CN1754556A - 复方葛根格列本脲药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于降糖药物领域，具体是一种复方葛根格列本脲药物组合物及其制备方法，所述药物组合物含有葛根素精品、格列本脲、天花粉微粉，按重量份计：葛根素精品2～8份、格列本脲1份、天花粉微粉80～200份，同时提供本发明制备方法。本发明所述药物组合物产品质量稳定，作用迅速，在人体内很快分解释放，疗效得到有效提高；用于治疗胰岛功能尚存的II型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病)且单用饮食控制无效的患者药物中的应用，可刺激内源性胰岛素的分泌而减少胰岛素的用量。

Description

复方葛根格列本脲药物组合物及其制备方法

【技术领域】

本发明涉及降糖药物领域，具体是提供一种复方葛根格列本脲药物组合物；更具体地是提供一种含有葛根素精品、格列本脲和天花粉微粉的药物组合物，同时提供本发明所述药物组合物的制备方法。

【背景技术】

糖尿病(DM)是一组由遗传和环境因素相互作用，导致胰岛素分泌的绝对和相对不足以及细胞对胰岛素敏感性下降，而引起糖、脂肪、蛋白质、水、电解质等一系列代谢紊乱的临床综合征，以高血糖为主要标志。西药治疗糖尿病的药物开发了很多。

但从实验和临床研究结果来看，和西药相比，中药具备多靶点、多层次综合治疗作用和功能调节作用，对糖尿病的治疗不仅能降低血糖，而且能有效地阻止和延缓糖尿病合并症的发生和发展，其作用温和持久、副作用较小或无副作用。因此市场上出现了大量的中西药结合的药品，如消渴丸是以清代名医叶天士“玉泉丸”与“消渴方”为基础方化裁而来，其成分为葛根、地黄、天花粉、玉米须、南五味子、山药、北芪、生地，内含了目前我国常用的口服治疗糖尿病的第2代磺脲类(SU)药物优降糖，消渴丸以中、西药合用，既能促进胰岛素的分泌，又能降低胰升糖素，对于改善糖尿病患者胰岛分泌功能紊乱和避免优降糖治疗中的继发性失效，具有积极的意义；消渴丸两种剂量均能使糖尿病大鼠体重增加，饮水量和尿量减少，其作用优于优降糖。由于其中中药组份复杂，质量难以控制，在实际应用中该药并不是很理想。

因此组方简单，疗效明显的药物成为患者的迫切需求，国内众多厂家和研究单位也为之做了大量的工作，如2002年公开的已有国家药品标准(WS-10001-(HD-1160)-2002，公开了一种复方葛根格列本脲药物组合物，具体公开了葛根提取物(以葛根素计)6g，格列本脲0.833g，天花粉167g；其组方简单，疗效明显。其中：

葛根提取物主要组份为葛根素，目前研究认为，葛根素具有提高胰岛素敏感性、改善胰岛素抵抗的作用，其机制为(1)通过阻断肾上腺素β受体对血管的收缩作用，扩张血管，并减轻对抗胰岛素的激素(肾上腺素、糖皮质激素等)的作用，有利于胰岛素生物学效应的发挥，提高胰岛素的敏感性。(2)通过降低全血粘度，改善血液流变学指标，使细胞Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性提高，使物质运输、糖和胰岛素的跨膜(肌肉、脂肪细胞等)能力加强，从而提高靶细胞对胰岛素的敏感性，改善胰岛素抵抗。(3)葛根素还能抑制蛋白质非酶糖基化，抗氧自由基损害，阻止糖尿病晚期合并症的发生。

格列本脲能刺激胰岛β细胞及时分泌胰岛素；能通过增加靶细胞胰岛素受体数量，提高受体对胰岛素的亲和力及受体后作用，增加周围组织对胰岛素的敏感性及对糖的利用；能通过抑制胰岛α细胞分泌胰高血糖素，抑制肝糖原的异生作用和肝糖原分解，减少肝糖入血。

