CN1684591A - 肽/氨基酸的生产方法、通过所述方法生产的肽/氨基酸及其应用 - Google Patents

肽/氨基酸的生产方法、通过所述方法生产的肽/氨基酸及其应用 Download PDF

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Abstract

根据第一方面，提供用于生产包含游离氨基酸和短肽的无蛋白制品的方法，其中将蛋白原料粉碎，用内源酶水解，通过不同的分离过程，包括使蛋白质残留物凝固，以便获得所需要的产品。本发明还包括所得产品及其用途。根据第二方面，生产富含游离氨基酸和短肽的蛋白制品，其中将蛋白原料研磨并用内源酶水解，其中水解产物经过各种分离过程。所得的产品包含蛋白质、短肽和长肽、游离氨基酸和矿物质并具有低脂肪含量和低含盐量。根据第三方面，进行含蛋白原料的水解和氨基酸/肽的分离，其中所述水解通过使用含蛋白原料的内源酶来实现。使水解产物通过膜滤器，其中肽/氨基酸随透过液物流流出，同时活性酶连续分解任何沉积在膜表面的蛋白质残留物。所述酶与截留液一起回流进行水解。此外，描述了氨基酸和肽制品以及油制品，并且公开了它们的用途。

Description

肽/氨基酸的生产方法、通过所述方法生产的肽/氨基酸及其应用 本发明涉及以下方面：
a)从动物原料或水产原料生产含有肽、游离氨基酸和矿物质的无蛋白制品的方法，以及所述产品及其作为动物饲料和/或在生物技术、制药和食品加工工业的产品中的用途。还描述了作为上述方法结果的油制品。
b)富含游离氨基酸和短肽的蛋白制品的生产方法，所获得的产品及其作为动物饲料和/或在兽药用途的产品中的用途以及在食品加工工业中的用途。还描述了作为上述方法结果的油制品。
c)从动物原料或水产原料中回收肽、游离氨基酸和矿物质的方法。
行业中已知通过酸解，并使用既有天然的又有合成的生物技术酶和/或化学/技术酶、浓缩酶，来生产肽和氨基酸。本发明是在生产药品质量、生物技术产品质量、食品质量或兽药质量产品的工业过程中利用动物或水产原料天然存在的分解酶的一种方法。
术语“药品质量”是指静脉用产品和分为人用和动物用药或天然药物的产品。
术语“生物技术产品质量”是指可用作例如培养细胞、细菌、真菌和藻类中的培养基或催化剂的产品。
术语“食品质量”是指或者作为添加剂或者作为独立产品供人消费用的产品。
术语“兽药质量”是指归类为动物用药的产品。
本发明也可以任选用于生产添加剂形式的或用作独立产品的饲料。
氨基酸和肽在制药、天然药物和兽医医药工业中作为例如静脉内食物和用于缓解某些损伤的特殊食物产品的要素是众所周知的。迄今为止，它主要是来自血浆的提取物和利用已在该领域中使用的猪胰腺酶和牛胰腺酶生产的蛋白水解产物。本发明为制药工业提供获得迄今未知品质的一定量的氨基酸和肽的可能性。
例如，当要生产高效培养基时，氨基酸和超短肽还用于生物技术工艺过程。对所有培养单细胞生物或培养来自高等生物的细胞底物的工业限制是优等质量培养基的供应。缺乏或高价格是限制因素。此外，用生物技术方法生产的氨基酸或肽通常含有生长抑制物质，这些物质通过使用本发明方法生产的产品可以避免。天然氨基酸和通过描述的本发明工艺过程生产的生物微量营养素/矿物质的各种组合，得到用于制备生物技术工业用培养基的独特产品。此外，所述技术可再循环多种培养物中的蛋白质成为后来可再使用的氨基酸和肽。
肽/氨基酸在食品加工工业作为粘合剂、乳化剂、矫味添加剂等使用。用量相当可观并且日益增长。食品加工工业中使用最多的肽和氨基酸得自大豆和乳。大豆、特别是乳的氨基酸和肽已知会引起变态反应，该变态反应只能通过利用另外的不得自这些来源的肽/氨基酸组成，或者已充分改性使得不产生这些反应的大豆或乳的肽/氨基酸组成才得以避免。因此，迫切需要一种提供也可来源于大豆和/或乳的氨基酸和肽组成但却不会引起变态反应的方法。因为没有可保持所述产品的功能性而同时除去不需要的降低品质组分如盐和脂肪的提取技术，所以大多数的动物源性产品没有达到相同的利用度。
得自不同来源的许多不同组成的蛋白质、肽和氨基酸都可用于生产动物饲料。肽、氨基酸和蛋白质的组成在生产饲料中也是非常重要的，因为动物生长潜力取决于平衡的饲料摄取。因此，该领域也迫切需要生产任何为动物提供最佳生长条件的所需组成的方法。
在下文中，术语“内源”酶用来表示来源于蛋白制品内的酶，相反，“外源”酶是在传统水解期间加入到蛋白原料中的外部酶。“外源”酶的一个实例是“Deterzyme APY”，它是通过嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alcalophilus)的控制发酵制备的细菌蛋白酶(E.C.3.4.21)，并且可从许多供应商处购买。术语“内源”酶还用于指从其它相似的天然酶材料或原料、优选从冷血动物中提取的酶。
术语“水解产物”在下文中用来指加工过的原料，即加热过和调节过pH的原料和水的混合物构成水解产物。具体适用于本发明的a)和b)两方面。
在本发明领域中有许多专利，例如RU 2103360，它描述了培养真核细胞的营养培养基和从蛋白酶水解制备的鱼内脏制备水解产物的方法。这种水解过程在氢氧化钠调节过的高pH下，通过利用温度灭活、过滤和干燥进行，其中鱼下脚与蒸馏水按1∶1的比率进行混合。水解在+40℃至+42℃的温度下进行，直到获得氨基氮的重量百分比为5.5-6-5％，游离氨基酸的重量百分比为50-60％。
SU 1755417还公开了一种在发酵罐中用鱼原料生产水解产物的方法，即向发酵罐中先加入发酵准备物，然后将所生产的水解产物过滤并干燥，其中使用定期向发酵罐中进料的未绞碎原料。
RU 1559466描述了水解产物的生产方法，所述方法需要将鱼类产品或其加工后的鱼粕粉碎，与水混合，将混合物加热，加入蛋白酶解发酵制备物，发酵，过滤并干燥，其中原料和水按2∶1-1∶1的比率进行混合，并加热到+40℃至+45℃的温度，同时利用外源酶原枯草菌素(protosubtilin)G3x发酵0.5-2.5小时。
参考文献还包括FR 2168259，其描述一种通过在不加入水的情况下将新鲜鱼绞碎成鱼浆进行鱼蛋白的酶促水解。加入外源酶并根据所需溶解度将所述鱼浆大约水解15小时。所得产物在+90℃至+100℃稳定5-20分钟，然后过滤，巴氏灭菌和离心。所述工艺过程得到有高营养价值的产品。
