CN1639150A

CN1639150A - 异喹啉衍生物

Info

Publication number: CN1639150A
Application number: CNA038051753A
Authority: CN
Inventors: M·维斯内尔; S·戈德曼; H·凯斯勒; G·图姆席恩; D·韦伯; D·戈特施林
Original assignee: Merck Patent GmbH
Current assignee: Merck Patent GmbH
Priority date: 2002-03-06
Filing date: 2003-02-07
Publication date: 2005-07-13
Also published as: KR20040089704A; CA2478618A1; AU2003218980A1; PL371216A1; WO2003074512A1; EP1480971A1; AR038869A1; US20050090525A1; DE10209692A1; BR0308195A; RU2004129734A; ZA200408027B; US7060707B2; MXPA04008469A; JP2005525363A

Abstract

通式(I)的异喹啉衍生物(其中X、Y、Z、R¹、R²和n如权利要求1中所定义)及其生理上可接受的盐或溶剂化物，是整联蛋白抑制剂，可用于对抗血栓形成、心肌梗塞、冠心病、动脉硬化、炎症、肿瘤、骨质疏松症、感染和血管成形术后的再狭窄或用于血管生成所维持或扩散的病理过程中。

Description

异喹啉衍生物

本发明涉及通式I化合物及其生理上可接受的衍生物，特别是它们的盐和溶剂化物：

其中

X为H，-C(＝NR³)-NHR⁴或Het，

或

Y为-(CH₂)_m-，

Z为NH或CH₂，

R¹和R⁵彼此独立地为H，A，OH，OA，芳烷基，，Hal，-CO-A，CN，NO₂，NHR³，COOA，COOH，SO₂A，CF₃或OCF₃，

R²在每种情况下独立地为H或A，

R³和R⁴彼此独立地为H，A，-CO-A，NO₂或CN，

A为具有1-6个碳原子的烷基，

m为0，1，2，3，4，5或6，

n和p彼此独立地为1，2或3。

本发明的目的在于寻找有价值的新化合物，特别是那些可用于制备药物的新化合物。

业已发现，式I化合物及其盐具有非常有价值的药理学性质和良好的耐受性。具体讲，它们可用作整联蛋白的抑制剂，特别是能够抑制αv，β3，β5或β6整联蛋白受体与配体间的相互作用，例如能够抑制血纤蛋白原与整联蛋白受体的结合。

整联蛋白属于I类异源二聚体跨膜受体家族，在许多细胞-基质和细胞-细胞粘附过程中起着重要作用(Tuckwell等，1996，Symp.Soc.Exp.Biol.47)。它们大致可分为3类：β1整联蛋白(它们是细胞外基质的受体)，β2整联蛋白(它们可以在白细胞上激活，从而在炎症过程中被激发)，以及αv整联蛋白，该类整联蛋白能够影响伤口愈合过程及其它病理过程中的细胞应答(Marshall和Hart，1996，Semin.CancerBiol.7，191)。对配体结合的相对亲和性和特异性取决于各种α和β亚单位的组合。

本发明的化合物对于整联蛋白αvβ1，αvβ3，αvβ5，αIIbβ3以及αvβ6和αvβ8(优选αvβ3，αvβ5和αvβ6，以及αIIbβ3)，都显示出特殊的功效。

αvβ6是一种相对稀少的整联蛋白(Busk等，J.Biol.Chem.1992，267(9)，5790)，在上皮组织的修复过程中其形成量增多，并且优先与天然基质分子粘连蛋白和肌腱蛋白结合(Wang等，Am.J.Respir.CellMol.Biol.1996，15(5)，664)。αvβ6的生理学和病理学作用尚不确切，但推测这种整联蛋白在与上皮细胞有关的生理过程和病症(例如炎症、伤口愈合、肿瘤)中起重要作用。因此，αvβ6在伤口的角化细胞上表达(Haapasalmi等，J.Invest.Dermatol.1996，106(1)，42)，据此可以假定除伤口愈合过程和炎症以外，皮肤的其它病理现象例如牛皮癣、大疱性天疱疹、皮炎和红斑、以及囊性纤维化、子宫内膜异位症、肝硬化和牙周炎，也可能受到所述整联蛋白的激动剂或拮抗剂的影响。此外，αvβ6还在呼吸道上皮中起作用(Weinacker等，Am.J.Respir.CellMol.Biol.1995，12(5)，547)，因此该整联蛋白的相应激动剂/拮抗剂可成功地用于呼吸道疾病，例如支气管炎、气喘、肺纤维化和呼吸道肿瘤。最后，已知αvβ6还在肠道上皮中起作用，这意味着相应的整联蛋白激动剂/拮抗剂可以用于治疗胃肠道的炎症、肿瘤和创伤。

已经发现本发明的式I化合物及其盐作为可溶性分子作用于携带上述受体的细胞，或者如果它们结合在表面上，则它们是αvβ6介导的细胞粘连的人工配体。具体讲，它们可用作αvβ6整联蛋白抑制剂，特别是能够抑制这种受体与其它配体的相互作用，例如粘连蛋白的结合。

本发明化合物尤其是玻连蛋白受体αvβ3的强效抑制剂和/或αvβ6受体的强效抑制剂。

αvβ3整联蛋白在许多细胞上均有表达，例如内皮细胞、血管平滑肌细胞(例如主动脉的血管平滑肌细胞)、降解骨基质(破骨细胞)或肿瘤细胞。

本发明化合物的作用例如可以采用J.W.Smith等在J.Biol.Chem.1990，265，12267-12271中描述的方法证实。

B.Felding-Habermann和D.A.Cheresh在Curr.Opin.Cell.Biol.1993，5，864中描述了整联蛋白作为粘连受体对各种病象与症状，尤其是与玻连蛋白受体αvβ3有关的各种病象与症状的重要性。

P.C.Brooks，R.A.Clark和D.A.Cheresh在Science 1994，264，569-571中描述到，血管生成依赖于血管整联蛋白与细胞外基质蛋白之间的相互作用。

P.C.Brooks，A.M.Montgomery，M.Rosenfeld，R.A.Reisfeld，T.Hu，G.Klier和D.A.Cheresh在Cell 1994，79，1157-1164中描述了使用环肽抑制这种相互作用并由此引发血管生成性血管细胞的细胞凋亡(编程性细胞死亡)的可能性。其中描述了可通过引发细胞凋亡而使肿瘤缩小的αvβ3拮抗剂或抗αvβ3的抗体。

类似于F.Mitjans等人的方法(J.Cell Science 1995，108，2825-2838)，在细胞粘附试验中，可提供实验证据证明本发明化合物也能阻止活细胞粘附于相应的基质蛋白，因此也可以阻止肿瘤细胞粘附于基质蛋白。

P.C.Brooks等在J.Clin.Invest.1995，96，1815-1822中介绍了可用于杀灭癌症和治疗肿瘤诱发的血管生成疾病的α_vβ₃拮抗剂。

本发明化合物能够抑制金属蛋白酶与整联蛋白的结合，由此阻止细胞利用蛋白酶的酶活性。其中的一个实例是如P.C.Brooks等所述(Cell 1996，85，683-693)，使用环-RGD肽可以抑制MMP-2(基质金属蛋白酶2)与玻连蛋白受体αvβ3的结合。

本发明的式I化合物因此可以用作药物活性成分，特别适用于治疗肿瘤疾病、骨质疏松症、溶骨病，以及用于抑制血管生成。

可以阻断整联蛋白受体与配体之间(例如纤维蛋白原与纤维蛋白原受体(糖蛋白IIb/IIIa)之间)相互作用的式I化合物，作为GPIIb/IIIa拮抗剂，能够阻止肿瘤细胞通过转移进行扩散。这可通过下列研究证实：

局部肿瘤的肿瘤细胞向脉管系统的扩散通过肿瘤细胞与血小板相互作用形成微聚集物(微血栓)而进行。肿瘤细胞通过保护在微聚集物中受到屏蔽，因而不能被免疫系统的细胞识别。微聚集物本身可以附着在血管壁上，从而有助于肿瘤细胞进一步侵入组织。由于纤维蛋白原与活化血小板上纤维蛋白原受体的结合能够促进微血栓的形成，因此GPIIb/IIIa拮抗剂可被认为是有效的转移抑制剂。

除能抑制纤维蛋白原、纤连蛋白和von Willebrand因子与血小板纤维蛋白原受体的结合之外，式I化合物还抑制其它粘附蛋白如玻连蛋白、胶原和层粘连蛋白与各种类型细胞表面上的相应受体的结合。特别是，它们能抑制血小板性血栓的形成，并因此可用于治疗血栓形成、中风、心肌梗死、炎症和动脉硬化。

