CN1488638A - 淫羊藿总黄酮的提取方法及其提取物所制成的产品 - Google Patents

Abstract

本发明涉及淫羊藿总黄酮的提取方法，并涉及用该方法获得的提取物制成的有益于防治骨质疏松症的制品。淫羊藿经煎煮，使水煎液通过大孔树脂，用不同浓度的乙醇溶液洗脱及浓缩等步骤得到淫羊藿总黄酮提取物，其中总黄酮含量为40－80％(用HPLC方法测定)。用该提取物制备的具有防治骨质疏松功能的产品最好含有(％重量)20－30％的所述提取物、4－8％的大豆异黄酮及65－75％的有机钙。

Description

淫羊藿总黄酮的提取方法及其提取物所制成的产品

技术领域：

本发明涉及从淫羊藿中提取淫羊藿总黄酮的方法，以及用该方法产生的提取物制成的产品。

背景技术：

骨质疏松症是一种在中、老年人群常见而多发的病症。这种病症的特征是人体全身性骨量减少和骨组织微细结构破坏，结果导致骨脆性增加和骨折危险性的增高。

从传统的中药学得知，淫羊藿具有“补肾壮阳、强筋骨”之功能，而且中医学认为“肾主骨，肾藏精、生髓、养骨”，通过增强“肾”的功能就能促进骨的生长发育，维持骨的成分及结构正常。但是根据传统中医学的笼统指示，本领域的技术人员未能得知淫羊藿中的哪种或哪几种成份具有强“肾”的功效；另外不同种属的淫羊藿经不同的煎煮处理提取出来的提取物的构成也不尽相同，从而会导致淫羊藿药效的不稳定性。因此在本领域中一直期待一种能从淫羊藿中提取的有效成份的方法，以及用该提取物制备的治疗骨质疏松症的产品。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种从淫羊藿中提取淫羊藿总黄酮的方法；

本发明的另一目的在于提供用上述方法得到的提取物具有较稳定的成份，并用此提取物生产的产品具有稳定的治疗骨质疏松症的功能。

本发明的自淫羊藿中提取淫羊藿总黄酮的方法具有以下的工艺步骤：

1)将淫羊藿在热水中煎煮，得到水煎液；

2)使所述水煎液通过大孔吸附树脂；

3)用浓度成一定梯度的不同乙醇溶液洗脱大孔树脂上的吸附物；

4)收集洗脱流出物，使该流出物浓缩至干。

本发明上述的提取淫羊藿总黄酮的方法采用药典规定种属的淫羊藿，而本发明的方法优选用朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)、箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatum Maxim)或柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim)。

本发明所述的提取淫羊藿总黄酮的方法所采用的用于洗脱吸附物的乙醇浓度梯度为10％，30％，50％和80％。

按本发明方法提取淫羊藿总黄酮提取物含有40～80％的淫羊藿总黄酮，其中淫羊藿甙的含量≥12％。其余物质目前尚不完全清楚，但可以确定的是，(1)它们是黄酮甙类物质；(2)它们对于治疗骨质疏松症至少没有不利的作用。

本发明的治疗骨质疏松症的产品含有按上述方法提取的淫羊藿总黄酮提取物；

上述的治疗骨质疏松症的产品含有20～30％(重量)的用本方法提取的淫羊藿总黄酮提取物；

上述的治疗骨质疏松症的产品中还含有4～8％(重量)的大豆异黄酮；

上述的治疗骨质疏松症的产品中还含有65～75％(重量)的有机钙，所述的有机钙优选天门冬氨酸钙、葡萄糖酸钙或乳酸钙。

下面通过实施例进一步说明本发明

具体实施方式

实施例1

1)取朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)(HPLC测定其中淫羊藿甙含量≥1％)150Kg，用2×1500Kg的水于80～100℃煎煮两次，收集合并煎煮液并使其通过大孔树脂(山东鲁抗医药股份有限公司提供)吸附；用水洗该吸附柱，然后依次用浓度为10％、30％、50％的乙醇溶液将吸附物洗脱；收集流出物，使其浓缩、干燥后得淫羊藿总黄酮。其中含有68.5％(重量)的总黄酮；

