CN1506363A - 光活双环醇及其制备方法和其药物组合物与用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了通式(I)所示的光学活性双环醇即(－)－双环醇和(+)－双环醇，其制备方法，含有他们的药物组合物，以及制备治疗慢性病毒性肝炎的药物用途。

Description

光活双环醇及其制备方法和其药物组合物与用途

技术背景

本发明涉及光学活性双环醇即(-)-双环醇和(+)-双环醇，其制备方法，含有他们的药物组合物，以及制备治疗慢性病毒性肝炎的药物用途。

背景技术

慢性病毒性肝炎是严重危害人民健康的常见传染病。据统计仅乙肝患者就占世界人口的5％。在我国病毒性肝炎的发病率高居世界首位，即约80％的肝炎患者集中在中国。目前我国现有病毒性肝炎患者达3000万人之多，每年有近50万人死于与乙肝有关的疾病。因此，慢性病毒性肝炎特别是乙型和丙型肝炎的治疗一直是世界医药界的难题。

由于庞大的乙肝人群亟待得到治疗，因此，目前我国市场上慢性肝炎的治疗药物品种繁多，据不完全统计，中西药物已达700余种，但疗效肯定、副作用小的药物为数不多。尽管肝炎疫苗的推广对肝炎防治起到巨大的推动作用，但肝炎患者仍以每年近百万的速度增加。因此，研制结构新颖，作用肯定的新型抗肝炎药仍十分迫切。

双环醇(化学名：4、4′-二甲氧基-2、3、2′、3′、-双(亚甲二氧基)-6-羟甲基-6′-甲氧羰基联苯)为本发明人研制的我国一类抗肝炎新药。双环醇具有显著保肝作用并具有一定的抗肝炎病毒效果，对四氯化碳、D-半乳糖胺、扑热息痛引起的小鼠急性肝损伤以及小鼠免疫性肝炎等4种动物模型均有显著的降低升高的血清转氨酶作用，减轻肝脏组织病理形态学损害。此外，对大鼠慢性四氯化碳肝损伤模型，双环醇除有降低升高的血清转氨酶作用外，兼有改善血清白蛋白/球蛋白比值及肝脏脯氨酸含量的效果，即有减轻肝纤维化的作用。双环醇具有抑制HBeAg、HBV-DNA及HBsAg分泌的效果，在长期慢性毒性试验中未发现有毒性，亦无致畸和致突变的毒性。临床所用双环醇为外消旋体。

临床研究结果表明：双环醇对慢性病毒性乙型肝炎和丙型肝炎患者均有很好的改善临床症状和降ALT及AST作用，并可使部分病人的HBeAg、HBV-DNA阴转。疗效显著并无明显副作用，安全性及耐受性好。市售的双环醇的商品名为“百赛诺”。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的对映异构体(-)-双环醇和(+)-双环醇，同现有的(±)-双环醇产品相比，它对慢性病毒性乙型肝炎和丙型肝炎患者均能够更好地改善临床症状。

本发明的另一目的在于提供一种新的对映异构体(-)-双环醇和(+)-双环醇的制备方法；

本发明再一目的在于提供一种药物组合物，其包括有效剂量的作为活性成份的通式(I)的化合物及制药领域中常用的载体。

本发明的再一目的在于提供一种新的对映异构体(-)-双环醇和(+)-双环醇在制备抗肝炎药物中的应用。

(+)-双环醇或(-)-双环醇

(±)-双环醇(I)，化学名4、4′-二甲氧基-2、3、2′、3′-双亚甲二氧基-6-羟甲基-6′-甲氧羰基联苯，为多取代联苯结构。在2、2′、6、6′位均有取代基，使连接两个苯环间的单键旋转受阻，而不处于同一个平面上，构成一对旋光性阻转异构体。经X-衍射单晶结构分析证实(±)-双环醇的两个苯环间二面角为78.0(1)°。分子间无氢键联系，以分子内氢键及分子间的范德华力维系分子在晶态下的稳定排列。由于该空间群为第二类空间群，故该分子在晶态下形成外消旋体结构。因此双环醇分子为外消旋体，可拆分为(-)-双环醇和(+)-双环醇两个旋光性对映体。由于两个光活对映体立体构型不同，很可能引起生理活性的差异。本发明制备出(-)-双环醇及(+)-双环醇以研究其生理活性的不同及特点，使(±)-双环醇的药效更加专一地得到利用。