血小板聚集抑制作用可用Born方法(Nature 1962，4832，927-929)在体外证实。

药物活性成分在生物体中的吸收量度标准是其生物利用度。

如果药物活性成分以注射液形式静脉内施于生物体，其绝对生物利用度，即在系统血液中未发生变化，亦即进行体循环的药物的比例为100％。

在口服给药治疗活性成分时，活性成分通常以固体制剂形式存在，因此必须首先溶出才能跨越进入屏障，例如胃肠道、口腔粘膜、鼻腔粘膜或皮肤，特别是角质层，然后才可以被身体吸收。药代动力学数据，即生物利用度数据可采用类似于J.Shaffer等人的方法获得(J.Pharm.Sciences，1999，88，313-318)。

本发明涉及用作治疗活性成分的权利要求1所述的式I化合物及其生理上可接受的盐和/或溶剂化物。

为此，本发明涉及用作整联蛋白抑制剂的权利要求1所述的式I化合物及其生理上可接受的盐和/或溶剂化物。

本发明涉及用于对抗疾病的权利要求1所述的式I化合物及其生理上可接受的盐和/或溶剂化物。

式I化合物可用作人和兽用药物的药物活性成分，尤其可用于预防和/或治疗以下疾病：循环疾病、血栓形成、心肌梗塞、动脉硬化、中风、心绞痛、肿瘤疾病如肿瘤生长或肿瘤转移、溶骨性疾病如骨质疏松症、病理性血管生成疾病如炎症、眼病、糖尿病性视网膜病、黄斑变性、近视、眼组织胞浆菌病、类风湿性关节炎、骨关节炎、新血管生成性(rubeotic)青光眼、胃溃疡性结肠炎、Crohn病、动脉粥样硬化、牛皮癣、大泡性天疱疹、皮炎、红斑、肺纤维化、囊性纤维化、子宫内膜异位症、肝硬化、牙周炎、血管成形术后再狭窄、多发性硬化、病毒感染、细菌感染、真菌感染、急性肾衰竭以及在伤口愈合中促进愈合过程。

式I化合物可在使用生物材料、植入物、导管或心脏起博器的手术中作为抗微生物剂使用。在此它们具有防腐作用。抗微生物活性的效力可用P.Valentin-Weigund等在Infection and Immunity，1988，2851-2855中描述的方法证明。

由于式I化合物是纤维蛋白原结合的抑制剂并因此是血小板上纤维蛋白原受体的配体，所以，如果它们被例如放射活性或UV可检测的基团取代，则它们可以作为体内诊断剂用于检测和定位血管系统中的血栓。

作为纤维蛋白原结合的抑制剂，式I化合物还可以作为有效助剂用于研究不同活化阶段血小板的代谢情况或研究纤维蛋白原受体的细胞内信号机制。掺入的标记物的可检测单位，例如³H标记的同位素，使得上述机理在与受体结合之后进行研究成为可能。

本文使用以下缩写：

Ac 乙酰基

Aza-Gly H₂N-NH-COOH

BOC 叔丁氧基羰基

CBZ或Z 苄氧基羰基

DCCI 二环己基碳二亚胺

DCM 二氯甲烷

DIPEA 二异丙基乙胺

DMF 二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亚砜

EDCI N-乙基-N，N’-(二甲氨基丙基)碳二亚胺

Et 乙基

Fmoc 9-芴基甲氧基羰基

Gly 甘氨酸

Gua 胍

HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六

氟磷酸盐

HOBt 1-羟基苯并三唑

Me 甲基

MBHA 4-甲基二苯甲基胺

Mtr 4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺酰基

NMP N-甲基吡咯烷酮

NMR 核磁共振

HONSu N-羟基琥珀酰亚胺

OBzl 苄基酯

OtBu 叔丁基酯

Oct 辛酰基

OMe 甲基酯

OEt 乙基酯

Pbf 2，2，4，6，7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基

β-Phe β-苯丙氨酸

POA 苯氧基乙酰基

Pyr 吡啶

R_f值保留因子

RP 反相

RT 保留时间

Sal 水杨酰

TBTU O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓四氟硼

酸盐

TFA 三氟乙酸

Thiqu 1，2，3，4-四氢异喹啉

Trt 三苯甲基(三苯基甲基)

式I化合物具有至少一个手性中心，因此可以多种立体异构体形式存在。所有这些立体异构体(例如D和L形式)及其混合物的形式(例如DL形式)都包括在式I内。

权利要求1所述的本发明化合物还包括所谓的前药衍生物，亦即用例如烷基或酰基、糖或寡肽修饰的式I化合物，它们在生物体内能迅速裂解成本发明的活性化合物。

这些还包括本发明化合物的生物可降解的聚合物衍生物，参见Int.J.Pharm.1995，115，61-67中的描述。

权利要求1所述的本发明化合物还包括式I化合物的这些衍生物，其中的羧基已转化成其药学上可接受的代谢不稳定酯或酰胺。

此外，作为式I化合物的取代基的游离氨基或游离羟基还可以带有合适的保护基。

术语“式I化合物的溶剂化物，，应理解为是指惰性溶剂分子与式I化合物形成的加合物，这种加合物基于它们的相互吸引力而形成。例如，溶剂化物包括一水合物或二水合物，或者与醇例如甲醇或乙醇形成的加合物。

本发明进一步涉及制备权利要求1所述化合物及其盐的方法，其特征在于：

a)在缩合剂例如HATU的存在下，使式II化合物：

其中Z，R¹和n如上定义，且W为常规保护基或肽化学中使用的固相，

与式III化合物进行反应：

其中Y如上定义，Q为合适的保护基或Het，

随后除去所述保护基和/或所述固相，

并且，在适当情况下，如果作为保护基的Q被除去，则将所得产物与合适的脒化合物例如N，N’-双-BOC-1-脒基吡唑反应，并且如果需要的话，除去剩余的保护基和/或固相，

或者

b)通过用溶剂解剂或氢解剂处理，将式I化合物从其官能团衍生物中释出，

和/或其特征在于，将碱性或酸性式I化合物通过用酸或碱处理而转化成其盐。

在本发明全文中，所有出现不止一次的基团例如R1可以相同或不同，即其是彼此独立的。

在上述各式中，A为直链或支链烷基，并且具有1-6个，优选1、2、3、4、5或6个的碳原子。A优选为甲基，此外还优选为乙基、异丙基、正丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基，以及正戊基，1-、2-或3-甲基丁基，1，1-、1，2-或2，2-二甲基丙基，1-乙基丙基，己基，1-、2-、3-或4-甲基戊基，1，1-、1，2-、1，3-、2，2-、2，3-或3，3-二甲基丁基，1-或2-乙基丁基，1-乙基-1-甲基丙基，1-乙基-2-甲基丙基，1，1，2-或1，2，2-三甲基丙基。

A特别优选为甲基。

术语“保护基”优选为乙酰基，丙酰基，丁酰基，苯乙酰基，苯甲酰基，甲苯基，POA，甲氧基羰基，乙氧基羰基，2，2，2-三氯乙氧基羰基，BOC，2-碘代乙氧基羰基，CBZ(“苄氧基羰基”)，4-甲氧基苄氧基羰基，Fmoc，Mtr或苄基，特别优选Fmoc。

芳烷基优选为苄基，苯乙基，苯丙基或萘甲基，特别优选苄基。

Hal优选为F，Cl或Br。

Het为含有至多三个杂原子的芳香性或饱和的单环或二环基团，优选为具有5-10个环原子的饱和、部分饱和或完全不饱和的单环或二环杂环基，其中可以存在1或2个N和/或1或2个S或O原子，并且这种杂环基可被CN、Hal、OH、OA、CF₃、A、NO₂或OCF₃单取代或二取代。

