发明内容
本发明人通过对石刁柏提取物的制备工艺和相应抗肿瘤作用的实验研究,发明出一种综合利用石刁柏,完整保留原药材的有效成分的提取制备方法,为社会提供一种药效确切的用于肿瘤治疗或辅助治疗的天然石刁柏提取物制剂。
本发明的目的在于提供一种用于肿瘤治疗或辅助治疗的天然石刁柏提取物及其制备方法。
本发明另外一个目的是提供以该提取物单独或作为组合物原料组成制成符合制剂要求的药物或保健食品。
本发明的石刁柏提取物,其特征在于,是通过以下方法制备的,该提取物的制备,包括以下步骤:
(1)新鲜石刁柏压榨取汁,得汁液;
(2)对步骤(1)所剩石刁柏药渣进行提取,得提取物。
还包括将步骤(1)中得到的汁液进行浓缩,得浓缩物;对步骤(2)得到的提取物进行浓缩,得浓缩物的步骤。
还包括将步骤(1)得到的浓缩物和步骤(2)得到的浓缩物混合的步骤。
还包括将混合的浓缩物进一步浓缩的步骤。
以上所述浓缩的方法选自:自然干燥、加热干燥、减压浓缩、喷雾干燥或冷冻干燥。
步骤(2)中所述提取的方法,选自:浸泡、煎煮、渗漉、萃取、回流。所述提取的方法中采用了溶剂,所述溶剂选自:水、醇、醚、酮或酯。
优选的是步骤(2)中剩余石刁柏药渣选用水加热回流法提取,加入5-15倍量水,加热提取1-4次,每次0.5-3小时。
本发明的石刁柏提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)新鲜石刁柏压榨取汁,得汁液;
(2)对步骤(1)所剩石刁柏药渣进行提取,得提取物。
优选的步骤是:
(1)选取新鲜石刁柏,除去杂质,洗净;
(2)由(1)所得新鲜石刁柏,压榨取汁,所得石刁柏汁经自然蒸发、减压浓缩或冷冻干燥,得到相应石刁柏流浸膏A;剩余石刁柏药渣采用水、乙醇或醇水混合溶媒,渗漉或加热回流提取;加入5-15倍量溶剂,加热回流提取1-4次,每次0.5-3小时;提取物经自然干燥、减压浓缩、喷雾干燥或冷冻干燥等常规方法除去溶剂,得到相应石刁柏流浸膏B;
(3)合并由2所得石刁柏流浸膏A和B,经选自自然蒸发、减压浓缩、真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥的步骤,除尽溶剂,即得石刁柏提取物。
以上步骤也可通过以下方法描述:
1、选取新鲜石刁柏,除去杂质,洗净。
2、提取:由1所得新鲜石刁柏,压榨取汁,所得石刁柏汁经自然蒸发、减压浓缩或冷冻干燥,优选减压浓缩,得到相应石刁柏流浸膏A。剩余石刁柏药渣可采用水、醇(小于五碳)或醇水混合溶媒,渗漉或加热回流提取,优选水加热回流提取。加入5-15倍量溶剂,加热回流提取1-4次,每次0.5-3小时;优选10倍量溶剂,加热回流提取2次,每次2小时。提取物经减压浓缩或冷冻干燥,优选减压浓缩,得到相应石刁柏流浸膏B。
3、合并由2所得石刁柏流浸膏A和B,经进一步自然蒸发、减压浓缩、真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥,优选喷雾干燥,除尽溶剂,即得石刁柏提取物。石刁柏提取物也可根据制剂需要,由以下方法制备:合并由2所得石刁柏流浸膏A和B,加适量蒸馏水或其它溶媒,稀释至所需浓度,如相当于石刁柏原药材1-10g/ml等。
本发明的特征在于其制备方法步骤2中新鲜石刁柏经压榨取汁和药渣再提取共两次提取步骤。
本发明的特征在于制得的提取物中含有槲皮素、芦丁、山奈素等黄酮类成分和yamogenin等皂苷类成分。
如上制备所得石刁柏提取物可作为药物或保健食品的活性成分,应用于制造药物或保健食品组合物,在制备所述药物或保健食品组合物时可以加入适宜的常用的药物或保健食品辅料或赋型剂,可以按药物或保健食品制剂学常规工艺制成符合制剂要求的任何一种药物剂型或保健食品剂型,如片剂、胶囊、颗粒剂、口服液或注射剂等。
