CN1823892A - 一种用于治疗慢性鼻炎的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于治疗慢性鼻炎的药物组合物，它由以下重量份的原料药组成：广藿香油10～30份，猪胆粉100～300份。它可加入辅料或赋形剂制成临床可接受的片剂、胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、滴丸剂及其他口服剂型。本发明的优点是：日用量降低，方便鼻炎患者的应用。

Description

一种用于治疗慢性鼻炎的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种可用于治疗慢性鼻炎、鼻窦炎等症的药物组合物。

背景技术

中医认为“鼻渊”病常由于胆经郁热，上移鼻窍，又为湿热所阻，浊气壅塞，化腐成脓。通常使用的中药藿胆丸由广藿香、猪胆汁组成，其中的猪胆汁苦寒，有清热解毒，消炎利胆之功效，尤擅清胆经之热，芳香上窜、化脓利湿；二者合用，可清风热、通鼻窍，主治风热上扰引起之鼻塞欠通，为中医治“鼻渊”代表性成药。藿胆丸处方为广藿香叶4000g、猪胆粉315g，由于方中广藿香叶用量大，直接粉碎成细粉与猪胆粉制丸，致使日用量达12克，让鼻炎患者深感不便，且由于处方量太大以至于市售藿胆丸只能为丸剂，而无法制成其他新型制剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种日用量较低、使用方便的用于治疗慢性鼻炎药物组合物及其制备方法。

本发明的技术解决方案是：它由以下重量份的原料药组成：广藿香油10～30份，猪胆粉100～300份。

作为一种优化方案，本发明的药物组合物由以下重量份的原料药组成：广藿香油10～20份，猪胆粉150～250份。

作为一种最优方案，本发明的药物组合物由以下重量份的原料药组成：广藿香油14份，猪胆粉219份。

本发明用广藿香油代替广藿香叶，使处方量大大减少，可以加入辅料或赋形剂制成临床可接受的剂型，如片剂、胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、滴丸剂等，而藿胆丸因为处方量太大剂型选择受到限制，目前只有丸剂一个剂型。

该药物组合物中的广藿香油，可以采用药典标准的广藿香油，也可以由广藿香采用直接水蒸汽蒸馏或采用SFE-CO2提取制得的广藿香油。

本发明的制备工艺方法为：取以上二味，混合，加辅料适量，混匀，制成临床上可接受的各种剂型。

所用的辅料为淀粉或聚乙二醇。

本发明的药物组合物具有以下药理作用：对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高以及大鼠角叉菜胶足趾肿胀、二甲苯所致小鼠耳廓肿胀等急性炎症模型均有明显抑制作用，对大鼠棉球肉芽肿的亚急性炎症模型也有明显的抑制作用，显示有较好的抗炎作用；对卵蛋白致敏豚鼠离体回肠肌，具有快速抑制过敏性收缩作用，对大鼠被动皮肤过敏反应具有明显的抑制作用，对2、4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应有明显的抑制作用，显示较好的抗过敏作用；体外抗菌试验对所试菌种(金黄色葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎链球菌、卡他球菌、白喉棒状杆菌、大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌及白色念珠菌)均有不同程度的抗菌作用，体内抗菌试验对注射金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎双球菌的小鼠，能显著降低小鼠死亡率；具有增强小鼠网状内皮系统碳粒廓清的吞噬作用，显示较好的增强免疫作用。

以上药理作用为本发明的药物组合物临床用于治疗湿热蕴结型慢性鼻炎、鼻窦炎提供了实验依据。

本发明的优点是：日用量降低，方便鼻炎患者的应用。

根据广藿香叶一般情况下所含挥发油的量，由原方推断出制备一个处方量制剂所需广藿香油的量，从以下的药效学实验结果可得出14重量份广藿香油与219重量份猪胆粉所制成的本发明的药物组合物的抗炎和抗过敏作用强度相当甚至优于原方藿胆丸。下面通过实验例来进一步说明本发明的效果：

实验例1、本发明药物组合物的主要药效学实验

一、实验材料

1、受试药物与对照药物

受试药物：本发明的药物组合物，成人临床用量为0.932g生药/d，批号：20050501，由广州中医药大学新药开发研究中心提供。

阳性对照药：醋酸泼尼松，5mg/片，广东华南药业有限公司生产，批号：050301；藿胆丸：广州王老吉药业有限公司生产，批号：041007；盐酸赛庚啶，2mg/片，常州四药制药有限公司，批号：KD9290。

拆方对照药：广藿香油，广州百花香精有限公司生产，批号：20021201；猪胆粉，福建省仙游县南丰生化有限公司生产，批号：050301。

2、试验剂量

本发明的药物组合物，成人临床用量为0.932g生药/d，以成人体重60kg计，平均用量为0.0155g生药/kg/d。本试验小鼠低、中、高三个剂量组，分别设为155、310、620mg生药/kg，上述剂量为临床用药剂量的10、20、40倍(按体重计算)；大鼠低、中、高三个剂量组，分别设为77.5、155、310mg生药/kg，上述剂量为临床用药剂量的5、10、20倍(按体重计算)。对照药物剂量按该试验中受试药物的中剂量倍数，根据临床剂量换算。

3、实验动物

NIH小鼠(合格证号2005A0001)，SPF级；SD大鼠(合格证号2005A008)，SPF级；豚鼠(合格证号2005A004)，普通级；均由广州中医药大学实验动物中心提供，正常饲养3天后供试。

