CN1853708B - 中药红豆蔻及其提取物的制药新用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及中药红豆蔻及其提取物在制药领域中的新用途，具体的是中药红豆蔻及其提取物在制备5α-还原酶抑制剂、前列腺增生治疗药物中的用途，本发明药物具有疗效显著、价格低廉、使用方便的特点。

Description

中药红豆蔻及其提取物的制药新用途

技术领域

本发明涉及中药红豆蔻的新用途，具体的说，是在制备5α-还原酶抑制剂和前列腺增生治疗药物中的应用，属于中药领域。

背景技术

前列腺增生症(benign prostatic hyperplasia，BPH)即前列腺肥大，是严重影响老年男性的一种常见病，以前列腺增生所致的静力性梗阻和前列腺平滑肌张力增加所致的动力性梗阻为特征，临床表现为膀胱尿液流出阻塞，尿急、尿频，尿液残留，常导致尿道感染甚至诱发肾炎。BPH本身虽然不是一种近期内危及生命的疾病，但却明显影响患者的体力活动和社交能力，从而影响其生活质量给患者带来极大的痛苦。该病多发生在50岁以后，发病率为50％-70％，欧美国家发病率较高。近年来随着我国生活水平提高，动物性食物在膳食结构中的比例不断提高以及人口老年化问题的出现，该病在我国的发病率有逐年上升的趋势。目前临床上针对较为严重的BPH患者常采用手术治疗，效果良好，但患病人群的高龄问题使得手术治疗具有一定的局限性。最近研究表明，前列腺除分泌前列腺液参与精液的组成外，还能产生多种免疫球蛋白具有保护生殖系统免遭细菌和其他病原微生物侵袭的局部免疫功能。因此，目前多主张用非手术的药物疗法对患者前列腺尽量予以保留。近10年来，BPH的药物治疗已成为轻度和中度症状患者的主要治疗方法。

BPH的发病机制复杂，国内外用于治疗该病的药物多达几十种，主要包括：5α-还原酶抑制剂、抗雄激素制剂、α肾上腺素能受体阻滞剂及天然产物制剂等。其中以5α-还原酶抑制剂所占的市场份额最大。5α-还原酶抑制剂可有效预防BPH的发生或防止早期BPH的继续发展，是一类目前治疗BPH的新型药物，在临床上得到日益广泛的使用。该类药物的作用机制是通过模拟与天然底物睾酮(T)构型或者睾酮与酶结合前所形成的烯酶过渡态构型与5α-还原酶结合，抑制5α-还原酶催化睾酮转化为二氢睾酮(DHT)的活性，从而减少DHT的生成，发挥其改善或治疗BPH的作用。同时研究表明：5α-还原酶是皮肤雄激素代谢的关键酶，近年来发现多种皮肤病与雄激素代谢异常有关，一些5α-还原酶抑制剂已用于雄激素源性脱发以及其他雄激素相关性皮肤病，如痤疮、多毛症等(尹兴平，夏隆庆.5a-还原酶在雄激素代谢中的作用及其抑制剂在皮肤科的应用.国外医学·皮肤性病学分册，2004，30(6)：375～377)。非那雄胺是目前临床应用广泛的5α-还原酶抑制剂，其安全性较高，病人耐受性良好，但仍存在某些不良反应，主要为DHT水平的下降所引起，包括阳痿或射精失败、性欲减退、女性化乳房及相关症状。

红豆蔻为姜科植物大高良姜Alpinia galanga Willd.的果实，主产广东、广西、云南等地，辛、温，归脾胃经，其功效为温中散寒，行气止痛.用于腹脘冷痛，食积胀满，呕吐泄泻等(《临床中药学》，张廷模主编，中国中医药出版社，2004，8).现代药理学研究表明：红豆蔻种子的甲醇提取物中分离出的成分腹腔注射能明显抑制大鼠溃疡；其根茎的挥发油显示抗微生物活性，能抗革兰氏阳性菌、酵母菌及一些皮肤真菌，具有细胞毒和抗真菌活性；其果实的甲醇提取物中分离的成分具有抗肿瘤作用(《中华本草》第八卷，上海科学技术出版社，1999).但迄今尚未见红豆蔻抑制5α-还原酶、预防或治疗良性前列腺增生以及相关疾病的报道.

