CN1823933A - 参附注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种参附注射液及其制备方法，本发明具有提高人参有效成分的提取率，降低附子毒性成分的过量提取的风险，操作简便，耗时短的突出优势；发明所得的参附注射液的配伍稳定性也优于现有技术。本发明的参附注射液，也可以应用到类似配方下的参附粉针、参附冻干粉针、参附输液等注射剂型，这些剂型的制备和实施也成为了可能。

Description

参附注射液及其制备方法

技术领域

本发明属于中药注射剂领域，具体涉及一种参附注射液及其制备方法。

背景技术

人参是一种名贵中药，它有很高药用价值，《神农本草经》认为，人参有“补五脏、安精神、定魂魄、止惊降、除邪气、明日开心益智″的功效，久服轻身延年”；而附子辛热燥烈，补火散寒，上助心阳，中温脾阳，下暧肾阳，可达表入里，温通周身之阳气。附子是临床上常用药之一，大热，亦有大毒。所以附子的临床应用是要慎重对待的。

参附注射液的基础方参附汤源于《妇人良方》，它具有回阳、益气、固脱之功效，用于元气大亏，阳气暴脱，症见手足厥冷、汗出、呼吸微弱、脉微等。基于参附汤开发研制的参附注射液已成为急症抢救的必备药物，它是全国中医院急诊科室必备急救用药，广泛应用于危重病的急救，显示出较好疗效。参附注射液对中枢神经系统、循环系统、呼吸系统、肾脏和肠道均有保护作用，在危重病的救治方面尤其是在心肺脑复苏领域，参附注射液也具有广阔的应用前景。

中国专利96117458公开了一种参附注射液及其制备方法。其制备方法是，取人参、附子分别进行提取：人参用乙醇回流提取；附子用水沉淀提取，然后合并人参、附子提取液配制而成。一方面，由于人参是贵重药材，该专利中为能够完全提取人参中的有效成分，在工艺操作中反复提取操作，因而其工艺非常繁琐，异常耗时；且由于加热提取的时间较长，也增大了人参有效成分降解的可能性；另一方面，由于附子是毒性较大的中药，提取工艺的反复操作和时间的延长也会提高毒性成分的提取率，加大了临床用药的风险。

发明内容

本发明的目的在于提供一种参附注射液。

本发明的另一目的在于提供一种参附注射液的制备方法。

具体而言，发明所述的参附注射液由人参有效部位和附子有效部位复配制成注射剂，其中人参和附子投料的重量比例为1∶2。

发明所述的附子有效部位制备过程为：

附子粉碎，加4-7倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到2-5，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置水浴保温，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集70％和95％乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇或二氯甲烷或氯仿萃取，挥去溶剂即得附子有效部位。

优选的附子有效部位制备过程为：

附子粉碎，加4-5倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置30-40℃水浴保温1-2小时，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集70％和95％乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇或二氯甲烷萃取3-5次，挥去溶剂即得附子有效部位。

所述的人参有效部位制备过程为：

人参粉碎，加4-12倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到2-5，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置30-45℃水浴保温2-6小时，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集人参皂苷集中的乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用5-9倍量50-95％乙醇回流提取2-5次，将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇萃取3-7次，挥去溶剂即得人参有效部位。

优选的人参有效部位制备过程为：

人参粉碎，加8-12倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置30-40℃水浴保温4-6小时，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集人参皂苷集中的乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用6-9倍量70-95％乙醇回流提取3-5次，将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇萃取5-7次，挥去溶剂即得人参有效部位。

具体而言，参附注射液制备过程为：

取注射用水，加热至沸腾，加入附子有效部位和人参有效部位搅拌使溶解，调PH约3-5，加热至沸腾，药液冷藏8-16小时，滤过，滤液加入活性炭，煮沸，微孔滤膜滤过，滤液加入吐温-80，搅拌使溶解，加注射用水至定容，灌封于安瓶中，100℃蒸汽灭菌30-60分钟，即得。

上述的大孔树脂选自D101型、DA201型、SIP系列、GDX104型、LD605型、LD601型、WLD型、H107型大孔树脂。

上述的纤维素酶是由葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和1，3-β-葡萄糖苷酶组成的混合物。

