CN1895617A - 温肾养心、壮腰安神的中药制剂及制备方法和质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明是一种温肾养心、壮腰安神的中药制剂及制备方法和质量控制方法，它由杜仲、菟丝子、肉苁蓉、远志、当归、莲子、泽泻、牡丹皮、白芍、淫羊藿、黄芪、熟地黄、山药、茯苓、白术、陈皮、砂仁、女贞子、金樱子、山茱萸、巴戟天、柏子仁、党参、枸杞子和甘草经提取后得到的有效成分与适当辅料制备而成。与现有技术相比，本发明具有崩解时限短、用量准确、疗效好且生产周期短、生产效益高、药品质量稳定、可控，生物利用度高的优点，还具有服用、携带方便，用量小，适用人群范围广的优点。本发明质量控制方法精密度高、重现性和稳定性好，可更加准确地控制药品质量。

Description

温肾养心、壮腰安神的中药制剂及制备方法和质量控制方法

技术领域：本发明涉及一种温肾养心、壮腰安神的中药制剂及其制备方法和质量控制方法，属于中药的技术领域。

背景技术：随着人们生活水平的不断提高，科技突飞猛进的发展，生活节奏加快，人们的学习、工作压力将会越来越大。由于这些外在因素以及自身免疫能力的关系，各种发病率均有增加的趋势。其中尤以肾虚最为突出。肾虚将会导致腰膝酸软，夜间小便多，神经衰弱，失眠。肾虚的治疗应以中医的保健治疗为主，我公司生产的温肾养心、壮腰安神的杜仲补天素片以25味中药材为原料，对治疗腰脊酸软，夜多小便，神经衰弱等症有较好的疗效，倍受广大患者的青睐。但其为糖衣片，存在以下缺点：(1)糖衣保存不当会变色、开裂，影响外观；(2)所包的糖衣与治疗作用无关，糖尿病人不能服用；(3)片剂崩解时间较长；(4)生产工序较多，生产周期长。而且原质量标准可控性较差，专属性不强，故在提高质量标准的前提下，将其改为其它剂型，更有利于患者服用。

发明内容：

本发明的目的在于：提供一种温肾养心、壮腰安神的中药制剂及制备方法和质量控制方法。本产品疗效显著，并且使用安全、无毒副作用和不良反应，服用后不易复发，服用剂量少，可以满足包括糖尿病患者在内的广大人群，适用人群范围广。本发明质量控制方法精密度高、重现性和稳定性好，可以更加准确地控制药品质量。

本发明是这样实现的：按照重量份计算，它由盐水炒杜仲20～500份、制菟丝子20～500份、肉苁蓉20～500份、制远志20～500份、酒制当归20～500份、莲子20～500份、泽泻20～500份、牡丹皮20～500份、白芍20～500份、淫羊藿18～450份、黄芪40～1000份、熟地黄40～1000份、山药40～1000份、茯苓40～1000份、白术40～1000份、陈皮10～250份、砂仁10～250份、女贞子8～240份、金樱子8～240份、山茱萸2～50份、巴戟天2～50份、柏子仁2～50份、党参40～1000份、枸杞子40～1000份和甘草20～500份经提取后得到的有效成分与适当辅料制备而成。

具体的说，按照重量份计算，它由盐水炒杜仲250份、制菟丝子250份、肉苁蓉250份、制远志250份、酒制当归250份、莲子250份、泽泻250份、牡丹皮250份、白芍250份、淫羊藿230份、黄芪500份、熟地黄500份、山药500份、茯苓500份、白术500份、陈皮130份、砂仁130份、女贞子120份、金樱子120份、山茱萸25份、巴戟天25份、柏子仁25份、党参500份、枸杞子500份和甘草250份经提取后得到的有效成分与浸膏粉重量1％～20％的辅料制备而成。

所述的制剂为胶囊剂、软胶囊剂、合剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂中的一种或药学上其它可能的剂型。

优选的制剂为胶囊剂、颗粒剂或散剂。

本发明中药制剂的制备方法为：取莲子、山药粉碎成细粉，备用；陈皮和砂仁提取挥发油，备用；药渣与杜仲、菟丝子、肉苁蓉、远志、当归、泽泻、牡丹皮、白芍、淫羊藿、黄芪、熟地黄、茯苓、白术、女贞子、金樱子、山茱萸、巴戟天、柏子仁、党参、枸杞子和甘草加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，药液浓缩至相对密度为1.30，加入莲子、山药细粉，混匀后干燥，即得本发明的有效成分，将得到的有效成分喷入挥发油，加入所需的辅料，按照常规方法制成不同的制剂。

所述的胶囊剂这样制备：取莲子、山药粉碎成细粉，备用；陈皮和砂仁提取挥发油，备用；药渣与杜仲、菟丝子、肉苁蓉、远志、当归、泽泻、牡丹皮、白芍、淫羊藿、黄芪、熟地黄、茯苓、白术、女贞子、金樱子、山茱萸、巴戟天、柏子仁、党参、枸杞子和甘草加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，药液浓缩至相对密度为1.30，加入莲子、山药细粉，混匀后干燥，加入适量辅料制粒，喷入挥发油，混匀，装入胶囊，即得。

颗粒剂这样制备：取莲子、山药粉碎成细粉，备用；陈皮和砂仁提取挥发油，备用；药渣与杜仲、菟丝子、肉苁蓉、远志、当归、泽泻、牡丹皮、白芍、淫羊藿、黄芪、熟地黄、茯苓、白术、女贞子、金樱子、山茱萸、巴戟天、柏子仁、党参、枸杞子和甘草加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，药液浓缩至相对密度为1.30，加入莲子、山药细粉，混匀后干燥，加入所需的辅料制粒，干燥，喷入挥发油，混匀，分装，即得。

散剂这样制备：取莲子、山药粉碎成细粉，备用；陈皮和砂仁提取挥发油，备用；药渣与杜仲、菟丝子、肉苁蓉、远志、当归、泽泻、牡丹皮、白芍、淫羊藿、黄芪、熟地黄、茯苓、白术、女贞子、金樱子、山茱萸、巴戟天、柏子仁、党参、枸杞子和甘草加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，药液浓缩至相对密度为1.30，加入莲子、山药细粉，混匀后干燥，粉碎，喷入挥发油，混匀，分装，即得。

本发明中药制剂的质量控制方法包括性状、鉴别、检查和含量测定，所述的性状项应符合各制剂项下的有关规定，所述的鉴别项为白芍及牡丹皮、黄芪、淫羊藿的鉴别；所述的检查项应符合中国药典2005年版一部附录各制剂项下的有关规定；所述的含量测定项为测定白芍及牡丹皮所含芍药苷C₂₃H₂₈O₁₁的含量。

本发明所述质量控制方法包括：

性状：药物或其内容物为棕色颗粒或粉末；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂内容物0.1～20g，研细，加1％～99％甲醇5～100ml，加热回流10～60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水5～50ml使溶解，用乙醚振摇提取2～5次，每次10～50ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取2～5次，每次10～50ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2～5次，每次10～50ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约0.5～2ml溶解，加中性氧化铝1～5g，置水浴上拌匀，干燥，装入200目、2g、内径10-15mm、预先干法装填好的中性氧化铝柱上，用甲醇10～100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇0.5～2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.5～5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5～15μl，对照品溶液1～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝10～50∶1～10∶5～20∶0.1～0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取本制剂内容物0.1～20g，研细，加60～90℃石油醚20～50ml，超声处理5～40分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇5～100ml，加热回流10～60分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水5～20ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心5～10分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取1～3次，每次5～30ml，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取1～5次，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤1～5次，每次15ml，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5～2ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含1～5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝1～20∶1～20∶1～10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5～20％硫酸乙醇溶液，在100～110℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)取黄芪甲苷对照品，加1％～99％甲醇制成每1ml含1～5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液5～10μl，对照品溶液1～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝1～20∶1～20∶1～10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5～20％硫酸乙醇溶液，在100～110℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录各剂型项下的有关规定；

