CN1765364A - 盐酸洛拉曲克的脂质体制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种盐酸洛拉曲克的脂质体组合物，其含有10－20重量份的盐酸洛拉曲克，20－40重量份的大豆卵磷脂，2－5重量份的二棕榈酰甘油磷脂，和5－20重量份的胆固醇。盐酸洛拉曲克脂质体延长了药物在体内保持的时间，使药物在肝脏和肿瘤组织中的浓度增大，从而提高了治疗指数。

Description

盐酸洛拉曲克的脂质体制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及盐酸洛拉曲克的脂质体制剂及其制备方法。

背景技术

洛拉曲克是一种胸苷酸合成酶(Thymidylate Synthase，TS)抑制剂。其化学名为2-氨基-6-甲基-5-(4-吡啶巯基)-4(1H)-喹唑啉酮。临床应用的洛拉曲克为其二盐酸盐化合物。洛拉曲克最早由美国Agouron公司基于TS的晶体结构，运用计算机辅助药物设计技术而设计和开发出来的一种全新结构的抗肿瘤药物。其主要用于治疗肝癌、结肠直肠癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌和头颈部肿瘤。其中用于肝癌治疗已处于III期研究阶段。

盐酸洛拉曲克的可以通过静脉注射和口服的方式给药。在临床试验中出现的主要不良反应是输注部位肤色苍白，有水肿发生，出现化疗药物常见的恶心、呕吐等消化道症状，在极限剂量时(病例II级毒性限制剂量)可能发生中性粒细胞减少、血小板减少、骨髓抑制等造血系统损害。另外，粘膜炎、皮肤潮红、丘疹也较常见。与其它胸苷酸合成酶抑制剂不同的是，盐酸洛拉曲克引起的不良反应恢复快。

但是，对于治疗不能切除或已转移肝癌患者的用药方案为每21日连续5日24小时静脉输注洛拉曲克二盐酸盐1000mg/m²/日)。该用药方案给盐酸洛拉曲克的临床应用带来诸多不便。

如果能将其制成脂质体制剂，既可以解决连续静脉注射带来的麻烦，还能够因脂质体的靶向作用提高其治疗指数。

脂质体是将磷脂分散在水中自然形成一种具有类似生物膜结构的双分子层小囊。其可分为多室脂质体和单室脂质体。单室脂质体又分为小单室脂质体和大单室脂质体。目前用作药物载体的脂质体多为大单室脂质体，粒径一般位于100-1000纳米之间。将脂质体用于药物载体的主要作用机理是将药物粉末或溶液包裹在脂质体双层脂质膜所封闭的水相中或嵌入脂质体双层脂质膜中，这种微粒具有类细胞结构，进入人体内主要被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，延长药物在血管中的浓度，从而捉高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。

发明内容

本发明的目的是将盐酸洛拉曲克制成脂质体制剂，以提高其对肿瘤的治疗效果，特别是肝癌的治疗效果。

本发明提供了一种盐酸洛拉曲克的脂质体组合物，其含有10-20重量份的盐酸洛拉曲克，20-40重量份的大豆卵磷脂，2-5重量份的二棕榈酰甘油磷脂，和5-20重量份的胆固醇。

在本发明的一个优选实施方案中，本发明的盐酸洛拉曲克的脂质体组合物含有10-20重量份的盐酸洛拉曲克，20-40重量份的大豆卵磷脂，2-5重量份的二棕榈酰甘油磷脂，5-20重量份的胆固醇，0.02-0.045重量份的维生素E，30-100重量份的柠檬酸，30-100重量份的柠檬酸钠，40-180重量份的无水碳酸钠，和300-1000重量份的甘露醇。

在本发明的一个实施方案中，其中所述脂质体为冻干的形式。

本发明还提供了盐酸洛拉曲克脂质体组合物的制备方法，包括以下步骤：

1)将磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿或氯仿-甲醇混合溶剂中，减压除去有机溶剂，形成脂质薄膜；