天花粉，拉丁名：Mongolian Snakegourd Root，为双子叶植物药葫芦科植物栝楼或双边栝楼的干燥根。有降低血糖的活性作用，可明显降低由四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠的血糖浓度，同时具有免疫调节作用。

由于受当时技术所限，该标准申报企业在生产时采用的是葛根素粗品，即葛根素不是很纯的葛根提取物，同时对天花粉也没有进一步加工，在实际生产和应用中，发现其质量不稳定，药效作用缓慢，在人体内分解释放不是迅速，因此该企业已停止上述品种的生产。

因此，寻找一种具有稳定质量、作用迅速、在人体内能很快分解释放的降糖药物具有重要的临床意义。

【发明内容】

本发明所要解决的技术问题是提供一种质量稳定、作用迅速、在人体内能很快分解释放、疗效得到有效提高的复方葛根格列本脲药物组合物。

本发明另一个要解决的技术问题是提供所述药物组合物的制备方法。

本发明人结合上述已公开的组方，结合现有技术的应用，进行了大量的试验对组方进行优化，包括对葛根提取物进行细提，得到大豆异黄酮、大豆甙等更多的活性物质；对葛根提取物进行精提，使主要成分葛根素纯度提高，有利于质量的控制，如市场上已有的纯度在96％以上葛根素精品；对格列本脲进行含量的优化；对天花粉进行活性分析，采用其主要活性成分天花粉蛋白组成组方，但发现治疗效果不是很理想；结合纳米技术的概念，本发明人将微粉技术带入该组方中，出人意料的发现，天花粉微粉与葛根素精品、格列本脲组合的药物组合物在动物试验和临床前期的试验中发现具有很好的效果，同时所制备的制剂具有良好的稳定性。

优选的是，本发明所述复方葛根格列本脲药物组合物中葛根素精品为含有大于等于99％的葛根素之葛根提取物，格列本脲与天花粉微粉，其中天花粉微粉的颗粒平均粒径小于等于100um，按重量份计算：葛根素精品2～7份、格列本脲1份、天花粉微粉60～200份。

更优选的，所述药物组合物含有如下重量份的组份：

葛根素精品4～6、格列本脲1、天花粉微粉80～150。

本发明所述复方葛根格列本脲药物组合物的制备方法，包括如下步骤：葛根用稀乙醇回流提取三次，提取液减压回收乙醇，水沉冷藏，离心得沉淀，沉淀真空干燥得葛根素粗品；葛根素粗品用水饱和的正丁醇溶解经氧化铝层析柱用，用水饱和的正丁醇洗脱，收集葛根素部分，真空干燥得葛根素精品；然后将上述重量份比的葛根素精品、格列本脲与天花粉微粉混合，再加入药学上可接受的辅料制成药剂学上可接受的药物组合物。所述药剂学上可接受的药物组合物可以是胶囊或片剂。

具体地说葛根素精品制备过程为：

将葛根粉碎成粗粉，加5～10倍的50～80％乙醇加热回流三次，时间为0.5～2小时，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇至无醇味；加入6～12倍量的纯化水，冷藏12～48小时，将冷藏后的药液用离心机离心分离(离心转速为12000～15000转/分)，收集沉淀，沉淀真空干燥得葛根素粗品；葛根素粗品加1～5倍量水饱和的正丁醇溶解，加入氧化铝层析柱中，用水饱和正丁醇洗脱，收集葛根素部分，真空干燥，得葛根素精品。

优选的葛根素精品制备过程为：

将葛根粉碎成粗粉，加8倍、6倍、5倍的70％乙醇加热回流三次，时间为2小时1小时、45分钟，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇至无醇味；加入10倍量的纯化水，冷藏24小时，将冷藏后的药液用离心机离心分离(离心转速为12000～15000转/分)，收集沉淀，沉淀真空干燥得葛根素粗品；葛根素粗品加3倍量水饱和的正丁醇溶解，加入氧化铝层析柱中，用水饱和正丁醇洗脱，收集葛根素部分，真空干燥，得葛根素精品。

