CN1802172A - 用于自身免疫性病症的治疗组合物 - Google Patents

用于自身免疫性病症的治疗组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN1802172A
CN1802172A CNA2004800156512A CN200480015651A CN1802172A CN 1802172 A CN1802172 A CN 1802172A CN A2004800156512 A CNA2004800156512 A CN A2004800156512A CN 200480015651 A CN200480015651 A CN 200480015651A CN 1802172 A CN1802172 A CN 1802172A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compositions
treatment
concentration
enzyme
collagen
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CNA2004800156512A
Other languages
English (en)
Inventor
S·麦克尤恩
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Epidyme Ltd
Original Assignee
Epidyme Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Epidyme Ltd filed Critical Epidyme Ltd
Publication of CN1802172A publication Critical patent/CN1802172A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0008—Antigens related to auto-immune diseases; Preparations to induce self-tolerance
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

描述了一种用于治疗、改善或预防自身免疫性病症的治疗组合物。该组合物包含适用于治疗病症的酶和免疫原。该组合物可以常规方式给药但优选通过皮内注射给药。

Description

用于自身免疫性病症的治疗组合物
本发明涉及一种治疗组合物。更详细地讲，本发明涉及一种用于治疗、改善或预防自身免疫性病症的治疗组合物。
自身免疫性以某种程度存在于每个人且通常是无害的。然而，自身免疫性可引起宽范围的人类疾病，总称为自身免疫性疾病、障碍或病症。当个体中存在误导的免疫反应，其中免疫系统攻击人体本身而不是异物、外来生物体或其它外来化合物或部分时，有从良性自身免疫到致病性自身免疫的发展，这时会发生自身免疫性病症。这个发展由遗传影响和由环境触发器来决定。
免疫反应几乎总是以炎症为特征，这表明潜在的修复过程。然而，在自身免疫性病症或疾病的情况下，炎症可以是引起组织损伤的慢性炎症。例如，在类风湿性关节炎中慢性炎症引起对关节和对软骨的特征性损伤。这些疾病准确的起因和病理生理学过程并没有完全知道。
当前对自身免疫性病症的治疗通常关注疼痛的处理、给予抗炎药物、替代损失的物质(例如，糖尿病中胰岛素的供应)或给予一种或多种免疫抑制剂。这些治疗通常是全身性的而不是局部的，且像这样的治疗可在身体其他部位引起不良反应。
当这些方法可暂时减轻病症或减少它们的发展时，他们通常的作用为直接抵抗实际的物理状态或效果而不是消除、减少或改变病症的根本原因或病原学。例如，已知许多自身免疫反应涉及T-细胞介导的反应，因此提供对作用于该反应的自身免疫性病症的治疗是有益的。