上述的淀粉酶是α淀粉酶。

上述的滤过用的微孔滤膜孔径为0.22-0.45μm。

本发明的参附注射液对于类似配方下的参附粉针、参附冻干粉针、参附输液等注射剂型也有借鉴意义，使这些剂型的制备和实施也成为了可能。

本发明所述参附注射液，其性状为淡黄棕色的澄明液体。用法与用量为：肌内注射：一次2～4ml，一日1～2次。静脉滴注，一次20～100ml，(用5～10％葡萄糖注射液250～500ml稀释后使用)。静脉推注，一次5～20ml(用5～10％葡萄糖注射液20ml稀释后使用)，或遵医嘱。

发明人基于简化工艺、减少人参中有效成分降解、降低附子毒性成分的临床风险和简化工艺的目的，完成了本发明。通过实验证明，通过本发明所得的参附注射液在品质上与原专利的产品相比，没有差别。本发明与原专利的相比，它具有提高人参有效成分的提取率，降低附子毒性成分的过量提取的风险，操作简便，耗时短的突出优势。令发明人惊喜的是，发明所得的参附注射液的配伍稳定性也优于原专利工艺。

具体实施方式

下面用实施例进一步描述本发明，有利于对本发明及其优点、效果有更好的了解，但所述实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。

              实施例1-参附注射液的制备

a.附子有效部位的制备：

取1kg附子粉碎，加4倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置37℃水浴保温2小时，滤过，滤液上D101型大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集70％和95％乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯萃取5次，挥去溶剂即得附子有效部位。

b.人参有效部位制备：

取0.5kg人参粉碎，加12倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置37℃水浴保温4-6小时，滤过，滤液上D101型大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集20％和30％乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用9倍量70％乙醇回流提取4次，将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用正丁醇萃取7次，挥去溶剂即得人参有效部位；

c.注射剂的制备：

取注射用水，加热至沸腾，加入附子有效部位和人参有效部位搅拌使溶解，调PH约3-5，加热至沸腾，药液冷藏12小时，滤过，滤液加入活性炭，煮沸，用孔径为0.22μm微孔滤膜滤过，滤液加入吐温-80，搅拌使溶解，加注射用水至定容，灌封于2ml安瓶中，100℃蒸汽灭菌45分钟，即得。

                   实施例2-参附注射液的制备

a.附子有效部位的制备：

取1kg附子粉碎，加5倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置40℃水浴保温2小时，滤过，滤液上D101型大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集70％和95％乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用二氯甲烷萃取3-5次，挥去溶剂即得附子有效部位。

b.人参有效部位制备：

取0.5kg人参粉碎，加12倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置40℃水浴保温5小时，滤过，滤液上D101型大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集50％乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用6倍量70％乙醇回流提取5次，将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯萃取5-7次，挥去溶剂即得人参有效部位；

c.注射剂的制备：

取注射用水，加热至沸腾，加入附子有效部位和人参有效部位搅拌使溶解，调PH约3-5，加热至沸腾，药液冷藏12小时，滤液加入活性炭，煮沸，用孔径为0.22μm微孔滤膜滤过，滤液加入吐温-80，搅拌使溶解，加注射用水至定容，灌封于2ml安瓶中，l00℃蒸汽灭菌45分钟，即得。

                    实施例3-参附注射液的制备

a.附子有效部位的制备：

取1kg附子粉碎，加4倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置37℃水浴保温2小时，滤过，滤液上D101型大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集70％和95％乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯萃取5次，挥去溶剂即得附子有效部位。

b.人参有效部位制备：

取0.5kg人参粉碎，加12倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置37℃水浴保温4-6小时，滤过，滤液上D101型大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集20％和30％乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用9倍量70％乙醇回流提取4次，将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用正丁醇萃取7次，挥去溶剂即得人参有效部位；

c.注射剂的制备：

取注射用水，加热至沸腾，加入附子有效部位和人参有效部位搅拌使溶解，调PH约3-5，加热至沸腾，药液冷藏12小时，滤过，滤液加入活性炭，煮沸，用孔径为0.22μm微孔滤膜滤过，滤液加入吐温-80，搅拌使溶解，加注射用水至定容，灌封于2ml安瓶中，100℃蒸汽灭菌45分钟，即得。