4、主要仪器与试剂

BS110S电子天平，Sartorius公司生产；722光栅分光光度计，上海精密科学仪器有限公司生产；BL-410生物信号采集系统，成都泰盟电子有限公司生产；

二甲苯，化学纯，广州化学试剂厂生产，批号：0203428；角叉菜胶，Sigma公司生产；伊文思蓝，Sigma公司生产；醋酸，上海试剂一厂生产，批号：0103521。卵蛋白，sigma公司生产。

二、方法和结果

1、抗炎试验

1.1对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响

取NIH小鼠，体重18～22g，80只，雌雄各半，随机分成八组，空白对照组，醋酸泼尼松组，藿胆丸组，本发明的药物组合物高、中、低剂量组，藿香油组，猪胆粉组，除空白对照组外，各组按表1计量分别灌胃给药，空白对照组给予等容积蒸馏水，每天给药1次，连续4天，末次给药0.5h后，将二甲苯100μl滴于小鼠右耳两面，左耳不涂作为对照，致炎0.5h后处死动物，沿耳廓基线剪下两耳，用直径9mm打下双耳同一部位圆片，电子分析天平，精密称重，以左、右耳片重量之差作为肿胀度，比较各组间差异。结果见表1。

   表1本发明的药物组合物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响( x±s)

组别	N(只)	剂量(mg生药/kg)	耳肿胀度(mg)
				空白对照醋酸泼尼松藿胆丸本发明的药物组合物本发明的药物组合物本发明的药物组合物广藿香油猪胆粉	1010101010101010	-404.0g15531062018.6292	12.5±2.81.5±0.3**1.6±0.4**1.7±0.2**1.5±0.4**1.4±0.2**1.7±0.4**1.6±0.5**

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与醋酸泼尼松组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与藿胆丸组比较ψP＜0.05，ψψP＜0.01；与本发明的药物组合物中剂量比较&P＜0.05，&&P＜0.01。

表1结果表明，与空白对照组比较，醋酸泼尼松西药阳性对照组、藿胆丸中药阳性对照组、本发明的药物组合物低、中、高剂量组，本发明的药物组合物组成药味猪胆粉组、广藿香油组，均能显著减轻二甲苯致炎小鼠的耳肿胀度(P值均＜0.01)。与醋酸泼尼松西药阳性对照组比较，藿胆丸中药阳性组、本发明的药物组合物低、中、高剂量组无统计学差异(P值均＞0.05)，提示本发明的药物组合物各剂量组消炎作用强度与醋酸泼尼松相当。与藿胆丸中药阳性组比较，本发明的药物组合物低、中、高剂量组无统计学差异(P值均＞0.05)，提示本发明的药物组合物各剂量组消炎作用强度与藿胆丸相当。拆方研究表明，猪胆粉组、广藿香油均有较强的消炎作用(P值均＜0.01)，与本发明的药物组合物中剂量组比较无统计学差异(P值均＞0.05)。从试验结果分析可知，对二甲苯致炎小鼠耳肿胀度的抑制作用强度，本发明的药物组合物与醋酸泼尼松、原方藿胆丸相当。

1.2对小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响(腹腔染料渗出法)

取NIH小鼠，体重18～22g，80只，雄性，随机分成八组，空白对照组，醋酸泼尼松组，藿胆丸组，本发明的药物组合物高、中、低剂量组，广藿香油组，猪胆粉组，灌胃给药，空白对照组给予等容积蒸馏水，每天给药1次，连续4天，末次给药0.5h后各鼠尾静脉注射0.5％伊文思蓝生理盐水溶液0.1ml/10g体重，立即腹腔注射0.6％醋酸生理盐水溶液0.2ml/只，30min后放血处死小鼠，剖开腹腔，用10ml生理盐水冲洗数次，收集洗液，离心，取上清液用分光光度计在590nm处测OD值，比较各组间差异。结果见表2。

表2本发明的药物组合物对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响( x±s)

组别	N(只)	剂量(mg生药/kg)	OD值
				空白对照醋酸泼尼松藿胆丸本发明的药物组合物本发明的药物组合物本发明的药物组合物广藿香油猪胆粉	1010101010101010	-404.0g15531062018.6292	0.568±0.0550.145±0.017**0.188±0.012**##0.200±0.014**##0.170±0.018**##ψ0.141±0.026**ψψ0.190±0.027**0.191±0.011**&

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与醋酸泼尼松组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与藿胆丸组比较ψP＜0.05，ψψP＜0.01；与本发明的药物组合物中剂量比较&P＜0.05，&&P＜0.01。

表2结果表明，与空白对照组比较，醋酸泼尼松西药阳性对照组、藿胆丸中药阳性对照组、本发明的药物组合物低、中、高剂量组，本发明的药物组合物组成药味猪胆粉组、广藿香油组，均能显著抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高(P均＜0.01)。与醋酸泼尼松西药阳性对照组比较，本发明的药物组合物高剂量组无统计学差异(P＞0.05)，藿胆丸中药阳性组、本发明的药物组合物低、中剂量组有显著性差异(P值均＜0.01)。与藿胆丸中药阳性组比较，本发明的药物组合物高剂量组有显著性差异(P＜0.01)，本发明的药物组合物中剂量组有差异(P＜0.05)，提示本发明的药物组合物中、高剂量组消炎作用强度优于藿胆丸组。拆方研究表明，猪胆粉组、广藿香油组均有较强的消炎作用(P值均＜0.01)，与本发明的药物组合物中剂量组比较，广藿香油组无统计学差异(P＞0.05)，猪胆粉组有差异(P＜0.05)，说明使用猪胆粉一味药，抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高的作用不如本发明的药物组合物。从试验结果分析可知，对抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高的作用强度，本发明的药物组合物优于原方藿胆丸和广藿香油、猪胆粉。

