CN1679859A - 丹参和川芎中药有效部位的提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了冠心宁中药有效成分的提取方法，所述的冠心宁以丹参和川芎质量比1∶1的组合物为原料，所述的方法按如下：丹参和川芎饮片加入质量为药材质量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得药液；所得药液进行纯化在30～80℃下减压浓缩，干燥即得丹参和川芎中药有效部位提取物。本发明的有益效果主要体现在：工艺过程简单，不需高温高压和特殊设备，安全，易于操作，成本低，总酚酸的含量高，杂质少，其有效部位含量在60％以上，生理活性强；得到的丹参、川芎总酚酸质量稳定，富含中药丹参和川芎的活性成分，具有抗脑缺血，抗细胞凋亡等药理作用，因此可以用来制备疗效好，安全可靠的防治心脑血管疾病药物。

Description

丹参和川芎中药有效部位的提取方法

(一)技术领域

本发明涉及由丹参和川芎组成的中药复方冠心宁有效部位的提取方法。

(二)背景技术

丹参和川芎及其包含此药的各种制剂是临床常用的治疗心脑血管病中药。自80年代对由丹参、川芎组成的复方制成的水针进行了临床研究，通过了387例的疗效分析，显示由活血药丹参、川芎组成的复方针剂治疗冠心病心绞痛确有较好的疗效，治疗后心绞痛病症有效率为91.73％，不正常心电图有效率为44.39％，心绞痛症状轻、中、重度不同分级中有效率大致相同，提示该水针不仅对轻、中型心绞痛病例有效而且对重型心绞痛病例同样有较好的疗效，治疗后心绞痛症状普遍地在较短时间内(1～4周)得到控制。对5例因该水针治疗的冠心病患者进行治疗前后容量图和心电图的现象，结果初步说明该水针具有一定的强心作用，有增加心搏出量的作用，以及对细小动脉有扩张作用。从而进一步说明了该水针具有改善冠脉循环和抗血凝作用，能显著增加冠脉血流量，改善心肌供血，预防和减少血栓的形成，使栓塞范围缩小，病变程度减轻。

目前，对丹参的水溶性成分进行了系统研究，分离得到丹酚酸A(1)、B(2)、C(3)、D(4)、E(5)、F(8)、G(9)、H(11)、I(12)、J(13)，迷迭香酸(6)、紫草素(7)、异丹酚酸(10)、迷迭香酸的葡萄糖甙(14)等酚酸类化合物。(Lian-niang.Li，J.chinese pharmacenticalsciences 1997.6，57～64)。药理实验结果说明这些酚酸类化合物具有很强的抗脂质过氧化、抗血栓、改善血液循环等作用。对川芎的水溶性成分也有较详细的研究，从川芎中分离提取的川芎嗪和阿魏酸，已经合成，并广泛应用于临床。

目前，由丹参和川芎组成的复方有效部位的剂型为单一水针；因酚酸类化合物化学性质的不稳定，在制备和储存过程中易分解变质，所以目前临床用的水针所含的成分主要为活性较弱的丹参素和原儿茶醛，而活性较强的其他丹参酚酸类成分，如丹酚酸B、阿魏酸因工艺受热时间长引起分解变质而所剩无几，药理活性大打折扣。

