CN113940983A - 红豆蔻提取物在制备治疗慢性前列腺炎中药产品中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种红豆蔻提取物在制备治疗慢性前列腺炎产品中的应用。根据药理实验结果，红豆蔻提取物对于慢性前列腺炎的前列腺指数、血清炎症因子等均有显著的改善作用。因此可开发红豆蔻提取物治疗慢性前列腺炎的新用途。该提取物作为药食两用的天然植物提取物，可以添加至不同剂型的产品中去，临床上用于治疗慢性前列腺炎，具有毒性小，疗效确切的特点。

Description

红豆蔻提取物在制备治疗慢性前列腺炎中药产品中的用途

技术领域

本发明属于中药医疗领域，具体涉及可改善慢性前列腺炎中炎症指标、腺体增生等作用的红豆蔻提取物在制备治疗前列腺炎中药产品方面的新用途。

背景技术

前列腺炎是泌尿外科门诊常见病、多发病，因其发病率高、治疗效果差而成为广受世界关注的疾病。1995年美国国立卫生研究院（National Institutes of Health , NIH）将前列腺炎分为急性细菌性前列腺炎（I型）、慢性细菌性前列腺炎（II型）、慢性无菌性前列腺炎（III型）以及无症状性前列腺炎（IV型）。

90%以上前列腺炎患者属于慢性无菌性前列腺炎。其特点是起病缓，疗效不显著，病程久，易在外因诱导下复发。由于其发病机制不明，给临床诊治带来了诸多困难。目前认为与病原体感染、氧化应激、免疫反应异常、性激素水平及神经内分泌均存在相关性。

目前，现代医学对慢性前列腺炎无特异性治疗药物和方法，临床上常用α-受体阻滞剂、抗生素和非甾体抗炎药，虽然对缓解症状有不同程度的疗效，但长期服用可导致眩晕、耐药等不良反应。中医药对慢性前列腺炎（白浊、淋症、精浊）有较好的治疗作用，具有多层次、多靶点的整体调节优势。因此，很有必要在中医药理论指导下开发一种疗效确切，副作用小，服用方便的治疗慢性前列腺炎的产品。

红豆蔻为姜科山姜属植物大高良姜 (Alpinia galanga Willd.) 干燥成熟的果实。秋季果实变红时采收。主要产于我国东南部和西南部地区，为药典收载品种。红豆蔻性辛、温，归脾、肺经，具有温中散寒、醒脾消食等功效，用于治疗脘腹冷痛、食积胀满、呕吐泄泻、噎膈反胃、饮酒过多等。主要含有挥发油、二萜、二苯庚烷和苯丙素类等化学成分。对其活性研究较少，至今未见有报道红豆蔻提取物用于制备治疗慢性无菌性前列腺炎的中药产品用途。

发明内容

本发明的目的是探索红豆蔻提取物在治疗慢性前列腺炎中药产品中的应用。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案为：红豆蔻提取物，该提取物的制备方法为：取红豆蔻药材粉碎过筛，加入5-10倍纯水浸泡，热回流提取2-4个小时，提取液减压浓缩得到的固体干燥粉末即为红豆蔻提取物。

所述的红豆蔻提取物，除了以上制备方法得到的，还可通过市售购买得到红豆蔻水提取物。

本发明通过研究证明，红豆蔻提取物可以抑制慢性无菌性前列腺炎SD大鼠血清中的炎症因子（NF-κB、MCP-1、TNF-α）的表达，表明红豆蔻提取物具有较好的改善慢性前列腺炎炎症指标的作用。此外，红豆蔻提取物还能改善模型大鼠的前列腺指数以及前列腺组织的病理状态。

本发明应用的红豆蔻水提物可以和药学上允许的任意一种辅料或药物赋形剂制成的产品，其制剂可以是药学上允许的任意一种剂型，包括但不限于片剂、凝胶、乳膏剂、颗粒剂、软胶囊、或软膏剂；或者作为活性成分和其他治疗慢性前列腺炎的中药提取物以及常用辅料配制成治疗慢性前列腺炎的制剂上允许的任意一种剂型。所用的辅料可以采用所述剂型常用辅料，复配所用的其他治疗慢性前列腺炎的中药提取物（醇提取物或水提物），如萆薢提取物，石菖蒲提取物等。

