CN1312989C - 具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法 - Google Patents
具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法。方法的步骤如下1)大头金蝇饲养：采用全透明式蝇房，房内拉设有多根绳子供种蝇歇息，以动物蛋白、红糖、水果为食物，以中药淫羊藿、加赖氨酸、蛋氨酸、维生素作为催卵素，用集卵盘子收集蝇卵；2)蝇蛆饲养：采用通风的蝇蛆房，房顶用透明材料，房中装有换气扇和风扇，窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好，蝇蛆房内设有育蛆池，育蛆池温度控制28℃～60℃，在育蛆池内放入蝇蛆饵料，同时放入上述蝇卵。本发明养殖的蝇蛆经过国家新药筛选中心几年来多次检测有对肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、胃癌、等肿瘤细胞生长有很强的抑制率，其抗肿瘤生物活性都在75%～97%。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法。
背景技术
苍蝇是蝇类的统称。蝇在生物学分类系统中属无脊椎动物、节肢动物门、昆虫纲、双翅目。再往下细分，有蝇科、麻蝇科、丽蝇科、寄蝇科、果蝇科、舌蝇科、狂蝇科、食蚜蝇科等数十个科。目前估计有6万种，而且每天都可能有新种发现。我国蝇类有记载的有1500多种。
1、常规养殖：目前国内常规养殖报道很多基本按以下办法为主。
①室外养殖：选择远离生活区，有树荫但有一定光线，野生苍蝇较多的地方，面积根据自己所需的产量而定，养殖房只要能遮雨就可以了，茅草房、水泥瓦房、树皮房都行，房屋四周用纱窗围起来，养殖采用简单的水泥池，每个池面积为1.5-2平方米，池边高20厘米，房里面用无数来回穿叉的绳子连接，以给苍蝇在上面歇息，用新鲜猪粪、鸡粪、豆腐渣等混合，堆成一堆用农膜盖严，发酵24-48小时后即喂养蝇蛆。
由于是室外养殖，集卵物有很多选择，有用死鱼等直接放在粪堆上，也用配制以100公斤粪料配麦麸1公斤，鱼粉2两，花生麸3两，水1.5公斤，混匀后放在粪堆上，集卵后放入水泥池内，第二天早上就全部孵化了一般长到七天至八天就可出池烫死，洗净烘干打粉作饲料。
②室内养殖：大多农场用红眼绿身苍蝇和家中常见的小家蝇，培育，种蝇喂养于棚内，主要喂食红糖水(1∶10)，加少量的奶油香精，喂法是在盆中垫块海绵，将糖水等倒入海绵即可。
种蝇房(棚)，100～300多平方米一间，种蝇和育蛆同在一房(也有笼养种蝇)，有较多窗户、房顶也留数个换气窗，房顶有瓦料也有塑料薄膜、窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好，房内拉设数条绳子供蝇歇息，蝇房地面用水泥分隔成面积为2～3平方米的长方形育蛆池，池边高20～25厘米，池的边角处理设有收蛆桶(小塑料桶)，桶边稍高于池底，长大的蝇蛆化蛹前，绝大多数都自动爬离粪堆，沿池边爬行最终掉入收蛆桶内。
蝇蛆饵料用猪粪、鸡粪、牛粪、酒糟、米糠、豆腐渣等配料，经过发酵喂养蝇蛆，长大后用开水烫死烘干打粉作饲料。也有养殖场用酒糟、米粉等配酵母粉，经消毒，喂养无菌蝇蛆，长大后烘干打粉，经紫外线消毒作为蝇蛆蛋白，用于保健食品或化装品的添加剂。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法。
方法的步骤如下
1)大头金蝇饲养
采用全透明式蝇房，房内拉设有多根绳子供种蝇歇息，大头金蝇以动物蛋白、红糖、水果为食物，以淫羊藿、加赖氨酸、蛋氨酸、维生素作为催卵素，用集卵盘子收集蝇卵，在集卵盘上放上万分子一的碳酸氨水配制小麦麸，以引诱种蝇集中产卵；
2)蝇蛆饲养
采用通风的蝇蛆房，房顶用透明材料，房中装有换气扇和风扇，窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好，蝇蛆房内放置多个育蛆池，在育蛆池内放入蝇蛆饵料，同时放入上述蝇卵，育蛆池温度控制28℃～60℃即可。
所述的蝇蛆饵料为青蛙、淡水鱼或猪肺粉碎后在发酵池内发酵4～6天即可。
或者青蛙15％～30％ 淡水鱼15％～30％、冬虫夏草0.1％～0.2％、灵芝粉1％～2％、鸡20％～30％、水果25％～35％，其余为植物饲料，粉碎后在发酵池内发酵4～6天即可。
或者猪肺25％～35％ 青蛙15～30％、淡水鱼15％～30％、灵芝粉为1％～2％、人参粉0.1％～0.2％、水果20％～30％，其余为植物饲料，粉碎后在发酵池内发酵4～6天即可。
全透明式蝇房体积为10～20立方米，饲养量为30万～50万只种蝇。
