CN105250366B - 香青兰提取物及其制备方法和用途 - Google Patents
香青兰提取物及其制备方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105250366B CN105250366B CN201510652848.7A CN201510652848A CN105250366B CN 105250366 B CN105250366 B CN 105250366B CN 201510652848 A CN201510652848 A CN 201510652848A CN 105250366 B CN105250366 B CN 105250366B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ethanol
- moldavica dragonhead
- percent
- extract
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 91
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims description 66
- 244000179525 Dracocephalum moldavica Species 0.000 title claims description 5
- 235000010700 Dracocephalum moldavica Nutrition 0.000 title claims description 5
- 241001529849 Dracocephalum Species 0.000 claims abstract description 173
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 400
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 131
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 119
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 69
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 63
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 62
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 60
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 58
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 56
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 54
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 51
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 35
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 35
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 32
- DOUMFZQKYFQNTF-WUTVXBCWSA-N (R)-rosmarinic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 DOUMFZQKYFQNTF-WUTVXBCWSA-N 0.000 claims description 28
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 26
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 23
- NLZCOTZRUWYPTP-MIUGBVLSSA-N 5-hydroxy-2-(4-methoxyphenyl)-7-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxychromen-4-one Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(OC1=C2)=CC(=O)C1=C(O)C=C2O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 NLZCOTZRUWYPTP-MIUGBVLSSA-N 0.000 claims description 19
- NLZCOTZRUWYPTP-UHFFFAOYSA-N acacetin-7-O-beta-D-galactoside Natural products C1=CC(OC)=CC=C1C(OC1=C2)=CC(=O)C1=C(O)C=C2OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 NLZCOTZRUWYPTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 19
- GWOKWCRSUJQOMD-UHFFFAOYSA-N tilianin Natural products C1=CC(OC)=CC=C1C(OC1=C2)=CC(=O)C1=CC=C2OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 GWOKWCRSUJQOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 claims description 16
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 15
- ZZAFFYPNLYCDEP-HNNXBMFYSA-N Rosmarinsaeure Natural products OC(=O)[C@H](Cc1cccc(O)c1O)OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2 ZZAFFYPNLYCDEP-HNNXBMFYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 14
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 14
- DOUMFZQKYFQNTF-MRXNPFEDSA-N rosemarinic acid Natural products C([C@H](C(=O)O)OC(=O)C=CC=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 DOUMFZQKYFQNTF-MRXNPFEDSA-N 0.000 claims description 14
- TVHVQJFBWRLYOD-UHFFFAOYSA-N rosmarinic acid Natural products OC(=O)C(Cc1ccc(O)c(O)c1)OC(=Cc2ccc(O)c(O)c2)C=O TVHVQJFBWRLYOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 13
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 13
- XCKMDTYMOHXUHG-UHFFFAOYSA-N Diosmetin 7-O-beta-D-glucuronopyranoside Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1C(OC1=C2)=CC(=O)C1=C(O)C=C2OC1C(O)C(O)C(O)C(C(O)=O)O1 XCKMDTYMOHXUHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 7