与现有技术比较本发明的有益效果：红豆蔻提取物属于药食同源的天然成分，作为治疗慢性前列腺炎的活性物质，具有安全性高、疗效好的特点。因此，红豆蔻提取物可以制备治疗慢性前列腺炎产品，改善症状。本发明为红豆蔻提取物提供了新用途，扩大了其应用范围。

附图说明

图1：红豆蔻提取物改善慢性前列腺炎大鼠前列腺指数

给予慢性前列腺炎模型大鼠不同剂量红豆蔻提取物21天。低剂量组（0.2 g/kg），中剂量组（0.5 g/kg），高剂量组（1.5 g/kg），阳性药组（普乐安片，0.5 g / kg）。末次给药24 h 后麻醉大鼠，腹主动脉取血，处死，取前列腺、吸干脏器表面液体和血液，称定质量并记录，计算前列腺指数（%）。结果以mean ± s.e.m表示。*P<0.05, **P<0.01。

图2：红豆蔻提取物改善慢性前列腺炎大鼠前列腺组织病理形态

取出部分大鼠前列腺组织，10% 甲醛溶液固定，常规石蜡包埋切片，进行HE染色，镜检观察其病理变化。（A）对照组;（B）模型组；（C）治疗组（红豆蔻提取物，0.5 g/kg）

图3：红豆蔻提取物改善慢性前列腺炎大鼠前列腺组织病理评分

按照各组前列腺腺体组织病变程度，将其形态学变化分为 3 个等级进行定量评价，对各项病理变化评分计算总和作为整体评分。主要从腺体形态、炎性细胞浸润、纤维组织增生程度 3 个方面进行评价。包括对照组，模型组，治疗组（红豆蔻提取物，0.5 g/kg）。结果以mean ± s.e.m表示。*P<0.05, **P<0.01。

图4：红豆蔻提取物改善慢性前列腺炎大鼠血清中NF-κB的表达

给予各组大鼠不同剂量红豆蔻提取物21天后，取血。利用ELISA 试剂盒检测大鼠血清中的 NF-κB表达。低剂量组（0.2 g/kg），中剂量组（0.5 g/kg），高剂量组（1.5 g/kg），阳性药组（普乐安片，0.5 g / kg）。结果以mean ± s.e.m表示。*P<0.05, **P<0.01。

图5：大鼠血清中MCP-1、TNF-α表达

利用ELISA 试剂盒检测，对照组、模型组、以及治疗组（红豆蔻提取物，0.5 g/kg）大鼠血清中的MCP-1、TNF-α表达，结果以mean ± s.e.m表示。*P<0.05, **P<0.01。

具体实施方式

以下通过具体实施方式对本发明效果做进一步说明：

实施例1：制备红豆蔻提取物

取红豆蔻药材粉碎过筛，加入10倍纯水浸泡，热回流提取2-4个小时，提取液减压浓缩得到的固体干燥粉末即为红豆蔻水提取物，得率为10.23%。

实施例2：红豆蔻提取物对慢性无菌性前列腺炎的治疗作用

1. 实验材料

红豆蔻提取物（10:1水提物），λ-角叉菜胶（sigema公司，货号22049），水合氯醛。ELISA试剂盒（南京建成生物工程研究所）。清洁级健康雄性 SD 大鼠，体质量 280 g，常规饲养，每天自由饮水进食。

2. 慢性非细菌性前列腺炎（CNP）模型的建立方法

清洁级健康雄性 SD 大鼠，体质量 280 g，常规饲养，每天自由饮水进食。适应性喂养 1 周后在无菌条件下以 10%水合氯醛麻醉，腹正中切口至腹腔，提出膀胱及两侧精囊。除假手术组大鼠注射等量生理盐水外，其余各组前列腺腹侧叶注入 0.1 mL 角叉菜胶生理盐水溶液，注射后缝合肌肉、皮肤。

3. 给药

造模7天后，空白组、模型组给予生理盐水，治疗组给予红豆蔻提取物，低剂量组（0.2 g/kg），中剂量组（0.5 g/kg），高剂量组（1.5 g/kg），阳性药组（普乐安片，0.5 g /kg）。每天1次，连续21天。