含量测定照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基键合硅胶为填充剂；1％～99％甲醇∶水＝20～40∶80～60为流动相；检测波长为210～230nm；理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于2000～5000；

对照品溶液的制备  取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品适量，精密称定，加1％～99％甲醇溶解，制成每1ml含10～50μg的溶液；

供试品溶液的制备  取单位制剂适量，研细，混匀，取约0.5～1.0g，精密称定，置50～100ml具塞锥形瓶中，精密加入50～90％甲醇溶液25～50ml，密塞，称定重量，超声提取30～60分钟，取出放冷，再称定重量，用50～90％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置60℃水浴上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5～10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得；

本制剂含白芍和牡丹皮以芍药苷C₂₃H₂₈O₁₁计，不得少于0.020～0.050％。

胶囊剂的质量控制方法为：

性状：其内容物为棕色颗粒或粉末；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂内容物10g，研细，加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次30ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约1ml溶解，加中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，干燥，装入200目、2g、内径10-15mm、预先干法装填好的中性氧化铝柱上，用甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取本制剂内容物10g，研细，加60～90℃石油醚30ml，超声处理20分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水10ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心10分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取2次，每次15ml，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取3次，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次15ml，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105？烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录IL胶囊剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝28∶72为流动相；检测波长为230nm；理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成每1ml含20μg的溶液；

供试品溶液的制备取装量差异项下的本制剂适量，研细，混匀，取约0.5g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声提取1小时，取出放冷，再称定重量，用75％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置60℃水浴上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得；

本胶囊剂含白芍和牡丹皮以芍药苷C₂₃H₂₈O₁₁计，每粒不得少于0.10mg。

颗粒剂的质量控制方法为：

性状：药物为棕色的颗粒；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂10g，研细，加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次30ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约1ml溶解，加中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，干燥，装入200目、2g、内径10-15mm、预先干法装填好的中性氧化铝柱上，用甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取本制剂10g，研细，加60～90℃石油醚30ml，超声处理20分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水10ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心10分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取2次，每次15ml，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取3次，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次15ml，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105？烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录IC颗粒剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝28∶72为流动相；检测波长为230nm；理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成每1ml含20μg的溶液；

供试品溶液的制备  取装量差异项下的本制剂适量，研细，混匀，取约0.5g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声提取1小时，取出放冷，再称定重量，用75％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置60℃水浴上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得；

本颗粒剂含白芍和牡丹皮以芍药苷C₂₃H₂₈O₁₁计，不得少于0.38mg/g。

散剂的质量控制方法为：

性状：药物为棕色的粉末；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂10g，研细，加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次30ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约1ml溶解，加中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，干燥，装入200目、2g、内径10-15mm、预先干法装填好的中性氧化铝柱上，用甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取本制剂10g，研细，加60～90℃石油醚30ml，超声处理20分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水10ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心10分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取2次，每次15ml，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取3次，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次15ml，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105？烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录IB散剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝28∶72为流动相；检测波长为230nm；理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备  取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成每1ml含20μg的溶液；

供试品溶液的制备  取装量差异项下的本品适量，研细，混匀，取约0.5g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声提取1小时，取出放冷，再称定重量，用75％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置60℃水浴上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得；

本散剂含白芍和牡丹皮以芍药苷C₂₃H₂₈O₁₁计，不得少于0.38mg/g。

本发明以杜仲、当归、白芍、淫羊藿等为主要原料，主要用于治疗腰脊酸软，夜多小便，神经衰弱等症。上述症状在中医多属于劳疾范畴。《医部全录》有载：“心主血，肾藏精，精竭血燥则劳生。治劳之法，当以调心补肾为先，不当用峻烈之剂，惟当温养滋补，以久取效。”另又云：“肾为都会关司之所，又听命于心。心主乎神，神有所思，动则神驰不返。”说明本病病因多责之肾阴亏虚、火旺而扰心血，使心不得滋养。因而腰酸软，夜多小便，神经衰弱。中医临床治疗当以滋补肾阴，养心安神为主。本方由杜仲、淫羊藿、当归、党参、砂仁等药物组成。方中以杜仲为主药，杜仲性甘、微辛，温，归肝、肾经，补肝肾而强筋骨；淫羊藿、金樱子、菟丝子、当归、党参、黄芪、枸杞子、女贞子、肉苁蓉、白芍、巴戟天，取其补益之功，协同杜仲滋阴补肾；熟地黄、山茱萸、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻皆六味地黄丸组方，其功能主治也为滋阴补肾；远志、柏子仁等具养心安神之效，且此方中，药多为性温；诸药同用共凑温肾养心，壮腰安神之力。方中甘草调和诸药。

与现有技术相比，本发明制剂能使药物迅速崩解释放，吸收加快，使机体快速达到最大血药浓度，生物利用度高；本发明在加工中无泛丸、包糖衣、打光等工艺，因而缩减了生产工艺流程，生产周期短，节约了生产成本，还避免了药物与光、湿、热空气直接接触，提高了药物的稳定性；此外，本发明还具有服用、携带方便，用量小，剂量更准确，适用人群范围广的优点。本发明质量控制方法精密度高、重现性和稳定性好，可更加准确地控制药品质量。

为了确保本发明制剂的制备工艺合理可行，申请人进行了以下试验研究：

1.胶囊剂的辅料选择：

辅料	颗粒吸湿性	颗粒流动性	崩解时限(分钟)	价格
					淀粉	较好	较好	17	价格便宜，经济
糊精	一般	较好	16	一般
					羧甲基纤维素钠	较好	较好	15	价格昂贵

羧甲基淀粉

较好

较好

15

价格昂贵

通过以上实验，选择淀粉作为辅料经济实惠，也能满足制剂需要。

2.颗粒剂的辅料选择：

辅料	颗粒硬度、溶化性	口感
			淀粉	颗粒较硬，溶化性较差	口感较差
糊精	颗粒较硬，溶化性较差	口感较差
			蔗糖	颗粒较硬，溶化性较较好	口感好

实验结果表明，选择蔗糖效果较好。

本发明杜仲补天素胶囊与对照组杜仲补天素片的疗效比较见下表：

	病例数	临床治愈	显效	有效	无效	总有效率％
							杜仲补天素胶囊	200	160	12	8	20	90
杜仲补天素片	200	150	8	20	22	85

结果表明：杜仲补天素胶囊的效果比杜仲补天素片的效果显著。

临床研究资料：

分别以本发明的杜仲补天素胶囊剂、杜仲补天素颗粒与现有技术中名称为“壮腰健肾丸”的成品药物(即对照组)进行临床疗效观察，其结果见表1、表2。

                   表1  本发明杜仲补天素胶囊与对照组的疗效比较

杜仲补天素胶囊	病例数	临床治愈	显效	有效	无效	总有效率％
							治疗组	200	150	16	12	22	89
对照组	90	60	8	4	18	80

               表2  本发明杜仲补天素胶囊与对照组的疗效比较

杜仲补天素颗粒	病例数	临床治愈	显效	有效	无效	总有效率％
							治疗组	200	140	16	20	24	88
对照组	90	60	8	4	18	80