1.3对大鼠足趾肿胀的影响

取SD雄性大鼠，体重为180～200g，80只，随机分成八组。空白对照组，醋酸泼尼松组，藿胆丸组，本发明的药物组合物高、中、低剂量组，广藿香油组，猪胆粉组，灌胃给药，空白对照组给予等容积蒸馏水，连续给药7天，每天一次。用改良容积法测量各组大鼠右后足正常体积(在足正下作一清晰标线)，末次给药后在右后足趾皮下注入0.1ml角叉菜胶(0.2％)，测定致炎后1h、2h、3h、4h右后足体积，计算肿胀率。

结果见表3、4。比较各给药组足趾肿胀率与蒸馏水对照组足趾肿胀率的差异，并进行t检验。

                              表3本发明的药物组合物对大鼠足趾肿胀率的影响( x±s)

组别	N只	剂量ng生药/kg	肿胀率(％)
							1h	2h	3h	4h
			空白对照组醋酸泼尼松藿胆丸本发明的药物组合物本发明的药物组合物本发明的药物组合物广藿香油猪胆粉	1010101010101010	-202.0g77.51553109.3146	21.83±2.208.28±3.39**21.54±3.2521.15±3.3514.80±3.13**ψψ18.10±3.59*ψ21.18±4.00&&21.83±3.47&&					18.51±3.906.16±2.88**18.23±2.8918.37±3.142.96±3.63**ψψ1.63±3.30**ψψ17.58±3.56&18.10±2.47&&	15.13±3.711.58±2.27**15.06±2.4014.92±3.689.88±3.23**ψψ6.22±2.88**ψψ11.73±3.0814.66±2.74&&	13.68±2.820.29±0.61**8.85±2.47**9.37±2.58**5.44±2.35**ψψ2.97±1.36**ψψ8.31±2.62**&10.66±2.78*&&

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与醋酸泼尼松组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与藿胆丸组比较ψP＜0.05，ψψP＜0.01；与本发明的药物组合物中剂量比较&P＜0.05，&&P＜0.01。

表4本发明的药物组合物对大鼠足趾肿胀抑制率的影响

组别

N

剂量

抑制率(％)

	只	mg生药/kg	1h	2h	3h	4h
							空白对照组醋酸泼尼松藿胆丸本发明的药物组合物本发明的药物组合物本发明的药物组合物广藿香油猪胆粉	1010101010101010	-202.0g77.51553109.3146	-62.061.323.1132.2017.092.970.00	-66.741.500.7630.0172.775.042.23	-89.550.461.3634.7158.3522.463.08	-97.8835.2731.5160.1911.8739.2322.08

表3、4结果表明，与空白对照组比较，醋酸泼尼松组对大鼠足趾肿胀在1h、2h、3h、4h均有明显抑制作用(P＜0.01)；本发明的药物组合物高剂量组对大鼠足趾肿胀在1h有抑制作用(P＜0.05)，在2h、3h、4h有明显抑制作用(P＜0.01)；本发明的药物组合物中剂量组在1h、2h、3h、4h均有明显抑制作用(P＜0.01)；本发明的药物组合物低剂量组在4h有明显抑制作用(P＜0.01)；藿胆丸组、广藿香油组、猪胆粉组在4h均有明显抑制作用(P＜0.01)。与醋酸泼尼松组比较，各实验组在各时间点均有显著差异(P＜0.01)。与藿胆丸组比较，本发明的药物组合物低剂量组在各时间点均无统计学差异(P值均＞0.05)，本发明的药物组合物中剂量组在各时间点均有显著差异(P值均＜0.01)，本发明的药物组合物高剂量组在1h与藿胆丸比较有差异(P＜0.05)，在2h、3h、4h与藿胆丸比较有显著差异(P＜0.01)，提示本发明的药物组合物组抗炎作用优于藿胆丸组。拆方研究表明，猪胆粉组、广藿香油均有一定的抗炎作用(在大鼠足趾肿胀4h，P值均＜0.01)，与本发明的药物组合物中剂量组比较，广藿香油组在1h、2h、4h与本发明的药物组合物中剂量组有差异(P＜0.01，P＜0.05，P＜0.05)，猪胆粉组在1h、2h、3h、4h均有显著差异(P值均＜0.01)，提示二药配伍应用有协同增效作用。从试验结果分析可知，对抑制角叉菜胶致大鼠足趾肿胀作用强度，本发明的药物组合物优于原方藿胆丸、广藿香油、猪胆粉，并且广藿香油、猪胆粉二药配伍应用有协同增效作用。

1.4大鼠棉球肉芽肿试验

SD大鼠80只，随机分成八组，每组10只。先称10mg的脱脂棉球制成形状大致相同的棉球，高压灭菌后烘干备用。每只大鼠腹腔注射乌拉糖0.2ml麻醉，手术将1个棉球植入大鼠腋窝部皮下。术后第二天继续给药，剂量同前，连续7天，第八天脱臼处死大鼠，取出棉球，置60℃烤箱至恒重，减去原棉球重量即为肉芽肿重量^[2]。肉芽肿重量以mg(肉芽肿)表示，比较各给药组肉芽肿与空白对照组肉芽肿重量差异，并进行t检验，结果见表5。

