和促进侵入的整联蛋白的增强表达以及E-钙粘着蛋白粘附分子(它通常介导角化细胞的相互作用以控制黑素细胞的生长)的下调节相关。综合这些数据表明，ERK是治疗黑色素瘤(一种目前不可治疗的疾病)的有前途的治疗目标。

一个特别令人感兴趣的激酶家族是c-Jun NH₂-端蛋白激酶，也称作JNK。已经鉴别出三个不同的基因JNK1、JNK2、JNK3，至少有十种不同的JNK拼接异构体存在于哺乳动物细胞中[Gupta等， EMBO J.，15：2760-70(1996)]。JNK家族的成员能被前炎症的细胞因子(例如肿瘤坏死因子-α(TNFα)和白细胞介素-1β(IL-1β))和环境刺激(包括茴香霉素、紫外辐射、缺氧和渗透压震扰)所激活[Minden等，Biochemica et Biophysica Acta，1333：F85-F104(1997)]。

JNK的下游底物包括转录因子c-Jun、ATF-2、Elk1、p53和细胞死亡域蛋白(DENN)[Zhang等 Proc.Natl.Acad.Sci.USA，95：2586-91(1998)]。每一种JNK异构体以不同的亲合力结合到这些底物上，这表明不同的JNK的底物特异性会体内地调节信号传递途径(Gupta等，见上)。

JNK和其它MAPK一起，已经在介导针对癌症、凝血酶诱导的血小板凝聚、免疫缺陷病、自身免疫病、细胞死亡、变态反应、骨质疏松和心脏病的细胞反应中起作用。与激活JNK途径相关的治疗目标包括慢性髓性白血病(CML)、类风湿性关节炎、哮喘、骨关节炎、局部缺血、肿瘤和神经退化病。

一些文献已经详细描述了与肝病或肝缺血症状相关的JNK激活的重要性( Nat.Genet.21：326-9(1999)； FEBS Lett.420：201-4(1997)； J.Clin.Invest.102：1942-50(1998)； Hepatology 28：1022-30(1998))。因此，JNK的抑制剂可以用于治疗多种肝病。

还已经报道了JNK在心血管病(例如心肌梗死或充血性心力衰竭)中的作用，因为已经证实JNK能介导针对多种形式的心脏应激的肥大反应[ Circ.Res.83：167-78(1998)； Circulation 97：1731-7(1998)； J.Biol.Chem.272：28050-6(1997)； Circ.Res.79：162-73(1996)； Circ.Res.78：947-53(1996)； J.Clin.Invest.97：508-14(1996)]。

已经证实，JNK级联还在T细胞激活(包括IL-2启动子的激活)中起作用。这样，JNK的抑制剂会在改变病理性的免疫反应中具有治疗价值[ J.Immunol.162：3176-87(1999)； Eur.J.Immunol.28：3867-77(1998)；J.Exp.Med.186：941-53(1997)； Eur.J.Immunol.26：989-94(1996)]。

还已经发现了JNK激活在多种肿瘤中的作用，这揭示了JNK抑制剂在癌症中的潜在用途。例如，构成性地激活的JNK与HTLV-1介导的肿瘤生成相关[ Oncogene 13：135-42(1996)]。JNK会在卡波剂氏肉瘤(KS)中起作用，因为认为bFGF和OSM对KS细胞的增殖作用是由它们对JNK信号传递途径的激活所介导的[ J.Clin.Invest.99：1798-804(1997)]。其它参与KS增殖的细胞因子(例如血管内皮生长因子(VEGF)、IL-6和TNFα)的增殖作用也可以由JNK介导。另外，在p210 BCR-ABL转化的细胞中的c-jun基因的调节与JNK的活性一致，这揭示了JNK抑制剂在治疗慢性髓性白血病(CML)中的作用[ Blood 92：2450-60(1998)]。

JNK1和JNK2在许多组织中广泛地表达。相反，JNK3选择性地在脑中、更少程度地在心脏和睾丸中表达[Gupta等，见上；Mohit等，Neuron 14：67-78(1995)；Martin等， Brain Res.Mol.Brain Res.35：47-57(1996)]。已经将JNK3与红藻氨酸诱导的神经细胞凋亡相联系，这揭示了JNK在谷氨酸神经毒性的发病机理中的作用。在成年人的脑中，JNK3的表达局限在CA1、CA4和海马的脑下脚区域的锥状的神经元亚群和新皮层的第3和5层[Mohit等，见上]。与来自正常患者的脑组织的海马趾神经元的最小扩散细胞质染色相比，急性缺氧患者的CA1神经元表现出强的核JNK3-免疫反应性[Zhang等，见上]。这样，JNK3似乎参与海马CA1神经元的缺氧的和局部缺血的损伤。

另外，JNK3与脆弱的神经元在免疫化学上共同存在于阿尔茨海默氏病[Mohit等，见上]。对JNK3基因的破坏会造成小鼠对激励毒性的谷氨酸受体激动剂红藻氨酸的抗性，包括对发作行为、AP-1转录活性和海马趾神经元的细胞凋亡的影响，这表明JNK3信号传递途径是谷氨酸神经毒性的发病机理锥的关键组分(Yang等， Nature，389：865-870(1997))。

基于这些发现，JNK信号传递(特别是JNK3的)已经涉入细胞凋亡驱动的神经退化病(例如阿尔茨海默氏病、帕金森氏症、ALS(肌萎缩性脊髓侧索硬化)、癫痫症和发作、杭廷顿氏舞蹈病、脑损伤、局部缺血和出血性休克)领域。

已经证实AKT(也称作PKB或Rac-PKβ)(一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶)在几种类型肿瘤中过量表达，并且是正常细胞功能的赋形剂[(Khwa ja，A.，Nature 1999，401，33-34)；(Yuan，Z.Q.，等，Oncogene 2000，19，2324-2330)；(Namikawa，K.，等，J Neurosci.2000，20，2875-2886)]。AKT包含N-端普列克底物蛋白同源(PH)域、激酶域和C-端″尾巴″区。迄今为止已经报道了人AKT激酶的三种异构体(AKT-1、-2和-3)[(Cheng，J.Q.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA1992，89，9267-9271)；(Brodbeck，D.等，J.Biol.Chem.1999，274，9133-9136)]。PH域能结合3-磷酸肌醇，后者通过生长因子(例如血小板衍生出的生长因子(PDGF)、神经生长因子(NGF)和胰岛素类生长因子(IGF-1))对磷脂酰基肌醇3-激酶(PI3K)的刺激来合成[(Kulik等，Mol.Cell.Biol.，1997，17，1595-1606)；(Hemmings，B.A.，Science，1997，275，628-630)]。结合到PH域的脂类能促进AKT易位到质膜上，并且有利于其它含有PH域的蛋白激酶(对于AKT异构体1、2和3，分别是在Thr308、Thr309和Thr305处的PDK1)进行磷酸化。为了产生完全激活的AKT酶，需要第二种已知的激酶来磷酸化分别位于AKT-1、-2和-3的C-端尾巴中的Ser473、Ser474或Ser472。

一旦定位到膜上，AKT就会介导细胞中的几项功能，包括胰岛素的新陈代谢效应(Calera，M.R.等，J.Biol.Chem.1998，273，7201-7204)、诱导分化和/或增殖、蛋白合成和应激反应(Alessi，D.R.等，Curr.Opin.Genet.Dev.1998，8，55-62)。

改变的AKT的调节表现出现在损伤和疾病(癌症的最重要的体现)中。AKT的第一作用与人卵巢癌相关，在15％的病例中发现AKT的表达有增加(Cheng，J.Q.等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1992，89，9267-9271)。还已经发现它在12％胰腺癌中过量表达(Cheng，J.Q.等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1996，93，3636-3641)。已经证实，AKT-2在12％卵巢癌中过量表达，且AKT的扩增在50％未分化的肿瘤中特别频繁，这表明AKT还与肿瘤的侵蚀性有关(Bellacosa，等，Int.J.Cancer 1995，64，280-285)。

糖原合酶激酶-3(GSK-3)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，它包含α和β异构体，每一种都由不同的基因编码[Coghlan等，Chemistry和Biology，7，793-803(2000)；Kim和Kimmel，Curr.OpinionGenetics Dev.，10，508-514(2000)]。GSK-3已经涉入多种疾病，包括糖尿病、阿尔茨海默氏病、CNS病(例如躁狂抑郁病和神经退化病)和心肌细胞肥大[参见，例如，WO 99/65897；WO 00/38675；Kaytor和Orr，Curr.Opin.Neurobiol.，12，275-8(2000)；Haq等，J.CellBiol.，151，117-30(2000)；Eldar-Finkelman，Trends Mol.Med.，8，126-32(2002)]。这些疾病都与某些细胞信号传递途径的异常工作(GSK-3在其中起作用)相关。

已经发现GSK-3能磷酸化和调控许多调节蛋白的活性。这包括糖原合酶(它是糖原合成所需要的限速酶)、与微管相关的蛋白Tau、基因转录因子β联蛋白、翻译起始因子e1F-2B、以及ATP柠檬酸裂解酶、axin、热休克因子-1、c-Jun、c-myc、c-myb、CREB和CEPBα。这些不同的目标将GSK-3涉入细胞代谢、增殖、分化和发育的许多方面。

在GSK-3介导的一条与治疗II型糖尿病有关的途径中，胰岛素诱导的信号传递导致细胞的葡萄糖摄入和糖原合成。GSK-3是该途径中的胰岛素诱导的信号的负调节剂。通常，胰岛素的存在会抑制GSK-3介导的磷酸化和糖原合酶的去活化。GSK-3的抑制作用增加了糖原合成和葡萄糖摄入[Klein等，PNAS，93，8455-9(1996)；Cross等，Biochem.J.，303，21-26(1994)；Cohen，Biochem.Soc.Trans.，21，555-567(1993)；和Massillon等，Biochem J.299，123-128(1994)；Cohen和Frame，Nat.Rev.Mol.Cell.Biol.，2，769-76(2001)]。但是，胰岛素反应在糖尿病患者中受到削弱，不能增加糖原合成和葡萄糖摄入，尽管存在相对较高的胰岛素血液水平。这导致异常高的葡萄糖血液水平，产生的急性和慢性作用会最终导致心血管病、肾衰竭和失明。在这样的患者中，不能发生正常的胰岛素诱导的GSK-3抑制作用。还已经报道，GSK-3在II型糖尿病患者中过量表达[WO00/38675]。因此，GSK-3的治疗性抑制剂可以用于治疗患有受到削弱的胰岛素反应的糖尿病患者。

细胞凋亡已经涉入局部缺血性脑损伤的病理学中(Li等，1997；Choi，等，1996；Charriaut-Marlangue等，1998；Grahm和Chen，2001；Murphy等，1999；Nicotera等，1999)。近期的文献表明，GSK-3β的激活会参与细胞凋亡机制(Kaytor和Orr，2002；Culbert等，2001)。在大脑中动脉阻塞(MCAO)诱导的局部缺血性休克的大鼠模型中的研究表明，局部缺血会增加GSK-3β的表达(Wang等，Brain Res，859，381-5，2000；Sasaki等，Neurol Res，23，588-92，2001)。成纤维细胞生长因子(FGF)能减轻在大鼠中造成永久大脑中动脉阻塞(MCO)后的局部缺血性脑损伤(Fisher等1995；Song等2002)。实际上，在大鼠的局部缺血模型中表现出的FGF的神经保护作用可以由PI-3激酶/AKT-依赖性的GSK-3β失活介导(Hashimoto等，2002)。这样，在大脑局部缺血事件后抑制GSK-3β也会改善局部缺血性脑损伤。

GSK-3还参与心肌梗死。参见，Jonassen等，Circ Res，89：1191，2001(再灌注施用胰岛素减少心肌梗死是通过Akt依赖性的信号传递途径介导的)；Matsui等，Circulation，104：330，2001(Akt激活能在体内保持心脏功能和防止瞬时心脏局部缺血后的心肌细胞损伤)；Miao等，J Mol Cell Cardiol，32：2397，2000(冠状动脉内的腺病毒介导的Akt基因在心脏内输送体内地减少了局部缺血-再灌注损伤后的总梗塞面积)；和Fujio等，Circulation等，101：660，2000(Akt信号传递体外地抑制心肌细胞凋亡，并防止小鼠心脏的局部缺血-再灌注损伤)。

GSK-3活性在头创伤中起作用。参见，Noshita等，Neurobiol Dis，9：294，2002(Akt/PI3-激酶途径的上调节对于创伤性脑损伤后的细胞存活是关键的)和Dietrich等，J Neurotrauma，13：309，1996(创伤后施用bFGF会显著减少创伤性的脑损伤大鼠模型中受损的皮层神经元和总挫伤体积)。

还已知GSK-3在精神病中起作用。参见，Eldar-Finkelman，TrendsMol Med，8：126，2002；Li等，Bipolar Disord，4：137，2002(LiCl和丙戊酸(抗精神病的情绪稳定药)会降低GSK3活性并增加β-连环蛋白)和Lijam等，Cell，90：895，1997(散乱的KO大鼠表现出异常的群体行为和有缺陷的感觉运动动作。散乱的细胞质蛋白参与WNT途径，抑制GSK3β活性)。

已经证实，锂和丙戊酸对GSK3的抑制会诱导轴突的重构和改变突触的连通性。参见，Kaytor和Orr，Curr Opin Neurobiol，12：275，2002(GSK3的下调节改变了与微管相关的蛋白：tau、MAP1和2)和Hall等，Mol Cell Neurosci，20：257，2002(锂和丙戊酸诱导形成沿着轴突的生长锥状结构)。

GSK-3活性还与阿尔茨海默氏病相关。该疾病的特征在于存在熟知的β-淀粉状肽和形成胞内神经纤丝网。该神经纤丝网含有过磷酸化的Tau蛋白，其中Tau是在异常位点被磷酸化。已经证实GSK-3能磷酸化细胞和动物模型中的这些异常位点。而且，已经证实GSK-3的抑制能防止细胞中Tau的过磷酸化[Lovestone等，Curr.Biol.，4，1077-86(1994)；和Brownlees等，Neuroreport 8，3251-55(1997)；Kaytor和Orr，Curr.Opin.Neurobiol.，12，275-8(2000)]。在过量表达GSK3的转基因小鼠中，观察到明显增强的Tau过磷酸化和神经元异常形态学[Lucas等，EMBO J，20：27-39(2001)]。有活性的GSK3聚集在预成网的神经元的细胞质中，这会导致在AD患者的脑中形成神经纤丝网[Pei等，J Neuropathol Exp Neurol，58，1010-19(1999)]。因此，抑制GSK-3会减缓或阻止神经纤丝网的形成，从而治疗或缓解阿尔茨海默氏病的严重程度。

已经体外地显示了GSK-3在阿尔茨海默氏病中的作用的证据。参见，Aplin等(1996)，J Neurochem 67：699；Sun等(2002)，NeurosciLett 321：61(GSK 3b能磷酸化淀粉状前体蛋白(APP)的细胞质域，并且对GSK3b的抑制会减少Ab40和Ab42在APP-转染的细胞中的分泌)；Takashima等(1998)，PNAS 95：9637；Kirschenbaum等(2001)，J Biol Chem 276：7366(GSK3b能与presenilin-1形成复合物并将其磷酸化，后者与从APP合成Ab的γ-分泌酶(secretase)活性相关)；Takashima等(1998)，Neurosci Res 31：317(Ab(25-35)对GSK3b的激活会增强对海马趾神经元中的tau的磷酸化。该发现提供了Ab和由过磷酸化的tau组成的神经纤丝网(AD的另外一种病理学标志)之间的联系)；Takashima等(1993)，PNAS 90：7789(阻断GSK 3b的表达或活性会阻止Ab-诱导的皮层和海马趾的原代培养物的神经退化)；Suhara等(2003)，Neurobiol Aging.24：437(通过干扰Akt/GSK-3b信号传递依赖性机制的激活，胞内Ab42对内皮细胞是有毒性的)；DeFerrari等(2003)Mol Psychiatry 8：195(锂会保护N2A细胞和原代海马趾神经元免受Ab原纤维-诱导的细胞毒性和b-联蛋白的降低的核易位/不稳定)；和Pigino等，J Neurosci，23：4499，2003(阿尔茨海默氏病中的presenilin 1突变会去调节和提高GSK-3的活性，这反过来削弱了神经元中的轴突运输。在受到影响的神经元中引起的轴突运输的减少最终会导致神经退化)。

已经体内地显示了GSK-3在阿尔茨海默氏病中的作用的证据。参见，Yamaguchi等(1996)，Acta Neuropathol 92：232；Pei等(1999)，J Neuropath Exp Neurol 58：1010(在AD脑的敏感区的GSK 3b免疫反应性有提高)；Hernandez等(2002)，J Neurochem 83：1529(有条件的GSK 3b过量表达的小鼠表现出认知缺陷，与AD的转基因APP小鼠模型的结果类似)；De Ferrari等(2003)Mol Psychiatry 8：195(长期锂处理能挽救Ab原纤维的海马趾内注射造成的神经退化和行为障碍(Morris水迷宫实验)；McLaurin等，Nature Med，8：1263，2002(Ab对AD转基因模型的免疫能减轻AD-样神经病理学和空间记忆损伤)；和Phiel等(2003)Nature 423：435(GSK3能通过直接抑制ADtg小鼠的γ分泌酶调节淀粉状-β肽的生成)。

Presenilin-1和驱动蛋白-1也是GSK-3的底物，并且与GSK-3在阿尔茨海默氏病起作用的另一种机制有关，如近来由Pigino，G.，等，Journal of Neuroscience(23：4499，2003)所记载的。发现GSK 3β能磷酸化kinsesin-I的轻链，后者会导致从膜结合的细胞器释放出驱动蛋白-1，导致快速的顺行轴突运输的减少(Morfini等，2002)。发明人认为，PS1的突变会去调节并增加GSK-3活性，这反过来削弱了神经元中的轴突运输。在受到影响的神经元中引起的轴突运输的减少最终会导致神经退化。

GSK-3还与肌萎缩性脊髓侧索硬化(ALS)相关。参见，Williamson和Cleveland，1999(在mSOD1小鼠的ALS非常早的阶段，轴突运输被延迟)；Morfini等，2002(GSK3能磷酸化驱动蛋白的轻链和抑制顺行的轴突运输)；Warita等，细胞凋亡，6：345，2001(在该ALS的SOD1 tg动物模型的神经元明显丧失之前的早期的和症状发生前的阶段，大部分脊髓运动神经元失去对PI3-K和Akt的免疫反应性)；和Sanchez等，2001(对PI-3K的抑制会诱导GSK3激活介导的神经突收缩)。

GSK-3活性还与脊髓和外周神经损伤相关联。已经证实，锂和丙戊酸对GSK3的抑制会诱导轴突的重构和改变突触的连通性。参见，Kaytor和Orr，Curr Opin Neurobiol，12：275，2002(GSK3的下调节会改变与微管相关的蛋白：tau，MAP1和2)和Hall等，Mol CellNeurosci，20：257，2002(锂和丙戊酸诱导形成沿着轴突的生长锥状结构)。参见，Grothe等，Brain Res，885：172，2000(FGF2能刺激许旺细胞(Schwann cell)的增殖和抑制轴突生长过程中的髓鞘形成)；Grothe和Nikkhah，2001(神经粉碎后5小时之内，近端的和末端的神经残根中的FGF-2受到上调节)；和Sanchez等，2001(PI-3K的抑制会诱导GSK3激活介导的神经突收缩)。

GSK-3的另-种底物是β-连环蛋白，它在GSK-3磷酸化后被降解。已经报道精神分裂症病人的降低的β-连环蛋白水平，并且已经与其它疾病(与神经细胞死亡的增多有关)相关联[Zhong等，Nature，395，698-702(1998)；Takashima等，PNAS，90，7789-93(1993)；Pei等，J.Neuropathol.Exp，56，70-78(1997)；和Smith等，Bio-org.Med.Chem.11，635-639(2001)]。而且，β-连环蛋白和Tcf-4通过抑制血管平滑肌细胞的凋亡和促进增殖在血管重构中起双重作用(Wang等，Circ Res，90：340，2002)。因此，GSK-3与血管生成病相关。参见，Liu等，FASEB J，16：950，2002(GSK3的激活会减少肝细胞生长因子，这导致改变内皮细胞障碍功能和减少血管完整性)和Kim等，k J Biol Chem，277：41888，2002(使用Matrigel栓实验，GSK3β激活会体内地抑制血管生成：GSK3β信号传递的抑制会增强毛细管的形成)。

已经证实了GSK-3和杭廷顿氏舞蹈病之间的关联。参见，Carmichael等，J Biol Chem.，277：33791，2002(GSK3β的抑制会通过增加b-联蛋白和其相关转录途径来保护细胞避免聚谷氨酰胺诱导的神经细胞和非神经细胞的死亡)。GSK3的过量表达减少了热休克转录因子-1和热休克蛋白HSP70的激活(Bijur等，J Biol Chem，275：7583，2000)，证实它们能减少多-(Q)聚集体和体外HD模型中的细胞死亡(Wyttenbach等，Hum Mol Genet，11：1137，2002)。

GSK-3会影响FGF-2的水平，它们的受体在脑聚集体培养物使大鼠脑重新形成髓鞘的过程中也有增加。参见，Copelman等，2000，Messersmith，等，2000；和Hinks和Franklin，2000。还发现FGF-2会通过少突神经胶质细胞影响FGF参与髓鞘重新形成来诱导过程的结果(Oh和Yong，1996；Gogate等，1994)，已经证实FGF-2基因治疗能改善实验性变应性脑脊髓炎(EAE)小鼠的恢复(Ruffini等，2001)。

还已经将GSK-3与毛发生长相关联，因为已经证实了Wnt/β-连环蛋白信号传递在毛囊的形态发生和分化中起主要作用(Kishimotot等Genes Dev，14：1181，2000；Millar，J Invest Dermatol，118：216，2002)。发现皮肤中的Wnt信号传递抑制剂构成性地过量表达的小鼠不能发育出毛囊。需要有Wnt信号才能启动毛囊的发育，GSK3能通过抑制β-连环蛋白构成性地调节Wnt途径(Andl等，Dev Cell 2：643，2002)。通过激活上皮毛囊前体中的β-连环蛋白和TCF-调节的基因转录，瞬时的Wnt信号提供了开始新毛发生长周期的关键的启动刺激(Van Mater等，Genes Dev，17：1219，2003)。

因为GSK-3活性与精子运动相关，GSK-3抑制可以用作男性避孕方式。证实了精子GSK3活性的下降与牛和猴附睾的精子运动发育相关(Vijayaraghavan等，Biol Reprod，54：709，1996；Smith等，JAndrol，20：47，1999)。而且，公牛的运动精子的GSK3酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸磷酸化比不运动精子的高(Vijayaraghavan等，BiolReprod，62：1647，2000)。还用人精子证实了该作用(Luconi等，Human Reprod，16：1931，2001)。

非受体酪氨酸激酶的Tec家族通过抗原受体(例如TCR、BCR和自由受体)在信号传递中起中心作用(参见，Miller A，等CurrentOpinion in Immunology 14；331-340(2002)。Tec家族激酶对于T细胞激活是不可缺少的。Tec家族的三个成员(Itk、Rlk和Tec)是激活的T细胞抗原受体配体(engagement)的下游，并向下游效应物(包括PLC-g)转递信号。在小鼠中同时缺失Itk和Rlk会深刻地抑制TCR反应，包括增殖、细胞因子生成和对胞内寄生物(刚地弓形虫，Toxoplasma gondii)的免疫反应(Schaeffer等，Science 284；638-641(1999))。TCR配合后的胞内信号传递在Itk/Rlk缺陷型T细胞中起动；三磷酸肌醇的生成、钙的运动和MAP激酶的激活都被降低。

Tec家族激酶对于B细胞的发育和激活也是不可缺少的。有Btk突变的患者具有深刻的B细胞发育阻碍，导致几乎完全没有B淋巴细胞和血浆细胞，严重地降低了Ig水平，深刻地抑制了对记忆抗原的体液反应(参见，Vihinen等Frontiers in Bioscience 5：d917-928)。缺失Btk的小鼠的外周B细胞数量也有减少，并且IgM和IgG3的水平也显著降低。小鼠中的Btk缺失对抗-IgM诱导的B细胞增殖具有深远影响，并且会抑制针对不依赖于胸腺的II型抗原的免疫反应(Ellmeier等，J Exp Med 192：1611-1623(2000))。Btk还通过高亲合力的IgE受体(FceRI)在肥大细胞的激活中起关键作用。Btk缺陷的鼠肥大细胞具有减轻的脱粒和FceRI交联后增强的前炎症细胞因子的生成(Kawakami等Journal of leukocyte biology 65：286-290)。

核糖体蛋白激酶p70S6K-1和-2是蛋白激酶AGC亚家族(它由其中的PKB和MSK组成)的成员。p70S6激酶能催化磷酸化和随后的核糖体蛋白S6的激活，后者已经参与mRNA(编码蛋白合成装置的组分)的翻译上调节。

这些mRNA在它们的5′转录起始位点含有以5′TOP结束的寡嘧啶管，已经证实这对于它们的翻译水平的调节是不可缺少的(Volarevic，S.等，Prog.Nucleic Acid Res.Mol.Biol.2001，65，101-186)。多种激素和生长因子会主要地通过PI3K途径刺激p70S6K依赖性的S6磷酸化(Coffer，P.J.等，Biochem.Biophys.Res.Commun，1994 198，780-786)，所述的PI3K途径可能是由mTOR调节，因为雷帕霉素能抑制p70S6K活性和阻止蛋白合成，特别地作为这些编码核糖体蛋白的mRNA的翻译下调节的结果(Kuo，C.J.等，Nature 1992，358，70-73)。

PDK1能体外地催化p70催化域(它对于p70活性是不可缺少的)的激活环中的Thr252的磷酸化(Alessi，D.R.，Curr.Biol.，1998，8，69-81)。雷帕霉素的使用和对来自果蝇的dp70S6K和来自小鼠的p70S6K1的基因缺失研究已经发现了p70在细胞生长和增殖信号传递中的中心作用。

3-磷酸肌醇依赖性的蛋白激酶-1(PDK1)在调节许多属于蛋白激酶AGC亚家族的激酶的活性中起关键作用(Alessi，D.等，Biochem.Soc.Trans 2001，29，1)。这包括蛋白激酶B(PKB，也称作AKT)的异构体、p70核糖体S6激酶(S6K)(Avruch，J.等，Prog.Mol.Subcell.Biol.2001，26，115)和p90核糖体S6激酶(Frdin，M.等，EMBO J.2000，19，2924-2934)。PDK1介导的信号传递由胰岛素和生长因子激活，并且作为细胞结合到胞外基质上的结果(整联蛋白信号传递)。一旦被激活，这些酶会通过磷酸化在控制过程(例如细胞存活、生长、增殖和葡萄糖调节)中起重要作用的关键调节蛋白来介导许多不同的细胞事件[(Lawlor，M.A.等，J.Cell Sci.2001，114，2903-2910)，(Lawlor，M.A.等，EMBO J.2002，21，3728-3738)]。PDK1是具有556个氨基酸的蛋白，具有N-端催化域和C-端普列克底物蛋白同源(PH)域，后者通过在这些激酶的激活环磷酸化它们来激活其底物(Belham，C.等，Curr.Biol.1999，9，R93-R96)。许多人癌症(包括前列腺和NSCL)具有升高的PDK1信号传递途径功能，其原因是许多不同的遗传事件，例如PTEN突变或某些关键调节蛋白的过量表达[(Graff，J.R.，Expert Opin.Ther.Targets 2002，6，103-113)，(Brognard，J.，等，Cancer Res.2001，61，3986-3997)]。通过用指向PDK1的反义寡核苷酸转染PTEN阴性人肿瘤细胞系(U87MG)，证实了PDK1作为治疗癌症的潜在机制。得到的PDK1蛋白水平的降低会减少细胞的增殖和存活(Flynn，P.，等，Curr.Biol.2000，10，1439-1442)。随后，PDK1的ATP结合位点抑制剂的设计在众多治疗中提供了有吸引力的癌症化疗目标。

已经将不同范围的肿瘤细胞基因型归因于下述六种基本的细胞生理学改变的表现：生长信号的自足、细胞凋亡的逃避、对生长抑制信号的不敏感性、无限制的复制潜能、持续的血管生成和导致转移的组织侵入(Hanahan，D.等，Cell 2000，100，57-70)。PDK1是PI3K信号传递途径的关键赋形剂，它调节许多细胞功能，包括生长、增殖和存活。结果，对这些途径的抑制会影响定义的癌症进程的六种需求中的四种或更多。这样，认为PDK1抑制剂会影响非常广范围的人肿瘤的生长。

更具体地，已经直接将增强的PI3K途径活性水平与许多人肿瘤的发育、侵入性的难控制状态(由化疗产生的耐受性)的发展和不良预后相关联。已经将这种升高的活性归因于一系列关键事件，包括降低负途径调节剂(例如磷酸化酶PTEN)的活性、激活正途径调节剂(例如Ras)的突变和过量表达途径自身的组分(例如PKB)，实例包括脑(胶质瘤)、乳腺、结肠、头和颈、肾、肺、肝、黑色素瘤、卵巢、胰腺、前列腺、肉瘤、甲状腺[(Teng，D.H.等，Cancer Res.，1997 57，5221-5225)，(Brognard，J.等，Cancer Res.，2001，61，3986-3997)，(Cheng，J.Q.等，Proc.Natl.Acad.Sci.1996，93，3636-3641)，(Int.J.Cancer 1995，64，280)，(Graff，J.R.，Expert Opin.Ther.Targets 2002，6，103-113)，(Am.J.Pathol.2001，159，431)]。

另外，已经在一系列细胞系中证实，通过基因敲除(knockout)、基因沉默(knockdown)降低的途径功能、显性负研究和该途径的小分子抑制剂能体外地反转许多肿瘤的表型(一些研究还已经体内地证实了类似效果)，例如阻断增殖、减少存活率和使肿瘤细胞对已知的化疗方法敏感，所述的细胞系代表下述的肿瘤：胰腺[(Cheng，J.Q.等，Proc.Natl.Acad.Sci.1996，93，3636-3641)，(Neoplasia 2001，3，278)]，肺[(Brognard，J.等，Cancer Res.2001，61，3986-3997)，(Neoplasia 2001，3，278)]，卵巢[(Hayakawa，J.等，Cancer Res.2000，60，5988-5994)，(Neoplasia 2001，3，278)]，乳腺(Mol.Cancer Ther.2002，1，707)，结肠[(Neoplasia 2001，3，278)，(Arico，S.等，J.Biol.Chem.2002，277，27613-27621)]，子宫颈(Neoplasia 2001，3，278)，前列腺[(Endocrinology 2001，142，4795)，(Thakkar，H.等J.Biol.Chem.2001，276，38361-38369)，(Chen，X.等，Oncogene 2001，20，6073-6083)]和脑(成胶质细胞瘤)[(Flynn，P.等，Curr.Biol.2000，10，1439-1442)]。

丝氨酸-苏氨酸激酶的Aurora家族对于细胞增殖是不可缺少的[Bischoff，J.R.和Plowman，G.D.，(The Aurora/Ipl1p kinasefamily：regulators of chromosome segregation andcytokinesis)Trends in Cell biology 9，454-459(1999)；Giet，R.和Prigent，C.，(Aurora/Ipl1p-related kinases，a new oncogenicfamily of mitotic serine-threonine kinases)Journal of CellScience 112，3591-3601(1999)；Nigg，E.A.(Mitotic kinases asregulators of cell division and its checkpoints)Nat.Rev.Mol.Cell Biol.2，21-32(2001)；Adams，R.R，Carmena，M.，和Earnshaw，W.C.(Chromosomal passengers and the(aurora)ABCs ofmitosis)Trends in Cell Biology 11，49-54(2001)]。因此，Aurora激酶家族的抑制剂具有阻断所有肿瘤类型的生长的潜力。

三种已知的哺乳动物家族成员，Aurora-A(″1″)、B(″2″)和C(″3″)，是负责染色体分离、有丝分裂纺锤体功能和胞质分裂的高度同源的蛋白。Aurora在静止细胞中的表达较低或不可检测，在细胞周期的G2和有丝分裂阶段出现表达和活性高峰。在哺乳动物细胞中，认为Aurora的底物包括组蛋白H3(参与染色体缩合的蛋白)和CENP-A(肌球蛋白II的调节轻链)、蛋白磷酸酶1、TPX2，细胞分裂需要它们。