(三)发明内容

本发明既是为了提供一种性能稳定、药理活性好的冠心宁即丹参和川芎中药有效部位的提取方法。

为达到发明目的本发明采用的技术方案是：

一种丹参和川芎中药有效部位的提取方法，其特征在于所述的丹参和川芎质量比为1∶1，所述的方法按如下步骤进行：

(1)丹参和川芎饮片加入质量为药材质量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得药液；

(2)对步骤(1)所得药液进行纯化；

(3)步骤(2)所得药液在30～80℃下减压浓缩，干燥即得丹参和川芎中药有效部位提取物。

所述的纯化除杂质步骤为醇沉。

所述的纯化除杂质步骤为上大孔吸附树脂洗脱。

所述的纯化除杂质步骤也可为醇沉与上大孔吸附树脂洗脱交替进行。

所述的大孔吸附树脂为苯乙烯型大孔吸附树脂。

所述的步骤(3)中干燥为减压干燥、在30～80℃下进行。

所述的步骤(3)中干燥为喷雾干燥。

特别的，所述的方法按如下步骤进行：

(1)丹参和川芎饮片加入质量为药材质量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得药液；

(2)步骤(1)所得药液在30～80℃下减压浓缩至浓度为0.5～5g/mL，浓缩液加入醇至含醇量为40～90％，静置，醇沉1～5次，吸取上清液，过滤，即得药液；

(3)步骤(2)所得药液在30～80℃下减压浓缩，在30～80℃下减压干燥即得丹参和川芎中药有效部位提取物。

或者，所述的方法按如下步骤进行：

(1)丹参和川芎饮片在质量为药材质量3～20倍的水或醇的水溶液中，在40～100℃下提取1～5次后，合并提取液，即得药液；

(2)步骤(1)所得药液离心后上大孔吸附树脂，用去离子水洗至流出液无α-萘酚反应后，再用10～90％乙醇洗脱至洗脱液无明显的酚羟基反应；

(3)所得药液在30～80℃下减压浓缩，在30～80℃下减压干燥即得所述的丹参和川芎中药有效部位。

进一步，所述的方法按如下步骤进行：

a)丹参和川芎饮片在质量为药材质量8～14倍的水或50～85％的乙醇水溶液中，在40～100℃下提取2～3次后，合并提取液，即得药液；

  b)步骤(1)所得药液在40～65℃下减压浓缩至浓度为1.5～3g/mL，浓缩液加入乙醇至含醇量为60～85％，静置，醇沉2～3次，过滤，即得药液；

c)所得药液在40～65℃下减压浓缩，40～65℃下减压干燥即得所述的丹参和川芎中药有效部位。

又或者，所述的方法按如下步骤进行：

(1)丹参和川芎饮片在质量为药材质量3～20倍的水或醇的水溶液中，在40～100℃下提取1～5次后，合并提取液，即得药液；

(2)步骤(1)所得药液在30～80℃下减压浓缩至浓度为0.5～5g/mL，浓缩液加入醇至含醇量为40～90％，静置，醇沉1～5次，吸取上清液，即得药液；

(3)步骤(2)所得药液经减压回收乙醇后加适量水溶解所得药液，离心后，药液先上大孔吸附树脂，用去离子水洗至流出液无α-萘酚反应后，再用10～90％乙醇洗脱至洗脱液无明显的酚羟基反应，收集洗脱液；

(4)所得洗脱液在30～80℃下减压浓缩，30～80℃下减压干燥即得所述的丹参和川芎中药有效部位。

进一步，所述的方法按如下步骤进行：

(1)丹参和川芎饮片在质量为药材质量8～14倍的水或50～85％的乙醇水溶液中，在40～100℃下提取2～3次后，合并提取液，即得药液；

(2)步骤(1)所得药液在40～65℃下减压浓缩至浓度为1.5～3g/mL，浓缩液加入乙醇至含醇量为60～85％，静置，醇沉1～3次，吸取上清液，过滤，即得药液；

(3)步骤(2)所得药液经减压回收乙醇后加适量水溶解所得药液，离心后，药液先上苯乙烯型大孔吸附树脂，用去离子水洗至流出液无α-萘酚反应后，再用10～90％乙醇洗脱至洗脱液无明显的酚羟基反应，收集洗脱液；

(4)所得洗脱液在40～65℃下减压浓缩，40～65℃下减压干燥即得所述的丹参和川芎中药有效部位。

本发明所述的丹参和川芎中药有效部位的提取方法的有益效果主要体现在：(1)工艺过程简单，不需高温高压和特殊设备，安全，易于操作，且成本低，应用本发明的提取方法，可以得到除去大量蛋白质，糖类，淀粉等杂质，总酚酸的含量高，杂质少，由于严格控制了提取及浓缩过程的温度，其有效部位含量在60％以上，其中丹酚酸B的含量占有效部位的5～50％，生理活性强；(2)利用本发明方法得到的丹参、川芎总酚酸不但质量稳定，而且富含中药丹参和川芎的活性成分，具有抗脑缺血，抗细胞凋亡等药理作用，因此可以用来制备疗效好，安全可靠的防治心脑血管疾病药物。