自身免疫由自身抗体(直接抗身体的抗体)和与宿主抗原有反应的T-细胞的存在来证明。自身免疫性病症可以是全身性的，例如全身性红斑狼疮，或是器官特异性的，例如甲状腺炎。自身免疫性病症的其他实例包括斯耶格伦(Sjgren)综合征、桥本(Hashimoto)甲状腺炎、重症肌无力、类风湿性关节炎、青少年(I型)糖尿病、多肌炎、硬皮病、阿狄森(Addison)病、白斑、恶性贫血、肾小球肾炎和肺纤维化。
本发明的目的是提供一种治疗组合物，其通过作用于病症的根本原因或各种原因介导对自身免疫性病症的效果。然而，本发明还可有对病症物理状态或效果的作用。
相应地，本发明提供了一种用于自身免疫性病症的治疗组合物，该组合物包含一定剂量的酶和免疫原，该剂量提供有治疗需要的个体有益效果。
最好是本发明的组合物介导作用于或影响自身免疫性病症根本原因的反应。例如，其可用于下调T-细胞介导的反应。不希望受理论的束缚，本发明人相信本发明的免疫原通过经由朗氏细胞或树突细胞或由胸腺介导的作用方式间接地减少T-细胞的活性，该作用重新引导对抗原敏感的淋巴细胞趋向调节功能(如IL-10的生成)或重新引导细胞活性离开免疫原的靶位。
本文使用的术语“免疫原”将定义任何能诱导免疫反应的物质。无意用这个术语限制免疫原的任何性质例如分子量。
在以下描述中，将特别结合类风湿性关节炎的治疗来描述本发明。然而，发现本发明在其他疾病的治疗中通过选择合适的免疫原有同等的效用。例如，多发性硬化症可以通过使用髓磷脂碱性蛋白作为免疫原来治疗，甲状腺炎或Hashimoto氏病可以使用甲状腺蛋白作为免疫原来治疗，和糖尿病可以使用胰岛素或β-细胞蛋白作为免疫原来治疗。此外，可以使用免疫原的组合或混合物，尤其是在涉及或与一种或多种免疫原相关的病症中。
优选在组合物中使用的酶为肝酶或粘多糖酶。更优选酶为葡糖醛酸糖苷酶，且最优选为β-葡糖醛酸糖苷酶。理想地是，β-葡糖醛酸糖苷酶为β-D-葡糖醛酸糖苷葡糖醛酸糖苷水解酶(glucuronosideglucuronosohydrolase)(注册号EC 3.2.1.31)。发现酶的来源对组合物的活性没有产生差异，条件是该酶不含防腐剂或山梨醇。因此，有必要纯化酶以使它能在本发明的组合物中使用。可以使用任何纯化方法，但发现使用凝胶过滤层析或切向流过滤是方便的。
优选酶纯化至浓度至少为20,000Fishman单位/mg，且在组合物中存在的浓度为200-10,000单位/ml，理想地为1,000-5,000单位/ml。
发现其它蛋白的污染，即使是非常低的水平都会影响酶的活性。因此优选组合物中存在稳定剂和/或活化剂。优选稳定剂和/或活化剂为惰性蛋白质部分，例如硫酸鱼精蛋白或1，10二氨基癸烷。优选稳定剂和/或活化剂存在的浓度最高达20mg/l。当稳定剂和/或活化剂为硫酸鱼精蛋白时，优选存在的浓度为1-10mg/l，更优选为3-9mg/l且理想地为约6mg/L(等于6μg/ml)。
组合物还可以包含羟基部分。优选所述羟基部分由含有至少两个羟基部分的多元醇提供，且更优选由含有至少两个羟基部分的糖或二元醇提供。优选的羟基部分来源为1，3环己二醇。优选1，3环己二醇存在的浓度最高达20μg/l，更优选1，3环己二醇存在的浓度为0.1-10μg/l，且理想地为1μg/l。发现1，3环己二醇的立体化学对本发明没有不利影响，因此可以使用顺式、反式或外消旋混合物。
优选组合物被缓冲至中性或酸性pH。更优选组合物被缓冲至5-6.5的pH，且理想地是组合物被缓冲至pH 5.9。
在本发明的优选实施方案中，其中组合物用于治疗类风湿性关节炎，优选的免疫原为胶原或其片段、衍生物、缀合物、类似物或其它产物，或其具有胶原-型结构或活性，无论是天然、合成或修饰来源均可。下文使用的术语“胶原”将包括如上所述的这类胶原产物。优选胶原以溶液存在。胶原可以来自任何来源，但优选胶原不含防腐剂、山梨醇或其它添加剂。因此，有必要纯化胶原使其能在本发明的组合物中使用。可以使用任何纯化方法，但发现使用凝胶过滤层析或切向流过滤是方便的。