为了实现本发明的目的，采用如下的步骤：

(A)由(±)-联苯双酯水解制得(±)-联苯双酸；

(B)(±)-联苯双酸脱水制得(±)-联苯酸酐；

(C)(±)-联苯酸酐还原制得(±)-双环醇酸；

(D)(±)-双环醇酸(II)与光活生物碱反应生成一对非对映异构体盐，即(-)-双环醇酸·光活生物碱盐与(+)-双环醇酸·光活生物碱盐；

(E)利用非对映异构体盐的物理性质差异及溶剂中溶解度的不同，进行分步重结晶，分别拆分制得非对映异构体盐(-)-双环醇酸·光活生物碱盐与(+)-双环醇酸·光活生物碱盐；

(F)两种非对映异构体盐分别进行解离，制得(-)-双环醇酸及(+)-双环醇酸的纯品；

(G)(-)-双环醇酸及(+)-双环醇酸再分别甲基化制得(-)-双环醇和(+)-双环醇。

(±)-双环醇酸(2)  (±)-联苯双酯(3)             (±)-联苯双酸(4)      (±)-联苯酸酐(5)

具体讲，制备本发明的(-)-双环醇及(+)-双环醇各步骤的具体技术方案如下：

(A)(±)-联苯双酸的制备：

用碱水解(±)-联苯双酯进行制备。

所用碱包括：氢氧化钾、氢氧化钠、甲醇钠、乙醇钠、甲醇钾、乙醇钾。

所用溶剂为：水、稀醇溶液(甲醇、乙醇、异丙醇等醇类)、稀丙酮溶液。

溶液浓度：5％-50％，优选浓度：20％-40％。

反应温度：20℃-100℃，优选温度：50℃-100℃。

(B)(±)-联苯酸酐的制备：

(±)-联苯双酸与乙酸酐等脱水剂反应制得(±)-联苯酸酐。

所用脱水剂为：乙酸酐、乙酰氯等。

所用溶剂为：乙酸酐、苯、甲苯、二甲苯等。

溶液浓度：50％-98％，优选浓度：80％-98％。

反应温度：80℃-140℃，优选温度：100℃-140℃。

(C)(±)-双环醇酸的制备：

用硼氢化钾或硼氢化钠等还原(±)-联苯酸酐得到(±)-双环醇酸。

所用还原剂包括：硼氢化钾、硼氢化钠等。

所用溶剂为：二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、吡啶等。

反应温度：-20℃-50℃，优选温度：0℃-20℃。

(D)由(±)-双环醇酸(II)与光活生物碱生成一对非对映异构体盐，即(±)-(II)+光活生物碱→(-)-(II)·光活生物碱盐+(+)-(II)·光活生物碱盐。

所用光活生物碱：(-)-马钱子碱、(-)-士的宁、(-)-喹宁、(+)-喹尼丁、(-)-麻黄碱、(+)-α-苯乙胺、(-)-α-苯乙胺、D-苯基异丙胺、L-苯基异丙胺、(-)-吗啡碱、(-)-薄荷胺、辛可宁碱、辛可尼丁碱。

所用溶剂：水、醇(甲醇、乙醇、异丙醇等醇类)、丙酮、稀醇溶液(甲醇、乙醇、异丙醇等醇类)、稀丙酮溶液、乙腈等溶剂。

反应温度：0-100℃，优选温度：20-50℃。

(E)利用非对映异构体盐的物理性质差异及溶剂中溶解度的不同，进行分步重结晶，分别拆分制得非对映异构体盐(-)-双环醇酸·光活生物碱盐与(+)-双环醇酸·光活生物碱盐；

所用溶剂：水、醇(甲醇、乙醇、异丙醇等醇类)、稀醇溶液(甲醇、乙醇、异丙醇等醇类)、稀丙酮溶液等溶剂。

重结晶温度：30-100℃，优选温度：50-80℃。

(F)两种非对映异构体盐分别进行解离，制得(-)-双环醇酸及(+)-双环醇酸的纯品；

解离非对映异构体盐所用酸：盐酸(浓度范围0.01-6N)、硫酸(浓度范围0.01-6N、乙酸(浓度范围0.01-6N)等酸类，优选盐酸。

解离非对映异构体盐所用碱：氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、乙醇钠、甲醇钾、乙醇钾、氨水等碱类，优选氢氧化钠和氢氧化钾，浓度范围是0.01-15N。