结果：本发明产品的治疗效果明显高于现有产品“壮腰健肾丸”。

本发明提供的质量控制方法与现有的质量标准相比，其优点在于：1、该方法精密度高、重现性和稳定性好；2、克服了原质量标准控制不稳定、专属性不强、测定偏差大等难题；3、该方法更有利于杜仲补天素胶囊的质量控制以及其他剂型的质量控制。

                  原质量标准与现质量标准的比较

原质量标准	现质量标准	结论
			(1)取本品，置显微镜下观察：淀粉粉粒扁卵形，直径8～35um，长约至48um，脐点点状，人字状或短缝状，多位于较小端，层纹可见，草酸钙针晶束甚长大，长80～240um，每一针晶粗2～5um，淀粉粒长圆形，类圆形，类三角形，有的具有小尖突，直径4～20um，长约至30um，脐点不明显，少数可见，裂缝状或点状，位于中央。	(1)增加了白芍及牡丹皮的薄层鉴别，具体的鉴别方法见本发明质量控制方法的鉴别项。	原来标准中只有显微鉴别和显色反应。存在的问题：1、方法精密度、重现性、稳定性差。2、质量标准控制不稳定、专属性不强(只能检测出某类成分，不能控制具体成分)、测定偏差大等缺点。提高后质量标准：增加了专属性较强的薄层鉴别和芍药苷的含量测定。优点：1、薄层鉴别是鉴别中药最有效而又简便实用的方法。2、含量测定能精确测定单位制剂中药材所含有效成分的含量，能反映出含量与疗效的直接关系。3、控制方法稳定、专属性强。4、能更好地控制产品的质量。
(2)取本品10片，除去糖衣，研细，称取2.5g，加乙醚20ml，振摇10分钟，滤过，取滤液10ml，置蒸发皿中蒸干，加10％香草醛的硫酸溶液1～2滴，显樱红物。	(2)增加了淫羊藿的薄层鉴别，具体鉴别方法见本发明质量控制方法的鉴别项。
		(3)取本品5～6片，除去糖衣，研细，称取1g，加乙醇10ml，振摇10分钟，滤过，取滤液1ml，用乙醇稀释至50ml，照分光光度法测定，在282nm±1的波长处有最大吸收。	(3)增加了黄芪的薄层鉴别，具体的鉴别方法见本发明质量控制方法的鉴别项。
	(4)增加了白芍及牡丹皮的含量测定方法，具体测定方法见本发明质量控制方法的含量测定项。

本发明的质量控制方法不仅仅可检测杜仲补天素制剂中的胶囊剂、颗粒剂、散剂，也可以检测杜仲补天素制剂其他任何剂型，如：软胶囊剂、合剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。

为了验证本发明鉴别方法的合理性，申请人对处方中每味药材的有效成分进行了研究分析，通过多批样品的反复验证，结果表明本方法准确、稳定，重复性好，专属性强，能很好地控制产品的质量，以下是对每味药材薄层鉴别方法进行的实验研究：

(1)白芍、牡丹皮中所含芍药苷的薄层鉴别：白芍、牡丹皮主含芍药苷，试验时以正已烷、乙醚、乙醇等有机溶剂进行提取，经过多次反复试验，用甲醇回流、乙醚脱脂后再用水饱和的正丁醇和正丁醇饱和的水提取效果最佳。以中国药品生物制品检定所提供的芍药苷对照品为对照，用质量控制方法中鉴别(1)项下的供试品溶液，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与芍药苷对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。用缺白芍的阴性样品同法操作结果有干扰，用缺牡丹皮的阴性样品同法操作，结果亦有干扰，用缺白芍和牡丹皮的阴性样品同法操作，结果无干扰。另用甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10∶5∶0.5)为展开剂进行验证，亦能得到相似结果，但用展开剂甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10∶5∶0.5)R_f值太大，故选用三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂。

(2)淫羊藿中淫羊藿苷的薄层鉴别：淫羊藿主含黄酮类，其中主要成份为淫羊藿苷。淫羊藿曾采用《中华人民共和国药典》2005年版一部淫羊藿药材鉴别项下的方法进行检测，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上杂质干扰过大，淫羊藿苷斑点无法检视，故改换方法。经过多次反复试验，必须采用石油醚脱脂，甲醇提取，三氯甲烷除杂质，正丁醇萃取，氨水洗脱等步骤，才可有效除杂，所得的供试品溶液以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，显色，所得斑点清楚，杂质干扰小，重现性好，阴性样品同法操作无干扰，故将该法列入本发明。以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(10∶20∶11∶5)的下层溶液为展开剂进行验证，亦可以得到相似的分离效果，但以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂的效果为佳，故列入本发明。

(3)黄芪中黄芪甲苷的薄层鉴别：黄芪主含皂苷类、多糖、黄酮类、氨基酸等，其中主要成分为黄芪甲苷。曾采用《中华人民共和国药典》2000版一部黄芪药材鉴别项下的方法，加甲醇回流后过中性氧化铝柱，用40％甲醇洗脱，然后用水饱和的正丁醇及正丁醇饱和的水提取，供试品色谱中在与黄芪甲苷相应的位置上可见相同颜色的斑点，但斑点较弱，经过多次反复试验，必须采用石油醚脱脂，甲醇提取，三氯甲烷除杂质，正丁醇萃取，氨水洗脱等步骤，才可有效除杂，所得的供试品溶液以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，显色，所得斑点清楚，杂质干扰小，重现性好，阴性样品同法操作无干扰。以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(10∶20∶11∶5)的下层溶液为展开剂进行验证，亦可以得到相似的分离效果，但以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂的效果为佳，故将该鉴别列入本发明。

(4)杜仲：为方中主药，主要含有松脂醇二葡萄糖苷、绿原酸、氨基酸及微量元素、鞣质、黄酮、生物碱等。方法一、取样品5g，研细，用水湿润，加乙酸乙酯20ml，超声5分钟，弃去乙酸乙酯液，残渣自“加乙酸乙酯20ml”起，重复处理1次，残渣加入1mol/L盐酸5滴，加乙酸乙酯20ml，超声处理5分钟，取乙酸乙酯液，残渣自“加乙酸乙酯20ml”起同法重复处理2次，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣用1ml乙醇溶解，作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，将供试品溶液与对照品溶液点于聚酰胺薄膜上使呈条状，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(1∶15∶1∶1∶2)的上层溶液为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上无相同颜色的荧光斑点。方法二、取样品5g，用60％乙醇回流提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，蒸干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液以乙酸乙酯提取5次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，将供试品溶液与对照品溶液点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为粘合剂的硅胶G薄层板上使呈条状，以乙酸乙酯-甲酸-水(10∶2∶3)的上层溶液为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上无相同颜色的荧光斑点。通过以上的方法未能检出绿原酸，所以未能建立杜仲的薄层鉴别。

(5)山药、莲子为打粉加入，拟建立山药、莲子的显微鉴别，用多种不同的方法制了三十多张片进行显微观察，但由于粉量在处方中所占比例较小，为10.7％，膏的比例较大，显微观察效果不好，山药及莲子的显微特征不明显，故不将山药、莲子的显微鉴别列入本发明。

(6)当归：主含阿魏酸。方法一、按《中华人民共和国药典》2005版一部“升麻”项下鉴别阿魏酸的方法进行鉴别，结果干扰较大，无法检验出是否含有阿魏酸。方法二、取样品10g，研细，加乙醇50ml在索氏提取器中回流提取2小时，取甲醇提取液置水浴上蒸干，加热水20ml，置水浴上加热20分钟使溶解，冷却后用乙醚20ml、10ml分次提取，合并乙醚液，置水浴上挥至约1ml，作为供试品溶液。另取阿魏酸对照品，加乙醚制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸-甲酸(5∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，无相同颜色的斑点。因此未列入本发明。