存在于组合物中的胶原浓度可以为10-1×1015分子/ml。更优选存在于组合物中的胶原浓度可以为1×104-1×1013分子/ml。通常，存在于组合物中的胶原浓度可根据需要的剂量而变化，因此预期有三个范围胶原剂量的组合物可用，这些剂量浓度将由高到低变化。高浓度范围的组合物将以1×1010-1×1015分子/ml阶数的浓度含有胶原，且更优选含有约1×1012-1×1013分子/ml。理想地是高浓度组合物将含有2.5×1013分子/ml。对于中等浓度范围的组合物，优选胶原存在的浓度阶数为1×109-1×1013分子/ml，且更优选含有约1×1010-1×1012分子/ml。理想地是中等浓度的组合物将含有2.5×1011分子/ml。对于低浓度范围的组合物，优选胶原存在的浓度阶数为1×102-1×108分子/ml，且更优选含有约1×104-1×107分子/ml。理想地是中等浓度的组合物含有2.5×105分子/ml。
优选组合物还包含糖胺聚糖或其混合物或组合。可以使用任何糖胺聚糖但优选糖胺聚糖选自透明质酸盐(D葡萄糖醛酸N乙酰基D葡萄糖胺)、硫酸软骨素(1，3，4或6硫酸D葡萄糖醛酸N乙酰基D半乳糖胺)、硫酸皮肤素(D葡萄糖醛酸或L艾杜糖醛酸N乙酰基D半乳糖胺)、硫酸角质素(硫酸D半乳糖N乙酰基D葡萄糖胺)和硫酸乙酰肝素(D葡萄糖醛酸或L艾杜糖醛酸N乙酰基D葡萄糖胺)。最优选的糖胺聚糖为6-硫酸-软骨素。
优选糖胺聚糖以0.1-1.0mg/ml的浓度存在于组合物，最优选0.5mg/ml。理想地是糖胺聚糖不含防腐剂或糖，且为了保证这一点有必要在使用前纯化糖胺聚糖。方便的纯化方法包括凝胶过滤层析或切向流过滤。
本发明的组合物可以任何常规方式全身或局部给药，例如经口、胃肠外、皮内、局部、直肠、鼻途径，通过局部注射或通过经皮输注。目前优选组合物通过皮下注射给药，优选通过皮内注射，或以任何形式的经皮输注。不需要将组合物局部给予自身免疫性区域，尤其是在类风湿性关节炎中，但在其他病症中可优选这样做以便将禁忌症减至最少或促进在具体位置的效果。
在一个优选的实施方案中，组合物于给药前短时间内制备或甚至给药前立即制备。在该实施方案中，组合物可以两种制剂提供，一种酶制剂和一种胶原制剂，于给药前彼此引入并混合。在该实施方案中，酶溶液含有稳定化酶、羟基部分且该酶为缓冲溶液；其中所有组分按如上所述存在。胶原溶液含有胶原和糖胺聚糖，按如上所述缓冲。优选给药的组合物含有胶原溶液多于酶溶液，更优选至少两倍量的胶原溶液(按体积计)，且理想地为约4份胶原溶液对一份酶溶液(按体积计)。
相应地，本发明也提供一种用于制备本发明组合物的试剂盒，该试剂盒包含酶溶液和免疫原溶液，这两种溶液在给予有治疗需要的个体前彼此引入并混合。这种试剂盒可以多室或多管分配器例如注射器的形式存在。
本发明的组合物可以在形成和使用期间保存。例如组合物可以冷冻、干燥、冷冻干燥、低压冻干、封囊或进一步用合适选择的对组合物体内活性有很少或没有不利效应的防腐剂保存，或用任何药学中常用或已知的其它保藏技术来保存。当组合物为干燥、冷冻干燥或其他方式形成的固体时，该组合物可以形成片剂、胶囊剂、锭剂或其它固体剂型，用于口服给药或重新组成以溶液或液体形式来使用，例如用于注射。当组合物被冷冻时，可很方便地将组合物或其组分以剂量单位量冷冻，任选在注射器中，以便于个体或医学从业者使用。
可用任何药学上可接受的溶剂制备液体形式的组合物。类似地，本发明组合物可使用常用粘合剂、赋形剂、溶媒和其它标准配药添加剂。
本发明也提供了一种治疗或预防自身免疫性病症的方法，该方法包括给予有治疗需要的个体治疗有效量的组合物，该组合物包含酶和免疫原。