(四)具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述：

实施例1：丹参、川芎有效部位提取

丹参、川芎各5kg饮片加去离子水在50℃浸泡24小时，60℃温提3次，各加80L、60L、60L水，每次均温提2小时，提取液在50℃减压浓缩至10L，冷却后加80％乙醇14L，静置过夜，过滤。滤液减压回收乙醇，所得浓缩液通过AB-8型大孔吸附树脂，用去离子水洗至α-萘酚反应，继续用70％乙醇洗脱至洗脱液加三氯化铁铁氰化钾试剂无明显的酚羟基反应，洗脱液在40℃下减压浓缩至适量，40℃下减压干燥，即得150克丹参和川芎总酚酸。

总酚酸和丹酚酸B的检测方法：

(1)丹酚酸B：用HPLC法测定，检测波长285nm，标准品丹酚酸B由中国药品生物制品检定所提供。

(2)丹参和川芎总酚酸：含量＝F(A-B)-B

其中：A为分光光度法测定以丹酚酸B为对照计算的总酚酸含量

      B为高效液相色谱法测定的丹酚酸B含量

      F为校正因子

总酚酸除了丹酚酸B(分子量718)外，还含有原儿茶醛(分子量138)、丹参素(分子量162)、紫草酸(分子量538)、咖啡酸(分子量180)、阿魏酸(分子量194)等酚酸类化合物，他们之间的分子量相差较大。以丹酚酸B为对照用分光光度法测定的总酚酸含量结果偏高，主要是由于其他酚酸类化合物的分子量低于丹酚酸B的分子量所致。因此，用上述6个酚酸类化合物平均分子量与丹酚酸B分子量的比值作为校正因子，以此校正后的总酚酸含量与用HPLC法分别测定原儿茶醛等6个酚酸类化合物含量之和基本一致。

阿魏酸、原儿茶醛、丹参素、咖啡酸、紫草酸、丹酚酸B由中国药品生物制品检定所提供。

检测结果：每克干浸膏含0.325克丹酚酸B；每克干浸膏含0.826克总酚酸。

实施例2：丹参、川芎有效部位提取

丹参、川芎各5kg饮片加水在100℃加热提取3次。第一次加80L水，加热2小时，第二、三次各加60L水，分别加热1.5小时。提取液在60℃减压6.7L，冷却后加95％乙醇至含醇量达75％，静置过夜，过滤。滤液减压回收乙醇，60℃减压浓缩至适量，60℃下减压干燥，即得丹参和川芎总酚酸干粉1.3Kg。

实施例3：丹参、川芎有效部位提取

丹参、川芎各5kg饮片加70％乙醇回流提取3次，第一次加70％乙醇40L，加热2小时，第二、三次各加30L水，分别加热2小时。提取液在60℃减压6.7L，冷却后加95％乙醇至含醇量达75％，静置过夜，过滤。滤液减压回收乙醇，浓缩至5L，冷却后加95％乙醇至含醇量达90％，静置过夜，过滤，滤液60℃减压浓缩至适量，喷雾干燥，即得丹参和川芎总酚酸干粉0.7Kg。

Claims (12)