(7)金樱子亦为方中主药。按《中华人民共和国药典》2005版一部该药材鉴别项下的方法进行鉴别，结果样品中杂质干扰较大，斑点分离不好，故改用其它方法进行鉴别。方法一、取样品10g，研细，加乙醇50ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，以三氯甲烷提取2次，每次25ml，合并三氯甲烷提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取金樱子对照药材5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2005版一部附录VIB)，吸取上述两种溶液各10μl，点于同一硅胶G板上，以三氯甲烷-甲醇(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上无相同颜色的斑点。

方法二、取样品10g，研细，加乙醇50ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml使溶解，用乙酸乙酯30ml提取，提取液用无水硫酸钠脱水，蒸干，残渣加少量无水乙醇，加在中性氧化铝柱上(2cm)，用40ml无水乙醇洗脱，弃去无水乙醇液再用70％乙醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取金樱子对照药材4g，加乙醇30ml，加热回流30分钟，滤过，残渣加甲醇1ml溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2005版一部附录VIB)，吸取上述两种溶液各2μl，点于同一硅胶G板上，以三氯甲烷-甲醇(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上无相同颜色的斑点。故未建立金樱子的薄层鉴别。

(8)陈皮：主含橙皮苷，按《中华人民共和国药典》2005年版一部该药材鉴别项下的方法进行鉴别，结果供试品色谱中，在与对照品相应位置上无相同颜色的斑点，故改用以下方法：取样品10g，研细，加乙醚50ml，加热回流1小时，弃去乙醚液，挥干，加甲醇50ml，回流30分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干。残渣加水50ml溶解，加到D₁₀₁大孔树脂柱上(内径1.5cm，长5-10cm)，用水70ml洗脱，弃去洗脱液，再用乙醇70ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的对照品溶液，照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2005版一部附录VIB)，吸取上述两种溶液各10μl，点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(100∶17∶13)为展开剂，第一次展开，展距为5cm，取出，晾干，再用甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水(20∶10∶1∶1)的上层溶液为展干剂，二次展开，展距为12cm，展开，取出，晾干。以1％AlCl₃的乙醇溶液为显色剂，显色，置紫外光灯(365nm)下检视，结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上没有相同的斑点，故陈皮的薄层鉴别也未建立。

(9)枸杞子：主含胡萝卜素、甜菜碱、烟酸等，取样品10g，研细，加水50ml，回流1小时，滤过，滤液用乙酸乙酯提取2次，每次15ml，合并提取液，浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2005版一部附录VIB)吸取上述两种溶液各2μl，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(4∶3∶0.8∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；取阴性样品同法操作，在与对照药材相应位置上，亦显相同颜色的荧光斑点，即阴性有干扰。

(10)女贞子亦为方中主药。参照药典2005年版一部“女贞子”鉴别项下的方法，进行齐墩果酸的薄层鉴别，结果样品中未检出齐墩果酸。方法二、取样品5g，加7％硫酸钠的乙醇-水(1∶3)溶液50ml，加热回流2小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取3次(50、25、25ml)，三氯甲烷液用水振摇洗涤后用无水硫酸钠脱水，滤过，三氯甲烷液蒸干，以甲醇1ml溶解。另取女贞子对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录VIB)吸取上述两种溶液各2μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，用硫酸-水(1∶1)的溶液显色，在105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照药材相应位置上，无相同颜色的斑点。因此没有建立女贞子的薄层鉴别。

(11)党参：为方中主要成分，取样品粉末及缺党参的阴性样品粉末各10g，分别加5％的盐酸的70％乙醇溶液40ml，置水浴中水解1小时，放冷，滤过，滤液置分液漏斗中，加水40ml混匀，用三氯甲烷40ml萃取，三氯甲烷萃取液用无水硫酸钠脱水，置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解成1ml，分别作为供试品溶液及阴性供试品溶液，另取党参对照药材1g同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录VIB)吸取上述三种溶液各5μl，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(14∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以25％磷钼酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱及阴性供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上均显相同颜色的斑点，证明阴性样品有干扰，故未建立党参的薄层鉴别。

(12)肉苁蓉：方法一、参照《中国药典》2005年版一部该药材项下的方法进行鉴别，结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上无相同颜色的斑点。方法二、取样品10g，研细，加无水乙醇50ml，加热回流提取30分钟，提取3次，合并回流提取液浓缩至约1ml作为供试品溶液。另取肉苁蓉对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录VIB)吸取上述二种溶液各5μl，点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以乙醇-0.5％盐酸(8∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改变碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上无相同颜色的斑点，故未建立肉苁蓉的薄层鉴别。

(13)甘草：参照《中国药典》2005年版一部该药材及“逍遥丸”项下的方法进行鉴别，结果干扰较大，斑点分离不好，且阴性样品也有干扰，故未将甘草的薄层鉴别列入本发明。

(14)远志：主含皂苷，取样品粉末及缺远志的阴性样品粉末各10g，分别加5％的盐酸的70％乙醇溶液40ml，置水浴中水解1小时，放冷，滤过，滤液置分液漏斗中，加水40ml混匀，用三氯甲烷40ml萃取，三氯甲烷萃取液用无水硫酸钠脱水，置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解成1ml，分别作为供试品溶液及阴性供试品溶液，另取远志对照药材1g同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录VIB)吸取上述三种溶液各5μl，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(14∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以25％磷钼酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱及阴性供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，证明阴性样品有干扰，远志的薄层鉴别也未建立。

此外，对方中熟地、白术等进行了TCL鉴别研究，均因各种原因没有成功。

含量测定为方中白芍和牡丹皮所含有效成份芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)的含量测定。申请人还对含量测定的方法进行了方法学验证，以下为方法学验证的内容：

(1)仪器与试剂

高效液相色谱仪：岛津LC-10ATVP输液泵(双泵)，SPD-10AVP紫外可见检测器；色谱柱：Diamonsil？C18迪玛柱250×4.6mm

电子天平：梅特勒-托利多AE天平

800型台式离心机

芍药苷对照品(供含量测定用)：购于中国药品生物制品检定所，批号0736-200424。

甲醇为色谱纯；水为重蒸馏水；磷酸二氢钾为优级纯(进口)；醋酸、异丙醇为分析纯。

(2)试验条件的选择

1、检测波长的选择取芍药苷对照品溶液，在200～700nm波长范围内用紫外分光光度法进行测定，结果在230nm处有最大吸收，故选择230nm作为检测波长。

2、流动相的选择参照《中国药典》2005年版一部白芍、八珍丸、牛黄降压片、四物合剂、乐脉颗粒、滋心口服液等含量测定项下芍药苷含测的色谱条件，检测波长为230nm。主要选用甲醇-0.5mol/L磷酸二氢钾-醋酸-异丙醇系统和甲醇-水系统，进行试验结果如下：

                          表3  色谱条件的选择结果

色谱条件	TR(min)	峰面积	样品分离效果
				①甲醇-0.5mol/L磷酸二氢钾-醋酸-异丙醇(60∶128∶4∶4)	8.093	36095	分离效果较差，样品含量较低。
②甲醇-水(28∶72)	10.649	140724	分离效果较好，样品含量较高。

通过以上对比试验的比较，方法②保留时间适当，样品分离效果好，故选用此方法。在此条件下，芍药苷峰的理论塔板数在6000～7500，参照《中国药典》2000年版一部有关品种中芍药苷含量测定项下的要求，规定芍药苷峰的理论塔板数不低于3000。