本发明还提供了一种治疗、改善或预防类风湿性关节炎的方法，该方法包括给予有治疗需要的个体治疗有效量的组合物，该组合物包含β-葡糖醛酸糖苷酶和胶原。
本发明也提供了治疗有效量的酶和免疫原在制备用于治疗或预防自身免疫性病症的药物中的用途。
本发明的再一方面也提供了β-葡糖醛酸糖苷酶和胶原在制备用于治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。
在最后一个实施方案中，本发明提供了一种用于治疗类风湿性关节炎的组合物，该组合物包含0.5-2.5mg/mlβ-葡糖醛酸糖苷酶、6μg/ml硫酸鱼精蛋白、1μg/m1，3环己二醇和0.5mg/ml硫酸软骨素，缓冲至pH 5.9并还包含2.5×1013、2.5×1011或2.5×105分子/ml胶原。
现在将通过实施例并结合以下附图描述本发明的实施方案，其中：
图1为显示对照组(B组)关节炎病程的图。
图2为显示A组和B组疾病病程随时间变化比较的图。
图3显示了在第29天A、B和C各个实验组的关节炎严重程度。
图4为显示B组和C组的疾病病程随时间变化比较的图。
图5显示了在第52天A、B和C各个实验组的关节炎严重程度，且表明高剂量治疗显著减少了峰关节炎评分。
实施例1
β-葡糖醛酸糖苷酶(EC 3.2.1.31)(从海产软体动物鲍属midae(Haliotis midae)(南非鲍鱼)获得)用凝胶过滤层析纯化以除去存在的任何防腐剂或山梨醇。
将纯化的β-葡糖醛酸糖苷酶加入到pH 5.9的缓冲溶液中得到最终浓度1.5mg/ml。加入1，3环己二醇(Sigma，Poole，Dorset，UK)，得到最终浓度1μg/ml。搅拌下加入硫酸鱼精蛋白BP以防止沉淀，得到最终浓度6μg/ml。
天然II型胶原单独用凝胶过滤层析纯化除去存在的任何防腐剂或山梨醇。
将纯化的胶原溶于溶液中并缓冲至pH 5.9，得到最终胶原浓度2.5×1013。向该溶液中加入硫酸软骨素得到最终浓度0.5mg/ml。
将0.01ml酶溶液加入到0.04ml胶原溶液中并混合。将0.05ml一次性大剂量浓注(bolus)组合物在小鼠关节炎模型中皮内注射。测量爪的重量和体积，与仅接受溶媒、仅接受胶原或仅接受β-葡糖醛酸糖苷酶的对照小鼠对比。
实施例2
β-葡糖醛酸糖苷酶/II型胶原在胶原诱导的DBA/1小鼠关节炎中的作用
地点
测试样品由McEwen Laboratories Ltd.Pangbourne，Berkshire，England制备。使用英国布里斯托尔大学医学科学学院，病理学和微生物学系的测试设备。
研究方案
研究方案如下：
研究开始日期   2004年2月2日
测定完成日期   2004年3月24日
研究目的：
本研究设计用于测定两个测试剂量的II型胶原与β-葡糖醛酸糖苷酶联合使用对胶原诱导的关节炎发生率及严重程度的影响。选择雄性DBA/1小鼠用于研究，并用II型胶原(小鸡)的完全弗氏佐剂溶液作为引发刺激物引发关节炎。II型胶原和β-葡糖醛酸糖苷酶作为独立的样品提供治疗。将样品于4℃保存并于注射前立即混合。在诱导后第10天以单剂量皮下注射到颈背进行治疗。从第17天到第52天每周两次通过观察关节发红和肿胀来给动物的临床关节炎记分。研究中心是盲的。
材料与方法
小鼠
6周龄的三十只雄性DBA/1小鼠从Harlan Olac获得。将动物在Bristol大学医学科学学院的动物房里供养，直至研究开始前达到12周龄。第0天所有的小鼠通过在尾部基底注射给予100μg小鸡II型胶原的完全弗氏佐剂乳化液(CII/CFA)。于第10天通过皮下注射到颈背进行治疗，然后从第17天到第52天每周两次给临床关节肿胀记分。
治疗
β-葡糖醛酸糖苷酶(E.C.3.2.1.31)(从海产软体动物鲍属midae(Haliotis midae)获得)以冻干粉提供。该粉末经过用大小排阻(凝胶过滤)层析进一步纯化(以除去冷冻干燥过程中或作为稳定剂使用的任何山梨醇和盐)，并用pH 5.9的缓冲液稀释成2mg/ml的浓度。向该溶液中加入1×10-8mg/ml的1，3-环己二醇和6×10-5mg/ml的硫酸鱼精蛋白。然后将该溶液无菌填充至管形瓶中，并于2℃至8℃保存直至使用。