Het优选是取代或未取代的2-或3-呋喃基，2-或3-噻吩基，1-、2-或3-吡咯基，1-、2-、4-或5-咪唑基，3-、4-或5-吡唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-异噁唑基，2-、4-或5-噻唑基，3-、4-或5-异噻唑基，2-、3-或4-吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，此外还优选1，2，3-三唑-1-、-4-或-5-基，1，2，4-三唑-1-、-4-或-5-基，1-或5-四唑基，1，2，3-噁二唑-4-或-5-基，1，2，4-噁二唑-3-或-5-基，1，3，4-噻二唑-2-或-5-基，1，2，4-噻二唑-3-或-5-基，1，2，3-噻二唑-4-或-5-基，2-、3-、4-、5-或6-2H-噻喃基，2-、3-或4-4H-噻喃基，3-或4-哒嗪基，吡嗪基，2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基，2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基，1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-1H-吲哚基，1-、2-、4-或5-苯并咪唑基，1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基，3-、4-、5-、6-或7-苯并异噁唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并异噻唑基，4-、5-、6-或7-苯并-2，1，3-噁二唑基，1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基，1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基，1-、2-、3-、4-或9-咔唑基，1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-吖啶基，3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基，2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基。杂环基还可以被部分或全部氢化。Het因此还可以是2，3-二氢-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基，2，5-二氢-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基，四氢-2-或-3-呋喃基，1，3-二氧戊环-4-基，四氢-2-或-3-噻吩基，2，3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基，2，5-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基，1-、2-或3-吡咯烷基，四氢-1-、-2-或-3-吡咯基，四氢-1-、-2-或-4-咪唑基，2，3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-或-7-1H-吲哚基，2，3-二氢-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡唑基，四氢-1-、-3-或-4-吡唑基，1，4-二氢-1-、-2-、-3-或-4-吡啶基，1，2，3，4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-或-6-吡啶基，1，2，3，6-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-或-6-吡啶基，1-、2-、3-或4-哌啶基，1-、2-、3-或4-氮杂庚环基，2-、3-或4-吗啉基，四氢-2-、-3-或-4-吡喃基，1，4-二噁烷基，1，3-二噁烷-2-、-4-或-5-基，六氢-1-、-3-或-4-哒嗪基，六氢-1-、-2-、-4-或-5-嘧啶基，1-、2-或3-哌嗪基，1，2，3，4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或8-喹啉基，1，2，3，4-四氢-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-异喹啉基。Het特别优选甲基吡啶基，尤其是4-甲基吡啶-2-基，吡啶-2-基，嘧啶-2-基，咪唑-2-基，苯并咪唑-2-基和它们的氢化衍生物。

OA优选为甲氧基，乙氧基，丙氧基或丁氧基，此外还优选为戊氧基或己氧基。

R¹和R⁵彼此独立地优选为H，A，CN，NO₂，Hal或-COA，其中A如上定义；R¹和R⁵尤其为H。

R²优选为H或A，其中A如上定义；特别是H。

R³和R⁴，彼此独立，优选为H或-COA，特别是H。

X优选为H，-C(＝NH)-NH₂，-C(＝N-甲基)-NH₂，4-甲基吡啶-2-基，吡啶-2-基，嘧啶-2-基，咪唑-2-基，苯并咪唑-2-基和它们的氢化衍生物。

Y为-(CH₂)_m-或

尤其是-(CH₂)₄-或

n和p，彼此独立，优选为1或2，尤其为1。

m优选为0，2或4，尤其是0或4。

优选式IA和IB的化合物：

其中X、Y、Z和R²如上定义。式IA和IB中的R²特别优选为H。

因此，本发明尤其涉及其中所述基团至少一个具有上述优选含义的式I化合物。一些优选的化合物组可以用下面亚式I1-136表述：

另外，式I化合物及制备它们用的起始原料可用本领域已知的方法制备，例如参见文献(譬如标准专著，如Houben-Weyl，Methoden derorganischen Chemie[有机化学方法]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)中描述的方法，确切地讲是在已知的且适于所述反应的反应条件下制备。在此也可以采用已知方法的变化形式，但在此不作详述。

如果需要，起始原料也可以就地生成，这样就无需从反应混合物中分离出它们，而可以直接进一步转化成式I化合物。

式I化合物优选在肽合成的条件下获得。理想的是使用常规肽合成方法，参见例如Houben-Weyl1.c.，Volume 15/II，第1-806页(1974)中所述。

式I化合物的直接前体也可以在固相例如可溶胀的聚苯乙烯树脂上合成，参见例如Merrifield所述方法(Angew.Chem.97，801-812，1985)。可以使用的固相原则上可以是例如固相肽合成或核酸合成已知的所有载体。合适的高分子载体材料是固相高分子(优选具有亲水性能)，例如交联的多糖如纤维素，sepharose或Sephadex^R，丙烯酰胺，聚乙二醇基聚合物或触角聚合物(tentacle polymers^R)。所用固相优选为三苯甲基氯-聚苯乙烯树脂，4-甲氧基三苯甲基氯树脂，Merrifield树脂或Wang树脂。

因此，式I化合物可以通过式II化合物与式III化合物反应，随后除去保护基或这种固相而获得。

式I化合物同样也可以经过式IV化合物与式V化合物反应，随后除去保护基而获得。

偶联反应优选是在脱水剂，例如碳化二亚胺如DCCI或EDCI，以及例如丙烷膦酸酐(参见Angew.Chem.1980，92，129)，二苯基膦酰基叠氮或2-乙氧基-N-乙氧基羰基-1，2-二氢喹啉的存在下，在惰性溶剂例如卤代烃(如二氯甲烷)、醚(如四氢呋喃或二噁烷)、酰胺(如DMF或二甲基乙酰胺)、腈(如乙腈)、二甲亚砜中或在这种溶剂存在下，于大约-10至40℃，优选0-30℃的温度下进行。为了促进分子间肽键合之前的分子内环化作用，反应宜在稀溶液中进行。反应时间取决于所用条件，可以从几分钟到14天不等。

本发明也可以使用式II和/或IV化合物的衍生物来代替式II和/或IV化合物，优选使用预活化的羧酸、或羧酰卤、对称或混合酸酐或活性酯。文献(例如见标准专著如Houben-Weyl，Methoden derorganischen Chemie[有机化学方法]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)已经记载了在典型的酰化反应中用于活化羧基的此类基团，活性酯宜就地形成，例如通过加入HOBt或N-羟基琥珀酰亚胺就地形成。

反应通常在惰性溶剂中进行，如果使用羧酰卤，反应则在有酸结合剂(优选有机碱如三乙胺、二甲基苯胺、吡啶或喹啉)存在的情形下进行。

同样有利的是加入碱金属或碱土金属的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，或碱金属或碱土金属的其它弱酸盐，优选钾、钠、钙或铯的这种盐。

此外，通过溶剂解(特别是水解)，或通过氢解，式I化合物还可以通过从其官能衍生物中释出而获得。

用于溶剂解或氢解的优选起始原料是在其它方面都与式I的结构一致，但其中的一个或多个游离氨基和/或羟基却被相应的被护氨基和/或羟基基团取代的那些化合物，尤其是其中H-N基团被SG¹-N基团(其中SG¹为氨基保护基)取代，和/或其中羟基的H原子被羟基保护基取代的那些化合物，例如具有式I结构但其中的-COOH基团被-COOSG²取代的化合物，其中SG²为羟基保护基。

起始原料分子中也可以存在多个相同或不同的保护的氨基和/或羟基。如果存在的保护基彼此不同，在许多情形下，能够选择性地将它们除去(参见：T.W.Greene，P.G.M.Wuts，有机化学中的保护基(Protective Groups in Organic Chemistry)，第2版，Wiley，New York1991或P.J.Kocienski，保护基(Protecting Groups，第1版，GeorgThieme Verlag，Stuttgart-New-York，1994)，H.Kunz，H.Waldmann综合有机合成(Comprehensive Organic Synthesis)Vol.6(Eds..B.M.Trost，I.Fleming，E.Winterfeldt)，Pergamon，Oxford，1991，pp.631-701)。

术语“氨基保护基”是通常已知的，并且是指适于保护(或封闭)氨基以避免其发生化学反应的基团。典型的这类基团尤其是未取代的或取代的酰基、芳基、芳烷氧基甲基或芳烷基。由于氨基保护基是在需要的反应(或合成顺序)之后除去，因此其类型和大小并不重要；但优选具有1-20个碳原子的那些基团。术语“酰基”应作与本发明方法有关的最广义的解释。它包括衍生自脂肪族、芳脂族、脂环族、芳族或杂环羧酸或磺酸的酰基，以及烷氧基羰基、链烯氧基羰基、芳氧基羰基和尤其是芳烷氧基羰基的基团。该类型酰基的实例是链烷酰基，譬如乙酰基、丙酰基和丁酰基；芳烷酰基，譬如苯乙酰基；芳酰基，如苯甲酰基和甲苯甲酰基；芳氧基链烷酰基，如苯氧基乙酰基；烷氧基羰基，如甲氧基羰基、乙氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基；Boc和2-碘代乙氧基羰基；链烯氧基羰基，如烯丙氧基羰基(Aloc)、芳烷氧基羰基，如CBZ(与Z同义)、4-甲氧基苄氧基羰基(MOZ)、4-硝基苄氧基羰基和9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)；2-(苯磺酰基)乙氧基羰基；三甲基甲硅烷基乙氧基羰基(Teoc)，和芳基磺酰基，如4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺酰基(Mtr)。优选的氨基保护基是Boc，Fmoc和Aloc，另外还有Z、苄基和乙酰基。