自1997年发现以来，已经将哺乳动物Aurora激酶家族与肿瘤发生密切地联系起来。这方面最有说服力的证据是，Aurora-A的过量表达会转变啮齿动物的成纤维细胞(Bischoff，J.R.，等.A homologueof Drosophila aurora kinase is oncogenic and amplified in humancolorectal cancers.EMBO J.17，3052-3065(1998))。有升高的该酶水平的细胞含有多个中心体和多极纺锤体，并且很快地变成非整倍体。Aurora激酶的致癌活性好像与这种遗传不稳定性的产生有关。实际上，已经在乳腺瘤和胃瘤中观察到aurora-A基因座的扩增和染色体不稳定性之间的关联(Miyoshi，Y.，Iwao，K.，Egawa，C.，和Noguchi，S.Association of centrosomal kinase STK15/BTAK mRNAexpression with chromosomal instability in human breast cancers.Int.J.Cancer 92，370-373(2001).(Sakakura，C.等.Tumor-amplified kinase BTAK is amplified and overexpressed ingastric cancers with possible involvement in aneuploidformation.British Journal of Cancer 84，824-831(2001))。已经报道Aurora激酶在广范围的人肿瘤中过量表达。已经在超过50％的结直肠瘤(Bischoff，J.R.，等.A homologue of Drosophila aurorakinase is oncogenic and amplified in human colorectal cancers.EMBO J.17，3052-3065(1998))(Takahashi，T.，等.Centrosomalkinases，HsAIRk1 and HsAIRK3，are overexpressed in primarycolorectal cancers.Jpn.J.Cancer Res.91，1007-1014(2000))、卵巢瘤(Gritsko，T.M.等.Activation and overexpression ofcentrosome kinase BTAK/Aurora-A in human ovarian cancer.Clinical Cancer Research 9，1420-1426(2003))、胃瘤(Sakakura，C.等.Tumor-amplified kinase BTAK is amplified andoverexpressed in gastric cancers with possible involvement inaneuploid formation.British Journal of Cancer 84，824-831(2001))和94％乳房侵入导管状腺癌(Tanaka，T.，等.Centrosomalkinase AIK1 is overexpressed in invasive ductal carcinoma ofthe breast.Cancer Research.59，2041-2044(1999))中检测到Aurora-A的升高度表达。还已经报道了肾瘤、子宫颈瘤、神经母细胞瘤、黑素瘤、淋巴瘤、胰腺瘤和前列腺瘤细胞系中的高水平的Aurora-A(Bischoff，J.R.，等.A homologue of Drosophila aurorakinase is oncogenic and amplified in human colorectal cancers.EMBO J.17，3052-3065(1998)(Kimura，M.，Matsuda，Y.，Yoshioka，T.，和Okano，Y.Cell cycle-dependent expression and centrosomallocalization of a third human Aurora/Ipl1-related proteinkinase，AIK3.Journal of Biological Chemistry 274，7334-7340(1999))(Zhou等.Tumour amplifiec kinase STK15/BTAKinduces centrosome amplification，aneuploidy andtransformation Nature Genetics 20：189-193(1998))(Li等.Overexpression of oncogenic STK15/BTAK/Aurora-A kinase inhuman pancreatic cancer Clin Cancer Res.9(3)：991-7(2003))。在人膀胱癌中发现Aurora-A的扩增/过量表达，而且Aurora-A的扩增与非整倍体的和侵入性的临床行为相关(Sen S.等Amplification/overexpression of a mitotic kinase gene in human bladder cancerJ Natl Cancer Inst.94(17)：1320-9(2002))。而且，aurora-A基因座(20q 13)的扩增与节(node)阴性的乳腺癌患者的难以预测相关(Isola，J.J.，等.Genetic aberrations detected by comparativegenomic hybridization predict outcome in node-negative breastcancer.American Journal of Pathology 147，905-911(1995))。Aurora-B在多种人肿瘤细胞系中高度表达，所述的细胞系包括白血病细胞(Katayama等.Human AIM-1：cDNA cloning and reducedexpression during endomitosis in megakaryocyte-lineage cells.Gene 244：1-7)。在初始的结直肠癌中，该酶的水平随着杜克阶段(Duke’s stage)而增加(Katayama，H.等Mitotic kinase expressionand colorectal cancer progression.Journal of the NationalCancer Institute 91，1160-1162(1999))。Aurora-C一般只在生殖细胞中发现，它也在初始的结直肠癌和多种肿瘤细胞系(包括子宫颈腺癌和乳腺癌细胞)中以高百分比过量表达(Kimura，M.，Matsuda，Y.，Yoshioka，T.，和Okano，Y.Cell cycle-dependent expression andcentrosomal localization of a third human Aurora/Ipl1-relatedprotein kinase，AIK3.Journal of Biological Chemistry 274，7334-7340(1999).(Takahashi，T.，等Centrosomal proteinkinases，HsAIRk1和HsAIRK3，are overexpressed in primarycolorectal cancers.Jpn.J.Cancer Res.91，1007-1014(2000))。

基于已知的Aurora激酶的功能，抑制它们的活性会中断导致细胞周期停止的有丝分裂。Aurora抑制剂因此能在体内减速肿瘤的生长和诱导退化。

在多种肿瘤细胞系中观察到升高水平的所有的Aurora家族成员。Aurora激酶在许多人肿瘤中过量表达，据报道这与乳腺瘤中的染色体不稳定性相关(Miyoshi等2001 92，370-373)。

Aurora-2在多种人肿瘤细胞系中高度表达，且其水平随着初始结直肠癌的杜克阶段而增加[Katayama，H.et al.(Mitotic kinaseexpression and colorectal cancer progression)Journal of theNational Cancer Institute 91，1160-1162(1999)]。Aurora-2在控制有丝分裂过程中的染色体的精确分离方面起作用。细胞周期的错误调节会导致细胞增殖和其它异常。在人结肠癌组织中，已经发现Aurora-2蛋白过量表达[Bischoff等，EMBO J.，17，3052-3065(1998)；Schumacher等.，J.Cell Biol.，143，1635-1646(1998)；Kimura等.，J.Biol.Chem.，272，13766-13771(1997)]。Aurora-2在大多数转化细胞中过量表达。Bischoff等人发现，在96％的源自肺瘤、结肠肿瘤、肾瘤、黑素瘤和乳腺瘤的细胞系中有高水平的Aurora-2(Bischoff等EMBO J.1998 17，3052-3065)。两个广泛的研究表明，在54％和68％(Bishoff等EMBO J.199817，3052-3065)(Takahashi等2000 Jpn J Cancer Res.91，1007-1014)的结直肠肿瘤和94％的乳房侵入导管状腺癌(Tanaka等1999 59，2041-2044)中有升高的Aurora-2。

Aurora-1在源自结肠肿瘤、乳腺瘤、肺瘤、黑素瘤、肾瘤、卵巢瘤、胰腺瘤、CNS、胃管瘤和白血病瘤的细胞系中的表达有所升高(Tatsuka等1998 58，4811-4816)。

已经在几种肿瘤细胞系中检测到高水平的Aurora-3，尽管它只限于正常组织的睾丸中(Kimura等1999 274，7334-7340)。还已经有记载，在高百分比(c.50％)的结直肠癌中过量表达Aurora-3(Takahashi等2000 Jpn J Cancer Res.91，1007-1014)。相反，Aurora在大多数正常组织中以低水平表达，例外是含有高比例的分裂细胞的组织，例如胸腺和睾丸(Bischoff等EMBO J.1998 17，3052-3065)。

要想进一步了解Aurora激酶在增殖性疾病中所起的作用，参见：Bischoff，J.R.& Plowman，G.D.(The Aurora/Ipl1p kinase family：regulators of chromosome segregation and cytokinesis)Trends inCell Biology 9，454-459(1999)；Giet，R.和Prigent，C.(Aurora/Ipl1p-related kinases，a new oncogenic family ofmitotic serine-threonine kinases)Journal of Cell Science 112，3591-3601(1999)；Nigg，E.A.(Mitotic kinases as regulatorsof cell division and its checkpoints)Nat.Rev.Mol.Cell Biol.2，21-32(2001)；Adams，R.R，Carmena，M.，和Earnshaw，W.C.(Chromosomal passengers and the(aurora)ABCs of mitosis)Trendsin Cell Biology 11，49-54(2001)；and Dutertre，S.，Descamps，S.，& Prigent，P.(On the role of aurora-A in centrosomefunction)Oncogene 21，6175-6183(2002)。

III型受体酪氨酸激酶(Flt3)在造血细胞和非造血细胞的维持、生长和发育中起重要作用[Scheijen，B，Griffin JD，Oncogene，2002，21，3314-3333和Reilly，JT，British Journal of Haematology，2002，116，744-757]。FLT-3调节干细胞/早期祖细胞群的维持和成熟的淋巴细胞和骨髓细胞的发育[Lyman，S，J acobsen，S，Blood，1998，91，1101-1134]。FLT-3含有内部激酶域，它能被配体介导的受体二聚化所激活。激活后，激酶域诱导受体的自动磷酸化和各种胞浆蛋白的磷酸化，这有助于导致生长、分化和复活的活化信号的传递。一些FLT-3受体信号传递的下游调节物包括PLCγ、PI3-激酶、Grb-2、SHIP和Src相关激酶[Scheijen，B，Griffin JD，Oncogene，2002，21，3314-3333]。FLT-3激酶在各种造血的和非造血的恶性肿瘤中起作用。已经在急性骨髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、肥大细胞病和肠胃基质瘤(GIST)中发现导致FLT-3的配体独立性的活化的突变。这些突变包括在激酶域或内部衔接重复中的单个氨基酸变化、受体近膜区域的点突变或框内缺失。除了激活突变外，过量表达的野生型FLT-3的配体依赖性(自分泌或旁分泌)刺激会助长恶性表型[Scheijen，B，Griffin JD，Oncogene，2002，21，3314-3333]。也参见：Sawyer，C.I.(Finding the next Gleevec：FLT3 targetedkinase inhibitor therapy for acute myeloid leukaemia)CancerCell.1，413-415(2002)。

细胞周期蛋白依赖性的激酶(CDK)是b-片(sheet)丰富的氨基端叶片(lobe)和更多的羧基端叶片(一般是α-螺旋)组成的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。CDK显示出所有蛋白激酶共有的11个亚域，分子质量范围为33至44kD。为了具有完全活性，该激酶家族(包括CDK1、CKD2、CDK4和CDK6)需要在对应CDK2 Thr160的残基处磷酸化[Meijer，L.，Drug Resistance Updates 2000，3，83-88]。

每一个CDK复合物都由调节性的细胞周期蛋白亚基(例如，细胞周期蛋白A、B1、B2、D1、D2、D3和E)和催化性的激酶亚基(例如，CDK1、CDK2、CDK4、CDK5和CDK6)形成。每一个不同的激酶/细胞周期蛋白对的功能是调节不同的和特异性的细胞周期阶段，已知为G1、S、G2和M阶段[Nigg，E.，Nature Reviews 2001，2，21-32；Flatt，P.，Pietenpol，J.，Drug Metabolism Reviews 2000，32，283-305]。

CDK已经涉入细胞增殖病(更具体地是肿瘤)中。细胞增殖是细胞分裂周期失调的直接或间接结果，CDK在调节该周期的多个阶段中起关键作用。例如，细胞周期蛋白D1的过量表达与多种人肿瘤相关，包括乳腺癌、结肠癌、肝细胞癌和胶质瘤[Flatt，P.，Pietenpol，J.，Drug Metabolism Reviews 2000，32，283-305]。CDK2/细胞周期蛋白E复合物在细胞周期的从G1早期至S期的过程中起关键作用，已经将细胞周期蛋白E的过量表达与多种实体瘤相关联。因此，细胞周期蛋白D1、E或与其相关的CDK的抑制剂是肿瘤治疗的有用目标[Kaubisch，A.，Schwartz，G.，The Cancer Journal 2000，6，192-212]。

CDK(更具体地是CDK2)还在细胞凋亡和T细胞发育中起作用。已经将CDK2鉴别为胸腺细胞凋亡的关键调节剂[Williams，O.，等，European Journal of Immunology 2000，709-713]。对CDK2激酶活性的刺激与特异性的刺激引起的胸腺细胞的凋亡进程有关。对CDK2激酶活性的抑制会阻断该细胞凋亡，从而保护胸腺细胞。

除了调节细胞周期和细胞凋亡外，CDK还直接参与转录过程。许多病毒在它们的复制过程中需要CDK。CDK抑制剂能抑制病毒复制的实例包括人巨细胞病毒、疱疹病毒和水痘带状疱疹病毒[Meijer，L.，DrugResistance Updates 2000，3，83-88]。

对CDK的抑制还可以用于治疗神经退化病，例如阿尔茨海默氏病。与阿尔茨海默氏病相关联的成对的螺旋丝(PHF)的出现，是由于CDK5/p25对Tau蛋白过磷酸化造成的[Meijer，L.，Drug ResistanceUpdates，20003，83-88]。

PIM-1是鼠白血病病毒激活的原癌基因( Provirus  Integrationsite for  Moloney murine leukemia virus)[Cuypers，H.T.等，细胞1984，37，141-150]。原癌基因的表达生成313个残基的非跨膜的丝氨酸/苏氨酸激酶，包括由253个氨基酸残基组成的激酶域。通过交替启动知道了两个异构体(p44和p33)[Saris，C.J.M.等，EMBO J.1991，10，655-664]。已经记载了两个PIM-1同系物[Baytel，D.Biochim Biophys Acta 1998，1442，274-85；Feldman，J.等，J BiolChem 1998，273，16535-16543]。PIM-2和PIM-3的氨基酸水平分别有58％和69％与Pim-1相同。在红细胞生成过程中，PIM-1在肝和脾中高度表达，且其表达受细胞因子的诱导，例如GM-CSF、G-SCF、IL-3、IF-α和IL-6[Lilly，M.等，Oncogene 1992，7，727-732；Sato，N.等，EMBO J.1993，12，4181-4189；Jaster，R.等，细胞信号1999，11，331-335；Matikainen，S.等，Blood 1999，93，1980-1991]。

PIM-1已经涉入淋巴瘤发育。PIM-1的诱导表达和原癌基因c-myc协同增加淋巴瘤生成的发生率[Breuer，M.等，Nature 1989，340，61-63；van Lohuizen，M.等，细胞1991，65，737-52]。PIM-1在细胞因子信号传递途径中起作用，并且在T细胞发育中起作用[Schmidt，T.等，EMBO J.17，1998，5349-5359；Jacobs，H.等，JEM 1999，190，1059-1068]。通过gp130(IL-6细胞因子家族的受体上常见的亚基)的信号传递会激活转录因子STAT3，并且会导致造血细胞的增殖[Hirano，T.等，Oncogene 2000，19，2548-2556]。激酶活性的PIM-1似乎对于gp130介导的STAT3增殖信号是不可缺少的。通过与c-myc共同作用，PIM-1能促进STAT3介导的细胞周期进程和抗细胞凋亡[Shirogane，T.等，Immunity 1999，11，709-719]。PIM-1还似乎对于IL-3刺激的源自骨髓的肥大细胞的生长[Domen，J.等，Blood 1993，82，1445-52]和撤去IL-3后FDCP1细胞的存活[Lilly，M.等，诱癌基因1999，18，4022-4031]是必不可少的。

另外，PIM-1对细胞增殖和存活的控制可以借助于其对公认的细胞周期调节剂cdc25[Mochizuki，T.等，J.Biol.Chem.1999，274，18659-18666]和/或p21(Cip1/WAF1)[Wang，Z.等，Biochim.Biophys.Acta 2002，1593，45-55]的磷酸化或对异染色质蛋白1(参与染色质结构和转录调节的分子)的磷酸化[Koike，N.等，FEBS Lett.2000，467，17-21]来实现。

III型受体酪氨酸激酶家族包括Flt3、c-Kit、PDGF-受体，c-Fms在造血和非造血细胞的维持、生长和发育中起重要作用[Scheijen，B，Griffin JD，Oncogene，2002，21，3314-3333和Reilly，JT，BritishJournal of Haematology，2002，116，744-757]。FLT-3和c-Kit调节干细胞/早期祖细胞的维持以及成熟的淋巴和骨髓细胞的发育[Lyman，S，Jacobsen，S，Blood，1998，91，1101-1134]。两种受体都含有内在的激酶域，它由配体介导的受体二聚化来激活。激活后，该激酶域诱导受体的自身磷酸化和多种细胞质蛋白(它们帮助导致生长、分化和存活的激活信号的传递)的磷酸化。FLT-3和c-Kit受体的下游调节剂包括PLCγ、PI3-激酶、Grb-2、SHIP和与Src有关的激酶[Scheijen，B，Griffin JD，Oncogene，2002，21，3314-3333]。已经证实两种受体酪氨酸激酶都在多种造血和非造血的恶性肿瘤中起作用。能诱导不依赖于配体的FLT-3和c-Kit的激活的突变已经涉入急性髓性白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病(ALL)、肥大细胞病和胃肠基质瘤(GIST)。这些突变包括在激酶域或内部衔接重复中的单个氨基酸变化、受体近膜区域的点突变或框内缺失。除了激活突变外，过量表达的野生型FLT-3或c-Kit的配体依赖性(自分泌或旁分泌)刺激会助长恶性表型[Scheijen，B，Griffin JD，Oncogene，2002，21，3314-3333]。

c-fms编码巨嗜细胞集落刺激因子受体(M-CSF-1R)，它主要在单核细胞/巨嗜细胞系中表达[Dai，XM等，Blood，2002，99，111-120]。MCSF-1R和其配体调节巨嗜细胞系的生长和分化。与其它家族成员类似，MCSF-1R也含有内在的激酶域，它由配体诱导的受体二聚化所激活。MCSF-1R也在非造血细胞(包括乳腺上皮细胞和神经元)中表达。该受体中的突变潜在地与骨髓性白血病有关，其表达与转移性乳腺癌、卵巢癌和子宫内膜癌相关[Reilly，JT，British Journal ofHaematology，2002，116，744-757和Kacinski，BM，Mol.Reprod andDevel.，1997，46，71-74]。MCSF-1R的拮抗剂的另外一种适应症是骨质疏松症[Teitelbaum，S，Science 2000，289，1504-1508。

PDGF-受体(PDGFR)具有两个亚基PDGFR-α和PDGRR-β，它们能依靠配体的结合形成同型或异型二聚体。有几种PDGF配体：AB、BB、CC和DD。PDGFR在早期的干细胞、肥大细胞、骨髓细胞、间叶细胞和平滑肌细胞中表达[Scheijen，B，Griffin JD，Oncogene，2002，21，3314-3333]。只有PDGFR-β已经涉入骨髓性白血病-通常是作为Tel、亨廷顿相互作用蛋白(HIP1)或Rabaptin5的移位伴侣。近来证实，PDGFR-α激酶域的激活突变是在胃肠基质瘤(GIST)中[Heinrich，MC等，Sciencexpress，2003]。

特别令人感兴趣的另外一个激酶家族是Src家族激酶。这些激酶涉入癌症、免疫系统功能障碍和骨重建病。关于一般评论，参见，Thomas和Brugge，Annu.Rev.Cell Dev.Biol.1997，13，513；Lawrence和Niu，Pharmacol.Ther.1998，77，81；Tatosyan和Mizenina，Biochemistry(Moscow)2000，65，49-58；Boschelli等，Drugs of theFuture 2000，25(7)，717。

Src家族成员包括下述的八种哺乳动物激酶：Src、Fyn、Yes、Fgr、Lyn、Hck、Lck和Blk。它们是非受体蛋白激酶，其分子质量范围为52至62kD。它们的特征在于共同的结构组织，其包含六个不同的功能域：Src同系物域4(SH4)、一个独特域、SH3域、SH2域、一个催化域(SH1)和一个C-端调节区。Tatosyan等，Biochemistry(Moscow)2000，65，49-58。

基于公开的文献，认为Src激酶是多种人疾病的潜在治疗目标。Src缺陷的小鼠会发生骨硬化症或骨聚集，因为破骨细胞抑制了骨吸收。这表明，通过抑制Src可以治疗异常高的骨吸收导致的骨质疏松。Soriano等，Cell 1992，69，551和Soriano等，Cell 1991，64，693。

已经通过在类风湿的滑膜细胞和破骨细胞中过量表达CSK实现了对关节炎性骨组织破坏的抑制。Takayanagi等，J.Clin.Invest.1999，104，137。CSK或C-端Src激酶能磷酸化并由此抑制Src的催化活性。这暗示着，Src的抑制可以预防类风湿性关节炎患者的特征--关节破坏。Boschelli等，Drugs of the Future 2000，25(7)，717。

Src还在乙肝病毒的复制中起作用。由病毒编码的转录因子HBx会在病毒增殖所需要的一个步骤中激活Src。Klein等，EMBO J.1999，18，5019，和Klein等，Mol.Cell.Biol.1997，17，6427。

许多研究已经将Src表达与癌症(例如结肠癌、乳腺癌、肝癌和胰腺癌)、某些B-细胞白血病和淋巴瘤联系起来。Talamonti等，J.Clin. Invest.1993，91，53；Lutz等，Biochem.Biophys.Res.1998，243，503；Rosen等，J.Biol.Chem.1986，261，13754；Bolen等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1987，84，2251；Masaki等，Hepatology1998，27，1257；Biscardi等，Adv.Cancer Res.1999，76，61；Lynch等，Leukemia 1993，7，1416。而且，已经证实在卵巢和结肠肿瘤细胞中表达的反义Src能抑制肿瘤生长。Wiener等，Clin.Cancer Res.，1999，5，2164；Staley等，Cell Growth Diff.1997，8，269。

其它的Src家族激酶也是潜在的治疗目标。Lck在T细胞信号传递中起作用。缺失Lck基因的小鼠具有较差的发育胸腺细胞的能力。Lck作为T细胞信号传递的正激活剂的功能表明，Lck抑制剂可以用于治疗自身免疫病，例如类风湿性关节炎。Molina等，Nature，1992，357，161。已经将Hck、Fgr和Lyn鉴别为骨髓白细胞中的整联蛋白信号的重要赋形剂。Lowell等，J.Leukoc.Biol.，1999，65，313。因此，对这些激酶赋形剂的抑制可以用于治疗炎症。Boschelli等，Drugs ofthe Future 2000，25(7)，717。

Syk是一种酪氨酸激酶，它在FcεRI介导的肥大细胞脱粒和嗜曙红细胞激活中起关键作用。因此，Syk激酶参与多种过敏病，特别是哮喘。已经证实，Syk能通过N-端SH2域结合到磷酸化的FcεRI受体γ链，并且对下游信号传递是不可缺少的[Taylor等，Mol.细胞.Biol.1995，15，4149]。

已经认为，嗜曙红细胞凋亡的抑制是哮喘中血液和组织嗜曙红细胞发育的关键机制。IL-5和GM-CSF在哮喘中受到上调节，认为它们会通过抑制嗜曙红细胞的凋亡造成血液和组织嗜曙红细胞。已经认为，嗜曙红细胞凋亡的抑制是哮喘中血液和组织嗜曙红细胞发育的关键机制。已经报道，需要有Syk激酶才能预防细胞因子造成嗜曙红细胞的凋亡(使用反义链)[Yousefi等，J.Exp.Med.1996，183，1407]。

已经使用辐照的用来自Syk-/-晶胚的胎儿肝细胞再造的小鼠嵌合体检测了Syk在来自骨髓的巨嗜细胞的FcγR依赖性的和独立性的反应中的作用。Syk缺陷的巨嗜细胞在FcγR诱导的吞噬作用中是有缺陷的，但是表现出正常的补体引起的吞噬作用[Kiefer等，Mol.Cell.Biol.1998，18，4209]。还已经报道，雾化的Syk反义链会抑制Syk的表达和赋形剂从巨嗜细胞中释放[Stenton等，J.Immunology 2000，164，3790]。

另一个令人感兴趣的激酶家族是与Rho相关的卷曲螺旋状的蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶(ROCK)，认为它是与Ras有关的小GTP酶Rho的效应物。ROCK家族包括p160ROCK(ROCK-1)(Ishizaki等，EMBO J.1996，15，1885-1893)和ROKα/Rho-激酶/ROCK-II(Leung等，J.Biol.Chem.1995，270，29051-29054；Matsui等，EMBO J.1996，15，2208-2216；Nakagawa等，FEBS Lett.1996，392，189-193)、蛋白激酶PKN(Amano等，Science 1996，271，648-650；Watanabe等，Science 1996，271，645-648)和香橼和香橼激酶(Madaule等，Nature1998，394，491-494；Madau1e等，FEBS Lett.1995，377，243-248)。已经证实ROCK家族激酶参与多种作用，包括Rho-诱导的肌动蛋白紧张纤维和焦点粘连的形成(Leung等，Mol.Cell Biol.1996，16，5313-5327；Amano等，Science 1997，275，1308-1311；Ishizaki等，FEBS Lett.1997，404，118-124)和下调节肌球蛋白磷酸酶(Kimura等，Science 1996，273，245-248)、血小板激活(Klages等，J.Cell.Biol.1999，144，745-754)、多种刺激引起的主动脉平滑肌收缩(Fu等，FEBS Lett.1998，440，183-187)、凝血酶-诱导的主动脉平滑肌细胞反应(Seasholtz等，Cir.Res.1999，84，1186-1193)、心肌细胞肥大(Kuwahara等，FEBS Lett.，1999，452，314-318)、支气管平滑肌收缩(Yoshii等，Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.1999，20，1190-1200)、非肌细胞的平滑肌收缩和细胞骨架重组(Fukata等，Trends in Pharm.Sci.2001，22，32-39)、体积调节的阴离子通道的激活(Nilius等，J.Physiol.1999，516，67-74)、神经突收缩(Hirose等，J.Cell.Biol.1998，141，1625-1636)、嗜中性的趋化性(Niggli，FEBS Lett.1999，445，69-72)、伤口愈合(Nobes和Hall，J.Cell.Biol.1999，144，1235-1244)、肿瘤侵入(Itoh等，Nat.Med.1999，5，221-225)和细胞转化(Sahai等，Curr.Biol.1999，9，136-145)。因此，ROCK激酶抑制剂的开发可以用作治疗ROCK激酶途径介导的疾病的治疗剂。

ZAP-70是T细胞受体信号传递不可缺少的。该酪氨酸激酶的表达局限在T细胞和自然杀伤细胞。已经在人患者、人T细胞系和小鼠中证实了ZAP-70在T细胞功能中的重要性。患有罕见形式的严重并发缺陷综合症(SCID)的人患者具有ZAP-70纯合突变(参见，Elder J.ofPedriatric Hematology/Oncology 1997，19(6)，546-550)。这些患者具有严重的免疫缺陷，缺少CD8+T细胞，具有CD4+T细胞(它不对T-细胞受体(TCR)介导的刺激起反应)。TCR激活激活后，这些CD4+细胞在Ca2+可动化、下游底物的酪氨酸磷酸化、增殖和IL-2生产70中表现出严重缺陷(参见，Elder Pedriatric Research 39，743-748)。缺少ZAP-70的人Jurkat细胞也为认识ZAP-70在T细胞受体信号传递中的关键作用提供了重要视点。证实了含有不能检测出的ZAP-70蛋白的Jurkat克隆(p116)在T细胞受体信号传递(它可以提供重新导入野生型ZAP-70来校正)中有缺陷(Williams等，Molecular and Cellular Biology 1998，18(3)，1388-1399)。缺少ZAP-70的小鼠的研究也证实，T细胞受体信号传递需要ZAP-70。ZAP-70-缺陷的小鼠在T细胞发育中有严重缺陷，T细胞受体信号传递在胸腺细胞中受到削弱(Negishi等，Nature 1995 376，435-438)。

通过研究人患者和在ZAP-70激酶域的DLAARN基序中表达相同突变的小鼠，证实了该激酶域在ZAP-70功能中的重要性。该突变引起的激酶活性的失活导致有缺陷的T细胞受体信号传递(Elder等J.Immunology 2001，656-661)。无催化活性的ZAP-70(Lys369Arg)在恢复ZAP-70缺陷的Jurkat细胞克隆(p116)中的T细胞受体信号传递时也是有缺陷的(Williams等，Molecular and Cellular Biology 1998，18(3)，1388-1399)。

Janus激酶(JAK)是由JAK1、JAK2、JAK3和TYK2组成的酪氨酸激酶家族。JAK在细胞因子信号传递中起关键作用。JAK激酶家族的下游底物包括信号转换器和转录(STAT)蛋白的激活剂。JAK/STAT信号传递已经涉入许多异常免疫反应的介导，例如变态反应、哮喘、自身免疫病例如移植物排斥、类风湿性关节炎、肌萎缩性脊髓侧索硬化和多发性硬化，还涉入实体的和血液的恶性肿瘤，例如白血病和淋巴瘤。已经观察了JAK/STAT途径的药物干涉[Frank Mol.Med.5：432-456(1999)和Seidel等，Oncogene 19：2645-2656(2000)]。

JAK1、JAK2和TYK2到处表达，而JAK3在造血细胞中显著地表达。JAK3排他地结合到普通细胞因子受体γ链(γ_c)上，并由IL-2、IL-4、IL-7、IL-9和IL-15激活。实际上，已经证实IL-4和IL-9诱导的鼠肥大细胞的增殖和存活依赖于JAK3-和γ_c信号传递[Suzuki等，Blood 96：2172-2180(2000)]。

敏化了的肥大细胞的高亲合力免疫球蛋白(Ig)E受体的交联导致前炎性赋形剂的释放，包括许多导致急性变态反应或即时(I型)的过敏反应的血管活性细胞因子[Gordon等，Nature 346：274-276(1990)和Galli，N.Engl.J.Med.，328：257-265(1993)]。已经体外地和体内地验证了JAK3在IgE受体介导的肥大细胞反应中的关键作用[Malaviya等，Biochem.Biophys.Res.Commun.257：807-813(1999)]。另外，还已经报道了对I型过敏反应(包括通过抑制JAK3激活肥大细胞所介导的过敏症)的预防[Malaviya等，J.Biol.Chem.274：27028-27038(1999)]。含有JAK3抑制剂的靶向肥大细胞体外地调控了肥大细胞脱粒，并体内地预防了IgE受体/抗原介导的过敏反应。

近期的文献记载了用于免疫抑制和移植物接受的JAK3的成功靶向。该研究证实了Wistar Furth受体中的Buffalo心脏移植物在施用JAK3的抑制剂后的剂量依赖性的存活，这指示着调节移植物抗宿主病中的不希望的免疫反应的可能性[Kirken，transpl.proc.33：3268-3270(2001)]。

已经提示IL-4介导的STAT-磷酸化是类风湿性关节炎(RA)的早期和晚期阶段的机制。RA滑膜和滑液中的前炎性细胞因子的上调节是该病的特征。已经证实，IL-4介导的IL-4/STAT途径的激活是通过Janus激酶(JAK1和3)介导的，与IL-4相关的JAK激酶在RA滑膜中表达[Muller-Ladner，等，J.Immunol.164：3894-3901(2000)]。

家族性的肌萎缩性脊髓侧索硬化(FALS)是致命的神经退化病，它影响约10％ALS患者。用JAK3特异性的抑制剂治疗后，FALS小鼠的存活率有所提高。这确信了JAK3在FALS中起作用[Trieu，等，Biochem.Biophys.Res.Commun.267：22-25(2000)]。

信号转换器和转录(STAT)蛋白的激活剂由(尤其是)JAK家族激酶激活。由结果形成的近期文献提示了通过靶向定位JAK家族激酶干涉JAK/STAT信号传递途径用特异性抑制剂治疗白血病的可能性[Sudbeck，等，Clin.Cancer Res.5：1569-1582(1999)]。证实了JAK3特异性的化合物能抑制表达JAK3的细胞系DAUDI、RAMOS、LC1、19、NALM-6、MOLT-3和HL-60的克隆源性生长。

在动物模型中，TEL/JAK2融合蛋白具有诱导的骨髓细胞增殖病，在造血细胞系中，TEL/JAK2的导入激活了不依赖于STAT1、STAT3、STAT5和细胞因子的生长[Schwaller等，EMBO J.17：5321-5333(1998)]。