4. 取样及指标检测

末次给药 24 h 后麻醉大鼠，腹主动脉取血，处死，取前列腺、胸腺，吸干脏器表面液体和血液，称定质量并记录，计算前列腺指数（%）、胸腺指数（%），并进行相关检测。血样放置 4 h 后离心 15 min，取血清，ELISA 试剂盒检测NF-κB、 MCP-1、TNF-α表达。

5. 前列腺组织病理变化

取出部分大鼠前列腺组织，10% 甲醛溶液固定，常规石蜡包埋切片，进行HE染色，镜检观察其病理变化。

6. 实验结果

6.1 前列腺指数

前列腺指数：常作为慢性非细菌性前列腺炎（chronic non-bacterialprostatitis，CNP）) 动物模型的炎症检测指标，通过记录每只大鼠的前列腺组织的总湿重以及自身体重，即可得到。公式为: 前列腺指数 = 前列腺组织总湿重/大鼠体重（单位:mg/g）。

如图1所示，与对照组相比，模型组大鼠的前列腺指数显著增加，具有统计学差异（P＜0.01）。治疗组给予各剂量组红豆蔻提取物后，均具有一定改善作用。其中低剂量组（0.2 g/kg）具有统计学差异（P＜0.05）。

6.2 前列腺组织病理变化

按照各给药组前列腺腺体组织病变程度，将其形态学变化分为 3 个等级进行定量评价，对各项病理变化评分计算总和作为整体评分。主要从腺体形态、炎性细胞浸润、纤维组织增生程度 3 个方面进行评价。

如图2所示，对照组大鼠前列腺组织腺体完整，腺上皮单层细胞结构完整，未见萎缩，细胞间质炎性细胞少，无纤维组织增生情况，腺腔内分泌物丰富; 模型组大鼠前列腺腺体变形严重，腺体萎缩，腺上皮皱襞减少，有脱落、坏死现象，部分腺上皮呈乳头状增生，腺体间质炎性细胞浸润严重，有明显的水肿现象，腺腔内分泌物减少。

如图3所示，前列腺组织病理评分结果显示，与对照组大鼠前列腺组织的腺体形态评分、炎症评分、纤维组织增生评分都显著升高，具有统计学意义（P＜0.01）。治疗组给予红豆蔻提取物（0.5 g/kg）后，对前列腺炎大鼠的腺体形态具有一定的改善作用。

前列腺组织病理变化（腺体形态、炎症评分、纤维组织增生评分），模型组与对照组之间，存在显著差异，且均具有统计学意义。表明本次实验成功建立了慢性非细菌性前列腺炎动物模型，可以在该模型基础上，评价各提取物的治疗效果。

治疗组给予红豆蔻提取物后，在改善前列腺炎大鼠的脏器指数，腺体形态、炎症评分、纤维组织增生等方面，均有一定的效果。

6.3 血清炎症因子NF-κB、MCP-1、TNF-α表达

NF-κB 是细胞胞浆中的反应转录因子，参与炎症中的免疫反应，其表达可引发多种炎症介质的产生，从而使炎症反应加剧。利用ELISA试剂盒，对各组大鼠血清中的NF-κB表达进行检测。结果如图4所示，与对照组相比，模型组大鼠的血清中NF-κB的表达显著升高，且具有统计学意义（P＜0.01）。给予各提取物后，大鼠血清中的NF-κB均有下降。其中给予红豆蔻提取物低剂量组（0.2 g/kg），中剂量组（0.5 g/kg）时，血清中NF-κB显著下降，且具有统计学意义（P＜0.01）。提示，低、中剂量红豆蔻提取物对于改善前列腺炎大鼠血清中的NF-κB表达，具有一定疗效。

MCP-1 是一种重要的单核细胞激活因子，可诱导炎症因子的表达，在多种炎症疾病评价中有重要参考价值。利用ELISA试剂盒，对各组大鼠血清中的MCP-1表达进行检测。结果如图5所示，与对照组相比，模型组大鼠的血清中MCP-1的表达显著升高。治疗组给予红豆蔻提取物（0.5 g/kg）后，血清中MCP-1显著下降，且具有统计学意义（P＜0.05）。提示，红豆蔻提取物（0.5 g/kg）对于改善前列腺炎大鼠血清中的MCP-1表达，具有一定疗效。