(3)对照品及供试品溶液的制备

对照品溶液的制备取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品约10mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得芍药苷对照品贮备液(约为0.2mg/ml)。再精密吸取5ml贮备液置50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(约为20μg/ml)。

供试品溶液制备方法的选择取装量差异项下的本制剂内容物，研磨成细粉，分别精密称取细粉0.5g，采用不同的方法处理样品，结果如下：

                  表4  对照品结果

对照品溶液	含量(ug/ml)	峰面积	平均峰面积
				1	20.08	356318	357515.5
2	359013

                             表5  样品制备方法选择结果

序号	称样量(g)	溶剂(25ml)	处理方法	峰面积	含量(％)	结论
							1	0.5016	水	超声1小时	89492	0.025	用75％甲醇提取时，提取率最高，且样品分离效果好
2	0.5025	25％甲醇	109790	0.031
					3	0.5022	50％甲醇	225968	0.064
4	0.5006	75％甲醇	287522	0.081
					5	0.5029	甲醇	280775	0.078
6	0.5015	甲醇	回流提取1小时	153130							0.071	回流提取1小时与超声提取1小时结果相当
					7	0.5008		回流提取30分钟	141357	0.04

8	0.5004	75％甲醇	回流提取40分钟	68404	0.019	1、超声提取60分钟与80分钟的结果接近，且含量最高。2、采用方法12时，样品中有大量杂质出现，但对含量测定结果无影响，且分离效果及峰型最好。
							9	0.5018	超声提取15分钟	95951	0.027
10	0.5036		超声提取45分钟	138429	0.039
							11	0.5005	超声提取80分钟	140462	0.039
12	0.5011		超声提取1小时后，取续滤液10ml水浴挥干，用甲醇溶解后定容到10ml	281724	0.079

以上结果说明①75％甲醇提取率最高，且样品的分离效果最好。②回流提取1小时与超声提取1小时的结果接近，考虑样品处理的方便，选用超声提取1小时的方法。③超声提取60分钟与超声提取80分钟含量最高，结果一致，故选用超声提取1小时的方法。④采用方法12处理时样品中有大量杂质出现，但对含量测定结果无影响，且分离效果及峰型最好，并且考虑到样品中减少杂质对保护色谱柱有利，故将方法12列入本发明。

即取装量差异项下的本制剂适量，研细，混匀，取约0.5g精密称定，置50ml具塞锥型瓶中，精密加入75％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声提取1小时，取出放冷，再称定重量，用75％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置水浴(60℃)上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。

(4)阴性样品及溶剂峰的测定阴性对照品的制备是按制剂处方中药味的比例，自配不含白芍及牡丹皮的群药，按其制备工艺制成空白制剂。取阴性样品(不含白芍和牡丹皮)0.5025g按本发明供试品溶液制备方法，依法制得阴性供试品溶液。分别吸取芍药苷对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液及溶剂(75％甲醇)各10μl注入色谱仪，按本发明含量测定项下色谱条件进行测定，结果如下：

     表6  阴性样品的考察结果

样品名称

保留时间(min)

峰面积

阴性对照样品	/	/
			溶剂	/	/
样品	10.642	142205
			对照品	10.623	122346

结果表明，阴性样品及溶剂(75％甲醇)在芍药苷的相对保留时间(约为10.6min)无色谱峰，所以样品测定的即为白芍及牡丹皮药材中所含的芍药苷。溶剂(75％甲醇)在芍药苷的相对保留时间(约为10.6min)无色谱峰，故认为对供试品的测试无影响。

(5)线性关系的考察

取芍药苷对照品贮备液(0.2008mg/ml)适量，加甲醇分别制成以下浓度的溶液(μg/ml)：2.008，5.02，10.04，20.08，30.12，40.16，80.32。各精密吸取10μl进样，按本发明含量测定项下色谱条件试验，结果如下：

                         表7  线性关系考察结果表

序号	浓度(ug/ml)	进样体积(ul)	进样量(ug)	保留时间(min)	峰面积
						1	2.008	10	0.02008	10.681	13091
2	5.020	0.0502	10.687	30084
					3	10.04	0.1004		10.635	61889
4	20.08	0.2008	10.627	123498
					5	30.12	0.3012		10.675	186721
6	40.16	0.4016	10.580	244314
					7	80.32	0.8032		10.635	491993

以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标绘制标准曲线。回归方程为：Y＝611866.6534X+403.2279  r＝0.9999芍药苷在0.02008～0.8032μg范围内具有良好的线性关系。

拟合成过原点的直线方程为Y＝612663.1664X，将线性关系考察的最低进样量与最高进样量分别代入两方程进行计算，所得峰面积相对偏差为1.5％(低)～0.024％(高)。由此可看作截距近似为零，故本发明中采用外标一点法计算芍药苷含量。

(6)稳定性试验  精密称取经研磨的样品(批号：20041024)细粉0.5009g，按供试品溶液制备方法制备样品供试品溶液，按含量测定项下的方法，每隔一定时间测定一次峰面积，结果如下：

                            表8  稳定性考察结果

放置时间(h)	保留时间(min)	峰面积	平均峰面积	RSD(％)
					0	10.604	298512	296200	1.2
1	10.622	298513
			2	10.637	290091
4	10.631	298954
			6	10.675	293557
8	10.626	297573

结果表明，峰面积的相对标准偏差小于2％，供试品溶液在8小时内稳定。

(7)精密度试验精密称取本制剂(批号：20041024)粉末0.50528，按本发明供试品溶液制备方法制备供试品溶液，取供试品溶液重复5次进样，每次10μl，按含量测定项下色谱条件试验，结果如下：

                     表9  精密度试验结果

序号	保留时间(min)	峰面积	平均峰面积	RSD(％)
					1	10.637	305353	305671.2	0.48
2	10.662	307592
			3	10.649	303963
4	10.603	304764
			5	10.613	306684

结果表明，峰面积的相对标准偏差小于2％，精密度良好，证明仪器稳定可靠。

(8)重复性试验分别精密称取经研磨的样品(批号：20041024)细粉5份，每份0.5g，按含量测定方法试验，结果如下：

              表10  重复性考察对照品结果表

对照品溶液	含量(ug/ml)	峰面积	平均峰面积
				1	20.08	255282	255247.5
2	255213

                             表11  重复性考察结果表

编号	称样量(g)	进样量(μl)	峰面积	含量(％)	平均含量(％)	RSD(％)
							1	0.5002	10	303102	0.119	0.12	1.02
2	0.5006	302387	0.119
				3	0.5001	304632	0.120

4	0.5004		309245	0.122
							5	0.5005	304827	0.120

结果表明，含量的相对标准偏差小于2％，重复性良好。

(9)回收率试验采用加样回收法。

加入对照品溶液的制备：精密量取5ml芍药苷对照品贮备液(浓度：0.2008mg/ml)置50ml量瓶中，加75％甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得(每ml含芍药苷20.08μg/ml)。

加样回收试验：分别精密称取已知含量经研磨的样品(批号：20041024)，含量0.12％)细粉5份，每份0.25g，置50ml具塞瓶中，加入以上制备的芍药苷对照品75％甲醇溶液(浓度：20.08μg/ml)适量，再加入一定量的75％甲醇，使总量为25ml(75％甲醇加入量＝25-芍药苷对照品溶液加入量)，密塞，按本发明供试品制备方法制备供试品溶液，含量测定项下的条件试验，按下式计算回收率：