食物中的动物蛋白35％～45％、红糖20％～30％、水果30％～40％，动物蛋白为蛆浆。
催卵素中的淫羊藿20％～30％、加赖氨酸15％～25％、蛋氨酸15％～25％、维生素25％～35％，维生素为B2。
育蛆池由轻烧镁粉30％～50％、氧化镁30％～50％、木渣15％～25％原料制成。
本发明养殖的蝇蛆经过国家新药筛选中心几年来多次检测有对肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、胃癌、等肿瘤细胞生长有很强的抑制率，其抗肿瘤生物活性都在75％～97％。几年来通过国家新药筛选中心的多次生物活性检测，我们提供的特种蝇蛆全虫粉具有抗癌等的生物活性。检测结果证明我们采用这种蛆虫的活体吸收、体内整合、组成特种蝇蛆全虫粉的方法是成功的。
具体实施方式
一.苍蝇(蝇蛆)房场地
选择远离生活区，无环境污染，植被良好，取用水方便地方建造蝇蛆房(棚)。
苍蝇房材料以木材为主每间有10～20立方米，有较多窗户，房顶也留数个换气窗，房顶用透明材料，房中装有换气扇和风扇，窗户、换气窗与房外相通的地方用多层纱窗严实封好，房内拉设来回穿叉的绳索供种蝇歇息。蝇蛆房地面用轻烧镁粉30％～40％、氧化镁10％～30％、木渣5％～15％原料制成60×40×50的长方体育蛆池，具有透气性能好。育蛆池温度控制28℃-60℃。池边角处埋设有收蛆桶(小塑料桶)，桶边稍高于地面，长大的蝇蛆化蛹前，绝大多数都自动爬离饵料，沿池边爬行最终掉入收蛆桶内(不健康的蝇蛆、死亡蝇蛆和健康蝇蛆形成自然分离)。
二.蝇种选择
目前，从国内到国际研究，饲养苍蝇一般都选用家蝇，因为家蝇比较容易养，饲养成本比较低，而我们所选用的是：“大头金蝇”(英文名：chrgsomgiamegacephala(Fabricius))，此蝇经浙大生命科学院鉴定。
该蝇种是我们经过多年选择，最终确定。它具有健壮、生殖率高、抗病能力强等特点。经过我们近几年的培养，选出了一批优良蝇种，使其不会退化确保功效。
三.种蝇的饲养
“大头金蝇”特点，好动，不易人工饲养，饲养要求高，这里主要的是其对温度条件要求很高，在25℃～40℃内为最佳。全透明式蝇房要求体积10～20立方米，饲养量30万～50万只种蝇，房内拉设有多根绳子供种蝇歇息。大头金蝇以动物蛋白35％、40％、45％、红糖20％、25％、30％、水果30％、35％、40％为食物，其中动物蛋白为蛆浆。以中药淫羊藿20％、25％、30％、加赖氨酸15％、20％、25％、蛋氨酸15％、20％、25％、维生素25％、30％、35％作为“催卵素”，其中维生素为B2。用集卵盘子收集蝇卵，在集卵盘子上放上万分子一的碳酸氨水配制小麦麸适量，以引诱种蝇集中产卵。
四.蛆的饲养
采用通风的蝇蛆房，房顶用透明材料，房中装有换气扇和风扇，窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好，蝇蛆房内放置多个蝇蛆池，在育蛆池内放入蝇蛆饵料，同时放入上述蝇卵，育蛆池温度控制28℃～60℃即可。
1.蝇房地面放有轻烧氧化镁粉配木渣制成60×40×50的长方体蝇蛆池，池内放入经过发酵的饵料。
1)饵料选择A：青蛙15％、23％、30％ 淡水鱼15％、23％、30％、冬虫夏草0.1％、0.15％、0.2％、灵芝粉1％、1.5％、2％、鸡20％、25％、30％、水果25％、30％、35％，其余为植物饲料，粉碎后在发酵池内发酵4、5、6天即可。
2)饵料选择B：猪肺25％、30％、35％ 青蛙15％、23％、30％、淡水鱼15％、23％、30％、灵芝粉为1％、1.5％、2％、人参粉0.1％、0.15％、0.2％、水果20％、25％、30％，其余为植物饲料，粉碎后在发酵池内发酵4、5、6天即可。
3)蝇蛆饵料C为青蛙、淡水鱼或猪肺粉碎后在发酵池内发酵4、5、6天即可。
4)发酵：用水泥砌成120×60×50发酵池，将粉碎后的配方饵料倒入发酵池，加入少量发酵粉和EM菌液并拌匀，用塑料薄膜密封，发酵4～6天即可喂养蝇蛆，发酵能杀灭饵料中的致病菌和寄生虫卵，还可消除饵料在蝇蛆房直接发酵产生的有害气体，以免对蝇蛆造成危害。
5)用以上配方喂养的蝇蛆经国家新药筛选中心多次检测对肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、胃癌、肺癌(附表)肿瘤细胞生长有很强的抑制率，其抗肿瘤生物活性都在75％～97％。
五.加工
将收集的蝇蛆漂洗冷冻，在适当的温度下进行烘干，去除虫体无效杂物、打粉，经紫外线消毒灭菌，没有经过任何分离就能达到这种活性效果，它完全有可能以中药单方进入市场，造福人类。
