CN1290557C - 一种治疗白内障的药物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种治疗白内障的药物及其制备方法,其原料由石菖蒲、决明子、肉苁蓉、葛根、青葙子、党参、蔓荆子、枸杞子、车前子、白芍、山茱萸等22味中药组成。将白芍和山茱萸的醇提液与其他药物的水提液合并浓缩干燥,加入适量辅料制成胶囊。
Description
【技术领域】
本发明涉及一种治疗白内障的药物及其制备方法。
【背景技术】
现代人所患的众多眼科疾病中,以白内障的危险性最高、市场潜力最大。白内障是由于眼睛内晶状体发生混浊由透明变成不透明,阻碍光线进入眼内,从而影响视力。初期混浊对视力影响不大,而后渐加重,明显影响视力甚至失明。大多数的病例与年老有关,50~60岁老年性白内障的发病率为60~70%,70岁以上的达80%,80岁以上的老年人几乎达100%。老年性白内障一般与以下因素有关:晶状体营养代谢障碍、内分泌紊乱(糖尿病、甲状腺功能减退)、紫外线照射、遗传因素。目前国内外治疗白内障确切有效的办法较少,以手术为主,但由于老年人器官有不同程度衰退,并不适宜手术,并且术后并发症较多,故非手术治疗为广大患者所急需。《中国药品质量标准》(2002,1,29~30)公开了广州中药一厂生产的障眼明糖衣片的中药组方及质量标准。该片剂在药材提取上采用传统水提法,包糖衣以掩盖药片中药物提取物的苦味和酸味。但是(1)白芍和山茱萸的主要成分溶于乙醇,传统水提法对其提取不完全;(2)糖衣片虽然掩盖了药物提取物的苦味,但糖尿病病人不能服用;(3)由于老年性白内障的成因中有糖尿病因素,糖衣的使用给治疗初、中期白内障带来相应副作用;(4)糖衣片硬度高,不易掰开,吞咽困难的老年人及儿童服用不易;(5)糖衣片在制备过程中粉尘大,对药品生产人员伤害较大;(6)糖衣片在生产上工序较多,历时16~30小时,操作条件不易掌握,隔离层厚度易不均匀,放置过程中容易出现花斑、龟裂、吸潮等现象,影响药物质量;(7)糖衣片的崩解时间为1小时,随着贮藏时间的延长,溶出时间还会增加;(8)糖衣片的质量标准不够完善,仅对成品进行鉴别实验,药品的生产质量不能够得到有效保障。综上因素,该药物的推广受到极大的限制,急需一种新的剂型以替代原有糖衣片,并提高原有的质量检测标准。
【发明内容】
本发明的目的是提供一种治疗白内障的药物剂型——胶囊,该制剂具有如下优点:(1)比原剂型明显提高疗效(2)崩解时间极大缩短(3)有效掩盖药物提取物本身的苦味(4)无需包糖衣(5)降低副作用(6)长期存放质量稳定(7)对于吞咽困难的特殊人群,本剂型可以方便地溶于水,便于服用。
本发明另一目的是提供了该制剂的制备方法,对药物提取物从原工艺上进行改进、药物成分提取更加完全、减轻原有苦酸味、操作简单易行并降低对药品生产人员的粉尘污染。
本发明还提供了该制剂的新的质量检测方法,提高了原有标准,有效保证药物的生产质量。
本发明提供的药物是由如下重量比药物的提取物制备的一种胶囊:
石菖蒲2.9 决明子3.9 肉苁蓉4.8 葛根4.8
青葙子3.9 党参6.2 蔓荆子3.9 枸杞子6.2
车前子4.8 白芍5.8 山茱萸3.1 甘草2.9
菟丝子7.8 升麻1.0 蕤仁(去内果皮)4.8 菊花4.8
密蒙花4.8 川芎3.9 黄精4.8 熟地黄7.8
黄柏3.9 黄芪6.2
本发明的制备工艺包括以下步骤:
(1)白芍、山茱萸用60-80%乙醇,优选60~70%乙醇,提取2~3次,优选2次,每次1~3小时,优选2小时,回收乙醇至无醇味,得提取液,备用;
(2)将决明子、蔓荆子、菟丝子、青葙子、车前子加沸水浸20小时;
(3)将其余15味药材加入决明子等5味药材浸泡液中,共同煎煮2~3次,优选2次,每次1~3小时,优选2小时,煎液滤过,得滤液;
(4)滤液及醇提取液合并,浸膏浓缩,干燥,加入适量辅料,优选淀粉、微晶纤维素和糊精中的一种或两种,最优选淀粉,混匀,装入胶囊。
溶出实验:
取本品6粒照崩解检测法(中国药典2000年版一部附录XIIA)测定,崩解时间符合药典规定,均小于15分钟。
质量检测标准:
[性状]本品为胶囊剂,内容物为棕色至棕褐色粉末,味微苦。
[鉴别]
(1)取本品15粒,倾出内容物,加甲醇30ml,浸泡3小时,搅拌,滤渣用甲醇10ml洗涤,洗液并入滤液,加活性炭4g,水浴上温热5分钟,滤过,滤液浓缩至约1ml,加新鲜配制的苯胺溶液(苯胺15ml,加浓盐酸1ml)即显棕黄色,渐变成棕红色。