如上所述，已知有不同的技术用于从适合食品生产的鱼类中释放蛋白质、肽和氨基酸。此外，还已知既可从植物来源又可从动物来源的原料中制备油/脂肪。
根据方面a)，本发明的目的是提供基于使用不加入任何非天然物料的天然酶，来生产无蛋白的蛋白水解产物的方法。该方法不同于其它利用来自细菌培养物等许多不同来源的酶的方法。
本发明的另一个目的是本发明工艺过程应提供完全不含蛋白质和DNA和其它变应原性物质并且不会负面影响原料利用的产品。该方法还预期会降低成品的脂肪到低水平，可排除利用鱼原料的不利条件。预期可生产用于许多不同领域的产品，这些领域已限制使用由已知方法生产的产品或者因为它们的脂肪含量而不可使用。
本发明的另一个目的是充分利用原料并且确保与生产相关的环境压力为最小限度。
因此，根据本发明的方面a)，提供从含蛋白原料中回收肽/氨基酸和油/脂肪的方法，其特征在于所述方法包括下述步骤：
a.把原料研磨；
b.将研磨的原料加热到40-62℃的温度范围，优选45-58℃；
c.任选在加热步骤之前和/或之后，从原料中分离出油/脂肪，以便获得第一种油制品；
d.加入水，其中水的温度同原料的温度大致或完全相同，并且其中水的pH通过加入钙进行调节；
e.用内源酶水解原料，以便制备水解产物；
f.任选在水解步骤期间，加入pH调节剂，以便保持水解产物的所需pH值；
g.将水解产物加热到75-100℃，优选85-95℃；
h.从水解产物中提取大颗粒，包括可返回水解步骤的未水解蛋白；
i.任选分离脂肪/油，以便获得第二种油制品；
J.使所得蛋白凝固；
k.提取凝固的蛋白；
l.任选分离脂肪/油，以便获得第三种油制品；
m.任选浓缩剩余的氨基酸和短肽；和
n.任选干燥浓缩物，以便获得短肽和氨基酸干制品。
根据本发明方面a)，所述方法的优选实施方案在从属权利要求2-6中作出说明。
根据本发明的方法便于生产具有低脂肪含量，优选小于0.1％脂肪含量的肽和氨基酸制品。此外，所生产的制品含有生物源性天然矿物质。所述制品的含盐量小于1％。
本发明还包括本发明方法之一在生产生物技术产品、药品、食品和饲料中的用途，如相应的权利要求7-10中所公开的。
本发明还包括本发明方法在生产羟基磷灰石中的用途，如权利要求11中所公开的。
本发明还使得根据本发明方法制备的氨基酸/肽的生产成为可能，并具有如权利要求12中所公开的特征。
还提供根据本发明方法生产的羟基磷灰石，并且其特征在于它不含有任何变应原和痕量DNA，如权利要求13中所公开的。
另外，还提供根据本发明方法生产的油品，并且其特征在于它不含有变应原和痕量DNA，如权利要求14中所公开的。
一方面，本发明解决了具有宽质量谱的产品的生产问题，所述质量谱从用于食品到用于例如符合药品要求的产品等各不相同。
另一方面，本发明通过利用原料的内源酶和适应这些酶的生产条件，解决了这个问题。
本发明工艺过程本质上不同于现有技术的水解工艺过程，因为本发明工艺过程可以实现或者能够实现：
-不需要用任何添加剂例如氯仿来防止不需要的细菌生长；
-不需要加入氢氧化钠；
-可以热回收和冷回收油/脂肪；
-在为工艺过程选择原料中，通过选择特殊的原料，可以控制成品中的游离氨基酸和肽谱；
-借助应用工艺参数例如温度和pH，可以控制所述工艺过程的结果，如氨基酸和肽的组成；
-在水解工艺过程中不需要加入酸；
-具有不同原料的灵活组合；
-通过利用合适的浓缩步骤来分离产物部分；并且在于
-通过凝固提取不完全水解的蛋白和大肽；
-通过过滤并分离所凝固的蛋白，
-通过应用合适的浓缩技术，和
-通过利用更短的水解时间，
从而获得含有生物源性矿物质和微量营养素的产品。
根据方面b)，本发明的目的是提供基于使用不加入任何非天然物料的天然酶，来生产含游离氨基酸以及短肽和长肽的蛋白制品的方法。该方法不同于其它利用来自细菌培养物等许多不同来源的酶的方法。
此外，该方法还预期会降低成品的脂肪到低水平，可排除利用鱼原料的不利条件。预期可提供能够用于许多不同领域的产品，这些领域已限制使用由已知方法生产的产品或者因为它们的脂肪含量不可使用。
还有一个目的是充分利用原料并且确保与生产相关的环境压力为最小限度。
因此，如权利要求15中所公开的，本发明提供一种用于从一种或多种含蛋白半成品中回收含有肽和游离氨基酸的蛋白制品的方法，其特征在于所述方法包括下述步骤：
a.把原料研磨；
b.将研磨的原料加热到40-62℃的温度范围，优选45-58℃；
c.任选在加热步骤之前和/或之后，从原料中分离出油/脂肪，以便获得第一种油制品；
d.加入水，其中水的温度同原料的温度大致或完全相同，并且其中水的pH值通过加入钙进行调节；
e.用内源酶水解原料，以便制备水解产物；
f.任选在水解步骤期间，加入钙、氮气或骨粉等pH调节剂，以便保持水解产物的所需pH值。不使用苛性碱溶液进行pH调节；
g.将水解产物加热到75-100℃，优选85-95℃；
h.从水解产物中提取大颗粒，包括未水解蛋白；
i.任选分离脂肪/油，以便获得第二种油制品；
j.提取蛋白质和长肽；
k.浓缩剩余的氨基酸和肽；
l.将蛋白质和长肽加入到以上浓缩物中，以便获得蛋白制品；和
m.任选干燥所得蛋白制品，以便获得含有蛋白质、游离氨基酸和短肽及长肽的干制品。
根据本发明方面b)，所述方法的优选实施方案在从属权利要求16-22中作出说明。
通过本发明方法生产的蛋白制品的特征在于它含有5-95％(重量)的游离氨基酸，优选30-60％(重量)的游离氨基酸，同时剩余的95-5％包含蛋白质和矿物质，所述矿物质是生物源性天然矿物质。
此外，所述蛋白制品的脂肪含量小于0.5％(重量)并且含盐量低，通常小于1％(重量)。
本发明还包括本发明的方法在生产兽医药品、食品和饲料中的用途，如在相应的权利要求23、24和25中所公开的。
还提供一种油品，其特征在于它是根据本发明方法生产的第一种油制品，并且具有食品质量，如权利要求26中所公开的。
一方面，本发明的方面b)跟其它方面一道解决了提供具有宽质量谱的产品问题，所述质量谱从用于食品生产到用于例如药品质量的产品等各不相同。
另一方面，根据方面b)，本发明通过利用鱼的内源酶和适合这些酶的生产条件，解决这个问题。
本发明工艺过程本质上不同于现有技术的水解工艺过程，因为本发明工艺过程可以实现或者能够实现：