解离所用溶剂：水、稀醇溶液(甲醇、乙醇、异丙醇等醇类)、稀丙酮溶液等。

反应温度：-20-100℃。优选温度：-10-30℃。

(G)(-)-双环醇酸和(+)-双环醇酸分别与甲基化试剂进行甲酯化，制备得(-)-双环醇及(+)-双环醇。

甲基化试剂：重氮甲烷、硫酸二甲酯、卤代甲烷、甲基醇类。

甲基化溶剂：四氢呋喃、乙醚、丙酮、甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈。

甲基化反应温度：-20-80℃。优选温度：-10-40℃

本发明因此还涉及含有作为活性成份的本发明化合物和常规药物赋形剂或辅剂的药物组合物。通常本发明药物组合物含有0.1-95重量％的本发明化合物。

本发明化合物的药物组合物可根据本领域公知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将本发明化合物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人药或兽药使用的适当的施用形式或剂量形式。

本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等，优选口服。

本发明化合物或含有它的药物组合物的给药途径可为注射给药。注射包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射和皮内注射等。

给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。如液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂等。

本发明化合物可以制成普通制剂、也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。

为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，例如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，例如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。

例如为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高岭土、滑石粉等；粘合剂，如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。

例如为了将给药单元制成胶囊，将有效成分本发明化合物与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明胶胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。

例如，将本发明化合物制成注射用制剂，如溶液剂、混悬剂溶液剂、乳剂、冻干粉针剂，这种制剂可以是含水或非水的，可含一种和/或多种药效学上可接受的载体、稀释剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂。如稀释剂可选自水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。这些辅料是本领域常用的

此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。

为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。

本发明化合物药物组合物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重、性格及个体反应，给药途径、给药次数、治疗目的，因此本发明的治疗剂量可以有大范围的变化。一般来讲，本发明中药学成分的使用剂量是本领域技术人员公知的。可以根据本发明化合物组合物中最后的制剂中所含有的实际药物数量，加以适当的调整，以达到其治疗有效量的要求，完成本发明的预防或治疗目的。本发明化合物的每天的合适剂量范围本发明的化合物的用量为0.001-150mg/Kg体重，优选为0.01-100mg/Kg体重，更优选为0.01-60mg/Kg体重，最优选为0.1-10mg/Kg体重。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药这受限于给药医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。

每一种治疗所需总剂量可分成多次或按一次剂量给药。本发明的化合物或组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用并调整剂量。

药理实验表明，(-)双环醇对四氯化碳引起的血清GPT和GOT升高均有明显的降低作用。(-)双环醇200mg/kg作用强于消旋双环醇200mg/kg，(-)双环醇100mg/kg的药理作用与消旋双环醇200mg/kg的作用相似，(+)双环醇200mg/kg的药理作用弱于消旋双环醇100mg/kg组或无效。

附图说明

图1(±)-双环醇HPLC手性柱图

图2(-)-双环醇HPLC手性柱图

图3(+)-双环醇HPLC手性柱图

图4(±)-双环醇HPLC手性柱图

图5(-)-双环醇HPLC手性柱图

图6(+)-双环醇HPLC手性柱图

具体实施方式

下面的实施例用来进一步说明本发明，但是这并不意味着对本发明的任何限制。

所得(-)-双环醇酸及(+)-双环醇酸用熔点、旋光检测。所得(-)-双环醇及(+)-双环醇纯品以熔点、旋光仪及手性柱检测。

实施例1  (±)-联苯双酸(2)的制备

50克(0.12mol)联苯双酯(1)和20克(0.36mol)氢氧化钾于水及乙醇中，回流反应至完全，用浓盐酸酸化，过滤，水洗至中性，干燥，得：46.6克化合物(2)，收率：99％，熔点：260℃。

¹HNMR：(DMSO-d₆)δppm DMSO-d₆

 3.88，OCH₃x2；5.94，-OCH₂O-；5.97，-OCH₂O-；7.24，Ar-Hx2；10.24，-COOHx2

MS分子离子峰390(基峰)