                   实施例4-参附注射液的制备

a.附子有效部位的制备：

取1kg附子粉碎，加5倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置40℃水浴保温2小时，滤过，滤液上D101型大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集70％和95％乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用二氯甲烷萃取3-5次，挥去溶剂即得附子有效部位；

b.人参有效部位制备：

取0.5kg人参粉碎，加12倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置40℃水浴保温5小时，滤过，滤液上D101型大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集20％、30％和50％乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用6倍量70％乙醇回流提取5次，将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯萃取5-7次，挥去溶剂即得人参有效部位；

c.注射剂的制备：

取注射用水，加热至沸腾，加入附子有效部位和人参有效部位搅拌使溶解，调PH约3-5，加热至沸腾，药液冷藏12小时，滤过，滤液加入活性炭，煮沸，用孔径为0.22μm微孔滤膜滤过，滤液加入吐温-80，搅拌使溶解，加注射用水至定容，灌封于2ml安瓶中，100℃蒸汽灭菌45分钟，即得。

                 对比例1参附注射液的制备

            (依照中国专利96117458实施例制备)

中国专利96117458参附注射液的工艺步骤如下：

a.制备人参提取液

(1)、取人参10kg，置容器中加乙醇3万ml，密闭，浸泡48小时，得浸泡液①；

(2)、药渣回流提取三次，每次加乙醇3万ml，回流2小时时，得回流提取液②；

(3)、取浸泡液①与回流提取②合并，得合并液③；

(4)、药渣用与原料等体积的乙醇淋洗，将淋洗液与合并液③合并，得提取液④；

(5)、取提取液④过滤，按其体积加入0.5％的活性炭，搅拌1小时，放置1小时，过滤，得过滤液⑤；

(6)、取过滤液⑤减压回收乙醇至无醇味，补加注射用水至5万ml，冷至室温，用40％的NaOH溶液调pH值至7-7.5，冷藏24小时，备用，得人参备用液⑥；

b、制备附子提取液

(7)、将电渗水置容器中，再加浓盐酸，使pH值达3-4，得酸水⑦；

(8)、取附子20kg，用常水搓洗、电渗水清洗后，置容器中，加入八倍量的酸水⑦，连续煎煮三次，每次2小时，合并三次煎煮液，过滤，减压浓缩至1∶1(即每1ml中含生药量1g)，冷至室温，得浓缩液⑧；

(9)、取浓缩液⑧，加入乙醇，搅拌，使含醇量达到75％，冷藏24小时，过滤，减压回收乙醇至2500ml，冷至室温，加乙醇、搅拌，使含醇量达到85％，用40％的NaOH溶液调PH值至8，冷藏过夜，得醇提取液⑨；

(10)、取醇提取液⑨过滤至澄明，减压回收乙醇至无醇味，补加注射用水至5万ml，冷至室温，用40％的NaOH溶液调PH值至7-7.5，冷藏24小时，备用，得附子备用液⑩

c、配制参附注射液

(11)、取人参备用液⑥和附子备用液⑩，分别过滤后，合并两液，加入0.5％的活性炭(按配液体积计算)，煮沸30分钟，冷至室温，过滤至澄明，加入0.2％吐温-80(按配液体积计算)，补加注射用水至全量，用40％的NaOH溶液调PH值至7-7.5，粗滤，精滤，灭菌，即得10万ml参附注射液。

d、上述参附注射液的处方为：人参10kg，附子20kg，适量注射用水，适量吐温-80，制成10万ml。每1ml中含有相当于原生药用量：人参0.1g，附子0.2g。

                 实验例1-参附注射液的性状和鉴别

【样品】实施例1-4和对比例1

【性状】样品为淡黄棕色的澄明液体。

【鉴别】

(1)取本品各1ml，置蒸发皿中，水浴上蒸干，残渣加醋酐0.5ml，使溶解，移入试管中，沿试管壁加硫酸0.5ml，两液界面呈棕红色环。

(2)取本品各30ml，置分液漏斗中，加氯仿30ml振摇，静置，取上层液蒸干，残渣加水2ml使溶解，加水饱和的正丁醇10ml，超声处理30分钟，吸收上清液，加氨试液3倍量，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取人参对照药材1g，加乙醇30ml，置水浴上回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液同法制成对照药材溶液。再取人参皂苷Rb1、Re及Rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典(2005版)》一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液20μl与对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