-不需要用任何添加剂例如氯仿来防止不需要的细菌生长；
-不需要加入氢氧化钠；
-可以热回收和冷回收油/脂肪；
-在为工艺过程选择原料中，通过选择特殊的原料，可以控制成品中的游离氨基酸和肽谱；
-借助应用工艺参数例如温度和pH，可以控制所述工艺过程的结果，如氨基酸和肽的组成；
-在水解工艺过程中不需要加入酸；
-具有不同原料的灵活组合；
-通过利用合适的浓缩步骤来分离产物部分；并且在于
-通过应用合适的浓缩技术；和
-通过利用更短的水解时间；
从而获得含有生物源性矿物质和微量营养素的产品。
根据所描述的方面a)和方面b)的方法是天然蛋白质的水解，其目的在于获得具有不同短肽和游离氨基酸组成的干成品。所述工艺过程获得含有5％至100％游离氨基酸、任选不含有蛋白质和长肽(方面(a))的成品。另外，所述方法描述了油/脂肪的回收。
根据本发明的方面c)，目的是提供基于使用不加入任何非天然物料的天然酶，来生产蛋白水解产物的方法。该方法不同于其它使用来自细菌培养物等许多不同来源的酶的方法。
此外，本发明的一个目的是根据方面c)的工艺过程应该提供完全不含蛋白质和DNA和其它变应原性物质并且不会负面影响原料利用的产品。该方法还预期会降低成品中的脂肪低水平，可排除使用鱼原料不利条件。预期可生产用于许多不同领域的产品，该领域已限制使用由已知方法生产的产品或者因为它们的脂肪含量不可使用。
本发明的另一个目的是充分利用原料并且确保与生产相关的环境压力为最小限度。
因此，根据本发明的方面c)，提供如权利要求27中所公开的，用于从含蛋白原料中回收肽/氨基酸和油/脂肪的方法，其特征在于所述方法包括下述步骤：
a.把原料研磨；
b.将研磨的原料加热到40-62℃的温度范围，优选45-58℃；
c.任选在从原料中分离油/脂肪之前和/或之后，以便获得第一种油制品；
d.加入水，其中水的温度同原料的温度大致或完全相同，并且其中水的pH通过加入钙进行调节；
e.用内源酶或得自相似原料的酶、优选得自冷血动物的酶水解原料，以便制备水解产物；
f.任选在水解步骤期间，加入pH调节剂，以便保持水解产物的所需pH值；
g.从水解产物中提取固体颗粒和可再被水解的未水解蛋白；
h.定期或连续分离出脂肪/油，以便获得第二种油制品；
i.任选处理所得水解产物以防止微生物生长，优选用紫外线进行处理；
j.通过膜过滤、优选交叉流型膜过滤，分离出所需分子量的肽/氨基酸部分；
k.使不能滤过j点中的膜滤器的水解产物部分返回步骤e进行水解；
l.浓缩并任选干燥透过液，以便获得肽/氨基酸；
m.使浓缩步骤的馏出液完全或部分返回膜滤器的透过液一侧。
根据本发明方法的优选实施方案在从属权利要求28-31中作出说明。
本文所用的术语“膜滤器”是指膜样滤器如膜滤器、渗透滤器、超滤器、静电滤器、交叉流滤器等。这些滤器优选的特征在于截留值小于或等于10,000道尔顿。
此外，提供如权利要求32中所公开的，用于水解一种或多种含蛋白原料并分离氨基酸/肽的方法，其特征在于使用一种或多种含蛋白原料的内源酶进行所述水解，并且使水解产物通过膜滤器，其中肽/氨基酸随透过液物流流出，同时活性酶连续分解任何沉积在膜表面的蛋白质残留物，并且所述酶与截留液一起回流进行水解。
本发明的另一特征是如权利要求33所公开的，用于从水解混合物中分离肽和氨基酸的方法，其特征在于使包含活性酶、氨基酸、肽和未转化蛋白质的水解混合物通过膜滤器，其中氨基酸和任何肽被滤出，而存在的活性酶确保沉积在膜滤器上的蛋白质被分解。
本发明还包括本发明的方法之一在生产药品、生物技术产品、食品和饲料中的用途，如在相应的权利要求34-37中所公开的。
本发明还包括根据本发明的方法在生产羟基磷灰石中的用途，如权利要求38中所公开的。
此外，提供根据本发明方法生产的氨基酸/肽，并且其特征在于它们不含有变应原和痕量DNA，如权利要求39中所公开的。
还提供由根据本发明方法生产的油制品，其特征在于它不含有变应原和痕量DNA，如权利要求40中所公开的。
最后，提供由根据本发明方法生产的羟基磷灰石，其特征在于它不含有变应原和痕量DNA，如权利要求41中所公开的。
一方面，根据方面c)，本发明解决了提供具有宽质量谱的产品问题，所述质量谱从用于食品生产到用于满足例如药物要求的产品等各不相同。
另一方面，本发明通过使用原料的内源酶和适应这些酶的生产条件，解决了这个问题。
本发明的方面c)结合内源酶的使用和回收特定大小的从简单氨基酸到略小于10,000道尔顿的大肽分子的技术。
本发明包括在发酵过程中保留酶，同时分离所释放的氨基酸和肽。
本发明也指水解工艺过程可以连续进行，同时在工艺过程中再加入原料。
本发明工艺过程本质上不同于现有技术的水解工艺过程，因为本发明工艺过程可以实现或者能够实现：
-不需要用任何添加剂例如氯仿来防止不需要的细菌生长；
-不需要加入氢氧化钠；
-可以热回收和冷回收无蛋白无菌海洋油/脂肪；
-在为工艺过程选择原料中，通过选择特殊的原料，可以控制成品中的游离氨基酸和肽谱；
-借助应用工艺参数例如温度和pH，可以控制所述工艺过程的结果，如氨基酸和肽的组成；
-不需要加入酸；
-具有不同原料的灵活组合；
-通过利用合适的浓缩步骤来分离产物部分；并且在于
-通过使用连续的酶降解过程；
-当使用酸或碱时，不使蛋白质和/或肽凝固；和
-所生产的肽按大小分级；
从而获得含有生物源性矿物质和微量营养素的产品。
因此，本发明提供一种从蛋白原料、优选水产来源的原料中回收肽/氨基酸、矿物质和油或脂肪的方法。
本发明通过本质上不同的制备鱼蛋白的方法而有别于现有技术，该鱼蛋白还存在于不同的含肽和氨基酸部分中。生产条件本质上也有别于现有技术，并且本发明避免使用外源酶。另外，还如前述中讲述的，原料、高品质的海洋油/脂肪可由本发明通过开发一种不同的未在现有技术中描述过的特殊方法来生产。
所描述的方法是蛋白质的天然酶解过程，目的在于获得含有不同组成的肽和游离氨基酸的干成品或液体产品。该工艺过程获得任选含有5％至100％游离氨基酸的成品。该产品不含有变应原和痕量DNA。仅含有极少量的脂肪(通常少于0.1％)和生物微量营养素。根据本发明的方法提供一种完全可用作所有类型的培养物(包括高等生物细胞)的培养基的产品。