JAK3和TYK2的抑制取消了STAT3的酪氨酸磷酸化，并抑制了蕈状真菌病(皮肤的T细胞淋巴瘤的一种形式)细胞的生长。这些结果提示了构成性地激活的JAK/STAT途径(它存在于蕈状真菌病中)中的JAK家族激酶[Nielsen等，Proc.Nat.Acad.Sci.U.S.A.94：6764-6769(1997)]。类似地，证实了STAT3、STAT5、JAK1和JAK2在小鼠T细胞淋巴瘤中被构成性地激活，其最初特征是LCK的过量表达，从而进一步提示了异常细胞生长中的JAK/STAT途径[Yu，等，J.Immunol.159：5206-5210(1997)]。另外，IL-6介导的STAT3激活被JAK抑制剂阻断，这导致骨髓瘤细胞向细胞凋亡的敏化[Catlett-Falcone，等，Immunity 10：105-115(1999)]。

蛋白激酶的生物学重要性导致了目前令人感兴趣的治疗上有效的蛋白激酶抑制剂。因此，仍然非常需要开发用于治疗多种与蛋白激酶激活相关的疾病或障碍的蛋白激酶抑制剂。

发明内容

现在已经发现，本发明的化合物和其组合物是有效的蛋白激酶抑制剂。在某些实施发案中，本发明的化合物是ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2的抑制剂。这些化合物具有通式I和V：

或其药学上可接受的盐，其中环B、Z¹、Z²、U、T、m、n、p、Q、Q′、R¹、R²、R^X、R³和R⁶定义如下。

这些化合物和其药学上可接受的组合物可用于治疗或缓解多种疾病的严重程度，包括中风、阿尔茨海默氏病、免疫缺陷病、炎症、变态反应病、自身免疫病、破坏性骨病(例如骨质疏松症)、炎症、增殖病(例如癌症)和与器官移植相关的疾病。

发明详述

本发明提供了式I化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

环B是具有0-3个氮的6-元芳族环；

Z¹和Z²中的每一个独立地选自N或CH；

T和Q中的每一个独立地选自饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的至多两个亚甲基单元被任选地和独立地替换为-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRCO₂-、-O-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、-S-、-SO-、-SO₂-、-NR-、-SO₂NR-或-NRSO₂-：

每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基，或：

同一氮上的两个R和该氮一起形成具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-8元的杂环或杂芳环；

U选自-NR-、-NRC(O)-、-NRC(O)NR-、-NRCO₂-、-O-、-C(O)NR-、-C(O)-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRSO₂-、-SO₂NR-、-NRSO₂NR-或-SO₂-；

m和n中的每一个独立地选自0或1；

p选自0、1、2、3或4；

R¹选自R或Ar；

每一个Ar是任选地被取代的环，它选自6-10元的芳族环、5-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环；

R²选自-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或-(CH₂)_yCH(R⁴)CH(R⁵)₂；

y是0-6；

R³选自R、Ar、-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或CN；

R⁴选自R、(CH₂)_wOR、(CH₂)_wN(R)₂或(CH₂)_wSR；

w是0-4；

每一个R⁵独立地选自任选地被取代的C_1-6脂族基、Ar、OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂、N(Ar)(R)、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂；和

每一个R⁶独立地选自R、F、Cl、N(R)₂、OR、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN、SO₂N(R)₂、N(R)O、ON(R)或N(R)N(R)。

本发明还涉及式V化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

环B是具有0-3个氮的6-元芳族环；

Z¹和Z²中的每一个独立地选自N或CH；

T是饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的至多两个亚甲基单元被任选地和独立地替换为-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRCO₂-、-O-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、-S-、-SO-、-SO₂-、-NR-、-SO₂NR-或-NRSO₂-；

每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基或：

同一氮上的两个R和该氮一起形成具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-8元的杂环或杂芳环；

Q′是饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的一个或多个亚甲基被任选地和独立地替换为-C(O)NR′-、-NR′CO₂-、-OC(O)NR′-、-NR′C(O)-、-NR′-、-SO₂NR′-或-NR′SO₂-；

每一个R′独立地选自C_1-6脂族基，其中所述的脂族基被一个Ar基团取代，且任选地被1-2个另外的独立地选自下述基团的基团取代：卤素、-OR、-SR、-NO₂、-CN、-N(R)₂、-NRC(O)R、-NRC(O)N(R)₂、-NRCO₂R、-NRNRC(O)R、-NRNRC(O)N(R)₂、-NRNRCO₂R、-C(O)C(O)R、-C(O)CH₂C(O)R、-CO₂R或-C(O)R；

U选自-NR-、-NRC(O)-、-NRC(O)NR-、-NRCO₂-、-O-、-C(O)NR-、-C(O)-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRSO₂-、-SO₂NR-、-NRSO₂NR-或-SO₂-；

m和n中的每一个独立地选自0或1；

p选自0、1、2、3或4；

R¹选自R或Ar；

每一个Ar是任选地被取代的环，它选自6-10元的芳族环、5-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环；

y是0-6；

R^X是-(CH₂)_yR⁵

R³选自R、Ar、-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或CN；

w是0-4；

每一个R⁵独立地选自任选地被取代的C_1-6脂族基、Ar、OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂、N(Ar)(R)、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂；和

每一个R⁶独立地选自R、F、Cl、N(R)₂、OR、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN、SO₂N(R)₂、N(R)O、ON(R)或N(R)N(R)。

如这里所使用的，除另有说明外将使用下述定义。短语″任选地被取代的″与短语″取代的或未取代的″可互换地使用。除另有说明外，任选地被取代的基团可以在该基团的每一个可取代的位置上有一个取代基，每一个取代独立于其它的取代。

如这里所使用的术语″脂族的″或″脂族基″是指直链或支链的完全饱和的或含有一个或多个不饱和单元的C₁-C₁₂烃链、或完全饱和的或含有一个或多个不饱和单元的单环C₃-C₈烃或双环C₈-C₁₂烃，但它不是芳族的(在这里也称作″碳环″或″环烷基″)，它具有单一的其它分子结合位点，其中所述双环系统中的任何单个环都是3-7元。例如，合适的脂族基包括但不限于直链的或支链的或烷基、链烯基、炔基和其杂合体，例如(环烷基)烷基、(环烯基)烷基或(环烷基)链烯基。

单独使用的或作为更大基团的一部分使用的术语″烷基″、″烷氧基″、″羟烷基″、″烷氧基烷基″和″烷氧基羰基″包括含有1-12个碳原子的直链和支链。单独使用的或作为更大基团的一部分使用的术语″链烯基″和″炔基″包括含有2-12个碳原子的直链和支链。

术语″卤代烷基″、″卤代链烯基″和″卤代烷氧基″是指烷基、链烯基或烷氧基，视情况而定，被一个或多个卤素原子取代。术语″卤素″是指F、Cl、Br或I。

术语″杂原子″是指氮、氧或硫，且包括氮和硫的任何氧化形式和任何碱性氮的季铵化形式。术语″氮″也包括杂环的可取代的氮。作为一个实例，在具有0-3个选自氧、硫或氮的杂原子的饱和的或部分地不饱和的环中，氮可以是N(如在3、4-二氢-2H-吡咯基中)、NH(如在吡咯烷基中)或NR⁺(如在N-取代的吡咯烷基中)。

单独使用的或作为更大基团(如在″芳烷基″、″芳烷基氧基″或″芳基氧烷基″中)的一部分使用的术语″芳基″是指具有共计5-14个环成员的单环、双环和三环系统，其中系统中的至少一个环是芳族的，且其中系统中的每个环含有3-7个环成员。术语″芳基″与术语″芳香环″可互换地使用。

如这里所使用的术语″杂环″、″杂环基″或″杂环的″是指具有5-14个环成员的非芳族的单环、双环或三环系统，其中一个或多个环成员是杂原子，其中系统中的每个环含有3-7个环成员。

单独使用的或作为更大基团(如在″杂芳烷基″或″杂芳基烷氧基″中)的一部分使用的术语″杂芳基″是指具有共计5-14个环成员的单环、双环和三环系统，其中系统中的至少一个环是芳族的，系统中的至少一个环含有一个或多个杂原子，且其中系统中的每个环含有3-7个环成员。术语″杂芳基″与术语″杂芳环″或术语″杂芳族的″可互换地使用。

芳基(包括芳烷基、芳烷基氧基、芳基氧烷基等)或杂芳基(包括杂芳烷基和杂芳基烷氧基等)可以含有一个或多个取代基。芳基、杂芳基、芳烷基或杂芳烷基的不饱和碳原子上的合适取代基选自卤素、-R^o、-OR^o、-SR^o、1，2-亚甲基-二氧、1，2-亚乙基二氧、受保护的OH(例如酰氧基)、苯基(Ph)、用R^o取代的Ph、-O(Ph)、用R^o取代的O-(Ph)、-CH₂(Ph)、用R^o取代的-CH₂(Ph)、-CH₂CH₂(Ph)、用R^o取代的-CH₂CH₂(Ph)、-NO₂、-CN、-N(R^o)₂、-NR^oC(O)R^o、-NR^oC(O)N(R^o)₂、-NR^oCO₂R^o、-NR^oNR^oC(O)R^o、-NR^oNR^oC(O)N(R^o)₂、-NR^oNR^oCO₂R^o、-C(O)C(O)R^o、-C(O)CH₂C(O)R^o、-CO₂R^o、-C(O)R^o、-C(O)N(R^o)₂、-OC(O)N(R^o)₂、-S(O)₂R^o、-SO₂N(R^o)₂、-S(O)R^o、-NR^oSO₂N(R^o)₂、-NR^oSO₂R^o、-C(＝S)N(R^o)₂、-C(＝NH)-N(R^o)₂或-(CH₂)_yNHC(O)R^o，其中每一个R^o独立地选自氢、任选地被取代的C_1-6脂族基、未取代的5-6元杂芳基或杂环、苯基(Ph)、-O(Ph)或CH₂(Ph)-CH₂(Ph)。R^o的脂族基团上的取代基选自NH₂、NH(C_1-4脂族基)、N(C_1-4脂族基)₂、卤素、C_1-4脂族基、OH、O-(C_1-4脂族基)、NO₂、CN、CO₂H、CO₂(C_1-4脂族基)、-O(卤代C_1-4脂族基)或卤代C_1-4脂族基。

脂族基或非芳族的杂环可以含有一个或多个取代基。脂族基或非芳族的杂环的饱和碳上的合适取代基选自上面为芳基或杂芳基的不饱和碳原子列出的那些和下面的：＝O、＝S、＝NNHR^*、＝NN(R^*)₂、＝N-、＝NNHC(O)R^*、＝NNHCO₂(烷基)、＝NNHSO₂(烷基)或＝NR^*，其中每一个R^*独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基。R^*的脂族基上的取代基选自NH₂、NH(C_1-4脂族基)、N(C_1-4脂族基)₂、卤素、C_1-4脂族基、OH、O-(C_1-4脂族基)、NO₂、CN、CO₂H、CO₂(C_1-4脂族基)、-O(卤代C_1-4脂族基)或卤代C_1-4脂族基。

非芳族的杂环的氮上的取代基选自-R⁺、-N(R⁺)₂、-C(O)R⁺、-CO₂R⁺、-C(O)C(O)R⁺、-C(O)CH₂C(O)R⁺、-SO₂R⁺、-SO₂N(R⁺)₂、-C(＝S)N(R⁺)₂、-C(＝NH)-N(R⁺)₂或-NR⁺SO₂R⁺；其中R⁺是氢、任选地被取代的C_1-6脂族基、任选地被取代的苯基(Ph)、任选地被取代的-O(Ph)、任选地被取代的-CH₂(Ph)、任选地被取代的-CH₂CH₂(Ph)或未取代的5-6元的杂芳基或杂环。R⁺的脂族基或苯基上的取代基选自NH₂、NH(C_1-4脂族基)、N(C_1-4脂族基)₂、卤素、C_1-4脂族基、OH、O-(C_1-4脂族基)、NO₂、CN、CO₂H、CO₂(C_1-4脂族基)、-O(卤代C_1-4脂族基)或卤代C_1-4脂族基。

术语″亚烷基链″是指直链的或支链的碳链，它可以是完全饱和的或具有一个或多个不饱和单元，且具有两个其它分子的连接点。

本发明的化合物限于那些化学上可行的和稳定的。因此，上述的化合物中的取代基或变量的组合只有在能产生稳定的或化学上可行的化合物时才是可允许的。稳定的或化学上可行的化合物是这样的化合物，在没有水分或其它的化学反应条件下，在40℃或更低的温度保持至少一周，其中的化学结构基本上没有改变。

除非另有说明，这里所述的结构还包括该结构的所有立体化学形式；即，每一个不对称中心的R和S构型。因此，本发明的单一立体化学异构体以及对映体和非对映体的混合物都在本发明的范围内。除非另有说明，这里所述的结构还包括这样的化合物，其不同之处仅仅是存在一个或多个富集同位素的原子。例如，具有本发明的结构、且只是将氢替换为氘或氚或将碳替换为富集¹³C-或¹⁴C-的碳的化合物在本发明的范围内。

本发明的化合物可以存在交替的互变异构形式。除另有说明外，提及的每一种互变异构体也意在包括另一种。

式I的优选的(T)_mR¹基团选自氢、N(R)₂、卤素、OH、3-6元的碳环基或任选地被取代的下述基团：C_1-6脂族基、6元的芳族环或5-6元的具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环。当R¹是任选地被取代的苯基或脂族基时，苯基或脂族基上的优选取代基是R^o、卤代、硝基、烷氧基和氨基。这样的优选的(T)_mR¹基团的实例包括氯、氟、甲基、乙基、丙基、环丙基、环己基、CH₂OCH₃、CH₂OH、NH₂、NHCH₃、NHAc、NHC(O)NHCH₃和CH₂NHCH₃。式I的更优选的(T)_mR¹基团是下面表1中列出的那些。

式I的优选的R³基团是氢、OR、任选地被取代的3-7元的碳环基或任选地被取代的下述基团：C_1-4脂族基、3-6元的具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环或5-6元的芳族环或具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环。这样的基团的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、环丙基、环己基、4-羟基环己基、苯基、苄基、异唑基、四氢呋喃基、OEt、OMe、O-异丙基、OCH₂环丙基、异唑-3-基、吡啶基和异丙基。当R³是任选地被取代的苯基时，苯环上的优选的取代基是卤素、R^o、OR^o、N(R^o)₂、CO₂R^o和SO₂N(R^o)₂。这样的取代基的实例包括氟、NH₂、Cl、Br、OCH₂苯基、吗啉-4-基、CO₂Me、OMe、卤代烷基(例如，CF₃)、O苄基、O苯基、OCF₃、OH、SO₂NH₂和亚甲基二氧。当R³是-(CH₂)_yCH(R⁵)₂时，这样的基团的实例包括-CH(CH₃)CH₂OH、-CH₂吡啶基、-CH(CH₂OH)苯基、-CH(CH₂OH)乙基、-CH(CH₂OH)₂、-CH(CH₂OH)异丙基和-CH(CH₂OH)CH₂环丙基。

式I的优选的U基团，当存在时，是-CH₂-、-O-、-NR-、-NHC(O)-和-NHCO₂-。式I的更优选的(U)_nR³基团是下面的表1中列出的那些。

式I的优选的Q基团选自C_1-4亚烷基链，其中Q的一个或两个亚甲基单元被独立地替换为C(O)、OC(O)、C(O)NH、OC(O)NH、SO₂、SO₂NH、NHC(O)、NHC(O)O或NHSO₂。式I的更优选的Q基团是C(O)、SO₂、C(O)NH或SO₂NH。式I的最优选的Q基团是C(O)和C(O)NH。

根据另一个实施方案，式I的Q是NRC(O)或NRSO₂。更优选地，Q是NHC(O)。

当式I的R²是(CH₂)_yCH(R⁵)₂时，优选的R⁵基团独立地选自任选地被取代的C_1-4脂族基、C_5-6环烷基、苯基、5-9元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或5-6元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环。更优选的R⁵基团独立地选自吡啶-3-基、吡啶-4-基、吗啉-4-基、硫代吗啉-4-基、咪唑基、呋喃-2-基、1，2，3，4-四氢异喹啉、四氢呋喃-2-基、环己基、苯基、苄基、-CH₂OH、-(CH₂)₂OH和异丙基，其中每一个基团是任选地被取代的。R⁵上的优选的取代基是卤素、R^o、NO₂、OR^o或SR^o。这样的取代基的实例是氯、氟、甲基、乙基、异丙基、OCH₃、-OH、SCH₃、吡啶基、哌啶基和任选地被取代的苯基。

根据另一个实施方案，当式I的R²是(CH₂)_yCH(R⁵)₂时，优选的R⁵基团选自OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂或N(Ar)(R)，其中每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-4脂族基，且Ar是C_5-6环烷基、苯基、5-9元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或5-6元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环。R上的优选的取代基选自OR^o、-SR^o、苯基、-O(Ph)、-CH₂(Ph)、-N(R^o)₂、-NR^oC(O)R^o、-NR^oC(O)N(R^o)₂、-NR^oCO₂R^o、-CO₂R^o、-C(O)R^o或-C(O)N(R^o)₂，其中每一个R^o独立地选自氢、C_1-4脂族基或未取代的5-6元的杂芳基或具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环、苯基(Ph)、-O(Ph)或-CH₂(Ph)-CH₂(Ph)。R^o的脂族基上的取代基选自NH₂、NH(C_1-4脂族基)、N(C_1-4脂族基)₂、卤素、C_1-4脂族基、OH、O-(C_1-4脂族基)、NO₂、CN、CO₂H、CO₂(C_1-4脂族基)、-O(卤代C_1-4脂族基)或卤代C_1-4脂族基。

当式I的R²是-(CH₂)_yCH(R⁴)CH(R⁵)₂时，优选的R²基团是R和OR，例如OH和CH₂OH，优选的R⁵如上所述。式I的优选的-(CH₂)_yCH(R⁴)CH(R⁵)₂基团是-CH(OH)CH(OH)苯基和-CH(Me)CH(OH)苯基。其它优选的-QR²基团是下面的表1中列出的那些。

根据一个实施方案，本发明涉及式I的化合物，其中环B是苯基。

根据另一个实施方案，本发明涉及式I的化合物，其中环B是吡啶基。

根据另一个实施方案，本发明涉及式I的化合物，其中环B是嘧啶基。

根据另一个实施方案，本发明涉及式I的化合物，其中环B是吡嗪基。

根据另一个实施方案，本发明涉及式I的化合物，其中环B是三嗪基。

式V的优选的(T)_mR¹基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式V的优选的R³基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式V的优选的U基团，当存在时，是上面为式I的化合物描述的那些。

式V的优选的Q′基团选自-C(O)NR′-、-NR′CO₂-、-OC(O)NR′-、-NR′C(O)-、-SO₂NR′-或-NR′SO₂-，其中每一个R′独立地选自C_1-4脂族基，其中所述的脂族基被一个Ar基团取代，且任选地被一个选自下述基团的其它基团取代：卤素、-OR、-SR、-NO₂、-CN、-N(R)₂、-NRC(O)R、-NRC(O)N(R)₂、-NRCO₂R、-NRNRC(O)R、-NRNRC(O)N(R)₂、-NRNRCO₂R、-C(O)C(O)R、-C(O)CH₂C(O)R、-CO₂R或-C(O)R。Q′的R′基团的优选的Ar取代基选自任选地被取代的苯基或5-6元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环。更优选地，式V的Q′是-C(O)NR′-或-NR′C(O)-，其中每一个R′是C_1-2脂族基，其中所述的脂族基是Ar取代的，且Ar是任选地被取代的苯基、5-6元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-6元的具有1-2个独立的选自氮、氧或硫的杂原子的杂环。更优选地，R′上的Ar取代基选自苯基、吡啶基、噻吩基或嘧啶基。

式V的优选的R^x基团是-(CH₂)_yR⁵，其中y是1或2，且R⁵是Ar，其中Ar是3-6元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环或任选地被取代的苯基或5-6元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环。更优选地，R^x是-(CH₂)_yR⁵，其中y是1或2，且R⁵选自吗啉-4-基、硫代吗啉-4-基、哌啶基、哌嗪基或吡咯烷基。

根据一个实施方案，本发明涉及式V的化合物，其中环B是苯基。

根据另一个实施方案，本发明涉及式V的化合物，其中环B是吡啶基。

根据另一个实施方案，本发明涉及式V的化合物，其中环B是嘧啶基。

根据另一个实施方案，本发明涉及式V的化合物，其中环B是吡嗪基。

根据另一个实施方案，本发明涉及式V的化合物，其中环B是三嗪基。

因此，本发明涉及式I的化合物，其中环A是吡啶(I-A)、嘧啶(I-B)或三嗪(I-C)环，如下所示：

或其药学上可接受的盐，其中环B、Z¹、Z²、U、T、m、n、p、Q、R¹、R²、R³和R⁶定义如上。

式I-A、I-B和I-C中的任一个的优选的(T)_mR¹基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I-A、I-B和I-C中的任一个的优选的U基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I-A、I-B和I-C中的任一个的优选的R³基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I-A、I-B和I-C中的任一个的优选的Q基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I-A、I-B和I-C中的任一个的优选的R²基团是上面为式I的化合物描述的那些。

本发明还涉及式V的化合物，其中环A是吡啶(V-A)、嘧啶(V-B)或三嗪(V-C)环，如下所示：

或其药学上可接受的盐，其中环B、Z¹、Z²、U、T、m、n、p、Q′、R¹、R^X、R³和R⁶定义如上。

式V-A、V-B和V-C中的任一个的优选的(T)_mR¹基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式V-A、V-B和V-C中的任一个的优选的U基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式V-A、V-B和V-C中的任一个的优选的R³基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式V-A、V-B和V-C中的任一个的优选的Q′基团是上面为式V的化合物描述的那些。

式V-A、V-B和V-C中的任一个的优选的R^X基团是上面为式V的化合物描述的那些。

合适的本发明的环B基团包括：

因此，本发明涉及下面的式I化合物：

式I-Ai、I-Aii、I-Aiii、I-Aiv、I-Av、I-Avi、I-Avii、I-Aviii、I-Aix、I-Ax、I-Axi、I-Axii、I-Bi、I-Bii、I-Biii、I-Biv、I-Bv、I-Bvi、I-Bvii、I-Aviii、I-Bix、I-Bx、I-Bxi、I-Bxii、I-Ci、I-Cii、I-Ciii、I-Civ、I-Cv、I-Cvi、I-Cvii、I-Cviii、I-Cix、I-Cx、I-Cxi和I-Cxii中的任一个的优选的(T)_mR¹基团是上面为式I化合物描述的那些。

式I-Ai、I-Aii、I-Aiii、I-Aiv、I-Av、I-Avi、I-Avii、I-Aviii、I-Aix、I-Ax、I-Axi、I-Axii、I-Bi、I-Bii、I-Biii、I-Biv、I-Bv、I-Bvi、I-Bvii、I-Aviii、I-Bix、I-Bx、I-Bxi、I-Bxii、I-Ci、I-Cii、I-Ciii、I-Civ、I-Cv、I-Cvi、I-Cvii、I-Cviii、I-Cix、I-Cx、I-Cxi和I-Cxii中的任一个的优选的U基团是上面为式I化合物描述的那些。

式I-Ai、I-Aii、I-Aiii、I-Aiv、I-Av、I-Avi、I-Avii、I-Aviii、I-Aix、I-Ax、I-Axi、I-Axii、I-Bi、I-Bii、I-Biii、I-Biv、I-Bv、I-Bvi、I-Bvii、I-Aviii、I-Bix、I-Bx、I-Bxi、I-Bxii、I-Ci、I-Cii、I-Ciii、I-Civ、I-Cv、I-Cvi、I-Cvii、I-Cviii、I-Cix、I-Cx、I-Cxi和I-Cxii中的任一个的优选的R³基团是上面为式I化合物描述的那些。

式I-Ai、I-Aii、I-Aiii、I-Aiv、I-Av、I-Avi、I-Avii、I-Aviii、I-Aix、I-Ax、I-Axi、I-Axii、I-Bi、I-Bii、I-Biii、I-Biv、I-Bv、I-Bvi、I-Bvii、I-Aviii、I-Bix、I-Bx、I-Bxi、I-Bxii、I-Ci、I-Cii、I-Ciii、I-Civ、I-Cv、I-Cvi、I-Cvii、I-Cviii、I-Cix、I-Cx、I-Cxi和I-Cxii中的任一个的优选的Q基团是上面为式I化合物描述的那些。

式I-Ai、I-Aii、I-Aiii、I-Aiv、I-Av、I-Avi、I-Avii、I-Aviii、I-Aix、I-Ax、I-Axi、I-Axii、I-Bi、I-Bii、I-Biii、I-Biv、I-Bv、I-Bvi、I-Bvii、I-Aviii、I-Bix、I-Bx、I-Bxi、I-Bxii、I-Ci、I-Cii、I-Ciii、I-Civ、I-Cv、I-Cvi、I-Cvii、I-Cviii、I-Cix、I-Cx、I-Cxi和I-Cxii中的任一个的优选的R²基团是上面为式I化合物描述的那些。

本发明还涉及下面的式V化合物：

式V-Ai、V-Aii、V-Aiii、V-Aiv、V-Av、V-Avi、V-Avii、V-Aviii、V-Aix、V-Ax、V-Axi、V-Axii、V-Bi、V-Bii、V-Biii、V-Biv、V-Bv、V-Bvi、V-Bvii、V-Aviii、V-Bix、V-Bx、V-Bxi、V-Bxii、V-Ci、V-Cii、V-Ciii、V-Civ、V-Cv、V-Cvi、V-Cvii、V-Cviii、V-Cix、V-Cx、V-Cxi和V-Cxii中的任一个的优选的(T)_mR¹基团是上面为式I化合物描述的那些。

式V-Ai、V-Aii、V-Aiii、V-Aiv、V-Av、V-Avi、V-Avii、V-Aviii、V-Aix、V-Ax、V-Axi、V-Axii、V-Bi、V-Bii、V-Biii、V-Biv、V-Bv、V-Bvi、V-Bvii、V-Aviii、V-Bix、V-Bx、V-Bxi、V-Bxii、V-Ci、V-Cii、V-Ciii、V-Civ、V-Cv、V-Cvi、V-Cvii、V-Cviii、V-Cix、V-Cx、V-Cxi和V-Cxii中的任一个的优选的U基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式V-Ai、V-Aii、V-Aiii、V-Aiv、V-Av、V-Avi、V-Avii、V-Aviii、V-Aix、V-Ax、V-Axi、V-Axii、V-Bi、V-Bii、V-Biii、V-Biv、V-Bv、V-Bvi、V-Bvii、V-Aviii、V-Bix、V-Bx、V-Bxi、V-Bxii、V-Ci、V-Cii、V-Ciii、V-Civ、V-Cv、V-Cvi、V-Cvii、V-Cviii、V-Cix、V-Cx、V-Cxi和V-Cxii中的任一个的优选的R³基团是上面为式I化合物描述的那些。

式V-Ai、V-Aii、V-Aiii、V-Aiv、V-Av、V-Avi、V-Avii、V-Aviii、V-Aix、V-Ax、V-Axi、V-Axii、V-Bi、V-Bii、V-Biii、V-Biv、V-Bv、V-Bvi、V-Bvii、V-Aviii、V-Bix、V-Bx、V-Bxi、V-Bxii、V-Ci、V-Cii、V-Ciii、V-Civ、V-Cv、V-Cvi、V-Cvii、V-Cviii、V-Cix、V-Cx、V-Cxi和V-Cxii中的任一个的优选的Q′基团是上面为式V化合物描述的那些。

式V-Ai、V-Aii、V-Aiii、V-Aiv、V-Av、V-Avi、V-Avii、V-Aviii、V-Aix、V-Ax、V-Axi、V-Axii、V-Bi、V-Bii、V-Biii、V-Biv、V-Bv、V-Bvi、V-Bvii、V-Aviii、V-Bix、V-Bx、V-Bxi、V-Bxii、V-Ci、V-Cii、V-Ciii、V-Civ、V-Cv、V-Cvi、V-Cvii、V-Cviii、V-Cix、V-Cx、V-Cxi和V-Cxii中的任一个的优选的R^X基团是上面为式V化合物描述的那些。

本发明的另一个实施方案涉及式I′化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环B、Z¹、Z²、U、T、m、n、p、Q、R¹、R²、R³和R⁶定义如上。

因此，本发明涉及式I′的化合物，其中环A是吡啶(I′-A)、嘧啶(I′-B)或三嗪(I′-C)环，如下所示：

或其药学上可接受的盐，其中环B、Z¹、Z²、U、T、m、n、p、Q、R¹、R²、R³和R⁶定义如上。

式I′-A、I′-B和I′-C中的任一个的优选的(T)_mR¹基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I′-A、I′-B和I′-C中的任一个的优选的U基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I′-A、I′-B和I′-C中的任一个的优选的R³基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I′-A、I′-B和I′-C中的任一个的优选的Q基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I′-A、I′-B和I′-C中的任一个的优选的R²基团是上面为式I化合物描述的那些。

根据另一个实施方案，本发明涉及下面的式I′化合物：

式I′-Ai、I′-Aii、I′-Aiii、I′-Aiv、I′-Av、I′-Avi、I′-Avii、I′-Aviii、I′-Aix、I′-Ax、I′-Axi、I′-Axii、I′-Bi、I′-Bii、I′-Biii、I′-Biv、I′-Bv、I′-Bvi、I′-Bvii、I′-Aviii、I′-Bix、I′-Bx、I′-Bxi、I′-Bxii、I′-Ci、I′-Cii、I′-Ciii、I′-Civ、I′-Cv、I′-Cvi、I′-Cvii、I′-Cviii、I′-Cix、I′-Cx、I′-Cxi和I′-Cxii中的任一个的优选的(T)_mR¹基团是上面为式I化合物描述的那些。

式I′-Ai、I′-Aii、I′-Aiii、I′-Aiv、I′-Av、I′-Avi、I′-Avii、I′-Aviii、I′-Aix、I′-Ax、I′-Axi、I′-Axii、I′-Bi、I′-Bii、I′-Biii、I′-Biv、I′-Bv、I′-Bvi、I′-Bvii、I′-Aviii、I′-Bix、I′-Bx、I′-Bxi、I′-Bxii、I′-Ci、I′-Cii、I′-Ciii、I′-Civ、I′-Cv、I′-Cvi、I′-Cvii、I′-Cviii、I′-Cix、I′-Cx、I′-Cxi和I′-Cxii中的任一个的优选的U基团是上面为式I化合物描述的那些。

式I′-Ai、I′-Aii、I′-Aiii、I′-Aiv、I′-Av、I′-Avi、I′-Avii、I′-Aviii、I′-Aix、I′-Ax、I′-Axi、I′-Axii、I′-Bi、I′-Bii、I′-Biii、I′-Biv、I′-Bv、I′-Bvi、I′-Bvii、I′-Aviii、I′-Bix、I′-Bx、I′-Bxi、I′-Bxii、I′-Ci、I′-Cii、I′-Ciii、I′-Civ、I′-Cv、I′-Cvi、I′-Cvii、I′-Cviii、I′-Cix、I′-Cx、I′-Cxi和I′-Cxii中的任一个的优选的R³基团是上面为式I化合物描述的那些。

式I′-Ai、I′-Aii、I′-Aiii、I′-Aiv、I′-Av、I′-Avi、I′-Avii、I′-Aviii、I′-Aix、I′-Ax、I′-Axi、I′-Axii、I′-Bi、I′-Bii、I′-Biii、I′-Biv、I′-Bv、I′-Bvi、I′-Bvii、I′-Aviii、I′-Bix、I′-Bx、I′-Bxi、I′-Bxii、I′-Ci、I′-Cii、I′-Ciii、I′-Civ、I′-Cv、I′-Cvi、I′-Cvii、I′-Cviii、I′-Cix、I′-Cx、I′-Cxi和I′-Cxii中的任一个的优选的Q基团是上面为式I化合物描述的那些。

式I′-Ai、I′-Aii、I′-Aiii、I′-Aiv、I′-Av、I′-Avi、I′-Avii、I′-Aviii、I′-Aix、I′-Ax、I′-Axi、I′-Axii、I′-Bi、I′-Bii、I′-Biii、I′-Biv、I′-Bv、I′-Bvi、I′-Bvii、I′-Aviii、I′-Bix、I′-Bx、I′-Bxi、I′-Bxii、I′-Ci、I′-Cii、I′-Ciii、I′-Civ、I′-Cv、I′-Cvi、I′-Cvii、I′-Cviii、I′-Cix、I′-Cx、I′-Cxi和I′-Cxii中的任一个的优选的R²基团是上面为式I化合物描述的那些。