II型胶原(从小鸡软骨获得)以冻干粉末提供，并按如上所述进行凝胶过滤层析来进一步纯化。然后将该粉末用含有0.5mg/ml硫酸软骨素(由鲨鱼软骨纯化得到)的pH 5.9的缓冲液稀释。使用两种代表约50ng/ml和50fg/ml浓度的稀释液，分别将它们无菌分配到管形瓶中，并于2℃至8℃保存直至使用。
由McEwen Laboratories Ltd提供治疗并标记如下：
1.酶A...............如上所述的β-葡糖醛酸糖苷酶溶液
2.CII A...............如上所述50fg/ml的胶原
3.酶Bg...............缓冲液对照
4.CII B...............缓冲液对照
5.酶C...............如上所述的β-葡糖醛酸糖苷酶溶液
6.CII C...............如上所述50ng/ml的胶原
在生命阶段结束前样品的鉴别由McEwen Laboratories记录但不向Bristol大学公开。在给每只动物注射200μl前10分钟内，将A、B和C样品在1ml的注射器中混合。将样品于4℃保存直至使用，并在从冰箱取出后直到注射点都放在冰上保存。
实验组(n＝10/组)
A组：第0天CII/CFA，第10天用混合物A治疗
B组：第0天CII/CFA，第10天用混合物B治疗
C组：第0天CII/CFA，第10天用混合物C治疗
终点
临床记分关节肿胀。从第17天到第52天每周检查动物两次。在每次检查时，根据(0＝正常；1＝整个关节轻微肿胀或个别趾炎症；2＝整个关节中等肿胀并有多于一个趾发红和/或炎症；3＝中等关节炎症且发红扩展到多个趾，有一些骨改变体征；4＝严重关节炎症且发红扩展到多个趾，有明显的骨改变体征。)对四肢的每一个都给出评分。
结果
样品解码。尸体剖检后将治疗样品的鉴别向研究中心报告。
在这个模型中对照组(B)中疾病具有预期的发生率和严重程度。在检查的第一天，疾病以非常低的水平存在，但发生率和严重程度从第17天直至存活阶段结束发生提高(图1)。这个发展与预期的该模型关节炎病程一致。对照组的整体疾病水平与在该检测设备进行的许多相似实验比较是严重的。
在低剂量治疗组中，与对照组相比疾病发生有所延迟(图2)。这表明单点(single point)T检验揭示A组和B组的关节炎严重程度有显著性差异，如在第29天测试那样(图3)。其后，A组的疾病严重程度增加。尽管与B组对比其在整个实验期间保持减少，但总体曲线表明第29天后没有显著治疗效果。
在高剂量治疗组中，从第25天到实验结束疾病低于B组(图4)。C组的疾病没有遵循该模型关节炎的正常病程。对于大多数试验感染疾病的动物比正常动物数量更低，且该组的疾病严重程度整体大大低于预期。除了两只动物以外，C组的疾病严重程度保持极低。这两只动物缺乏保护表明C组数据集的方差相对比较高。然而，在第42、46和52天对C组和B组比较表明，关节炎的严重程度显著更低(Mann-Whitney U检验)。第52天的数据(因为该日疾病记分最高)如图5显示。此外，用KruskaL Wallis后检验(post-test)法进行Annova分析表明C组的疾病水平与B组比较有总体的显著性差异(p＝0.0196)。
结论
在实验中两个治疗剂量均改变了关节炎病程。低剂量治疗中更不明显的减少(其表现为疾病发展的延迟)在实验中是显著的。高剂量治疗中观察到的疾病病程改变提示具有有效的抗关节炎作用。当在相似的实验过程中给予确定的抗关节炎药物时，C组中疾病减少的水平在可见范围内。单一治疗后观察到这个保护水平的事实是令人高度鼓舞的。当疾病发展时，低剂量治疗水平的提高可通过给予更多剂量来实现。