术语“羟基保护基”同样也是通常已知的，并且是指适于保护羟基以避免其发生化学反应的基团。典型的此类基团是上述的未取代的或取代的芳基、芳烷基、芳酰基或酰基，此外还可以是烷基，烷基-、芳基-和芳烷基甲硅烷基基团，以及O，O-和O，S-缩醛。由于羟基保护基是在需要的化学反应或合成顺序之后除去，因此其性质和大小并不重要；具有1-20个碳原子，特别是1-10个碳原子的基团是优选的。羟基保护基的实例特别是芳烷基，如苄基、4-甲氧基苄基和2，4-二甲氧基苄基，芳酰基，如苯甲酰基和对-硝基苯甲酰基，酰基如乙酰基和新戊酰基，对-甲苯磺酰基，烷基如甲基和叔丁基，但也可以是烯丙基，烷基甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基(TMS)、三异丙基甲硅烷基(TIPS)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)和三乙基甲硅烷基，三甲基甲硅烷基乙基，芳烷基甲硅烷基，如叔丁基二苯基甲硅烷基(TBDPS)，环状缩醛，如亚异丙基缩醛、亚环戊基缩醛、亚环己基缩醛、亚苄基缩醛、对甲氧基亚苄基羧酸和邻，对-二甲氧基亚苄基缩醛，非环状缩醛，如四氢吡喃基(Thp)、甲氧基甲基(MOM)、甲氧基乙氧基甲基(MEM)、苄氧基甲基(BOM)和甲硫基甲基(MTM)。特别优选的羟基保护基是苄基、乙酰基、叔丁基和TBS。

在使用保护基的每种情形下，从其官能团衍生物中释出式I化合物的方法是文献中已知的(如T.W.Greene，P.G.M.Wuts，有机化学中的保护基(Protective Groups in Organic Chemistry)，第2版，Wiley，New York 1991，或P.J.Kocienski，保护基(Protecting Groups)，第1版，Georg Thieme Verlag，Stuttgart-New York，1994)。在该情形下也可以使用本领域已知的改进形式，但在此不作详述。

式I碱可利用酸转化成缔合的酸加成盐，例如，在惰性溶剂如乙醇中将等量的这种碱与酸反应，然后蒸发便可以实现这种转化。对于该反应，适宜的酸特为那些能形成生理上可接受的盐的酸。因此，可以使用无机酸，例如硫酸、亚硫酸、连二硫酸、硝酸、氢卤酸(如盐酸或氢溴酸)、磷酸，如正磷酸，氨基磺酸、另外也可以使用有机酸，特别是脂族、脂环族、芳脂族、芳族或杂环的一元或多元羧酸、磺酸或硫酸，例如甲酸、乙酸、丙酸、己酸、辛酸、癸酸、十六烷酸、十八烷酸、新戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富马酸、马来酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、葡糖酸、抗坏血酸、烟酸、异烟酸、甲磺酸或乙磺酸、苯磺酸、三甲氧基苯甲酸、金刚烷羧酸、对-甲苯磺酸、乙醇酸、扑酸、氯苯氧基乙酸、天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、乙醛酸、棕榈酸、对-氯苯氧基异丁酸、环己烷羧酸、葡萄糖1-磷酸、萘一磺酸和萘二磺酸或月桂基硫酸。与生理上不可接受的酸所成的盐，例如苦味酸盐，可用于分离和/或纯化式I化合物。

另一方面，式I化合物可利用碱(例如氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾)转化为相应的金属盐，特别是碱金属盐或碱土金属盐，或者转化为相应的铵盐。另外，合适的盐还包括取代的铵盐，例如单乙醇-、二乙醇-或二异丙基铵盐，环己基或二环己基铵盐，二苄基乙二胺盐，以及例如与精氨酸或赖氨酸形成的盐。

本发明还涉及式I化合物和/或其生理上可接受的盐在制备药物方面的用途。

此外，本发明还涉及包含至少一种式I化合物和/或其生理上可接受的盐或溶剂化物的药物制剂，所述药物制剂是以非化学方法制备的。在这种情形下，可以将式I化合物与至少一种固体、液体和/或半液体赋形剂或辅剂一起，并且如果需要，和一种或多种其它活性成分联合制成合适剂型。

这些制剂可作为人用药或兽用药使用。适宜的赋形剂是适于肠道(例如口服)、胃肠外或局部给药并且不与本发明的新化合物发生反应的有机或无机物质，例如水、植物油、苄醇类、亚烷基二醇、聚乙二醇、甘油三乙酸酯、明胶、碳水化合物如乳糖或淀粉、硬脂酸镁、滑石或凡士林。具体讲，片剂、丸剂、包衣片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、糖浆剂、果汁剂或滴剂适合口服给药，栓剂适合直肠给药，溶液优选油性或水性溶液、以及混悬剂、乳剂或植入剂适合胃肠外给药，软膏剂、霜剂或粉剂适合局部给药。也可以将本发明新化合物冻干，由此得到的冻干物可用于例如制备注射剂。所述制剂可以加以灭菌和/或可包含辅助剂，如润滑剂、防腐剂、稳定剂和/或湿润剂，乳化剂、调节渗透压的盐、缓冲物质、着色剂、调味剂和/或其它活性成分，例如一种或多种维生素。

对于吸入喷雾给药，可以使用其中的活性成分溶在或悬浮在推进剂气体或推进剂气体混合物(例如CO₂或氯氟烃类)中的喷雾剂。在此所用的活性成分优选为微粉化形式，其中可存在一种或多种附加的生理上可接受的溶剂，例如乙醇。吸入溶液可借助常规的吸入器施用。

在对抗疾病，特别是血栓形成、心肌梗塞、冠心病、动脉硬化、肿瘤、骨质疏松症、炎症和感染中，式I化合物及其生理上可接受的盐可以用作整联蛋白抑制剂。

式I化合物及其生理上可接受的盐还可以用于通过血管生成来维持或扩散的病理过程，特别是肿瘤或类风湿性关节炎。

本发明的物质通常以类似于其它已知的市售肽，特别是类似于US-A-472,305中所述化合物的方式给药，优选以每剂量单位约0.05-500mg，特别是0.5-100mg的剂量给药。日剂量优选为约0.01-2mg/kg体重。但对于每位患者的特定剂量取决于多种因素，例如所所用特定化合物的效力、年龄、体重、健康状况、性别、饮食、给药的时间与方法、排泄速率、药物联用情况以及所治疗的特定疾病的严重程度。优选胃肠外给药。

此外，式I化合物可以作为整联蛋白配体用于制备纯化整联蛋白用的亲和色谱柱。在该方法中，配体即式I化合物通过粘固官能团如Asp的羧基共价偶联在高分子载体上。

用于整联蛋白纯化的亲和色谱材料在本领域已知的缩合氨基酸用的常规条件下制备。

式I化合物含有一个或多个手性中心，因此可以以外消旋或旋光体形式存在。得到的外消旋体可用本领域已知的物理或化学方法拆分成对映体。非对映体优选通过外消旋混合物与光活性拆分剂反应来形成。适宜的拆分剂的实例有光活性酸，如D和L形式的酒石酸、二乙酰基酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸，以及各种光活性的樟脑磺酸，如β-樟脑磺酸。借助填充有光活性拆分剂(如二硝基苯甲酰基甘氨酸)的柱进行对映体的拆分也是有利的；合适的洗涤剂的实例包括己烷/异丙醇/乙腈混合物，其体积比为例如82∶15∶3。

当然，按照上述方法，使用光活性起始原料也可以获得光学活性的式I化合物。

在上下文中，所有温度均以℃为单位给出。在下列实施例中，“常规后处理”是指，如果需要的话，加入水，如果需要话(取决于最终产物的构成)，将pH值调节至2-10，用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取混合物，分相，将有机相用硫酸钠干燥并进行蒸发，然后将产物通过硅胶色谱和/或通过结晶纯化。

RT＝下列体系中HPLC的保留时间(分钟)：

柱购自Omnicrom YMC：

1.4.6×250mm，5μm，C₁₈(分析)；

2.30×250mm，7μm，C₁₈(制备).

采用的洗脱剂为含0.1％TFA的乙腈(B)和含0.1％TFA的水(A)的梯度洗脱液(梯度数值在每种情况下都是以乙腈的体积百分比表示)。保留时间RT在1ml/min的流速下测定。

在220nm处检测。

非对映体优选在所述条件下分离。

质谱(MS)：ESI(电喷雾离子化)(M+H)⁺

FAB(快原子轰击)(M+H)⁺.

