CN1736186A - 具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法。方法的步骤如下:1)大头金蝇饲养:采用全透明式蝇房,房内拉设有多根绳子供种蝇歇息,以动物蛋白、红糖、水果为食物,以中药淫羊藿、加赖氨酸、蛋氨酸、维生素作为催卵素,用集卵盘子收集蝇卵;2)蝇蛆饲养:采用通风的蝇蛆房,房顶用透明材料,房中装有换气扇和风扇,窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好,蝇蛆房内设有育蛆池,育蛆池温度控制28℃~60℃,在育蛆池内放入蝇蛆饵料,同时放入上述蝇卵。本发明养殖的蝇蛆经过国家新药筛选中心几年来多次检测有对肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、胃癌、等肿瘤细胞生长有很强的抑制率,其抗肿瘤生物活性都在75%~97%。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法。
背景技术
苍蝇是蝇类的统称。蝇在生物学分类系统中属无脊椎动物、节肢动物门、昆虫纲、双翅目。再往下细分,有蝇科、麻蝇科、丽蝇科、寄蝇科、果蝇科、舌蝇科、狂蝇科、食蚜蝇科等数十个科。目前估计有6万种,而且每天都可能有新种发现。我国蝇类有记载的有1500多种。
1、常规养殖:目前国内常规养殖报道很多基本按以下办法为主。
①室外养殖:选择远离生活区,有树荫但有一定光线,野生苍蝇较多的地方,面积根据自己所需的产量而定,养殖房只要能遮雨就可以了,茅草房、水泥瓦房、树皮房都行,房屋四周用纱窗围起来,养殖采用简单的水泥池,每个池面积为1.5-2平方米,池边高20厘米,房里面用无数来回穿叉的绳子连接,以给苍蝇在上面歇息,用新鲜猪粪、鸡粪、豆腐渣等混合,堆成一堆用农膜盖严,发酵24-48小时后即喂养蝇蛆。
由于是室外养殖,集卵物有很多选择,有用死鱼等直接放在粪堆上,也用配制以100公斤粪料配麦麸1公斤,鱼粉2两,花生麸3两,水1.5公斤,混匀后放在粪堆上,集卵后放入水泥池内,第二天早上就全部孵化了一般长到七天至八天就可出池烫死,洗净烘干打粉作饲料。
②室内养殖:大多农场用红眼绿身苍蝇和家中常见的小家蝇,培育,种蝇喂养于棚内,主要喂食红糖水(1∶10),加少量的奶油香精,喂法是在盆中垫块海绵,将糖水等倒入海绵即可。
种蝇房(棚),100~300多平方米一间,种蝇和育蛆同在一房(也有笼养种蝇),有较多窗户、房顶也留数个换气窗,房顶有瓦料也有塑料薄膜、窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好,房内拉设数条绳子供蝇歇息,蝇房地面用水泥分隔成面积为2~3平方米的长方形育蛆池,池边高20~25厘米,池的边角处理设有收蛆桶(小塑料桶),桶边稍高于池底,长大的蝇蛆化蛹前,绝大多数都自动爬离粪堆,沿池边爬行最终掉入收蛆桶内。
蝇蛆饵料用猪粪、鸡粪、牛粪、酒糟、米糠、豆腐渣等配料,经过发酵喂养蝇蛆,长大后用开水烫死烘干打粉作饲料。也有养殖场用酒糟、米粉等配酵母粉,经消毒,喂养无菌蝇蛆,长大后烘干打粉,经紫外线消毒作为蝇蛆蛋白,用于保健食品或化装品的添加剂。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法。
方法的步骤如下
1)大头金蝇饲养
采用全透明式蝇房,房内拉设有多根绳子供种蝇歇息,大头金蝇以动物蛋白、红糖、水果为食物,以淫羊藿、加赖氨酸、蛋氨酸、维生素作为催卵素,用集卵盘子收集蝇卵,在集卵盘上放上万分子一的碳酸氨水配制小麦麸,以引诱种蝇集中产卵;
2)蝇蛆饲养
采用通风的蝇蛆房,房顶用透明材料,房中装有换气扇和风扇,窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好,蝇蛆房内放置多个育蛆池,在育蛆池内放入蝇蛆饵料,同时放入上述蝇卵,育蛆池温度控制28℃~60℃即可。
所述的蝇蛆饵料为青蛙、淡水鱼或猪肺粉碎后在发酵池内发酵4~6天即可。
或者青蛙15%~30%淡水鱼15%~30%、冬虫夏草0.1%~0.2%、灵芝粉1%~2%、鸡20%~30%、水果25%~35%,其余为植物饲料,粉碎后在发酵池内发酵4~6天即可。
或者猪肺25%~35%青蛙15~30%、淡水鱼15%~30%、灵芝粉为1%~2%、人参粉0.1%~0.2%、水果20%~30%,其余为植物饲料,粉碎后在发酵池内发酵4~6天即可。
全透明式蝇房体积为10~20立方米,饲养量为30万~50万只种蝇。
食物中的动物蛋白35%~45%、红糖20%~30%、水果30%~40%,动物蛋白为蛆浆。