Claims (35)

1.一种用于治疗自身免疫性病症的治疗组合物，所述组合物包含一定剂量的酶和免疫原，该剂量提供有治疗需要的个体有益的效果。
2.权利要求1的组合物，其中所述酶为肝酶或粘多糖酶。
3.权利要求1或权利要求2的组合物，其中所述酶为β-葡糖醛酸糖苷酶。
4.权利要求3的组合物，其中所述β-葡糖醛酸糖苷酶为β-D-葡糖醛酸糖苷葡糖醛酸糖苷水解酶(注册号EC 3.2.1.31)。
5.前述权利要求中任一项的组合物，其中所述酶存在的浓度为200-10,000 Fishman单位/ml。
6.权利要求5的组合物，其中所述酶存在的浓度为1,000-5,000单位/ml。
7.权利要求5的组合物，其中所述酶存在的浓度为0.5-2.5mg/ml。
8.前述权利要求中任一项的组合物，所述组合物还包含稳定剂和/或活化剂。
9.权利要求8的组合物，其中所述稳定剂和/或活化剂为惰性蛋白质部分。
10.权利要求8或权利要求9的组合物，其中所述稳定剂和/或活化剂为硫酸鱼精蛋白或1，10二氨基癸烷。
11.权利要求8-10中任一项的组合物，其中所述稳定剂和/或活化剂存在的浓度最高达20mg/l。
12.权利要求8-10中任一项的组合物，其中所述稳定剂和/或活化剂存在的浓度为3-9mg/l。
13.前述权利要求中任一项的组合物，所述组合物还包含羟基部分。
14.权利要求13的组合物，其中所述羟基部分由糖或二元醇提供。
15.权利要求13或权利要求14的组合物，其中所述羟基部分由1，3环己二醇提供。
16.权利要求13-15中任一项的组合物，其中所述羟基部分存在的浓度最高达20μg/l。
17.前述权利要求中任一项的组合物，所述组合物被缓冲至酸性或中性pH。
18.权利要求17的组合物，所述组合物被缓冲至pH为5-6。
19.前述权利要求中任一项的组合物，所述组合物还包含胶原。
20.权利要求19的组合物，其中所述胶原存在的浓度为10-1×1015分子/ml。
21.权利要求19的组合物，其中所述胶原存在的浓度为1×104-1×1014分子/ml。
22.前述权利要求中任一项的组合物，所述组合物还包含糖胺聚糖。
23.权利要求22的组合物，其中所述糖胺聚糖选自透明质酸盐(D葡萄糖醛酸N乙酰基D葡萄糖胺)、硫酸软骨素(4或6硫酸D葡萄糖醛酸N乙酰基D半乳糖胺)、硫酸皮肤素(D葡萄糖醛酸或L艾杜糖醛酸N乙酰基D半乳糖胺)、硫酸角质素(硫酸D半乳糖N乙酰基D葡萄糖胺)和硫酸乙酰肝素(D葡萄糖醛酸或L艾杜糖醛酸N乙酰基D葡萄糖胺)。
24.权利要求22或权利要求23的组合物，其中所述糖胺聚糖为6-硫酸-软骨素。
25.权利要求22-24中任一项的组合物，其中所述糖胺聚糖存在的浓度为0.1-1.0mg/ml。
26.权利要求22-24中任一项的组合物，其中所述糖胺聚糖存在的浓度为0.5mg/ml。
27.前述权利要求中任一项的组合物，所述组合物为适用于经皮输注或皮内注射的制剂。
28.前述权利要求中任一项的组合物，所述组合物于给药前短时间内制备或甚至于给药前立即制备。
29.一种用于制备前述权利要求中任一项组合物的试剂盒，所述试剂盒包含酶溶液和免疫原溶液，这两种溶液在给予有治疗需要的个体前彼此引入并混合。
30.一种治疗或预防自身免疫性病症的方法，所述方法包括给予有治疗需要的个体治疗有效量的组合物，该组合物包含酶和免疫原。
31.一种治疗、改善或预防类风湿性关节炎的方法，所述方法包括给予有治疗需要的个体治疗有效量的组合物，该组合物包含β-葡糖醛酸糖苷酶和胶原。
32.治疗有效量的酶和免疫原在制备用于治疗或预防自身免疫性病症的药物中的用途。
33.β-葡糖醛酸糖苷酶和胶原在制备用于治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。
34.一种用于治疗类风湿性关节炎的组合物，所述组合物包含1,000-5,000 Fishman单位/ml的β-葡糖醛酸糖苷酶、6μg/mL硫酸鱼精蛋白、1μg/mL 1，3环己二醇和0.5mg/mL硫酸软骨素以及浓度选自2.5×1012、2.5×1010和2.5×104分子/ml的胶原，该组合物被缓冲至pH 5.9。
35.一种组合物，所述组合物基本上如上文中所述并结合及如实施例1所举例说明。
CNA2004800156512A 2003-04-07 2004-04-07 用于自身免疫性病症的治疗组合物 Pending CN1802172A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB0307989.4 2003-04-07
GBGB0307989.4A GB0307989D0 (en) 2003-04-07 2003-04-07 Therapeutic composition