本发明的另一个实施方案涉及式I″化合物：

或其药学上可接受的盐，其中环B、Z¹、Z²、U、T、m、n、p、Q、R¹、R²、R³和R⁶定义如上。

因此，本发明涉及式I″的化合物，其中环A是吡啶(I″-A)、嘧啶(I″-B)或三嗪(I″-C)环，如下所示：

或其药学上可接受的盐，其中Z¹、Z²、U、T、m、n、p、Q、R¹、R²、R³和R⁶定义如上。

式I″-A、I″-B和I″-C中的任一个的优选的(T)_mR¹基团是上面为式I化合物描述的那些。

式I″-A、I″-B和I″-C中的任一个的优选的U基团是上面为式I化合物描述的那些。

式I″-A、I″-B和I″-C中的任一个的优选的R³基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I″-A、I″-B和I″-C中的任一个的优选的Q基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I″-A、I″-B和I″-C中的任一个的优选的R²基团是上面为式I的化合物描述的那些。

根据另一个实施方案，本发明涉及下面的式I″的化合物：

式I″-Ai、I″-Aii、I″-Aiii、I″-Av、I″-Avi、I″-Aviii、I″-Ax、I″-Bi、I″-Bii、I″-Biii、I″-Bv、I″-Bvi、I″-Bviii、I″-Bx、I″-Ci、I″-Cii、I″-Ciii、I″-Cv、I″-Cvi、I″-Cviii和I″-CAx中的任一个的优选的(T)_mR¹基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I″-Ai、I″-Aii、I″-Aiii、I″-Av、I″-Avi、I″-Aviii、I″-Ax、I″-Bi、I″-Bii、I″-Biii、I″-Bv、I″-Bvi、I″-Bviii、I″-Bx、I″-Ci、I″-Cii、I″-Ciii、I″-Cv、I″-Cvi、I″-Cviii和I″-CAx中的任一个的优选的U基团是上面为式I化合物描述的那些。

式I″-Ai、I″-Aii、I″-Aiii、I″-Av、I″-Avi、I″-Aviii、I″-Ax、I″-Bi、I″-Bii、I″-Biii、I″-Bv、I″-Bvi、I″-Bviii、I″-Bx、I″-Ci、I″-Cii、I″-Ciii、I″-Cv、I″-Cvi、I″-Cviii和I″-CAx中的任一个的优选的R³基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I″-Ai、I″-Aii、I″-Aiii、I″-Av、I″-Avi、I″-Aviii、I″-Ax、I″-Bi、I″-Bii、I″-Biii、I″-Bv、I″-Bvi、I″-Bviii、I″-Bx、I″-Ci、I″-Cii、I″-Ciii、I″-Cv、I″-Cvi、I″-Cviii和I″-CAx中的任一个的优选的Q基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式I″-Ai、I″-Aii、I″-Aiii、I″-Av、I″-Avi、I″-Aviii、I″-Ax、I″-Bi、I″-Bii、I″-Biii、I″-Bv、I″-Bvi、I″-Bviii、I″-Bx、I″-Ci、I″-Cii、I″-Ciii、I″-Cv、I″-Cvi、I″-Cviii和I″-CAx中的任一个的优选的R²基团是上面为式I的化合物描述的那些。

本发明的另一个优选的实施方案涉及式II化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

Z¹和Z²中的每一个独立地选自N或CH；

T是饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的至多两个亚甲基单元被任选地和独立地替换为-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRCO₂-、-O-、-NRC(O)NR、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、-S-、-SO-、-SO₂-、-NR-、-SO₂NR-或-NRSO₂-；

U选自-NR-、-NRC(O)-、-NRC(O)NR-、-NRCO₂-、-O-、-C(O)NR-、-C(O)-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRSO₂-、-SO₂NR-、-NRSO₂NR-或-SO₂-；

m和n中的每一个独立地选自0或1；

p选自0、1、2、3或4；

R¹选自R或Ar；

每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基，或：

同一氮上的两个R和该氮一起形成具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-8元的杂环或杂芳环；

每一个Ar是任选地被取代的环，它选自6-10元的芳族环、5-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环；

y是0-6；

R³选自R、Ar、-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或CN；

每一个R⁵独立地选自任选地被取代的C_1-6脂族基、Ar、OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂、N(R)₂、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂；和

每一个R⁶独立地选自R、F、Cl、N(R)₂、OR、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN、SO₂N(R)₂、N(R)O、ON(R)或N(R)N(R)。

因此，本发明涉及式II的化合物，其中环A是吡啶(II-A)、嘧啶(II-B)或三嗪(II-C)环，如下所示：

或其药学上可接受的盐，其中T、U、m、n、p、R¹、R³、R⁵和R⁶定义如上。

式II-A、II-B和II-C中的任一个的优选的T_mR¹基团是上面为式I化合物描述的那些。

式II-A、II-B和II-C中的任一个的优选的R³基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式II-A、II-B和II-C中的任一个的优选的R⁵基团是上面为式I的化合物描述的那些。

本发明的另一个优选实施方案涉及式III的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

Z¹和Z²中的每一个独立地选自N或CH；

T和Q中的每一个独立地选自饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的至多两个亚甲基单元被任选地和独立地替换为-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRCO₂-、-O-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、-S-、-SO-、-SO₂-、-NR-、-SO₂NR-或-NRSO₂-；

U选自-NR-、-NRC(O)-、-NRC(O)NR-、-NRCO₂-、-O-、-C(O)NR-、-C(O)-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRSO₂-、-SO₂NR-、-NRSO₂NR-或-SO₂-；

m和n中的每一个独立地选自0或1；

p选自0、1、2、3或4；

R¹选自R或Ar；

每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基，或：

同一氮上的两个R和该氮一起形成具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-8元的杂环或杂芳环；

每一个Ar是任选地被取代的环，它选自6-10元的芳族环、5-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环；

R⁴选自R、(CH₂)_wOR、(CH₂)_wN(R)₂或(CH₂)_wSR，其中w是0-4；

y是0-6；

R³选自R、Ar、-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或CN；

每一个R⁵独立地选自任选地被取代的C_1-6脂族基、Ar、OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂、N(R)₂、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂；和

每一个R⁶独立地选自R、F、Cl、N(R)₂、OR、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN、SO₂N(R)₂、N(R)O、ON(R)或N(R)N(R)。

因此，本发明涉及式III的化合物，其中环A是吡啶(III-A)、嘧啶(III-B)或三嗪(III-C)环，如下所示：

或其药学上可接受的盐，其中T、U、m、n、p、R¹、R³、R⁴、R⁵和R⁶定义如上。

式III-A、III-B和III-C中的任一个的优选的(T)_mR¹基团是上面为式I化合物描述的那些。

式III-A、III-B和III-C中的任一个的优选的U基团是上面为式I化合物描述的那些。

式III-A、III-B和III-C中的任一个的优选的R³基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式III-A、III-B和III-C中的任一个的优选的R⁵基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式III-A、III-B和III-C中的任一个的优选的R⁴基团是上面为式I的化合物描述的那些。

本发明的另一个优选的实施方案涉及式IV的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

Z¹和Z²中的每一个独立地选自N或CH；

Q选自NRC(O)、C(O)NR、NRSO₂或SO₂NR；

T是饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的至多两个亚甲基单元被任选地和独立地替换为-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRCO₂-、-O-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、-S-、-SO-、-SO₂-、-NR-、-SO₂NR-或-NRSO₂-；

U选自-NR-、-NRC(O)-、-NRC(O)NR-、-NRCO₂-、-O-、-C(O)NR-、-C(O)-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRSO₂-、-SO₂NR-、-NRSO₂NR-或-SO₂-；

m和n中的每一个独立地选自0或1；

p选自0、1、2、3或4；

R¹选自R或Ar；

每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基，或：

同一氮上的两个R和该氮一起形成具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-8元的杂环或杂芳环；

每一个Ar是任选地被取代的环，它选自6-10元的芳族环、5-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环；

y是0-6；

R³选自R、Ar、-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或CN；

每一个R⁵独立地选自任选地被取代的C_1-6脂族基、Ar、OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂、N(R)₂、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂；和

每一个R⁶独立地选自R、F、Cl、N(R)₂、OR、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN、SO₂N(R)₂、N(R)O、ON(R)或N(R)N(R)。

因此，本发明涉及式IV的化合物，其中环A是吡啶(IV-A)、嘧啶(IV-B)或三嗪(IV-C)环，如下所示：

或其药学上可接受的盐，其中Q、T、U、m、n、p、R¹、R³、R⁵和R⁶定义如上。

式IV-A、IV-B和IV-C中的任一个的优选的Q基团选自NRC(O)或C(O)NR。更优选地，Q是NHC(O)或C(O)NH。

式IV-A、IV-B和IV-C中的任一个的优选的T_mR¹基团是上面为式I化合物描述的那些。

式IV-A、IV-B和IV-C中的任一个的优选的R³基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式IV-A、IV-B和IV-C中的任一个的优选的R⁵基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式IV-A、IV-B和IV-C中的任一个的更优选的R⁵基团选自C_5-6环烷基、苯基、5-9元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或5-6元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环。这样的更优选的R⁵基团的实例是吡啶-3-基、吡啶-4-基、吗啉-4-基、硫代吗啉-4-基、咪唑基、呋喃-2-基、1，2，3，4-四氢异喹啉、四氢呋喃-2-基、环己基或苯基，其中每一个基团是任选地被取代的。

根据另一个优选的实施方案，式IV-A、IV-B和IV-C中的任一个的一个R⁵基团选自苯基或5-9元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环，式IV-A、IV-B和IV-C中的任一个的另一个R⁵基团选自5-6元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环。更优选地，式IV-A、IV-B和IV-C中的任一个的一个R⁵基团选自任选地被取代的苯基、吡啶基、噻唑基、咪唑基或呋喃基，式IV-A、IV-B和IV-C中的任一个的另一个R⁵基团选自任选地被取代的吗啉基、硫代吗啉基、哌啶基、哌嗪基或吡咯烷基。

本发明的另一个实施方案涉及式V′化合物：

或其药学上可接受的盐，其中Z¹、Z²、U、T、m、n、p、Q′、R¹、R^X、R³和R⁶定义如上。

因此，本发明涉及式V′的化合物，其中环A是吡啶(V′-A)、嘧啶(V′-B)或三嗪(V′-C)环，如下所示：

或其药学上可接受的盐，其中Q′、T、U、m、n、p、R¹、R³、R^X和R⁶定义如上。

式V′-A、V′-B和V′-C中的任一个的优选的(T)_mR¹基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式V′-A、V′-B和V′-C中的任一个的优选的U基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式V′-A、V′-B和V′-C中的任一个的优选的R³基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式V′-A、V′-B和V′-C中的任一个的优选的Q′基团是上面为式V的化合物描述的那些。

式V′-A、V′-B和V′-C中的任一个的优选的R^X基团是上面为式V的化合物描述的那些。

本发明的另一个实施方案涉及式VI化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

T是饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的至多两个亚甲基单元被任选地和独立地替换为-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRCO₂-、-O-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、-S-、-SO-、-SO₂-、-NR-、-SO₂NR-或-NRSO₂-；

每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基，或：

同一氮上的两个R和该氮一起形成具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-8元的杂环或杂芳环；

每一个R′独立地选自C_1-6脂族基，其中所述的脂族基被一个Ar基团取代，且任选地被1-2个另外的独立地选自下述基团的基团取代：卤素、-OR、-SR、-NO₂、-CN、-N(R)₂、-NRC(O)R、-NRC(O)N(R)₂、-NRCO₂R、-NRNRC(O)R、-NRNRC(O)N(R)₂、-NRNRCO₂R、-C(O)C(O)R、-C(O)CH₂C(O)R、-CO₂R或-C(O)R；

U选自-NR-、-NRC(O)-、-NRC(O)NR-、-NRCO₂-、-O-、-C(O)NR-、-C(O)-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRSO₂-、-SO₂NR-、-NRSO₂NR-或-SO₂-；

m和n中的每一个独立地选自0或1；

p选自0、1、2、3或4；

R¹选自R或Ar；

每一个Ar是任选地被取代的环，它选自6-10元的芳族环、5-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环；

y是0-6；

R^X是-(CH₂)_yR⁵

R³选自R、Ar、-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或CN；

w是0-4；

每一个R⁵独立地选自任选地被取代的C_1-6脂族基、Ar、OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂、N(R)₂、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂；和

每一个R⁶独立地选自R、F、Cl、N(R)₂、OR、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN、SO₂N(R)₂、N(R)O、ON(R)或N(R)N(R)。

因此，本发明涉及式VI的化合物，其中环A是吡啶(VI-A)、嘧啶(VI-B)或三嗪(VI-C)环，如下所示：

或其药学上可接受的盐，其中U、T、m、n、p、R′、R¹、R^X、R³和R⁶定义如上。

式VI-A、VI-B和VI-C中的任一个的优选的(T)_mR¹基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式VI-A、VI-B和VI-C中的任一个的优选的U基团是上面为式I的化合物描述的那些。

式VI-A、VI-B和VI-C中的任一个的优选的R³基团是上面为式I化合物描述的那些。

式VI-A、VI-B和VI-C中的任一个的优选的R′基团是上面为式V的化合物描述的那些。

式VI-A、VI-B和VI-C中的任一个的优选的R^X基团是上面为式V的化合物描述的那些。

式I′化合物的示例性结构如下面的表1所示。

表1：式I′化合物

式I″化合物的示例性结构如下面的表2所示。

表2：式I″化合物

式V′化合物的示例性结构如下面的表3所示。

表3：式V′化合物

总体上，本发明的化合物可以通过本领域的技术人员已知的用于类似化合物的方法来制备，如一般路线图I、II、III、IV、V、VI、VII和VIII和下面所述的合成实施例所说明的。

路线图I

试剂和条件：(a)Me₂NC(OMe)₂H，回流，12小时；(b)CH₃CN，回流，12小时；(c)浓HCl，回流，12小时；(d)H₂N-R²、EDCI、HOBt、THF，12小时，室温。

上面的路线图I显示了用于制备当Q是C(O)NH时的本发明的式I化合物的一般合成路线。在步骤(a)中，烯胺中间体 2是通过用Me₂NC(OMe)₂H回流处理 1制备的。

通过用胍 3高温处理烯胺2形成了步骤(b)的嘧啶化合物 4。根据步骤(c)水解中间体 4的氰基形成羧酸 5，然后用多种式R²-NH₂胺处理它，形成式 6酰胺化合物。本领域的技术人员能够理解，通过本领域已知的方法可以将多种式R²-NH₂胺连接到羧酸 5上。

路线图II

试剂和条件：(a)MeOH、K₂CO₃，回流；(b)m-氯过苯酸、CH₂Cl₂；(c)H₂N-R²、THF，回流，12小时。

上面的路线图II显示了制备嘧啶化合物 4的替代方法；通过使用上面的路线图I所述的方法或本领域技术人员已知的方法，可以用该嘧啶化合物 4制备本发明的化合物。

用S-甲基硫脲环化上面路线图I所述的步骤(a)的烯胺 2，形成2-硫甲基嘧啶 9，它可以再用m-CPBA氧化成砜 10。随后可以用式R³(U)_n-NH₂胺替换磺酰基，生成取代的氨基嘧啶 4。

路线图III

试剂和条件：a)i.α-溴-2-苯基醋酸、草酰氯，ii.吗啉、二异丙基乙基胺；b)DMF-DMA，115℃；c)R³(U)_n-胍、K₂CO₃、DMF，115℃。

上面的路线图III说明了制备式IV化合物的一般方法。在步骤(a)中，在存在二异丙基乙基胺的情况下，用α-溴-2-苯基醋酸和草酰氯、然后用吗啉处理1-(4-氨基-苯基)-乙酮，形成化合物12。虽然路线图III说明了α-溴-2-苯基醋酸和吗啉在步骤(a)中的应用，本领域的技术人员能够认识到，在步骤(a)的反应中也可以用其它芳基醋酸和杂环基团制备多种式IV化合物。然后在115℃用DMF-DMA以基本上与路线图I的步骤(a)类似的方式处理化合物12，形成烯胺13。用胍处理烯胺13，形成氨基-嘧啶化合物14。本领域的技术人员能够认识到，在步骤(c)的反应中可以用多种胍(包括取代的和未取代的胍)通过本领域已知的方法制备多种式IV化合物。

路线图IV

试剂和条件：(a)Pd(PPh₃)₄、Na₂CO₃、DME，80℃；(b)R³(U)_n-NH₂、DMSO，110℃；(c)NaOH、MeOH，80℃；和(d)R²-NH₂、PyBOP、DIEA、DMF，室温。

上面的路线图IV显示了制备本发明的化合物(其中环A是吡啶基)的一般方法。在步骤(a)中，用硼酸(16)处理碘-吡啶衍生物(15)，形成二芳基中间体(17)。化合物17的氟基被替换为R³(U)_n-NH₂，形成酯化合物(18)。然后水解酯官能团，用合适的胺偶联，形成化合物(20)。本领域的技术人员能够认识到，多种胺能与羧酸酯化合物19偶联，形成多种本发明的化合物。

路线图V

试剂和条件：(a)R³(U)_n-NH₂、TEA、DCM，0℃；和(b)Pd(PPh₃)₄、Na₂CO₃、DME，80℃。

上面的路线图V显示了制备本发明的化合物(其中环A是三嗪基)的一般方法。在步骤(a)中，用式R³(U)_n-NH₂胺处理二氯三嗪化合物(21)，形成单氯化合物(22)。然后用硼酸(16)处理氯中间体(22)，形成二芳基中间体(17)。化合物(17)通过上述的一般方法用于制备本发明的化合物。

路线图VI

上面的路线图VII显示了制备2，4，5-三氯嘧啶(可以用作制备本发明的化合物的中间体)的一般方法。用三氯氧磷和N，N-二甲基苯胺处理5-氯尿嘧啶，形成2，4，5-三氯嘧啶。

路线图VII

试剂和条件：(a)Pd(PPh₃)₄、Na₂CO₃、DME，80℃；(b)R³(U)_n-NH₂、DMSO，110℃；(c)NaOH、MeOH，80℃；和(d)R²-NH₂，PyBOP、DIEA、DMF，室温。

上面的路线图VII显示了制备本发明的嘧啶化合物(其中T_(m)R¹是氯)的替代方法。用硼酸(16)处理2，4，5-三氯嘧啶，形成二芳基中间体(26)。以基本上与上面的一般路线图所述相似的方式通过这里所述的合成实施例进行步骤(b)、(c)和(d)。

路线图VIII

试剂和条件：(a)R²NH₂、TEA、DCM，室温；(b)双频哪醇酰(pinacolato)二硼、Pd(pddf)₂、DMF，70℃；(c)2，4，6-三氯嘧啶、Pd(PPh₃)₄、THF，80℃；(d)U_(n)R³NH₂、DMSO、75℃。

上面的路线图VIII显示了制备本发明的化合物(其中Q是-SO₂NH-)的一般方法。在步骤(a)中，用R²NH₂处理碘苯磺酰氯(″对碘苯磺酰氯″)，形成磺酰胺化合物(31)。以基本上与上面的一般路线图所述相似的方式通过这里所述的合成实施例进行步骤(b)、(c)和(d)。

这里所述的化合物和组合物通常可用于抑制一种或多种酶的蛋白激酶活性。关于激酶结构、功能和它们在疾病或疾病症状中的作用的进一步信息，可以从Protein Kinase Resource网站获得。(http：//Kinases.sdsc.edu/html/index.shtml)。

这里所述的化合物和组合物能抑制的和能作为这里所述的方法的使用对象的激酶实例包括但不限于ERK1、ERK2、AKT3、GSK3、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK1、JAK2、JAK3、CDK1、CDK2、CDK5、LCK、LYN、FLT3、MK2、MKK4、MKK6、MEK1、Mapkap1、PDK1、p70s6k、Aurora-1、Aurora-2、Aurora-3、cMET、IRAK1、IRAK2、TEC、FGF1R(＝FGR-1)、FGF2R(＝FGR-2)、IKK-1(＝IKK-α＝CHUK)、IKK-2(＝IKK-β)、KIT、PKA、PKB(包括全部PKB亚型)、PKC(包括全部PKC亚型)、REDK、CHK、SAPK、PIM和BARK和这些激酶的全部亚型。因此，本发明的化合物和组合物还特别适用于治疗包含一种或多种前述激酶的疾病和疾病症状。

在一个特别的实施方案中，本发明的化合物和组合物是ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和CDK2中的一种或多种的抑制剂，这样这些化合物和组合物特别适用于治疗或减轻与ERK2、AKT3、GSK3、P70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2相关的疾病或疾病症状的严重程度。

可以体外地、体内地或在细胞系中检测在本发明中用作ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2的抑制剂的化合物的活性。体外实验包括检测抑制激活的ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2的磷酸化活性或ATP酶活性的实验。互换的体外实验能对抑制剂结合ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2的能力进行定量。抑制剂的结合可以如下测定：在结合之前放射标记该抑制剂，分离抑制剂/ERK2、抑制剂/AKT3、抑制剂/GSK3、抑制剂/p70s6k、抑制剂/PDK1、抑制剂/Aurora-2、抑制剂/ROCK、抑制剂/SRC、抑制剂/SYK、抑制剂/ZAP70、抑制剂/JNK3、抑制剂/JAK3、抑制剂/TEC、抑制剂/LCK、抑制剂/FLTS或抑制剂/CDK2复合物，检测结合的放射标记的量。或者，通过竞争实验检测抑制剂的结合，其中将新抑制剂与结合到已知的放射性配体上的ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2一起温育。检测在本发明中用作ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和CDK2激酶的抑制剂的化合物的详细条件如下面的实施例所述。

根据另一个实施方案，本发明提供了一种组合物，它含有本发明的化合物或其药学上可接受的衍生物和药学上可接受的载体、辅剂或赋形剂。化合物在本发明的组合物中的量是这样的，它能可检测地有效地抑制生物样品或患者中的蛋白激酶，更具体地是ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2激酶。优选地，本发明的组合物制成可以给需要该组合物的患者施用的制剂。最优选地，本发明的组合物制成给患者经口施用的制剂。

如这里所使用的术语″患者″是指动物，优选地是哺乳动物，最优选地是人。

术语″药学上可接受的载体、辅剂或赋形剂″是指无毒性的载体、辅剂或赋形剂，它不会破坏与其一起配成制剂的化合物的药学活性。可以在本发明的组合物中使用的药学上可接受的载体、辅剂或赋形剂包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白例如人血清白蛋白、缓冲剂例如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和的植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质，例如硫酸精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅胶、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段共聚物、聚乙二醇和羊毛脂。

如这里所使用的术语″可检测地抑制″是指样品与等价样品之间的ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2活性的可检测的变化，所述的样品含有所述的组合物和ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2激酶，所述的等价样品含有ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2激酶但不含有所述的组合物。

如这里所使用的，术语″JNK″与术语″JNK激酶″和″JNK家族激酶″可互换地使用。优选地，JNK是指JNK3激酶。

如这里所使用的，术语″JAK″与术语″JAK激酶″和″JAK家族激酶″可互换地使用。优选地，JAK是指JAK3激酶。

″药学上可接受的衍生物″是指本发明的化合物的无毒性的盐、酯、酯的盐或其它衍生物，给受体施用后，能直接地或间接地提供本发明的化合物或其抑制剂活性的代谢产物或残余物。

如这里所使用的，术语″其抑制剂活性的代谢产物或残余物″是指其代谢产物或残余物也是ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2激酶的抑制剂。

本发明的化合物的药学上可接受的盐包括来自药学上可接受的无机的或有机的酸和碱的那些。合适的酸盐的实例包括醋酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡糖庚酸盐、甘油磷酸盐、羟乙酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢氯酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟乙基磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、pectinate、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐(picrate)、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫代氰酸盐、甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。当其本身不是药学上可接受的时，其它的酸(例如草酸)可以用于制备盐，该盐可以在制备本发明的化合物和它们的药学上可接受的酸加成盐的过程中用作中间体。

来自合适碱的盐包括碱金属(例如钠和钾)盐、碱土金属(例如镁)盐、铵盐和N⁺(C_1-4烷基)₄盐。本发明还包括这里公开的化合物的任何碱性的含氮基团的季铵化反应。通过这样的季铵化反应可以得到水溶性的或油溶性的可分散的产物。

本发明的组合物可以经口地、肠胃外地、吸入喷雾地、局部地、直肠地、经鼻地、口腔地、阴道地或通过植入储蓄器施用。如这里所使用的术语″肠胃外的″包括皮下的、静脉内的、肌肉内的、关节内的、滑膜内的、膜内的、鞘内的、肝内的、病灶内的和颅内的注射或灌输技术。优选地，该组合物经口地、腹膜内地或静脉内地施用。本发明的组合物的无菌注射形式可以是水悬液或油悬液。这些悬浮液可以通过本领域已知的技术、使用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂来制备。无菌注射制剂还可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，例如作为在1，3-丁二醇中的溶液。在可接受的赋形剂和溶剂中，可以使用的是水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌的不挥发性油常规地用作溶剂或悬浮赋形剂。

为此目的，可以使用任何温和的不挥发性油，包括合成的单-或二-甘油酯。脂肪酸(例如油酸和其甘油酯衍生物)可以用于制备注射剂，因为它们是天然的药学上可接受的油，例如橄榄油或蓖麻油，特别是它们的聚氧乙烯化形式。这些油溶液或悬浮液还可以含有长链醇稀释剂或分散剂，例如羧甲基纤维素或类似的在制备药学上可接受的制剂形式(包括乳状液和悬浮液)时经常使用的分散剂。为了制剂目的，还可以使用其它常用的表面活性剂(例如吐温、Span和其它乳化剂)或常用于生产药学上可接受的固体、液体或其它剂量形式的生物利用度增强剂。

本发明的药学上可接受的组合物可以以任何经口地可接受的剂量形式(包括但不限于胶囊、片剂、水性悬浮液或溶液)经口地施用。在经口施用片剂的情况下，常用的载体包括乳糖和玉米淀粉。典型地还加入润滑剂，例如硬脂酸镁。对于经口施用的胶囊形式，有用的稀释剂包括乳糖和干燥的玉米淀粉。当需要经口施用水悬液时，可以将活性成分与乳化剂和悬浮剂组合。如果需要，还可以加入某些甜味剂、矫味剂或着色剂。

或者，本发明的药学上可接受的组合物可以以用于直肠施用的栓剂形式施用。它们可以通过将试剂与合适的无刺激的赋形剂相混合来制备，所述的赋形剂在室温下为固态、但在直肠稳定下为液态，因此在直肠中会熔化以释放药物。这样的材料包括可可油、蜂蜡和聚乙二醇。

本发明的药学上可接受的组合物还可以局部地施用，特别当治疗目标包括通过局部应用能够容易地接近的区域或器官时，包括眼病、皮肤病或下肠道。对于这些区域或器官中的每一种，可以容易地制备合适的局部制剂。

用于下肠道的局部应用可以通过栓剂制剂(见上)或合适的灌肠制剂来实现。还可以使用局部的透皮贴剂。

为了局部应用，药学上可接受的组合物可以制成合适的软膏剂，它含有悬浮或溶解在一种或多种载体中的活性组分。用于局部施用本发明的化合物的载体包括但不限于矿物油、液态矿脂、白矿脂、丙二醇、聚氧乙烯-聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。或者，药学上可接受的组合物可以制成合适的洗剂或乳剂，其含有悬浮或溶解在一种或多种药学上可接受的载体中的活性组分。合适的载体包括但不限于矿物油、山梨醇酐单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鲸蜡基酯蜡、鲸蜡硬脂醇(cetearyl alcohol)、2-辛基十二烷醇、苄基醇和水。

为了眼用，药学上可接受的组合物可以制成在等渗的、pH调节的无菌盐水中的微粉化的悬浮液，或者优选地，制成在等渗的、pH调节的无菌盐水中的含或不含防腐剂(例如苄基氯铵)的溶液。或者，为了眼用，药学上可接受的组合物可以制成软膏剂，例如矿脂。

本发明的药学上可接受的组合物还可以通过鼻气雾剂或吸入剂施用。可以根据药物制剂领域熟知的方法，使用苄基醇或其它合适的防腐剂、增强生物利用度的吸收促进剂、碳氟化合物和/或其它常规增溶剂或分散剂制备这样的组合物，且可以制成盐水溶液。

最优选地，本发明的药学上可接受的组合物是制成经口施用的制剂。

可以与载体材料组合生产单一剂量形式的组合物的本发明的化合物的量可以根据要治疗的宿主和特定的给药模式而变化。优选地，组合物应当制成这样的，可以给接受这些组合物的患者施用剂量为0.01-100mg/kg体重/天的抑制剂。

还应当理解，针对任何特定患者的特异性的剂量和治疗方案取决于许多因素，包括施用的特定化合物的活性、年龄、体重、总体健康情况、性别、饮食、给药时间、排泄速度、药物组合和治疗医生的判断以及要治疗的特定疾病的严重程度。本发明的化合物在组合物中的量也取决于在组合物中的特定化合物。

根据一个实施方案，本发明涉及一种抑制生物样品中的蛋白激酶活性的方法，其包括将所述的生物样品与本发明的化合物或含有所述化合物的组合物相接触的步骤。

根据另一个实施方案，本发明涉及一种抑制生物样品中的ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2激酶活性的方法，其包括将所述的生物样品与本发明的化合物或含有所述化合物的组合物相接触的步骤。

如这里所使用的，术语″生物样品″包括但不限于细胞培养物或其提取物，从哺乳动物或其提取物得到的活组织检查材料，和血液、唾液、尿、粪便、精液、眼泪或其它体液或其提取物。

对生物样品中的蛋白激酶、或选自ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2激酶的蛋白激酶的活性的抑制可以用于多种目的，这是本领域技术人员已知的。这样的目的的实例包括但不限于输血、器官移植、生物标本储藏和生物学实验。

本发明的另一个实施方案涉及抑制患者的蛋白激酶活性的方法，其包括给所述的患者施用本发明的化合物或含有所述化合物的组合物的步骤。

根据另一个实施方案，本发明涉及抑制患者的ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3和/或CDK2激酶活性的方法，其包括给所述的患者施用本发明的化合物或含有所述化合物的组合物的步骤。

根据另一个实施方案，本发明提供了治疗或减轻患者的ERK2介导的疾病或障碍的严重程度的方法，其包括给所述的患者施用本发明的组合物的步骤。

如这里所使用的术语″ERK2介导的疾病或症状″是指已知ERK在其中起作用的任何疾病或其它有害的障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知ERK在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻下述疾病或障碍的严重程度的方法：癌症、中风、糖尿病、肝肥大、心血管病包括心肥大、阿尔茨海默氏病、囊肿性纤维化、病毒病、自身免疫病、动脉粥样硬化、再狭窄、银屑病、变态反应病包括哮喘、炎症、神经障碍病和与激素相关的疾病，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

根据另一个实施方案，本发明涉及治疗癌症的方法，所述的癌症选自乳腺癌、卵巢癌、子宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、泌尿生殖道癌、食道癌、喉癌、成胶质细胞瘤、成神经细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤、胰腺癌、甲状腺癌、滤胞癌、未分化癌、乳头状癌、精原细胞瘤、黑色素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和胆道癌、肾癌、骨髓病、淋巴病、霍奇金氏病、毛细胞、口腔和咽(口的)、唇、舌、嘴、咽、小肠、结肠-直肠、大肠、直肠、脑和中枢神经系统和白血病。

另一个实施方案涉及治疗需要治疗的患者的黑色素瘤、乳腺癌、结肠癌或胰腺癌的方法。

如这里所使用的术语″AKT介导的疾病″或″症状″是指已知AKT在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知AKT在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻选自增殖病、癌症和神经退化病的疾病或障碍的严重程度的方法，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

如这里所使用的术语″GSK3介导的疾病″或″症状″是指已知GSK3在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知GSK3在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻下述疾病或障碍的严重程度的方法：自身免疫病、炎症、代谢障碍、精神病、糖尿病、血管生成病、tauopothy、神经障碍或神经退化病、脊髓损伤、青光眼、脱发或心血管病，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

根据另一个实施方案，本发明涉及治疗或减轻下述疾病或障碍的严重程度的方法：变态反应、哮喘、糖尿病、阿尔茨海默氏病、杭廷顿氏舞蹈病、帕金森氏病、与AIDS相关的痴呆、肌萎缩性脊髓侧索硬化(ALS、鲁盖瑞氏症)、多发性硬化(MS)、头创伤引起的损伤、精神分裂症、焦虑、双极型障碍、tauopothy、脊髓或外周神经损伤、心肌梗死、心肌细胞肥大、青光眼、注意力不集中症(ADD)、抑郁、睡眠障碍、再灌注/局部缺血、中风、血管生成病或脱发，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的化合物或其组合物。