我们提供的特种蝇蛆全虫粉，具有抗癌等生物活性，检测结果证明我们采用这种蛆虫活体吸收、体内整合、组成特种蝇蛆全虫粉的方法是成功的。
国家新药筛选中心
National Center for Drug Screening
Shanghai，China
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细 胞 株：BEL-7402人肝癌
作用时间：72h
对肿瘤细胞生长的抑制率％
| 浓度(mg/ml)样品编号 | BEL-7402 | 评价 | 备注 | ||||
| 1 | 0.25 | 0.063 | 0.016 | 0.0039 | |||
| 115426115427 | 88.592.1 | 95.470.6 | 20.113.0 | 4.12.5 | 2.36.1 | 有活性有活性 | |
日期：2003.3.7
国家新药筛选中心
National Center for Drug Screening
Shanghai，China
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细 胞 株：A-549人肺癌
作用时间：72h
对肿瘤细胞生长的抑制率％
| 浓度(mg/ml)样品编号 | A-549 | 评价 | 备注 | ||||
| 1 | 0.25 | 0.063 | 0.016 | 0.0039 | |||
| 115426115427 | 93.295.4 | 97.798.2 | 4.00 | 00 | 00 | 有活性有活性 | |
日期：2003.3.7
国家新药筛选中心
National Center for Drug Screening
Shanghai，China
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细 胞 株：A-549人肺癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
| 浓度(mg/ml)样品编号 | 4 | 1 | 0.25 | 0.063 | 0.016 | 评价 | 备注 |
| NC00114961NC00114962NC00114963NC00114964 | 95.095.391.494.8 | 97.397.096.897.2 | 79.452.02.594.3 | 002.50 | 3.7000 | 有活性有活性有活性有活性 |
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2004.11.30
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细 胞 株：BEL-7402人肝癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
| 浓度(mg/ml)样品编号 | 4 | 1 | 0.25 | 0.063 | 0.016 | 评价 | 备注 |
| NC00114961NC00114962NC00114963NC00114964 | 84.392.686.285.9 | 96.695.494.394.3 | 23.697.0090.6 | 0000 | 3.0000 | 有活性有活性有活性有活性 |
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2004.11.30
国新药筛选中心
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：四氮唑盐(Methyl-Thiazol-Tetrozolim，MTT)还原法
细 胞 株：HL-60人白血病
作用时间：72h
对肿瘤细胞生长的抑制率％
| 浓度(mg/ml)样品编号 | 4 | 1 | 0.25 | 0.063 | 0.016 | 评价 | 备注 |
| NC00114961NC00114962NC00114963NC00114964 | 92.889.46.388.0 | 10062.710.599.3 | 1.21.89.040.7 | 001.36.4 | 0000 | 有活性有活性无活性有活性 |
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2004.11.30
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细 胞 株：HO-8910人卵巢癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