发明内容

本发明的技术方案是提供了中药红豆蔻及其提取物的新用途。本发明还提供了含有红豆蔻原生药或提取物为活性成分的药物组合物及其制备方法和用途。

本发明提供了中药红豆蔻在制备5α-还原酶抑制剂药物中的应用和中药红豆蔻在制备治疗前列腺增生药物中的应用。

所述的中药红豆蔻来自于姜科植物大高良姜(Alpinia galanga Willd.)的果实。

所述的红豆蔻为红豆蔻原生药材或水/有机溶剂提取物。

其中，所述的红豆蔻有机溶剂提取物为甲醇、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、乙醚或石油醚中的一种溶剂的提取物或者多种溶剂混合的提取物。

其中，红豆蔻的水或有机溶剂提取物是由以下方法制备得到：

a)红豆蔻用水或30～95％的乙醇回流提取，提取液浓缩干燥得样品A；

b)样品A溶于水，用石油醚、乙醚、乙酸乙酯或正丁醇萃取，减压回收溶剂得水提取物和相应的有机溶剂提取物。

本发明还提供了一种用于制备5α-还原酶抑制剂药物的药物组合物，它是由所述的红豆蔻原生药材或其水/有机溶剂提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。

以上述中药红豆蔻或其提取物为活性成分，与药学上可接受的辅助添加剂成分混合后，按相应的常规药物制剂方法，可以制备抑制5α-还原酶活性、预防和/或治疗前列腺增生的药物。例如，与在口服制剂中可以被接受的崩解剂、赋形剂、润滑剂、粘合剂、填充剂等常用辅助添加成分混合后，按常规的操作方法和过程，可以制成为片剂、丸剂、胶囊剂或多种相应的缓释剂、控释剂等固体口服制剂形式的药物；与常规的增溶剂、乳化剂、润饰剂、起泡或消泡剂等表面活性剂、稀释剂、防腐剂、稳定剂、矫味剂、增稠剂等混合后，按相应的常规方法，可以制备成为合剂、糖浆、口服液等液体制剂形式的口服药物；与常规的悬浮剂、稳定剂、分散剂或调节溶液渗透压剂混合，按相应的常规方法，配置成注射液。

进一步的，本发明提供了该药物组合物的制备方法，包括以下步骤：

a)红豆蔻用水或30～95％的乙醇回流提取，提取液浓缩干燥得样品A；

b)样品A溶于水，用石油醚、乙醚、乙酸乙酯或正丁醇萃取，减压回收溶剂得水提取物和相应的有机溶剂提取物；

c)以红豆蔻水/有机溶剂提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成制剂。

本发明还提供了该药物组合物在制备5α-还原酶抑制剂药物中的应用。

本发明还提供了该药物组合物在制备预防和/或治疗前列腺增生药物中的应用。

按照本发明，可以将上述含有中药红豆蔻或其提取物，或中药红豆蔻及其提取物与其它具有预防和/或治疗前列腺增生作用的西药或中药活性成分配伍组成的复方制剂，按照常规的制剂技术，制备成口服制剂或注射剂。

本发明从中药红豆蔻中提取得到红豆蔻提取物，试验证明其具有抑制5α-还原酶活性的作用，对雄性大鼠的前列腺增生具有明显的预防和治疗作用.可用于制备治疗和/或预防前列腺增生的药物制剂，如口服制剂或注射剂.具有疗效显著、价格低廉、服用方便的特点.