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN1802172A true CN1802172A (zh) 2006-07-12

Family

ID=9956332

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA2004800156512A Pending CN1802172A (zh) 2003-04-07 2004-04-07 用于自身免疫性病症的治疗组合物

Country Status (11)

Country Link
US (2) US7901676B2 (zh)
EP (1) EP1610814B8 (zh)
JP (1) JP2006522086A (zh)
CN (1) CN1802172A (zh)
AT (1) ATE458495T1 (zh)
CA (1) CA2521602A1 (zh)
DE (1) DE602004025683D1 (zh)
GB (2) GB0307989D0 (zh)
HK (1) HK1087328A1 (zh)
MX (1) MXPA05010790A (zh)
WO (1) WO2004089405A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109069546A (zh) * 2016-03-11 2018-12-21 林家明 可食用燕窝提取物和提取方法

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0307989D0 (en) * 2003-04-07 2003-05-14 Mcewen Lab Ltd Therapeutic composition
CA2714399C (en) * 2007-12-12 2018-07-24 Dacy Tech Pty Ltd Compositions comprising extracts of biota orientalis and use thereof for treating cartilage degradation
US10376550B2 (en) 2007-12-12 2019-08-13 Dacy Tech Pty Ltd. Nutraceutical composition and methods of use
AU2008336268B2 (en) * 2007-12-12 2014-06-12 Dacy Tech Pty Ltd Nutraceutical composition and methods of use
ITMI20080357A1 (it) * 2008-03-04 2009-09-05 Sarm Allergeni Srl Proteina da haliotis midae e suo uso come agente immunoterapico

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2620649C3 (de) * 1976-05-11 1980-11-06 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Immunologisches Adjuvans
US5268463A (en) * 1986-11-11 1993-12-07 Jefferson Richard A Plant promoter α-glucuronidase gene construct
GB8713906D0 (en) 1987-06-15 1987-07-22 Mcewen L M Beta-glucuronidase containing compositions
US5399347A (en) 1987-06-24 1995-03-21 Autoimmune, Inc. Method of treating rheumatoid arthritis with type II collagen
DE4125400C2 (de) * 1991-07-31 2000-08-17 Edwin Klaus Verwendung von unlöslichem Kollagen zur Behandlung von degenerativen, nicht entzündlichen Gelenkprozessen
US5980898A (en) * 1996-11-14 1999-11-09 The United States Of America As Represented By The U.S. Army Medical Research & Material Command Adjuvant for transcutaneous immunization
DE19828450A1 (de) * 1998-06-26 1999-12-30 Hassan Jomaa Bisphosphonsäuren und deren Derivate enthaltende Arzneimittel zur Prophylaxe und zur Behandlung von Autoimmunkrankheiten sowie von Allergien
AR020717A1 (es) * 1998-10-07 2002-05-22 Syngenta Participations Ag Proteinas terapeuticamente activas en plantas.
US6162787A (en) * 1999-04-02 2000-12-19 Immudyne, Inc. Methods for treating arthritis using collagen type II, glucosamine chondroitin sulfate, and compositions
WO2001070663A2 (en) * 2000-03-17 2001-09-27 Corixa Corporation Novel amphipathic aldehydes and their use as adjuvants and immunoeffectors
EP1228767A1 (en) 2001-01-31 2002-08-07 S.A.R.M. S.r.l. Use of beta-Glucuronidase for the treatment of immune or allergic diseases
CN1516595A (zh) * 2001-03-19 2004-07-28 Iomai公司 用于经皮免疫的贴剂
US6902739B2 (en) * 2001-07-23 2005-06-07 Nutracea Methods for treating joint inflammation, pain, and loss of mobility
CA2469078A1 (en) * 2001-12-05 2003-06-12 Circassia Limited Immunotherapeutic methods and systems
GB0307989D0 (en) * 2003-04-07 2003-05-14 Mcewen Lab Ltd Therapeutic composition
US9549959B2 (en) * 2006-09-15 2017-01-24 I Did It, Inc. Animal chew toy containing solid food