TNF-α是重要的炎症因子，能诱导趋化因子产生，使上皮细胞和淋巴细胞表达黏附分子，导致组织细胞增生、组织损伤等病理变化。利用ELISA试剂盒，对各组大鼠血清中的TNF-α表达进行检测。结果如图5所示，与对照组相比，模型组大鼠血清中TNF-α指标升高。治疗组给予红豆蔻提取物（0.5 g/kg）后，血清中TNF-α显著下降，且具有统计学意义（P＜0.05）。提示，红豆蔻提取物，对于改善慢性前列腺大鼠血清中TNF-α指标，具有一定疗效。

以上实验结果表明，红豆蔻提取物在改善慢性前列腺炎大鼠血清炎症指标方面，具有显著的疗效。提示其对于慢性前列腺炎具有一定的治疗作用。

实施例3：红豆蔻提取物乳膏

红豆蔻水提取物1 g，硬脂酸100 g，十六醇20 g，单硬脂酸甘油酯10 g，液体石腊10 g，羟苯甲酯0.8 g，羟苯丁酯0.2 g，甘油140 g，氢氧化钾5 g，乙醇10 g，蒸馏水加至1000 g。

实施例4：红豆蔻提取物凝胶

红豆蔻水提取物1 g，PEG400450 g，己二醇80 g，吐温8020 g，卡波姆30 g，乙醇胺6 ml，苯甲醇10 g，蒸馏水加至1000 g。

实施例5：红豆蔻提取物胶囊

红豆蔻水提取物100 g，淀粉80 g，羧甲基淀粉钠24 g，糊精17 g，70％乙醇适量，制成1000粒(每粒含红豆蔻提取物100 mg)。

实施例6：红豆蔻提取物片

红豆蔻水提取物1000 g，乳糖55 g，可压性淀粉15 g，羟丙纤维素10 g，硬脂酸镁5g，70％乙醇适量，制成1000片(每片含红豆蔻水提取物1000 mg)。

实施例7：红豆蔻提取物颗粒剂

红豆蔻提取物10 g，乳糖粉800 g，硬脂酸镁194 g，70％乙醇适量，制成1000克颗粒(每g颗粒制中含红豆蔻提取物10 mg)。

实施例8：红豆蔻提取物软胶囊

红豆蔻提取物50 g，大豆油10 g，明胶5 g，甘油5 g，蒸馏水7 g，制成1000粒(每粒含红豆蔻提取物50 mg)。

实施例9：红豆蔻提取物、萆薢提取物两种组合物凝胶

红豆蔻提取物1 g，萆薢提取物1 g，PEG400 450 g，己二醇80 g，吐温8020 g，卡波姆30 g，乙醇胺6 ml，苯甲醇10 g，蒸馏水加至1000 g。

实施例10：红豆蔻提取物、石菖蒲提取物两种组合物凝胶

红豆蔻提取物1 g，石菖蒲提取物1 g，PEG400 450 g，己二醇80 g，吐温8020 g，卡波姆30 g，乙醇胺6 ml，苯甲醇10 g，蒸馏水加至1000 g。

Claims (5)

1.红豆蔻提取物在制备治疗慢性前列腺炎中药产品中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于红豆蔻提取物作为活性成分和常用辅料配制成中药产品的任意一种剂型；或者作为活性成分和其他治疗慢性前列腺炎的中药提取物以及常用辅料配制成中药制剂产品上允许的任意一种剂型。

3.根据权利要求2所述的用途，所述的剂型可以是乳膏剂、凝胶、胶囊、软胶囊、片剂、颗粒剂等。

4.根据权利要求2所述的用途，所用的辅料可以采用所述剂型常用辅料，复配所用的其他中药提取物为改善慢性前列腺炎的中药提取物（醇提取物或水提取物），如萆薢提取物，石菖蒲提取物等。

5.根据权利要求1所述的红豆蔻提取物，其特征在于：制备方法是通过纯水提取红豆蔻药材得到的水提物干燥后的固体粉末，提取方法可以为煎煮法，回流提取法等。

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