        表5本发明的药物组合物对大鼠棉球肉芽肿的影响( x±s)

组别	N(只)	剂量(mg生药/kg)	肉芽肿重量(mg)
				空白对照	10	-	42.5±2.3

醋酸泼尼松藿胆丸本发明的药物组合物本发明的药物组合物本发明的药物组合物广藿香油猪胆粉

10101010101010

202.0g77.51553109.3146

23.4±3.8**29.5±2.9**##32.1±3.9**##29.3±3.4**##27.8±3.0**#31.9±3.3**36.22.4**&&

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与醋酸泼尼松组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与藿胆丸组比较ψP＜0.05，ψψP＜0.01；与本发明的药物组合物中剂量比较&P＜0.05，&&P＜0.01。

表5结果表明，与空白对照组比较，醋酸泼尼松西药阳性对照组、藿胆丸中药阳性对照组、本发明的药物组合物低、中、高剂量组，本发明的药物组合物组成药味猪胆粉组、广藿香油组，均能显著减轻肉芽组织重量(P值均＜0.01)，提示各实验组药物对亚慢性炎症均有明显的抗炎作用。与醋酸泼尼松西药阳性对照组比较，藿胆丸中药阳性组、本发明的药物组合物低、中剂量组有显著性差异(P值均＜0.01)，本发明的药物组合物高剂量组有差异(P＜0.05)。与藿胆丸中药阳性组比较，本发明的药物组合物低、中、高剂量组无统计学差异(P值均＞0.05)，提示本发明的药物组合物各剂量组抗炎作用强度与藿胆丸相当。拆方研究表明，猪胆粉组、广藿香油均有较强的消炎作用(P值均＜0.01)，与本发明的药物组合物中剂量组比较，广藿香油组无统计学差异(P值均＞0.05)，猪胆粉组有显著差异(P＜0.01)。从试验结果分析可知，对棉球肉芽组织的抑制作用强度，本发明的药物组合物作用强度优于猪胆粉，与藿胆丸相当。

2、抗过敏试验

2.1抗致敏豚鼠回肠肌过敏性收缩反应

取豚鼠10只，体重200～250g。每只豚鼠两后腿各肌注5％卵蛋白K-H液0.4ml，同时腹腔注射该溶液1.0ml以致敏，3周后将豚鼠放血处死，剖腹取回肠，剪成1cm左右肠段，置入盛有K-H液10ml的浴槽中，一端固定于浴槽底部的固定钩上，另一端与拉力换能器相连，记录收缩张力(g)。前负荷1～1.5g，恒温37±1℃，平衡15min后开始实验。实验分为模型组(即生理盐水组)、盐酸赛庚啶组，藿胆丸组，本发明的药物组合物低、中、高剂量组，猪胆粉组，广藿香油组，各组给药0.1ml，给药后所达到药物浓度为表中所示。给药后，待药物与标本接触5min后，向浴槽内加入5mg/ml卵蛋白K-H液0.1ml进行抗原攻击，比较各组回肠收缩张力的差别，用t检验比较各组差异有无显著性。结果见表6。

   表6对卵蛋白致致敏豚鼠离体回肠肌过敏性收缩反应抑制程度

组别	剂量(mg生药/ml)	收缩力差值
			模型对照盐酸赛庚啶藿胆丸本发明的药物组合物低剂量本发明的药物组合物中剂量本发明的药物组合物高剂量猪胆粉广藿香油	-0.00450.050.0750.150.2250.0750.025	1.17±0.410.15±0.10**0.35±0.24**#0.31±0.17**#0.17±0.09**0.15±0.12**0.37±0.27**&0.32±0.20**&

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与盐酸赛庚啶组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与藿胆丸组比较ψP＜0.05，ψψP＜0.01；与本发明的药物组合物中剂量比较&P＜0.05，&&P＜0.01。

表6结果表明，模型对照组用抗原攻击后可产生明显收缩反应，与模型对照组比较，盐酸赛庚啶西药阳性对照组、藿胆丸中药阳性对照组、本发明的药物组合物低、中、高剂量组，本发明的药物组合物组成药味猪胆粉组、广藿香油组，均显著抑制其收缩反应(P值均＜0.01)，提示各实验组药物均有明显的抗过敏作用。与盐酸赛庚啶西药阳性对照组比较，藿胆丸中药阳性组、本发明的药物组合物低剂量组有差异(P值均＜0.05)，本发明的药物组合物中、高剂量组比较无差异(P＞0.05)，提示本发明的药物组合物中、高剂量组抗过敏作用与盐酸赛庚啶组相当。与藿胆丸中药阳性组比较，本发明的药物组合物低剂量组无显著性差异(P＞0.05)，本发明的药物组合物中、高剂量组有差异(P值均＜0.05)，提示本发明的药物组合物中、高剂量组抗过敏作用强度优于藿胆丸组。拆方研究表明，猪胆粉组、广藿香油均有较强的抗过敏作用(P值均＜0.01)，与本发明的药物组合物中剂量组比较，广藿香油组、猪胆粉组均有差异(P值均＜0.05)，提示方中二药配伍使用有协同增效作用。从试验结果分析可知，本发明的药物组合物抗过敏作用强度与盐酸赛庚啶相当，并优于原方藿胆丸和广藿香油、猪胆粉。