        实验例2-参附注射液的乌头类生物碱限量检查

【样品】实施例1-4和对比例1

【乌头类生物碱限量检查】

标准曲线的制备：精密称取乌头碱对照品5mg，置50ml量瓶中，加0.01mol/L盐酸溶液使溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取0.00、0.25、0.50、0.75、1.00、1.50、2.00ml，分别置分液漏斗中，各依次加入0.01mol/L盐酸溶液2.00、1.75、1.50、1.25、1.00、0.50、0.00ml，各精密加醋酸-醋酸钠缓冲液(取0.2mol/L醋酸溶液250ml，用0.2mol/L醋酸钠溶液调pH值至3.1)10ml，溴甲酚绿液[取溴甲酚绿50mg，加0.05mol/L氢氧化钠液1.6ml研磨使溶解，加水至100ml，用氯仿提取3次(每次30ml)，弃去氯仿液]2ml，氯仿10ml，振摇3分钟，静置，分取氯仿液，照分光光度度法(《中国药典(2005版)》一部附录V)在416nm波长处测定吸收度。以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

供试品溶液的制备：精密量取样品各10ml，置分液漏斗中，加氨试液调节pH值10-11，用氯仿提取4次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干。残渣加0.01mol/L盐酸溶液，分次溶液，并转入10ml量瓶中，稀释至刻度。另精密量取0.2％(g/ml)聚山梨酯80溶液10ml按同法操作，作为空白对照溶液。

测定法：精密量取上述供试品溶液与空白对照溶液各2ml，分别置分液漏斗中，照标准曲线的制备项下的方法，自“各精密加醋酸-醋酸钠缓冲液10ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中含乌头碱的重量(μg)，计算，即得。

各样品每1ml含乌头类生物碱以乌头碱(C₂₄H₄₇NO₁₁)计，均低于0.1mg。

              实验例3-参附注射液的人参皂苷检测

【样品】实施例1-4和对比例1

【含量测定】

对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷Rb₁对照品，用甲醇制成每1ml中含人参皂苷Rb13mg的溶液，即得。

标准曲线的制备：精密吸取对照品溶液20、30、40、50、60μl，分别置具塞试管中，水浴上挥去溶剂，放冷，各精密加5％香草醛冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，冰水浴冷却，加冰醋酸5ml，摇匀，以相应试剂为空白，照分光光度法(《中国药典(2005版)》一部附录VB)，在550nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

测定法：精密吸取样品各10ml，置分液漏斗中，用氯仿振摇提取4次，每次10ml，弃去氯仿层，水层再以水饱和的正丁醇提取4次，每次10ml，合并正丁醇液，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次10ml，弃去水液，正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。另精密量取0.2％(g/ml)聚山梨酯80液10ml，同法处理作空白对照液。精密吸取上述供试品溶液50μl，置具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法“自水浴上挥去溶剂”起依法测定吸收度，计算，即得。

各样品每1ml含人参总皂甙以人参皂Rb₁(C₅₄H₉₂O₂₃)计，均大于0.5mg。

              实验例4-参附注射液的常规检验

【样品】实施例1-4和对比例1

【pH值】各样品pH值在4.5-7.0内(《中国药典(2005版)》一部附录VII G)。

【热原】各样品按热原检查法(《中国药典(2005版)》一部附录X III A)检查，剂量按家兔体重1kg注射2ml，均符合规定。

【溶血试验】2％红血球混悬液的配制：取家兔心脏血，置有玻璃珠的容器内，振摇数分钟，除去纤维蛋白元，使成脱纤维血，加生理盐水，摇匀，离心，倾去上清液，沉淀的红血球再用生物盐水洗涤3～4次，至离心后上清液不显红色为止，然后按所得红血球体积用生物盐稀释成2％混悬液，当天使用，用时摇匀。

试验方法  取试管5支，编号，1～3号管分别加入供试品0.3、0.3、0.3及生理盐水2.2、2.2、2.2ml，4号管加入生理盐水2.5ml(作阴性对照管)，5号管加入蒸馏水2.5ml，置电热恒温箱内，保持36.54±0.5℃的温度，观察3小时，各样品均无溶血现象。

【其他】各样品均符合注射剂项下有关的各项规定(《中国药典(2005版)》一部附录IU)。

               实验例5-实施例1与对比例1的制剂配伍对比

实验目的：参附注射液临床以输液稀释后静脉滴注方式给药。现以配伍后混合溶液外观、pH值为指标，考察了实施例1与对比例1与不同浓度葡萄糖注射液氯化钠注射液，葡萄糖氯化钠注射液、盐酸川芎嗪注射液、氧氟沙星氯化钠注射液、维生素C注射液及碳酸氢钠注射液配伍后的稳定性。