根据一个优选的实施方案，本发明的方法涉及治疗或减轻中风的严重程度。

根据另一个优选的实施方案，本发明的方法涉及治疗或减轻神经退化或神经障碍的严重程度。

本发明的另一个方面涉及降低雄性患者的精子运动的方法，其包括给需要治疗的患者施用本发明的化合物或其组合物。

如这里所使用的术语″p70S6K介导的障碍″或″疾病″是指已知p70S6K在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。术语″p70S6K介导的障碍″或″疾病″还指通过用p70S6K抑制剂治疗能够减轻的那些疾病或障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知p70S6K在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻选自增殖病(例如癌症和结节性硬化症)的疾病或障碍的严重程度的方法，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

如这里所使用的术语″PDK1介导的障碍″或″疾病″是指已知PDK1在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。术语″PDK1介导的障碍″或″疾病″还指通过用PDK1抑制剂治疗能够减轻的那些疾病或障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知PDK1在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻选自增殖病和胰腺癌、前列腺癌或卵巢癌的疾病或障碍的严重程度的方法，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

如这里所使用的术语″Tec家族酪氨酸激酶介导的疾病″是指已知Tec家族激酶在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知Tec家族激酶在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻选自自身免疫病、炎症、增殖病和过度增殖病和免疫地介导的疾病(包括移植的器官或组织的排斥和获得性免疫缺陷综合症(AIDS))的疾病或障碍的严重程度的方法，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

例如，与Tec家族酪氨酸激酶相关的疾病和障碍包括呼吸道疾病，包括但不限于可逆的阻滞性呼吸道疾病，包括哮喘，例如支气管的、变态反应的、固有的、非固有的和粉尘的哮喘，特别是慢性或长期的哮喘(例如，晚期哮喘呼吸道过度反应)和支气管炎。其它与Tec家族酪氨酸激酶相关的疾病和障碍包括那些特征在于鼻粘膜炎症的，包括急性鼻炎、过敏性鼻炎、萎缩性鼻炎和慢性鼻炎，包括干酪性鼻炎、肥厚性鼻炎、鼻炎化脓、干燥性鼻炎和药物性鼻炎；膜性鼻炎包括格鲁布性鼻炎、纤维蛋白性鼻炎和假膜性鼻炎和腺病性鼻炎，季节性鼻炎包括神经性鼻炎(rhinitis nervosa)(枯草热)和血管舒缩性鼻炎、结节病、农夫肺和相关疾病、肺纤维症和特发性间质性肺炎。

与Tec家族酪氨酸激酶相关的其它疾病和障碍包括骨和关节病，包括但不限于类风湿性关节炎(中形成角膜翳)、血清反应阴性的脊椎关节病(包括强直性脊柱炎、银屑病关节炎和瑞特综合症)、贝堤特氏病、舍格伦综合征和全身性硬化。

与Tec家族酪氨酸激酶相关的其它疾病和障碍包括皮肤病和障碍，包括但不限于银屑病、全身性硬化、特应性皮炎、接触性皮炎和其它湿疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔藓、天疱疮、大疱性天疱疹、大疱性表皮松解症、荨麻疹、皮血管炎(angiodermas)、血管炎、红斑、皮肤嗜曙红细胞增多、葡糖膜炎、脱发、簇状的和春季结膜炎。

与Tec家族酪氨酸激酶相关的其它疾病和障碍包括胃肠道病和障碍，包括但不限于腹腔病、直肠炎、嗜曙红细胞性胃肠炎、肥大细胞病、胰腺炎、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、对肠有远距离影响的与食物相关的变态反应(例如偏头痛、鼻炎和湿疹)。

与Tec家族酪氨酸激酶相关的其它疾病和障碍包括其它组织的那些疾病和障碍以及系统性疾病，包括但不限于多发性硬化、动脉硬化症、获得性免疫缺陷综合症(AIDS)、红斑狼疮、系统性狼疮、红斑、桥本甲状腺炎、重症肌无力、I型糖尿病、肾病综合症、嗜曙红细胞筋膜炎、IgE过多综合症、瘤型麻风、赛谢综合征和先天性血小板减少症紫癜、血管成形术后的再狭窄、肿瘤(例如白血病、淋巴瘤)、动脉硬化症和系统性红斑狼疮。

与Tec家族酪氨酸激酶相关的其它疾病和障碍包括移植物的排斥，包括但不限于例如肾、心、肝、肺、骨髓、皮肤和角膜移植后的急性和慢性移植物的排斥；和慢性移植物抗宿主病。

根据另一个实施方案，本发明涉及治疗或减轻一种或多种上述的与Tec家族酪氨酸激酶相关的疾病和障碍的严重程度的方法，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

如这里所使用的术语″Aurora介导的疾病″是指已知Aurora家族但不激酶在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知Aurora在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻下述疾病或障碍的严重程度的方法：黑色素瘤、白血病或结肠癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、子宫颈癌、肺癌、CNS、肾癌、前列腺癌、淋巴瘤癌、成神经细胞瘤、胰腺癌、白血病和膀胱癌。

本发明的另一个方面涉及干扰患者癌细胞的有丝分裂，其包括给所述患者施用本发明的化合物或其组合物的步骤。

根据另一个实施方案，本发明涉及治疗或减轻患者的癌症严重程度的方法，其包含用本发明的化合物或其组合物抑制Aurora-1、Aurora-2和/或Aurora-3干扰癌细胞的有丝分裂的步骤。

如这里所使用的术语″ROCK介导的障碍″或″疾病″是指已知ROCK在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。术语″ROCK介导的障碍″或″疾病″还指通过用ROCK抑制剂治疗能够减轻的那些疾病或障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知ROCK在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻下述疾病或障碍的严重程度的方法：高血压、心绞痛、脑血管收缩、哮喘、外周循环病、早产、癌症、动脉硬化、痉挛、视网膜病、炎症、自身免疫病、AIDS和骨质疏松，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

如这里所使用的术语″SRC介导的障碍″或″SRC介导的疾病″是指已知SRC在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。术语″SRC介导的障碍″或″SRC介导的疾病″还指通过用SRC抑制剂治疗能够减轻的那些疾病或障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知SRC在其中起作用的疾病的严重程度的方法。更具体地，本发明涉及治疗或减轻疾病或障碍的严重程度的方法：高钙血症、骨质疏松症、骨关节炎、癌症、骨转移的症状疗法和佩吉特氏病，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

如这里所使用的术语″SYK介导的疾病″或SYK介导的障碍″是指已知SYK蛋白激酶在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知SYK在其中起作用的疾病的严重程度的方法。更具体地，本发明涉及治疗或减轻选自变态反应病的疾病或障碍的严重程度的方法，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

根据另一个实施方案，本发明涉及治疗或减轻需要治疗的患者的哮喘的严重程度的方法，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。如这里所使用的，术语″哮喘″包括支气管的、变态反应的、固有的、非固有的和粉尘哮喘，特别是慢性或长期的哮喘(例如，晚期哮喘呼吸道过度反应)和支气管炎。

如这里所使用的术语″ZAP70介导的疾病″是指已知ZAP70在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知ZAP70在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻选自自身免疫病、炎症、增殖病和过度增殖病和免疫地介导的疾病的疾病或障碍的严重程度的方法，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

根据另一个实施方案，本发明涉及治疗或减轻下述疾病或障碍的严重程度的方法：移植的器官或组织的排斥、获得性免疫缺陷综合症(AIDS)、移植物的排斥，包括但不限于例如肾、心、肝、肺、骨髓、皮肤和角膜移植后的急性和慢性移植物的排斥；和慢性移植物抗宿主病。

根据另一个实施方案，本发明涉及治疗或减轻特征如下的疾病或障碍的严重程度的方法：鼻粘膜炎症，包括急性鼻炎、过敏性鼻炎、萎缩性鼻炎和慢性鼻炎，包括干酪怀鼻炎、肥厚性鼻炎、鼻炎化脓、干燥性鼻炎和药物性鼻炎；膜性鼻炎包括格鲁布性鼻炎、纤维蛋白性鼻炎和假膜性鼻炎和腺病性鼻炎，季节性鼻炎包括神经性鼻炎(枯草热)和血管舒缩性鼻炎、结节病、农夫肺和相关疾病、肺纤维症和特发性间质性肺炎。

根据另一个实施方案，本发明涉及治疗或减轻骨和关节疾病或障碍的严重程度的方法，包括类风湿性关节炎(中形成角膜翳)、血清反应阴性的脊椎关节病(包括强直性脊柱炎、银屑病关节炎和瑞特综合症)、贝堤特氏病、舍格伦综合征和全身性硬化。

根据另一个实施方案，本发明涉及治疗或减轻皮肤疾病或障碍的严重程度的方法，包括但不限于银屑病、全身性硬化、特应性皮炎、接触性皮炎和其它湿疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔藓、天疱疮、大疱性天疱疹，大疱性表皮松解症、荨麻疹、皮血管炎(angiodermas)、血管炎、红斑、皮肤嗜曙红细胞增多、葡糖膜炎、脱发、簇状的和春季结膜炎。

根据另一个实施方案，本发明涉及治疗或减轻胃肠道疾病或障碍的严重程度的方法，包括但不限于腹腔病、直肠炎、嗜曙红细胞性胃肠炎、肥大细胞病、胰腺炎、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、对肠有远距离影响的与食物相关的变态反应(例如偏头痛、鼻炎和湿疹)。

另一个实施方案，本发明涉及治疗或减轻下述疾病或障碍的严重程度的方法：多发性硬化、动脉硬化症、获得性免疫缺陷综合症(AIDS)、红斑狼疮、系统性狼疮、红斑、桥本甲状腺炎、重症肌无力、I型糖尿病、肾病综合症、嗜曙红细胞筋膜炎、IgE过多综合症、瘤型麻风、赛谢综合征和先天性血小板减少症紫癜、血管成形术后的再狭窄、肿瘤(例如白血病、淋巴瘤)、动脉硬化症和系统性红斑狼疮。

如这里所使用的术语″FLT3介导的疾病″是指已知FLT3家族激酶在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知FLT3在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻选自造血病(更具体地是急性髓性白血病(AML)、急性前髓细胞白血病(APL)和急性淋巴细胞性白血病(ALL))的疾病或障碍的严重程度的方法，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

如这里所使用的术语″LCK介导的疾病″或″LCK介导的障碍″是指已知LCK在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。术语″LCK介导的疾病″或″LCK介导的障碍″还指通过用LCK抑制剂治疗能够减轻的那些疾病或障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知LCK在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻选自自身免疫病(例如移植物排斥、变态反应、类风湿性关节炎和白血病)的疾病或障碍的严重程度的方法，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

根据另一个实施方案，本发明提供了治疗或减轻患者的JNK介导的疾病或障碍的严重程度的方法，其中包含给所述患者施用本发明的组合物的步骤。

如这里所使用的术语″JNK介导的障碍″或″疾病″是指已知JNK在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知JNK在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻下述疾病或障碍的严重程度的方法：炎症、自身免疫病、破坏性骨病、增殖病、癌症、感染性疾病、神经退化病、变态反应、中风后的再灌注/局部缺血、心脏病发作、血管生成病、器官缺氧、血管增生、心脏肥大、凝血酶诱导的血小板凝聚和与前列腺素内过氧化酶合酶-2相关的疾病，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

本发明的化合物可以治疗的炎症包括但不限于急性胰腺炎、慢性胰腺炎、哮喘、变态反应和成年人呼吸窘迫综合症。

本发明的化合物可以治疗的自身免疫病包括但不限于肾小球肾炎、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、硬皮病、慢性甲状腺炎、格雷夫斯病、自身免疫胃炎、糖尿病、自身免疫溶血性贫血、自身免疫中性白细胞减少、血小板减少症、特应性皮炎、慢性活动性肝炎、重症肌无力、多发性硬化、炎性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、银屑病或移植物抗宿主病。

本发明的化合物可以治疗的破坏性骨病包括但不限于骨质疏松、骨关节炎和与多发性骨髓瘤相关的骨病。

本发明的化合物可以治疗的增殖病包括但不限于急性髓性白血病、慢性髓性白血病、转移性黑色素瘤、卡波剂氏肉瘤、与多发性骨髓瘤相关的骨病和HTLV-1介导的肿瘤发生。

本发明的化合物可以治疗的血管生成病包括实体瘤、眼血管再生、婴儿血管瘤。

本发明的化合物可以治疗的感染性疾病包括但不限于败血症、败血症性休克和志贺氏菌病。

本发明的化合物可以治疗的病毒病包括但不限于急性肝炎感染(包括甲型肝炎、乙型肝炎和丙型肝炎)、HIV感染和CMV视网膜炎。

本发明的化合物可以治疗的神经退化病包括但不限于阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、肌萎缩性脊髓侧索硬化(ALS)、癫痫症发作、杭廷顿氏舞蹈病、创伤性脑损伤、局部缺血和出血性休克、大脑局部缺血或神经退化病，包括创伤性损伤、急性缺氧、局部缺血或谷氨酸神经毒性造成的细胞凋亡驱动的神经退化病。

术语″JNK介导的疾病″或″障碍″还包括中风后的局部缺血/再灌注、心脏病发作、心肌局部缺血、器官缺氧、血管增生、心脏肥大、肝局部缺血、肝病、充血性心力衰竭、病理性免疫反应，例如T细胞激活和凝血酶诱导的血小板凝聚造成的。

另外，本发明的化合物还能抑制可诱导的前炎症蛋白的表达。因此，本发明的化合物可以治疗的其它″JNK介导的疾病″或″障碍″还包括水肿、失痛症、发烧和疼痛，例如神经肌肉痛、头痛、癌性疼痛、牙痛和关节炎性疼痛。

根据另一个实施方案，本发明提供了治疗或减轻患者的JAK介导的疾病或障碍的严重程度的方法，其包括给所述的患者施用本发明的组合物。

如这里所使用的术语″JAK介导的疾病″是指已知JAK家族激酶在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。因此，本发明的另一个实施方案涉及治疗或减轻一种或多种已知JAK在其中起作用的疾病的严重程度。更具体地，本发明涉及治疗或减轻下述疾病或障碍的严重程度的方法：免疫反应(例如变态反应或I型超敏反应)、哮喘、自身免疫病(例如移植物排斥、移植物抗宿主病)、类风湿性关节炎、肌萎缩性脊髓侧索硬化和多发性硬化、神经退化病(例如家族性肌萎缩性脊髓侧索硬化(FALS))以及实体瘤和血液恶性瘤(例如白血病和淋巴瘤)，其中所述的方法包含给需要治疗的患者施用本发明的组合物。

本发明的化合物还可以用作CDK2激酶的抑制剂。因此，这些化合物可以用于治疗或减轻CDK2介导的疾病或障碍的严重程度。

如这里所使用的术语″CDK2介导的疾病″是指已知CDK2在其中起作用的任何疾病或其它有害障碍。因此，这些化合物可以用于治疗已知受CDK2激酶活性影响的疾病或障碍。这样的疾病或障碍包括病毒感染、神经退化病和与胸腺细胞凋亡相关的疾病。这样的疾病或障碍还包括细胞周期失调(特别是从G1至S期的进程)导致的增殖病。

根据另一个实施方案，本发明涉及治疗或减轻癌症的严重程度的方法，其包括用本发明的化合物或其药学上可接受的组合物抑制CDK2、阻止癌细胞过渡到它们的增殖期的步骤。

根据要治疗的特定障碍或疾病，通常用来治疗该疾病的其它治疗剂也可以存在于本发明的组合物中。如这里所使用的，通常用来治疗特定疾病或障碍的其它治疗剂被称作″适用于要治疗的疾病或障碍″

例如，化疗剂或其它抗-增殖剂可以与本发明的化合物组合，以治疗增殖病和癌症。已知的化疗剂的实例包括但不限于Gleevec、阿霉素、地塞米松、长春新碱、环磷酰胺、氟尿嘧啶、拓扑替康(topotecan)、紫杉酚、干扰素和铂衍生物。

本发明的抑制剂还可以与其它的试剂相组合，实例包括但不限于：用于治疗阿尔茨海默氏病的试剂，例如Aricept^和Excelon^；用于治疗帕金森氏症的试剂，例如L-DOPA/卡比多巴、恩他卡朋、ropinrole、普拉克索、溴隐亭、硫内麦角林、trihexephendyl和金刚烷胺；用于治疗多发性硬化(MS)的试剂，例如β-干扰素(例如，Avonex^和Rebif^)、Copaxone^和米托蒽醌；用于治疗哮喘的试剂，例如沙丁胺醇和SingμLair^；用于治疗精神分裂症的试剂，例如奥氮平、利培酮、思瑞康和氟哌啶醇；抗炎药，例如皮质类固醇、TNF阻断剂、IL-1RA、硫唑嘌呤、环磷酰胺和柳氮磺吡啶；免疫调控剂和免疫抑制剂，例如环孢霉素、他克莫司、雷帕霉素、霉酚酸吗啉乙酯、干扰素、皮质类固醇、环磷酰胺、硫唑嘌呤和柳氮磺吡啶；神经营养因子，例如乙酰胆碱酯酶抑制剂、MAO抑制剂、干扰素、抗惊厥剂、离子通道阻断剂、利鲁唑和抗-似帕金森氏病药；用于治疗心血管病的试剂，例如β-阻断剂、ACE抑制剂、利尿剂、硝酸盐、钙离子通道阻断剂和抑制素；用于治疗肝病的试剂，例如皮质类固醇、消胆胺、干扰素和抗病毒药；用于治疗血液病的试剂，例如皮质类固醇、抗白血病药和生长因子；和用于治疗免疫缺陷病的试剂，例如γ-球蛋白。

这些其它试剂可以与含有化合物的组合物分开地施用，作为多次剂量方案的一部分。或者，这些试剂可以是单一剂量形式的一部分，与本发明的化合物一起混合到单一组合物中。如果作为多次剂量方案的一部分施用，两种活性试剂可以同时地、先后地或相互分开一段时间(通常相隔5小时以内)地施用。

本化合物和其它治疗剂(在含有上述的其它治疗剂的那些组合物中)可以与载体材料相组合制成单一剂量形式，两者的量根据要治疗的宿主和特定的给药模式而变。优选地，本发明的组合物应当制成能够以0.01-100mg/kg体重/天的剂量施用式I化合物的剂型。

在含有其它治疗剂的那些组合物中，其它治疗剂和本发明的化合物可以协同地作用。因此，其它治疗剂在这样的组合物中的量会比只使用该治疗剂的单独疗法所需要的更低。在这样的组合物中，可以施用剂量为以0.01-100μg/kg体重/天的其它治疗剂。

其它治疗剂在本发明的组合物中的量不会超过在含有该治疗剂作为唯一活性试剂的组合物中通常施用的量。优选地，其它治疗剂在本发明的组合物中的量的范围为在含有该治疗剂作为唯一治疗活性试剂的组合物中通常用量的约50％～100％。

本发明的化合物或其药物组合物还可以并入用于涂布可植入的医疗装置的组合物中，例如假肢、人工瓣膜、人造血管、支架和导管。血管支架例如已经用于克服再狭窄(手术后血管壁再狭窄)。但是，使用支架或其它可植入装置的患者有形成凝块或激活血小板的风险。通过给装置预涂含有激酶抑制剂的药学上可接受的组合物，可以预防或减轻这些有害的作用。合适的涂料和有涂层的可植入装置的一般制备方法记载在美国专利6,099,562、5,886,026和5,304,121中。涂料典型地是医用聚合材料，例如水凝胶聚合物、聚甲基二硅氧烷、聚己酸内酯、聚乙二醇、聚乙酸、乙烯醋酸乙烯酯和它们的混合物。涂层还可以任选地进一步包有合适的氟硅氧烷、多糖、聚乙二醇、磷脂或其组合的外涂层，使组合物具有控释特征。包有本发明的化合物的可植入装置是本发明的另一个实施方案。

前述的每一种方法都旨在抑制一种或多种蛋白激酶或治疗能由此减轻的疾病，其优选地用上述的优选的式I、I′、I″、II、III、IV或V化合物来实现。更优选地，前述的每一种方法都用优选的式I′、I″、II、III、IV或V′化合物来实现，最优选地用式I″或V′化合物。

为了更充分地理解这里所述的发明，阐述了下面的实施例。应当理解，这些实施例仅仅是用于解释目的，不应理解为以任何方式限制本发明。

合成实施例

实施例1

3-(3-二甲基氨基-丙烯酰基)-苄腈：将3-乙酰基-苄腈(36.2g，249mmol)在二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(200mL，过量)中的混合物加热回流过夜。真空蒸发溶剂，得到橙色固体。将固体溶解到二氯甲烷中，经硅胶填料过滤，用20％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱。真空浓缩滤液，得到42.0g(84％)主题化合物的橙色固体。

实施例2

3-(2-苯基氨基-嘧啶-4-基)-苄腈：向3-(3-二甲基氨基-丙烯酰基)-苄腈(30.4g，152mmol)于乙腈(250mL)中的溶液中加入苯基胍(21.0g，155mmol)于乙腈(250mL)中的溶液，将混合物加热回流2小时。冷却溶液，过滤得到的固体，用乙腈洗涤，得到主题化合物。

实施例3

3-(2-苯基氨基-嘧啶-4-基)-苯甲酸：向3-(2-苯基氨基-嘧啶-4-基)-苄腈(10g，36.7mmol)于醋酸(20mL)中的溶液中加入浓盐酸(30mL)，将悬浮液在100℃加热过夜。原料完全溶解后，沉淀出固体。过滤反应混合物，用醚和甲醇洗涤，得到9g(84％)主题化合物。

实施例4

以下面的方式，从3-(2-苯基氨基-嘧啶-4-基)-苯甲酸制备一系列本发明的化合物：向3-(2-苯基氨基-嘧啶-4-基)-苯甲酸(100mg，343μmol)于DMF的溶液中加入EDC(105mg，548μmol)、HOBT(90mg，666μmol)和乙基二异丙基胺(177μl，1.02mmol)。在室温下搅拌反应混合物1小时。加入胺(3当量)，在室温搅拌反应过夜。用乙酸乙酯稀释反应混合物，顺序地用水、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)。浓缩有机层，得到黄色油状粗产物。粗产物通过制备HPLC(柱：Kiomasil，150×21mm，C8，10mm梯度：20％CH₃CN--＞90％CH₃CN，经过15分钟)纯化，得到需要的酰胺产物。

实施例5

N-(4-乙酰基-苯基)-2-吗啉-4-基-2-苯基-乙酰胺：向α-溴-2-苯基醋酸(1g)于CH₂Cl₂(15mL)的溶液中加入草酰氯(5mL，2M，在CH₂Cl₂中)。向得到的溶液中加入1DMF(10μL)。2小时后，浓缩溶液，与甲苯共沸(2×10mL)，然后重新溶解到CH₂Cl₂(15mL)。用4-氨基苯乙酮(1.0g)处理搅拌的溶液。30分钟后，顺序用二异丙基乙基胺(3mL)和吗啉(2mL)处理得到的悬浮液。在室温搅拌得到的深色溶液8小时，然后通过旋转蒸发浓缩。通过硅胶色谱(1∶1CH₂Cl₂∶EtOAc)纯化粗产物，生成200mg黄色油状主题化合物。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ9.32(1H，s)，7.95(2H，d)，7.70(2H，d)，7.40(5H，m)，4.0(1H，s)，3.8(4H，m)，2.60(3H，s)，2.55(4H，m)ppm.FIA MS：339.2(M+H)。

实施例6

N-{4-[2-(3-氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-苯基}-2-吗啉-4-基-2-苯基-乙酰胺(I″-1)：通过基本上与上面所述的实施例1-4类似的方法，从N-(4-乙酰基-苯基)-2-吗啉-4-基-2-苯基-乙酰胺制备化合物I″-1。¹H NMR(CDCl₃，500MHz)δ9.2(1H，s)，8.35(1H，d)，8.0(2H，d)，8.65(2H，d)，7.3(5H，m)，7.15(1H，m)，7.0(1H，m)，6.9(1H，d)，6.32(1H，m)，3.95(1H，s)，3.70(4H，m)，2.50(4H，m)ppm.M+1 481.3。

实施例7

4-[5-氯-2-(1-(S)-羟甲基乙基氨基)-嘧啶-4-基]-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-苯甲酰胺(I″-40)：将5-氯尿嘧啶(25g，0.17mol)放入干燥的烧瓶(250mL)中，在环境温度加入三氯氧磷(100mL)。向该溶液中加入N，N-二甲基苯胺(1mL)。将得到的溶液在110℃加热3天，或者直到反应混合物变成均质的。减压蒸发溶剂，将残余物溶解到乙酸乙酯中，然后用水、盐水洗涤2次。有机层经硫酸钠干燥，然后通过二氧化硅色谱(乙酸乙酯3％在己烷中)纯化粗产物，得到25g黄色液体状的2，4，5--三氯嘧啶。通过¹H NMR确认结构。

在一个烧瓶中加入2，4，5-三氯-嘧啶(1.3当量，2.66g，14.6mmol)、商业获得的4-羧基苯基硼酸甲酯(1.0当量，2.02g，11.2mmol)，四三苯基膦钯(0.1当量，1.3g，1.12mmol)、氯化锂(3.0当量，1.4g，33.6mmol)、碳酸钠(2N，5mL)和1，2-二甲氧基乙烷(20mL)。将得到的混合物在80℃加热24小时，然后溶解到乙酸乙酯中，用盐酸(1N)、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。通过二氧化硅色谱(乙酸乙酯，10％在己烷中)纯化粗产物，得到1.21g白色固体状的4-(2，5-二氯-嘧啶-4-基)苯甲酸甲酯。通过¹H NMR确认结构。

在一个含有1.0当量4-(2，5-二氯-嘧啶-4-基)-苯甲酸甲酯(1.0当量，1.415g，5mmol)于干乙醇(8mL)中的烧瓶中加入(S)-(+)-氨基丙醇(3.0当量，1.12g，15mmol)。将溶液加热12小时，蒸发溶剂，通过二氧化硅色谱(乙酸乙酯25-40％在己烷中)纯化粗产物，得到780mg无色油状的4-[5-氯-2-(1-(S)-羟甲基-乙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲酸甲酯。通过¹H NMR和LCMS确认结构：ES+＝322.0。

向4-[5-氯-2-(1-(S)-羟甲基乙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲酸甲酯(780mg，2.43mmol)于MeOH(7mL)的溶液中加入氢氧化钠(3mL，1N)。将溶液在80℃加热24小时。通过在环境温度加入盐酸(12N)，调节反应混合物的pH至约3。减压蒸发溶剂，在高真空下干燥粗产物4-[5-氯-2-(1-(S)-羟甲基乙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲酸，并原样用于下一步骤。通过LCMS确认结构：ES+＝308.0，ES-＝306.1。

向4-[5-氯-2-(1-(S)-羟甲基乙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲酸(760mg，2.47mmol)和HOBt(1.2当量，400mg，2.96mmol)于DMF(6mL)的溶液中加入EDC(1.3当量，617mg，3.21mmol)和DIEA(2.2当量，950μL，5.43mmol)。搅拌45分钟后，加入(S)-(+)-3-氯苯基甘氨酰(glycinol)盐酸盐(1.1当量，565mg，2.72mmol)。通过HPLC监视反应。约24小时后，用乙酸乙酯稀释溶液，并用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。通过二氧化硅色谱(MeOH 0-2％在乙酸乙酯中)纯化粗产物，得到230mg主题产物。¹H NMR 500MHz(MeOH-d4)：8.23(s，1H)，7.82(m，2H)，7.79(m，2H)，7.30(s，1H)，7.20(m，3H)，5.10(m，1H)，4.02(m，1H)，3.78(m，2H)，3.50(m，2H)，1.12(d，3H).LCMS：ES+＝461，ES-＝459.2。

实施例8

N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-4-[2-(1-(S)-羟甲基-丙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲酰胺(I″-36)：向4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-苯甲酸(1.0当量，661mg，3.1mmol)和HOBt(1.1当量，467mg，3.4mmol)于DMF(6mL)的溶液中加入DIEA(2.2当量，1.18mL，6.8mmol)和EDC(1.2当量，708mg，3.7mmol)。将溶液搅拌10分钟，然后加入(S)-(+)-3-氯苯基glycinol盐酸盐(1.1当量，703mg，3.4mmol).搅拌24小时后，用乙酸乙酯稀释溶液，并用碳酸氢钠、盐水洗涤有机层，经MgSO₄干燥。通过二氧化硅色谱(MeOH 5％在CH₂Cl₂中)纯化粗产物，得到9.4mg 4-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-苯甲酰胺。¹H NMR 500MHz(DMSO-d6)：8.4(d，1H)，8.0-8.2(dd，4H)，7.5(s，1H)，7.2-7.4(m，4H)，5.15(m，1H)，3.7(m，2H).LCMS：ES+＝369，ES-＝367.2。

在0℃，向4-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-苯甲酰胺(1.0当量，264mg，0.71mmol)于THF(5mL)的溶液中加入800μL氢氟酸吡啶复合物。5分钟后，加入200μL叔丁基亚硝酸盐。搅拌溶液过夜，使升温至环境温度。用冰/水结束反应，用乙酸乙酯萃取水溶液两次，用碳酸氢钠、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。蒸发溶剂，粗产物N-[1-(3-氯-(S)-苯基)-2-羟基-乙基]-4-(2-氟-嘧啶-4-基)-苯甲酰胺直接用于下一步。LCMS：ES+＝372.0，ES-＝370.5。

向N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟基-乙基]-4-(2-氟-嘧啶-4-基)-苯甲酰胺(59mg，纯度约80％)于EtOH(1mL)的溶液中加入(S)-(+)-2-氨基-1-丁醇(10.0当量，140μL)。将溶液在80℃加热3小时，粗产物通过反相制备HPLC(二氧化硅，MeOH 10％在CH₂Cl₂中)纯化，得到7.0mgN-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-4-[2-(1-(S)-羟甲基-丙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲酰胺。¹H NMR 500MHz(MeOH-d4)：7.9-8.3(3xs，5H)，7.1-7.4(m，5H)，5.2(m，1H)，3.85(d，2H)，3.6(m，2H)，1.5-1.75(2xm，2H)，1.05(t，3H)。LCMS：ES+＝441.2，ES-＝439.1。

实施例9

N-[1-(3-氯苯基)-2-(S)-羟乙基]-4-(2-环丙基氨基-5-甲基吡啶-4-基)-苯甲酰胺(I″-46)：将2-氟-4-碘-5-甲基-吡啶(0.90g，3.8mmol)、4-羧甲基-苯基硼酸(0.72g，4.0mmol)、磷酸钾(2.5g，11.8mmol)和二氯[1，1′-双(二苯基膦基(phoshino))二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(0.30g，0.37mmol)组合放入螺帽试管中，加入1，4-二烷(20mL)。将氩通入反应混合物中起泡，然后密封并加热到95℃过夜。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取。有机层经硫酸钠干燥，浓缩成红色固体，它再通过二氧化硅色谱(EtOAc 0～40％在己烷中)纯化，得到4-(2-氟-5-甲基-吡啶-4-基)-苯甲酸甲酯，0.62g，2.5mmol，66％产率。¹H NMR 500MHz(CDCl₃)：8.05(m，3H)，7.33(d，2H)，6.74(s，1H)，3.90(s，3H)，2.15(s，3H)。

将4-(2-氟-5-甲基-吡啶-4-基)-苯甲酸甲酯(0.31g；1.3mmol)溶解到10mL THF中。向该溶液中加入溶解在2mL水中的100mg(2.5mmol)氢氧化锂一水合物，搅拌反应混合物过夜。加入6N HCl(0.4mL)，将反应混合物浓缩成白色固体。向该固体加入3-(S)-氯苯基glycinol盐酸盐(0.30g，1.4mmol)、EDC(0.38g，2.0mmol)和HOBt(0.27g，2.0mmol)，并溶解到5mL DMF中。向该反应混合物中加入DIEA(0.5mL)，在室温搅拌反应混合物过夜。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用10％柠檬酸、饱和碳酸氢钠洗涤。干燥有机层，并浓缩成油，它通过二氧化硅色谱(EtOAc 40～100％/己烷)纯化得到N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-4-(2-氟-5-甲基吡啶-4-基)-苯甲酰胺，0.40g，1.04mmol，80％产率。¹H NMR 500MHz(CDCl₃)：8.05(s，1H)，7.88(d，2H)，7.33(d，2H)，6.90(m，1H)，7.25(m，4H)，6.74(s，1H)，5.20(m，1H)，3.94(m，2H)，2.15(s，3H)，2.04(m，1H)。

