CN1290557C - 一种治疗白内障的药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗白内障的药物及其制备方法，其原料由石菖蒲、决明子、肉苁蓉、葛根、青葙子、党参、蔓荆子、枸杞子、车前子、白芍、山茱萸等22味中药组成。将白芍和山茱萸的醇提液与其他药物的水提液合并浓缩干燥，加入适量辅料制成胶囊。

Description

一种治疗白内障的药物及其制备方法

【技术领域】

本发明涉及一种治疗白内障的药物及其制备方法。

【背景技术】

现代人所患的众多眼科疾病中，以白内障的危险性最高、市场潜力最大。白内障是由于眼睛内晶状体发生混浊由透明变成不透明，阻碍光线进入眼内，从而影响视力。初期混浊对视力影响不大，而后渐加重，明显影响视力甚至失明。大多数的病例与年老有关，50～60岁老年性白内障的发病率为60～70％，70岁以上的达80％，80岁以上的老年人几乎达100％。老年性白内障一般与以下因素有关：晶状体营养代谢障碍、内分泌紊乱(糖尿病、甲状腺功能减退)、紫外线照射、遗传因素。目前国内外治疗白内障确切有效的办法较少，以手术为主，但由于老年人器官有不同程度衰退，并不适宜手术，并且术后并发症较多，故非手术治疗为广大患者所急需。《中国药品质量标准》(2002，1，29～30)公开了广州中药一厂生产的障眼明糖衣片的中药组方及质量标准。该片剂在药材提取上采用传统水提法，包糖衣以掩盖药片中药物提取物的苦味和酸味。但是(1)白芍和山茱萸的主要成分溶于乙醇，传统水提法对其提取不完全；(2)糖衣片虽然掩盖了药物提取物的苦味，但糖尿病病人不能服用；(3)由于老年性白内障的成因中有糖尿病因素，糖衣的使用给治疗初、中期白内障带来相应副作用；(4)糖衣片硬度高，不易掰开，吞咽困难的老年人及儿童服用不易；(5)糖衣片在制备过程中粉尘大，对药品生产人员伤害较大；(6)糖衣片在生产上工序较多，历时16～30小时，操作条件不易掌握，隔离层厚度易不均匀，放置过程中容易出现花斑、龟裂、吸潮等现象，影响药物质量；(7)糖衣片的崩解时间为1小时，随着贮藏时间的延长，溶出时间还会增加；(8)糖衣片的质量标准不够完善，仅对成品进行鉴别实验，药品的生产质量不能够得到有效保障。综上因素，该药物的推广受到极大的限制，急需一种新的剂型以替代原有糖衣片，并提高原有的质量检测标准。

【发明内容】

本发明的目的是提供一种治疗白内障的药物剂型——胶囊，该制剂具有如下优点：(1)比原剂型明显提高疗效(2)崩解时间极大缩短(3)有效掩盖药物提取物本身的苦味(4)无需包糖衣(5)降低副作用(6)长期存放质量稳定(7)对于吞咽困难的特殊人群，本剂型可以方便地溶于水，便于服用。