天花粉微粉的制备过程：将天花粉用粗粉机粉碎成粗粉，再用微粉机组将粗粉粉碎成天花粉微粉；优选选择颗粒平均粒径小于等于100um的天花粉微粉。

本发明所述复方葛根格列本脲药物组合物的制备方法，其特征在于将葛根素精品与格列本脲、天花粉微粉加入药学上可接受的辅料制成药剂学上可接受的药物组合物剂。本发明所述药物组合物中优选的方案中每粒含葛根素为5.4mg～5.9mg，装量优选为每粒0.3g。口服。每日2-3次，每次1-2粒，餐前半小时服用。服用10-14日后，根据餐后2小时血糖的情况调整服药剂量：如疗效满意，可逐渐减量为每日2次，每次1粒的维持剂量；如需加量，最大剂量为每次2粒，每日3次。

本品采用中西药结合组方，具有标本兼治的特点。既能降低血糖消除糖尿病症状，又能恢复胰岛组织功能，促进胰岛细胞正常分泌胰岛素，还能活化组织细胞，提高受体对胰岛素的敏感性，恢复机体正常糖代谢。同时能防止和延缓糖尿病肾病、糖尿病周围神经病变、糖尿病视网膜病变、冠心病、心肌梗死等合并症的发生。

与传统工艺相比，葛根素经过本发明工艺处理后纯度更高，减少了有关物质，也克服了传统工艺中乙醇提取物在贮存过程宜吸潮的特性；本品的天花粉通过超微粉碎，经人体口服吸收后很快在人体内释放并发挥疗效，使本发明制剂在临床上应用时疗效更迅速。

与已公开的处方相比，本发明所述药物组合物更优化了各组份的比例，提高了格列本脲的含量，降低了天花粉的含量，不仅使药效更好，同时在使用上也方便了患者。

本发明所述的复方葛根格列本脲药物组合物临床上用于胰岛功能尚存的II型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病)且单用饮食控制无效的患者。对使用外源性胰岛素治疗的II型糖尿病患者服用本品可刺激内源性胰岛素的分泌而减少胰岛素的用量。

下面用实施例进一步描述本发明，有利于对本发明及其优点、效果更好的了解，但所述实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。

【具体实施方式】

实施例1复方葛根格列本脲胶囊的制备

将葛根粉碎成粗粉，加8倍、6倍、5倍重量的70％乙醇加热回流三次，时间为2小时、1小时、45分钟，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇至无醇味；加入10倍重量的纯化水，冷藏24小时，将冷藏后的药液用离心机离心分离(离心转速为12000转/分)，收集沉淀，沉淀真空干燥得葛根素粗品；葛根素粗品加3倍重量水饱和的正丁醇溶解，加入氧化铝层析柱中，用水饱和正丁醇洗脱，收集葛根素部分，真空干燥，得葛根素精品，经测定纯度为99.2％。

将天花粉用粗粉机粉碎成粗粉，再用微粉机组将粗粉粉碎成天花粉微粉，粉末颗粒平均粒径为95um。

将葛根素精品5.9g与格列本脲1.45g、天花粉微粉120g再加入药学上可接受的具体辅料，制成药剂学上可接受的胶囊1000粒。性状为浅褐色的颗粒。味甘、微苦。每粒含葛根素为5.9mg装量为每粒0.3g。

实施例2复方葛根格列本脲片剂的制备

将葛根粉碎成粗粉，加6倍、6倍、5倍的60％乙醇加热回流三次，时间为2小时2小时、1小时，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇至无醇味；加入8倍量的纯化水，冷藏48小时，将冷藏后的药液用离心机离心分离(离心转速为15000转/分)，收集沉淀，沉淀真空干燥得葛根素粗品；葛根素粗品加5倍量水饱和的正丁醇溶解，加入氧化铝层析柱中，用水饱和正丁醇洗脱，收集葛根素部分，真空干燥，得葛根素精品。