催卵素中的淫羊藿20%~30%、加赖氨酸15%~25%、蛋氨酸15%~25%、维生素25%~35%,维生素为B2。
育蛆池由轻烧镁粉30%~50%、氧化镁30%~50%、木渣15%~25%原料制成。
本发明养殖的蝇蛆经过国家新药筛选中心几年来多次检测有对肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、胃癌、等肿瘤细胞生长有很强的抑制率,其抗肿瘤生物活性都在75%~97%。几年来通过国家新药筛选中心的多次生物活性检测,我们提供的特种蝇蛆全虫粉具有抗癌等的生物活性。检测结果证明我们采用这种蛆虫的活体吸收、体内整合、组成特种蝇蛆全虫粉的方法是成功的。
具体实施方式
一.苍蝇(蝇蛆)房场地
选择远离生活区,无环境污染,植被良好,取用水方便地方建造蝇蛆房(棚)。
苍蝇房材料以木材为主每间有10~20立方米,有较多窗户,房顶也留数个换气窗,房顶用透明材料,房中装有换气扇和风扇,窗户、换气窗与房外相通的地方用多层纱窗严实封好,房内拉设来回穿叉的绳索供种蝇歇息。蝇蛆房地面用轻烧镁粉30%~40%、氧化镁10%~30%、木渣5%~15%原料制成60×40×50的长方体育蛆池,具有透气性能好。育蛆池温度控制28℃-60℃。池边角处埋设有收蛆桶(小塑料桶),桶边稍高于地面,长大的蝇蛆化蛹前,绝大多数都自动爬离饵料,沿池边爬行最终掉入收蛆桶内(不健康的蝇蛆、死亡蝇蛆和健康蝇蛆形成自然分离)。
二.蝇种选择
目前,从国内到国际研究,饲养苍蝇一般都选用家蝇,因为家蝇比较容易养,饲养成本比较低,而我们所选用的是:“大头金蝇”(英文名:chrgsomgiamegacephala(Fabricius)),此蝇经浙大生命科学院鉴定。
该蝇种是我们经过多年选择,最终确定。它具有健壮、生殖率高、抗病能力强等特点。经过我们近几年的培养,选出了一批优良蝇种,使其不会退化确保功效。
三.种蝇的饲养
“大头金蝇”特点,好动,不易人工饲养,饲养要求高,这里主要的是其对温度条件要求很高,在25℃~40℃内为最佳。全透明式蝇房要求体积10~20立方米,饲养量30万~50万只种蝇,房内拉设有多根绳子供种蝇歇息。大头金蝇以动物蛋白35%、40%、45%、红糖20%、25%、30%、水果30%、35%、40%为食物,其中动物蛋白为蛆浆。以中药淫羊藿20%、25%、30%、加赖氨酸15%、20%、25%、蛋氨酸15%、20%、25%、维生素25%、30%、35%作为“催卵素”,其中维生素为B2。用集卵盘子收集蝇卵,在集卵盘子上放上万分子一的碳酸氨水配制小麦麸适量,以引诱种蝇集中产卵。
四.蛆的饲养
采用通风的蝇蛆房,房顶用透明材料,房中装有换气扇和风扇,窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好,蝇蛆房内放置多个蝇蛆池,在育蛆池内放入蝇蛆饵料,同时放入上述蝇卵,育蛆池温度控制28℃~60℃即可。
1.蝇房地面放有轻烧氧化镁粉配木渣制成60×40×50的长方体蝇蛆池,池内放入经过发酵的饵料。
1)饵料选择A:青蛙15%、23%、30%淡水鱼15%、23%、30%、冬虫夏草0.1%、0.15%、0.2%、灵芝粉1%、1.5%、2%、鸡20%、25%、30%、水果25%、30%、35%,其余为植物饲料,粉碎后在发酵池内发酵4、5、6天即可。
2)饵料选择B:猪肺25%、30%、35%青蛙15%、23%、30%、淡水鱼15%、23%、30%、灵芝粉为1%、1.5%、2%、人参粉0.1%、0.15%、0.2%、水果20%、25%、30%,其余为植物饲料,粉碎后在发酵池内发酵4、5、6天即可。
3)蝇蛆饵料C为青蛙、淡水鱼或猪肺粉碎后在发酵池内发酵4、5、6天即可。
4)发酵:用水泥砌成120×60×50发酵池,将粉碎后的配方饵料倒入发酵池,加入少量发酵粉和EM菌液并拌匀,用塑料薄膜密封,发酵4~6天即可喂养蝇蛆,发酵能杀灭饵料中的致病菌和寄生虫卵,还可消除饵料在蝇蛆房直接发酵产生的有害气体,以免对蝇蛆造成危害。
5)用以上配方喂养的蝇蛆经国家新药筛选中心多次检测对肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、胃癌、肺癌(附表)肿瘤细胞生长有很强的抑制率,其抗肿瘤生物活性都在75%~97%。
五.加工
将收集的蝇蛆漂洗冷冻,在适当的温度下进行烘干,去除虫体无效杂物、打粉,经紫外线消毒灭菌,没有经过任何分离就能达到这种活性效果,它完全有可能以中药单方进入市场,造福人类。
我们提供的特种蝇蛆全虫粉,具有抗癌等生物活性,检测结果证明我们采用
这种蛆虫活体吸收、体内整合、组成特种蝇蛆全虫粉的方法是成功的。
国家新药筛选中心