本发明另一目的是提供了该制剂的制备方法，对药物提取物从原工艺上进行改进、药物成分提取更加完全、减轻原有苦酸味、操作简单易行并降低对药品生产人员的粉尘污染。

本发明还提供了该制剂的新的质量检测方法，提高了原有标准，有效保证药物的生产质量。

本发明提供的药物是由如下重量比药物的提取物制备的一种胶囊：

石菖蒲2.9   决明子3.9   肉苁蓉4.8           葛根4.8

青葙子3.9   党参6.2     蔓荆子3.9           枸杞子6.2

车前子4.8   白芍5.8     山茱萸3.1           甘草2.9

菟丝子7.8   升麻1.0     蕤仁(去内果皮)4.8   菊花4.8

密蒙花4.8   川芎3.9     黄精4.8             熟地黄7.8

黄柏3.9     黄芪6.2

本发明的制备工艺包括以下步骤：

(1)白芍、山茱萸用60-80％乙醇，优选60～70％乙醇，提取2～3次，优选2次，每次1～3小时，优选2小时，回收乙醇至无醇味，得提取液，备用；

(2)将决明子、蔓荆子、菟丝子、青葙子、车前子加沸水浸20小时；

(3)将其余15味药材加入决明子等5味药材浸泡液中，共同煎煮2～3次，优选2次，每次1～3小时，优选2小时，煎液滤过，得滤液；

(4)滤液及醇提取液合并，浸膏浓缩，干燥，加入适量辅料，优选淀粉、微晶纤维素和糊精中的一种或两种，最优选淀粉，混匀，装入胶囊。

溶出实验：

取本品6粒照崩解检测法(中国药典2000年版一部附录XIIA)测定，崩解时间符合药典规定，均小于15分钟。

质量检测标准：

[性状]本品为胶囊剂，内容物为棕色至棕褐色粉末，味微苦。

[鉴别]

(1)取本品15粒，倾出内容物，加甲醇30ml，浸泡3小时，搅拌，滤渣用甲醇10ml洗涤，洗液并入滤液，加活性炭4g，水浴上温热5分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，加新鲜配制的苯胺溶液(苯胺15ml，加浓盐酸1ml)即显棕黄色，渐变成棕红色。

(2)取本品30粒，倾出内容物，至锥形瓶中，加乙醇50ml，加热回流30分钟，倾出乙醇液，滤过，再加入70％乙醇60ml，加热回流30分钟，滤过，合并滤液，浓缩至约15ml，移至分液漏斗中，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液(水溶液备用)，用无水硫酸钠脱水后，回收醋酸乙酯至0.5ml，作为供试品溶液，另取葛根对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述2种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G的薄层板上，以氯仿-甲醇(9∶1)为展开剂，展开，晾干，用氨蒸汽熏片刻，置紫外灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的灰蓝色荧光斑点。

(3)取[鉴别](2)项下的醋酸乙酯提取后的水溶液，用氨试液调节PH值大于10，用氯仿40ml提取，氯仿液用无水硫酸钠脱水，蒸去氯仿，残渣加无水乙醇1ml溶解，作为供试品溶液，另取黄柏对照药材1g，加酸性乙醇20ml，加热回流，蒸去乙醇，用氨试液调节PH值大于10，同法制得对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加无水乙醇溶液制成每ml含1mg的对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G的薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4.2∶0.6∶1.5)上层液为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的颜色的荧光斑点。喷以稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(4)取本品30粒，倾出内容物，研细，加盐酸2ml与氯仿40ml，加热回流1小时后，放冷，分取氯仿层，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加无水乙醇溶解，制成每ml含1mg的对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述2种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G的薄层板上，以石油醚(30-60℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(10∶15∶7∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以25％鳞钼酸乙醇溶液，于110℃加热约10分钟，至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(5)取决明子对照药材0.5g，加盐酸1ml与氯仿20ml，加热回流1小时后，放冷，分取氯仿层，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取对照药材溶液和上述鉴别(4)项下的供试品溶液各10μl，分点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶15∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的颜色的斑点。置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点。置氨气中熏后，日光下检视，显相同的红色斑点。

[含量测定]

按照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水(12.5∶87.5)为流动相，检测波长230nm，理论塔板数按芍药苷峰计算，应不低于1500。

对照品溶液的制备：精密称取在五氧化二磷减压干燥中干燥36小时的芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀，即得。

供试品溶液的制备：取本品内容物约2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，密塞，称定重量。超声处理1小时，再称定重量，用50％甲醇补足重量，摇匀，滤过，精密吸取滤液20ml，水浴蒸干，残渣加正庚烷浸泡2次，每次15ml(浸泡约2～3分钟)，倾去正庚烷液，蒸干。残渣用水转移至已处理好的D101大孔吸附树脂柱(内径15mm，长100mm)上，以水100ml洗脱，弃去水液，再用50％甲醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用50％甲醇溶解并转移至10ml量瓶内，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得，本品每粒含芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得少于0.3mg。