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 claims description 6
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 claims description 6
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 claims description 6
- VSUOKLTVXQRUSG-ZFORQUDYSA-N luteolin 7-O-beta-D-glucosiduronic acid Chemical compound O1[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C=C(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)OC2=C1 VSUOKLTVXQRUSG-ZFORQUDYSA-N 0.000 claims description 6
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 claims description 5
- JBFOLLJCGUCDQP-ZFORQUDYSA-N Apigenin 7-glucuronide Chemical compound O1[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C=C(C=3C=CC(O)=CC=3)OC2=C1 JBFOLLJCGUCDQP-ZFORQUDYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 4
- GTDSSCNJWWPJHR-UHFFFAOYSA-N apigenin 7-O-beta-D-glucuronide Natural products OC1C(Oc2ccc3C(=O)C=C(Oc3c2O)c4ccc(O)cc4)OC(C(O)C1O)C(=O)O GTDSSCNJWWPJHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JBFOLLJCGUCDQP-UHFFFAOYSA-N scutellarin A Natural products O1C(C(O)=O)C(O)C(O)C(O)C1OC1=CC(O)=C2C(=O)C=C(C=3C=CC(O)=CC=3)OC2=C1 JBFOLLJCGUCDQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- JEGUKCSWCFPDGT-UHFFFAOYSA-N h2o hydrate Chemical compound O.O JEGUKCSWCFPDGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 abstract description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 14
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 abstract description 13
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 abstract description 13
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 abstract description 13
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 abstract description 13
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 13
- 241000700159 Rattus Species 0.000 abstract description 12
- 239000008187 granular material Substances 0.000 abstract description 12
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 abstract description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 abstract description 5
- 208000014674 injury Diseases 0.000 abstract description 5
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 abstract description 4
- 150000008156 D-glucuronides Chemical class 0.000 description 25
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 18
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 6
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 6
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 6
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 6
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical group CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 3
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 3
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- 206010042434 Sudden death Diseases 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 2
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 2
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 2
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010069729 Collateral circulation Diseases 0.000 description 1
- 201000000057 Coronary Stenosis Diseases 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000207923 Lamiaceae Species 0.000 description 1
- 208000031481 Pathologic Constriction Diseases 0.000 description 1
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 210000000702 aorta abdominal Anatomy 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003601 intercostal effect Effects 0.000 description 1