2.2大鼠被动皮肤过敏试验

首先制备抗血清，取雄性大鼠，体重150～200g，每侧大腿肌肉注射1％卵清蛋白生理盐水0.5ml，皮下注射4％氢氧化铝凝胶0.1ml，14d后断颈取血，离心取血清，置-4℃冰箱备用。以同种雄性大鼠80只，随机分成空白对照组，盐酸赛庚啶组，藿胆丸组，本发明的药物组合物高、中、低剂量组，广藿香油组，猪胆粉组。连续灌胃给药14d。第15天背部剃毛，用1∶10稀释的抗血清作背部皮内注射。每侧两点，每点注射0.1ml。48h后，每只大鼠尾静脉注射1％伊文思蓝、1％卵清蛋白生理盐水的混合液1.0ml。30min后处死大鼠，剪下带有蓝斑的皮肤。置入盛有5ml丙酮生理盐水(7∶3)试管内浸泡48h，离心后上清液用分光光度计于610nm处测定光密度(OD)值，结果见表7。

                        表7对大鼠被动皮肤过敏试验的影响

组别	N(只)	剂量(mg生药/kg)	OD值
				空白对照盐酸赛庚啶藿胆丸本发明的药物组合物本发明的药物组合物本发明的药物组合物广藿香油猪胆粉	1010101010101010	-2.02.0g1553106209.3146	0.204±0.0850.014±0.006**0.030±0.012**##0.030±0.006**##0.017±0.010**ψ0.010±0.002**ψψ0.026±0.004**&0.032±0.008**&&

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与盐酸赛庚啶组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与藿胆丸组比较ψP＜0.05，ψψP＜0.01；与本发明的药物组合物中剂量比较&P＜0.05，&&P＜0.01。

表7结果表明，与空白对照组比较，盐酸赛庚啶西药阳性对照组、藿胆丸中药阳性对照组、本发明的药物组合物低、中、高剂量组，本发明的药物组合物组成药味猪胆粉组、广藿香油组，均能显著抑制大鼠被动皮肤过敏反应(P值均＜0.01)，提示各实验组药物均有明显的抗过敏作用。与盐酸赛庚啶西药阳性对照组比较，藿胆丸中药阳性组、本发明的药物组合物低剂量组有显著性差异(P值均＜0.01)，本发明的药物组合物中、高剂量组无统计学差异(P值均＞0.05)，提示本发明的药物组合物中、高剂量组抗过敏作用与盐酸赛庚啶组相当。与藿胆丸中药阳性组比较，本发明的药物组合物低剂量组无统计学差异(P＞0.05)，本发明的药物组合物中、高剂量组有差异((P＜0.05，P＜0.01)，提示本发明的药物组合物中、高剂量组抗过敏作用强度优于藿胆丸组。拆方研究表明，猪胆粉组、广藿香油均有较强的抗过敏作用(P值均＜0.01)，与本发明的药物组合物中剂量组比较，广藿香油组有差异(P＜0.05)，猪胆粉组有显著差异(P＜0.01)，提示二药配伍应用有协同增效作用。从试验结果分析可知，本发明的药物组合物对大鼠被动皮肤过敏的抑制作用强度，与盐酸赛庚啶相当，并优于原方藿胆丸以及广藿香油、猪胆粉。

2.3对2，4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响

小鼠80只随机分8组，用5％的2，4-二硝基氯苯乙醇液涂布于小鼠腹部皮肤(去毛)致敏，致敏前一天灌胃给药，给药剂量见表12，每天一次，连续9d。致敏后第7天用1％的2，4-二硝基氯苯涂右耳，24h后处死小鼠，剪取耳片称重，以左右两耳片重量差值作为迟发型超敏反应值，结果见表8。

   表8 2，4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的影响( x±s)

组别	N(只)	剂量(mg生药/kg)	耳片差值(mg)
				空白对照盐酸赛庚啶藿胆丸本发明的药物组合物本发明的药物组合物本发明的药物组合物广藿香油猪胆粉	1010101010101010	-4.04.0g15531062018.6292	7.04±2.602.06±1.71**2.62±1.74**2.95±1.32**2.70±1.28**2.29±1.50**2.59±1.13**2.45±1.27**

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与盐酸赛庚啶组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与藿胆丸组比较ψP＜0.05，ψψP＜0.01；与本发明的药物组合物中剂量比较&P＜0.05，&&P＜0.01。

表8结果表明，与空白对照组比较，盐酸赛庚啶阳性对照组、藿胆丸中药阳性对照组、本发明的药物组合物低、中、高剂量组，本发明的药物组合物组成药味猪胆粉、广藿香油组，均能显著抑制2，4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应(P值均＜0.01)，提示各实验组药物均有明显的抗过敏作用。与盐酸赛庚啶西药阳性对照组比较，藿胆丸中药阳性组、本发明的药物组合物高、中、低剂量组均无统计学差异(P值均＞0.05)，提示本发明的药物组合物高、中、低剂量组，藿胆丸中药阳性组对迟发性超敏反应的作用强度与盐酸赛庚啶相当。与藿胆丸中药阳性组比较，本发明的药物组合物高、中、低剂量组均无统计学差异(P＞0.05)，提示本发明的药物组合物对迟发性超敏反应的作用强度与藿胆丸相当。拆方研究表明，猪胆粉组、广藿香油均有较强的抗过敏作用(P值均＜0.01)，与本发明的药物组合物中剂量组比较，广藿香油组、猪胆粉组均无统计学差异(P＞0.05)。从试验结果分析可知，本发明的药物组合物对2，4-二硝基氯苯所致小鼠耳廓皮肤迟发型超敏反应的抑制作用强度，相当于盐酸赛庚啶和原方藿胆丸。