实施例2  (±)-联苯酸酐(3)的制备

50克(0.13mol)化合物(2)，于100毫升乙酸酐中，回流反应至完全，蒸干，得：46.6克化合物(3)，收率：97％，熔点：266℃。

¹HNMR(CDCl₃)  δppm  CDCl₃

3.95，OCH₃x2；6.03、6.14，-OCH₂O-；7.0，Ar-Hx2

MS分子离子峰372(基峰)。

实施例3  (±)-双环醇酸(4)的制备

50克(0.14mol)化合物(3)和150毫升二甲基甲酰胺，于搅拌下加入15克(0.27mol)的硼氢化钾，室温反应至完全，控制内温低于15℃，加入水，用浓盐酸酸化，过滤，干燥，得：47.0克化合物(4)，收率：90％，熔点：192-195℃。

¹HNMR(CDCl₃)δppm CDCl₃，δppm

3.926，-OCH₃；3.959，-OCH₃；4.424，4.385，4.359，4.320，Ar-CH₂-OJ＝11.7Hz.19.5Hz；5.895，-OCH₂O-；6.039、6.013，-OCH₂O-J＝7.8Hz；6.729、7.396，Ar-H；

MS分子离子峰376

实施例4  (-)-双环醇酸·(+)-喹尼丁盐(5)的制备

化合物(4)10g(0.027mol)溶于丙酮中，加入9g(+)-喹尼丁(0.028mol)，搅拌反应30分钟，析出白色固体，过滤得9.2g，用乙醇重结晶三次，得化合物(5)7.3g，收率：78.4％，比旋光度[α]¹D⁷＝+65.7(c＝0.56 CHCl₃)，m.p.230-231℃。

实施例5  (+)-双环醇酸·(+)-喹尼丁盐(6)的制备

将化合物(5)析出后的母液蒸干，得白色固体11g，乙醇重结晶三次，得化合物(6)2.6g，收率：28％，比旋光度[α]¹D⁷＝+106.6，(c＝0.97CHCl₃)，m.p.149-150℃。

实施例6  (-)-双环醇酸(7)的制备

化合物(5)2.5g用稀盐酸酸化，过滤，水洗至中性，得化合物(7)1.02g，收率：76％，比旋光度[α]¹D⁹＝-37.1，(c＝0.61吡啶)，m.p.182-184℃。

实施例7  (+)-双环醇酸(8)的制备

1.6g化合物(6)，用稀盐酸酸化，过滤，水洗至中性，干燥，得化合物(8)0.6g，收率：70％，比旋光度[α]¹D⁹＝+37.7，(c＝060，吡啶)，m.p.174-175℃。

实施例8  (-)-双环醇((-)I)的制备

化合物(7)500mg溶于THF中，加入700mg亚硝基甲基尿素用浓KOH溶液分解后的乙醚溶液(含重氮甲烷)，搅拌反应。TLC显示反应完全，加入Na₂SO₄干燥，蒸干溶剂，纯化，得化合物((-)I)470mg，收率：91％，比旋光度[α]¹D⁹＝-41.8，(c＝0.51，CHCl₃)，m.p.80-82℃，手性柱测得光纯度为：100％(HP1100，柱长：250mm×4.6mm，流动相：异丙醇/正己烷＝88/12)。

¹HNMR(CDCl₃，δppm)：δ3.71，s，-CH₃；δ3.95、3.97，-OCH₃；δ4.37，-CH₂OH；δ5.91、δ6.02，-OCH₂O-；δ7.26、δ7.33，Ar-H。

MS：390(M+)，358(-CHO)，329(CH₃)，314，(-CH₃)，299(-CO)。

实施例9  (+)-双环醇((+)I)的制备

360mg化合物(8)，溶于THF中，加入500mg亚硝基甲基尿素用浓KOH溶液分解后的乙醚溶液(含重氮甲烷)，反应至TLC显示完全，加入无水Na₂SO₄干燥，蒸干溶剂，纯化，得化合物((+)I)320mg，收率：86％，比旋光度[α]¹D⁹＝+40.2，(c＝0.60，CHCl₃)，m.p.81-83℃，手性柱测得光纯度为：100％(HP1100，柱长：250mm×4.6mm，流动相：异丙醇/正己烷＝88/12)。