1实验部分

1.1仪器及试药样品

仪器：pHS-2C型酸度计。

试药样品：对比例1、实施例1、5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液、氯化钠注射液、葡萄糖氯化钠注射液、碳酸氢钠注射液、盐酸川芎嗪注射液、氧氟沙星氯化钠注射液、维生素C注射液。

1.2方法

1.2.1配伍溶液的制备与稳定性考察取参附注射液适量，分置于5个量瓶中，分别以5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液、氯化钠注射液、葡萄糖氯化钠注射液、碳酸氢钠注射液、盐酸川芎嗪注射液、氧氟沙星氯化钠注射液、维生素C注射液稀释制成10％(ml/ml)的配伍溶液，混匀，放置，于0、3、6、9、24h作澄明度(表1)、pH值(表2)检查。

表1  实施例1与对比例1澄明度变化

配伍注射剂	样品	配伍前外观	配伍后外观
								0小时	3小时	6小时	9小时	24小时
			5％葡萄糖注射液	实施例1	澄明	澄明	澄明						澄明	澄明	澄明
10％葡萄糖注射液	澄明	澄明						澄明	澄明	澄明	澄明
			0.9％氯化钠注射液		澄明	澄明	澄明					澄明	澄明	澄明
碳酸氢钠注射液	澄明	澄明						澄明	澄明	澄明	澄明
			葡萄糖氯化钠注射液		澄明	澄明	澄明					澄明	澄明	澄明
盐酸川芎嗪注射液	澄明	澄明						澄明	澄明	澄明	澄明
			氧氟沙星氯化钠注射液		澄明	澄明	澄明					澄明	澄明	澄明
维生素C注射液	澄明	澄明						澄明	澄明	澄明	澄明
			5％葡萄糖注射液		对比例1	澄明	澄明					澄明	澄明	澄明	澄明
10％葡萄糖注射液	澄明	澄明		澄明				澄明	澄明	澄明
			0.9％氯化钠注射液			澄明	澄明				澄明	澄明	澄明	澄明
碳酸氢钠注射液	澄明	澄明		澄明				澄明	混浊	混浊
			葡萄糖氯化钠注射液			澄明	澄明				澄明	澄明	澄明	澄明
盐酸川芎嗪注射液	澄明	澄明		澄明				澄明	混浊	混浊
			氧氟沙星氯化钠注射液			澄明	澄明				澄明	混浊	混浊	混浊
维生素C注射液	澄明	澄明		澄明				澄明	澄明	澄明

由表1可以看出，实施例1的配伍稳定性优于对比例1。

表2  实施例1与对比例1配伍的pH变化

配伍注射剂	样品	配伍前pH值	配伍后pH值
								0小时	3小时	6小时	9小时	24小时
			5％葡萄糖注射液	实施例1	4.08	5.32	4.08						5.32	4.08	5.32
10％葡萄糖注射液	3.85	5.14						3.85	5.14	3.85	5.14
			0.9％氯化钠注射液		5.82	5.94	5.82					5.94	5.82	5.94
碳酸氢钠注射液	7.08	7.15						7.08	7.15	7.08	7.15
			葡萄糖氯化钠注射液		7.82	8.12	7.82					8.12	7.82	8.12
盐酸川芎嗪注射液	2.60	2.71						2.60	2.71	2.60	2.71
			氧氟沙星氯化钠注射液		5.67	5.66	5.67					5.66	5.67	5.66
维生素C注射液	5.81	5.95						5.81	5.95	5.81	5.95
			5％葡萄糖注射液		对比例1	4.08	5.42					4.08	5.42	4.08	5.42
10％葡萄糖注射液	3.85	5.18		3.85				5.18	3.85	5.18
			0.9％氯化钠注射液			5.82	5.96				5.82	5.96	5.82	5.96
碳酸氢钠注射液	7.08	7.25		7.08				7.25	7.08	7.25

葡萄糖氯化钠注射液		7.82	8.33	7.82	8.33	7.82	8.33
								盐酸川芎嗪注射液	2.60	2.76	2.60	2.76	2.60	2.76
氧氟沙星氯化钠注射液		5.67	5.69	5.67	5.69	5.67	5.69
								维生素C注射液	5.81	5.97	5.81	5.97	5.81	5.97