本发明允许的方法不使用可能在工业规模的氨基酸和肽生产中产生问题的氢氧化钠。而且，水的比率与现有技术相比可有较大程度的不同，并且以重量百分比计的游离氨基酸也在一个更大范围内。
与该项技术相比，在本发明中，粉碎原料和未粉碎原料两者都可使用，并且不加入发酵制备物，而使用已经存在于原料中的天然酶。因此，使用蛋白原料的内源酶，可产生一种更简单、更稳定、更便宜进行水解的方法。另外，所用条件已经完全适合所述内源酶的活性条件，这一点也不同于现有技术。
行业中存在的另一个问题是外源酶昂贵并且可能品质各异。本发明通过内源酶的再循环避免了这一问题。
此外，活性酶具有一种特殊的清除功能。因为它们保留在滤器中，所以这些酶作用于未过滤的蛋白质和肽。所述酶使得这些原料分解，因此与迄今已知的水解过程中所用的传统过滤过程比较，滤器的寿命更长。对于成本、滤器寿命和效率、产品品质和系统或工艺过程的利用水平而言，这是一个巨大的优势。
另外，所述方法描述油/脂肪和固体的回收。根据本发明的方法可获得的固体之一是羟基磷灰石。羟基磷灰石用在例如生物层析和其它生物分离过程中，用在NMR中和其它检测过程中，因而是所述工艺过程中有商业价值的的副产品。
选择技术参数和工艺参数将会决定获得怎样的成品。这样，使产品适合消费者的需求将是可能的。
图1表示生产设备的第一实施方案，其中使用根据本发明方面a)的水解工艺过程。
图2表示生产设备的第二实施方案，其中使用根据本发明方面b)的水解工艺过程。
图3表示生产设备的第三实施方案，其中使用根据本发明方面c)的水解工艺过程。
分别根据本发明方面a)和方面b)方法的实施方案在下文分别参照图1和图2中作更详细解释。
原料通过给予原料所需粉碎的研磨系统102；202从101；201罐泵进。
在酶过程开始前可先回收得自原料的油/脂肪。这里，例如可使用油的冷回收。还可能在酶解前不取出油。在这种情况下，原料在旁通物流D1；D2中直接泵到热交换器105；205。
可以进行油的冷回收，即：
1.将原料在例如滗析型离心机103；203中离心，使液体和固体颗粒分成两个不同的部分；
2.使用例如分离器104；204，从液相物流A1；A2中分离出油；
3.将固相物流B1；B2和经分离的重相混合，将物流C1；C2泵到发酵罐中；
4.经分离的油相物流D1；D2可通过除菌滤器109；209泵到罐110；210中，从而不需要进一步精制就可达到食品质量。
物料可通过“线内”连续热交换器105；205或者间歇工作热交换器泵到发酵罐106；206。如果物料泵进前没有在热交换器中完成加热的话，所述发酵罐还可用于加热。加入到原料中的是加热过的和调节过pH的水流E1；E2，它们通过热交换器108；208被加热到大约可以进行发酵的温度。优选通过使水通过释放钙的过滤介质107；207进行pH的调节。
在此过程中，通过传感器111，111′；211，211′或以其它方式，监控发酵罐中的温度和pH。在此过程中，调节到所需的pH可优选使用从贮罐112，212加入的骨粉或钙来实现。在此过程中，氮气113，213也可用于pH调节。
当酶解过程完成时，优选通过热交换器114；214加热所得水解产物，从而使酶失活。
如果水解产物含有骨或其它固体颗粒，优选通过使用筛网装置115；215将其移出。所得固体颗粒即物流F1；F2借助浮选装置116；216被分成两个或两个以上部分。重部分117；217由骨(羟基磷灰石)组成，可在pH调节前干燥和/或使用，参见物流H1；H2。轻部分即物流G1；G2主要是未水解的蛋白。
如图1所示，这些轻部分G1可送回研磨系统102，并且用作新一轮水解过程的原料或者作为副产物除去。
如图2所示，根据本发明方面b)的轻部分G2可单独传送并与得自浓缩器222的浓缩物混合。或者，它们可作为独立产品干燥。
第一次脂肪分离后残留的脂肪可使用例如三相分离器118；218分离出来。油/脂肪物流I1；I2在滤器119；219中过滤并且送至罐120；220，供任选后续进一步加工等用。
如图1所示，将水解产物即物流J1传送至混合罐121，其中加入酸122(优选磷酸)，直到pH＜5。然后加入钙123，使得长肽和蛋白质团聚。用离心机124分离出蛋白质和钙/磷酸钙并且送至罐125。这种副产物可高温干燥，从而烧掉所有蛋白质残留物。
优选在真空蒸发器126中浓缩无蛋白的水解产物即物流K1。冷凝物即物流L1可用作追加水即物流E1。浓缩物即物流M1可在喷雾干燥器127、优选Filtermate型喷雾干燥器中干燥。或者，对所得浓缩物进行抽提后作为液体产品即物流N1。
如图2所示，水解产物即物流J2可用离心机221处理，从而分离出蛋白质和长肽即物流N2。这些与得自浓缩器222的游离氨基酸和短肽的浓缩物即物流M2混合。冷凝物即物流L2可用作追加水即物流E2。浓缩物即物流M2与混合的蛋白质和长肽可在喷雾干燥器223、优选Filtermate型喷雾干燥器中干燥。
除非另有说明，所有在本文中公开的百分比以重量计的百分比给出。
下面更详细地描述本发明工艺过程。
1)原料：
用于所述工艺过程的原料可由蛋白物料组成，所述蛋白物料优选鱼、鱼类产品、有壳水生动物、甲壳动物、软体动物和渔业/捕鱼业的副产品，例如鱼下脚和其它淡水和海水中的海洋生物。各种原料可单独使用或与含“酶物料”和“蛋白物料”的产品结合使用。所述“酶物料”是含有符合要求量及要求品质的内源酶的原料。所述“蛋白物料”是指不含有符合要求量及要求品质的内源酶的原料，因此为了能够进行酶处理，必须补充酶产品的蛋白原料。在某些情况下，酶物料与蛋白物料可能是相同的。先前已知的工艺过程描述了废料和蛋白原料按1∶1的比率组合。为了获得所需结果的成品，本文描述的方法可以改变这种比率。
原料符合用于食品生产的半成品的法定要求。先前，通过立法和规定，已将该原料归类为废料。通过良好的物流工序，在这种情况下有可能使该原料被批准为食品。这允许该产品在食品业和/或制药业中工业规模生产及使用。
2)原料的预处理：
原料通过提供所需的物料粉碎的研磨系统自罐中泵进。所述研磨为酶提供一个较大的工作表面并更快地释放原料的酶。可以在酶处理之前回收原料的油/脂肪。例如，可以使用油的冷回收。
可以进行油的冷回收，即：
1.将原料离心，使液体和固体颗粒分成两个不同的部分；
2.从液相中分离出油；
3.将固相和来自分离步骤的重相混合，然后将其泵到发酵罐中；