在一个含有1.0当量N-[1-(3-(S)-氯-苯基)-2-羟基-乙基]-4-(2-氟-5-甲基-吡啶-4-基)-苯甲酰胺(23mg，60μM)于500μLDMSO中的烧瓶中，加入100μL环丙基胺，将溶液在110℃搅拌3天。粗产物通过制备HPLC纯化，得到5.1mg N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-(S)-羟乙基]-4-(2-环丙基氨基-5-甲基-吡啶-4-基)-苯甲酰胺。¹H NMR500MHz(MeOH-d4)：8.0(d，2H)，7.8(s，1H)，7.25-7.6(m，6H)，5.2(t，1H)，3.85(d，2H)，2.7(m，1H)，2.15(s，3H)，1.0(m，2H)，0.7(m，2H)。LCMS：ES+＝422.2，ES-＝420.3。

实施例10

N-[1-(3-氯-苯基)-2-羟基-乙基]-4-[5-氟-2-(1-羟甲基-丙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲酰胺(I″37)：将2，4-二氯-5-氟嘧啶(0.50g，3.0mmol)和4-羧基苯基硼酸(0.5g，3.0mmol)溶解到在螺帽试管中的二甲氧基乙烷(20mL)中，加入6mL 2M Na₂CO₃，随后加入80mg(0.069mmol)四(三苯基膦)钯。向反应混合物中通入氩起泡5分钟，然后将反应混合物加热到85℃过夜。将反应混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥，浓缩成固体，它再通过二氧化硅色谱(MeOH 5％/CH₂Cl₂)纯化，生成0.22g(0.87mmol，29％产率)4-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-苯甲酸白色固体。¹H NMR 500MHz(MeOH-d4)：8.85(m，1H)，8.20(m，4H)。

将4-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-苯甲酸(0.11g，0.44mmol)、3-(S)-氯苯基glycinol盐酸盐(0.104g，0.50mmol)、EDC(0.114g，0.60mmol)和HOBt(68mg，0.50mmol)一起放入DMF中。向该反应混合物中加入DIEA(0.4mL)，在室温搅拌反应混合物3天。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用1N HCl和盐水洗涤。有机层经硫酸钠干燥，浓缩成油，它再通过二氧化硅色谱(BtOAc 25-65％/己烷)纯化，生成40mg 4-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-苯甲酰胺，0.01mmol，23％产率。

将4-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-苯甲酰胺(40mg，0.01mmol)溶解到乙醇(0.5mL)中，加入90mg(S)-2-氨基丁烷-1-醇，将反应混合物加热到85℃3天。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用水洗涤和有机层经硫酸钠干燥，浓缩成油，它再通过反相HPLC纯化，得到15mg N-[1-(3-(S)-氨-苯基)-2-羟基-乙基]-4-[5-氟-2-(1-(S)-羟甲基-丙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲酰胺黄色固体，0.033mmol，33％产率。¹H NMR 500MHz(MeOH-d4)：8.9(d，1H)，8.28(d，1H)，8.20(m，2H)，8.00(d，2H)，7.48(s，1H)，7.30(m，3H)，5.20(m，1H)，3.98(m，1H)，3.87(m，2H)，3.69(m，2H)，1.80(m，1H)，1.60(m，1H)，1.00(t，3H)。LCMS：ES+＝459.0。

实施例11

4-[5-氯-2-(1-(S)-羟甲基丙基氨基)-嘧啶-4-基]-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-苯甲酰胺(I″-38)：将2，4，5-三氯嘧啶(0.40g，2.2mmol)和4-羧甲基苯基硼酸(0.4g，2.2mmol)溶解到在螺帽试管中的二甲氧基乙烷(20mL)中，加入Na₂CO₃(3.3mL，2M)，随后加入四(三苯基膦)钯(40mg，0.036mmol)。向反应混合物中通入氩起泡5分钟，然后将反应混合物密封并加热到90℃过夜。将反应混合物倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。有机层盐水用洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩成油，它再通过二氧化硅色谱(EtOAc 0 to 15％/己烷)纯化，生成0.31g(1.1mmol，50％产率)4-(2，5-二氯嘧啶-4-基)-苯甲酸甲酯白色固体。¹HNMR 500MHz(CDCl₃)：8.78(s，1H)，8.27(d，2H)，8.04(d，2H)，4.02(s，3H)。

将4-(2，5-二氯嘧啶-4-基)-苯甲酸甲酯(70mg，0.25mmol)溶解到含有的乙醇(含有0.22g、2.5mmol(S)-2-氨基丁烷-1-醇)中，将反应混合物加热到80℃6小时，然后在室温静置过夜。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩成油，它再通过二氧化硅色谱(EtOAc 20～60％在己烷中)纯化，得到无色油状的4-[5-氯-2-(1-羟甲基丙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲酸甲酯，68mg，0.20mmol，80％。¹H NMR 500MHz(CDCl₃)：8.24(s，1H)，8.10(d，2H)，7.78(d，2H)，5.23(m，1H)，3.96(m，1H)，3.94(s，3H)，3.78(m，1H)，3.63(m，1H)，2.84(brs，1H)，1.56(m，2H)，0.96(t，3H)。

将4-[5-氯-2-(1-羟甲基丙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲酸甲酯(68mg，0.20mmol)溶解到4mL THF中。向该溶液中加入41mg氢氧化锂一水合物(在2mL水中)，将反应混合物搅拌3天。用1N HCl稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取。有机层经硫酸钠干燥，浓缩得到4-[5-氯-2-(1-羟甲基丙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲酸黄色固体，64mg，0.20mmol。LCMS ES+＝322.1。

将4-[5-氯-2-(1-(S)-羟甲基丙基氨基)-嘧啶-4-基]-苯甲酸(64mg，0.20mmol)、3-氯-(S)-苯基glycinol盐酸盐(62mg，0.30mmol)、EDC(0.06g，0.30mmol)和HOBt(40mg，0.30mmol)一起放入DMF中。向该反应混合物中加入DIEA(0.1mL)，在室温搅拌反应混合物过夜。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用1N HCl和盐水洗涤，有机层经硫酸钠干燥，浓缩成油，它再通过二氧化硅柱(MeOH 1～10％/CH₂Cl₂)，然后通过反相HPLC进一步纯化，生成30mg(0.063mmol，31％产率)4-[5-氯-2-(1-(S)-羟甲基丙基氨基)-嘧啶-4-基]-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-苯甲酰胺。¹H NMR 500MHz(MeOH-d4/CDCl₃)：8.31(s，1H)，7.98(d，2H)，7.87(m，2H)，7.48(s，1H)，7.25(m，3H)，5.24(t，1H)，3.97(m，3H)，3.80(dd，1H)，3.76(dd，1H)，1.72(m，1H)，1.62(m，1H)，1.03(t，3H)。LCMS：ES+＝475.0。

实施例12

4-(5-氯-2-环丙基氨基-嘧啶-4-基)-N-[1-(3-(S)-氯-苯基)-2-羟基-乙基]-苯甲酰胺(I″-39)：将4-(2，5-二氯嘧啶-4-基)-苯甲酸甲酯(85mg，0.30mmol)溶解到乙醇(含0.2mL环丙基胺)中，将反应混合物加热到80℃过夜。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取。有机层经硫酸钠干燥，浓缩得到4-(5-氨-2-环丙基氨基嘧啶-4-基)苯甲酸甲酯固体，90mg，0.30mmol，100％产率。LCMS：ES+＝304.1。

将4-(5-氯-2-环丙基氨基嘧啶-4-基)-苯甲酸甲酯(90mg，0.30mmol)溶解到THF中，加入50mg(1.2mmol)氢氧化锂一水合物(溶解在水中)。将反应混合物加热到50℃5小时，冷却至室温，用1N HCl稀释，用乙酸乙酯萃取。有机层经硫酸钠干燥，浓缩得到4-(5-氯-2-环丙基氨基嘧啶-4-基)-苯甲酸黄色固体，78mg，0.27mmol，90％产率。

将4-(5-氯-2-环丙基氨基嘧啶-4-基)-苯甲酸(78mg，0.27mmol)、3-(S)-氯苯基glycinol盐酸盐(80mg，0.38mmol)、EDC(0.095g，0.50mmol)和HOBt(62mg，0.46mmol)一起放入DMF中。向该反应混合物中加入DIEA(0.2mL)，将反应混合物在室温搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用1N HCl、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，有机层经硫酸钠干燥，浓缩成油状，它再与二乙基醚一起粉碎，得到4-(5-氯-2-环丙基氨基-嘧啶-4-基)-N-[1-(3-(S)-氯-苯基)-2-羟乙基]-苯甲酰胺黄色固体，75mg，0.17mmol，62％产率。(CDCl₃)：8.33(s，1H)，7.87(s，4H)，7.28(s，1H)，7.24(m，3H)，6.95(d，1H)，5.40(s，1H)，5.18(m，1H)，3.93(m，2H)，2.74(m，1H)，2.23(t，1H)，0.80(m，2H)，0.50(m，2H)。LCMS：ES+＝442.9。

实施例13

4-(5-氯-2-异丙基氨基-吡啶-4-基)-N-[1-(3-氯-苯基)-2-羟基-乙基]-苯甲酰胺(I″-44)：将5-氯-2-氟-4-碘吡啶、(257mg，1mmol)、4-羧甲基苯基硼酸(0.2g，1.1mmol)溶解到在螺帽试管中的二甲氧基乙烷中，加入1.5mL 2M Na₂CO₃，然后加入四(三苯基膦)钯(50mg，0.044mmol)。向反应混合物中通入氩起泡5分钟，密封试管，然后将反应混合物加热到85℃过夜。将反应混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩成油，它再通过二氧化硅色谱(EtOAc 0～15％在己烷中)纯化，生成90mg(0.34mmol，34％产率)4-(5-氯-2-氟吡啶-4-基)-苯甲酸甲酯。¹H NMR 500MHz(CDCl₃)：8.24(s，1H)，8.10(d，2H)，7.48(d，2H)，6.89(d，1H)，3.91(s，3H)。LCMS：ES+＝257.9。

将4-(5-氯-2-氟吡啶-4-基)-苯甲酸甲酯(90mg，0.34mmol)溶解到在螺帽试管中的DMSO中，加入0.5mL异丙基胺。密封试管，加热到90℃2天。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩成油，它再通过二氧化硅色谱(EtOAc 0～20％/己烷)纯化，生成70mg 4-(5-氯-2-异丙基氨基-吡啶-4-基)-苯甲酸甲酯，0.23mmol，67％产率。¹H NMR 500MHz(CDCl₃)：8.08(m，3H)，7.45(d，2H)，6.22(s，1H)，4.37(d，1H)，3.88(s，3H)，3.80(m，1H)，1.17(d，6H)。

将4-(5-氯-2-异丙基氨基吡啶-4-基)-苯甲酸甲酯(70mg，0.23mmol)溶解到3mL THF中。向该溶液中加入氢氧化锂一水合物(82mg)(在1mL水中)，搅拌反应混合物过夜。将6N HCl(0.5mL)加入到反应混合物中，浓缩溶液，生成羧酸固体。将该物质的一半与3-(S)-氯苯基glycinol盐酸盐(80mg，0.38mmol)、EDC(80mg，0.42mmol)和HOBt(44mg，0.33mmol)合并，并溶解到3mL DMF中。向该反应混合物中加入DIEA(0.5mL)，将反应混合物在室温搅拌3天。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用1N HCl、饱和碳酸氢钠洗涤，干燥有机层，浓缩成油状，它再通过反相HPLC纯化，得到12mg 4-(5-氯-2-异丙基氨基-吡啶-4-基)-N-[1-(3-氯-苯基)-2-羟基-乙基]-苯甲酰胺，0.027mmol，24％产率。¹H NMR 500MHz(MeOH-d4)；8.02(m，3H)7.62(d，2H)，7.43(m，1H)，7.34(m，2H)，7.30(m，1H)，6.87(s，1H)，5.21(t，1H)，3.97(m，1H)，3.88(d，2H)，1.35(d，6H)。LCMS：ES+＝444.0。

实施例14

N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟基-乙基]-4-(5-氟-2-异丙基氨基-嘧啶-4-基)-苯甲酰胺(I″-41)：在氩下，向2，4-二氯-5-氟嘧啶(0.478g，2.86mmol)和4-羧基苯基硼酸甲酯(0.516g，2.86mmol)于5mL乙二醇二甲基醚的溶液中加入Pd(PPh₃)₄，随后加入2N Na₂CO₃，用氩吹洗得到的混合物2分钟。密封得到混合物，在85℃加热过夜。18小时后，用20mL乙酸乙酯稀释反应混合物，用水洗涤。浓缩有机层，通过(二氧化硅，10％乙酸乙酯在己烷中)色谱纯化，得到4-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-苯甲酸甲酯(0.35g，46％)白色固体。LCMS：ES+＝267。

向4-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-苯甲酸甲酯(0.3g，1.13mmol)于4mL THF的溶液中加入LiOH(0.378g，9.0mmol)于4mL水的溶液，在室温搅拌3小时。用乙酸乙酯(10mL)萃取反应混合物，除去所有副产物。用6N HCl将水层酸化至pH＝3，过滤得到的沉淀。向这些固体在5mL DMF的悬浮液中加入EDC(0.26g，1.36mmol)、HOBt(0.229g，1.70mmol)和Et₃N(0.236mL，1.70mmol)，搅拌10分钟。加入(S)-(+)-3-氯苯基glycinol(0.353g，1.70mmol)，搅拌反应过夜。18小时后，用乙酸乙酯稀释反应混合物，用1N HCl、NaHCO₃、饱和NaCl洗涤。浓缩有机层，残余物通过色谱(二氧化硅，40％乙酸乙酯在己烷中)纯化，得到4-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-N-[1-(3-氯苯基)-2-羟乙基]-苯甲酰胺(0.15g，55％)白色固体。¹H NMR(CDCl₃，500MHz)：8.40(d，1H)，8.15(d，2H)，7.90-7.95(m，2H)，7.32(s，1H)，7.22-7.29(m，2H)，7.05-7.08(m，1H)，5.18-5.22(m，1H)，3.95-4.00(m，2H)，1.80(s，2H)。LCMS：ES+＝406。

向4-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-N-[1-(3-氯苯基)-2-羟基-乙基]-苯甲酰胺(0.030g，0.074mmol)于0.5mL DMSO的溶液中加入异丙基胺(0.20mL，2.3mmol)，在80℃加热2小时。用10mL乙酸乙酯稀释反应，用5mL水洗涤。浓缩有机层，通过色谱(二氧化硅，50％乙酸乙酯在己烷中)纯化，得到N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟基-乙基]-4-(5-氟-2-异丙基氨基-嘧啶-4-基)-苯甲酰胺(0.02g，67％)白色固体。¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：8.20(d，1H)，8.20-8.22(d，2H)，7.85-7.90(m，2H)，7.35(s，1H)，7.22-7.29(m，2H)，6.93-6.95(m，1H)，5.20-5.25(m，1H)，4.08-4.12(m，1H)，3.92-3.95(m，2H)，1.20-1.22(d，6H)。LCMS：ES+＝429。

向4-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟基-乙基]-苯甲酰胺(0.030g，0.074mmol)于0.5mL DMSO的溶液中加入环丙基胺(0.100mL，1.44mmol)，在110℃加热2小时。用10mL乙酸乙酯稀释反应，用5mL H₂O洗涤。浓缩有机层，通过色谱(二氧化硅，50％乙酸乙酯在己烷中)纯化，得到N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-4-(2-环丙基氨基-5-氟嘧啶-4-基)-苯甲酰胺(0.01g，33％)白色固体。¹H NNM(CDCl₃，500MHz)：8.22(d，1H)，8.10(d，2H)，7.85(d，2H)，7.30(s，1H)，7.22-7.29(m，2H)，6.92-6.95(m，1H)，5.20-5.24(m，1H)，3.92-3.98(m，2H)，2.70-2.78(m，1H)，1.20(s，4H)。LCMS：ES+＝427。

实施例15

N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-4-[5-氟-2-(2-(S)-羟基-1-甲基-乙基氨基)-嘧啶-4-基]-3-甲基-苯甲酰胺(I″-58)：向4-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟基-乙基]-3-甲基-苯甲酰胺(0.015g，0.036mmol)于0.5mL DMSO的溶液中加入(S)-(+)-2-氨基-1-丙醇(0.05mL，074mmol)，将得到的混合物在110℃加热2小时。用10mL乙酸乙酯稀释反应，用5mL H₂O洗涤。浓缩有机层，通过色谱(二氧化硅，40％乙酸乙酯在己烷中)纯化，得到主题化合物(0.010g，63％)的白色固体。¹H NMR(CDCl₃，500MHz)：8.15(s，1H)，7.70(s，1H)，7.65(d，1H)，730-7.35(m，3H)，7.20-7.25(m，2H)，5.32(d，1H)，5.09-5.12(m，1H)，4.00-4.08(m，1H)，3.80-3.90(m，2H)，3.65-3.71(m，1H)，3.52-3.55(m，1H)，2.30(s，3H)，1.21(d，3H)。LC/MS：ES+＝459。

实施例16

4-[5-氯-2-(2-羟基-1-甲基乙基氨基)-嘧啶-4-基]-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟基-乙基]-3-甲基苯甲酰胺(I″-45)：¹H NMR(CDCl₃，500MHz)：8.25(s，1H)，7.70(s，1H)，7.65(d，1H)，7.30(s，1H)，7.20-7.25(m，3H)，6.92(m，1H)，5.35-5.40(m，1H)，5.10-5.15(m，1H)，4.02-4.10(m，1H)，3.90-3.92(m，2H)，3.65-3.70(m，1H)，3.55-3.60(m，1H)，2.20(s，3H)，1.25(d，3H)。LCMS：ES+＝475。

实施例17

4-[5-氯-2-(1-(S)-羟甲基丙基氨基)-嘧啶-4-基]-N-[1-(3-(S)氯苯基)-2-羟乙基]-苯磺酰胺(I″-47)：向3-(S)-氯苯基glycinolHCl盐(416mg，2mmol)于DCM(10mL)的悬浮液中加入TEA(0.8mL，5.7mmol)和对碘苯磺酰氯(605mg，2mmol)。在室温搅拌得到的反应混合物2小时。用DCM(30mL)稀释反应混合物，用H₂O和盐水溶液洗涤，有机层经Na₂SO₄干燥，真空浓缩。直接使用粗N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟基-乙基]-4-碘苯磺酰胺

在N₂下，向N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟基-乙基]-4-碘苯磺酰胺(2mmol)于DMF(5mL)的溶液中加入双戊酰二硼(600mg，2.4mmol)、1，1-双(二苯基phosphino)二茂铁钯(80mg，0.1mmol)和醋酸钾(600mg，6mmol)。在70℃搅拌得到的混合物18小时，然后用EtOAC(30mL)稀释，用盐水(2x)洗涤，经Na₂SO₄干燥。通过色谱(二氧化硅，30％EtOAc在己烷中)纯化粗产物，得到400mg N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苯磺酰胺。LCMS：ES+＝437。

在N₂下，向N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苯磺酰胺(390mg，0.9mmol)、2，4，6-三氯嘧啶(200mg，1.1mmol)和四三苯基膦钯(100mg，0.09mmol)于THF(8mL)的混合物中加入2M Na₂CO₃溶液(1.35mL，2.7mmol)。在80℃搅拌得到的溶液18小时，然后冷却至室温。用EtOAC(30mL)稀释反应混合物，用盐水(2X)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，真空浓缩。粗产物通过色谱(二氧化硅，30％EtOAc在己烷中)纯化，得到N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-4-(2，5-二氯-嘧啶-4-基)-苯磺酰胺灰白色固体(270mg)。LCMS：ES+＝458。

将N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苯磺酰胺(30mg)和(S)-(+)-2-氨基-1-丁醇(50μL)于DMSO(0.5mL)中的溶液加热到75℃4小时。粗产物通过制备HPLC纯化，得到15mg棕色油，它再进一步通过制备TLC纯化，得到7mg 4-[5-氯-2-(1-(S)-羟甲基丙基氨基)-嘧啶-4-基]-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-苯磺酰胺白色固体。LCMS：ES+＝511，ES-＝509。

实施例18

N-[1-(3-氯苯基)-2-(S)-羟乙基]-4-(2-丙基氨基-5-甲基-4-苯基)-苯甲酰胺(I″-62)：向铁(1.5g，27.6mmol)和氯化铵(2.46g，46mmol)于水(50mL)中的悬浮液中缓慢加入3-溴-4-甲基-1-硝基苯(1.0g，4.6mmol)于甲醇(25mL)中的溶液。将得到混合物回流2小时。在反应混合物还热时，通过硅藻土过滤形成的固体，然后除去澄清滤液中的溶剂。将粗残余物重新溶解到水中，用乙酸乙酯萃取，经无水硫酸钠干燥。在硅胶上吸收粗油，在硅胶上通过快速色谱(己烷/EtOAc，从95∶5至50∶50)纯化。分离浅红色油状产物3-溴-4-甲基苯胺(462mg)。HPLC R_t3.425分钟。

将2-碘丙烷(1.2mL，12.4mmol)中加入到3-溴-4-甲基苯胺(462mg，2.48mmol)于DMF(2mL)的溶液中。在环境温度搅拌反应混合物过夜。将粗混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取。经无水硫酸钠干燥后，除去溶剂，在硅胶上吸收粗产物。在硅胶上通过快速色谱(己烷/EtOAc，从99∶1至80∶20)纯化后，分离浅红色油状产物N，N-(3-溴-4-甲基苯基)异丙基胺(177mg)。FIA ES+228.0，230.0。

向4-羧基苯基硼酸(517mg，3.11mmol)、3-氯-(S)-苯基glycinol盐酸盐(713mg，3.42mmol)和DIEA(1.2mL，6.84mmol)于DMF(6mL)的溶液中加入PyBOP(1.1g，3.73mmol)，在环境温度搅拌得到的混合物24小时。将反应混合物溶解到乙酸乙酯中，用水和盐水洗涤。经无水硫酸钠干燥后，除去溶剂，粗油通过反相HPLC纯化，生成4-[N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基氨基]羧基苯基硼酸的白色固体(620mg)。FIA ES+320.3，ES-318.0。

将N，N-(3-溴-4-甲基苯基)异丙基胺(88.5mg，0.39mmol)溶解到DME(1.5mL)中。然后加入4-[N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基氨基]羧基苯基硼酸(125mg，0.39mmol)，随后加入LiCl(49.6mg，1.17mmol)和2M Na₂CO₃(0.5mL)溶液。加入Pd(PPh₃)₄(45mg，0.039mmol)，密封小瓶。在85℃加热反应混合物过夜。将反应混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取。经无水硫酸钠干燥后，除去溶剂，粗油通过反相HPLC纯化，生成N-[1-(3-氯苯基)-2-(S)-羟乙基]-4-(2-丙基氨基-5-甲基-4-苯基)-苯甲酰胺的白色固体(24.7mg)。LCMS 2.5分钟；ES+423.2，ES-421.2。¹H NMR 500MHz(MeOH-d4)；7.95(d，2H)，7.5(d，1H)，7.45(m，3H)，7.3(m，3H)，7.2(m，2H)，5.2(t，1H)，3.85(d，2H)，3.75(m，1H)，2.3(s，3H)，1.3(d，6H)。

实施例19

4-(5-氯-2-乙氧基氨基嘧啶-4-基)-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟乙基]-苯甲酰胺(I″-72)：向4-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-N-[1-(3-(S)-氯苯基)-2-羟基-乙基]-3-甲基-苯甲酰胺(50mg，0.12mmol)于2mLDMSO的溶液中加入0-乙基羟基胺.HCl(2当量，23mg，0.24mmol)，将得到混合物在110℃加热5小时。粗产物通过制备HPLC纯化，得到6.7mg主题化合物。¹H NMR 500MHz(MeOH-d4)：8.4(s，1H)，7.9-8.0(dd，4H)，7.25-7.4(m，4H)，5.2(m，1H)，4.0(m，2H)，3.85(m，2H)，1.3(t，3H)。LCMS：ES+＝447.0，ES-＝445.1。

实施例20

通过与上面的实施例1-19所述的方法、路线图I-VIII所示的方法基本上类似的方法和通过本领域普通技术人员已知的方法，制备了本发明的混合物。这些混合物的特征数据总结在表4中，其中包括LC/MS、HP LC和¹H NMR数据。除非另有说明，¹H NMR数据是在500MHz用CDCl₃得到的，所有记载的化学位移都是ppm。

如这里所使用的，除非另有说明，术语″R_t″是指使用下述HPLC方法从化合物得到的保留时间，单位为分钟：

柱：YMC ODS AQ，3×100mm，C18，5mm

梯度：10％CH₃CN--＞90％CH₃CN经8分钟

HPLC方法B，如果标示了R_t值，对应于上面的HPLC方法，其中梯度是15％CH₃CN--＞90％CH₃CN。

化合物的编号对应于在表1、2和3中列出的化合物编号。

表4。选出的式I化合物的特征数据

化合物编号	M+1	M-1	Rt	1H NMR
					I′-1	441.32	-	3.60	-
I′-2	441.30	-	3.40	-

化合物编号	M1+1	M-1	Rt	1H NMR
					I′-3	425.31	-	4.00	-
I′-4	441.31	-	3.60	-
					I′-5	411.33	-	3.90	-
I′-6	411.32	-	3.88	-
					I′-7	391.35	-	3.88	-
I′-8	407.31	-	3.55	-
					I′-9	377.36	-	3.65	-
I′-10	393.28	-	3.19
					I′-11	486.30	-	3.71	-
I′-12	486.33	-	3.70	-
					I′-13	N	-	3.32	-
I′-14	431.40	-	4.55	-
					I′-15	487.34	-	3.85	-
I′-16	377.36	-	3.65	-
					I′-17	391.36	-	3.93	-
I′-124	441.2	439.1	2.5	(CDCl3)8.42(1H，s)；8.26(1H，d)；7.97(1H，d)；7.88(1H，d)；7.50(1H，t)；7.31(1H，s)；7.22(3H，m)；6.98(1H，d)；5.30(1H，m)；5.18(1H，m)；3.90(3H，m)；3.79(1H，m)；3.70(1H，m)；1.53(1H，m)；
					I′-125	529.3	-	5.2	-
I′-126	483.3	-	4.1	-
					I″-1	481.3	-	-	9.2(1H，s)，8.35(1H，d)，8.0(2H，d)，8.65(2H，d)，7.3(5H，m)，7.15(1H，m)，7.0(1H，m)，6.9(1H，d)，6.32(1H，m)，3.95(1H，s)，3.70(4H，m)，2.50(4H，m)ppm.
I″-13	497.2	-	-	DMSO-d6 10.12(1H，s)，8.58(1h，d).8.23(1H，d)，8.09(1H，s)，7.89(2H，d)，7.85(2H，d)，7.72(1H，d)，7.54-7.41(5H，m)，7.03(1H，d)，5.88(1H，s)，3.82(1H，brs)，3.45(1H，brs)，3.19(5H，m)，2.80(1H，brs)ppm.

化合物编号	M+1	M-1	Rt	1H NMR
					I″-14	573	-	-	CD3OD 8.34(1H，d)，8.10(2H，d)，8.04(2H，d)，7.91(1H，d)，7.40(1H，m)，7.33(5H，m)，7.24(2H，m)，7.20(1H，d)，7.06(3H，m)，6.85(1H，m)，6.60(1H，m)，6.47(1H，t)，6.41(2H，m)，4.99(1H，dd)，3.58(1H，dd)，2.9
I″-15	425.2	-	-	CD3OD 8.50(1H，d)，8.18(3H，m)，7.70，m)，7.48(1H，t)，7.41(1H，d)，7.34(5H，m)，7.03(1H，d)，4.25(1H，t)，3.33(1H，dd)，3.19(1H，dd)ppm.
					I″-16	573.2	-	-	CD3OD 8.50(1H，d)，8.18(3H，m)，7.70，m)，7.48(1H，t)，7.41(1H，d)，7.34(5H，m)，7.03(1H，d)，4.25(1H，t)，3.33(1H，dd)，3.19(1H，dd)ppm.
I″-17	425.2	-	-	CD3OD 8.50(1H，d)，8.18(3H，m)，7.70(1H，m)，7.481H，t)，7.41(1H，d)，7.34(5H，m)，7.03(1H，d)，4.25(1H，t)，3.33(1H，dd)，3.19(1H，dd)，ppm.
					I″-18	555.2	-	-	DMSO-d6 10.39(1H，d)，9.64(1H，s)，8.50(1H，d)，8.13(2H，d)，7.84(2H，d)，7.78(2H，m)，7.50(3H，m)，7.32(9H，m)，6.95(1H，t)，4.38(1H，m)，3.55(2H)，3.17(1H，m)，2.70(1H，m)，2.65(1H，m)，2.30(2H，m)，1.65
I″-19	467.2	-	-	DMSO-d6 10.45(1H，s)，9.64(1H，s)，8.50(1H，d)，8.15(2H，d)，7.85(4H，m)，7.48(2H，m)，7.35(6H，m)，6.95(1H，m)，4.41(1H，s)，2.60(2H，m)，2.37(2H，m)，2.12(6H，s)ppm.
					I″-20	509.2	-	-	DMSO-d6 10.45(1H，s)，9.64(1H，s)，8.50(1H，d)，8.15(2H，d)，7.85(4H，m)，7.48(2H，m)，7.35(6H，m)，6.95(1H，m)，4.41(1H，s)，3.55(4H，m)，2.65(2H，m)，2.12(6H，2.40(6H，m)ppm.
I″-21	494.2	-	-	MeOD-d4 8.40(1H，d)，8.12(2H，d)，7.71(3H，m)，7.54(1H，d)，7.4-7.30(3H，m)，7.29(2H，t)，7.24(1H，d)，6.99(1H，t)，5.48(1H，s)，3.72(2H，m)，3.42(3H，m)，3.22(2H，m)，2.75(1H，m)，1.79(2H，m)，1.65(2H，m)
					I″-22	480.3	-	-	CD3OD 8.40(1H，d)，8.15(2H，d)，7.78(4H，m)，7.47(1H，d)，7.4-7.30(5H，m)，7.26(1H，d)，6.99(1H，t)，5.49(1H，s)，4.15(1H，m)，3.99(1H，m)，2.40(1H，m)，2.15(2H，m)，1.90(2H，m)，1.65(2H，m)，1.50(2H，m)

化合物编号	M+1	M-1	Rt	1H NMR
					I″-23	478.2	-	-	CD3OD 8.40(1H，d)，8.15(2H，d)，7.78(4H，m)，7.47(1H，d)，7.4-7.30(5H，m)，7.26(1H，d)，6.99(1H，t)4.57(1H，s)，3.62(1H，m)，)，2.35(2H，m)，1.90-1.55(10H，m)ppm.
I″-24	482.1	-	-	CD3OD 7.7-7.10(16H，m)，5.30(1H，s)，3.70(4H，m)，2.77(4H，m)ppm.
					I″-25	496.2	-	-	CD3OD 8.40(1H，d)，8.12(2H，m)，7.72(2H，d)，7.53(2H，m)，7.5-7.30(4H，m)，7.23(1H，m)，7.20(2H，m)，6.63(1H，m)，3.95(1H，s)，3.80(3H，s)，3.72(4H，m)，2.50(4H，m)ppm.
I″-26	500.13	-	-	CD3OD 8.42(1H，m)，8.12(2H，d)，8.05(1H，m)，7.72(2H，d)，7.55(2H，m)，7.4-7.20(6H，m)，6.93(1H，m)，3.95(1H，s)，3.72(4H，m)，2.50(4H，m)ppm.
					I″-27	482.2	-	-	9.16(1H，s)，8.35(1H，d)，7.99(2H，d)，7.63(2H，d)，7.38(1H，s)，7.29(5H，m)，7.12(1H，t)，7.02(2H，t)，6.45(1H，d)，3.93(1H，s)，3.71(4H，m)，2.45(4H，m)ppm
I″-28	572.3	-	-	9.16(1H，s)，8.35(1H，d)，8.00(2H，d)，7.63(2H，d)，7.52(1H，m)，7.38(1H，s)，7.29(9H，m)，7.12(1H，t)，7.03(2H，t)，6.60(1H，d)，5.03(2H，s)，3.92(1H，s)，3.71(4H，m)，2.45(4H，m)ppm
					I″-29	-	-	-	9.08(1H，s)，8.35(1H，d)，7.99(2H，d)，7.55(2H，d)，7.47(1H，m)，7.33(1H，m)，7.25-7.10(8H，m)，7.04(2H，d)，6.55(1H，d)，3.80(4H，m)，3.71(2H，m)，3.67(2H，m)，3.46(1H，t)，3.32(1H，dd)，3.15(4H，m)
I″-30	534.1	-	-	8.39(1H，d)，8.25(1H，s)，8.02(2H，d)，7.68(2H，d)，7.62(1H，d)，7.39-7.25(6H，m)，7.21(1H，d)，7.11(1H，d)，3.76(5H，m)，2.50(4H，m)ppm.
					I″-31	524.2	-	-	9.49(1H，s)，8.68(1H，d)，8.30(1H，s)，8.07(2H，d)，7.83(1H，d)，7.69(2H，d)7.58(1H，d)，7.50-7.38(6H，m)，7.18(1H，d)，3.94(4H，m)，3.75(1H，s)，3.61(2H，m)，3.26(2H，m)ppm.
I″-32	544.1	-	-	9.29(1H，s)，8.37(1H，d)，8.06(1H，s)，7.99(2H，d)，7.67(2H，d)，7.40-7.22(6H，m)，7.11-7.07(3Hm)，3.74(4H，m)，3.40(1H，s)，2.52(4H，m)ppm.

