CN1736186A - 具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法。方法的步骤如下：1)大头金蝇饲养：采用全透明式蝇房，房内拉设有多根绳子供种蝇歇息，以动物蛋白、红糖、水果为食物，以中药淫羊藿、加赖氨酸、蛋氨酸、维生素作为催卵素，用集卵盘子收集蝇卵；2)蝇蛆饲养：采用通风的蝇蛆房，房顶用透明材料，房中装有换气扇和风扇，窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好，蝇蛆房内设有育蛆池，育蛆池温度控制28℃～60℃，在育蛆池内放入蝇蛆饵料，同时放入上述蝇卵。本发明养殖的蝇蛆经过国家新药筛选中心几年来多次检测有对肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、胃癌、等肿瘤细胞生长有很强的抑制率，其抗肿瘤生物活性都在75％～97％。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法。
背景技术
苍蝇是蝇类的统称。蝇在生物学分类系统中属无脊椎动物、节肢动物门、昆虫纲、双翅目。再往下细分，有蝇科、麻蝇科、丽蝇科、寄蝇科、果蝇科、舌蝇科、狂蝇科、食蚜蝇科等数十个科。目前估计有6万种，而且每天都可能有新种发现。我国蝇类有记载的有1500多种。
1、常规养殖：目前国内常规养殖报道很多基本按以下办法为主。
①室外养殖：选择远离生活区，有树荫但有一定光线，野生苍蝇较多的地方，面积根据自己所需的产量而定，养殖房只要能遮雨就可以了，茅草房、水泥瓦房、树皮房都行，房屋四周用纱窗围起来，养殖采用简单的水泥池，每个池面积为1.5-2平方米，池边高20厘米，房里面用无数来回穿叉的绳子连接，以给苍蝇在上面歇息，用新鲜猪粪、鸡粪、豆腐渣等混合，堆成一堆用农膜盖严，发酵24-48小时后即喂养蝇蛆。
由于是室外养殖，集卵物有很多选择，有用死鱼等直接放在粪堆上，也用配制以100公斤粪料配麦麸1公斤，鱼粉2两，花生麸3两，水1.5公斤，混匀后放在粪堆上，集卵后放入水泥池内，第二天早上就全部孵化了一般长到七天至八天就可出池烫死，洗净烘干打粉作饲料。
②室内养殖：大多农场用红眼绿身苍蝇和家中常见的小家蝇，培育，种蝇喂养于棚内，主要喂食红糖水(1∶10)，加少量的奶油香精，喂法是在盆中垫块海绵，将糖水等倒入海绵即可。
种蝇房(棚)，100～300多平方米一间，种蝇和育蛆同在一房(也有笼养种蝇)，有较多窗户、房顶也留数个换气窗，房顶有瓦料也有塑料薄膜、窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好，房内拉设数条绳子供蝇歇息，蝇房地面用水泥分隔成面积为2～3平方米的长方形育蛆池，池边高20～25厘米，池的边角处理设有收蛆桶(小塑料桶)，桶边稍高于池底，长大的蝇蛆化蛹前，绝大多数都自动爬离粪堆，沿池边爬行最终掉入收蛆桶内。
蝇蛆饵料用猪粪、鸡粪、牛粪、酒糟、米糠、豆腐渣等配料，经过发酵喂养蝇蛆，长大后用开水烫死烘干打粉作饲料。也有养殖场用酒糟、米粉等配酵母粉，经消毒，喂养无菌蝇蛆，长大后烘干打粉，经紫外线消毒作为蝇蛆蛋白，用于保健食品或化装品的添加剂。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法。
方法的步骤如下
1)大头金蝇饲养
采用全透明式蝇房，房内拉设有多根绳子供种蝇歇息，大头金蝇以动物蛋白、红糖、水果为食物，以淫羊藿、加赖氨酸、蛋氨酸、维生素作为催卵素，用集卵盘子收集蝇卵，在集卵盘上放上万分子一的碳酸氨水配制小麦麸，以引诱种蝇集中产卵；
2)蝇蛆饲养
采用通风的蝇蛆房，房顶用透明材料，房中装有换气扇和风扇，窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好，蝇蛆房内放置多个育蛆池，在育蛆池内放入蝇蛆饵料，同时放入上述蝇卵，育蛆池温度控制28℃～60℃即可。
所述的蝇蛆饵料为青蛙、淡水鱼或猪肺粉碎后在发酵池内发酵4～6天即可。
或者青蛙15％～30％淡水鱼15％～30％、冬虫夏草0.1％～0.2％、灵芝粉1％～2％、鸡20％～30％、水果25％～35％，其余为植物饲料，粉碎后在发酵池内发酵4～6天即可。
或者猪肺25％～35％青蛙15～30％、淡水鱼15％～30％、灵芝粉为1％～2％、人参粉0.1％～0.2％、水果20％～30％，其余为植物饲料，粉碎后在发酵池内发酵4～6天即可。
全透明式蝇房体积为10～20立方米，饲养量为30万～50万只种蝇。
食物中的动物蛋白35％～45％、红糖20％～30％、水果30％～40％，动物蛋白为蛆浆。
催卵素中的淫羊藿20％～30％、加赖氨酸15％～25％、蛋氨酸15％～25％、维生素25％～35％，维生素为B2。
育蛆池由轻烧镁粉30％～50％、氧化镁30％～50％、木渣15％～25％原料制成。
本发明养殖的蝇蛆经过国家新药筛选中心几年来多次检测有对肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、胃癌、等肿瘤细胞生长有很强的抑制率，其抗肿瘤生物活性都在75％～97％。几年来通过国家新药筛选中心的多次生物活性检测，我们提供的特种蝇蛆全虫粉具有抗癌等的生物活性。检测结果证明我们采用这种蛆虫的活体吸收、体内整合、组成特种蝇蛆全虫粉的方法是成功的。