稳定性实验：

本剂型常规条件下放置2年的检测结果如下：

溶出实验：

取本品6粒照崩解检测法(中国药典2000年版一部附录XIIA)测定，崩解时间符合药典规定。

质量检测：

各项指标均符合质量检测标准中的规定。

结论：本胶囊质量稳定。

临床实验：

1临床病例：选取300例病例观察，其中初期老年性白内障200例，验证组(障眼明胶囊，即本发明)100例，对照组(障眼明糖衣片)100例；中期老年性白内障100例，验证组50例，对照组50例。

2诊断标准：①45岁以后；②双眼先后发生晶状体混浊，视力逐渐减退，或单眼复视；③散大瞳孔经彻照和裂隙灯显微镜检查：晶状体皮质混浊。混浊程度具体分为4度：I度为皮质内有空泡、板层分离、水裂隙及成人核浮雕；II度为楔状混浊进入瞳孔区，但楔形间清晰，或者瞳孔区皮质轻度絮状混浊；III度为楔状之间皮质变混浊，或絮状混浊显著，但裂隙灯光束可切至后囊；IV度为混浊明显，光线切不到后囊。

3治疗方法：

观察组：服用本发明药物，用法每日3次，每次3粒。对照组：服用障眼明片，由广州中药一厂生产，用法：每日3次，每次4片。两组患者服药均1个月为1疗程，连续观察3个疗程。

4疗效标准：显效：视力提高4行以上，晶状体混浊部分吸收或者程度减轻；有效：视力提高2～3行，晶状体混浊程度稍有减轻或不变；无效：视力提高1行或不变，晶状体混浊不变或加重。

5结果：

两组综合疗效比较：初期老年性白内障：验证组愈显率68.0％，总有效率95.27％；对照组愈显率58.94％，总有效率84.35％。中期老年性白内障：验证组愈显率62.2％，总有效率90.3％；对照组愈显率53.5％，总有效率81.4％。

结论：本发明对于白内障的治疗率明显高于原有剂型。

为确定本发明的制备方法中药物提取因素，我们作了如下实验进行考察：

1.醇提因素

1.1自芍和山茱萸醇提因素考察以芍药苷为检测指标：

                   表1因素设定

水平	乙醇浓度A	时间(h)B	提取次数C
				123	60％70％80％	123	123

1.2芍药苷的测定方法

仪器与标准对照品：Waters-高效液相色谱仪(日本)；芍药苷对照品(含量测定用，批号：736-9811，中国药品生物制品检定所提供)。

芍药苷色谱条件与系统适用性试验：同[含量测定]。

芍药苷对照品溶液的制备：同[含量测定]。

芍药苷供试品溶液的制备：取样相当于白芍原药材0.2-0.5g浸膏，精密称定，水浴蒸干，置具塞锥形瓶中，后续操作同[含量测定]。

测定：同[含量测定]。

1.3结果分析

                      表2正交实验安排及结果

列号	A	B	C	芍药苷含量(mg/g)	总干膏得率(％)
						123456789	111222333	123231312	123312231	6.311.79.210.57.69.310.58.810.2	11.314.816.815.211.113.314.514.910.3
总干膏得率K1K2K3RSS	42.939.639.73.32.349	39.540.342.42.91.496	32.742.646.914.235.349	G＝122.2CT＝1659.20
						芍药苷得率K1K2K3RSS	27.227.429.52.31.082	24.432.427.38.010.936	24.131.528.57.49.236	G＝84.1CT＝785.87

                       表3.醇提总干膏得率方差分析表

方差来源	离均差平方和	自由度	均方	F值	显著性
						ABC	2.3491.49635.349	222	1.1740.74817.674	37.75024.036568.107	P＜0.05P＜0.05P＜0.01