结果如下：

               表12  回收率试验对照品结果

对照品溶液	含量(ug/ml)	峰面积	平均峰面积
				1	20.08	255282	255247.5
2	255213

                                         表13  回收率考察结果

编号	称样量(g)	相当于芍药苷的量(mg)	添加对照品的量(ml)	添加对照品的量(mg)	峰面积	测出对照品的总量(mg)	回收率(％)	平均回收率(％)	RSD(％)
										1	0.2541	0.3049	11.5	0.2309	273846	0.5386	101.2	98.8	1.8
2	0.2502	0.3002	270089	0.5312	100.0
						3	0.2516	0.3019	15	0.3022	305346	0.6005			98.8
4	0.2478	0.2974	298610	0.5873	95.9
						5	0.2508	0.3009			18	0.3615	334575	0.6580	98.8
6	0.2501	0.3001	332255	0.6535	97.8

结果表明，本方法有良好的回收率，且回收率的标准偏差小于2％。

(10)样品测定结果  按本发明含量测定方法和条件测试十批样品，分别计算样品中芍药苷含量：

                  表14  10批样品测试对照品结果表

编号	含量(ug/ml)	保留时间	峰面积	平均峰面积
					1	20.08	10.634	255282	255247.5
2	10.608	255213

                        表15  10批样品测试结果

编号(批号)		称样量(g)	保留时间min	峰面积	平均含量(％)
						20041024	1	0.5034	10.526	303102	0.117
2	0.5022	10.559	302387
				20041025	1		0.5014	10.688	279362	0.113
2	0.5009	10.664	282366
					20041026	1	0.5007	10.657	281251		0.110
2	0.5017	10.690	285187
				20041103		1	0.5032	10.562	141929	0.056
2	0.5019	10.564	140954
					20041104	1	0.5012	10.681	143922		0.058
2	0.5014	10.684	142865
				20041105		1	0.5022	10.546	149296	0.058
2	0.5001	10.555	149001
					20050106	1	0.5009	10.689	117765		0.048
2	0.5002	10.691	118656
				20050309		1	0.5012	10.511	138995	0.054
2	0.5009	10.519	136226
					20050310	1	0.5049	10.638	139889		0.054
2	0.5043	10.644	136892
				20050431		1	0.5001	10.675	179665	0.071
2	0.5005	10.679	176332

根据10批样品测定结果，确定本制剂每粒含牡丹皮、白芍以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得少于0.038％。

具体实施方式：

本发明的实施例1：杜仲(盐水炒)250份、菟丝子(制)250份、肉苁蓉250份、远志(制)250份、当归(酒制)250份、莲子250份、泽泻250份、牡丹皮250份、白芍250份、淫羊藿230份、黄芪500份、熟地黄500份、山药500份、茯苓500份、白术500份、陈皮130份、砂仁130份、女贞子120份、金樱子120份、山茱萸25份、巴戟天25份、柏子仁25份、党参500份、枸杞子500份和甘草250份(以上份量均为重量份)。

取莲子、山药粉碎成细粉，备用；陈皮和砂仁提取挥发油，备用；药渣与杜仲、菟丝子、肉苁蓉、远志、当归、泽泻、牡丹皮、白芍、淫羊藿、黄芪、熟地黄、茯苓、白术、女贞子、金樱子、山茱萸、巴戟天、柏子仁、党参、枸杞子和甘草加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，浓缩至相对密度为1.30，加入莲子、山药细粉，混匀后干燥，加入适量淀粉制粒，喷入挥发油，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得本发明的胶囊剂。本制剂口服，一次2～4粒，一日2次。

本发明的实施例2：杜仲(盐水炒)20份、菟丝子(制)20份、肉苁蓉20份、远志(制)20份、当归(酒制)20份、莲子20份、泽泻20份、牡丹皮20份、白芍20份、淫羊藿18份、黄芪40份、熟地黄40份、山药40份、茯苓40份、白术40份、陈皮10份、砂仁10份、女贞子8份、金樱子8份、山茱萸2份、巴戟天2份、柏子仁2份、党参40份、枸杞子40份和甘草20份(以上份量均为重量份)

取莲子、山药粉碎成细粉，备用；陈皮和砂仁提取挥发油，备用；药渣与杜仲、菟丝子、肉苁蓉、远志、当归、泽泻、牡丹皮、白芍、淫羊藿、黄芪、熟地黄、茯苓、白术、女贞子、金樱子、山茱萸、巴戟天、柏子仁、党参、枸杞子和甘草加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，浓缩至相对密度为1.30，加入莲子、山药细粉，混匀后干燥，加入适量蔗糖制粒，干燥，喷入挥发油，混匀，分装，制成1000袋，即得本发明的颗粒剂。本制剂口服，一次1袋，一日2次。

本发明的实施例3：杜仲(盐水炒)500份、菟丝子(制)500份、肉苁蓉500份、远志(制)500份、当归(酒制)500份、莲子500份、泽泻500份、牡丹皮500份、白芍500份、淫羊藿450份、黄芪1000份、熟地黄1000份、山药1000份、茯苓1000份、白术1000份、陈皮250份、砂仁250份、女贞子240份、金樱子240份、山茱萸50份、巴戟天50份、柏子仁50份、党参1000份、枸杞子1000份和甘草500份(以上份量均为重量份)

取莲子、山药粉碎成细粉，备用；陈皮和砂仁提取挥发油，备用；药渣与杜仲、菟丝子、肉苁蓉、远志、当归、泽泻、牡丹皮、白芍、淫羊藿、黄芪、熟地黄、茯苓、白术、女贞子、金樱子、山茱萸、巴戟天、柏子仁、党参、枸杞子和甘草加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，浓缩至相对密度为1.30，加入莲子、山药细粉，混匀后干燥，粉碎，喷入挥发油，混匀，分装，制成1000袋，即得本发明的散剂。本制剂口服，一次1袋，一日2次。

本发明的实施例4：本发明胶囊剂(按本发明生产工艺制备而成，由本申请人直接提供)的质量控制方法为：

性状：其内容物为棕色颗粒或粉末；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂内容物10g，研细，加50％甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次30ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约1ml溶解，加中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，干燥，装入预先装填好的中性氧化铝柱(200目，2g，内径10-15mm，干法装柱)上，用甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(2)取本制剂内容物10g，研细，加石油醚(60～90℃)30ml，超声处理20分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水10ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心10分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取2次，每次15ml，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取3次(10，10，5ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次(每次15ml)，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(3)取黄芪甲苷对照品，加50％甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液10μ1，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。

检查：应符合胶囊剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版一部附录IL)。

含量测定  照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基键合硅胶为填充剂；50％甲醇-水(28∶72)为流动相；检测波长为230nm。理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备  取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品约10mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得芍药苷对照品贮备液(约为0.2mg/ml)。再精密吸取5ml贮备液置50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(约为20μg/ml)。

供试品溶液的制备  取装量差异项下的本制剂适量，研细，混匀，取约0.5g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声提取1小时，取出放冷，再称定重量，用75％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置水浴(60℃)上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

本胶囊剂含白芍和牡丹皮以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，每粒不得少于0.10mg。

本发明的实施例5：本发明颗粒剂(按本发明生产工艺制备而成，由本申请人直接提供)的质量控制方法为：

性状：药物为棕色的颗粒；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂10g，研细，加50％甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次30ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约1ml溶解，加中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，干燥，装入预先装填好的中性氧化铝柱(200目，2g，内径10-15mm，干法装柱)上，用甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(2)取本制剂10g，研细，加石油醚(60～90℃)30ml，超声处理20分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水10ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心10分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取2次，每次15ml，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取3次(10，10，5ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次(每次15ml)，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(3)取黄芪甲苷对照品，加50％甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。

检查：应符合颗粒剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版一部附录IC)。

含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂；50％甲醇-水(28∶72)为流动相；检测波长为230nm。理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备  取经80℃干燥l小时后的芍药苷对照品约10mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得芍药苷对照品贮备液(约为0.2mg/ml)。再精密吸取5ml贮备液置50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(约为20μg/ml)。