2)将脂质薄膜在柠檬酸缓冲溶液中水化，得到空白脂质体悬浮液；

3)用高压均质器将脂质体的粒径控制在50-300nm之间，调节PH值至7.1-7.8；

4)将盐酸洛拉曲克溶于注射用水，加入甘露醇，与脂质体混悬液混合，在50-60℃下振摇；

5)采用脂质体分散液洗涤盐酸洛拉曲克的脂质体，利用渗析过滤法使脂质体外溶液置换为pH5-7的脂质体分散液，得盐酸洛拉曲克脂质体混悬液；

6)用微孔膜过滤除菌；

7)任选地将脂质体溶液冻干。

本发明还提供了一种胶囊制剂，包含盐酸洛拉曲克脂质体组合物。

本发明还提供了一种胶囊制剂，包含10-20重量份的盐酸洛拉曲克，20-80重量份的淀粉，1-5重量份的羧甲基纤维素，和硬脂酸镁。

本发明还提供了一种胶囊制剂，包含盐酸洛拉曲克脂质体组合物。

本发明还提供了一种冻干粉针制剂，包含1重量份的盐酸洛拉曲克和0.2-2重量份的甘露醇。

本发明的冻干粉针从大量的填充和冻干保护剂中优选出甘露醇作为该制剂的填充和冻干保护剂，获得了外形和溶解性均满意的制品。

本发明的制剂还含有辅料、填充和冻干保护剂等。辅料选自稀释剂如淀粉、糊精等，粘合剂如羧甲基纤维素、润滑剂如硬脂酸镁和滑石粉；填充和冻干保护剂如海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麦芽糖等。

在本发明的制剂中，胶囊中主药和辅料的用量范围为盐酸洛拉曲克：辅料1∶2～8(重量比)；冻干粉针中盐酸洛拉曲克：辅料的比例为1∶0.02～0.2。

按照本发明的一个优选实施方案，脂质体冻干粉配方为

盐酸洛拉曲克              10g-20g

大豆卵磷脂                20-40g

二棕榈酰甘油磷脂(DPPG)    2-5g

胆固醇                    5-20g

维生素E                   20-45mg

柠檬酸                    30-100g

柠檬酸钠                  30-100g

无水碳酸钠                40-180g

甘露醇                    300-1000g

注射用水                  1500-3000ml

优选地，盐酸洛拉曲克的脂质体制剂的制备方法包含下列步骤：

1)根据配方组成选用磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿或氯仿—甲醇混合溶剂中，在旋转蒸发仪上减压除去有机溶剂，形成脂质薄膜。

2)按照处方配制0.3M的柠檬酸缓冲溶液(PH为4.0)，用该溶液来水化脂质薄膜，得空白脂质体悬浮液。

3)水化完全后，用高压均质器制备脂质体至所需粒径和均匀度，控制在50-300nm。加入碳酸钠溶液，调节水化后的脂质体悬浮液的PH值至7.1-7.8。

4)将盐酸洛拉曲克溶于注射用水，加热到50℃后加入配方量的甘露醇。完全溶解后与脂质体混悬液混合，50-60℃下振摇、搅拌、保温10min.。

5)采用脂质体分散液洗涤盐酸洛拉曲克的脂质体，利用渗析过滤法使脂质体外溶液置换为pH5-pH7的脂质体分散液，得盐酸洛拉曲克脂质体混悬液。

6)用注射用水定容，将盐酸洛拉曲克脂质体悬浮液用微孔膜过滤除菌后分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。

本发明的脂质体制剂因其靶向和缓释作用，既可以解决连续静脉注射带来的麻烦，还能够提高其治疗指数。

具体实施方式

实施例1

胶囊配方一(每粒含盐酸洛拉曲克50mg)

盐酸洛拉曲克     10g

淀粉             40g

羧甲基纤维素     2.5g

硬脂酸镁         250mg

制备方法

将盐酸洛拉曲克10g，加如淀粉40g，分别过120目筛，混合均匀。加8％的淀粉浆将混合粉剂制成软材，过20目尼龙筛，制粒，60℃以下干燥。加2.5g羧甲基纤维素和250mg的硬脂酸镁，过20目筛整粒均匀，装胶囊。每粒重量250mg。

实施例2

胶囊配方二(每粒含盐酸洛拉曲克200mg)

盐酸洛拉曲克     20g

淀粉             20g

羧甲基纤维素     1g

硬脂酸镁         100mg

制备方法

将盐酸洛拉曲克20g，加如淀粉20g，分别过120目筛，混合均匀。加8％的淀粉浆将混合粉剂制成软材，过20目尼龙筛，制粒，60℃以下干燥。加1g羧甲基纤维素和100mg的硬脂酸镁，过20目筛整粒均匀，装胶囊。每粒重量400mg。

实施例3

冻干粉配方一

盐酸洛拉曲克     10g

甘露醇           0.5g

注射用水         200ml

制备方法

将盐酸洛拉曲克10g与0.5g甘露醇，加入到置有120ml注射用水的烧杯内搅拌溶解，加入0.1％活性炭脱色处理后补加注射用水定容后用0.22μm微孔滤膜正压除菌，分装冷冻干燥。

实施例4

冻干粉配方二

盐酸洛拉曲克     10g

甘露醇           1g

注射用水         200ml

制备方法

将盐酸洛拉曲克10g与1g甘露醇，加入到置有120ml注射用水的烧杯内搅拌溶解，加入0.1％活性炭脱色处理后补加注射用水定容后用0.22μm微孔滤膜正压除菌，分装冷冻干燥。