具体实施方式
一.苍蝇(蝇蛆)房场地
选择远离生活区，无环境污染，植被良好，取用水方便地方建造蝇蛆房(棚)。
苍蝇房材料以木材为主每间有10～20立方米，有较多窗户，房顶也留数个换气窗，房顶用透明材料，房中装有换气扇和风扇，窗户、换气窗与房外相通的地方用多层纱窗严实封好，房内拉设来回穿叉的绳索供种蝇歇息。蝇蛆房地面用轻烧镁粉30％～40％、氧化镁10％～30％、木渣5％～15％原料制成60×40×50的长方体育蛆池，具有透气性能好。育蛆池温度控制28℃-60℃。池边角处埋设有收蛆桶(小塑料桶)，桶边稍高于地面，长大的蝇蛆化蛹前，绝大多数都自动爬离饵料，沿池边爬行最终掉入收蛆桶内(不健康的蝇蛆、死亡蝇蛆和健康蝇蛆形成自然分离)。
二.蝇种选择
目前，从国内到国际研究，饲养苍蝇一般都选用家蝇，因为家蝇比较容易养，饲养成本比较低，而我们所选用的是：“大头金蝇”(英文名：chrgsomgiamegacephala(Fabricius))，此蝇经浙大生命科学院鉴定。
该蝇种是我们经过多年选择，最终确定。它具有健壮、生殖率高、抗病能力强等特点。经过我们近几年的培养，选出了一批优良蝇种，使其不会退化确保功效。
三.种蝇的饲养
“大头金蝇”特点，好动，不易人工饲养，饲养要求高，这里主要的是其对温度条件要求很高，在25℃～40℃内为最佳。全透明式蝇房要求体积10～20立方米，饲养量30万～50万只种蝇，房内拉设有多根绳子供种蝇歇息。大头金蝇以动物蛋白35％、40％、45％、红糖20％、25％、30％、水果30％、35％、40％为食物，其中动物蛋白为蛆浆。以中药淫羊藿20％、25％、30％、加赖氨酸15％、20％、25％、蛋氨酸15％、20％、25％、维生素25％、30％、35％作为“催卵素”，其中维生素为B2。用集卵盘子收集蝇卵，在集卵盘子上放上万分子一的碳酸氨水配制小麦麸适量，以引诱种蝇集中产卵。
四.蛆的饲养
采用通风的蝇蛆房，房顶用透明材料，房中装有换气扇和风扇，窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好，蝇蛆房内放置多个蝇蛆池，在育蛆池内放入蝇蛆饵料，同时放入上述蝇卵，育蛆池温度控制28℃～60℃即可。
1.蝇房地面放有轻烧氧化镁粉配木渣制成60×40×50的长方体蝇蛆池，池内放入经过发酵的饵料。
1)饵料选择A：青蛙15％、23％、30％淡水鱼15％、23％、30％、冬虫夏草0.1％、0.15％、0.2％、灵芝粉1％、1.5％、2％、鸡20％、25％、30％、水果25％、30％、35％，其余为植物饲料，粉碎后在发酵池内发酵4、5、6天即可。
2)饵料选择B：猪肺25％、30％、35％青蛙15％、23％、30％、淡水鱼15％、23％、30％、灵芝粉为1％、1.5％、2％、人参粉0.1％、0.15％、0.2％、水果20％、25％、30％，其余为植物饲料，粉碎后在发酵池内发酵4、5、6天即可。
3)蝇蛆饵料C为青蛙、淡水鱼或猪肺粉碎后在发酵池内发酵4、5、6天即可。
4)发酵：用水泥砌成120×60×50发酵池，将粉碎后的配方饵料倒入发酵池，加入少量发酵粉和EM菌液并拌匀，用塑料薄膜密封，发酵4～6天即可喂养蝇蛆，发酵能杀灭饵料中的致病菌和寄生虫卵，还可消除饵料在蝇蛆房直接发酵产生的有害气体，以免对蝇蛆造成危害。
5)用以上配方喂养的蝇蛆经国家新药筛选中心多次检测对肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、胃癌、肺癌(附表)肿瘤细胞生长有很强的抑制率，其抗肿瘤生物活性都在75％～97％。
五.加工
将收集的蝇蛆漂洗冷冻，在适当的温度下进行烘干，去除虫体无效杂物、打粉，经紫外线消毒灭菌，没有经过任何分离就能达到这种活性效果，它完全有可能以中药单方进入市场，造福人类。
我们提供的特种蝇蛆全虫粉，具有抗癌等生物活性，检测结果证明我们采用
这种蛆虫活体吸收、体内整合、组成特种蝇蛆全虫粉的方法是成功的。
国家新药筛选中心
National Center for Drug Screening
Shanghai，China
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细胞株：BEL-7402人肝癌
作用时间：72h
对肿瘤细胞生长的抑制率％
浓度(mg/ml) BEL-7402
样品编号 1 0.25 0.063 0.016 0.0039 评价 备注
115426 88.5 95.4 20.1 4.1 2.3 有活性
115427 92.1 70.6 13.0 2.5 6.1 有活性
日期：2003.3.7
国家新药筛选中心
Natioral Center for Drug Screening
Shanghai，China
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细胞株：A-549人肺癌
作用时间：72h
对肿瘤细胞生长的抑制率％
浓度(mg/ml) A-549
样品编号 1 0.25 0.063 0.016 0.0039 评价 备注
115426 93.2 97.7 4.0 0 0 有活性
115427 95.4 98.2 0 0 0 有活性
日期：2003.3.7
国家新药筛选中心
National Center for Drug Screening