将天花粉用粗粉机粉碎成粗粉，再用微粉机组将粗粉粉碎成天花粉微粉，粉末颗粒平均粒径为85um。

将葛根素精品5.4g与格列本脲1.20g、天花粉微粉133g再加入药学上可接受的辅料制成药剂学上可接受的片剂1000片。味甘、微苦。每片含葛根素为5.4mg，装量为每片0.3g。

实施例3复方葛根格列本脲胶囊的制备

将葛根粉碎成粗粉，加6倍、6倍、6倍的80％乙醇加热回流三次，时间为1.5小时1.5小时、1小时，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇至无醇味；加入12倍量的纯化水，冷藏24小时，将冷藏后的药液用离心机离心分离(离心转速为12000～15000转/分)，收集沉淀，沉淀真空干燥得葛根素粗品；葛根素粗品加2倍量水饱和的正丁醇溶解，加入氧化铝层析柱中，用水饱和正丁醇洗脱，收集葛根素部分，真空干燥，得葛根素精品。

将天花粉用粗粉机粉碎成粗粉，再用微粉机组将粗粉粉碎成天花粉微粉；粉末颗粒平均粒径为80um。

将葛根素精品5.5g与格列本脲1.25g、天花粉微粉125g再加入药学上可接受的辅料制成药剂学上可接受的药物组合物剂1000粒。性状为浅褐色的颗粒。味甘、微苦。每粒含葛根素为5.5mg，装量为每粒0.3g。

                            实验例1

本实验例为本发明所述实施例1中所制成的复方葛根格列本脲胶囊的外观性状、装量差异、崩解时限、微生物限度检查项目的检查。

性状  本品为浅褐色的颗粒。味甘、微苦。

装量差异  取本品按药物组合物剂项下的检查方法中装量差异检查法(中国药典2000年版二部附录IE)检查，符合规定。

崩解时限  取本品按崩解时限检查法(中国药典2000年版二部附录XA)检查，符合规定。

微生物限度  取本品按微生物限度检查法(中国药典2000年版二部附录XIJ)检查，符合规定。

                            实验例2

本实验例为本发明所述实施例3中所制成的复方葛根格列本脲胶囊的葛根素定性测定。

取本品细粉2g，加稀乙醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取瓜氨酸对照品，加稀乙醇溶解，制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版二部附录VIB)试验。吸取供试品溶液6μl及对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶G薄层板，以正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水(8∶2∶2∶3)为展开剂，展开、取出、晒干。喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

取含量测定项下的供试品溶液，注入液相色谱仪，供试品主峰的保留时间与葛根素对照品峰的保留时间一致。

本品上述项目检查均符合规定。

                            实验例3

本实验例为本发明所述实施例3中所制成的复方葛根格列本脲胶囊的格列本脲限度检查。

格列本脲限度  取本品内容物研成细粉，精密量取1.03g，置100ml碘瓶中，加氯仿25ml，振摇30分钟，滤过，滤渣和滤器用氯仿20ml分次洗涤，合并洗液与滤液，置水浴上蒸发至近干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为供试品溶液。另精密称取格列本脲对照品，加氯仿制成每1ml含4mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版二部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2ml，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿-环乙烷-乙醇-冰醋酸(8∶13∶1∶1)为展开剂，展开，取出、晾干，置紫外光(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。供试品斑点面积与强度不得超过对照品斑点面积与强度。

本品上述项目检查均符合规定。

                            实验例4

本实验例为本发明所述实验例3中所制成的复方葛根格列本脲胶囊中葛根素的定量测定。

照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录VD)测定

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(20∶80)为流动相；检测波长为250nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备  精密称取葛根素对照品适量，置量瓶中，加30％乙醇溶解并定量制成每1ml中约含葛根素80μg的溶液。