4.进一步处理得自分离步骤的油相，得到客户定制的最终产品，该产品不需要进一步精制就可达到食品质量。
原料可通过“线内”连续热交换器或者间歇工作热交换器泵到发酵罐。如果原料泵进前没有在热交换器中完成加热，则发酵罐还可用于加热。如果有必要按一定比率混合不同类型的原料，则这些产品可同时泵进并混合。可借助流量计和/或发酵罐内水平调节来控制不同原料的量。
此外，有可能不研磨原料或者避免同时混合原料，其中将已知量的原料A泵进混合罐，然后将已知量的原料B泵进同一罐。
必要的是原料应加热到有利于酶在水解过程中具最大活性所需的温度。该温度范围为40-62℃。在多数情况下最佳范围是45-58℃。应用不同的温度将获得不同的酶解效果并将控制氨基酸的组成。
为了获得低脂肪含量的成品，本发明提供在工艺过程中、水解后回收/分离脂肪的可能性。
可在蛋白凝固之前和/或之后进行脂肪分离。在肽/氨基酸干成品中，成品的脂肪含量通常小于0.1％。
众所周知的技术如滗析、分离和/或化学方法可以用于脂肪分离。
3)水解过程：
加热过的原料混合物泵进水解容器或罐中。将加热到近似发酵发生温度并调节过pH的水加入到该混合物中。可根据原料和所需结果而改变水量。在现有技术中使用总量的50％，也就是50％原料和50％水。在根据本发明的方法中，因为可得到的酶和蛋白物料以及温度和pH的最佳化，所以可使用更少量的水。该方法使用加入的水量从10％至40％。加入的水最优化将在20％和30％之间。更少的加入水意味着水解产物中短肽和游离氨基酸的浓度在水解后会更高，这意味着节省过程和动力成本。
水解产物在发酵罐中保持持续搅拌和泵动。这样做的目的是改进水解工艺过程。在所述工艺过程中，搅拌/泵动水解产物故障可能会导致不能充分控制pH、温度和过程本身。水解可能在水解产物部分中差异地进行并且某些酶可能丧失。
为了检查水解进行到何种程度，可分析氨基结合氮。分析可直接在发酵罐中借助自动装置进行，或者在生产实验室使用众所周知的技术例如甲醛滴定等进行。所述工艺过程中所用时间可以1-4小时不等。当水解产物中游离氨基酸的百分比不再增加时，可终止水解过程。这样可避免多余的氨水形成，它可产生原料利用水平的降低。
工作酶是碱性酶，这是所述工艺过程的先决条件。因此，在水解中，pH＞7.00是基本的。pH范围将在7.00和8.50之间。pH在7.60至8.20可获得最优化的水解过程。如果在整个过程中pH＞8.1、但＜8.4，则游离色氨酸排除在氨基酸谱之外。相反，如果在整个过程中pH＜7.6、但＞7.4，则色氨酸占到可能回收总量的最大值，该最大值取决于原料。如果在整个过程中温度＜46℃但＞44℃并且pH＜7.8但＞7.7，则胶原蛋白不会有任何大程度的溶解，但可以获得固体颗粒形式。
可用不同的碱调节水解产物的pH，例如先前回收的鱼骨的骨粉、钙和氮/氮气，但根据方面a)没有氢氧化钠。
在本发明中的工艺过程中不加入HCl。这样做的原因是会形成多余的盐。生产成本还将更高。现有技术还描述了氯仿作为一种添加剂来防止细菌生长。因为水解时间短，在本发明中未这样使用。不必要以工业规模使用氯仿，但是是可能的。
用高温，优选高于70℃终止水解。优选使用“线内”热交换器实现该温度增加。
用低pH实现残留蛋白质的凝固。然后磷酸可用作添加剂来降低pH到所需水平，优选pH在3.2和5.5之间。在加入磷酸后，任选与加热/冷却结合，将有可能从水解产物中提取蛋白质和肽。当然，还可使用其它变性蛋白质和肽的方法。例如可用电变性。
可使用已知的过滤技术从变性的蛋白质和长肽中分离出游离氨基酸和短肽内容物。在分离中还可用所述部分的不同重量和不同化学性质将其分离。可用磷酸钙、氢氧化钙和氯化钙促进这种分离。使得蛋白质和肽“粘着在一起”。因此，由于它们的密度增加，它们变得更容易分离。加入的化学药品量将既根据蛋白质和肽的含量又根据溶液中其它缓冲剂的含量而变化。
4)浓缩：
然后有必要浓缩水解终产物。在干燥步骤前完成浓缩并除去水分，从而可充分利用干燥步骤的能力。在结晶开始前，有可能在干燥前预浓缩高达70％干物量(DM)。
真空蒸发型的蒸馏步骤正好适合于这个目的，但是可使用任何其它形式的浓缩装置。真空蒸发器在低温下浓缩所得液体，因此确保肽和氨基酸不受损伤。
蒸发可以发生在50-85℃的温度范围。温度范围最佳为65-70℃。而且，水解产物可以不经过浓缩步骤直接转到干燥步骤(参见第5点)，或者可以以除煮沸或真空蒸发以外的其它方式进行浓缩。不同类型的过滤/膜/渗透设备还可以完成该步骤。
5)干燥/造粒：
浓缩后，如果有必要可干燥所得产品，但是产品还可以液体形式或者干燥或液体形式之间的任何状态存在。干燥使得产品能更稳定地贮藏，并且简化了物流工序。其中这种干燥产品的方式对最终结果是重要的。制备的肽/氨基酸制品可能是高吸湿性的并且因此对该过程是一个挑战。为使产品更易于操作，所需的是颗粒状产品。
在该过程的一个实施方案中，干燥和造粒发生于两个阶段，但是一个阶段过程当然是可能的。第一阶段包含在喷雾干燥器或同样的装置中用冷却步骤干燥成粉，然后通过加入液体水解产物造粒。
通过使用机械旋转刀片保持所述粉末/产物有力的运动，给于所述产品流化床样特征来“构建”颗粒实现造粒。然后，将浓缩产物/水解产物喷雾到该原料中。这样使得逐步构建颗粒。所有这些以连续过程发生。在造粒过程的结束时，干冷空气吹过或穿过所述颗粒。将所得颗粒过筛并对所需要的部分进行抽提。再循环剩余的细粉用于进一步造粒。研磨过大的颗粒并再次过筛。使任何新形成的细粉返回造粒步骤。
如前所提及的，以上概述的干燥和造粒过程正好是实施方案之一，它可用于根据本发明方法的产品的干燥和造粒，并且本领域中任何一个技术人员将会认识到，可用任何其它合适的方法获得同样的结果。
当然，还可能将不同的添加剂优选在造粒步骤加入所述产品中。
根据本发明的方面c)，现在将更详细地描述本发明的实现。
图3中的参考数字表示生产设备的下列部分：
301＝发酵罐
302＝分离单元，优选筛子，用于分离固体颗粒
303＝分离单元，优选滗析型离心机
304＝浮选罐，用于分离蛋白质和羟基磷灰石
305＝分离单元，优选离心机，用于分离油
306＝过滤单元，用于过滤除菌
307＝油/脂肪罐
308＝微生物过滤单元
309＝膜过滤单元
310＝浓缩单元
311＝干燥单元
312＝研磨设备