Shanghai，China
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细胞株：A-549人肺癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 95.0 97.3 79.4 0 3.7 有活性
NC00114962 95.3 97.0 52.0 0 0 有活性
NC00114963 91.4 96.8 2.5 2.5 0 有活性
NC00114964 94.8 97.2 94.3 0 0 有活性
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2004.11.30
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细胞株：BEL-7402人肝癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-8mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 84.3 96.6 23.6 0 3.0 有活性
NC00114962 92.6 95.4 97.0 0 0 有活性
NC00114963 86.2 94.3 0 0 0 有活性
NC00114964 85.9 94.3 90.6 0 0 有活性
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2004.11.30
国新药筛选中心
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：四氮唑盐(Methyl-Thiazol-Tetrozolim，MTT)
还原法
细胞株：HL-60人白血病
作用时间：72h
对肿瘤细胞生长的抑制率％
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 92.8 100 1.2 0 0 有活性
NC00114962 89.4 62.7 1.8 0 0 有活性
NC00114963 6.31 0.5 9.0 1.3 0 无活性
NC00114964 88.0 99.3 40.7 6.4 0 有活性
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2004.11.30
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细胞株：HO-8910人卵巢癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 91.1 92.9 93.0 1.2 0 有活性
NC00114962 89.2 94.3 64.5 17.4 20. 有活性
NC00114963 92.8 90.1 97.2 46.6 25. 有活性
NC00114964 86.4 91.1 95.9 24.5 9.8 有活性
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2005.3.30
国家新药筛选中心
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细胞株：SGC-7901人胃癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 92.8 96.4 95.0 10.8 25. 有活性
NC00114962 92.1 95.6 92.6 0 13.3 有活性
NC00114963 90.8 96.2 0 0 1.7 有活性
NC00114964 81.0 96.9 89.9 0.6 3.1 有活性
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2005.3.30
国新药筛选中心
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细胞株：HELA人宫颈癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 54.5 92.2 95.6 19.5 0 有活性
NC00114962 90.4 95.9 0 0 有活性
NC00114963 66.3 95.7 20.0 0 0 有活性
NC00114964 93.4 95.0 0 0 有活性
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2005.3.30
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细胞株：MDA-MB-468人乳腺癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 97.3 97.8 86.6 13.9 2.7 有活性
NC00114962 97.0 97.8 93.0 0 15.4 有活性
NC00114963 96.6 98.1 15.7 0 1.2 有活性
NC00114964 97.3 97.8 96.9 0 0 有活性