¹HNMR(CDCl₃，δppm)：δ3.71，-CH₃；δ3.95、3.97，-OCH₃；δ4.37，-CH₂OH；δ5.91、δ6.02，-OCH₂O-；δ7.26、δ7.33，Ar-H。

MS：390(M+)，358(-CHO)，329(-CH₃)，314(-CH₃)，299(-CO)。

实施例10  (+)-双环醇酸·(-)-马钱子碱盐(9)的制备

化合物(4)500mg(0.0013mol)溶于丙酮中，加入524mg(-)-马钱子碱(0.0013mol)，搅拌反应30分钟，析出白色固体，过滤得505mg，用无水乙醇重结晶，得化合物(9)410mg，收率：80.1％，比旋光度[α]¹D⁷＝+48.7，(c＝0.53 CHCl₃)，m.p.160.5-162.5℃。

实施例11  (-)-双环醇酸·(+)-马钱子碱盐(10)的制备

化合物(9)析出后的母液蒸干，用无水乙醇重结晶，得化合物(10)430mg，收率：84％，比旋光度[α]¹D⁷＝-37.4，(c＝0.43 CHCl₃)m.p.157-158.5℃。

实施例12  (+)-双环醇酸(8)的制备

化合物(9)350mg用稀盐酸酸化，过滤，水洗至中性，干燥，得化合物(8)140mg，收率：81.9％，比旋光度[α]¹D⁹＝+38.4，(c＝0.37，吡啶)，m.p.172.5-174℃。

实施例13  (-)-双环醇酸(7)的制备

420mg化合物(10)，用稀盐酸酸化，过滤，水洗至中性，干燥，得化合物(7)200mg，收率：97.5％，比旋光度[α]¹D⁹＝-37.9，(c＝0.28，吡啶)，m.p.183-185℃。

实施例14  (+)-双环醇((+)I)的制备

化合物(8)130mg溶于THF中，加入180mg亚硝基甲基尿素用浓KOH溶液分解后的乙醚溶液(含重氮甲烷)，搅拌反应至TLC显示反应完全，无水Na₂SO₄干燥，蒸干溶剂，纯化，得化合物((+)I)110mg，收率：82.1％，比旋光度[α]²D⁰＝+40.3，(c＝0.58，CHCl₃)，m.p.80-82℃，手性柱测得光纯度为：99.4％，(HP1100，柱长：250mm×4.6mm，流动相：异丙醇/正己烷＝88/12)。

¹HNMR(CDCl₃，δppm)：δ3.71，-CH₃；δ3.95、3.97，-OCH₃；δ4.37，-CH₂OH；δ5.91、δ6.02，-OCH₂O-；δ7.26、δ7.33，Ar-H。

MS：390(M+)，358(-CHO)，329(-CH₃)，314(-CH₃)，299(-CO)。

实施例15  (-)-双环醇((-)I)的制备

190mg化合物(7)，溶于THF中，加入260mg亚硝基甲基尿素用浓KOH溶液分解后的乙醚溶液(含重氮甲烷)，搅拌反应1小时，TLC显示反应完全，无水Na₂SO₄干燥，蒸干溶剂，纯化，得化合物((-)I)165毫克，收率：83.7％，比旋光度[α]²D⁰＝-41.5，(c＝0.61 CHCl₃)，m.p.80-82℃，手性柱测得光纯度为：99.8％，(HP1100，柱长：250mm×4.6mm，流动相：异丙醇/正己烷＝88/12)。

¹HNMR(CDCl₃，δppm)：δ3.71，s，-CH₃；δ3.95、3.97，-OCH₃；δ4.37，-CH₂OH；δ5.91、δ6.02，-OCH₂O-；δ7.26、δ7.33，Ar-H。

MS：390(M+)，358(-CHO)，329(CH₃)，314，(-CH₃)，299(-CO)。

药理实验

试验例1

双环醇和(+)，(-)双环醇对小鼠实验性肝损伤保护作用的比较

1.试验材料及实验方法

a.双环醇由药研所合成室张纯贞教授提供，(+)，(-)双环醇是由本发明的实施例7、8、14、15制备。用时以0.5％CMC或PEG 400配成50，100，200mg/10ml悬液。

b.动物：雄性昆明种小鼠，体重18-22g，购自医科院动物繁育中心。

c.试剂：GPT试剂盒和CCl₄购自北京化工厂。

d.方法：将小鼠随机分为11组，每组7只。给药组于实验第一天上下午各一次口服不同剂量双环醇(50，100，200mg/kg，10ml/kg)，对照组给同体积0.5％CMC或PEG 400。次日下午各组动物均于腹腔注射0.12％CCl₄花生油液，10ml/kg后，禁食过夜。给CCl₄后16小时，将动物断头处死，离心分离血清，测定GPT，GOT活性。