3、抗菌试验

3.1体外抗菌试验

(一)药物本发明的药物组合物组成药物(不包括辅料)，每g药粉含生药1.0g，实验时每g药粉加入吐温800.4ml，再用营养肉汤配制每ml含0.2g生药使用。

(二)菌种金黄色葡萄球菌(26112)、甲型溶血性链球菌(32209)、乙型溶血性链球菌(32210)、肺炎链球菌(31001)、卡他球菌、白喉棒状杆菌(38101)、大肠埃希氏菌(44113)、绿脓假单胞菌(10211)及白色念珠菌(98001)，共九种。卡他球菌由细菌检验室从咽喉标本分离，白色念珠菌为广州市药品检定所惠赠，其余菌种均由北京中国药品生物制品检定所提供。

(三)培养基营养肉汤、1％葡萄糖肉汤、1％血清肉汤、沙保氏培养基，均按常规制备。

(四)实验方法(液体试管法)

本发明的药物组合物以营养肉汤配制成每ml含生药量0.2g、0.1g、0.05g、0.025g……4.9×10^-5g共13个药物浓度，每管总量1ml，蒸气灭菌。对链球菌的试验尚需在灭菌药液中添加1％葡萄糖，对肺炎链球菌和白喉棒状杆菌则加10％灭活兔血清，对白色念珠菌的试验则用沙保氏培养液配制药液。

对照菌种对照为不含药物的培养基加试验菌；药物对照为不加试验菌的药液。

每排药液的各个浓度管及菌种对照管分别加入1∶2000的试验菌液(8小时培养物)0.1ml，37℃培养18小时观察结果。对白色念珠菌的试验则用24小时培养物，药液加菌液后28℃培养48小时观察结果。以浊度为指标肉眼观测各管有无菌生长。

判定最小抑菌浓度(MIC)MIC是指完全抑制试验菌种生长所含的最小药物浓度。结果见表9。

  表9本发明的药物组合物体外抗菌作用

菌种	MIC(g/ml)
		金黄色葡萄球菌甲型溶血性链球菌乙型溶血性链球菌肺炎链球菌卡他球菌白喉棒状杆菌大肠埃希氏菌绿脓假单胞菌白色念珠菌	6.2×10-31.2×10-21.2×10-26.2×10-32.5×10-21.2×10-25.0×10-22.0×10-15.0×10-2

注：菌种对照各菌生长正常。药物对照无菌生长。

表6结果表明，本发明的药物组合物对所试菌种(主要是引起呼吸道感染的常见病原菌和条件致病菌)均有不同程度的抗菌作用，对各菌的MIC介于6.2×10^-3g/ml～2.0×10^-1g/ml之间，对大多数试验菌种的抗菌作用强。

3.2体内抗菌试验

3.2体内抗菌试验

3.2.1对肺炎双球菌感染小鼠死亡率的保护作用

取NIH小鼠70只，雌雄各半，体重18～22g，随机分为5组，空白对照组，本发明药物组合高、中、低剂量组，阿莫仙阳性对照组。预先灌胃给药1天，上、下午各1次，于第2天取肺炎双球菌混悬液12×10⁹/ml以0.5ml/只给各组小鼠腹腔注射，于注射后第1、6小时，各灌胃给药一次，阴性对照组灌胃给予等容积的蒸馏水，连续观察7天，记录每日小鼠的死亡数，计算各组小鼠死亡率，比较各组间差异。结果见表10。

      表10本发明药物组合对肺炎双球菌感染小鼠死亡保护作用

组别	剂量(mg生药/kg)	N(只)	死亡数(只)	死亡率(％)
					空白阿莫仙本发明药物组合本发明药物组合本发明药物组合	-500155310620	1414141414	1201042	85.70**71.4##28.6**#14.3**

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与阿莫仙组比较#P＜0.05，##P＜0.01

表10结果表明，与空白对照组比较，本发明药物组合高、中剂量组、阿莫仙组均有显著性差异(P值均＜0.01)，显示本发明药物组合对肺炎链球菌致小鼠死亡有保护作用；与阿莫仙阳性组比较，本发明药物组合高剂量组无差异(P＞0.05)，本发明药物组合中剂量组有差异(P＜0.05)，本发明药物组合低剂量组有显著性差异(P＜0.01)，提示本发明药物组合高剂量组对肺炎链球菌致小鼠死亡的保护作用与阿莫仙相当。实验表明本发明药物组合有良好的量效关系，高、中剂量均能明显降低感染肺炎链球菌致小鼠死亡率，低剂量对感染肺炎链球菌小鼠死亡虽有一定的保护作用，但无统计学意义。

3.2.2对溶血性链球菌感染小鼠死亡率的保护作用

取NIH小鼠80只，雌雄各半，体重18～22g，随机分为5组。预先灌胃给药1天，上、下午各1次，于第2天取溶血性链球菌混悬液30×10⁹/ml以0.5ml/只给各组小鼠腹腔注射，于注射后第1、6小时，各灌胃给药一次，空白对照组灌胃给予等容积的蒸馏水，连续观察7天，记录每日小鼠的死亡数，计算各组小鼠死亡率，比较各组间差异。结果见表11。