1.材料与制备通法

合成用溶剂可以是“技术级”产品(使用前要进行蒸馏)，或者也可以是购自Fluka(Seelze)或Merck(Darmstadt)的“无水”或“供合成用”纯度级别产品。NMP(已蒸馏过)由BASF(Ludwigshafen)惠赠。柱色谱用溶剂为“技术级”产品，使用前需进行蒸馏或者也可以不经蒸馏而直接使用(己烷)。HPLC溶剂乙腈(溶剂B)和TFA为购自Merck(Dermstadt)的“梯度级”纯度级别产品，水(溶剂A)为去离子水并且经Millipore(Molsheim，France)的Milli-Q系统处理。

Fmoc-保护的氨基酸购自Novabiochem Advanced ChemTech，MultiSyn Tech或PepTech Corporation(Cambridge，USA)。

对于人工固相合成，使用由Becton-Dickinson(Fraga，Spain)或Braun(Melsungen)提供的PE注射器，其中的PE釉料由Roland VetterLaborbedarf(Ammerbuch)提供。为混合树脂悬浮液，以大约30rpm旋转注射器。将树脂加料到玻璃振动器内。

空气或湿度敏感反应在干燥玻璃容器中于氩气氛(99.996％)下进行。已经经过无水处理的吸湿性溶剂在氩气氛围中转移到注射器中。

对于HPLC纯化，是将化合物溶于DMSO、乙腈或甲醇(梯度级)中，通过Sartorius(Gttingen)生产的RC15或RC25(RC膜，0.45μm)过滤。分析、半制备和制备性分离使用两个Amersham PharmaciaBiotech)生产的HPLC系统(分析：kta Basic 10F，带有A-900自动进样器；制备：kta Basic 100F，带有P-900泵系统和UV-900检测器)和两个Beckman提供的系统(具有125溶剂模块和166检测器模块的Gold系统；110B泵系统，420控制单元和Knauer Uvicord检测器)进行。分析分离使用的柱为Omnicrom YMC生产的ODS-A C₁₈(250mm×4.6mm，5μm，流速：1ml/min)；半制备分离用的柱为Omnicrom YMC生产的ODS-A C₁₈(250mm×20mm，5μm或10μm，流速：8ml/min)；制备分离柱为Omnicrom YMC生产的ODS-A C₁₈(250mm×30mm，10μm，流速：25ml/min)和Macherey-Nagel生产的Nucleosil C₁₈(250mm×20mm，7μm，流速：25ml/min)。化合物用在水(溶剂A)和0.1％(v/v)TFA中的乙腈(溶剂B)线性梯度洗脱剂洗脱(30min)。为了测定半制备或制备性HPLC纯化后化合物的分析纯度，在220nm检测器波长下求值分析HPLC色谱的峰积分值。

柱色谱用Merck(Darmstadt)生产的硅胶60(230-400目ASTM，粒度0.040-0.063mm)进行，快速色谱在高于大气压1-1.2巴的压力下进行。

薄层色谱(TLC)及R_f值的测定使用Merck(Darmstadt)生产的涂布有硅胶60F₂₅₄的铝TLC板。在UV灯(λ＝254nm)下观察TLC板进行检测。

熔点使用Büchi 510熔点仪按照Dr Tottoli法测定，并且未经校正。

所有¹H-NMR和¹³C-NMR光谱是在300K下用Bruker AC250或DMX500光谱仪记录，光谱数据在Bruker Aspekt 1000(AC250)或Silicon Graphics Indy，O2和Octane工作站上利用XWINNMR软件处理。化学位移(δ)以相对于四甲基硅烷的百万分之几(ppm)为单位给出，并且偶合常数以赫兹(Hz)为单位给出。所用内标为四甲基硅烷或溶剂峰：DMSO-d₆：2.49ppm(¹H-NMR)和39.5ppm(¹³C-NMR)；CDCl₃：7.24ppm(¹H-NMR)和77.0ppm(¹³C-NMR)。¹³C-NMR光谱利用¹H宽带去偶合技术记录。大多数情况下的信号归属借助于HMQC和COSY实验确定。

质谱是在Finnigan MAT8200仪器上利用电子轰击(EI)和化学电离(CI)技术记录的。电喷雾电离(ESI)质谱是在Finnigan LCQ质谱议上记录，该质谱议与带有Omnicrom YMC生产的ODS-A C₁₈(125mm×2mm，3μm，流速：0.2ml/min)柱的Hewlett Packard 1100 HPLC系统联用。化合物以乙腈(溶剂B)/水(溶剂A)+0.1％(v/v)甲酸的线性梯度洗脱液洗脱(15分钟)。质谱以“X(Y)[M+Z]⁺”的形式给出，其中“X”为检测质量，“Y”为质量峰的观测强度，“M”为所测试的分子，且“Z”为加成阳离子。

高分辨质谱(HRMS)由Koka Jajasimhulu博士(University ofCincinnati，USA)采用电喷雾电离-飞行时间(ESI-TOF)技术记录。

冻干使用Christ(Osterode)提供的Alpha2-4仪器进行。

AAV 1：TCP树脂的载荷

将相应的Fmoc-保护的氨基酸(1.56mmol，1.5eq)和DIPEA(177μl，1.03mmol)加到在无水CH₂Cl₂(6ml，10min)中预溶胀TCP树脂(1.16g，最大负荷：0.9mmol/g)内。5分钟后，进一步加入DIPEA(91μl，0.52mmol)，振动树脂。2小时后，加入甲醇(1.16ml)用于封端未反应的三苯甲基基团，并且进一步振动15分钟。树脂然后用无水CH₂Cl₂(5×20ml，每次3分钟)、NMP(5×20ml，每次3分钟)洗涤，然后再用无水CH₂Cl₂(5×20ml，每次3分钟)洗涤，最后用甲醇/CH₂Cl₂(1∶1，20ml)的混合物和甲醇(20ml)洗涤。将树脂在高真空下干燥，利用下述方程可以测定树脂的载荷：

l = \frac{(m_{2} - m_{1}) \times 1000}{(MW - 36.45) \times m_{2}}

l树脂载荷，单位[mmol/g]，

m₁偶联前树脂重量[g]

m₂偶联后干燥树脂的重量[g]

MW Fmoc-保护的氨基酸/羧酸的分子量，单位[g/mol]

CI和MeO的质量差值引起的误差可以忽略不计。

AAV 2：Fmoc保护基的除去

将树脂(100mg)在NMP(5ml，10min)中预溶胀。在NMP(5ml)中用新制备的20％哌啶溶液(v/v)处理15分钟以除去Fmoc保护基。然后将树脂用NMP(5×5ml，每次3分钟)洗涤，再加入在NMP(5ml，15分钟)中的20％哌啶溶液(v/v)。最后，将树脂用NMP洗涤(5×5ml，每次3分钟)。

AAV 3：按照Gibson法偶联5-(9H-芴-9-基甲氧基)-3H-1，3，4-噁二唑-2-酮(142)和树脂键合的游离胺

为了脱保护树脂键合的胺，向TCP树脂(100mg，0.354mmol/g，0.035mmol)中加入在NMP(2×5ml，每次15分钟)中的20％哌啶(v/v)。树脂然后用NMP(5×5ml，每次3分钟)和无水CH₂Cl₂(5×5ml，每次3分钟)洗涤，然后在无水CH₂Cl₂(5ml)中溶胀半小时。之后再向树脂中加入5-(9H-芴-9-基甲氧基)-3H-1，3，4-噁二唑-2-酮(142)(30.5mg，0.108mmol，3.1eq)的无水CH₂Cl₂(1ml)溶液，振动所得混合物90分钟。通过用CH₂Cl₂(5×5ml，每次3分钟)和NMP(5×5ml，每次3分钟)洗涤终止反应。

AAV 4：利用HATU/HOAt的偶联

将树脂键合的游离胺或肼(0.389mmol)用NMP(5×5ml，每次3分钟)洗涤。然后向树脂中加入适当Fmoc-保护的氨基酸或羧酸单元(0.779mmol，2eq)、HATU(296mg，0.779mmol，2eq)和HOAt(106mg，0.779mmol，2eq)在NMP(5ml)中的溶液。最后，加入均三甲吡啶(1027μl，7.79mmol，20eq)，并且振动树脂过夜。树脂然后用NMP(5×5ml，每次3分钟)洗涤，并使用相同的试剂、用量和反应时间重复偶联步骤。树脂随后用NMP(5×5ml，每次3分钟)洗涤。

AAV 5：从TCP树脂中脱除

按照下述流程从TCP树脂中脱除化合物：

步骤试剂操作次数时间[min]

1 CH₂Cl₂ 洗涤 3 10

2 TFA/TIPS/H₂O 脱除/脱保护 3 30

(18∶1∶1)

3 CH₂Cl₂ 洗涤 3 3

对于100mg树脂，通常使用2ml脱除溶液。蒸发合并的步骤2和3的滤液。

2.实施例

实施例1a)

N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]肼(141)