实施例5

冻干粉配方三

盐酸洛拉曲克            10g

甘露醇                  1.5g

注射用水                200ml

制备方法

将盐酸洛拉曲克10g与1.5g甘露醇，加入到置有120ml注射用水的烧杯内搅拌溶解，加入0.1％活性炭脱色处理后补加注射用水定容后用0.22μm微孔滤膜正压除菌，分装冷冻干燥。

实施例6

脂质体冻干粉配方一

盐酸洛拉曲克            10g

大豆卵磷脂              30g

二棕榈酰甘油磷脂(DPPG)  3g

胆固醇                  10g

维生素E                 33mg

柠檬酸                  75g

柠檬酸钠                61.5g

无水碳酸钠              45g

甘露醇                  400g

注射用水                2000ml

制备方法

1.称取配方中的磷脂、胆固醇和维生素E溶于1000ml的氯仿中，在旋转蒸发仪上减压除去氯仿，形成脂质薄膜。

2.配制0.3mol/L的柠檬酸缓冲溶液(PH为4.0)，并用该溶液来水化脂质薄膜，得空白脂质体悬浮液。

3.水化完全后，用高压均质器制备脂质体至所需粒径和均匀度，使脂质体粒径为100±10mn。加入碳酸钠溶液，调节水化后的脂质体悬浮液的PH值至7.5。

4.将盐酸洛拉曲克溶于注射用水，加热到50℃后加入20％甘露醇。完全溶解后与脂质体混悬液混合，50-60℃下振摇、搅拌、保温15min。

5.采用20％的甘露醇作为脂质体分散液来洗涤盐酸洛拉曲克的脂质体，利用渗析过滤法使脂质体外溶液置换为pH6-pH7的脂质体分散液，得盐酸洛拉曲克脂质体混悬液。

6.将盐酸洛拉曲克脂质体悬浮液用微孔膜过滤除菌后，用注射用水定容，使盐酸洛拉曲克的浓度为6mg/ml，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。

实施例7

脂质体冻干粉配方二

盐酸洛拉曲克            10g

大豆卵磷脂              30g

二棕榈酰甘油磷脂(DPPG)  3g

胆固醇                  10g

维生素E                 33mg

柠檬酸                  75g

柠檬酸钠                61.5g

无水碳酸钠              45g

甘露醇                  400g

注射用水                2000rnl

制备方法

1.称取配方中的磷脂、胆固醇和维生素E溶于1000ml的氯仿-甲醇(体积比2∶1)中，在旋转蒸发仪上减压除去氯仿，形成脂质薄膜。

2.配制0.3mol/L的柠檬酸缓冲溶液(PH为4.0)，并用该溶液来水化脂质薄膜，得空白脂质体悬浮液。

3.水化完全后，用高压均质器制备脂质体至所需粒径和均匀度，使脂质体粒径为150±10nm。加入碳酸钠溶液，调节水化后的脂质体悬浮液的PH值至7.5。

4.将盐酸洛拉曲克溶于注射用水，加热到50℃后加15％甘露醇。完全溶解后与脂质体混悬液混合，50-60℃下振摇、搅拌、保温15min。

5.采用15％的甘露醇作为脂质体分散液来洗涤盐酸洛拉曲克的脂质体，利用渗析过滤法使脂质体外溶液置换为pH6-pH7的脂质体分散液，得盐酸洛拉曲克脂质体混悬液。

6.将盐酸洛拉曲克脂质体悬浮液用微孔膜过滤除菌后，用注射用水定容，使盐酸洛拉曲克的浓度为6mg/ml，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。

实施例8

脂质体冻干粉配方三

盐酸洛拉曲克            10g

氢化大豆卵磷脂          30g

二硬脂酰甘油磷脂(DSPG)  6g

胆固醇                  10g

维生素E                 20mg

柠檬酸                  75g

柠檬酸钠                61.5g

无水碳酸钠              45g

甘露醇                  400g

注射用水                2000ml

制备方法

1.称取配方中的磷脂、胆固醇和维生素E溶于1000ml的氯仿中，在旋转蒸发仪上减压除去氯仿，形成脂质薄膜。

2.配制0.3mol/L的柠檬酸缓冲溶液(PH为4.0)，并用该溶液来水化脂质薄膜，得空白脂质体悬浮液。

3.水化完全后，用高压均质器制备脂质体至所需粒径和均匀度，使脂质体粒径为110±20nm。加入碳酸钠溶液，调节水化后的脂质体悬浮液的PH值至7.5。

4.将盐酸洛拉曲克溶于注射用水，加热到50℃后加入15％甘露醇。完全溶解后与脂质体混悬液混合，50-60℃下振摇、搅拌、保温15min。

5.采用15％的甘露醇作为脂质体分散液来洗涤盐酸洛拉曲克的脂质体，利用渗析过滤法使脂质体外溶液置换为pH6-pH7的脂质体分散液，得盐酸洛拉曲克脂质体混悬液。

6.将盐酸洛拉曲克脂质体悬浮液用微孔膜过滤除菌后，用注射用水定容，使盐酸洛拉曲克的浓度为6mg/ml，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。