- 208000037906 ischaemic injury Diseases 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 238000011369 optimal treatment Methods 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000036262 stenosis Effects 0.000 description 1
- 208000037804 stenosis Diseases 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 208000003663 ventricular fibrillation Diseases 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及香青兰提取物技术领域，是一种香青兰提取物及其制备方法和用途；该香青兰提取物中的总黄酮的质量百分含量为50.3%至58.5%。本发明香青兰提取物中总黄酮含量较现有香青兰提取物中总黄酮含量有较大幅度提高；同时本发明香青兰提取物高剂量组和中剂量组对心肌缺血的疗效较益心巴迪然吉布亚颗粒好，说明本发明香青兰提取物对大鼠心肌缺血性损伤产生一定的保护作用，本发明香青兰提取物中剂量组和低剂量组的服用剂量仅为益心巴迪然吉布亚颗粒服用剂量的25%和12.5%，从而大大降低了服用量。
Description
技术领域
本发明涉及香青兰提取物技术领域，是一种香青兰提取物及其制备方法和用途。
背景技术
冠心病是中老年人最常见的一种心血管疾病，近半个世纪以来心血管疾病已成为威胁人类生命和健康的“第一杀手”，而冠心病是其中最重要的“罪魁”。冠心病在许多发达国家被称为“时代的瘟疫”，占人口死亡原因的第一位，在包括中国在内的一些发展中国家里发病和死亡人数也在逐渐增加，并迅速向发达国家靠拢。我国冠心病的发病率和死亡率在改革开放之前增加速度并不太快，而近二十多年来，有加速上升的趋势。
冠心病是冠状动脉粥样硬化性心脏病的简称，指由冠状动脉发生粥样硬化，引起管腔狭窄甚至闭塞，导致心肌缺血甚至坏死，使得心脏的功能发生障碍甚至无法继续工作，导致的后果是非常严重并且时常是致命的。冠心病的危害除了可以发生心绞痛和心肌梗死以外，还可以因为心肌缺血导致各种心律失常以及心脏扩大和心力衰竭。最严重的心律失常是心室颤动，临床上表现为突然死亡（医学上称之为“猝死”）。冠状动脉是整个心脏的“生命线”，细小且要承担很大的血流量，如同一条小马路却要承担很大的车流量，一旦出现问题则更容易发生拥堵。由于心脏中存在侧枝循环，缓慢的动脉粥样硬化进程常常使患者直到冠状动脉严重狭窄时才会出现症状，从而丧失了最佳的治疗时机。
冠心病的防治是目前世界医药科学研究的重大课题，传统中医药学在治疗冠心病方面积累了丰富的经验，中医提倡以预防为主，更强调整体治疗，标本兼治，临床疗效得到了全世界的广泛认同，使中医药治疗心血管疾病成为世界医药界关注的重点。
故从天然药物中寻找开发新的治疗冠心病药物已经势在必行。在发掘民族医药宝库的基础上，用现代高科技手段，研究具有高疗效的制剂，给患者减轻痛苦，提高其生活质量，具有重大的现实意义。
香青兰为唇形科植物香青兰 Dracocephalum Moldevica L.的干燥地上部分，维吾尔名为巴迪然吉布亚。收载于《中华人民共和国卫生部药品标准-维吾尔药分册》1999年版。分布在我国东北、西北和华北等地区，特别在新疆资源丰富。其性二级温热，有很强的香味，具有补益心脑、活血化瘀、通路开窍、止痛解毒、利尿止咳之功能。
益心巴迪然吉布亚颗粒由香青兰单味药材经水煎浓缩制得，1999年被收载于《中华人民共和国卫生部药品标准·维吾尔药分册》，具有补益心脑、活血化淤、通络开窍等功能，用于治疗冠心病、心绞痛、心肌缺血，能疗效显著，该制剂工艺简单，简单的水提后加入辅料制成颗粒剂，服用剂量大，依从性差，物质基础不清楚。
目前，文献报道香青兰提取物的制备方法很多，但均为简单的水提取物或经简单纯化后得的提取物，专利文献ZL 200710203385.1名称为“香青兰提取物和香青兰滴丸及其生产方法”公开了香青兰提取物的制备方法，主要针对于香青兰全草中总黄酮，纯化工艺简单，采用单一浓度乙醇水溶液洗脱，使得有效成分大量流失。
发明内容
本发明提供了一种香青兰提取物及其制备方法和用途，克服了上述现有技术之不足，其能有效解决现有香青兰提取物在制备过程中有效成分大量流失、益心巴迪然吉布亚颗粒服用剂量大导致依从性差的问题。
本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种香青兰提取物，香青兰提取物中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为8.0%至9.0%、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为2.0%至3.0%、迷迭香酸的质量百分含量为8.0%至11.3%、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为7.0%至8.6%、田蓟苷的质量百分含量为13.0%至17.0%、刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量10.0%至13.5%；总黄酮的质量百分含量为50.3%至58.5%。
下面是对上述发明技术方案之一的进一步优化或/和改进：
上述香青兰提取物按下述方法得到：第一步，取适量香青兰粉碎后得到香青兰药材粉，香青兰药材粉用水或体积百分比为30%至60%的乙醇水溶液回流提取1次至2次，每次回流提取温度为30℃至70℃，每次回流提取时间为3h至6h，每次回流提取时水或乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的30倍至60倍，回流提取后合并提取液得到提取混合液；第二步，将提取混合液浓缩至香青兰药材粉重量的5倍至25倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为50%至80%，在温度为0℃至4℃下静置12h至24h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的8倍至15倍后得到第二浓缩液；第三步，将0.5倍至1.5倍柱体积的第二浓缩液通过大孔树脂进行吸附，吸附后弃去吸附残液，接着用2倍至7倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用2倍至6倍柱体积的体积百分比为2%至8%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用4倍至10倍柱体积的体积百分比为20%至40%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用4倍至10倍柱体积的体积百分比为50%至80%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.05至1.20的稠膏，然后干燥后得到香青兰提取物。
上述香青兰为香青兰地上部分，香青兰药材粉为香青兰最粗粉。
上述第一步中，香青兰药材粉用水或体积百分比为40%的乙醇水溶液回流提取1次，回流提取温度为30℃至70℃，回流提取时间为5h，回流提取时水或乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的50倍；或/和，第二步中，将提取混合液浓缩至香青兰药材粉重量的20倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为70%，在温度为4℃下静置24h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的10倍后得到第二浓缩液；或/和，第三步中，大孔吸附树脂为HPD600或HPD826或XDA-6或LX-11或LX-17。
上述第三步中，大孔吸附树脂为LX-11；或/和，第三步中，用4倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用5倍柱体积的体积百分比为8%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用5倍柱体积的体积百分比为30%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用5倍柱体积的体积百分比为60%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.20的稠膏，然后干燥后得到香青兰提取物；或/和，第三步中，干燥温度为50℃至70℃，干燥时间为6h至10h；或/和，第三步中，干燥温度为60℃，干燥时间为8h。