| 浓度(mg/ml)样品编号 | 4 | 1 | 0.25 | 0.063 | 0.016 | 评价 | 备注 |
| NC00114961NC00114962NC00114963NC00114964 | 91.189.292.886.4 | 92.994.390.191.1 | 93.064.597.295.9 | 1.217.446.624.5 | 020.25.9.8 | 有活性有活性有活性有活性 |
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2005.3.30
国家新药筛选中心
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细 胞 株：SGC-7901人胃癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
| 浓度(mg/ml)样品编号 | 4 | 1 | 0.25 | 0.063 | 0.016 | 评价 | 备注 |
| NC00114961NC00114962NC00114963NC00114964 | 92.892.190.881.0 | 96.495.696.296.9 | 95.092.6089.9 | 10.8000.6 | 25.13.31.73.1 | 有活性有活性有活性有活性 |
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2005.3.30
国新药筛选中心
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细胞株：HELA人宫颈癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
| 浓度(mg/ml)样品编号 | 4 | 1 | 0.25 | 0.063 | 0.016 | 评价 | 备注 |
| NC00114961NC00114962NC00114963NC00114964 | 54.566.3 | 92.290.495.793.4 | 95.695.920.095.0 | 19.5000 | 0000 | 有活性有活性有活性有活性 |
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2005.3.30
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)
蛋白染色法
细 胞 株：MDA-MB-468人乳腺癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
| 浓度(mg/ml)样品编号 | 4 | 1 | 0.25 | 0.063 | 0.016 | 评价 | 备注 |
| NC00114961NC00114962NC00114963NC00114964 | 97.397.096.697.3 | 97.897.898.197.8 | 86.693.015.796.9 | 13.9000 | 2.715.41.20 | 有活性有活性有活性有活性 |
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2005.3.30
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：四氮唑盐(Methyl-Thiazol-Tetrozolim，MTT)还原法
细 胞 株：HCT-116人肠癌
作用时间：72h
结果评定：无效：10-5mol/L＜85％
弱效：10-5mol/L≥85％或10-6mol/L＞50％
强效：10-6mol/L≥85％或10-7mol/L＞50％
对肿瘤细胞生长的抑制率％
| 浓度(mg/ml)样品编号 | 4 | 1 | 0.25 | 0.063 | 0.016 | 评价 | 备注 |
| NC00114961NC00114962NC00114963NC00114964 | 90.993.795.495.4 | 97.797.797.797.3 | 96.898.742.197.0 | 0000 | 0000 | 有活性有活性有活性有活性 |
试验者：许承辉 杨蔚怡
日期：2005.3.30
国家新药筛选中心
National Center for Drug Screening
Shanghai，China
抗肿瘤生物活性体外筛选试验
筛选方法：四氮唑盐(Methyl-Thiazol-Tetrozolim，MTT)还原法
细 胞 株：P-388小鼠白血病
作用时间：48h
对肿瘤细胞生长的抑制率％