效果实施例1

对不同辅料盐酸洛拉曲克冻干粉针性状进行了比较，结果如下：

表1  不同辅料盐酸洛拉曲克冻干粉针性状比较

辅料	外观	溶解性	澄清度
				无辅料海藻糖甘露醇葡萄糖	微黄色饼状，外观欠佳类白色饼状，外观一般类白色饼状，外观优类白色饼状，外观优	2分钟左右溶解25秒左右溶解12秒左右溶解18秒左右溶解	2-33-42-33-4

效果实施例2

在荷S180实体瘤小鼠中对盐酸洛拉曲克冻干粉针和脂质体的药效学参数进行比较

实验方法：荷S180实体瘤小鼠尾静脉注射给药，剂量为80mg/kg，采用HPLC紫外检测方法测定盐酸洛拉曲克在生物样品中的浓度。结果如表2所示。

表2  盐酸洛拉曲克冻干粉针和脂质体的药效学参数比较

比较参数	盐酸洛拉曲克冻干粉针	盐酸洛拉曲克脂质体
			消除半衰期(t1/2β)1小时后血清药物浓度(ug/ml)12小时后血清药物浓度(ug/ml)1小时肝脏药物浓度(ug/ml)12小时肝脏药物浓度(ug/ml)1小时肾脏药物浓度(ug/ml)12小时肾脏药物浓度(ug/ml)1小时肿瘤组织药物浓度(ug/ml)12小时肿瘤组织药物浓度(ug/ml)	2.25小时40.3小时7.8小时74.3小时10.2小时102.6小时12.3小时18.6小时5.6小时	5.30小时32.1小时20.3小时88.9小时45.6小时90.2小时35.6小时39.3小时15.8小时

结果表明，盐酸洛拉曲克脂质体延长了药物在体内保持的时间，使药物在肝脏和肿瘤组织中的浓度增大，从而提高了治疗指数。

Claims (8)

1.一种盐酸洛拉曲克的脂质体组合物，其含有10-20重量份的盐酸洛拉曲克，20-40重量份的大豆卵磷脂，2-5重量份的二棕榈酰甘油磷脂，和5-20重量份的胆固醇。

2.根据权利要求1的组合物，其含有10-20重量份的盐酸洛拉曲克，20-40重量份的大豆卵磷脂，2-5重量份的二棕榈酰甘油磷脂，5-20重量份的胆固醇，0.02-0.045重量份的维生素E，30-100重量份的柠檬酸，30-100重量份的柠檬酸钠，40-180重量份的无水碳酸钠，和300-1000重量份的甘露醇。

3.根据权利要求1的组合物，其中所述脂质体为冻干的形式。

4.权利要求1-3中任何一项的脂质体组合物的制备方法，包括以下步骤：

1)将磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿或氯仿-甲醇混合溶剂中，减压除去有机溶剂，形成脂质薄膜；

2)将脂质薄膜在柠檬酸缓冲溶液中水化，得到空白脂质体悬浮液；

3)用高压均质器将脂质体的粒径控制在50-300nm之间，调节PH值至7.1-7.8；

4)将盐酸洛拉曲克溶于注射用水，加入甘露醇，与脂质体混悬液混合，在50-60℃下振摇；

5)采用脂质体分散液洗涤盐酸洛拉曲克的脂质体，利用渗析过滤法使脂质体外溶液置换为pH5-7的脂质体分散液，得盐酸洛拉曲克脂质体混悬液；

6)用微孔膜过滤除菌；

7)任选地将脂质体溶液冻干。

5.一种胶囊制剂，包含权利要求1-3中任何一项的脂质体组合物。

6.一种胶囊制剂，包含10-20重量份的盐酸洛拉曲克，20-80重量份的淀粉，1-5重量份的羧甲基纤维素，和硬脂酸镁。

7.一种冻干粉针制剂，包含权利要求1-3中任何一项的脂质体组合物。

8.一种冻干粉针制剂，包含1重量份的盐酸洛拉曲克和0.2-2重量份的甘露醇。