2.结果：

表1.双环醇及光学异构体(CMC)对小鼠四氯化碳肝损伤保护作用的比较

组别          动物数          sGPT

                              u±SD

正常对照        7             44±6

CCl₄对照       7             510±46^a

双环醇

50mg            7             315±192

100mg           7             280±99^c

200mg           7             101±28^c

(+)双环醇

50mg            7             509±56

100mg           7             410±144

200mg           7             297±155^b

(-)双环醇

50mg            7             167±156^b

100mg           7             100±47^c

200mg           7             52±18^c

a P＜0.001，与正常对照相比

b P＜0.01，与CCl₄对照相比

c P＜0.001，与CCl₄对照相比

表2.双环醇及光学异构体(PEG400)对小鼠四氯化碳肝损伤保护作用的比较

组别        动物数        sGPT          sGOT

                         (u±SD)       (u±SD)

正常对照      7           64±9        127±13

CCl₄对照     7           1623±533^a  990±196^a

双环醇

37.5mg        7           855±347^b   761±240^b

75mg          7           598±312^c   649±196^b

150mg         7           127±39^d    321±49^d

(+)双环醇

37.5mg        7           1616±213    970±126

75mg          7           1454±291    887±177

150mg         7           1097±570    669±341

(-)双环醇

37.5mg        7           446±259^d   670±170^c

75mg          7           289±143^d   427±15^d

150mg         7           82±29^d     342±80^d

a P＜0.001，与正常对照相比

b P＜0.05，与CCl₄对照相比

c P＜0.01，与CCl₄对照相比

d P＜0.001与CCl₄对照相比

3.结论：双环醇对四氯化碳引起的血清GPT和GOT升高均有明显的降低作用，(-)双环醇200mg/kg作用强于双环醇200mg/kg，(-)双环醇100mg/kg的药理作用与双环醇200mg/kg的作用相似，(+)双环醇200mg/kg的药理作用弱于双环醇100mg/kg组或无效。

Claims (9)

1、如通式(I)所示的化合物：

其特征在于：所述化合物为光活对映异构体(-)-双环醇和(+)-双环醇。

2、如权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(A)  (±)-双环醇酸与光活生物碱反应生成一对非对映异构体盐；

(B)  分步重结晶，分别拆分制得非对映异构体盐(-)-双环醇酸·光活生物碱盐与(+)-双环醇酸·光活生物碱盐；

(C)  两种非对映异构体盐分别进行解离制得(-)-双环醇酸及(+)-双环醇酸的纯品；

(D)  (-)-双环醇酸及(+)-双环醇酸再分别用甲基化试剂甲基化制得(-)-双环醇和(+)-双环醇。

3、根据权利要求2的制备方法，其特征在于，所述的光活生物碱包括(-)-马钱子碱、(-)-士的宁、(-)-喹宁、(+)-喹尼丁、(-)-麻黄碱、(+)-α-苯乙胺、(-)-α-苯乙胺、D-苯基异丙胺、L-苯基异丙胺、(-)-吗啡碱、(-)-薄荷胺、辛可宁碱、辛可尼丁碱。

4、根据权利要求2的制备方法，其特征在于，所述的拆分所用的溶剂包括：水、醇类、丙酮、稀醇水溶液、稀丙酮水溶液、乙腈。

5、根据权利要求2的制备方法，其特征在于，所述的解离所用的碱包括：氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、甲醇钾、乙醇钠、乙醇钾。

6、根据权利要求2的制备方法，其特征在于，所述的解离所用的酸包括盐酸、硫酸、乙酸。

7、根据权利要求2的制备方法，其特征在于，所述的甲基化试剂包括：重氮甲烷、硫酸二甲酯、卤代甲烷、甲基醇类。

8、一种药物组合物，其特征在于，含有有效剂量的如权利要求1所述的任一化合物，以及药效学上可接受的载体。

9、权利要求1所述化合物在制备抗肝炎药物中的应用。

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