National Center for Drug Screening
Shanghai,China
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法:磺酰罗丹明B(sulforhodamineB,SRB)
蛋白染色法
细胞株:BEL-7402人肝癌
作用时间:72h
对肿瘤细胞生长的抑制率%
浓度(mg/ml) BEL-7402
样品编号 1 0.25 0.063 0.016 0.0039 评价 备注
115426 88.5 95.4 20.1 4.1 2.3 有活性
115427 92.1 70.6 13.0 2.5 6.1 有活性
日期:2003.3.7
国家新药筛选中心
Natioral Center for Drug Screening
Shanghai,China
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法:磺酰罗丹明B(sulforhodamineB,SRB)
蛋白染色法
细胞株:A-549人肺癌
作用时间:72h
对肿瘤细胞生长的抑制率%
浓度(mg/ml) A-549
样品编号 1 0.25 0.063 0.016 0.0039 评价 备注
115426 93.2 97.7 4.0 0 0 有活性
115427 95.4 98.2 0 0 0 有活性
日期:2003.3.7
国家新药筛选中心
National Center for Drug Screening
Shanghai,China
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法:磺酰罗丹明B(sulforhodamineB,SRB)
蛋白染色法
细胞株:A-549人肺癌
作用时间:72h
结果评定:无效:10-5mol/L<85%
弱效:10-5mol/L≥85%或10-6mol/L>50%
强效:10-6mol/L≥85%或10-7mol/L>50%
对肿瘤细胞生长的抑制率%
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 95.0 97.3 79.4 0 3.7 有活性
NC00114962 95.3 97.0 52.0 0 0 有活性
NC00114963 91.4 96.8 2.5 2.5 0 有活性
NC00114964 94.8 97.2 94.3 0 0 有活性
试验者:许承辉 杨蔚怡
日期:2004.11.30
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法:磺酰罗丹明B(sulforhodamineB,SRB)
蛋白染色法
细胞株:BEL-7402人肝癌
作用时间:72h
结果评定:无效:10-5mol/L<85%
弱效:10-5mol/L≥85%或10-6mol/L>50%
强效:10-8mol/L≥85%或10-7mol/L>50%
对肿瘤细胞生长的抑制率%
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 84.3 96.6 23.6 0 3.0 有活性
NC00114962 92.6 95.4 97.0 0 0 有活性
NC00114963 86.2 94.3 0 0 0 有活性
NC00114964 85.9 94.3 90.6 0 0 有活性
试验者:许承辉 杨蔚怡
日期:2004.11.30
国新药筛选中心
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法:四氮唑盐(Methyl-Thiazol-Tetrozolim,MTT)
还原法
细胞株:HL-60人白血病
作用时间:72h
对肿瘤细胞生长的抑制率%
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 92.8 100 1.2 0 0 有活性
NC00114962 89.4 62.7 1.8 0 0 有活性
NC00114963 6.31 0.5 9.0 1.3 0 无活性
NC00114964 88.0 99.3 40.7 6.4 0 有活性
试验者:许承辉 杨蔚怡
日期:2004.11.30
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法:磺酰罗丹明B(sulforhodamineB,SRB)
蛋白染色法
细胞株:HO-8910人卵巢癌
作用时间:72h
结果评定:无效:10-5mol/L<85%
弱效:10-5mol/L≥85%或10-6mol/L>50%