本发明的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种香青兰提取物的制备方法，按下述步骤进行：第一步，取适量香青兰粉碎后得到香青兰药材粉，香青兰药材粉用水或体积百分比为30%至60%的乙醇水溶液回流提取1次至2次，每次回流提取温度为30℃至70℃，每次回流提取时间为3h至6h，每次回流提取时水或乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的30倍至60倍，回流提取后合并提取液得到提取混合液；第二步，将提取混合液浓缩至香青兰药材粉重量的5倍至25倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为50%至80%，在温度为0℃至4℃下静置12h至24h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的8倍至15倍后得到第二浓缩液；第三步，将0.5倍至1.5倍柱体积的第二浓缩液通过大孔树脂进行吸附，吸附后弃去吸附残液，接着用2倍至7倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用2倍至6倍柱体积的体积百分比为2%至8%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用4倍至10倍柱体积的体积百分比为20%至40%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用4倍至10倍柱体积的体积百分比为50%至80%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.05至1.20的稠膏，然后干燥后得到香青兰提取物。
下面是对上述发明技术方案之二的进一步优化或/和改进：
上述香青兰为香青兰地上部分，香青兰药材粉为香青兰粗最粗粉。
上述第一步中，香青兰药材粉用水或体积百分比为40%的乙醇水溶液回流提取1次，回流提取温度为30℃至70℃，回流提取时间为5h，回流提取时水或乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的50倍；或/和，第二步中，将提取混合液浓缩至香青兰药材粉重量的20倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为70%，在温度为4℃下静置24h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的10倍后得到第二浓缩液；或/和，第三步中，大孔吸附树脂为HPD600或HPD826或XDA-6或LX-11或LX-17。
上述第三步中，大孔吸附树脂为LX-11；或/和，第三步中，用4倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用5倍柱体积的体积百分比为8%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用5倍柱体积的体积百分比为30%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用5倍柱体积的体积百分比为60%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.20的稠膏，然后干燥后得到香青兰提取物；或/和，第三步中，干燥温度为50℃至70℃，干燥时间为6h至10h；或/和，第三步中，干燥温度为60℃，干燥时间为8h。
本发明的技术方案之三是通过以下措施来实现的：一种香青兰提取物作为制备治疗冠心病、动脉硬化和心绞痛药物的应用。
本发明香青兰提取物中总黄酮含量较现有香青兰提取物中总黄酮含量有较大幅度提高；同时本发明香青兰提取物高剂量组和中剂量组对心肌缺血的疗效较益心巴迪然吉布亚颗粒好，说明本发明香青兰提取物对大鼠心肌缺血性损伤产生一定的保护作用，本发明香青兰提取物中剂量组和低剂量组的服用剂量仅为益心巴迪然吉布亚颗粒服用剂量的25%和12.5%，从而大大降低了服用量。
附图说明
附图1为本发明香青兰提取物HPLC色谱图（附图中1号峰为木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷色谱峰、2号峰为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷色谱峰、3号峰为迷迭香酸色谱峰、4号峰为香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷色谱峰、5号峰为田蓟苷色谱峰、6号峰为刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷色谱峰）。
附图2为现有技术木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷对照品HPLC色谱图（与附图1中1号峰相对应）。
附图3为现有技术芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷对照品HPLC色谱图（与附图1中2号峰相对应）。
附图4为现有技术迷迭香酸对照品HPLC色谱图（与附图1中3号峰相对应）。
附图5为现有技术香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷对照品HPLC色谱图（与附图1中4号峰相对应）。
附图6为现有技术田蓟苷对照品HPLC色谱图（与附图1中5号峰相对应）。
附图7为现有技术刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷对照品HPLC色谱图（与附图1中6号峰相对应）。
具体实施方式
本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。
实施例1，该香青兰提取物，香青兰提取物中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为8.0%至9.0%、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为2.0%至3.0%、迷迭香酸的质量百分含量为8.0%至11.3%、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为7.0%至8.6%、田蓟苷的质量百分含量为13.0%至17.0%、刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量10.0%至13.5%；总黄酮的质量百分含量为50.3%至58.5%。
实施例2，该香青兰提取物按下述制备方法得到：第一步，取适量香青兰粉碎后得到香青兰药材粉，香青兰药材粉用水或体积百分比为30%至60%的乙醇水溶液回流提取1次至2次，每次回流提取温度为30℃至70℃，每次回流提取时间为3h至6h，每次回流提取时水或乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的30倍至60倍，回流提取后合并提取液得到提取混合液；第二步，将提取混合液浓缩至香青兰药材粉重量的5倍至25倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为50%至80%，在温度为0℃至4℃下静置12h至24h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的8倍至15倍后得到第二浓缩液；第三步，将0.5倍至1.5倍柱体积的第二浓缩液通过大孔树脂进行吸附，吸附后弃去吸附残液，接着用2倍至7倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用2倍至6倍柱体积的体积百分比为2%至8%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用4倍至10倍柱体积的体积百分比为20%至40%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用4倍至10倍柱体积的体积百分比为50%至80%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.05至1.20的稠膏，然后干燥后得到香青兰提取物。