将Boc-肼(10.0g，75.6mmol)和DIPEA(12.95ml，75.6mmol)溶于无水CH₂Cl₂(200ml)，冷却到0℃。然后在30分钟内加入溶在无水CH₂Cl₂(100ml)中的FmocCl(19.6g，75.8mmol)，并于室温搅拌混合物过夜。有机相用水(200ml)萃取，蒸发到大约100ml体积。随后于0℃小心加入三氟乙酸(100ml)，搅拌混合物1.5小时。产物通过小心加入饱和Na₂CO₃溶液(300ml)进行沉淀，干燥得无色固体(18.02g，70.8mmol，94％)。

m.p.150-153℃；¹H-NMR(250MHz，DMSO-d₆，300K)δ＝10.10(bs，1H，NH)，9.60(bs，1H，NH)，7.89(d，J＝7.6Hz，2H，arom)，7.70(d，J＝7.3Hz，2H，arom)，7.30-7.45(m，4H，arom)，4.48(d，J＝6.6Hz，2H，CO-CH₂)，4.27(t，J＝6.7Hz，1H，CO-CH₂-CH)；¹³C-NMR(62.9MHz，DMSO-d₆，300K)δ＝156.26，143.59，140.98，127.96，127.34，125.33，120.39，67.00，46.60；HRMS(ESI-TOF)：C₁₅H₁₅N₂O₂[M+H]⁺：255.1134(计算值：255.1119)；分析HPLC(5-90％，30min)t_R＝16.47min.

实施例1b)

5-(9H-芴-9-基甲氧基)-3H-1，3，4-噁二唑-2-酮(142)

将由N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]肼(141)(1.49g，5.78mmol)、CH₂Cl₂(60ml)和饱和NaHCO₃溶液(60ml)组成的悬浮液于0℃剧烈搅拌5分钟，所形成的溶液然后在不搅拌情形下放置5分钟。然后利用注射器向下方的有机相中小心加入光气(1.89M甲苯溶液，7.95ml，15.0mmol)，加毕随即开始搅拌反应混合物。10分钟后，向反应混合物中加入水(20ml)和CH₂Cl₂(20ml)。然后迅速分离各相，水相用CH₂Cl₂(50ml)萃取，合并的有机相用Na₂SO₄干燥。减压除去溶剂，干燥得无色固体(1.35g，4.82mmol，83％)。

m.p.125℃；¹H-NMR(250MHz，CDCl₃，300K)δ＝8.72(bs，1H，NH)，7.77(d，J＝7.5Hz，2H，arom)，7.59(d，J＝7.4Hz，2H，arom)，7.28-7.45(m，4H，arom)，4.49(d，J＝7.8Hz，2H，CH₂-CH)，4.32-4.41(m，1H，CH₂-CH).

实施例2a)

N-苯乙基甲酰胺(146)

缓慢加热苯乙胺(20.0g，0.165mol)和甲酸(49.4ml，1.309mol)的混合物到200℃。在该过程中馏除过量的水和甲酸。然后将混合物于200℃维持1小时，减压蒸馏产物，得到无色油体(22.0g，0.147mol，89％)。

¹H-NMR(250MHz，DMSO-d₆，300K)δ＝8.06(bs，1H，CHO)，7.16-7.32(m，5H，arom)，3.32-3.42(m，2H，NH-CH₂)，2.77(t，J＝7.2Hz，2H，NH-CH₂-CH₂)；分析HPLC(5-90％，30min)t_R＝15.04min.

实施例2b)

3，4-二氢异喹啉(147)

氩气氛下，在油浴中于1小时内加热多磷酸(25g)和五氧化二磷(5.4g，38.0mmol)到180℃。然后于160℃加入N-苯乙基甲酰胺(146)(4.3g，28.8mmol)，并在恒温下搅拌混合物1.5小时。然后任混合物自然冷却到室温，加入水(40ml)。混合物随后通过小心加饱和氢氧化钠水溶液调节pH至10。混合物然后用乙醚(500ml)萃取，分出有机相，用NaOH干燥。蒸发得到棕色油体(2.81g，21.4mmol，74％)。

¹H-NMR(250MHz，DMSO-d₆，300K)δ＝8.32(t，J＝2.3Hz，1H，N-CH)，7.16-7.40(m，4H，arom)，3.59-3.66(m，2H，N-CH₂)，2.66(t，J＝7.3Hz，2H，N-CH₂-CH₂)；分析HPLC(5-90％，30min)t_R＝8.29min.

实施例2c)

2-(1，2，3，4-四氢-1-异喹啉基)乙酸(148)

在室温下混合3，4-二氢异喹啉(147)(2.2g，16.77mmol)和丙二酸(1.94g，16.77mmol)，进而在油浴中于120℃加热1小时。冷却混合物到室温，将产物用甲醇(150ml)重结晶。干燥得到无色固体(1.52g，7.99mmol，48％).

m.p.230℃(分解)；¹H-NMR(250MHz，D₂O，300K)δ＝7.13-7.23(m，4H，arom)，4.65(t，J＝6.9Hz，1H，CH-NH)，3.44-3.54(m，1H，NH-CH₂)，3.24-3.34(m，1H，NH-CH₂)，2.95-3.03(m，2H，NH-CH₂-CH₂)，2.79(d，J＝6.1Hz，2H，CH₂-COOH)；HRMS(ESI-TOF)：C₁₁H₁₄NO₂[M+H]⁺：192.1047(计算值：192.1025)；分析HPLC(5-90％，30min)t_R＝10.15min.

实施例2d)

1-羧甲基-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸9H-芴-9-基甲基酯(149)

将2-(1，2，3，4-四氢-1-异喹啉基)乙酸(148)(0.9g，4.73mmol)、饱和NaHCO₃溶液(15ml)和二噁烷(5ml)组成的悬浮液冷却到0℃。然后在30分钟内逐滴加入溶解在二噁烷(5ml)中的FmocCl(1.35g，5.2mmol)，搅拌混合物过夜。混合物然后通过摇动用乙醚洗涤(30ml)，进而利用浓盐酸将水相的pH调节至1。产物然后用乙酸乙酯(50ml)萃取，将有机相用硫酸镁干燥并且蒸发。粗产物随后通过柱色谱纯化(乙酸乙酯/己烷/乙酸，1∶1∶1％)，干燥得无色泡沫物(1.54g，3.73mmol，79％)。

m.p.61-63℃；TLC R_f(乙酸乙酯/己烷/乙酸，1∶1∶1％)＝0.54；¹H-NMR(250MHz，DMSO-d₆，300K)δ＝7.79-7.91(m，2H，arom)，7.63-7.66(m，2H，arom)，7.05-7.39(m，8H，arom)，5.40-5.52(m，1H，NH-CH)，4.37-4.42(m，1H，COO-CH₂-CH)，4.25-4.32(m，2H，COO-CH₂)，3.62-4.02(m，1H，N-CH₂)，3.27-3.38(m，1H，N-CH₂)，2.52-2.76(m，4H，N-CH-CH₂和N-CH₂-CH₂)；MS(ESI)m/e 179.1(30)，414.0(20)[M+H]⁺，436.2(25)[M+Na]⁺，492.8(15)，826.7(5)[2M+H]⁺，849.1(45)[2M+Na]⁺，865.1(100)[2M+K]⁺；HRMS(ESI-TOF)：C₂₆H₂₄NO₄[M+H]⁺：414.1721(计算值：414.1705)；分析HPLC(5-90％，30min)t_R＝27.53min.

实施例3a)

5-[N-(4-甲基吡啶-2-基)氨基]戊酸乙酯

在130℃(油浴温度)回流5-溴戊酸乙酯(33.03g，25ml，158mmol)和2-氨基-4-甲基吡啶(32.9g，304mmol)过夜。待冷却到室温后，向反应混合物中加入饱和NaHCO₃溶液(100ml)，然后用乙醚(5×100ml)萃取。合并的有机相用MgSO₄干燥，然后除去溶剂。粗产物通过快速色谱纯化(乙酸乙酯/己烷，1∶1，2l；3∶2，1l；7∶3，1l；4∶11l)，干燥得到无色固体(16.7g，70.7mmol，45％)。

m.p.41-43℃；TLC R_f(乙酸乙酯/己烷，1∶1)＝0.26；¹H-NMR(250MHz，DMSO-d₆，300K)δ＝7.90(d，J＝5.3Hz，1H，N-CH-CH)，6.38(d，J＝5.2Hz，1H，N-C-CH)，6.17(s，1H，N-CH-CH)，4.51(bs，1H，NH)，4.11(q，J＝7.2Hz，2H，O-CH₂-CH₃)，3.25(q，J＝6.3Hz，2H，NH-CH₂)，2.33(t，J＝7.0Hz，2H，CH₂-CO)，2.21(s，3H，C-CH₃)，1.60-1.80(m，4H，NH-CH₂-CH₂-CH₂)，1.23(t，J＝7.0Hz，2H，O-CH₂-CH₃)；分析HPLC(5-90％，30min)t_R＝13.58min.