强效:10-6mol/L≥85%或10-7mol/L>50%
对肿瘤细胞生长的抑制率%
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 91.1 92.9 93.0 1.2 0 有活性
NC00114962 89.2 94.3 64.5 17.4 20. 有活性
NC00114963 92.8 90.1 97.2 46.6 25. 有活性
NC00114964 86.4 91.1 95.9 24.5 9.8 有活性
试验者:许承辉 杨蔚怡
日期:2005.3.30
国家新药筛选中心
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法:磺酰罗丹明B(sulforhodamineB,SRB)
蛋白染色法
细胞株:SGC-7901人胃癌
作用时间:72h
结果评定:无效:10-5mol/L<85%
弱效:10-5mol/L≥85%或10-6mol/L>50%
强效:10-6mol/L≥85%或10-7mol/L>50%
对肿瘤细胞生长的抑制率%
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 92.8 96.4 95.0 10.8 25. 有活性
NC00114962 92.1 95.6 92.6 0 13.3 有活性
NC00114963 90.8 96.2 0 0 1.7 有活性
NC00114964 81.0 96.9 89.9 0.6 3.1 有活性
试验者:许承辉 杨蔚怡
日期:2005.3.30
国新药筛选中心
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法:磺酰罗丹明B(sulforhodamineB,SRB)
蛋白染色法
细胞株:HELA人宫颈癌
作用时间:72h
结果评定:无效:10-5mol/L<85%
弱效:10-5mol/L≥85%或10-6mol/L>50%
强效:10-6mol/L≥85%或10-7mol/L>50%
对肿瘤细胞生长的抑制率%
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 54.5 92.2 95.6 19.5 0 有活性
NC00114962 90.4 95.9 0 0 有活性
NC00114963 66.3 95.7 20.0 0 0 有活性
NC00114964 93.4 95.0 0 0 有活性
试验者:许承辉 杨蔚怡
日期:2005.3.30
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法:磺酰罗丹明B(sulforhodamineB,SRB)
蛋白染色法
细胞株:MDA-MB-468人乳腺癌
作用时间:72h
结果评定:无效:10-5mol/L<85%
弱效:10-5mol/L≥85%或10-6mol/L>50%
强效:10-6mol/L≥85%或10-7mol/L>50%
对肿瘤细胞生长的抑制率%
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 97.3 97.8 86.6 13.9 2.7 有活性
NC00114962 97.0 97.8 93.0 0 15.4 有活性
NC00114963 96.6 98.1 15.7 0 1.2 有活性
NC00114964 97.3 97.8 96.9 0 0 有活性
试验者:许承辉 杨蔚怡
日期:2005.3.30
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法:四氮唑盐(Methyl-Thiazol-Tetrozolim,MTT)
还原法
细胞株:HCT-116人肠癌
作用时间:72h
结果评定:无效:10-5mol/L<85%
弱效:10-5mol/L≥85%或10-6mol/L>50%
强效:10-6mol/L≥85%或10-7mol/L>50%
对肿瘤细胞生长的抑制率%
浓度(mg/ml)
样品编号 4 1 0.25 0.063 0.016 评价 备注
NC00114961 90.9 97.7 96.8 0 0 有活性
NC00114962 93.7 97.7 98.7 0 0 有活性
NC00114963 95.4 97.7 42.1 0 0 有活性
NC00114964 95.4 97.3 97.0 0 0 有活性
试验者:许承辉 杨蔚怡
日期:2005.3.30
国家新药筛选中心
National Center for Drug Screening