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以作出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

实施例1红豆蔻原生药药品的制备

取中药红豆蔻原生药，即大高良姜Alpinia galanga Willd.的干燥成熟种仁净制以后，按常规方法粉碎，过筛，制成粒度为60～80目的红豆蔻细粉，灭菌，分装即成。

实施例2红豆蔻提取物的制备

称取红豆蔻1000g，用90％乙醇提取三次，溶媒量分别为8倍、6倍、6倍，提取时间分别为2小时、1小时、1小时。合并提取液，回收至无醇味。50℃减压干燥得样品A。称取样品A 50g，用150ml蒸馏水溶解。水溶液分别用3倍体积的石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压回收溶剂得样品B(石油醚相)、C(乙醚相)、D(乙酸乙酯相)、E(正丁醇相)、F(水相)。上述提取溶剂可根据需要，选择其中不同的有机溶剂混合使用。

实施例3

称取红豆蔻1000g，用30％乙醇提取三次，溶媒量分别为8倍、6倍、6倍，提取时间分别为2小时、1小时、1小时。合并提取液，回收至无醇味。50℃减压干燥发明红豆蔻提取物。

实施例4

称取红豆蔻1000g，用95％乙醇提取三次，溶媒量分别为8倍、6倍、6倍，提取时间分别为2小时、1小时、1小时。合并提取液，回收至无醇味。50℃减压干燥发明红豆蔻提取物。

实施例5片剂的制备

片剂的组成：实施例2制备的红豆蔻提取物A      0.5g

HPMC_LV100                                    30g

乳糖                                         69g

硬脂酸镁                                     0.5g

共                                           100g

将红豆蔻提取物A、HPMC_LV100、乳糖混匀，以75％乙醇为粘合剂制湿颗粒，过22目筛，50℃干燥3小时，22目筛整粒，加入硬脂酸镁混匀压片，制成1000片，每片0.1g。用于患者，口服，一日3次，每次2片。

实施例6胶囊剂的制备

胶囊组成：实施例2制备的红豆蔻提取物B      0.5g

淀粉                                      99g

硬脂酸镁                                  0.5g

共                                        100g

将红豆蔻提取物B、淀粉、硬脂酸镁混匀，装胶囊，共1000粒，每粒0.1g。用于患者，口服，一日3次，每次2粒。

实施例7注射剂的制备

注射液组成：实施例2制备的红豆蔻提取物C   0.5g

吐温80                                   10ml

氯化钠                                   8g

红豆蔻提取物C，加入10％碳酸钠调PH值至7.0～7.5，冷藏过滤，加入吐温-80，加注射用水至1000ml，滤过，分装，灌封，100℃流通蒸汽灭菌，30min即得。

实施例8复方片剂或胶囊的制备

用红豆蔻提取物制备复方制剂，取红豆蔻提取物D 0.5g，姜黄提取物200g，按常规方法，加入辅料，制成片剂或胶囊。每片或粒200mg，用于患者，口服，一日3次，每次1片或1粒，一月为一疗程。

以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。

试验例1红豆蔻提取物对5α-还原酶的抑制作用

稳定表达5α-还原酶I的人胚肾293细胞，按常规方法维持培养在含10％小牛血清，100ug/ml链霉素，100U/ml青霉素的1640培养基中，次日以3.5×10⁴/孔接种于24孔板中，37℃5％CO₂饱和湿度培养箱中培养24小时，换新鲜培养基，每孔加入0.1mM睾酮并分别加入红豆蔻A、B、C、D、E、F样品，以柏诺特(瑞士端纳博士药厂生产，批号为A004188)为阳性对照药物。

稳定表达5α-还原酶II的人胚肾293细胞，按常规方法维持培养在含10％小牛血清，100ug/ml链霉素，100U/ml青霉素的1640培养基中，次日以3.5×10⁴/孔接种于24孔板中，37℃5％CO₂饱和湿度培养箱中培养24小时，换新鲜培养基，每孔加入0.1mM睾酮并分别加入红豆蔻A、B、C、D、E、F样品，以保列治(非那甾胺，杭州默沙东制药厂生产，批号为20011019)为阳性对照药物。