(2)取本品30粒,倾出内容物,至锥形瓶中,加乙醇50ml,加热回流30分钟,倾出乙醇液,滤过,再加入70%乙醇60ml,加热回流30分钟,滤过,合并滤液,浓缩至约15ml,移至分液漏斗中,用醋酸乙酯提取2次,每次20ml,合并醋酸乙酯提取液(水溶液备用),用无水硫酸钠脱水后,回收醋酸乙酯至0.5ml,作为供试品溶液,另取葛根对照药材1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验,吸取上述2种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G的薄层板上,以氯仿-甲醇(9∶1)为展开剂,展开,晾干,用氨蒸汽熏片刻,置紫外灯(254nm)下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的灰蓝色荧光斑点。
(3)取[鉴别](2)项下的醋酸乙酯提取后的水溶液,用氨试液调节PH值大于10,用氯仿40ml提取,氯仿液用无水硫酸钠脱水,蒸去氯仿,残渣加无水乙醇1ml溶解,作为供试品溶液,另取黄柏对照药材1g,加酸性乙醇20ml,加热回流,蒸去乙醇,用氨试液调节PH值大于10,同法制得对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品,加无水乙醇溶液制成每ml含1mg的对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验,吸取上述3种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G的薄层板上,以正丁醇-冰醋酸-水(4.2∶0.6∶1.5)上层液为展开剂,展开,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视,供试品色谱中,在与对照药材和对照品色谱相应的位置上,显相同的颜色的荧光斑点。喷以稀碘化铋钾试液,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(4)取本品30粒,倾出内容物,研细,加盐酸2ml与氯仿40ml,加热回流1小时后,放冷,分取氯仿层,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1ml溶解,作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品,加无水乙醇溶解,制成每ml含1mg的对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验,吸取上述2种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G的薄层板上,以石油醚(30-60℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(10∶15∶7∶0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以25%鳞钼酸乙醇溶液,于110℃加热约10分钟,至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(5)取决明子对照药材0.5g,加盐酸1ml与氯仿20ml,加热回流1小时后,放冷,分取氯仿层,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1ml溶解,作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验,吸取对照药材溶液和上述鉴别(4)项下的供试品溶液各10μl,分点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上,以石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶15∶1)的上层溶液为展开剂,展开,取出晾干。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的颜色的斑点。置紫外光灯(365nm)下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的橙黄色荧光斑点。置氨气中熏后,日光下检视,显相同的红色斑点。