         表11本发明药物组合对溶血性链球菌感染小鼠死亡保护作用

组别	剂量(mg生药/kg)	N(只)	死亡数(只)	死亡率(％)
					空白阿莫仙本发明药物组合本发明药物组合本发明药物组合	-500155310620	1616161515	150945	93.7056.0*##26.7**#33.3**#

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与阿莫仙组比较#P＜0.05，##P＜0.01

表11结果表明，与空白对照组比较，本发明药物组合高、中剂量组、阿莫仙组均有显著性差异(P＜0.01)，本发明药物组合低剂量组有差异(P＜0.05)，显示本发明药物组合对降低感染溶血性链球菌致小鼠的死亡有保护作用(死亡率小于70％)；与阿莫仙阳性对照组比较，本发明药物组合高、中剂量组有差异(P＜0.05)，本发明药物组合低剂量组有显著性差异(P＜0.01)，显示本发明药物组合对降低感染溶血性链球菌致小鼠的死亡的保护作用不如阿莫仙；实验表明本发明药物组合有良好的量效关系，各剂量组均能降低感染溶血性链球菌致小鼠的死亡率(死亡率小于70％)。

3.2.3对金黄色葡萄球菌感染小鼠死亡率的保护作用

取NIH小鼠80只，雌雄各半，体重18～22g，随机分为5组。预先灌胃给药1天，上、下午各1次，于第2天取金黄色葡萄球菌混悬液12×10⁹/ml以0.5ml/只给各组小鼠腹腔注射，于注射后第1、6小时，各灌胃给药一次，空白对照组灌胃给予等容积的蒸馏水，连续观察7天，记录每日小鼠的死亡数，计算各组小鼠死亡率，比较各组间差异。结果见表12。

         表12本发明药物组合对金黄色葡萄球菌感染小鼠死亡保护作用

组别	剂量(mg生药/kg)	N(只)	死亡数(只)	死亡率(％)
					空白阿莫仙本发明药物组合本发明药物组合本发明药物组合	-500155310620	1616161516	1201098	75.0062.5##60.0##50.0##

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与阿莫仙组比较#P＜0.05，##P＜0.01

表12结果表明，与空白对照组比较，阿莫仙组有显著性差异(P值＜0.01)，本发明药物组合高、中、低剂量均无显著性差异，但对感染金黄色葡萄球菌的小鼠死亡率有降低趋势(死亡率均小于70％)，显示本发明药物组合对降低感染金黄色葡萄球菌的小鼠死亡率有一定作用(死亡率均小于70％)。与阿莫仙阳性组比较，本发明药物组合高、中、低剂量均有显著性差异(P均值＜0.01)，显示本发明药物组合对降低感染金黄色葡萄球菌的小鼠死亡率的作用不如阿莫仙。实验表明本发明药物组合各剂量组能降低感染金黄色葡萄球菌小鼠的死亡率(死亡率均小于70％)的趋势。

4、免疫试验：小鼠网状内皮系统碳粒廓清实验

取NIH小鼠，雌雄各半，体重为18～22g，80只，随机分成八组。空白对照组，醋酸泼尼松组(免疫抑制剂)，藿胆丸组，本发明药物组合物高、中、低剂量组，广藿香油组，猪胆粉组，除空白对照组外，灌胃给药，空白对照组给予等容积蒸馏水，动物灌胃给药7天，每天一次。末次给药后0.5小时，于尾静脉注入稀释中华墨汁(用1％明胶液稀释4倍)0.1ml/10g，于注入墨汁后2min及12min，用特制吸管从小鼠眼眶后静脉丛取血20μl，立刻吹入0.1％Na₂CO₃溶液10ml中，用吸管于该液中吸入催促数次充分洗出吸管壁附着之血液，以0.025ml正常小鼠血容于10ml 0.1％Na₂CO₃溶液校零，于576nm处测定吸收度(A)值，于注入墨汁后12min处死小鼠，摘取胸腺和脾脏，计算吞噬指数K、胸腺系数、脾系数、校正廓清指数α。

$K=\frac{\log 0D1-\log 0D2}{t2-t1}$

结果见表13。

             表13本发明药物组合对小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响( x±s)

组别	N(只)	剂量(mg生药/kg)	吞噬指数K	校正廓清指数α	胸腺系数g/100g	脾系数g/100g
							空白醋酸泼尼松藿胆丸本发明药物组合本发明药物组合本发明药物组合广藿香油猪胆粉	1010101010101010	-404.0g15531062018.6292	0.0074±0.00110.0069±0.0035*0.0164±0.0047**0.0217±0.0069**0.0166±0.0065**0.0131±0.003**0.0156±0.0041**0.0179±0.0082**	26.46±4.4461.73±22.34**33.45±3.72**33.35±8.91*30.85±6.2430.79±5.1530.39±10.7529.49±5.34	0.32±0.110.11±0.06**0.35±0.050.46±0.07**ψψ0.39±0.220.39±0.080.48±0.18*0.43±0.13	0.44±0.050.19±0.04**0.41±0.090.37±0.100.49±0.110.38±0.070.40±0.040.46±0.17

注：与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与藿胆丸组比较ψP＜0.05，ψψP＜0.01；与本发明药物组合中剂量比较&P＜0.05，&&P＜0.01。