化合物编号	M+1	M-1	Rt	1H NMR
					I″-33	481.3	-	-	DMSO-d6 10.39(1H，s)，9.30(1H，s)，8.42(1H，d)，8.12(H2d)，7.80(2H，d)，7.55(2H，m)，7.38(2H，m)，7.30(2H，m)，6.90(2H，m)，6.20(1H，m)，4.90(1H，s)，3.65(4H，m)，2.38(4H，m)ppm.
I″-34	481.3	-	-	DMSO-d6 10.39(1H，s)，9.30(1H，s)，8.42(1H，d)，8.12(2H，d)，7.80(2H，d)，7.55(2H，m)，7.38(2H，m)，7.30(2H，m)，6.90(2H，m)，6.20(1H，m)，4.90(1H，s)，3.65(4H，m)，2.38(4H，m)ppm.
					I″-35	369	367.2	2.2	(DMSO-d6)：8.4(d，1H)，8.0-8.2(dd，4H)，7.5(s，1H)7.2-7.4(m，4H)，5.15(m，1H)，3.7(m，2H).
I″-42	427	425.2	3.5	8.22，1H，d；8.10，2H，d；7.85，2H，d；7.30，1H，s；7.22-7.29，2H，m；6.92-6.95，1H，m；5.20-5.24，1H，m；3.92-3.98，2H，m；2.70-2.78，1H，m；1.20，4H，s.
					I″-43	459.1	-	3.1	8.15，1H，s；7.70，1H，s；7.65，1H，d；7.30-7.35，3H，m；7.20-7.25，2H，m；5.32，1H，d；5.09-5.12，1H，m；4.00-4.08，1H，m；3.80-3.90，2H，m；3.65-3.71，1H，m；3.52-3.55，1H，m；2.30，3H，s；1.21，3H，d.
I″-48	511	509	3.4	CD3OD 8.3(s，1H)；7.7-7.8(m，4H)；7.0-7.2(m，4H)；4.42(t，1H)；4.0(t，1H)；3.6-3.7(m，4H)；1.5-1.8(m，2H)；1.0(t，3H)
					I″-49	335.14	-	1.6/B	-
I″-50	349.2	-	1.86/B	-
					I″-52	445	-	-	8.25，1H，s；7.79，4H，s；7.28，1H，s；7.20，3H，m；7.03，1H，d；5.12，1H，m；5.03，1H，m；4.02，1H，m；3.82，2H，m；2.71，1H，br s；1.65，1H，br s；1.20，6H，d.
I″-53	484.9	483	3.9	(CDCl3/CD3OD)8.36，1H，s；7.98，2H，m；7.88，2H，m；7.62，1H，m；7.38，1H，s；7.26，4H，m；5.20，1H，m；4.17，2H，m；3.92，2H，m.
					I″-54	409	407.1	2.5	(MeOH-d4)：8.9(d，1H)，8.4(2xd，3H)，8.0(d，2H)，7.5(m，1H)，7.4(s，1H)，7.2-7.3(m，3H)，5.2(m，1H)，3.85(d，2H)，2.7(m，1H)，1.0(m，2H)，0.75(m，2H).
I″-55	427	425.2	2.4	(MeOH-d4)：8.3(m，3H)，8.0(d，2H)，7.2-7.4(m，5H)，5.2(m，1H)，3.9(d，2H)，3.6-3.7(m，2H，1.3(d，3H).

化合物编号	M+1	M-1	Rt	1H NMR
					I″-56	460	458.2	2.6	(CDCl3/CD3OD)7.96，1H，s；7.87，2H，d；7.42，2H，d；7.30，1H，s；7.18，3H，m；6.33，1H，s；5.13，1H，m；3.85，3H，m；3.60，1H，m；3.52，1H，m；1.18，3H，d.1.30，3H，d；
I″-57	441	439.1	3.1	8.18，1H，s；7.77，2H，d；7.70，2H，d；7.25，5H，m；5.48，1H，d；5.16，1H，m；3.88，2H，m；3.82，1H，m；3.59，1H，m；3.43，1H，br m3.20，1H，br m；1.52，2H，m；0.90，3H，t.
					I″-59	395.2	393.3	3.5	8.18，1H，m；8.10，2H，d；7.85，2H，d；7.30-7.35，3H，m；7.25-7.28，1H，m；6.90，1H，d；5.20-5.25，1H，m；5.10-5.18，1H，s；4.05-4.12，1H，m；3.92-4.00，2H，m；1.18-1.22，6H，m
I″-60	411.2	409	3.5	(CD3OD)8.30，1H，s；8.12-8.19，2H，m；7.98，2H，d；7.42，1H，d；7.32-7.35，2H，m；7.25-7.30，2H，d；5.20-5.25，1H，m；4.12-4.15，1H，m；3.82-3.85，2H，m；3.55-3.65，2H，m；1.28，3H，d
					I″-61	393.2	391.1	3.1	8.30，1H，s；8.20，2H，d；7.92，2H，d；7.30-7.40，4H，m；6.90，2H，d；5.28-5.31，1H，m；4.05-4.10，2H，m；2.80-2.85，1H，m；0.85-0.92，2H，m，0.60-0.65，2H，m
I″-63	407.2	-	2.2	(CD3OD)8.28，1H，s；8.05，2H，d；7.83，2H，d；7.44，2H，d；7.30，3H，m；5.23，1H，m；4.23，1H，br s；3.88，2H，d；3.75，2H，m；2.26，3H，s；1.31，3H，d.
					I″-64	441.1	-	2.5	(CD3OD)8.28，1H，s；8.04，2H，d；7.83，2H，d；7.42，1H，s；7.30，3H，m；5.22，1H，m；4.23，1H，br s；3.87，2H，d；3.68，2H，m；2.26，3H，s；1.28，3H，d.
I″-65	441.1	439.2	3.3	8.25，1H，s；7.70，1H，s；7.60，1H，d；7.30-7.35，3H，m；7.21-7.25，2H，m；6.80，1H，m；5.35-5.38，1H，m；5.20-5.22，1H，m；4.02-4.10，1H，m；3.90-3.95，2H，m；3.65-3.70，1H，m；3.50-3.58，1H，m；2.20，3H，s；1.25，3H，d.
					I″-66	441.1	439.5	2.6	8.26，1H，d；7.66，1H，s；7.61，1H，d；7.37，1H， d；7.24，1H，s；7.20-7.25，2H，m；6.98，1H，d；6.60，1H，d；5.30，1H，d；5.12-5.16，1H，m；4，05-4，12m1H，m；3.88-3.91，2H，m；3.65-3.70，1H，m；3.55-3.58，1H，m；2.35，3H，s；1.20，3
I″-67	407.2	405.6	2.2	(CD3OD)8.30，1H，d；7.85，1H，s；7.80，1H，d；7.55，1H，d；7.40，1H，d；7.30-7.38，3H，m；7.22-7.28，1H，m；6.90，1H，d；5.20-5.22，1H，m；4.18-4.20，1H，m；3.85，d，2H；3.62，2H，d；2.12，3H，s；1.25，3H，d.

化合物编号	M+1	M-1	Rt	1H NMR
					I″-68	424.3	422.2	2.1	(CD3OD)7.97，2H，d；7.82，1H，s；7.43，3H，m；7.33，2H，m；7.28，1H，m；6.40，1H，s；5.20，1H，t；3.98，1H，m；3.88，2H，d；2.04，3H，s；1.21，6H，d.
I″-69	440.2	438.2	-	(CD3OD)7.97，2H，d；7.82，1H，s；7.43，3H，m；7.33，2H，m；7.28，1H，m；6.41，1H，s；5.21，1H，t；3.98，1H，m；3.88，2H，d；3.53，2H，m，2.04，3H，s；1.22，3H，d.
					I″-70	454.3	452.2	2.1	(CD3OD)7.96，2H，d；7.81，1H，s；7.43，3H，m；7.33，2H，m；7.29，1H，m；6.42，1H，s；5.22，1H，t；3.88，2H，d；3.73，1H，m；3.53，2H，m2.04，3H，s；1.72，1H，m；1.57，1H，m；1.22，3H，t.
I″-71	422.15	420.3	2.13	(CD3OD)：8.0(d，2H)，7.8(s，1H)，7.25-7.6(M，6H)，5.2(t，1H)，3.85(d，2H)，2.7(m，1H)，2.15(s，3H)，1.0(m，2H)，0.7(m，2H).
					V′-4	455.20	3.20	-	8.24，1H，s；7.78，2H，br s；7.52，2H，br s；7.31，4H，m；，7.18，1H，m；5.89，1H，br s；5.32，1H，m；，5.15，1H，br s；4.28，1H，br s；4.04，1H，br s；3.89，1H，br s；3.70，1H，br s；3
V′-5	-	-	-	8.43(1H，d)，7.99(2H，d)，7.32(1H，s)，7.20(3H，m)，7.21-7.02(6H，m)，6.95(1H，d)，6.34(1H，d)，4.06(1H，s)，2.67(4H，m)，2.55(4H，m)ppm.

实施例21

JNK3抑制实验

通过分光光度法酶偶联实验检测化合物对JNK3的抑制。在该实验中，将固定浓度的激活的JNK3(10nM)与各种浓度的溶解到DMSO中的潜在抑制剂一起在含有0.1M HEPES缓冲剂(pH7.5，含有10mM MgCl₂、2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、200μM NADH、150μg/mL丙酮酸激酶、50μg/mL乳酸脱氢酶和200μM EGF受体肽)的缓冲液中在30℃温育10分钟。EGF受体肽是JNK3催化的激酶反应中的磷酰基受体。该反应通过加入10μM ATP启动，将实验板插入维持在30℃的分光光度计实验板室中。监视随时间变化的在340nm处的吸光度减少。将随抑制剂浓度变化的速度数据用于竞争性抑制动力学模型，确定K_i。

发现本发明的化合物能抑制JNK3。

实施例22

CDK-2抑制实验

使用标准偶联酶实验(Fox等(1998)Protein Sci 7，2249)，以下述方式筛选化合物抑制CDK-2的能力。

向实验原缓冲液(含有0.1M HEPES(pH7.5)、10mM MgCl₂、1mM DTT、25mM NaCl、2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300mM NADH、30mg/ml丙酮酸激酶、10mg/ml乳酸脱氢酶、100mM ATP和100μM肽(MAHHHRSPRKRAKKK，American Peptide，Sunnyvale，CA))中加入本发明化合物的DMSO溶液，至终浓度为30μM。将得到混合物在30℃温育10分钟。

在实验中，通过加入10μL CDK-2/细胞周期蛋白A原溶液得到25nM终浓度来启动反应。使用BioRad Ultramark平板读数仪(Hercules，CA)，在30℃经5分钟读数时间监视340nm处的吸光度，得到反应速度。从随抑制剂浓度变化的速度数据确定K_i值。

发现本发明的化合物能抑制CDK2。

实施例23

JAK抑制实验

通过G.R.Brown等，Bioorg.Med.Chem.Lett.2000，第10卷，第575-579页所述的方法，以下述方式检测混合物对JAK的抑制。预先在4℃用聚(Glu，Ala，Tyr)6∶3∶1涂布Maxisorb平板，然后用磷酸盐缓冲盐水0.05％和吐温(PBST)洗涤，向平板中加入2μM ATP、5mM MgCl₂和化合物的DMSO溶液。用JAK酶启动反应，将平板在30℃温育60分钟。然后用PBST洗涤平板，加入100μL HRP-共轭的4G10抗体，将平板在30℃温育90分钟。再用PBST洗涤平板，加入100μLTMB溶液，将平板再在30℃温育30分钟。加入硫酸(100μL 1M)中止反应，在450nm读平板，得到用于分析确定IC₅₀值的光密度。发现本发明的化合物能抑制JAK3。

实施例24

ERK2抑制实验

通过分光光度法酶偶联实验(Fox等，Protein Sci.1998，7，2249)检测混合物对ERK2的抑制。在该实验中，将固定浓度的激活的ERK2(10nM)与各种浓度的在DMSO(2.5％)中的本发明化合物一起在0.1M HEPES缓冲液(pH7.5，含有10mM MgCl₂、2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、200M NADH、150μg/mL丙酮酸激酶、50μg/mL乳酸脱氢酶和200μMerktide肽)中在30℃温育10分钟。该反应通过加入65μM ATP启动。监视在340nM处的吸光度减少速度。从随抑制剂浓度变化的速度数据确定K_i值。

发现本发明的化合物能抑制ERK2。

实施例25

ERK2抑制：细胞增殖实验

通过细胞增殖实验可以检测化合物对ERK2的抑制。在该实验中，通过向RPMI 1640培养基(JRH Biosciences)中加入10％胎牛血清和青霉素/链霉素溶液制备出完全培养基。以10,000细胞/孔/150μL的接种密度，将结肠癌细胞(HT-29细胞系)加到96孔平板的84个孔的每一个中。通过在37℃温育2小时，使细胞附到平板上。通过将实验化合物的溶液在完全培养基中系列稀释，得到下述浓度：20μM，6.7μM，2.2μM，0.74μM，0.25μM和0.08μM。将实验化合物溶液(50μL)加入到72个含有细胞的孔的每一个中。向剩下的12个含有细胞的孔中只加入完全培养基(200μL)作为对照组，以检测最大增殖。向剩下的12个空孔中加入完全培养基作为赋形剂对照组，以检测背景。将平板在37℃温育3天。将³H-胸腺嘧啶的原溶液(1mCi/mL，NewEngland Nuc1ear，Boston，MA)在RPMI培养基中稀释到20μCi/mL，然后将20μL该溶液加入到每一个孔中。将平板再在37℃温育8小时，然后收获，使用液体闪烁计数器分析³H-胸腺嘧啶的摄入。

实施例26

ERK1抑制实验

通过分光光度法酶偶联实验(Fox等(1998)Protein Sci 7，2249)检测化合物对ERKl的抑制。在该实验中，将固定浓度的激活的ERKl(20nM)与各种浓度的溶解到DMSO(2.0％)中的化合物一起在含有0.1M HEPES缓冲剂(pH7.6，含有10mM MgCl₂、2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、200μM NADH、30μg/mL丙酮酸激酶、10μg/mL乳酸脱氢酶和150μM erktide肽)的缓冲液中在30℃温育10分钟。该反应通过加入140μM ATP(20μL)启动。监视在340nM处的吸光度减少速度。从随抑制剂浓度变化的速度数据确定K_i。

实施例27

AKT-3抑制实验

使用标准偶联酶实验(Fox等Protein Sci.19987，2249)，筛选化合物抑制AKT的能力。实验在100mM HEPES(pH7.5)、10mM MgCl₂、25mM NaCl、1mM DTT和3％DMSO的混合物中进行。实验中的终底物浓度是170μM ATP(Sigma Chemicals)和200μM肽(American Peptide，Sunnyvale，CA)。实验在30℃和45nM AKT进行。偶联酶系统组分的终浓度是2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300μM NADH、30μg/ml丙酮酸激酶和10μg/ml乳酸脱氢酶。

制备的实验原缓冲液含有上述的所有试剂，除了AKT、DTT和目标实验化合物之外。将55μl原溶液放入96孔平板中，然后加入2μl1mM DMSO原溶液(含有本发明的化合物，化合物终浓度为30μM)。将平板在30℃预温育约10分钟，通过加入10μl酶(终浓度45nM)和1mM DTT启动反应。使用Molecular Devices SpectraMax Plus平板读数仪，在30℃经15分钟读数时间得到反应速度。滴定对标准细胞(含有实验混合物和DMSO，不含实验化合物)抑制超过50％的化合物，确定IC₅₀值。

发现本发明的化合物能抑制AKT3。

实施例28

Aurora-2抑制实验：

使用标准偶联酶实验(Fox等，Protein Sci.1998，7，2249)，以下述方式筛选化合物抑制Aurora-2的能力。

向实验原缓冲液(含有0.1M HEPES(pH7.5)、10mM MgCl₂、1mM DTT、25mM NaCl、2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300mM NADH、30mg/ml丙酮酸激酶、10mg/ml乳酸脱氢酶、40mM ATP和800μM肽(AmericanPeptide，Sunnyvale，CA))中加入本发明化合物的DMSO溶液，至终浓度为30μM。将得到混合物在30℃温育10分钟。在实验中，通过加入10μL Aurora-2原溶液得到70nM终浓度来启动反应。使用BioRadUltramark平板读数仪(Hercules，CA)，在30℃经5分钟读数时间监视340nm处的吸光度，得到反应速度。从随抑制剂浓度变化的速度数据确定K_i值。

实施例29

c-KIT抑制实验

使用放射过滤器-结合实验，筛选化合物抑制c-KIT活性的能力。该实验监测³³P向底物聚(Glu，Tyr)4∶1(pE4Y)中的整合。反应在含有100mM HEPES(pH7.5)、10mM MgCl₂、25mM NaCl、1mM DTT、0.01％BSA和2.5％DMSO的溶液中进行。实验中的终底物浓度是700μM ATP和0.5mg/mL pE4Y(均来自Sigma Chemicals，St Louis，MO)。化合物的终浓度通常在0.01和5μM之间。典型地，通过从实验化合物的10mM DMSO原液制备系列稀释液，进行12点滴定。

制备了两种实验溶液。溶液1含有100mM HEPES(pH7.5)、10mMMgCl₂、25mM NaCl、1mg/m1 pE4Y和1.4mM ATP(对每一个反应，含有0.5μCi[γ-³³P]ATP)。溶液2含有100mM HEPES(pH7.5)、10mMMgCl₂、25mM NaCl、2mM DTT、0.02％BSA和25nM c-KIT：通过将33μL溶液1和1.65μL实验化合物相混合，在96孔平板上进行实验。用33μL溶液2启动反应。在室温温育20分钟后，用50μL 10％TCA(含有0.2mM ATP)中止反应。然后将所有反应体积转移到过滤平板上，通过来自TOMTEC(Hamden，CT)的Harvester9600，用5％TCA洗涤。通过Packard TopCount微板闪烁计数器(Meriden，CT)分析整合进pE4y的³³P的量。使用Prism软件处理数据，得到IC₅₀或K_i。

实施例30

FLT-3抑制实验

使用放射过滤器-结合实验，筛选化合物抑制FLT-3活性的能力。该实验监测³³P向底物聚(Glu，Tyr)4∶1(pE4Y)中的整合。反应在含有100mM HEPES(pH7.5)、10mM MgCl₂、25mM NaCl、1mM DTT、0.01％BSA和2.5％DMSO的溶液中进行。实验中的终底物浓度是90μM ATP和0.5mg/mL pE4Y(均来自Sigma Chemicals，St Louis，MO)。本发明化合物的终浓度通常在0.01和5μM之间。典型地，通过从实验化合物的10mM DMSO原液制备系列稀释液，进行12点滴定。

制备了两种实验溶液。溶液1含有100mM HEPES(pH7.5)、10mMMgCl₂、25mM NaCl、1mg/m1 pE4Y和180μM ATP(对每一个反应，含有0.3μCi[γ-³³P]ATP)。溶液2含有100mM HEPES(pH7.5)、10mMMgCl₂、25mM NaCl、2mM DTT、0.02％BSA和3nM FLT-3。通过将50μl溶液1和2.5μl本发明化合物相混合，在96孔平板上进行实验。用溶液2启动反应。在室温温育20分钟后，用50μl 20％TCA(含有0.4mM ATP)中止反应。然后将所有反应体积转移到过滤平板上，通过来自TOMTEC(Hamden，CT)的Harvester9600，用5％TCA洗涤。通过Packard Top Count微板闪烁计数器(Meriden，CT)分析整合进pE4y的³³P的量。使用Prism软件处理数据，得到IC₅₀或K_i。

发现本发明的化合物能抑制FLT3。

实施例31

GSK-3抑制实验

使用标准偶联酶系统(Fox等Protein Sci.1998 7，2249)，筛选本发明化合物抑制GSK-3β(AA1-420)的能力。反应在含有100mMHEPES(pH7.5)、10mM MgCl₂、25mM NaCl、300μM NADH、1mM DTT和1.5％DMSO的溶液中进行。实验中的终底物浓度是20μM ATP(SigmaChemicals，St Louis，MO)和300μM肽(American Peptide，Sunnyvale，CA)。实验在30℃和20nM GSK-3β进行。偶联酶系统组分的终浓度是2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300μM NADH、30μg/ml丙酮酸激酶和10μg/m1乳酸脱氢酶。

制备的实验原缓冲液含有上述的所有试剂，除了ATP和本发明的实验化合物之外。将实验原缓冲液(175μl)与5μl终浓度范围为0.002μM～301μM的本发明的实验化合物一起在96孔平板中在30℃温育10分钟。典型地，通过从本发明的实验化合物的DMSO溶液(10mM化合物原液)制备系列稀释液，在子板中进行12点滴定。通过加入20μl ATP(终浓度20μM)启动反应。使用Molecular DevicesSpectramax平板读数仪(Sunnyvale，CA)，在30℃经10分钟得到反应速度。从随抑制剂浓度变化的速度数据确定K_i值。

发现本发明的化合物能抑制GSK3。

实施例32

MK2抑制实验

使用标准偶联酶系统(Fox等Protein Sci.1998 7，2249)，筛选化合物抑制MK2的能力。反应在含有100mM HEPES(pH7.5)、10mMMgCl₂、25mM NaCl、300μM NADH、1mM DTT和1.5％DMSO的溶液中进行。实验中的终底物浓度是30μM ATP(Sigma Chemicals，St Louis，MO)和300μM肽(American Peptide，Sunnyvale，CA)。实验在30℃和30nM MK2进行。偶联酶系统组分的终浓度是2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300μM NADH、30μg/ml丙酮酸激酶和10μg/ml乳酸脱氢酶。

制备的实验原缓冲液含有上述的所有试剂，除了ATP和本发明的实验化合物之外。将实验原缓冲液(1751μl)与5μl终浓度范围为0.014μM～30μM的本发明的实验化合物一起在96孔平板中在30℃温育10分钟。典型地，通过从本发明的实验化合物的DMSO溶液(10mM化合物原液)制备系列稀释液，在子板中进行12点滴定。通过加入20μl ATP(终浓度30μM)启动反应。使用Molecular DevicesSpectramax平板读数仪(Sunnyvale，CA)，在30℃经10分钟得到反应速度。从随抑制剂浓度变化的速度数据确定K_i值。

实施例33

PDK-1抑制实验

使用放射活性磷酸盐整合实验(Pitt和Lee，J.Biomol.Screen.1996，1，47)，筛选化合物抑制PDK-1活性的能力。实验在100mMHEPES(pH7.5)、10mM MgCl₂、25mM NaCl、2mM DTT的混合物中进行。实验中的终底物浓度是40μM ATP(Sigma Chemicals)和65μM肽(PDKtide，Upstate，Lake Placid，NY)。在存在约27.5nCi/μl[γ-³²P]ATP(Amersham Pharmacia Biotech，Amersham，UK)的情况下，在30℃和25nM PDK-1中进行实验。制备的实验原缓冲液含有上述的所有试剂，除了ATP和本发明的实验化合物之外。将15μl原溶液放入96孔平板中，然后加入1μl 0.5mM DMSO原溶液(含有本发明的化合物，化合物终浓度25μM，DMSO终浓度5％)。将平板在30℃预温育约10分钟，通过加入4μl ATP(终浓度40μM)启动反应。

10分钟后，通过加入100μl 100mM磷酸、0.01％吐温-20中止反应。在加入反应混合物(100μl)之前，用100μl 100mM磷酸、0.01％吐温-20预处理磷酸纤维素96孔平板(Millipore，目录号MAPHNOB50)。在洗涤步骤(4×200μl 100mM磷酸，0.01％吐温-20)之前，让斑点浸湿至少5分钟。干燥后，向孔中加入20μl Optiphase″SuperMix″液体闪烁混合物(Perkin Elmer)，然后闪烁计数(1450Microbeta Liquid Scintillation Counter，Wallac)。滴定对标准细胞(含有实验混合物和DMSO，不含实验化合物)抑制超过50％的化合物，确定IC₅₀值。

实施例34

PIM-1抑制实验

使用标准偶联酶系统(Fox等Protein Sci.1998 7，2249)，筛选化合物抑制PIM-1的能力。反应在100mM HEPES(pH7.5)、10mM MgCl₂、25mM NaCl、1mM DTT、20μg/ml BSA和1.5％DMSO中进行。实验中的终底物浓度是120μM ATP(Sigma Chemicals)和200μM肽(AmericanPeptide，Sunnyvale，CA)。实验在30℃和50nM PIM-1进行。偶联酶系统组分的终浓度是2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、350μM NADH、30μg/ml丙酮酸激酶和10μg/ml乳酸脱氢酶。

制备的实验原缓冲液含有上述的所有试剂，除了PIM-1、DTT、BSA和本发明的实验化合物之外。将56μl实验溶液放入384孔平板中，然后加入1μl 2mM DMSO原溶液(含有实验化合物，化合物终浓度30μM)。将平板在30℃预温育约10分钟，通过加入10μl在DTT和BSA中的酶(终浓度50nM PIM-1，1mM DTT和20μg/ml BSA)启动反应。使用BioRad Ultramark平板读数仪(Hercules，CA)，在30℃经5分钟读数时间得到反应速度。滴定对标准细胞(含有DMSO，不含化合物)抑制超过50％的实验化合物，使用类似方法确定IC₅₀值。

实施例35

PKA抑制实验

使用标准偶联酶实验(Fox等Protein Sci.1998 7，2249)，筛选化合物抑制PKA的能力。实验在100mM HEPES(pH7.5)、10mM MgCl₂、25mM NaCl、1mM DTT和3％DMSO的混合物中进行。实验中的终底物浓度是50μM ATP(Sigma Chemicals)和80μM肽(Kemptide，AmericanPeptide，Sunnyvale，CA)。实验在30℃和18nM PKA进行。偶联酶系统组分的终浓度是2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300μM NADH、30μg/ml丙酮酸激酶和10μg/ml乳酸脱氢酶。

制备的实验原缓冲液含有上述的所有试剂，除了ATP和本发明的实验化合物之外。将55μl原溶液放入96孔平板中，然后加入2μlDMSO原溶液(含有本发明的实验化合物的系列稀释液，典型地从终浓度5μM开始)。将平板在30℃预温育约10分钟，通过加入5μl ATP(终浓度50μM)启动反应。使用Molecular Devices SpectraMax Plus平板读数仪，经15分钟读数时间得到起始反应速度。使用Prism软件包(GraphPad Prism version 3.0a for Macintosh，GraphPad Software，San Diego California，USA)，从非线性回归分析计算IC₅₀和K_i数据。

发现本发明的化合物是PKA的抑制剂。

实施例36

p70S6K抑制实验

使用放射活性磷酸盐整合实验在Upstate Biotechnology(Pitt和Lee，J.Biomol.Screen.1996，1，47)筛选化合物抑制p70S6K的能力。实验在8mM MOPS(pH7.0)、10mM醋酸镁、0.2mM EDTA的混合物中进行。实验中的终底物浓度是15μM ATP(Sigma Chemicals)和100μM肽(Upstate Ltd.，Dundee，UK)。在存在p70S6K(5-10mU，UpstateLtd.，Dundee，UK)和[γ-³³P]ATP(特异性的活性约500cpm/pmol，Amersham Pharmacia Biotech，Amersham，UK)的情况下，在30℃进行实验。制备的实验原缓冲液含有上述的所有试剂，除了ATP和本发明的实验化合物之外。将15μl原溶液放入96孔平板中，然后加入1μl 40μM或8μM DMSO原溶液(双份，含有本发明的化合物，化合物终浓度分别为2μM或0.4μM，DMSO终浓度5％)。将平板在30℃预温育约10分钟，通过加入4μl ATP(终浓度15μM)启动反应。

10分钟后，通过加入5μl 3％磷酸溶液中止反应。在加入反应混合物(20μl)之前，用100μl 100mM磷酸、0.01％吐温-20预处理磷酸纤维素96孔平板(Millipore，目录号MAPHNOB50)。在洗涤步骤(4×200μl 100mM磷酸，0.01％吐温-20)之前，让斑点浸湿至少5分钟。干燥后，向孔中加入20μl Optiphase″SuperMix″液体闪烁混合物(Perkin  Elmer)，然后闪烁计数(1450 Microbeta LiquidScintillation Counter，Wallac)。

发现本发明的化合物能抑制p70s6K。

实施例37

ROCK抑制实验

使用标准偶联酶实验(Fox等Protein Sci.1998 7，2249)，筛选本发明的化合物抑制ROCK的能力。实验在100mM HEPES(pH7.5)、10mM MgCl₂、25mM NaCl、1mM DTT和1.5％DMSO中进行。实验中的终底物浓度是13μM ATP(Sigma Chemicals)和200μM肽(AmericanPeptide，Sunnyvale，CA)。实验在30℃和200nM ROCK进行。偶联酶系统组分的终浓度是2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、400μM NADH、30μg/ml丙酮酸激酶和10μg/ml乳酸脱氢酶。

制备的实验原缓冲液含有上述的所有试剂，除了ROCK、DTT和本发明的目标实验化合物之外。将56μl实验反应溶液放入384孔平板中，然后加入1μl 2mM DMSO原溶液(含有本发明的化合物，化合物终浓度为30μM)。将平板在30℃预温育约10分钟，通过加入10μl酶(终浓度100nM)启动反应。使用BioRad Ultramark平板读数仪(Hercules，CA)，在30℃经5分钟读数时间得到反应速度。滴定对标准细胞(含有DMSO，不合化合物)抑制超过50％的本发明化合物，使用类似方法确定IC₅₀值。

发现本发明的化合物是ROCK的抑制剂。

实施例38

SRC抑制实验

使用基于放射活性的实验或分光光度法实验，将本发明的化合物评价为人Src激酶的抑制剂。

Src抑制实验A：基于放射活性的实验

将本发明的化合物检测为从baculo病毒细胞表达和纯化的全长重组人Src激酶(来自Upstate Biotechnology，目录号14-117)的抑制剂。通过检测³³P从ATP向组合物的随机聚Glu-Tyr聚合物(Glu∶Tyr＝4∶1(Sigma，目录号P-0275))底物中的酪氨酸的整合，监视Src激酶活性。实验组分的终浓度是：0.05M HEPES(pH7.6)、10mM MgCl₂、2mM DTT、0.25mg/ml BSA、10μM ATP(1-2μCi ³³P-ATP/反应)、5mg/ml聚Glu-Tyr和1-2单位重组人Src激酶。在一个典型实验中，将除了ATP之外的所有反应组分预混合，等量地分入实验板孔中。将本发明的化合物溶解到DMSO并加入孔中，得到的DMSO终浓度为2.5％。将实验板在30℃温育10分钟，然后启动³³P-ATP反应。反应20分钟后，用150μl含有20mM Na₃PO₄的10％三氯醋酸(TCA)中止反应。然后将中止的样品转移到安装在过滤板真空歧管上的96-孔过滤板(Whatman，UNI-Filter GF/F玻璃纤维过滤器，目录编号7700-3310)。用含有20mM Na₃PO₄的10％TCA洗涤过滤板4次，然后用甲醇洗涤4次。然后向每一个孔加入200μl闪烁液体。将板密封，在TopCount闪光计数器上定量与过滤器相连的放射活性的量。用随着本发明的化合物浓度而变的整合的放射活性绘图。将数据用于竞争性抑制动力学模型，确定本发明化合物的K_i值。