[含量测定]
按照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,乙腈-水(12.5∶87.5)为流动相,检测波长230nm,理论塔板数按芍药苷峰计算,应不低于1500。
对照品溶液的制备:精密称取在五氧化二磷减压干燥中干燥36小时的芍药苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备:取本品内容物约2.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇50ml,密塞,称定重量。超声处理1小时,再称定重量,用50%甲醇补足重量,摇匀,滤过,精密吸取滤液20ml,水浴蒸干,残渣加正庚烷浸泡2次,每次15ml(浸泡约2~3分钟),倾去正庚烷液,蒸干。残渣用水转移至已处理好的D101大孔吸附树脂柱(内径15mm,长100mm)上,以水100ml洗脱,弃去水液,再用50%甲醇80ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣用50%甲醇溶解并转移至10ml量瓶内,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
测定法:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl,注入液相色谱仪,测定,即得,本品每粒含芍药苷(C23H28O11)计,不得少于0.3mg。
稳定性实验:
本剂型常规条件下放置2年的检测结果如下:
溶出实验:
取本品6粒照崩解检测法(中国药典2000年版一部附录XIIA)测定,崩解时间符合药典规定。
质量检测:
各项指标均符合质量检测标准中的规定。
结论:本胶囊质量稳定。
临床实验:
1临床病例:选取300例病例观察,其中初期老年性白内障200例,验证组(障眼明胶囊,即本发明)100例,对照组(障眼明糖衣片)100例;中期老年性白内障100例,验证组50例,对照组50例。
2诊断标准:①45岁以后;②双眼先后发生晶状体混浊,视力逐渐减退,或单眼复视;③散大瞳孔经彻照和裂隙灯显微镜检查:晶状体皮质混浊。混浊程度具体分为4度:I度为皮质内有空泡、板层分离、水裂隙及成人核浮雕;II度为楔状混浊进入瞳孔区,但楔形间清晰,或者瞳孔区皮质轻度絮状混浊;III度为楔状之间皮质变混浊,或絮状混浊显著,但裂隙灯光束可切至后囊;IV度为混浊明显,光线切不到后囊。
3治疗方法:
观察组:服用本发明药物,用法每日3次,每次3粒。对照组:服用障眼明片,由广州中药一厂生产,用法:每日3次,每次4片。两组患者服药均1个月为1疗程,连续观察3个疗程。
4疗效标准:显效:视力提高4行以上,晶状体混浊部分吸收或者程度减轻;有效:视力提高2~3行,晶状体混浊程度稍有减轻或不变;无效:视力提高1行或不变,晶状体混浊不变或加重。
5结果:
两组综合疗效比较:初期老年性白内障:验证组愈显率68.0%,总有效率95.27%;对照组愈显率58.94%,总有效率84.35%。中期老年性白内障:验证组愈显率62.2%,总有效率90.3%;对照组愈显率53.5%,总有效率81.4%。
结论:本发明对于白内障的治疗率明显高于原有剂型。
为确定本发明的制备方法中药物提取因素,我们作了如下实验进行考察:
1.醇提因素
1.1自芍和山茱萸醇提因素考察以芍药苷为检测指标:
表1因素设定
水平 | 乙醇浓度A | 时间(h)B | 提取次数C |
123 | 60%70%80% | 123 | 123 |
1.2芍药苷的测定方法
仪器与标准对照品:Waters-高效液相色谱仪(日本);芍药苷对照品(含量测定用,批号:736-9811,中国药品生物制品检定所提供)。
芍药苷色谱条件与系统适用性试验:同[含量测定]。
芍药苷对照品溶液的制备:同[含量测定]。
芍药苷供试品溶液的制备:取样相当于白芍原药材0.2-0.5g浸膏,精密称定,水浴蒸干,置具塞锥形瓶中,后续操作同[含量测定]。
测定:同[含量测定]。
1.3结果分析
表2正交实验安排及结果
列号 | A | B | C | 芍药苷含量(mg/g) | 总干膏得率(%) |
123456789 | 111222333 | 123231312 | 123312231 | 6.311.79.210.57.69.310.58.810.2 | 11.314.816.815.211.113.314.514.910.3 |