实施例3b)

5-[N-(4-甲基吡啶-2-基)氨基]戊酸

将5-[N-(4-甲基吡啶-2-基)氨基]戊酸乙酯(16.7g，70.7mmol，可以按照实施例3a)获得)溶解在甲醇(20ml)中，加入2N NaOH水溶液(71ml，141mmol)，将混合物在室温下搅拌过夜。然后除去溶剂，并将所得固体用CHCl₃(500ml)和过量的DIPEA充分萃取。蒸发滤液，干燥得到无色固体(3.92g，18.8mmol，27％)。

m.p.138-140℃；¹H-NMR(250MHz，DMSO-d₆，300K)δ＝7.79(d，J＝5.2Hz，1H，NH)，6.26-6.30(m，2H，arom.C⁵-H和C⁶-H)，6.22(s，1H，arom.C³-H)，3.17(dt，J＝5.8Hz，2H，NH-CH₂)，2.21(t，J＝7.0Hz，2H，CH₂-CH₂-CO)，2.11(s，3H，C^quat.-CH₃)，1.41-1.58(m，4H，CH₂-CH₂-CH₂-CH₂)；¹³C-NMR(67.5MHz，DMSO-d₆，300K)δ＝174.6(COOH)，159.3，147.3，146.8，113.1，107.9，40.5，33.7，28.8，22.4，20.8；HRMS(ESI-TOF)：C₁₁H₁₇N₂O₂[M+H]⁺：209.1293(计算值：209.1290)；分析HPLC(5-90％，30min)t_R＝9.83min.

实施例4

按照AAV 1中所述(m₁＝0.84g，m₂＝1.0g，I＝0.426mmol/g)，在TCP树脂上加载1-羧甲基-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸9H-芴-9-基甲基酯(149，实施例2d))(0.48g，1.16mmol)。按照AAV 2和3所述脱保护Fmoc并偶联新制备的5-(9H-芴-9-基甲氧基)-3H-1，3，4-噁二唑-2-酮(142，实施例1b))(385mg，1.32mmol)，然后如AAV 4所述偶联5-[N-(4-甲基吡啶-2-基)氨基]戊酸(177mg，0.852mmol)，并按照AAV 5的方法除去树脂。经HPLC纯化(10-80％，30min)和冻干后，得到无色粉末(3.0mg，0.00542mmol，1.3％)。

m.p.103-109℃；¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆，300K)δ＝8.81(bs，1H，NH-NH)，8.44(bs，1H，NH-NH)，8.25(d，J＝6.5Hz，1H，N-CH-CH)，7.74-7.77(m，4H，arom)，7.34(s，1H，N-C-CH)，7.21(d，J＝6.4Hz，1H，N-CH-CH)，6.06-6.07(m，1H，N-CH)，4.46-4.52(m，1H，CH-CH₂)，3.82-3.93(m，3H，NH-CH₂和CH-CH₂)，3.47-3.57(m，2H，NCH₂CH₂)，3.30-3.40(m，2H，NCH₂CH₂)，2.94(s，3H，C-CH₃)，2.79-2.84(m，2H，CH₂-CO)，2.23-2.35(m，4H，NH-CH₂-CH₂-CH₂)；MS(ESI)m/e 191.2(8)，249.1(100)，440.1(30)[M+H]⁺，462.1(8)[M+Na]⁺，478.1(10)[M+K]⁺，901.0(2)[2M+Na]⁺，917.1(3)[2M+K]⁺，939.1(4)[2M-H+Na+K]⁺，945.1(4)；C₂₃H₃₀N₅O₄[M+H]⁺的HRMS：440.2273(计算值：440.2298)；分析HPLC(5-90％，30min)t_R＝14.69min(92.7％纯度，220nm).

实施例5a)

树脂键合的Fmoc-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-(S)-基乙酸

将200mg三苯甲基氯-聚苯乙烯树脂(0.18mmol，理论载荷)在1.5ml无水DCM中洗涤。随后向树脂中加入0.24mmol Fmoc-1，2，3，4-四氢异喹啉-3(S)-基乙酸和0.6mmol DIPEA在1.5ml无水DCM中的溶液，并在室温下振动该混合物1.5小时，尔后加入0.2ml甲醇。混合物用DCM(5×1.5ml)和甲醇(3×1.5ml)洗涤，干燥。

实施例5b)

树脂键合的Fmoc-Gly-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-基乙酸

将0.072mmol A用DMF(1×2ml)洗涤。其后用20％哌啶/DMF(2×2ml)脱保护两次，第一次5分钟，第二次15分钟，并用DMF(6×2ml)洗涤。向与树脂键合的游离胺中加入大约0.1M的2.5当量(基于树脂载荷，0.18mmol)的Fmoc-甘氨酸、2.4当量(0.17mmol)的HATU和30当量(2.16mmol)的均三甲基吡啶在无水DMF中的溶液，并将混合物在室温下振动90分钟。之后通过在DMF(6×2ml)中洗涤终止反应。

实施例5c)

3-胍基苯甲酰基甘氨酰基-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-基乙酸

将0.036mmol B用DMF(1×1ml)洗涤。该化合物随后用在DMF中的20％哌啶(2×1ml)脱保护两次，第一次5分钟，第二次则15分钟，然后用DMF(6×1ml)洗涤。向树脂键合的游离胺中加入大约0.1M的2.5当量(基于树脂载荷，0.09mmol)Fmoc-3-氨基苯甲酸、2.4当量(0.086)HATU和30当量(1.08)均三甲基吡啶在无水DMF中的溶液，并在室温下振动该混合物90分钟。混合物然后用DMF(6×1ml)洗涤，并按上所述脱保护。

树脂随后用无水氯仿(3×1ml)洗涤，加入0.36mmol N，N’-双-BOC-1-脒基吡唑在0.4ml无水氯仿中的溶液，使混合物于50℃在可加热的震动器中反应。20小时后，将树脂用DCM(6×1ml)洗涤。为了从树脂中裂除并同时除去BOC，将树脂与4.75∶4.75∶0.5的DCM、TFA和TIPS的混合物(3×1ml)一起震动，一次1.5小时，一次30分钟，一次3分钟，然后过滤。蒸发合并的滤液，残留物在叔丁醇/水中冻干。利用制备HPLC纯化，得到3-胍基苯甲酰基甘氨酰基-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-基乙酸，三氟乙酸盐。

RT＝12.3(10→90％ACN，30min)

MS(ESI)：m/e＝410.2([M+H]⁺).

¹H-NMR(1.3∶1比例的内旋转异构体，*少量内旋转异构体的信号，500MHz，DMSO-d₆)δ＝12.39(br.s，1H，COOH)，9.95(s，1H，NH-^ArC)，8.67(t，J＝5.4Hz，1H，NH-^GlyCH₂)，8.63^*(t，J＝5.4Hz，IH，NH-^GlyCH₂)，7.78(d，J＝7.8Hz，IH，^ArC⁶-H)，7.72(s，1H，^ArC²-H)，7.58(s，4H，^GuaN₂H₄)，7.53(t，J＝7.8Hz，1H，^ArC⁵-H)，7.39(d，J＝7.8Hz，1H，^ArC⁴-H)，7.17-7.25(m，4H，^ThiquC^{5，6，7，8}-H)，5.11(d，J＝17.9Hz，1H，^ThiquC¹-H₂)，5.01-5.02^*(m，1H，^ThiquC³-H)，4.82^*(d，J＝16.2Hz，1H，^ThiquC¹-H₂)，4.73-4.75(m，1H，^ThiquC³-H)，4.55^*(d，J＝16.2Hz，1H，^ThiquC¹-H₂)，4.44(dd，J＝16.4Hz，J＝5.4Hz，1H，^GlyCH₂)，4.19-4.29(m，3H，^GlyCH₂)，4.10(d，J＝17.9Hz，1H，^ThiquC¹-H₂)，3.15(dd，J＝16.4Hz，J＝5.0Hz，1HCH₂CO₂H)，2.98^*(dd，J＝15.8Hz，J＝5.2Hz，1H，CH₂CO₂H)，2.74-2.79(m，2H，CH₂CO₂H)，2.41-2.51，2.33-2.37，2.16-2.21(m，4H，^ThiquiC⁴-H₂).