313＝离心机，优选滗析型离心机
314＝油过滤器
315＝水解步骤前的油回收罐
316＝热交换器，用于原料加热
317＝钙定量单元
318＝热交换器，用于水加热
319＝骨粉供应装置
320＝加氮装置
321＝骨部分回收容器
另外，与生产设备的描述一起，图3表示根据本发明方面c)，工艺过程的一个实施方案，其中以下符号表示下列物流：
A3＝包括蛋白质、酶、油/脂肪、肽和游离氨基酸的物流。
如果已使用分离单元302和302，则在微生物过滤单元308后，该物流不含有任何固体颗粒，并且有大比例减少的未水解蛋白和脂肪。
A31＝如果使用分离单元302的物流；在302单元后该物流不再含有固体颗粒；
A32＝如果未使用分离单元303的物流；
B31＝包括用筛子移去的固体的物流；
B32＝包括用离心机分离的固体的物流；
C3＝包括油/脂肪的物流；
D3＝用于从膜滤器309释放透过液的馏出液等的物流；
E3＝往干燥单元的浓缩肽-氨基酸溶液的物流；
E31＝往包装成液体产品的浓缩肽-氨基酸溶液的物流；
F3＝往发酵罐301的原料的物流
F31＝当水解之前不发生油分离时的原料的物流
G3＝返回到物流A3的未水解蛋白的物流；
H3＝加入的水流；
I3＝水解步骤之前回收的油的物流。
除非另有说明，所有在本文中公开的百分比是以重量计的百分比。
下面更详细描述本发明工艺过程。
1)原料：
用于所述工艺过程的原料可由蛋白物料组成，所述蛋白物料优选鱼、鱼类产品、有壳水生动物、甲壳动物、软体动物和渔业/捕鱼业的副产品，例如鱼下脚和其它淡水和海水中的海洋生物。各种原料可单独使用或与含“酶物料”和“蛋白物料”的产品结合使用。所述“酶物料”是含有符合要求量及要求品质的内源酶的原料。所述“蛋白物料”是指不含有符合要求量及要求品质的内源酶的原料，因此为了能够进行酶处理，必须补充酶产品的蛋白原料。在某些情况下，酶物料与蛋白物料可能是相同的。先前已知的工艺过程描述了废料和蛋白原料按1∶1的比率组合。为了获得所需结果的成品，本文描述的方法可以改变这种比率。
原料符合用于食品生产的半成品的法定要求。先前，通过立法和规定，已将该原料归类为废料。通过良好的物流工序，在这种情况下有可能使该原料被批准为食品。这允许该产品在食品业和/或制药业中工业规模生产及使用。
2)原料的预处理：
原料通过提供所需的物料粉碎的研磨系统312自罐中泵进。所述研磨为酶提供一个较大的工作表面并释放原料的酶。
在酶解过程开始前可以回收得自原料的第一种油/脂肪。例如，可使用油的冷回收。
可以进行油的冷回收，即：
1.将313原料离心，使液体和固体颗粒分成两个不同的部分；
2.从液相中分离出油，参见314和315；
3.将固相和得自分离步骤的重相混合，然后将其泵到发酵罐301；
4.进一步处理得自分离步骤的油相，得到客户定制的最终产品，该产品不需要进一步精制就可达到食品质量。
研磨后加到发酵罐301中的原料可贮藏于一个或多个缓冲罐中。蛋白物料和酶物料可使用不同的罐。
原料可以经由热交换器316泵到发酵罐301。如果原料在泵进前没有在热交换器中完成加热，则发酵罐301还可用于加热。
发酵罐301中的条件监测可连续地自动完成或通过人工取样完成。加入各种添加剂，使得尽可能使将生产的产品的酶解条件在最优化范围内保持不变。
3)酶解过程：
将加热过的原料或未加热过的原料以蛋白物料和酶物料形式泵进一个或多个酶反应罐。将加热到近似发酵发生温度并调节过pH的水加入到这种混合物中。可根据原料和所需结果而改变水量，这取决于可得到的酶和蛋白物料的最佳化。通过加入例如氮气或骨粉可调节pH。
加热过的和调节过pH的原料F3和水H3的混合物在下文中将被称作“水解产物”。所述水解产物任选在恒定剧烈搅拌下保持在发酵罐301中。这样做的目的是增强酶解过程。所述水解产物连续地泵过系统以取出所需的氨基酸和肽。
为了保持发酵罐301中的酶解恒定条件，可定期检查氨基结合氮、总蛋白质含量和pH。
在整个工艺过程的所需持续时间内，按需加入蛋白物料和酶物料。
工作酶是碱性酶，这是所述工艺过程的先决条件。因此，在酶解中，pH＞7.00是基本的。pH范围将在7.00和8.50之间。pH在7.60至8.20可获得最优化的酶解过程。如果在整个过程中pH＞8.1、但＜8.4，则游离色氨酸排除在氨基酸谱之外。相反，如果在整个过程中pH＜7.6、但＞7.4，则色氨酸占到可能回收总量的最大值，该最大值取决于原料。如果在整个过程中温度＜46℃但＞44℃并且pH＜7.8但＞7.7，则胶原蛋白不会有任何大的程度溶解，但可以获得固体颗粒形式。
不同的碱，例如较早时生产的骨粉、钙和氮气，参见319和320，都可用来调节水解产物的pH。
为了维持所述条件于最优化水平，根据本发明的方面c)，借助本发明有可能通过使用不同的参数连续控制酶解过程。
为了防止氨化，在所述工艺过程的结束时，必须通过温度灭活或某些其他方式终止酶活性。
4)微生物生长的控制：
现有技术描述氯仿作为添加剂用于防止微生物生长，但在本工艺过程中优选不使用它。根据本发明的方法，可使用紫外线或其它不使酶凝固的适当方法杀死细菌和真菌。这样做以防止在新蛋白质形成中，微生物的大量生长消耗释放的短肽和游离氨基酸。此外，在工业规模上不优选氯仿。
5)固体颗粒的提取：
本发明包括借助筛分系统/滤器，连续地或者定期从水解产物中提取超过一定大小的固体颗粒。如果在下一个生产阶段中的滗析系统303处理移去所有的固相，或者产品A3正在被加工、不含有适合筛分的固体颗粒的情形下，则可以从所述系统中省略或绕过筛分系统302。
然后所取出的颗粒B32可以根据密度通过浮选过程304分离，使得蛋白质残留物G3可以反馈到发酵罐301。蛋白质漂浮在上面并可以机械或人工撇去。较重的物料沉积在浮选罐底部。
6)水解产物的滗析：
滗析器303可用在油分离器305和膜滤器309之前的系统中。这样做简化了例如在三相分离器中分离水解产物的脂肪，因此减少随后膜滤器上的张力。
如果固体颗粒的含量太高，则意味着淤浆相当多，分离器不能最佳地工作。滗析器是一个建造来分离比含固体颗粒部分的液体更高密度的固体颗粒的机器。在本发明中，主要是被分离的蛋白质，并且有必要使它们返回发酵罐进行进一步酶解。已分离的固体物料可根据筛分系统使用的同样原理进行浮选。如有必要，可使用同一浮选装置。如果已提及的筛分装置处理所需的分离或被处理的产品未产生蛋白质残留，则可以省略或者断开系统中的滗析器303。