本发明的优点在于该提取物经过现代科学方法加以提取、浓缩、精制而成,工艺简单易行、安全无试剂污染、无环境污染,完整保留了原药材的有效成分,并且有效成分含量增加,提高了利用率,为社会提供了一种具有明确的抗肿瘤、提高机体免疫力的肿瘤治疗或辅助治疗的天然药物和保健食品。
本发明的内容,是通过对石刁柏有效部位的药理筛选、成分分离基础上,对其制备工艺进行研究和优化完成的。
1、刁柏有效部位的药理筛选结果和成分分离
我们应用体外细胞培养,测定了石刁柏石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水等各极性部位对人宫颈癌细胞(HELA)、人肝癌细胞(SMMC-7721)的细胞毒作用,结果表明各极性部位均有一定细胞毒活性。同一剂量下药理活性以全提取液最佳。
我们的化学分析结果表明,石刁柏的鲜汁和残渣乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水等各极性部位化学组成基本相同。从二者合并后的各部分中,分离得到槲皮素、芦丁、山奈素等黄酮类成分和yamogenin皂苷元等主要活性成分。
2、刁柏提取物的制备工艺研究结果
现有的石刁柏提取物产品,主要均以芦笋鲜汁为主。另有研究表明,芦笋茎皮含有多种甾体皂苷,也具有较好的抗肿瘤活性。结合我们的药理筛选结果,我们对石刁柏采用了先提取鲜汁、再提取药渣的二步提取法,所获得的石刁柏提取物,不仅提高了产率,而且最大限度地保留了石刁柏中的有效成分。同时,该提取物为固体粉末,易于按常规方法加工为片剂、颗粒剂、胶囊、口服液等其它制剂。
3、石刁柏的药理研究结果(试验数据)
我们的药理研究结果发现,本发明的石刁柏提取物和用该提取物制备的组合物对体外人宫颈癌细胞(HELA)、人肝癌细胞(SMMC-7721)感染的细胞增殖均有一定抑制作用,对S180和EAC动物移植性肿瘤也有显著抑制作用。研究结果证明本发明的石刁柏提取物对各种肿瘤尤其是肝癌和宫颈癌具有治疗作用,并具有增强荷瘤动物免疫功能的功效。
具体实施方式
本发明所述的石刁柏提取物,以及提取物药理活性是按如下实施例所表示的方法制造或发现的,所涉及到的方法是本领域的技术人员能够掌握和运用的技术手段。但以下实施例不得理解为任何意义上的对本发明权利要求的限制。
实施例1:石刁柏提取物的制备(1)
选取新鲜石刁柏1kg,除去杂质,洗净,压榨取汁,所得石刁柏汁(500ml)减压浓缩,得到相应石刁柏流浸膏A(36g)。剩余石刁柏药渣分别加入5000ml水加热回流提取2次,每次2小时,趁热用纱布过滤,滤液减压浓缩,得到相应石刁柏流浸膏B(10g)。合并所得石刁柏流浸膏A和B,经进一步减压浓缩,真空干燥,即得石刁柏提取物18g,产率约1.8%。
实施例2:石刁柏提取物的制备(2)
选取新鲜石刁柏25kg,除去杂质,洗净,压榨取汁,所得石刁柏汁(101)60℃减压浓缩,得到相应石刁柏流浸膏A(850g)。剩余石刁柏药渣分别依次加入100l水加热回流提取2次,每次2小时,趁热过滤,滤液减压浓缩,得到相应石刁柏流浸膏B(240g)。合并所得石刁柏流浸膏A和B,经减压浓缩,真空干燥,即得石刁柏提取物500g,产率2.0%。
实施例3:芦笋片的制备
处方:
石刁柏提取物150g,淀粉70g、糊精90g、蔗糖50g,硬脂酸镁3.6g
制法:取由实施例2制备的石刁柏提取物,加淀粉、糊精、蔗糖,混匀,制粒,80℃以下干燥,加入硬脂酸镁,混合均匀,压片,包薄膜衣,共制为1000片。
实施例4:芦笋胶囊的制备
处方:
石刁柏提取物150g,淀粉120g、糊精20g、乳糖80g,硬脂酸镁3.6g
制法:取由实施例2制备的石刁柏提取物,加淀粉、糊精、乳糖,混匀,制粒,80℃以下干燥,加入硬脂酸镁,混合均匀,装入胶囊,共制为1000粒。
实施例5:芦笋颗粒剂的制备
处方:石刁柏提取物120g,乳糖880g
制法:取由实施例2制备的石刁柏提取物,加乳糖,混匀,制粒,80℃以下干燥,共制为1000g,5g/袋。