实施例6

5-(4-甲基吡啶-2-基氨基)戊酰基甘氨酰基-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-基乙酸

将0.036mmol B(可按照实施例5b)所述制得)用DMF(1×1ml)洗涤。随后将该化合物用在DMF中的20％哌啶(2×1ml)脱保护两次，第一次5分钟，第二次15分钟，之后用DMF(6×1ml)洗涤。将得到的树脂键合的游离胺在室温下与大约0.1M的2.5当量(0.09mmol)5-(N-(4-甲基吡啶-2-基)氨基戊酸、2.4当量(0.086mmol)HATU和30当量(1.08mmol)三甲基吡啶在无水DMF中的溶液一起振动过夜。混合物用DMF和DCM洗涤。为了从固相中裂解出来，将洗涤过的树脂与1ml DCM/三氟乙醇/乙酸(31/1)混合物一起振动，第一次90分钟，然后30分钟，最后1分钟。除去溶剂，利用制备HPLC纯化，得到5-(4-甲基吡啶-2-基氨基)戊酰基甘氨酰基-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-基乙酸，三氟乙酸盐。

RT＝13.3(10→90％ACN，30min)

MS(ESI)：m/e＝439.3([M+H]⁺).

¹H-NMR(1.3∶1比例的内旋转异构体，*少量内旋转异构体的信号，500MHz，DMSO-d₆)δ＝12.35(br.s，1H，COOH)，8.46(br.s，1H，NH-CH₂)，7.93-7.97(m，1H，NH-^GlyCH₂)，7.78(d，J＝6.5Hz，1H，^PyrC⁶-H)，7.14-7.22(m，4H，^ThiquC^{5，6，7，8}-H)，6.81(s，1H，^PyrC³-H)，6.69(d，J＝6.5Hz，1H，^PyrC⁵-H)，5.08(d，J＝17.9Hz，1H，^ThiquC¹-H₂)，4.97-5.01^*(m，1H，^ThiquC³-H)，4.71^*(d，J＝16.2Hz，1H，^ThiquC¹-H₂)，4.59-4.63(m，1H，^ThiquC³-H)，4.47^*(d，J＝16.2Hz，1H，^ThiquC¹-H₂)，4.21(dd，J＝16.7Hz，J＝5.5Hz，1H，^GlyCH₂)，4.04-4.08(m，3H，^GlyCH₂，^ThiquC¹-H₂)，3.97^*(dd，J＝16.9Hz，J＝5.4Hz，1H，^GlyCH₂)，3.27(m，2H，NH-CH₂)，3.11(dd，J＝16.2Hz，J＝5.3Hz，1H，CH₂CO₂H)，2.95^*(dd，J＝15.7Hz，J＝5.4Hz，1H，CH₂CO₂H)，2.62-2.77(m，2H，CH₂CO₂H)，2.34-2.44(m，3H，^ThiquiC⁴-H₂)，2.31(s，3H，CH₃)，2.12-2.21(m，3H，^ThiquiC⁴-H₄，CH₂-CH₂-CO)，1.58(s，4H，(CH₂)₂-CH₂-CO).

类似地，其它式I化合物，特别是式I1至I36的化合物，可以使用相应的前体制得。

下列实施例涉及药物制剂：

实施例A：小瓶注射剂

将100g的式I活性成分和5g磷酸氢二钠在3L双蒸水中的溶液用2N盐酸调节至pH6.5，无菌过滤，分装到注射小瓶中，在无菌条件下冻干，然后在无菌条件下密封。每瓶注射剂包含5mg活性成分。

实施例B：栓剂

将20g式I活性成分与100g大豆卵磷脂和1400g椰子油的混合物熔融，倒入模具中并使其冷却。每颗栓剂含有20mg活性成分。

实施例C：溶液

使用1g式I活性成分、9.38g NaH₂PO₄·2H₂O、28.48gNa₂HPO₄·12H₂O和0.1g苯扎氯铵在940ml双蒸水中制备溶液。将该溶液的pH调至6.8，加至1L，然后通过辐射灭菌。该溶液可用作滴眼剂。

实施例D：软膏剂

取500mg式I活性成分与99.5g凡士林在无菌条件下混合。

实施例E：片剂

将1kg式I活性成分、4kg乳糖、1.2kg马铃薯淀粉、0.2kg滑石与0.1kg硬脂酸镁的混合物以常规方式压制成片，每片含10mg活性成分。

实施例F：包衣片剂

类似于实施例E压制片剂，然后以常规方式使用蔗糖、马铃薯淀粉、滑石、黄耆胶和注射剂的包衣衣料包衣。

实施例G：胶囊剂

将2kg式I活性成分以常规方式填充到硬明胶胶囊内，使每粒胶囊含有20mg活性成分。

实施例H：安瓿剂

将1kg式I活性成分在60L双蒸水中的溶液进行灭菌过滤，分装到安瓿中，在无菌条件下冻干并无菌密封。每瓶安瓿含有10mg活性成分。

实施例I：吸入喷雾剂

将14g式I活性成分溶于10L等渗NaCl溶液中，并将该溶液转移到带有泵装置的市售喷雾容器中。该溶液喷雾到口腔或鼻腔中。每喷射一次的喷雾量(约0.1ml)相当于大约0.14mg的剂量。

Claims

1.式I化合物及其生理上可接受的衍生物，特别是其盐和溶剂化物：

其中

X为H，-C(＝NR³)-NHR⁴或Het，

或

Y为-(CH₂)_m-，

Z为NH或CH₂，

R¹和R⁵彼此独立地为H，A，OH，OA，芳烷基，Hal，-CO-A，CN，NO₂，NHR³，COOA，COOH，SO₂A，CF₃或OCF₃，

R²在每种情况下独立地为H或A，

R³和R⁴彼此独立地为H，A，-CO-A，NO₂或CN，

A为具有1-6个碳原子的烷基，

m为0，1，2，3，4，5或6，

n和p彼此独立地为1，2或3。

2.根据权利要求1的式I化合物，其中A为甲基，此外还为乙基、异丙基、正丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。

3.根据权利要求1和2中任一项或多项的式I化合物，其中Het为4-甲基吡啶-2-基，吡啶-2-基，嘧啶-2-基，咪唑-2-基，苯并咪唑-2-基和它们的氢化衍生物。

4.根据权利要求1-3中任一项或多项的式I化合物，其特征在于R¹和R⁵彼此独立，优选为H，A，CN，NO₂，Hal或-CO-A-。

5.根据权利要求1-3中任一项或多项的式I化合物，其特征在于R²优选为H或A。

6.根据权利要求1-3中任一项或多项的式I化合物，其特征在于R³和R⁴彼此独立，优选为H或-COA-。

7.根据权利要求1-3中任一项或多项的式I化合物，其特征在于X为H，-C(＝NH)-NH₂，-C(＝N-甲基)-NH₂，4-甲基吡啶-2-基，吡啶-2-基，嘧啶-2-基，咪唑-2-基，苯并咪唑-2-基和它们的氢化衍生物。

8.根据权利要求1-3中任一项或多项的式I化合物，其特征在于Y为-(CH₂)_m-或

9.根据权利要求1-3中任一项或多项的式I化合物，其特征在于n和p彼此独立地为1或2。

10.根据权利要求1-3中任一项或多项的式I化合物，其特征在于m为0，2或4。

11.式I1至I36的化合物：

12.制备权利要求1-11中任一项或多项所述的式I化合物及其盐的方法，其特征在于：

a)在缩合剂例如HATU的存在下，使式II化合物：

其中Z，R¹和n如上定义，W为常规保护基或肽化学中使用的固相，

与式III化合物进行反应：

其中Y如上定义，Q为合适的保护基或Het，

随后除去所述保护基和/或所述固相，

或者

13.作为治疗活性成分的权利要求1-11中任一项或多项所述的式I化合物及其生理上可接受的盐或溶剂化物。

14.作为整联蛋白抑制剂的权利要求1-11中任一项或多项所述的式I化合物及其生理上可接受的盐或溶剂化物。

15.用于对抗疾病的权利要求1-11中任一项或多项所述的式I化合物及其生理上可接受的盐或溶剂化物。

16.药物制剂，其特征在于其中含有至少一种权利要求1-11中任一项或多项所述的式I化合物和/或一种其生理上可接受的盐或溶剂化物。

17.权利要求1-11中任一项或多项所述的式I化合物和/或其生理上可接受的盐或溶剂化物在制备药物制剂中的应用。

18.权利要求1-11中任一项或多项所述的式I化合物和/或其生理上可接受的盐或溶剂化物在制备用于对抗下述疾病的药物制剂中的应用：血栓形成、心肌梗塞、冠心病、动脉硬化、炎症、肿瘤、骨质疏松症、感染和血管成形术后再狭窄。

19.权利要求1-11中任一项或多项所述的式I化合物和/或其生理上可接受的盐或溶剂化物在血管生成所维持或扩散的病理过程中的应用。