Shanghai,China
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法:四氮唑盐(Methyl-Thiazol-Tetrozolim,MTT)
还原法
细胞株:P-388小鼠白血病
作用时间:48h
对肿瘤细胞生长的抑制率%
浓度(mg/ml) P-388
样品编号 1 0.25 0.063 0.016 0.0039 评价 备
注
115426 99.0 98.9 20.8 0 0 有活性
Claims (8)
1.一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法,其特征在于,方法的步骤如下
1)大头金蝇饲养
采用全透明式蝇房,房内拉设有多根绳子供种蝇歇息,大头金蝇以动物蛋白、红糖、水果为食物,以淫羊藿、加赖氨酸、蛋氨酸、维生素作为催卵素,用集卵盘子收集蝇卵,在集卵盘上放上万分子一的碳酸氨水配制小麦麸,以引诱种蝇集中产卵;
2)蝇蛆饲养
采用通风的蝇蛆房,房顶用透明材料,房中装有换气扇和风扇,窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好,蝇蛆房内放置多个育蛆池,在育蛆池内放入蝇蛆饵料,同时放入上述蝇卵,育蛆池温度控制28 ℃~60℃即可。
2.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法,其特征在于,所述的蝇蛆饵料为青蛙、淡水鱼或猪肺粉碎后在发酵池内发酵4~6天即可。
3.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法,其特征在于,所述的蝇蛆饵料的重量百分比为青蛙15%~30%淡水鱼15%~30%、冬虫夏草0.1%~0.2%、灵芝粉1%~2%、鸡20%~30%、水果25%~35%,其余为植物饲料,粉碎后在发酵池内发酵4~6天即可。
4.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法,其特征在于,所述的蝇蛆饵料的重量百分比为猪肺25%~35%青蛙15%~30%、淡水鱼15%~30%、灵芝粉为1%~2%、人参粉0.1%~0.2%、水果20%~30%,其余为植物饲料,粉碎后在发酵池内发酵5~6天即可。
5.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法,其特征在于,所述的全透明式蝇房体积为10~20立方米,饲养量为30万~50万只种蝇。
6.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法,其特征在于,所述的食物中的动物蛋白35%~45%、红糖20%~30%、水果30%~40%,动物蛋白为蛆浆。
7.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法,其特征在于,所述催卵素中的淫羊藿20%~30%、加赖氨酸15%~25、蛋氨酸15%~25%、维生素25%~35%,维生素为B2。
8.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法,其特征在于,所述的育蛆池由轻烧镁粉30%~50%、氧化镁30%~50%、木渣15%~25%原料制成。
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CNB2005100602774A CN1312989C (zh) | 2005-08-04 | 2005-08-04 | 具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法 |
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CNB2005100602774A CN1312989C (zh) | 2005-08-04 | 2005-08-04 | 具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
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CN1736186A true CN1736186A (zh) | 2006-02-22 |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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