总干膏得率K1K2K3RSS | 42.939.639.73.32.349 | 39.540.342.42.91.496 | 32.742.646.914.235.349 | G=122.2CT=1659.20 | |
芍药苷得率K1K2K3RSS | 27.227.429.52.31.082 | 24.432.427.38.010.936 | 24.131.528.57.49.236 | G=84.1CT=785.87 |
表3.醇提总干膏得率方差分析表
方差来源 | 离均差平方和 | 自由度 | 均方 | F值 | 显著性 |
ABC | 2.3491.49635.349 | 222 | 1.1740.74817.674 | 37.75024.036568.107 | P<0.05P<0.05P<0.01 |
表4.醇提芍药苷得率方差分析表
方差来源 | 离均差平方和 | 自由度 | 均方 | F值 | 显著性 |
AB | 1.08210.936 | 22 | 0.5415.468 | 3.29133.250 | P>0.05P<0.05 |
C | 9.236 | 2 | 4.618 | 28.081 | P<0.05 |
综合两个实验结果,①总干膏得率、芍药苷得率方差分析结果显示B、C因素对其均有显著性影响;但因本实验中以芍药苷得率指标较为重要,且在总干膏得率中B3与B2、C3与C2又相当接近;在确保总干膏得率有效提取的前提下,综合考虑能耗问题,减少提取时间和次数;故选定B2C2为最佳因素水平。②虽然以总干膏得率的实验结果分析,其有显著性影响因素A水平应选1,但A水平对芍药苷得率的方差分析无显著性影响,水平可自选,故定为A1~A2。
综上,确定最优工艺为用60~70%乙醇,加热回流提取2次,每次2小时。
2.其余药物水提工艺的考察,以黄柏中小檗碱为评价指标:
表5.水提工艺因素水平表
水平 | 提取时间(h)D | 提取次数(次)E |
123 | 123 | 123 |
2.1小檗碱的测定方法
仪器与标准对照品:spu-2型自动喷雾显色器(日本),薄层自动铺板器(四川重庆),定量毛细管(美国Drummodm公司),CQ-250超声波清洗仪(上海船舶电子设备研究所),硅胶G,硅胶H(薄层层析用,青岛海洋化工厂,其它均为分析纯)。盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号:0739-9709)。
测定方法:取相当于含黄柏原药材0.2-0.7g的干膏,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,称定重量,超声处理30分钟,时时振摇,放冷,再称定重量,用甲醇补足减轻的重量,摇均,放置,滤过,精密量取续滤液25ml,浓缩至约5ml,置中性氧化铝柱(5g,内径约1cm,湿法装柱,用乙醇30ml预清)上,用乙醇洗脱,收集洗脱液50ml,蒸干,加1%盐酸-甲醇溶液溶解,定容至5ml的容量瓶中,作为供试液。量取盐酸小檗碱对照精密称定,加1%盐酸-甲醇溶液制成每ml含0.25mg对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验,精密吸取供试品溶液10ul,对照品溶液2ul和4ul,分别交叉点于同一用羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以正丁醇-冰醋酸-水(7∶5∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B薄层扫描法)进行扫描,波长λs=425nm,λL=550nm,测量供试品吸收度积分值和对照品吸收度积分值,计算,即得。
2.2结果分析
按上述各项实验因素测定实验数据,结果见表6。
表6.水提取工艺正交试验表
列号 | D时间 | E次数 | 试验结果 | |
浸膏含量(%) | 小檗碱(mg/g) | |||
123456789 | 123231312 | 123312231 | 10.0221.4122.4224.5311.5718.6819.4619.5212.37 | 0.4380.9550.8780.8610.5080.8480.9310.8550.584 |