表12结果表明，与空白对照组比较，醋酸泼尼松组(免疫抑制对照组)的吞噬指数K、校正廓清指数α、胸腺系数、脾系数均有统计学差异(吞噬指数P＜0.05，其余P值均＜0.01)，提示醋酸泼尼松有较强的抑制免疫作用。与空白对照组比较，其他各试验组的吞噬指数K均有显著性差异(P值均＜0.01)，藿胆丸组、本发明药物组合低剂量组的校正廓清指数α有差异(P＜0.01，P＜0.05)，本发明药物组合低剂量组、广藿香油组的胸腺系数有差异(P＜0.01，P＜0.05)，提示本发明药物组合各剂量组、藿胆丸、本发明药物组合组成药物均有增强免疫作用。与藿胆丸阳性对照组比较，本发明药物组合低剂量组的胸腺系数有显著差异(P＜0.01)，其他各试验组均无统计学差异(P值均＞0.05)。与本发明药物组合中剂量组比较，本发明药物组合组成药物猪胆粉、广藿香油均无统计学差异(P值均＞0.05)。

实验例2：本发明的药物组合物的毒理研究

1.急性毒性实验

应用小鼠进行急性毒性实验表明：小鼠灌胃给予最高浓度的本发明的药物组合物，用药16.275g生药/kg(相当于临床成年人用量的1050倍)，连续观察七天。结果表明各组动物全身反应均无异常，体重增长、摄食、饮水、活动均正常，无一动物死亡，说明本发明的药物组合物毒性极小。

2.慢性毒性实验

选用SD大鼠，给予不同浓度(0.248、0.744、1.488g生药/kg)的本发明的药物组合物，每天灌胃给药一次，连续90天，末次给药后24小时各组活杀10只动物(雌雄各半)，其余10只动物继续观察2周后活杀。试验期间观察动物的外观、一般行为、体重变化，给药后90天和停药2周进行血液学(RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、HB、PLT、CT、WBC及分类、凝血时间)和血清生化(AST、ALT、ALP、Glu、BUN、Crea、TP、T.BIL、ALB、GLOB、A/G、CHOL、Na、K、Cl)、尿液生化、脏器系数、病理组织学等指标检查。试验结果表明：各组动物一般状态良好，外观体征、行为活动、体重增长均无异常变化；三个剂量组及对照组血液学检查、血液生化学、尿液生化检查均在正常范围，组间无显著差异；各组主要脏器组织未见与药物相关的病理学变化。上述指标停药2周后也未见改变。本试验用药剂量分别为临床用药剂量的96、48、16倍，根据试验结果表明：本发明的药物组合物低、中、高三个剂量(0.248、0.744、1.488g生药/kg)连续90天给药对大鼠无明显影响，恢复期观察也未见延迟性毒性反应，提示本品临床应用的剂量安全性较高。

具体实施方式

实施例1：本发明的药物组合物的硬胶囊剂制备：

取广藿香油14g，猪胆粉219g，加入淀粉，制成颗粒，包装制成胶囊。

实施例2：本发明的药物组合物的片剂制备：

取广藿香油10g，猪胆粉100g，加入淀粉，压制成片。

实施例3：本发明的药物组合物的软胶囊剂制备：

取广藿香油30g，猪胆粉120g，加入植物油，制成软胶囊。

实施例4：本发明的药物组合物的滴丸剂制备：

取广藿香油30g，猪胆粉300g，加入聚乙二醇，制成滴丸。

实施例5：本发明的药物组合物的丸剂制备：

取广藿香油14g，猪胆粉219g，加入淀粉炼蜜。泛丸，制成丸剂。

实施例6：本发明的药物组合物的硬胶囊剂制备：

取广藿香油14g，猪胆粉219g，加入淀粉，干压制成颗粒，填充1#胶囊，分装，即得。

实施例7：本发明的药物组合物的硬胶囊剂制备：

取广藿香油30g，猪胆粉230g，加入淀粉，制成颗粒，包装制成胶囊。

实施例8：本发明的药物组合物的硬胶囊剂制备：

取广藿香2770g，猪胆粉219g，将广藿香采用水蒸汽蒸馏制得广藿香油，与猪胆粉混匀，制成颗粒，包装制成胶囊。

实施例9：本发明的药物组合物的片剂制备：

取广藿香2770g，猪胆粉219g，将广藿香采用SFE-CO2提取制得广藿香油，与猪胆粉混匀，制成颗粒，压制成片剂。

Claims (6)

1、一种用于治疗慢性鼻炎的药物组合物，其特征在于：它由以下重量份的原料药组成：广藿香油10～30份，猪胆粉100～300份。

2、根据权利要求1所述的用于治疗慢性鼻炎的药物组合物，其特征在于：它由以下重量份的原料药组成：广藿香油10～20份，猪胆粉150～250份。

3、根据权利要求1所述的用于治疗慢性鼻炎的药物组合物，其特征在于：它由以下重量份的原料药组成：广藿香油14份，猪胆粉219份。

4、根据权利要求1、2或3所述的用于治疗慢性鼻炎的药物组合物，其特征在于：它可加入辅料或赋形剂制成临床可接受的片剂、胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、滴丸剂及其他口服剂型。

5、根据权利要求4所述的用于治疗慢性鼻炎的药物组合物，其特征在于：所述的广藿香油，可以是药典标准的广藿香油，或者是由广藿香采用直接水蒸汽蒸馏或采用SFE-CO2提取法制得的广藿香油。

6、一种制备权利要求1所述的用于治疗慢性鼻炎药物组合物的方法，其特征在于：取以上二味，混合，加辅料适量，混匀，制成临床上可接受的片剂、胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、滴丸剂及其他口服剂型。