供试品溶液的制备  取装量差异项下的本制剂适量，研细，混匀，取约0.5g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声提取1小时，取出放冷，再称定重量，用75％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置水浴(60℃)上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

本颗粒剂含白芍和牡丹皮以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，每克不得少于0.38mg。

本发明的实施例6：本发明散剂(按本发明生产工艺制备而成，由本申请人直接提供)的质量控制方法为：

性状：药物为棕色的粉末；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂10g，研细，加50％甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次30ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约1ml溶解，加中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，干燥，装入预先装填好的中性氧化铝柱(200目，2g，内径10-15mm，干法装柱)上，用甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(2)取本制剂10g，研细，加石油醚(60～90℃)30ml，超声处理20分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水10ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心10分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取2次，每次15ml，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取3次(10，10，5ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次(每次15ml)，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(3)取黄芪甲苷对照品，加50％甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。

检查：应符合散剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版一部附录IB)。

含量测定  照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基键合硅胶为填充剂；50％甲醇-水(28∶72)为流动相；检测波长为230nm。理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备  取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品约10mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得芍药苷对照品贮备液(约为0.2mg/ml)。再精密吸取5ml贮备液置50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(约为20μg/ml)。

供试品溶液的制备  取装量差异项下的本制剂适量，研细，混匀，取约0.5g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声提取1小时，取出放冷，再称定重量，用75％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置水浴(60℃)上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

本散剂含白芍和牡丹皮以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，每克不得少于0.38mg。

本发明的实施例7：本发明胶囊剂的质量控制方法也可以为：

性状：其内容物为棕色颗粒或粉末；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂内容物0.1g，研细，加99％甲醇5ml，加热回流10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水5ml使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次50ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次50ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次50ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约0.5ml溶解，加中性氧化铝1g，置水浴上拌匀，干燥，装入预先装填好的中性氧化铝柱(200目，2g，内径10-15mm，干法装柱)上，用甲醇10ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液5μl，对照品溶液1μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10∶10∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(2)取本制剂内容物0.1g，研细，加石油醚(60～90℃)20ml，超声处理5分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇5ml，加热回流10分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水5ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心5分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取1次(30ml)，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取1次(30ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤1次(每次15ml)，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含3mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(1∶10∶0.5)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，在100℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(3)取黄芪甲苷对照品，加99％甲醇制成每1ml含3mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液5μl，对照品溶液1μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝1∶10∶0.5的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，在100℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。

检查：应符合胶囊剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版一部附录IL)。

含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基键合硅胶为填充剂；99％甲醇-水(20∶80)为流动相；检测波长为210nm。理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备  取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品约10mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加99％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得芍药苷对照品贮备液(约为0.2mg/ml)。再精密吸取5ml贮备液置100ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(约为10μg/ml)。

供试品溶液的制备  取装量差异项下的本制剂适量，研细，混匀，取约0.8g精密称定，置80ml具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇溶液40ml，密塞，称定重量，超声提取30分钟，取出放冷，再称定重量，用50％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置水浴(60℃)上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

本胶囊剂含白芍和牡丹皮以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，每粒不得少于0.10mg。

本发明的实施例8：本发明颗粒剂的质量控制方法也可以为：

性状：药物为棕色的颗粒；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂20g，研细，加1％甲醇100ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水50ml使溶解，用乙醚振摇提取5次，每次10ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次10ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤5次，每次10ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约2ml溶解，加中性氧化铝5g，置水浴上拌匀，干燥，装入预先装填好的中性氧化铝柱(200目，2g，内径10-15mm，于法装柱)上，用甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液15μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(50∶1∶20∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(2)取本制剂20g，研细，加石油醚(60～90℃)50ml，超声处理40分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇100ml，加热回流60分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水20ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心8分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取3次，每次5ml，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取5次(每次5ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤5次(每次15ml)，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(20∶1∶5)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20％硫酸乙醇溶液，在110℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(3)取黄芪甲苷对照品，加1％甲醇制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液8μ1，对照品溶液3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝20∶1∶5的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20％硫酸乙醇溶液，在110℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。

检查：应符合颗粒剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版一部附录IC)。

含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基键合硅胶为填充剂；1％甲醇-水(40∶60)为流动相；检测波长为220nm。理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于5000。

对照品溶液的制备  取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品约10mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加1％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得芍药苷对照品贮备液(约为0.2mg/ml)。再精密吸取5ml贮备液置20ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(约为50μg/ml)。

供试品溶液的制备取装量差异项下的本制剂适量，研细，混匀，取约1.0g精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入90％甲醇溶液50ml，密塞，称定重量，超声提取45分钟，取出放冷，再称定重量，用90％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置水浴(60℃)上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各8μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

本颗粒剂含白芍和牡丹皮以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，每克不得少于0.38mg。

Claims (13)

1.一种温肾养心、壮腰安神的中药制剂，其特征在于：按照重量份计算，它由盐水炒杜仲20～500份、制菟丝子20～500份、肉苁蓉20～500份、制远志20～500份、酒制当归20～500份、莲子20～500份、泽泻20～500份、牡丹皮20～500份、白芍20～500份、淫羊藿18～450份、黄芪40～1000份、熟地黄40～1000份、山药40～1000份、茯苓40～1000份、白术40～1000份、陈皮10～250份、砂仁10～250份、女贞子8～240份、金樱子8～240份、山茱萸2～50份、巴戟天2～50份、柏子仁2～50份、党参40～1000份、枸杞子40～1000份和甘草20～500份经提取后得到的有效成分与适当辅料制备而成。

2.按照权利要求1所述温肾养心、壮腰安神的中药制剂，其特征在于：按照重量份计算，它由盐水炒杜仲250份、制菟丝子250份、肉苁蓉250份、制远志250份、酒制当归250份、莲子250份、泽泻250份、牡丹皮250份、白芍250份、淫羊藿230份、黄芪500份、熟地黄500份、山药500份、茯苓500份、白术500份、陈皮130份、砂仁130份、女贞子120份、金樱子120份、山茱萸25份、巴戟天25份、柏子仁25份、党参500份、枸杞子500份和甘草250份经提取后得到的有效成分与浸膏粉重量1％～20％的辅料制备而成。

3.按照权利要求1或2所述温肾养心、壮腰安神的中药制剂，其特征在于：所述的制剂为胶囊剂、软胶囊剂、合剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂中的一种或药学上其它可能的剂型。

4.按照权利要求3所述温肾养心、壮腰安神的中药制剂，其特征在于：所述的制剂为胶囊剂、颗粒剂或散剂。

5.如权利要求1～4中任意一项所述温肾养心、壮腰安神的中药制剂的制备方法，其特征在于：取莲子、山药粉碎成细粉，备用；陈皮和砂仁提取挥发油，备用；药渣与杜仲、菟丝子、肉苁蓉、远志、当归、泽泻、牡丹皮、白芍、淫羊藿、黄芪、熟地黄、茯苓、白术、女贞子、金樱子、山茱萸、巴戟天、柏子仁、党参、枸杞子和甘草加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，药液浓缩至相对密度为1.30，加入莲子、山药细粉，混匀后干燥，即得本发明的有效成分，将得到的有效成分喷入挥发油，加入所需的辅料，按照常规方法制成不同的制剂。