Src抑制实验B：分光光度法实验

使用偶联酶实验(Fox等Protein Sci.1998 7，2249)，定量从人重组Src激酶催化聚Glu-Tyr底物的磷酸化的ATP生成的ADP。在该实验中，在激酶反应中生成每分子的ADP，会将一分子的NADH氧化成NAD。在340nm可以方便地检测到NADH的消失。

实验组分的终浓度为：0.025M HEPES(pH7.6)、10mM MgCl₂、2mM DTT、0.25mg/ml聚Glu-Tyr和25nM重组人Src激酶。偶联酶系统组分的终浓度是2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、200μM NADH、30μg/ml丙酮酸激酶和10μg/ml乳酸脱氢酶。

在一个典型实验中，将除了ATP之外的所有反应组分预混合，等量地分入实验板孔中。将本发明的化合物溶解到DMSO并加入孔中，得到的DMSO终浓度为2.5％。将实验板在30℃温育10分钟，然后用100μM ATP启动反应。在分子装置平板读数仪上监视在340nm处随时间流逝的吸光度变化。将数据用于竞争性抑制动力学模型，确定本发明化合物的K_i值。

发现本发明的化合物是SRC的抑制剂。

实施例39

SYK抑制实验

使用标准偶联酶实验(Fox等Protein Sci.1998 7，2249)，筛选化合物抑制SYK的能力。实验在100mM HEPES(pH7.5)、10mM MgCl₂、25mM NaCl、1mM DTT和1.5％DMSO中进行。实验中的终底物浓度是200μM ATP(Sigma Chemical Co.)和4μM聚Gly-Tyr肽(SigmaChemical Co.)。实验在30℃和200nM SYK进行。偶联酶系统组分的终浓度是2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300μM NADH、30μg/ml丙酮酸激酶和10μg/ml乳酸脱氢酶。

制备的实验原缓冲液含有上述的所有试剂，除了SYK、DTT和本发明的目标实验化合物之外。将56μl原溶液放入96孔平板中，然后加入1μl 2mM DMSO原溶液(含有本发明的实验化合物，化合物终浓度为30μM)。将平板在30℃预温育约10分钟，通过加入10μl酶(终浓度25nM)启动反应。使用BioRad Ultramark平板读数仪(Hercules，CA)，在30℃经5分钟读数时间得到反应速度，根据标准方法确定本发明的化合物的K_i值。

发现本发明的化合物是SYK的抑制剂。

实施例40

ZAP-70抑制实验

使用标准偶联酶实验(Fox等Protein Sci.1998 7，2249)，筛选化合物抑制ZAP-70的能力。实验在100mM HEPES(pH7.5)、10mM MgCl₂、25mM NaCl、2mM DTT和3％DMSO的混合物中进行。实验中的终底物浓度是100μM ATP(Sigma Chemicals)和20μM肽(聚-4EY，SigmaChemicals)。实验在30℃和60nM ZAP-70进行。偶联酶系统组分的终浓度是2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300μM NADH、30μg/ml丙酮酸激酶和10μg/ml乳酸脱氢酶。

制备的实验原缓冲液含有上述的所有试剂，除了ZAP-70和本发明的目标实验化合物之外。将55μl原溶液放入96孔平板中，然后加入2μl DMSO原溶液(含有本发明的实验化合物的系统稀释，典型地从终浓度15μM开始)。将平板在30℃预温育约10分钟，通过加入10μl酶(终浓度60nM)启动反应。使用Molecular Devices SpectraMaxPlus平板读数仪，经15分钟读数时间确定起始反应速度。使用Prism软件包(GraphPad Prism version 3.0a for Macintosh，GraphPadSoftware，San Diego California，USA)，从非线性回归分析计算K_i数据。

发现本发明的化合物是ZAP70的抑制剂。

实施例41

使用基于放射活性的实验或分光光度法实验，将本发明的化合物评价为人Lck激酶的抑制剂。

Lck抑制实验A：基于放射活性的实验

将本发明的化合物检测为从baculo病毒细胞表达和纯化的全长牛胸腺Lck激酶(来自Upstate Biotechnology，目录号14-106)的抑制剂。通过检测³³P从ATP向组合物的随机聚Glu-Tyr聚合物(Glu∶Tyr＝4∶1(Sigma，目录号P-0275))底物中的酪氨酸的整合，监视Lck激酶活性。实验组分的终浓度是：0.025M HEPES(pH7.6)、10mM MgCl₂、2mM DTT、0.25mg/ml BSA、10μM ATP(1-2μCi ³³P-ATP/反应)、5mg/ml聚Glu-Tyr和1-2单位重组人Src激酶。在一个典型实验中，将除了ATP之外的所有反应组分预混合，等量地分入实验板孔中。将已经溶解在DMSO中的抑制剂加入孔中，得到的DMSO终浓度为2.5％。将实验板在30℃温育10分钟，然后启动³³P-ATP反应。反应20分钟后，用150μl含有20mM Na₃PO₄的10％三氯醋酸(TCA)中止反应。然后将中止的样品转移到安装在过滤板真空歧管上的96-孔过滤板(Whatman，UNI-Filter GF/F玻璃纤维过滤器，目录编号7700-3310)。用含有20mM Na₃PO₄的10％TCA洗涤过滤板4次，然后用甲醇洗涤4次。然后向每一个孔加入200μl闪烁液体。将板密封，在TopCount闪光计数器上定量与过滤器相连的放射活性的量。用随着本发明的化合物浓度而变的整合的放射活性绘图。将数据用于竞争性抑制动力学模型，确定化合物的K_i值。

Lck抑制实验B：分光光度法实验

使用偶联酶实验(Fox等(1998)Protein Sci.7，2249)，定量从人重组Lck激酶催化聚Glu-Tyr底物的磷酸化的ATP生成的ADP。在该实验中，在激酶反应中生成每分子的ADP，会将一分子的NADH氧化成NAD。在340nm可以方便地检测到NADH的消失。

实验组分的终浓度如下：0.025M HEPES(pH7.6)、10mM MgCl₂、2mM DTT、5mg/ml聚Glu-Tyr和50nM重组人Lck激酶。偶联酶系统组分的终浓度是2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、200μM NADH、30μg/ml丙酮酸激酶和10μg/ml乳酸脱氢酶。

在一个典型实验中，将除了ATP之外的所有反应组分预混合，等量地分入实验板孔中。将已经溶解在DMSO中的抑制剂加入孔中，得到的DMSO终浓度为2.5％。将实验板在30℃温育10分钟，然后用150μM ATP启动反应。在分子装置平板读数仪上监视在340nm处随时间流逝的吸光度变化。将数据用于竞争性抑制动力学模型，确定化合物的K_i值。

发现本发明的化合物是LCK的抑制剂。

虽然已经陈述了本发明的许多实施方案，显然可以改变我们的基本构思来提供利用了本发明的化合物和方法的其它实施方案。因此，应当明白，本发明的范围由所附的权利要求书限定，而不是由已经通过实施例的方式予以陈述的特定实施方案限定。

Claims (85)

1.式I化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

环B是具有0-3个氮的6-元芳族环；

Z¹和Z²中的每一个独立地选自N或CH；

T和Q中的每一个独立地选自饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的至多两个亚甲基单元被任选地和独立地替换为-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRCO₂-、-O-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、-S-、-SO-、-SO₂-、-NR-、-SO₂NR-或-NRSO₂-；

每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基，或：

同一氮上的两个R和该氮一起形成具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-8元的杂环或杂芳环；

U选自-NR-、-NRC(O)-、-NRC(O)NR-、-NRCO₂-、-O-、-C(O)NR-、-C(O)-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRSO₂-、-SO₂NR-、-NRSO₂NR-或-SO₂-；

m和n中的每一个独立地选自0或1；

p选自0、1、2、3或4；

R¹选自R或Ar；

每一个Ar是任选地被取代的环，它选自6-10元的芳族环、5-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环；

R²选自-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或-(CH₂)_yCH(R⁴)CH(R⁵)₂；

y是0-6；

R³选自R、Ar、-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或CN；

R⁴选自R、(CH₂)_wOR、(CH₂)_wN(R)₂或(CH₂)_wSR；

w是0-4；

每一个R⁵独立地选自任选地被取代的C_1-6脂族基、Ar、OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂、N(Ar)(R)、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、CON(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂；且

每一个R⁶独立地选自R、F、Cl、N(R)₂、OR、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂。

2.根据权利要求1的化合物，其中：

m是0或1；

T选自-NR-或-O-；且

R¹是卤素或任选地被取代的基团，该基团选自氢、C_1-6脂族基或5-6元的芳族环或具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环。

3.根据权利要求2的化合物，其中：

n是0或1；

R³是氢、3-7元的碳环基或任选地被取代的基团，该基团选自C_1-4脂族基、3-6元的具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环或5-6元的芳族环或具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环；且

U是-CH₂-、-O-、-NR-、-NHC(O)-或-NHCO₂-。

4.根据权利要求3的化合物，其中：

Q选自C(O)、OC(O)、C(O)NH、OC(O)NH、SO₂、SO₂NH、NHC(O)、NHC(O)O或NHSO₂；

R²是(CH₂)_yCH(R⁵)₂；且

每一个R⁵是独立地和任选地被取代的基团，其选自C_1-4脂族基、C_5-6环烷基、苯基、5-9元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或5-6元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环。

5.根据权利要求3的化合物，其中：

Q选自C(O)、OC(O)、C(O)NH、OC(O)NH、SO₂、SO₂NH、NHC(O)、NHC(O)O或NHSO₂；

R²是-(CH₂)_yCH(R⁴)CH(R⁵)₂；

R⁴是R或OR；且

每一个R⁵是独立地和任选地被取代的基团，其选自C_1-4脂族基、C_5-6环烷基、苯基、5-9元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或5-6元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环。

6.根据权利要求1的化合物，其中所述的化合物具有式I′：

或其药学上可接受的盐。

7.根据权利要求6的化合物，其中环B选自苯基、吡啶基或嘧啶基。

8.根据权利要求6的化合物，其具有式II：

或其药学上可接受的盐，其中：

Z¹和Z²中的每一个独立地选自N或CH；

T是饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的至多两个亚甲基单元被任选地和独立地替换为-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRCO₂-、-O-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、-S-、-SO-、-SO₂-、-NR-、-SO₂NR-或-NRSO₂-；

U选自-NR-、-NRC(O)-、-NRC(O)NR-、-NRCO₂-、-O-、-C(O)NR-、-C(O)-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRSO₂-、-SO₂NR-、-NRSO₂NR-或-SO₂-；

m和n中的每一个独立地选自0或1；

p选自0、1、2、3或4；

R¹选自R或Ar；

每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基或：

同一氮上的两个R和该氮一起形成具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-8元的杂环或杂芳环；

每一个Ar是任选地被取代的环，它选自6-10元的芳族环、5-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环；

y是0-6；

R³选自R、Ar、-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或CN；

每一个R独立地选自任选地被取代的C_1-6脂族基、Ar、OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂、N(R)₂、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂；且

每一个R⁶独立地选自R、F、Cl、N(R)₂、OR、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂.

9.根据权利要求6的化合物，其具有式III：

或其药学上可接受的盐，其中：

Z¹和Z²中的每一个独立地选自N或CH；

T和Q中的每一个独立地选自饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的至多两个亚甲基单元被任选地和独立地替换为-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRCO₂-、-O-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、-S-、-SO-、-SO₂-、-NR-、-SO₂NR-或-NRSO₂-；

U选自-NR-、-NRC(O)-、-NRC(O)NR-、-NRCO₂-、-O-、-C(O)NR-、-C(O)-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRSO₂-、-SO₂NR-、-NRSO₂NR-或-SO₂-；

m和n中的每一个独立地选自0或1；

p选自0、1、2、3或4；

R¹选自R或Ar；

每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基或：

同一氮上的两个R和该氮一起形成具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-8元的杂环或杂芳环；

每一个Ar是任选地被取代的环，它选自6-10元的芳族环、5-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环；

R⁴选自R、(CH₂)_wOR、(CH₂)_wN(R)₂或(CH₂)_wSR，其中w是0-4；

y是0-6；

R³选自R、Ar、-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或CN；

每一个R⁵独立地选自任选地被取代的C_1-6脂族基、Ar、OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂、N(R)₂、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂；且

每一个R⁶独立地选自R、F、Cl、N(R)₂、OR、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂.

10.根据权利要求1的化合物，其中所述的化合物具有式I″：

或其药学上可接受的盐。

11.根据权利要求10的化合物，其中环B选自苯基、吡啶基或嘧啶基。

12.根据权利要求10的化合物，其具有式IV：

或其药学上可接受的盐，其中：

Z¹和Z²中的每一个独立地选自N或CH；

Q选自NRC(O)、C(O)NR、NRSO₂或SO₂NR；

T是饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的至多两个亚甲基单元被任选地和独立地替换为-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRCO₂-、-O-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、-S-、-SO-、-SO₂-、-NR-、-SO₂NR-或-NRSO₂-；

U选自-NR-、-NRC(O)-、-NRC(O)NR-、-NRCO₂-、-O-、-C(O)NR-、-C(O)-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRSO₂-、-SO₂NR-、-NRSO₂NR-或-SO₂-；

m和n中的每一个独立地选自0或1；

p选自0、1、2、3或4；

R¹选自R或Ar；

每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基，或：

同一氮上的两个R和该氮一起形成具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-8元的杂环或杂芳环；

每一个Ar是任选地被取代的环，它选自6-10元的芳族环、5-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环；

y是0-6；

R³选自R、Ar、-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或CN；

每一个R⁵独立地选自任选地被取代的C_1-6脂族基、Ar、OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂、N(R)₂、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂；且

每一个R⁶独立地选自R、F、Cl、N(R)₂、OR、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂.

13.根据权利要求1的化合物，其中所述的化合物选自下面表1化合物：

表1：式I′化合物

14.根据权利要求1的化合物，其中所述的化合物选自下面表2的化合物：

表2：式I″化合物

15.式V化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

环B是具有0-3个氮的6-元芳族环；

Z¹和Z²中的每一个独立地选自N或CH；

T是饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的至多两个亚甲基单元被任选地和独立地替换为-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRCO₂-、-O-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、-S-、-SO-、-SO₂-、-NR-、-SO₂NR-或-NRSO₂-；

每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基或：

同一氮上的两个R和该氮一起形成具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-8元的杂环或杂芳环；

Q′是饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的一个或两个亚甲基被任选地和独立地替换为-C(O)NR′-、-NR′CO₂-、-OC(O)NR′-、-NR′C(O)-、-NR′-、-SO₂NR′-或-NR′SO₂-；

每一个R′独立地选自C_1-6脂族基，其中所述的脂族基被一个Ar基团取代，且任选地被1-2个另外的独立地选自下述基团的基团取代：卤素、-OR、-SR、-NO₂、-CN、-N(R)₂、-NRC(O)R、-NRC(O)N(R)₂、-NRCO₂R、-NRNRC(O)R、-NRNRC(O)N(R)₂、-NRNRCO₂R、-C(O)C(O)R、-C(O)CH₂C(O)R、-CO₂R或-C(O)R；

U选自-NR-、-NRC(O)-、-NRC(O)NR-、-NRCO₂-、-O-、-C(O)NR-、-C(O)-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRSO₂-、-SO₂NR-、-NRSO₂NR-或-SO₂-；

m和n中的每一个独立地选自0或1；

p选自0、1、2、3或4；

R¹选自R或Ar；

每一个Ar是任选地被取代的环，它选自6-10元的芳族环、5-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环；

y是0-6；

R^X是-(CH₂)_yR⁵

R³选自R、Ar、-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或CN；

w是0-4；

每一个R⁵独立地选自任选地被取代的C_1-6脂族基、Ar、OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂、N(Ar)(R)、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂；且

每一个R⁶独立地选自R、F、Cl、N(R)₂、OR、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂。

16.根据权利要求15的化合物，其中：

m是0或1；

T选自-NR-或-O-；且

R¹是任选地被取代的基团，其选自氢、C_1-6脂族基或5-6元的芳族环或具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环。

17.根据权利要求16的化合物，其中：

n是0或1；

R³是氢、3-7元的碳环基或任选地被取代的基团，其选自C_1-4脂族基、3-6元的具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环或5-6元的芳族环或具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环；且

U是-CH₂-、-O-、-NR-、-NHC(O)-或-NHCO₂-。

18.根据权利要求17的化合物，其中：

Q′选自-C(O)NR′-、-NR′CO₂-、-OC(O)NR′-、-NR′C(O)-、-SO₂NR′-或-NR′SO₂-；且

每一个R′独立地选自C_1-4脂族基，其中：

所述的脂族基被一个Ar基团取代，且任选地被1-2个另外的独立地选自下述基团的基团取代：卤素、-OR、-SR、-NO₂、-CN、-N(R)₂、-NRC(O)R、-NRC(O)N(R)₂、-NRCO₂R、-NRNRC(O)R、-NRNRC(O)N(R)₂、-NRNRCO₂R、-C(O)C(O)R、-C(O)CH₂C(O)R、-CO₂R或-C(O)R。

19.根据权利要求18的化合物，其中：

R^x是-(CH₂)_yR⁵；

y是1或2：

R⁵是Ar，其中：

Ar是3-6元的具有1-2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环或任选地被取代的苯基或5-6元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环。

20.根据权利要求15的化合物，其中环B选自苯基、吡啶基或嘧啶基。

21.根据权利要求15的化合物，其中所述的化合物具有式V′：

或其药学上可接受的盐。

22.根据权利要求21的化合物，其中所述的化合物具有式VI：

或其药学上可接受的盐，其中：

T是饱和的或不饱和的C_1-6亚烷基链，其中：

该链的至多两个亚甲基单元被任选地和独立地替换为-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRCO₂-、-O-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、-S-、-SO-、-SO₂-、-NR-、-SO₂NR-或-NRSO₂-；

每一个R独立地选自氢或任选地被取代的C_1-6脂族基，或：

同一氮上的两个R和该氮一起形成具有1-3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-8元的杂环或杂芳环；

每一个R′独立地选自C_1-6脂族基，其中所述的脂族基被一个Ar基团取代，且任选地被1-2个另外的独立地选自下述基团的基团取代：卤素、-OR、-SR、-NO₂、-CN、-N(R)₂、-NRC(O)R、-NRC(O)N(R)₂、-NRCO₂R、-NRNRC(O)R、-NRNRC(O)N(R)₂、-NRNRCO₂R、-C(O)C(O)R、-C(O)CH₂C(O)R、-CO₂R或-C(O)R；

U选自-NR- 、-NRC(O)-、-NRC(O)NR-、-NRCO₂-、-O-、-C(O)NR-、-C(O)-、-CO₂-、-OC(O)-、-NRSO₂-、-SO₂NR-、-NRSO₂NR-或-SO₂-；

m和n中的每一个独立地选自0或1；

p选自0、1、2、3或4；

R¹选自R或Ar；

每一个Ar是任选地被取代的环，它选自6-10元的芳族环、5-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂芳环或3-10元的具有1-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的杂环；

y是0-6；

R^X是-(CH₂)_yR⁵

R³选自R、Ar、-(CH₂)_yCH(R⁵)₂或CN；

w是0-4；

每一个R⁵独立地选自任选地被取代的C_1-6脂族基、Ar、OR、CO₂R、(CH₂)_yN(R)₂、N(R)₂、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂；且

每一个R⁶独立地选自R、F、Cl、N(R)₂、OR、SR、NRC(O)R、NRC(O)N(R)₂、C(O)N(R)₂、SO₂R、NRSO₂R、C(O)R、CN或SO₂N(R)₂.

23.根据权利要求15的化合物，其中所述的化合物选自下面的化合物：

24.一种组合物，其含有权利要求1或15的化合物和药学上可接受的载体、辅剂或赋形剂。

25.根据权利要求24的组合物，还包含选自下述试剂的治疗剂：抗增殖剂、抗炎药、免疫调控剂、神经营养因子、治疗心血管病的药、治疗肝病的药、抗病毒药、治疗血液病的药、治疗糖尿病的药或治疗免疫缺陷病的药。

26.一种抑制生物样品中的蛋白激酶活性的方法，其包括将所述的生物样品与：

a)权利要求1的化合物；

b)权利要求15的化合物；或

c)权利要求24的组合物

相接触的步骤。

27.根据权利要求26的方法，其中所述的蛋白激酶是ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3或CDK2。

28.一种抑制患者的蛋白激酶活性的方法，其包含给所述的患者施用权利要求24的组合物的步骤。

29.根据权利要求28的方法，其中所述的蛋白激酶是ERK2、AKT3、GSK3、p70s6k、PDK1、Aurora-2、ROCK、SRC、SYK、ZAP70、JNK3、JAK3、TEC、LCK、FLT3或CDK2。

30.一种治疗或减轻下述疾病的严重程度的方法：炎症、自身免疫病、破坏性骨病、增殖病、感染性疾病、神经退化病、变态反应、中风后的再灌注/局部缺血、心脏病发作、血管生成病、器官缺氧、血管增生、心脏肥大、凝血酶诱导的血小板凝聚或与前炎性细胞因子相关的疾病，其包含给需要治疗的患者施用权利要求24的组合物的步骤。

31.根据权利要求30的方法，其中所述的方法用于治疗或减轻炎症的严重程度，所述的炎症选自急性胰腺炎、慢性胰腺炎、哮喘、变态反应或成年人呼吸窘迫综合症。

32.根据权利要求30的方法，其中所述的方法用于治疗或减轻自身免疫病的严重程度，所述的自身免疫病选自肾小球肾炎、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、硬皮病、慢性甲状腺炎、格雷夫斯病、自身免疫胃炎、糖尿病、自身免疫溶血性贫血、自身免疫中性白细胞减少、血小板减少症、特应性皮炎、慢性活动性肝炎、重症肌无力、多发性硬化、炎性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、银屑病或移植物抗宿主病。

33.根据权利要求30的方法，其中所述的方法用于治疗或减轻增殖病的严重程度，所述的增殖病选自急性髓性白血病、慢性髓性白血病、转移性黑色素瘤、卡波剂氏肉瘤或多发性骨髓瘤。

34.根据权利要求30的方法，其中所述的方法用于治疗或减轻神经退化病的严重程度，所述的神经退化病选自阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、肌萎缩性脊髓侧索硬化、杭廷顿氏舞蹈病、大脑局部缺血或创伤性损伤、中风、谷氨酸神经毒性或缺氧引起的神经退化病。

35.根据权利要求30的方法，其中所述的方法用于治疗或减轻中风后的局部缺血/再灌注或心肌局部缺血、肾局部缺血、心脏病发作、器官缺氧或凝血酶诱导的血小板凝聚的严重程度。

36.根据权利要求30的方法，其中所述的方法用于治疗或减轻与T细胞激活或病理性免疫反应相关的疾病的严重程度。

37.根据权利要求30的方法，其中所述的方法用于治疗或减轻选自实体瘤、眼血管再生或婴儿血管瘤的血管生成病的严重程度。

38.根据权利要求30的方法，其中所述的方法用于治疗或减轻自身免疫病、变态反应、类风湿性关节炎或白血病的严重程度。

39.根据权利要求30的方法，其中所述的方法用于治疗或减轻变态反应或I型超敏反应、哮喘、移植物排斥、移植物抗宿主病、类风湿性关节炎、肌萎缩性脊髓侧索硬化、多发性硬化、家族性肌萎缩性脊髓侧索硬化(FALS)、白血病或淋巴瘤的严重程度。

40.根据权利要求30的方法，还包含给所述的患者施用其它治疗剂的其它步骤，所述的其它治疗剂选自抗增殖剂、抗炎药、免疫调控剂、神经营养因子、治疗心血管病的药、治疗肝病的药、抗病毒药、治疗血液病的药、治疗糖尿病的药或治疗免疫缺陷病的药，其中：

所述的其它治疗剂适用于要治疗的疾病；且

所述的其它治疗剂与所述的组合物一起作为单一剂量形式施用，或者与所述的组合物分开地作为多次剂量形式的一部分施用。

41.一种治疗或减轻需要治疗的患者的下述疾病的严重程度的方法：黑色素瘤、白血病、淋巴瘤、成神经细胞瘤或结肠癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、子宫颈癌、肺癌、中枢神经系统(CNS)癌、肾癌、前列腺癌、膀胱癌或胰腺癌，其中所述的方法包含给所述的患者施用权利要求24的组合物。

42.根据权利要求41的方法，其中所述的方法用于治疗或减轻黑色素瘤或乳腺癌、结肠癌或胰腺癌的严重程度。

43.根据权利要求41的方法，其中所述的方法用于治疗或减轻前列腺癌、卵巢癌或胰腺癌的严重程度。

44.一种治疗或减轻需要治疗的患者的下述疾病的严重程度的方法：自身免疫病、炎症、代谢障碍、精神病、糖尿病、血管生成病、tauopothy、神经障碍或神经退化病、脊髓损伤、青光眼、脱发或心血管病，其包含给所述的患者施用权利要求24的组合物。

45.根据权利要求44的方法，其中所述的疾病、障碍或症状选自变态反应、哮喘、糖尿病、阿尔茨海默氏病、杭廷顿氏舞蹈病、帕金森氏病、与AIDS相关的痴呆、肌萎缩性脊髓侧索硬化(ALS，鲁盖瑞氏症)、多发性硬化(MS)、头创伤引起的损伤、精神分裂症、焦虑、双极型障碍、tauopothy、脊髓或外周神经损伤、心肌梗死、心肌细胞肥大、青光眼、注意力不集中症(ADD)、抑郁、睡眠障碍、再灌注/局部缺血、中风、血管生成病或脱发。

46.根据权利要求45的方法，其中所述的疾病、障碍或症状是中风。

47.根据权利要求45的方法，其中所述的疾病、障碍或症状是阿尔茨海默氏病。

48.根据权利要求44的方法，其中所述的疾病是神经障碍或神经退化病。

49.一种降低雄性患者的精子运动的方法，其包括给所述的患者施用权利要求24的组合物。

50.一种治疗或减轻需要治疗的患者的结节性硬化症的严重程度的方法，其中所述的方法包含给所述的患者施用根据权利要求24的组合物。

51.一种治疗或减轻需要治疗的患者的哮喘或鼻炎的严重程度的方法，其中所述的方法包含给所述的患者施用根据权利要求24的组合物。

52.一种治疗或减轻需要治疗的患者的糖尿病的严重程度的方法，其中所述的方法包含给所述的患者施用根据权利要求24的组合物。

53.一种治疗或减轻需要治疗的患者的高血压、绞痛、动脉硬化或视网膜病的严重程度的方法，其中所述的方法包含给所述的患者施用根据权利要求24的组合物。

54.一种治疗或减轻需要治疗的患者的高钙血症、骨质疏松症、骨关节炎、骨转移的症状疗法或类风湿性关节炎的严重程度的方法，其中所述的方法包含给所述的患者施用根据权利要求24的组合物。

55.一种治疗或减轻需要治疗的患者癌症的严重程度的方法，其包含用：

a)权利要求1的化合物；或

b)权利要求24的组合物

抑制Aurora-1、Aurora-2和Aurora-3中的一种或多种来干扰癌细胞的有丝分裂的步骤。

56.一种治疗或减轻需要治疗的患者癌症的严重程度的方法，其包含用：

a)权利要求1的化合物；或

b)权利要求24的组合物

抑制CDK2来阻止癌细胞过渡到它们的增殖期的步骤。

57.一种增强需要治疗的患者的糖原合成的方法，该方法包含给所述的患者施用治疗有效量的权利要求24的组合物的步骤。

58.一种降低需要治疗的患者的血糖水平的方法，该方法包含给所述的患者施用治疗有效量的权利要求24的组合物的步骤。

59.一种抑制需要治疗的患者生成过磷酸化的Tau蛋白的方法，该方法包含给所述的患者施用治疗有效量的权利要求24的组合物的步骤。

60.一种抑制需要治疗的患者的β-连环蛋白磷酸化的方法，该方法包含给所述的患者施用治疗有效量的权利要求24的组合物的步骤。

61.权利要求24的组合物在生产用于治疗下述疾病的药物中的应用：炎症、自身免疫病、破坏性骨病、增殖病、感染病、神经退化病、变态反应、中风后的再灌注/局部缺血、心脏病发作、血管生成病、器官缺氧、血管增生、心脏肥大、凝血酶诱导的血小板凝聚或与前炎性细胞因子相关的疾病。

62.根据权利要求61的应用，其中所述的疾病是选自急性胰腺炎、慢性胰腺炎、哮喘、变态反应或成年人呼吸窘迫综合症的炎症。

63.根据权利要求61的应用，其中所述的疾病是自身免疫病，它选自肾小球肾炎、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、硬皮病、慢性甲状腺炎、格雷夫斯病、自身免疫胃炎、糖尿病、自身免疫溶血性贫血、自身免疫中性白细胞减少、血小板减少症、特应性皮炎、慢性活动性肝炎、重症肌无力、多发性硬化、炎性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、银屑病或移植物抗宿主病。

64.根据权利要求61的应用，其中所述的疾病是增殖病，它选自急性髓性白血病、慢性髓性白血病、转移性黑色素瘤、卡波剂氏肉瘤或多发性骨髓瘤。

65.根据权利要求61的应用，其中所述的疾病是神经退化病，它选自阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、肌萎缩性脊髓侧索硬化、杭廷顿氏舞蹈病、大脑局部缺血或创伤性损伤、中风、谷氨酸神经毒性或缺氧引起的神经退化病。

66.根据权利要求61的应用，其中所述的疾病是中风后的局部缺血/再灌注或心肌局部缺血、肾局部缺血、心脏病发作、器官缺氧或凝血酶诱导的血小板凝聚。

67.根据权利要求61的应用，其中所述的疾病是与T细胞激活或病理性免疫反应相关的疾病。

68.根据权利要求61的应用，其中所述的疾病是血管生成病，它选自实体瘤、眼血管再生或婴儿血管瘤。

69.根据权利要求61的应用，其中所述的疾病是自身免疫病、变态反应、类风湿性关节炎或白血病。

70.根据权利要求61的应用，其中所述的疾病是变态反应或I型超敏反应、哮喘、移植物排斥、移植物抗宿主病、类风湿性关节炎、肌萎缩性脊髓侧索硬化、多发性硬化、家族性肌萎缩性脊髓侧索硬化(FALS)、白血病或淋巴瘤。

71.权利要求24的组合物在生产用于治疗下述疾病的药物中的应用：黑色素瘤、白血病、淋巴瘤、成神经细胞瘤或结肠癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、子宫颈癌、肺癌、中枢神经系统(CNS)癌、肾癌、前列腺癌、膀胱癌或胰腺癌。

72.根据权利要求71的应用，其中所述的疾病是黑色素瘤或乳腺癌、结肠癌或胰腺癌。

73.根据权利要求71的应用，其中所述的疾病是癌症，它选自前列腺癌、卵巢癌或胰腺癌。

74.权利要求24的组合物在生产用于治疗下述疾病的药物中的应用：自身免疫病、炎症、代谢障碍、精神病、糖尿病、血管生成病、tauopothy、神经障碍或神经退化病、脊髓损伤、青光眼、脱发或心血管病。

75.根据权利要求74的应用，其中所述的疾病选自变态反应、哮喘、糖尿病、阿尔茨海默氏病、杭廷顿氏舞蹈病、帕金森氏病、与AIDS相关的痴呆、肌萎缩性脊髓侧索硬化(ALS、鲁盖瑞氏症)、多发性硬化(MS)、头创伤引起的损伤、精神分裂症、焦虑、双极型障碍、tauopothy、脊髓或外周神经损伤、心肌梗死、心肌细胞肥大、青光眼、注意力不集中症(ADD)、抑郁、睡眠障碍、再灌注/局部缺血、中风、血管生成病或脱发。

76.根据权利要求74的应用，其中所述的疾病是中风。

77.根据权利要求74的应用，其中所述的疾病是阿尔茨海默氏病。

78.根据权利要求74的应用，其中所述的疾病是神经障碍或神经退化病。

79.权利要求24的组合物在生产用于治疗结节性硬化症的药物中的应用。

80.权利要求24的组合物在生产用于治疗哮喘或鼻炎的药物中的应用。

81.权利要求24的组合物在生产用于治疗糖尿病的药物中的应用。

82.权利要求24的组合物在生产用于治疗高血压、心绞痛、动脉硬化或视网膜病的药物中的应用。

83.权利要求24的组合物在生产药物中的应用，所述药物用于治疗高钙血症、骨质疏松症、骨关节炎、症状性治疗骨转移、或类风湿性关节炎。

84.用于涂布可植入的装置的组合物，其包括权利要求1的化合物和适用于涂布所述的可植入装置的载体。

85.涂布有权利要求84的组合物的可植入的装置。