1.一种丹参和川芎中药有效部位的提取方法，其特征在于所述的丹参和川芎质量比为1∶1，所述的方法按如下步骤进行：

(1)丹参和川芎饮片加入质量为药材质量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得药液；

(2)对步骤(1)所得药液进行纯化除杂质；

(3)步骤(2)所得药液在30～80℃下减压浓缩，干燥即得丹参和川芎中药有效部位提取物。

2.如权利要求1所述的丹参和川芎中药有效部位的提取方法，所述的纯化除杂质步骤为醇沉。

3.如权利要求1所述的丹参和川芎中药有效部位的提取方法，所述的纯化除杂质步骤为上大孔吸附树脂洗脱。

4.如权利要求1所述的丹参和川芎中药有效部位的提取方法，所述的纯化处理步骤为醇沉与上大孔吸附树脂洗脱交替进行。

5.如权利要求3或4所述的丹参和川芎中药有效部位的提取方法，其特征在于所述的大孔吸附树脂为苯乙烯型大孔吸附树脂。

6.如权利要求1所述的丹参和川芎中药有效部位的提取方法，其特征在于所述的步骤(3)中干燥为减压干燥，在30～80℃下进行。

7.如权利要求1所述的丹参和川芎中药有效部位的提取方法，其特征在于所述的步骤(3)中干燥为喷雾干燥。

8.如权利要求2所述的丹参和川芎中药有效部位的提取方法，所述的方法按如下步骤进行：

(1)丹参和川芎饮片加入质量为药材质量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得药液；

(2)步骤(1)所得药液在30～80℃下减压浓缩至浓度为0.5～5g/mL，浓缩液加入醇至含醇量为40～90％，静置，醇沉1～5次，吸取上清液，过滤，收集药液；

(3)步骤(2)所得药液在30～80℃下减压浓缩，在30～80℃下减压干燥即得丹参和川芎中药有效部位提取物。

9.如权利要求3所述的丹参和川芎中药有效部位的提取方法，所述的方法按如下步骤进行：

(1)丹参和川芎饮片加入质量为药材质量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得药液；

(2)步骤(1)所得药液离心后上大孔吸附树脂，用去离子水洗至流出液无α-萘酚反应后，再用10～90％乙醇洗脱至洗脱液无明显的酚羟基反应；

(3)步骤(2)所得药液在30～80℃下减压浓缩，在30～80℃下减压干燥即得丹参和川芎中药有效部位提取物。

10.如权利要求4所述的丹参和川芎中药有效部位的提取方法，其特征在于所述的方法如下：

(1)丹参和川芎饮片加入质量为药材质量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得药液；

(2)步骤(1)所得药液在30～80℃下减压浓缩至浓度为0.5～5g/mL，浓缩液加入醇至含醇量为40～90％，静置，醇沉1～5次，吸取上清液，过滤，收集药液；

(3)步骤(2)的药液经30～80℃减压回收乙醇后加适量水溶解所得药液离心后先上大孔吸附树脂，用去离子水洗至流出液无α-萘酚反应后，再用10～90％乙醇洗脱至洗脱液无明显的酚羟基反应；

(4)步骤(3)所得洗脱液在30～80℃下减压浓缩，在30～80℃下减压干燥即得丹参和川芎中药有效部位提取物。

11.如权利要求7所述的丹参和川芎中药有效部位的提取方法，其特征在于所述的方法按如下步骤进行：

(1)丹参和川芎饮片在质量为药材质量8～14倍的水或60～85％的乙醇水溶液中，在40～100℃下提取2～3次后，合并提取液，即得药液；

(2)步骤(1)所得药液在40～65℃下减压浓缩至浓度为1.5～3g/mL，浓缩液加入乙醇至含醇量为60～85％，静置，醇沉1～3次，吸取上清液，过滤，即得药液；

(3)所得药液在40～65℃下减压浓缩，40～65℃下减压干燥即得所述的丹参和川芎中药有效部位。

12.如权利要求9所述的丹参和川芎中药有效部位的提取方法，其特征在于所述的方法按如下步骤进行：

(1)丹参和川芎饮片在质量为药材质量8～14倍的水或60～85％的乙醇水溶液中，在40～100℃下提取2～3次后，合并提取液，即得药液；

(2)步骤(1)所得药液在40～65℃下减压浓缩至浓度为1.5～3g/mL，浓缩液加入乙醇至含醇量为60～85％，静置，醇沉1～3次，吸取上清液，过滤，即得药液；

(3)步骤(2)所得药液经30～80℃减压回收乙醇后加适量水溶解所得的药液离心后先上苯乙烯型大孔吸附树脂，用去离子水洗至流出液无α-萘酚反应后，再用10～90％乙醇洗脱至洗脱液无明显的酚羟基反应，收集洗脱液；

(4)所得洗脱液在40～65℃下减压浓缩，40～65℃下减压干燥即得所述的丹参和川芎中药有效部位。