由表2可以看出，实施例1与对比例1的配伍后的pH值没有显著差异。

              实验例6-实施例1与对比例1的操作时间对比

发明人对实施例1与对比例1的操作时间进行了实际操作的对比，结果如表3。

表3  实施例1与对比例1的操作时间对比

人参工艺
				对比例1	操作时间(小时)	实施例1	操作时间(小时)
步骤(1)	48	浸泡	24
				步骤(2)	9	酶解	5
步骤(3)	0.5	大孔树脂分离	10
				步骤(4)	2	回流	8
步骤(5)	2.5	萃取	8
				步骤(6)	25	-	-
合计	87	合计	55
				附子工艺
对比例1	操作时间(小时)	实施例1	操作时间(小时)
				步骤(7)	0.5	浸泡	24
步骤(8)	10	酶解	2
				步骤(9)	28	大孔树脂分离	10
步骤(10)	28	回收乙醇	8
				-	-	萃取	8
合计	66.5	合计	52
				注射剂制备
对比例1	操作时间(小时)	实施例1	操作时间(小时)
				步骤(11)	48	注射剂制备	18
总计	201.5	总计	125

由表2可以看出，实施例1与对比例1相比，具有提高人参有效成分的提取率，降低附子毒性成分的过量提取的风险，操作简便，耗时短的突出优势。

Claims (10)

1.一种参附注射液，其特征在于由人参有效部位和附子有效部位复配制成注射剂。

2.根据权利要求1所述的参附注射液，其特征在于所述的附子有效部位的制备过程为：附子粉碎，加4-7倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到2-5，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置水浴保温，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集70％和95％乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇或二氯甲烷或氯仿萃取，挥去溶剂即得附子有效部位。

3.根据权利要求2所述的参附注射液，其特征在于所述的附子有效部位的制备过程为：附子粉碎，加4-5倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置30-40℃水浴保温1-2小时，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集70％和95％乙醇洗脱部分，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇或二氯甲烷萃取3-5次，挥去溶剂即得附子有效部位。

4.根据权利要求1所述的参附注射液，其特征在于所述的人参有效部位的制备过程为：人参粉碎，加4-12倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到2-5，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置30-45℃水浴保温2-6小时，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集人参皂苷集中的乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用5-9倍量50-95％乙醇回流提取2-5次，将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇萃取3-7次，挥去溶剂即得人参有效部位。

5.根据权利要求4所述的参附注射液，其特征在于所述的人参有效部位的制备过程为：人参粉碎，加8-12倍量水浸泡24小时，用盐酸调pH到3-4，加入纤维素酶和淀粉酶，搅拌，置30-40℃水浴保温4-6小时，滤过，滤液上大孔树脂，用水洗脱除去糖类，再用3-5倍体积的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脱，收集人参皂苷集中的乙醇洗脱部分；然后将处理后的人参用6-9倍量70-95％乙醇回流提取3-5次，将乙醇洗脱部分与回流提取部分合并，减压回收乙醇至无醇味，离心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇萃取5-7次，挥去溶剂即得人参有效部位。

6.根据权利要求2-5任一所述的参附注射液，其特征在于所述的参附注射液制备过程为：取注射用水，加热至沸腾，加入附子有效部位和人参有效部位搅拌使溶解，调PH约3-5，加热至沸腾，药液冷藏8-16小时，滤过，滤液加入活性炭，煮沸，微孔滤膜滤过，滤液加入吐温-80，搅拌使溶解，加注射用水至定容，灌封于安瓶中，100℃蒸汽灭菌30-60分钟，即得。

7.根据权利要求2-5任一所述的参附注射液，其特征在于所述的大孔树脂选自D101型、DA201型、SIP系列、GDX104型、LD605型、LD601型、WLD型、H107型大孔树脂。

8.根据权利要求2-5任一所述的参附注射液，其特征在于所述的纤维素酶是由葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和1，3-β-葡萄糖苷酶组成的混合物。

9.根据权利要求2-5任一所述的参附注射液，其特征在于所述的淀粉酶是α淀粉酶。

10.根据权利要求2-5任一所述的参附注射液，其特征在于所述的微孔滤膜孔径为0.22-0.45μm。