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2005.3.30
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：四氮唑盐(Methyl-Thiazol-Tetrozolim，MTT)
还原法
细胞株：HCT-116人肠癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 90.9 97.7 96.8 0 0 有活性
NC00114962 93.7 97.7 98.7 0 0 有活性
NC00114963 95.4 97.7 42.1 0 0 有活性
NC00114964 95.4 97.3 97.0 0 0 有活性
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2005.3.30
国家新药筛选中心
National Center for Drug Screening
Shanghai，China
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：四氮唑盐(Methyl-Thiazol-Tetrozolim，MTT)
还原法
细胞株：P-388小鼠白血病
作用时间：48h
对肿瘤细胞生长的抑制率％
浓度(mg/ml) P-388
样品编号 1 0.25 0.063 0.016 0.0039 评价 备
注
115426 99.0 98.9 20.8 0 0 有活性
Claims (8)
1.一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，方法的步骤如下
1)大头金蝇饲养
采用全透明式蝇房，房内拉设有多根绳子供种蝇歇息，大头金蝇以动物蛋白、红糖、水果为食物，以淫羊藿、加赖氨酸、蛋氨酸、维生素作为催卵素，用集卵盘子收集蝇卵，在集卵盘上放上万分子一的碳酸氨水配制小麦麸，以引诱种蝇集中产卵；
2)蝇蛆饲养
采用通风的蝇蛆房，房顶用透明材料，房中装有换气扇和风扇，窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好，蝇蛆房内放置多个育蛆池，在育蛆池内放入蝇蛆饵料，同时放入上述蝇卵，育蛆池温度控制28 ℃～60℃即可。
2.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述的蝇蛆饵料为青蛙、淡水鱼或猪肺粉碎后在发酵池内发酵4～6天即可。
3.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述的蝇蛆饵料的重量百分比为青蛙15％～30％淡水鱼15％～30％、冬虫夏草0.1％～0.2％、灵芝粉1％～2％、鸡20％～30％、水果25％～35％，其余为植物饲料，粉碎后在发酵池内发酵4～6天即可。
4.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述的蝇蛆饵料的重量百分比为猪肺25％～35％青蛙15％～30％、淡水鱼15％～30％、灵芝粉为1％～2％、人参粉0.1％～0.2％、水果20％～30％，其余为植物饲料，粉碎后在发酵池内发酵5～6天即可。
5.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述的全透明式蝇房体积为10～20立方米，饲养量为30万～50万只种蝇。
6.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述的食物中的动物蛋白35％～45％、红糖20％～30％、水果30％～40％，动物蛋白为蛆浆。
7.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述催卵素中的淫羊藿20％～30％、加赖氨酸15％～25、蛋氨酸15％～25％、维生素25％～35％，维生素为B2。
8.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述的育蛆池由轻烧镁粉30％～50％、氧化镁30％～50％、木渣15％～25％原料制成。
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|---|---|---|---|
| CNB2005100602774A CN1312989C (zh) | 2005-08-04 | 2005-08-04 | 具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
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| CN1736186A true CN1736186A (zh) | 2006-02-22 |
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Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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