| 浓度(mg/ml)样品编号 | P-388 | 评价 | 备注 | ||||
| 1 | 0.25 | 0.063 | 0.016 | 0.0039 | |||
| 115426 | 99.0 | 98.9 | 20.8 | 0 | 0 | 有活性 | |
Claims (8)
1.一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，方法的步骤如下：
1)大头金蝇饲养
采用房顶透明式蝇房，房内拉设有多根绳子供种蝇歇息，大头金蝇以动物蛋白、红糖、水果为食物，以淫羊藿、赖氨酸、蛋氨酸、维生素作为催卵素，用集卵盘子收集蝇卵，在集卵盘上放上万分子一的碳酸氨水配制小麦麸，以引诱种蝇集中产卵；
2)蝇蛆饲养
采用通风的蝇蛆房，房顶用透明材料，房中装有换气扇和风扇，窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好，蝇蛆房内放置多个育蛆池，在育蛆池内放入蝇蛆饵料，同时放入上述蝇卵，育蛆池温度控制28℃～60℃，育蛆池由轻烧镁粉30％～50％、氧化镁30％～50％、木渣15％～25％原料制成，蝇蛆饵料的重量百分比组份为青蛙15％～30％、淡水鱼15％～30％、冬虫夏草0.1％～0.2％、灵芝粉1％～2％、鸡20％～30％、水果25％～35％，其余为其它植物饲料，粉碎后在发酵池内发酵4～6天。
2.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述的蝇房体积为10～20立方米，饲养量为30万～50万只种蝇。
3.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述的食物中的动物蛋白35％～45％、红糖20％～30％、水果30％～40％，动物蛋白为蛆浆。
4.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述催卵素中的淫羊藿20％～30％、赖氨酸15％～25％、蛋氨酸15％～25％、维生素25％～35％，维生素为B2。
5.一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，方法的步骤如下：
1)大头金蝇饲养
采用房顶透明式蝇房，房内拉设有多根绳子供种蝇歇息，大头金蝇以动物蛋白、红糖、水果为食物，以淫羊藿、赖氨酸、蛋氨酸、维生素作为催卵素，用集卵盘子收集蝇卵，在集卵盘上放上万分子一的碳酸氨水配制小麦麸，以引诱种蝇集中产卵；
2)蝇蛆饲养
采用通风的蝇蛆房，房顶用透明材料，房中装有换气扇和风扇，窗户、换气窗与房外相通的地方用纱窗严实封好，蝇蛆房内放置多个育蛆池，在育蛆池内放入蝇蛆饵料，同时放入上述蝇卵，育蛆池温度控制28℃～60℃，育蛆池由轻烧镁粉30％～50％、氧化镁30％～50％、木渣15％～25％原料制成，蝇蛆饵料的重量百分比组份为：猪肺25％～35％、青蛙15％～30％、淡水鱼15％～30％、灵芝粉1％～2％、人参粉0.1％～0.2％、水果20％～30％，其余为其它植物饲料，粉碎后在发酵池内发酵5～6天。
6.根据权利要求5所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述的蝇房体积为10～20立方米，饲养量为30万～50万只种蝇。
7.根据权利要求5所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述的食物中的动物蛋白35％～45％、红糖20％～30％、水果30％～40％，动物蛋白为蛆浆。
8.根据权利要求5所述的一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法，其特征在于，所述催卵素中的淫羊藿20％～30％、赖氨酸15％～25％、蛋氨酸15％～25％、维生素25％～35％，维生素为B2。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2005100602774A CN1312989C (zh) | 2005-08-04 | 2005-08-04 | 具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2005100602774A CN1312989C (zh) | 2005-08-04 | 2005-08-04 | 具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法 |
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