2)制备口服片剂：

取上述淫羊藿总黄酮提取物8kg、大豆异黄酮2kg、天门冬氨酸钙20kg及常规辅料10kg混合经制粒、烘干、压片或灌装胶囊制成口服制剂。

3)本发明产品具有良好的安全性，小鼠急性经口LD₅₀大于20g/kg，属无毒级物质。

4)功能试验方法：

①模型制备：

随机取雌性大鼠50只，以30mg/kg体重的剂量腹腔注射1％戊巴比妥钠溶液，麻醉后切除双侧卵巢，术后肌肉注射2万单位的青霉素，连续注射3天。

②假手术组的处理：

随机取雌性大鼠10只，麻醉方式同上，但打开腹腔后切除0.5g左右的脂肪，保留双侧卵巢。

③本发明的人体口服推荐剂量为每日1.6g/60kg，本实验按推荐剂量的5倍、10倍、30倍给药，即设计日用药量为0.13g、0.27g、0.80g/kg体重的低、中、高三个剂量组。制成模型的取所余的10只大鼠为模型对照组，各组均单笼饲养。取实施例2中的混合样品0.13g、0.27g、0.80g，分别加入10ml去离子水，每日以10ml/kg体重的剂量给上述三个试验组的大鼠灌胃，阳性对照组经口给予1.0mg/kg.BW的阿仑膦酸钠；对照模型组和假手术组的大鼠仅以去离子水灌胃。整个实验持续26周，然后用颈椎脱臼处死大鼠，测量大鼠股骨中点及股骨干骺端骨密度，然后解剖大鼠，剥离左侧股骨，测量股骨的长度，将股骨烤干至恒重，称量骨干重。依据国家有关标准测定骨钙含量。结果见表1

表1  样品对大鼠股骨的长度、重量、骨密度及骨钙的影响

            动物  股骨长度      股骨重量       股骨干骺端      股骨中点         骨钙含量

组别        (只)  (cm)          (g)            骨密度          骨密度           (mg/g)

                                               (g/cm³)        (g/cm³)

假手术组    10    3.31±0.27^a  0.64±0.058^a  0.236±0.025^a  0.223±0.005^a   270.6±36.4^a

模型对照组  10    3.33±0.28^a  0.56±0.067^b  0.191±0.027^b  0.185±0.017^b   181.9±55.7^c

阳性对照组  10    3.31±0.22^a  0.63±0.062^a  0.229±0.027^a  0.217±0.028^a   238.3±38.8^ab

低剂量组    10    3.34±0.26^a  0.61±0.092^ab 0.203±0.014^ab 0.201±0.034^ab  224.3±37.9^bc

中剂量组    10    3.39±0.31^a  0.64±0.061^a  0.224±0.036^a  0.213±0.027^a   255.1±31.5^ab

高剂量组    10    3.36±0.25^a  0.65±0.056^a  0.230±0.028^a  0.219±0.021^a   274.2±27.7^a

注：同一纵行，上标数字不同，表示组间差异有显著性，P＜0.05(经方差分析)。

由上表可见，各组大鼠的股骨长度均无显著差异；假手术组大鼠股骨的重量、股骨干骺端骨密度、股骨中点骨密度及骨钙含量均显著高于模型对照组；阳性对照组及样品高、中剂量组股骨重量、股骨干骺端骨密度、股骨中点骨密度及骨钙含量显著高于模型对照组。由此可见，本发明的产品具有良好的改善大鼠骨质疏松作用。

本发明的提取方法可以将淫羊藿总黄酮从淫羊藿中提取出来，并用它制成治疗骨质疏松症的产品。由于该产品含有含量固定的用于治疗骨质疏松的有效组份，因而疗效稳定可靠，而且所述产品只需较小的剂量即能达到理想的疗效，所以该产品还有便于服用的优点。

Claims (10)

1.从淫羊藿中提取淫羊藿总黄酮提取物的方法，其步骤为：

1)将淫羊藿用热水煎煮，得到水煎液；

2)使所述水煎液通过大孔吸附树脂；

3)用浓度成一定梯度的不同乙醇溶液洗脱大孔树脂上的吸附物；

4)收集洗脱液，使洗脱流出物浓缩至干。

2.权利要求书1所述的提取物淫羊藿总黄酮提取物的方法，其中所述的淫羊藿选自箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatum Maxim)，朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanumNakai)或柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim)。

3.权利要求书1的从淫羊藿提取淫羊藿总黄酮提取物的方法，其中用于梯度洗脱步骤的乙醇溶液的浓度分别为10％、30％、50％和80％。

4.治疗骨质疏松症的产品，其特征在于该产品含有按权利要求1-3的方法提取的淫羊藿总黄酮提取物，其中总黄酮含量为40-80％(用HPLC方法测定)。

5.权利要求4的治疗骨质疏松症的产品，其特征在于所述淫羊藿总黄酮提取物的含量为20-30％(重量)。

6.权利要求5的治疗骨质疏松症的产品，其特征在于所述产品还含有4-8％(重量)的大豆异黄酮。

7.权利要求4的治疗骨质疏松症的产品，其特征在于所述产品还含有65-75％(重量)的有机钙。

8.权利要求4的治疗骨质疏松症的产品，其特征在于所述产品4-8％的大豆异黄酮和65-75％(重量)的有机钙，以及余量的常规辅料。

9.权利要求7或8的治疗骨质疏松症的产品，其中所述的有机钙为天门冬氨酸钙、葡萄糖酸钙或乳酸钙。

10.本发明产品可作为保健食品或药物。