供试品溶液的制备  取本品内容物0.3g，精密称定，置25ml量瓶中，加入30％乙醇15ml，超声处理30分钟，放冷，用30％乙醇稀释至刻度、摇匀，滤过精密量取续滤液1ml置10ml量瓶中，加入30％乙醇稀释至刻度，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取滤液，即得供试品溶液，即得。

测定法  分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

                        比较例1稳定性比较

本比较例说明采用本发明实施例3所制备的治疗II型糖尿病药物复方葛根格列本脲胶囊(简称发明组)与采用如下常规制备方法生产(取市售葛根提取物，含葛根素90％，格列本脲，天花粉，按本实施例3所述比例混合，制备)的复方葛根格列本脲胶囊(简称常规组)通过六个月加速实验的稳定性比较，结果见下表1。

            表1、复方葛根格列本脲药物组合物稳定性比较

3月	含量：葛根素1.96％格列本脲0.48％天花粉微粉50％	含量：葛根素1.80％格列本脲0.47％天花粉微粉48％
			6月	含量：葛根素1.90％格列本脲0.47％天花粉微粉49％	含量：葛根素1.65％格列本脲0.45％天花粉微粉46％

通过以上实验可以看出，发明组在经过加速实验六个月后，其含量未发生明显变化，而常规组的含量均有明显降低，说明本发明所制备的治疗治疗II型糖尿病药物复方葛根格列本脲胶囊明显优于采用常规制备方法生产的。

                       比较例2溶出度比较

本发明实施例1制备的复方葛根格列本脲胶囊与比较例制备的复方葛根格列本脲胶囊进行溶出度比较，以葛根素精品为测定标准。取药物组合物，在80-M型药物溶出度测定仪上，按中华人民共和国药典2005年版二部溶出度测定第二法，以0.1mol/L盐酸900ml为溶剂，转速50转/分，在药物组合物接触溶出介质时开始计时，分别在等5、10、20、30、40、60分钟时取样5ml(及时补进等量、等温的溶出介质)离心，上清液供测定用。发明组与常规组各测六粒，计算平均累积溶出度百分率，进行统计比较。

            表2、复方葛根格列本脲胶囊葛根素溶出度测定结果(％)

组别	时间(分钟)
							5	10	20	30	40	60
	发明组	35.22±8.52	56.09±2.41	76.64±2.97	88.38±2.05	94.12±1.96							96.33±1.87
常规组							28.23±4.36	45.14±2.98	64.52±3.12	75.14±2.74	85.22±2.14	86.07±1.98

结果表明：发明组溶出度较高，两组溶出度相比，在10、20、30、40、60分钟各时间点有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。

通过以上实验可以看出，采用本发明工艺制备的药物组合物的溶出度优于常规工艺制备的药物组合物的溶出度。

                        比较例3疗效比较

1资料与方法

1.1一般资料

选住院的II型糖尿病患者80例。符合2000年WHO糖尿病的诊断标准，并进行了胰岛素分泌试验测定确诊，无任何并发症。

1.2治疗方法

所有患者初次诊治，无任何并发症，随机分组。本发明实施例3所述的复方葛根格列本脲药物组合物治疗组(A组)：40例均为门诊病人，其中男26，女14，年龄28～68岁。常规工艺复方葛根格列本脲药物组合物(B组)40例，其中男21女19，年龄25～65岁。口服。每日3次，每次2粒，一个月一疗程，连用6个疗程。

1.3观察项目及指标

检测指标包括：空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FlnS)。空腹血糖(FBG)采用葡萄糖氧化酶法；空腹胰岛素(FlnS)采用放射免疫法。