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109069546A (zh) * 2016-03-11 2018-12-21 林家明 可食用燕窝提取物和提取方法
CN109069546B (zh) * 2016-03-11 2022-05-06 林家明 可食用燕窝提取物和提取方法

Also Published As

Publication number Publication date
US20110135624A1 (en) 2011-06-09
CA2521602A1 (en) 2004-10-21
WO2004089405A1 (en) 2004-10-21
US20040228850A1 (en) 2004-11-18
JP2006522086A (ja) 2006-09-28
ATE458495T1 (de) 2010-03-15
HK1087328A1 (en) 2006-10-13
US7901676B2 (en) 2011-03-08
MXPA05010790A (es) 2006-07-10
GB0307989D0 (en) 2003-05-14
EP1610814B1 (en) 2010-02-24
GB0407828D0 (en) 2004-05-12
GB2400556A (en) 2004-10-20
GB2400556B (en) 2005-10-19
EP1610814A1 (en) 2006-01-04
EP1610814B8 (en) 2010-06-02
DE602004025683D1 (de) 2010-04-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1668332A (zh) 包含苯酚的含高浓度人生长激素的液体制剂
CN1604788A (zh) 高浓度蛋白制剂及其制备方法
US20110135624A1 (en) Therapeutic composition for autoimmune conditions
CN1903191A (zh) 青蒿琥酯在制备抗肝纤维化制剂中的应用
WO2024066288A1 (zh) 一种疫苗佐剂、疫苗组合物及其应用
CN105535964A (zh) 一种具有免疫调节作用的双链聚核苷酸—ε-聚赖氨酸—硫酸聚糖复合物及其制备使用方法
US6726913B1 (en) Treatment of dermal tumors, warts, and viral infections of the respiratory tract in humans using heat-killed P. acnes
CN1686165A (zh) 药用纳米碳管组合物、制备方法及其应用
US10071137B2 (en) Method for decreasing mortality associated with chronic liver disease by use of long-acting human recombinant soluble tumor necrosis factor α receptor
CN1826133A (zh) 治疗经化疗的癌症患者的方法
CN101229183B (zh) 一种核糖核酸降解片断复合物及其应用
RU2115433C1 (ru) Вакцина сибиреязвенная комбинированная
CN1939328A (zh) 葛根素注射用制剂
CN1686179A (zh) 垂体前叶肾上腺皮质提取物纳米脂质体组合药物及其制备方法和用途
RU99124561A (ru) Способ профилактики и лечения остеоартроза, средство для его осуществления и способ получения средства для лечения остеоартроза
RU2401112C2 (ru) Фармацевтическая композиция для лечения аутоиммунных заболеваний, связанных с повышенным образованием антител к нуклеиновым кислотам
CN104688677A (zh) 一种稳定的甘精胰岛素注射液及其制备方法
CN1820761A (zh) 可用于静脉途径给药的硫酸软骨素及其制备方法
BRPI0900639A2 (pt) composição farmacêutica e uso desta para tratamento e/ou prevenção de doenças do trato respiratório
CN116036262A (zh) 一种人参酸性多糖疫苗佐剂、疫苗组合物及其应用
WO2022056437A1 (en) Compositions and methods of use for infusible extracellular matrix
CN1254236C (zh) 一种新的西维来司钠冻干制剂
CN113975296A (zh) 动物脾脏提取物在制备治疗阿尔兹海默症的药物中的应用
RU2321393C1 (ru) Способ лечения телят, больных неспецифической катаральной бронхопневмонией
JPH04211611A (ja) 腸管外投与しうる、貯蔵安定な、免疫刺激性製剤及びこれを製造する方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C12 Rejection of a patent application after its publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Open date: 20060712