                    表4.醇提芍药苷得率方差分析表

方差来源	离均差平方和	自由度	均方	F值	显著性
						AB	1.08210.936	22	0.5415.468	3.29133.250	P＞0.05P＜0.05

C

9.236

2

4.618

28.081

P＜0.05

综合两个实验结果，①总干膏得率、芍药苷得率方差分析结果显示B、C因素对其均有显著性影响；但因本实验中以芍药苷得率指标较为重要，且在总干膏得率中B₃与B₂、C₃与C₂又相当接近；在确保总干膏得率有效提取的前提下，综合考虑能耗问题，减少提取时间和次数；故选定B₂C₂为最佳因素水平。②虽然以总干膏得率的实验结果分析，其有显著性影响因素A水平应选1，但A水平对芍药苷得率的方差分析无显著性影响，水平可自选，故定为A₁～A₂。

综上，确定最优工艺为用60～70％乙醇，加热回流提取2次，每次2小时。

2.其余药物水提工艺的考察，以黄柏中小檗碱为评价指标：

        表5.水提工艺因素水平表

水平	提取时间(h)D	提取次数(次)E
			123	123	123

2.1小檗碱的测定方法

仪器与标准对照品：spu-2型自动喷雾显色器(日本)，薄层自动铺板器(四川重庆)，定量毛细管(美国Drummodm公司)，CQ-250超声波清洗仪(上海船舶电子设备研究所)，硅胶G，硅胶H(薄层层析用，青岛海洋化工厂，其它均为分析纯)。盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号：0739-9709)。

测定方法：取相当于含黄柏原药材0.2-0.7g的干膏，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，时时振摇，放冷，再称定重量，用甲醇补足减轻的重量，摇均，放置，滤过，精密量取续滤液25ml，浓缩至约5ml，置中性氧化铝柱(5g，内径约1cm，湿法装柱，用乙醇30ml预清)上，用乙醇洗脱，收集洗脱液50ml，蒸干，加1％盐酸-甲醇溶液溶解，定容至5ml的容量瓶中，作为供试液。量取盐酸小檗碱对照精密称定，加1％盐酸-甲醇溶液制成每ml含0.25mg对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，精密吸取供试品溶液10ul，对照品溶液2ul和4ul，分别交叉点于同一用羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B薄层扫描法)进行扫描，波长λ_s＝425nm，λ_L＝550nm，测量供试品吸收度积分值和对照品吸收度积分值，计算，即得。

2.2结果分析

按上述各项实验因素测定实验数据，结果见表6。

               表6.水提取工艺正交试验表

列号	D时间	E次数	试验结果
					浸膏含量(％)	小檗碱(mg/g)
			123456789	123231312			123312231	10.0221.4122.4224.5311.5718.6819.4619.5212.37	0.4380.9550.8780.8610.5080.8480.9310.8550.584
膏浸得率K1K2K3RSS	48.2258.3153.4510.0916.976	33.9659.5566.4732.51195.515			G＝159.98CT＝2843.73
			小檗碱K1K2K3RSS	1.872.402.3170.530.01166			1.532.7342.5941.2040.289	G＝6.858CT＝5.230

对表6中浸膏含量、小檗碱含量进行方差分析，结果见表7、表8。

                        表7.浸膏含量方差分析表

方差来源	离差平方和	自由度	方差	F值	显著性
						DE	16.976195.515	22	8.48897.757	43.495500.949	P＜0.05P＜0.01

                 表8.小檗碱含量方差分析表

方差来源	离差平方和	自由度	方差	F值	显著性
						DE	0.011660.289	22	0.0058300.145	7.386183.088	P＞0.05P＜0.01