7)分离：
使用三相分离器305或者其它适合分离较轻水解产物的脂肪部分的适当离心方法，分离水解产物。进行连续或定期脂肪分离，取决于正在加工的原料中的脂肪量。本发明一个特别重要的特征是可以回收到非常纯的高品质脂肪部分，因为在工艺过程中，可以连续进行分离，所以释放的脂肪不会比当脂蛋白通过水解分解时所需要的氧化更长。水解作用在碱性条件下发生还有助于保持脂肪的高品质，使用氮气调节pH时尤其如此。
8)膜过滤：
本发明包括将水解产物泵过优选配备有膜滤器309的装置，在某种意义上，其功能允许一定大小的分子渗透过膜，优选小于10,000道尔顿的分子。因而可将水解产物泵过多个管状膜或者多个平面状膜完成过滤。
渗透的原理用于穿过膜的运输。浓缩未过滤的游离氨基酸和肽可提供作为副产品的蒸馏水，并且其中一部分与膜的另一侧上的水解产物大约相同的压力返回滤器。通过在膜的透过液一侧保持较低浓度的氨基酸和肽，将能维持渗透驱动的渗透作用，沿着膜流动的水解产物机械地清除比那些能够渗透过膜更大的蛋白质残留物和肽的沉积。
9)浓缩：
然后，必须浓缩最终的水解产物透过液。在干燥过程前完成浓缩以除去水分，从而可充分利用干燥步骤的能力，或者可在液体产品中获得所需的进料氨基酸和肽浓度水平。
真空蒸发型的蒸馏过程正好适合于这种目的，但是可用任何其它形式的浓缩装置取出液体中的所需肽和氨基酸，其中所述肽和氨基酸在膜过滤中溶解在液体中。真空蒸发器310在低温下浓缩液体，所以不会对肽/氨基酸造成损伤。在较早阶段最优化的膜过滤功能的先决条件是浓缩装置310能够回收到尽可能纯的馏出液。因此，穿过膜的渗透作用将是最优化的。蒸发作用可发生在+50-+85℃温度范围内。这个范围最佳将是+65-+70℃。具有太高的温度而不能返回滤器或发酵罐的冷凝物可能存在风险。如果是这种情况，必须使用热交换器将温度降低到所需的水平。
10)干燥：
浓缩后，如有必要可干燥产品，但是产品还可以是液体产品形式或者任何中间形式。干燥使得产品更稳定贮藏，并且简化了物流工序，参见311。干燥产品这种方式对最终结果是重要的。制备的肽/氨基酸制品可能是高吸湿性的，因此对于该过程是一个挑战。过程中的高温还将使所述产品更具吸湿的特征。
干燥/造粒将发生于两个阶段。第一，产物在喷雾干燥器等中用冷却步骤干燥成粉，然后进行产物造粒。通过借助机械流化保持所述粉末/产物有力的运动来“构建”颗粒，从而实现造粒。然后，将浓缩产物/水解产物喷雾到该原料中并且逐步增大颗粒。所有这些以连续过程发生。在造粒过程的结束时，干冷空气吹过或穿过所述颗粒。这使得颗粒变得更硬且更容易溶解。然后将所述颗粒过筛并对所需要的部分进行抽提。使太小的颗粒(细粉)返回用于进一步造粒，同时再次研磨和筛分“过大的”颗粒。使任何新形成的细粉返回用于再造粒。
还可使用普通的常规喷雾干燥，但是这样产生具有大表面的细粉。这意味着所述产品表现为高吸湿性，并且因此难于在大型包装、贮藏等中操作。
在造粒过程中，各种添加剂可加入到产品中。还可生产非造粒的产品，如未干燥但是简单地浓缩到所需水平的产品。
膜滤器功能的详细描述：
滤器309可以构造成平面状或管状的滤器元件。滤器系统这样构造，使发酵罐的蛋白水解产物组成的过滤物，可自由地循环通过膜的截留液一侧(交叉流过滤)，其中所述透过液已除去固体颗粒和脂肪，但包括酶复合物。因此，产生沿膜表面的物流，可机械地最小化沉积在膜上、堵塞滤器的保留块形成的风险。在滤过膜截留液一侧循环的透过液含有的酶可分解集聚于膜上或膜内，但太大而不能渗透膜到渗透产物一侧的蛋白质和大肽。如果选择膜使得透过液的最大分子大小是9,800道尔顿，则可防止所述酶渗透过膜。因此，可阻截未被分解的蛋白质并可获得无蛋白无菌产品。
选择阻截较小分子的膜将得到含更小肽和更高百分比游离氨基酸的产品。
在透过液一侧，优选使水流相应在透过液一侧沿膜流动。膜两侧的压力可以是相等的，渗透作用驱使透过液穿过膜。溶解发生在透过液一侧循环的液体中。
渗透作用起作用的必要条件是在膜的截留液一侧氨基酸和肽的浓度较高。这可通过得自浓缩设备的馏出液完成，该馏出液是在膜的透过液一侧循环的液体。原则上，这可描述为反渗滤，这里在透过液一侧使用纯水添加剂。
可使用另一个计划用于反渗透(RO)的膜滤器完成透过液的浓缩。膜滤器的功能将会是相同的。
至于最大化肽大小，可使用一系列滤器来分离不同的部分，但是在随后的滤器中，酶复合物对保持滤过膜在保留一侧无滤饼没有任何帮助。为了防止堵塞，在一个阶段内过滤可能具有优势。
已在实验室试验中，用医院范围所用的、由厂商SpectrumLaboratories生产的标准管状类型的透析膜所获得的数值如下：
在Spectra/Por 1实验中，使用分子量截留值(MWCO)或者6,000道尔顿至8,000道尔顿(6k至8k MWCO)的再生纤维素(RC)。当在截留液一侧的总DM(干物量)为14.7％时，如果在48.7℃温度和pH7.85，通过这些膜的流量开始时是3.7ml/cm2/h。12小时后是3.8ml/cm2/h，24小时后是3.8ml/cm2/h。甚至在运行时间60小时时还没有记录到堵塞。在总共60小时内，产生的合计23升含36％ DM的浓缩前和浓缩后液体中，用肽大小分析未在透过液中鉴定出大于9,000道尔顿的分子。光谱图上的最大峰是410-1350道尔顿，给出42％未校正的光谱图面积。

Claims (41)

1.一种从一种或多种含蛋白原料中回收肽/氨基酸和油/脂肪的方法，其特征在于所述方法包括下述步骤：
a.把原料研磨；
b.将研磨的原料加热到40-62℃温度范围，优选45-58℃；
c.任选在加热步骤之前和/或之后，从原料中分离出油/脂肪，以便获得第一种油制品；
d.加入水，其中水的温度同原料的温度大致或完全相同，并且其中水的pH通过加入钙进行调节；
e.用内源酶水解原料，以便制备水解产物；
f.任选在水解步骤期间，加入pH调节剂，以便保持水解产物的所需pH值；
g.将水解产物加热到75-100℃，优选85-95℃；
h.从水解产物中提取大颗粒，包括可再被水解的未水解蛋白；
i.任选分离脂肪/油，以便获得第二种油制品；
j.使所得蛋白凝固；
k.提取凝固的蛋白；