膏浸得率K1K2K3RSS | 48.2258.3153.4510.0916.976 | 33.9659.5566.4732.51195.515 | G=159.98CT=2843.73 | |
小檗碱K1K2K3RSS | 1.872.402.3170.530.01166 | 1.532.7342.5941.2040.289 | G=6.858CT=5.230 |
对表6中浸膏含量、小檗碱含量进行方差分析,结果见表7、表8。
表7.浸膏含量方差分析表
方差来源 | 离差平方和 | 自由度 | 方差 | F值 | 显著性 |
DE | 16.976195.515 | 22 | 8.48897.757 | 43.495500.949 | P<0.05P<0.01 |
表8.小檗碱含量方差分析表
方差来源 | 离差平方和 | 自由度 | 方差 | F值 | 显著性 |
DE | 0.011660.289 | 22 | 0.0058300.145 | 7.386183.088 | P>0.05P<0.01 |
综合上述结果分析,①方差分析结果显示,E因素对浸膏含量、小檗碱含量均有显著性影响;本实验主要考虑小檗碱含量,且浸膏含量指标中E3与E2又非常接近(无显著性差异,P>0.05),故因素E中E2最佳。②从浸膏含量、小檗碱含量方差分析结果可见,结合K值分析,三者均以因素D2水平为最佳。
综上分析,确定最佳工艺为D2E2。即水提取2小时,共提取2次。
【具体实施方式】
实施例1
投药量为:
石菖蒲30.4g 决明子40.8g 肉苁蓉50.4g 葛根50.4g
青葙子40.8g 党参64.8g 蔓荆子40.8g 枸杞子64.8g
车前子50.4g 白芍60.8g 山茱萸32.8g 甘草30.4g
菟丝子81.6g 升麻10.4g 蕤仁(去內果皮)50.4g 菊花50.4g
密蒙花50.4g 川芎40.8g 黄精50.4g 熟地黄81.6g
黄柏40.8g 黄芪64.8g
制备:
1)白芍、山茱萸用60%乙醇,提取3次,每次3小时,回收乙醇至无醇味,得提取液,备用;
2)决明子、蔓荆子、菟丝子、青葙子、车前子加沸水浸20小时;
3)其余15味药材加入决明子等5味药材浸泡液中,共同煎煮2次,每次1小时,煎液滤过,得滤液;
4)滤液及醇提取液合并浓缩,减压干燥,加入微晶纤维素和淀粉,混匀,装入胶囊,制成1000粒。
实施例2
制备:
1)白芍、山茱萸用80%乙醇,提取2次,每次1小时,回收乙醇至无醇味,得提取液,备用;
2)同实施例1;
3)其余15味药材加入决明子等5味药材浸泡液中,共同煎煮2次,每次3小时,煎液滤过,得滤液;
4)滤液及醇提取液合并浓缩,减压干燥,加入糊精和微晶纤维素,混匀,装入胶囊,制成1000粒。
实施例3
投药量同实施例1。
制备:
1)白芍、山茱萸用70%乙醇,提取2次,每次2小时,回收乙醇至无醇味,得提取液,备用;
2)投药量同实施例1;
3)其余15味药材加入决明子等5味药材浸泡液中,共同煎煮2次,每次2小时,煎液滤过,得滤液;
4)滤液及醇提取液合并浓缩,减压干燥,加入淀粉,混匀,装入胶囊,制成1000粒。
Claims (9)
1、一种治疗白内障的中药胶囊,其中制成中药有效成分的原料按重量比组成为:
石菖蒲2.9 决明子3.9 肉苁蓉4.8 葛 根4.8
青葙子3.9 党 参6.2 蔓荆子3.9 枸杞子6.2
车前子4.8 白 芍5.8 山茱萸3.1 甘 草2.9
菟丝子7.8 升 麻1.0 去内果皮的蕤仁4.8 菊 花4.8
密蒙花4.8 川 芎3.9 黄 精4.8 熟地黄7.8
黄 柏3.9 黄 芪6.2。
2、权利要求1胶囊的制备方法,包括以下步骤:
(1)将白芍、山茱萸用60-80%醇提取,得提取液,备用;
(2)将决明子、蔓荆子、菟丝子、青葙子、车前子加沸水浸20小时;
(3)将其余15味药材加入决明子等5味药材浸泡液中,共同煎煮,煎液滤过,得滤液;
(4)滤液及醇提取液合并,浓缩干燥,加入适量辅料,混合均匀,装入胶囊。
3、权利要求2中乙醇浓度为60~70%。
4、权利要求2中乙醇提取次数为2~3次,每次1~3小时。
5、权利要求2中乙醇提取2次,每次2小时。
6、权利要求2中水煎煮2~3次,每次1~3小时。
7、权利要求2中水煎煮2次,每次2小时。
8、权利要求2中辅料为淀粉、糊精、微晶纤维素中的一种或两种。
9、权利要求2中辅料为淀粉。
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