加入红豆蔻提取物A、B、C、D、E、F样品以及阳性药物2小时后，收集细胞培养上清，用EIA试剂盒定量检测二氢睾酮，测定450nm条件下的吸光值，根据标准测定值计算二氢睾酮量，以此确定睾酮的转换以及样品对睾酮转换的抑制效率，结果见表1：

表1红豆蔻提取物(A、B、C、D、E、F)对5α-还原酶I和II的抑制作用(样品浓度：100μg/ml)

表1结果显示，红豆蔻提取物A-E具有抑制两种5α-还原酶的作用，即双重酶抑制作用，在细胞水平上阻断睾酮向二氢睾酮的转换。

实验例2红豆蔻提取物对丙酸睾酮所致去势大鼠前列腺增生的影响

选取正常雄性SD大鼠70只，随机分为七组，每组10只，即正常组(灌胃给予等体积生理盐水)，去势组(摘除双侧睾丸)，去势+睾酮组(摘除双侧睾丸，注射丙酸睾丸酮2mg/kg)，红豆蔻高、中、低剂量组(去势+睾酮并灌胃给予红豆蔻C提取物)，阳性药物组(去势+睾酮并灌胃给予保列治)。给药45天后眼眶后静脉丛取血，分离血清测定DHT浓度，检测方法及计算参照EIA试剂盒说明进行；取血后脱颈处死大鼠，剥离前列腺周围组织，取出前列腺腹叶，称取湿重后放置低温匀浆，离心收集上清，检测组织中的DHT和T浓度，检测方法及计算参照EIA试剂盒说明进行，结果见表2。

表2红豆蔻提取物C对前列腺增生大鼠血清、组织DHT水平的影响(n＝8，X±SD)

注：与去势+睾酮组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

表2结果显示，与去势+睾酮组比较，红豆蔻提取物C高剂量组具有显著降低血清DHT、组织DHT和前列腺湿重的作用(P＜0.05)。

上述药效学试验结果表明，本发明药物提取物具有明显的治疗前列腺增生的作用，可用于制备治疗和/或预防前列腺增生的药物制剂，疗效显著，且质量稳定，可控性强.

Claims (9)

1.中药红豆蔻及其水和乙醇提取物在制备5α-还原酶抑制剂药物中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的药物是预防和/或治疗前列腺增生的药物。

3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于：所述的红豆蔻为姜科植物大高良姜Alpinia galanga Willd.的果实。

4.一种用于制备5α-还原酶抑制剂的药物组合物，它由红豆蔻原生药材或水或乙醇提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成制剂。

5.根据权利要求4所述的制备5α-还原酶抑制剂的药物组合物，其特征在于：所述的制剂是口服制剂或注射剂。

6.根据权利要求4或5所述的药物组合物，其特征在于：红豆蔻的水或有机溶剂提取物是由以下方法制备：

a)红豆蔻用30～95％的乙醇回流提取，提取液浓缩干燥得样品A；

b)样品A溶于水，用石油醚、乙醚、乙酸乙酯或正丁醇萃取，减压回收溶剂得水提取物和相应的有机溶剂提取物。

7.一种制备权利要求4或5所述的药物组合物的方法，包括以下步骤：

a)红豆蔻用30～95％的乙醇回流提取，提取液浓缩干燥得样品A；

b)样品A溶于水，用石油醚、乙醚、乙酸乙酯或正丁醇萃取，减压回收溶剂得水提取物和相应的有机溶剂提取物；

c)以红豆蔻水/有机溶剂提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成制剂。

8.权利要求4或5所述的药物组合物在制备5α-还原酶抑制剂药物中的用途。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于：所述药物是制备预防和/或治疗前列腺增生的药物。