1.4结果

1.4.1症状改善

                                    表3两组患者主要症状改善情况

组别	项目	症状
										口渴	多饮	多食	乏力	消瘦	肥胖
发明组	例数	13	8	8	29	10	21
									痊愈	9	7	7	23	9	4
	好转	4	0	1	5	0	10
									无转		1		1	1	7
	有效率	100％	87.5％	100％	95.5％	90.0％	66.7％
								常规组	例数	11	7	7	31	9	19
	痊愈	6	4	2	20	4	4
									好转	5	2	4	9	4	8
	无转	0	1	1	2	1	7
									有效率	100％	85.7％	85.7％	93.5％	88.9％	63.2％

以上结果表明：发明组症状改善明显优于常规组。

1.4.2血糖：发明组和常规组空腹血糖均下降，与给药前相比，两组在给药3个月及6个月后，空腹血糖均有显著差异(P＜0.05或P＜0.01)；给药3个月及6个月后，发明组与常规组相比降血糖作用较明显，但无统计学意义。见表2。

1.4.3胰岛素：两组空腹胰岛素均升高，发明组空腹胰岛素升高效果较好，但给药3个月及6个月后，组间相比及组内给药前后相比均无统计学意义。见表4。

                    表4两组患者治疗前后FBG、FlnS测定结果比较

组别	发明组			常规组
							例数	40			40
	治疗前	3个月	6个月	治疗前	3个月	6个月
							FBG	10.81±2.95	6.51±1.70*	6.16±1.26**	9.89±2.53	6.64±1.67*	6.36±1.95**
FlnS	14.26±6.78	16.43±6.27	18.97±6.51	14.19±7.01	15.38±6.83	17.85±6.91

注：^*本组治疗前后比较P＜0.05，^**本组治疗前后比较P＜0.01

以上试验表明：在治疗II型糖尿病方面，采用本发明工艺制备的复方葛根格列本脲药物组合物与常规工艺制备的复方葛根格列本脲药物组合物相比，作用迅速、治疗效果较优。

Claims (9)

1、一种复方葛根格列本脲药物组合物，其特征在于所述药物组合物含有葛根素精品、格列本脲、天花粉微粉。

2、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述葛根素精品为含有大于等于99％的葛根素之葛根提取物。

3、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述天花粉微粉为颗粒平均粒径小于等于100um的天花粉微粉。

4、根据权利要求1～3之任一项所述的药物组合物，其特征在于所述药物组合物含有如下重量份组份：

葛根素精品2～7份、格列本脲1份、天花粉微粉60～200份。

5、根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于药物组合物含有如下重量份的组份：葛根素精品4～6份、格列本脲1份、天花粉微粉80～150份。

6、根据权利要求4之任一项所述的药物组合物，其特征在于所述药物组合物为药剂学上可接受的胶囊或片剂。

7、权利要求1～6之任一所述药物组合物的制备方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：葛根用稀乙醇回流提取三次，提取液减压回收乙醇，水沉冷藏，离心得沉淀，沉淀真空干燥得葛根素粗品；葛根素粗品用水饱和的正丁醇溶解经层析柱用，用水饱和的正丁醇洗脱，收集葛根素部分，真空干燥得葛根素精品；然后将葛根素精品与格列本脲、天花粉微粉再加入药学上可接受的辅料制成药剂学上可接受的药物组合物。

8、根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于方法中所述的葛根素精品制备过程为：

将葛根粉碎成粗粉，加5～10倍的50～80％乙醇加热回流三次，时间为0.5～2小时，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇至无醇味；加入6～12倍量的纯化水，冷藏12～48小时，将冷藏后的药液用离心机离心分离(离心转速为12000～15000转/分)，收集沉淀，沉淀真空干燥得葛根素粗品；葛根素粗品加1～5倍量水饱和的正丁醇溶解，加入氧化铝层析柱中，用水饱和正丁醇洗脱，收集葛根素部分，真空干燥，得葛根素精品。

9、根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于方法中所述的天花粉微粉制备过程为：

将天花粉用粗粉机粉碎成粗粉，再用微粉机组将粗粉粉碎成天花粉微粉，颗粒平均粒径小于等于100um。