综合上述结果分析，①方差分析结果显示，E因素对浸膏含量、小檗碱含量均有显著性影响；本实验主要考虑小檗碱含量，且浸膏含量指标中E₃与E₂又非常接近(无显著性差异，P＞0.05)，故因素E中E₂最佳。②从浸膏含量、小檗碱含量方差分析结果可见，结合K值分析，三者均以因素D₂水平为最佳。

综上分析，确定最佳工艺为D₂E₂。即水提取2小时，共提取2次。

【具体实施方式】

实施例1

投药量为：

石菖蒲30.4g   决明子40.8g   肉苁蓉50.4g            葛根50.4g

青葙子40.8g   党参64.8g     蔓荆子40.8g            枸杞子64.8g

车前子50.4g   白芍60.8g     山茱萸32.8g            甘草30.4g

菟丝子81.6g   升麻10.4g     蕤仁(去內果皮)50.4g    菊花50.4g

密蒙花50.4g   川芎40.8g     黄精50.4g              熟地黄81.6g

黄柏40.8g     黄芪64.8g

制备：

1)白芍、山茱萸用60％乙醇，提取3次，每次3小时，回收乙醇至无醇味，得提取液，备用；

2)决明子、蔓荆子、菟丝子、青葙子、车前子加沸水浸20小时；

3)其余15味药材加入决明子等5味药材浸泡液中，共同煎煮2次，每次1小时，煎液滤过，得滤液；

4)滤液及醇提取液合并浓缩，减压干燥，加入微晶纤维素和淀粉，混匀，装入胶囊，制成1000粒。

实施例2

制备：

1)白芍、山茱萸用80％乙醇，提取2次，每次1小时，回收乙醇至无醇味，得提取液，备用；

2)同实施例1；

3)其余15味药材加入决明子等5味药材浸泡液中，共同煎煮2次，每次3小时，煎液滤过，得滤液；

4)滤液及醇提取液合并浓缩，减压干燥，加入糊精和微晶纤维素，混匀，装入胶囊，制成1000粒。

实施例3

投药量同实施例1。

制备：

1)白芍、山茱萸用70％乙醇，提取2次，每次2小时，回收乙醇至无醇味，得提取液，备用；

2)投药量同实施例1；

3)其余15味药材加入决明子等5味药材浸泡液中，共同煎煮2次，每次2小时，煎液滤过，得滤液；

4)滤液及醇提取液合并浓缩，减压干燥，加入淀粉，混匀，装入胶囊，制成1000粒。

Claims (9)

1、一种治疗白内障的中药胶囊，其中制成中药有效成分的原料按重量比组成为：

石菖蒲2.9  决明子3.9   肉苁蓉4.8           葛  根4.8

青葙子3.9  党  参6.2   蔓荆子3.9           枸杞子6.2

车前子4.8  白  芍5.8   山茱萸3.1           甘  草2.9

菟丝子7.8  升  麻1.0   去内果皮的蕤仁4.8   菊  花4.8

密蒙花4.8  川  芎3.9   黄  精4.8           熟地黄7.8

黄  柏3.9  黄  芪6.2。

2、权利要求1胶囊的制备方法，包括以下步骤：

(1)将白芍、山茱萸用60-80％醇提取，得提取液，备用；

(2)将决明子、蔓荆子、菟丝子、青葙子、车前子加沸水浸20小时；

(3)将其余15味药材加入决明子等5味药材浸泡液中，共同煎煮，煎液滤过，得滤液；

(4)滤液及醇提取液合并，浓缩干燥，加入适量辅料，混合均匀，装入胶囊。

3、权利要求2中乙醇浓度为60～70％。

4、权利要求2中乙醇提取次数为2～3次，每次1～3小时。

5、权利要求2中乙醇提取2次，每次2小时。

6、权利要求2中水煎煮2～3次，每次1～3小时。

7、权利要求2中水煎煮2次，每次2小时。

8、权利要求2中辅料为淀粉、糊精、微晶纤维素中的一种或两种。

9、权利要求2中辅料为淀粉。