6.按照权利要求5所述温肾养心、壮腰安神的中药制剂的制备方法，其特征在于：胶囊剂这样制备：取莲子、山药粉碎成细粉，备用；陈皮和砂仁提取挥发油，备用；药渣与杜仲、菟丝子、肉苁蓉、远志、当归、泽泻、牡丹皮、白芍、淫羊藿、黄芪、熟地黄、茯苓、白术、女贞子、金樱子、山茱萸、巴戟天、柏子仁、党参、枸杞子和甘草加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，药液浓缩至相对密度为1.30，加入莲子、山药细粉，混匀后干燥，加入适量辅料制粒，喷入挥发油，混匀，装入胶囊，即得。

7.按照权利要求5所述温肾养心、壮腰安神的中药制剂的制备方法，其特征在于：颗粒剂这样制备：取莲子、山药粉碎成细粉，备用；陈皮和砂仁提取挥发油，备用；药渣与杜仲、菟丝子、肉苁蓉、远志、当归、泽泻、牡丹皮、白芍、淫羊藿、黄芪、熟地黄、茯苓、白术、女贞子、金樱子、山茱萸、巴戟天、柏子仁、党参、枸杞子和甘草加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，药液浓缩至相对密度为1.30，加入莲子、山药细粉，混匀后干燥，加入所需的辅料制粒，干燥，喷入挥发油，混匀，分装，即得。

8.按照权利要求5所述温肾养心、壮腰安神的中药制剂的制备方法，其特征在于：散剂这样制备：取莲子、山药粉碎成细粉，备用；陈皮和砂仁提取挥发油，备用；药渣与杜仲、菟丝子、肉苁蓉、远志、当归、泽泻、牡丹皮、白芍、淫羊藿、黄芪、熟地黄、茯苓、白术、女贞子、金樱子、山茱萸、巴戟天、柏子仁、党参、枸杞子和甘草加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，药液浓缩至相对密度为1.30，加入莲子、山药细粉，混匀后干燥，粉碎，喷入挥发油，混匀，分装，即得。

9.如权利要求1或5所述温肾养心、壮腰安神的中药制剂的质量控制方法，包括性状、鉴别、检查和含量测定，所述的性状项应符合各制剂项下的有关规定，其特征在于：所述的鉴别项为白芍及牡丹皮、黄芪、淫羊藿的鉴别；所述的检查项应符合中国药典2005年版一部附录各制剂项下的有关规定；所述的含量测定项为测定白芍及牡丹皮所含芍药苷C23H28O11的含量。

10.按照权利要求9所述温肾养心、壮腰安神的中药制剂的质量控制方法，其特征在于：所述质量控制方法包括：

性状：药物或其内容物为棕色颗粒或粉末；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂内容物0.1～20g，研细，加1％～99％甲醇5～100ml，加热回流10～60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水5～50ml使溶解，用乙醚振摇提取2～5次，每次10～50ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取2～5次，每次10～50ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2～5次，每次10～50ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约0.5～2ml溶解，加中性氧化铝1～5g，置水浴上拌匀，干燥，装入200目、2g、内径10-15mm、预先干法装填好的中性氧化铝柱上，用甲醇10～100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇0.5～2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.5～5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5～15μl，对照品溶液1～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝10～50∶1～10∶5～20∶0.1～0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取本制剂内容物0.1～20g，研细，加60～90℃石油醚20～50ml，超声处理5～40分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇5～100ml，加热回流10～60分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水5～20ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心5～10分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取1～3次，每次5～30ml，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取1～5次，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤1～5次，每次15ml，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5～2ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含1～5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝1～20∶1～20∶1～10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5～20％硫酸乙醇溶液，在100～110℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)取黄芪甲苷对照品，加1％～99％甲醇制成每1ml含1～5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液5～10μl，对照品溶液1～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝1～20∶1～20∶1～10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5～20％硫酸乙醇溶液，在100～110℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录各剂型项下的有关规定；

含量测定照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基键合硅胶为填充剂；1％～99％甲醇∶水＝20～40∶80～60为流动相；检测波长为210～230nm；理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于2000～5000；

对照品溶液的制备  取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品适量，精密称定，加1％～99％甲醇溶解，制成每1ml含10～50μg的溶液；

供试品溶液的制备  取单位制剂适量，研细，混匀，取约0.5～1.0g，精密称定，置50～100ml具塞锥形瓶中，精密加入50～90％甲醇溶液25～50ml，密塞，称定重量，超声提取30～60分钟，取出放冷，再称定重量，用50～90％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置60℃水浴上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5～10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得；

本制剂含白芍和牡丹皮以芍药苷C23H28O11计，不得少于0.020～0.050％。

11.按照权利要求9或10所述温肾养心、壮腰安神的胶囊剂的质量控制方法，其特征在于：

性状：其内容物为棕色颗粒或粉末；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂内容物10g，研细，加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次30ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约1ml溶解，加中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，干燥，装入200目、2g、内径10-15mm、预先干法装填好的中性氧化铝柱上，用甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取本制剂内容物10g，研细，加60～90℃石油醚30ml，超声处理20分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水10ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心10分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取2次，每次15ml，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取3次，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次15ml，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105？烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录IL胶囊剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝28∶72为流动相；检测波长为230nm；理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成每1ml含20μg的溶液；

供试品溶液的制备  取装量差异项下的本制剂适量，研细，混匀，取约0.5g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声提取1小时，取出放冷，再称定重量，用75％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置60℃水浴上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得；

本胶囊剂含白芍和牡丹皮以芍药苷C23H28O11计，每粒不得少于0.10mg。

12.按照权利要求9或10所述温肾养心、壮腰安神的颗粒剂的质量控制方法，其特征在于：

性状：药物为棕色的颗粒；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂10g，研细，加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次30ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约1ml溶解，加中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，干燥，装入200目、2g、内径10-15mm、预先干法装填好的中性氧化铝柱上，用甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取本制剂10g，研细，加60～90℃石油醚30ml，超声处理20分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水10ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心10分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取2次，每次15ml，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取3次，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次15ml，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105？烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录IC颗粒剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝28∶72为流动相；检测波长为230nm；理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备  取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成每1ml含20μg的溶液；

供试品溶液的制备  取装量差异项下的本制剂适量，研细，混匀，取约0.5g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声提取1小时，取出放冷，再称定重量，用75％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置60℃水浴上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得；

本颗粒剂含白芍和牡丹皮以芍药苷C23H28O11计，不得少于0.38mg/g。

13.按照权利要求9或10所述温肾养心、壮腰安神的散剂的质量控制方法，其特征在于：

性状：药物为棕色的粉末；气微，味酸、微甘；

鉴别：(1)取本制剂10g，研细，加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次30ml，弃去乙醚液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇约1ml溶解，加中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，干燥，装入200目、2g、内径10-15mm、预先干法装填好的中性氧化铝柱上，用甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液3μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取本制剂10g，研细，加60～90℃石油醚30ml，超声处理20分钟，滤过，药渣置水浴上挥尽残留的石油醚，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤渣用少量甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加水10ml，加热使溶解，放冷，溶液置离心管中离心10分钟，取上清液置分液漏斗中，用三氯甲烷提取2次，每次15ml，弃去三氯甲烷液，水液用水饱和的正丁醇提取3次，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次15ml，弃去氨溶液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取鉴别(2)项下的供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105？烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；立即置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录IB散剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基键合硅胶为填充剂；甲醇∶水＝28∶72为流动相；检测波长为230nm；理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备  取经80℃干燥1小时后的芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成每1ml含20μg的溶液；

供试品溶液的制备  取装量差异项下的本品适量，研细，混匀，取约0.5g精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声提取1小时，取出放冷，再称定重量，用75％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取10ml续滤液置60℃水浴上挥至近干，用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得；

本散剂含白芍和牡丹皮以芍药苷C23H28O11计，不得少于0.38mg/g。