l.任选分离脂肪/油，以便获得第三种油制品；
m.任选浓缩剩余的氨基酸和短肽；和
n.任选干燥所得浓缩物，以便获得短肽和氨基酸干制品。
2.权利要求1的方法，其特征在于步骤d中加入的水占总反应混合物的10-40％，优选20-30％。
3.权利要求1的方法，其特征在于所述方法采用封闭式工艺过程。
4.权利要求1的方法，其特征在于步骤f中的pH调节剂是氮气、钙或骨粉。
5.权利要求1的方法，其特征在于所述方法还包括将步骤h的大颗粒分成生产羟基磷灰石的骨部分、可再被水解的蛋白质残留物和其它固体颗粒。
6.权利要求1的方法，其特征在于所述肽和氨基酸制品的脂肪含量＜0.1％，含盐量＜1％。
7.权利要求1的方法之一在生产药品中的用途。
8.权利要求1的方法之一在生产食品中的用途。
9.权利要求1的方法之一在生产饲料中的用途。
10.权利要求1的方法之一在生产生物技术产品中的用途。
11.权利要求1的方法在生产羟基磷灰石中的用途。
12.通过权利要求1的方法制备的氨基酸/肽，其特征在于它们不含有变应原和痕量DNA，并且脂肪含量＜0.1％重量，以及它们的含盐量＜0.5％重量。
13.通过权利要求5的方法生产的羟基磷灰石，其特征在于它不含有变应原和痕量DNA。
14.油品，其特征在于它是通过权利要求1的方法所生产的第一种油制品，是冷榨油，并且具有食品质量。
15.一种从一种或多种含蛋白半成品中回收肽/氨基酸的方法，其特征在于所述方法包括下述步骤：
a.把原料研磨；
b.将研磨的原料加热到40-62℃温度范围，优选45-58℃；
c.任选在加热步骤之前和/或之后，从原料中分离出油/脂肪，以便获得第一种油制品；
d.加入水，其中水的温度同原料的温度大致或完全相同，并且其中水的pH通过加入钙进行调节；
e.用内源酶水解原料，以便制备水解产物；
f.任选在水解步骤期间，加入pH调节剂，以便保持水解产物的所需pH值；
g.将水解产物加热到75-100℃，优选85-95℃；
h.从水解产物中提取大颗粒，包括未水解蛋白；
i.任选分离脂肪/油，以便获得第二种油制品；
j.提取蛋白质和长肽；
k.浓缩剩余的氨基酸和肽；
l.将蛋白质和长肽加入到以上浓缩物中，以便获得蛋白制品；和
m.任选干燥所得蛋白制品，以便获得含有蛋白质、游离氨基酸以及短肽和长肽的干制品。
16.权利要求15的方法，其特征在于步骤d中加入的水占总反应混合物的10-40％，优选20-30％。
17.权利要求15的方法，其特征在于所述方法采用封闭式工艺过程。
18.权利要求15的方法，其特征在于步骤f中的pH调节剂是氮气、钙或骨粉。
19.权利要求15的方法，其特征在于所述方法还包括将步骤h的大颗粒分成生产羟基磷灰石的骨部分、蛋白质残留物和其它固体颗粒。
20.权利要求15-19中任一项的方法，其特征在于所述蛋白制品包含5-95％重量的游离氨基酸，优选30-60％重量的游离氨基酸。
21.权利要求15-20中任一项的方法，其特征在于所述蛋白制品含有小于0.5％重量的脂肪。
22.权利要求15-21中任一项的方法，其特征在于所述蛋白制品含有小于1％重量的盐。
23.权利要求15的方法之一在生产兽医药品中的用途。
24.权利要求15的方法之一在生产食品中的用途。
25.权利要求15的方法之一在生产饲料中的用途。
26.油品，其特征在于它是通过权利要求15的方法所生产的第一种油制品，是冷榨油，并且具有食品质量。
27.一种从含蛋白原料中回收肽/氨基酸和油/脂肪的方法，其特征在于所述方法包括下述步骤：
a.把原料研磨；
b.将研磨的原料加热到40-62℃温度范围，优选45-58℃；
c.任选在加热步骤之前和/或之后，从原料中分离出油/脂肪，以便获得第一种油制品；
d.加入水，其中水的温度同原料的温度大致或完全相同，并且其中水的pH通过加入钙进行调节；
e.用内源酶水解原料，以便制备水解产物；
f.任选在水解步骤期间，加入pH调节剂，以便保持水解产物的所需pH值；
g.从水解产物中提取大颗粒和可再被水解的未水解蛋白；
h.定期或连续分离脂肪/油，以便获得第二种油制品；
i.任选处理所得水解产物以防止微生物生长，优选用紫外线进行处理；
j.通过膜过滤、优选交叉流型膜过滤，分离出所需分子量的肽/氨基酸部分；
k.使不能渗透j点中的膜滤器的水解产物部分返回步骤e进行水解；
l.浓缩并任选干燥透过液，以便获得肽/氨基酸；和
m.使浓缩的馏出液完全或部分返回膜滤器的透过液一侧。
28.权利要求27的方法，其特征在于所述方法采用封闭式工艺过程。
29.权利要求27的方法，其特征在于步骤f中的pH调节剂是氮气或骨粉。
30.权利要求27的方法，其特征在于所述方法还包括将步骤g的固体颗粒分成羟基磷灰石、蛋白质残留物和其它固体颗粒。
31.权利要求27的方法，其特征在于使步骤h中所回收的第二种油制品通过滤器，并且提取任何重部分例如硬脂酸，以便获得无蛋白无菌冷榨油。
32.一种用于水解一种或多种含蛋白原料并分离氨基酸/肽的方法，其特征在于
使用一种或多种含蛋白物料的内源酶进行所述水解；和
使水解产物通过膜状滤器，其中肽/氨基酸随透过液物流流出，同时活性酶连续分解任何沉积在膜表面的蛋白质残留物，并且所述酶与截留液一起回流进行水解。
33.一种用于从水解混合物中提取肽和氨基酸的方法，其特征在于使包含活性酶、氨基酸、肽和未转化蛋白质的水解混合物通过膜滤器，其中氨基酸和任何肽被滤出，而存在的活性酶可分解沉积在膜滤器上的蛋白质。
34.权利要求27、32或33的方法之一在生产药品中的用途。
35.权利要求27、32或33的方法之一在生产生物技术产品中的用途。
36.权利要求27、32或33的方法之一在生产食品中的用途。
37.权利要求27、32或33的方法之一在生产饲料中的用途。
38.权利要求30的方法在生产羟基磷灰石中的用途。
39.通过权利要求27的方法生产的氨基酸/肽，其特征在于它们不含有变应原和痕量DNA、基本上无脂以及含盐量＜0.5％重量。
40.通过权利要求31的方法生产的油品，其特征在于它不含有变应原或痕量DNA。
41.通过权利要求30的方法生产的羟基磷灰石，其特征在于它不含有变应原或痕量DNA。
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