实施例3，作为上述实施例的优化，香青兰为香青兰地上部分，香青兰药材粉为香青兰最粗粉。
实施例4，作为上述实施例的优化，第一步中，香青兰药材粉用水或体积百分比为40%的乙醇水溶液回流提取1次，回流提取温度为30℃至70℃，回流提取时间为5h，回流提取时水或乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的50倍；或/和，第二步中，将提取混合液浓缩至香青兰药材粉重量的20倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为70%，在温度为4℃下静置24h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的10倍后得到第二浓缩液；或/和，第三步中，大孔吸附树脂为HPD600或HPD826或XDA-6或LX-11或LX-17。
实施例5，作为上述实施例的优化，第三步中，大孔吸附树脂为LX-11；或/和，第三步中，用4倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用5倍柱体积的体积百分比为8%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用5倍柱体积的体积百分比为30%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用5倍柱体积的体积百分比为60%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.20的稠膏，然后干燥后得到香青兰提取物；或/和，第三步中，干燥温度为50℃至70℃，干燥时间为6h至10h；或/和，第三步中，干燥温度为60℃，干燥时间为8h。
实施例6，该香青兰提取物按下述制备方法得到：第一步，取50g香青兰粉碎后得到香青兰药材粉，香青兰药材粉用体积百分比为40%的乙醇水溶液回流提取1次，回流提取温度为50℃，回流提取时间为6h，回流提取时乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的40倍，回流提取后得到提取液；第二步，将提取液浓缩至香青兰药材粉重量的20倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为70%，在温度为4℃下静置24h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的10倍后得到第二浓缩液；第三步，将1.5倍柱体积的第二浓缩液通过大孔树脂进行吸附，吸附后弃去吸附残液，接着用4倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用5倍柱体积的体积百分比为5%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用5倍柱体积的体积百分比为30%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用7倍柱体积的体积百分比为60%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.20的稠膏，然后在温度为60℃下干燥8h，干燥后得到香青兰提取物。本实施例中大孔吸附树脂为LX-11。本实施例的香青兰提取物中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为8.0%、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为3.0%、迷迭香酸的质量百分含量为10.5%、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为7.0%、田蓟苷的质量百分含量为17.0%、刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为13.0%、总黄酮的质量百分含量为57.5%。
实施例7，该香青兰提取物按下述制备方法得到：第一步，取50g香青兰粉碎后得到香青兰药材粉，香青兰药材粉用体积百分比为50%的乙醇水溶液回流提取2次，每次回流提取温度为70℃，第一次回流提取时间为3h、第二次回流提取时间为2h，每次回流提取时乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的40倍，回流提取后合并提取液得到提取混合液；第二步，将提取混合液浓缩至香青兰药材粉重量的15倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为70%，在温度为4℃下静置24h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的10倍后得到第二浓缩液；第三步，将1倍柱体积的第二浓缩液通过大孔树脂进行吸附，吸附后弃去吸附残液，接着用4倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用3倍柱体积的体积百分比为7%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用5倍柱体积的体积百分比为35%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用5倍柱体积的体积百分比为70%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.18的稠膏，然后在温度为60℃下干燥7h，干燥后得到香青兰提取物。本实施例中大孔吸附树脂为HPD826。本实施例的香青兰提取物中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为8.5%、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为2.0%、迷迭香酸的质量百分含量为8.0%、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为8.0%、田蓟苷的质量百分含量为14.0%、刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为10.0%、总黄酮的质量百分含量为55%。
实施例8，该香青兰提取物按下述制备方法得到：第一步，取50g香青兰粉碎后得到香青兰药材粉，香青兰药材粉用体积百分比为30%的乙醇水溶液回流提取1次，回流提取温度为50℃，回流提取时间为4h，回流提取时乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的40倍，回流提取后得到提取液；第二步，将提取液浓缩至香青兰药材粉重量的22倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为70%，在温度为4℃下静置22h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的12倍后得到第二浓缩液；第三步，将1.1柱体积的第二浓缩液通过大孔树脂进行吸附，吸附后弃去吸附残液，接着用4倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用6倍柱体积的体积百分比为4%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用5倍柱体积的体积百分比为20%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用5倍柱体积的体积百分比为60%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.18的稠膏，然后在温度为60℃下干燥8h，干燥后得到香青兰提取物。本实施例中大孔吸附树脂为XDA-6。本实施例的香青兰提取物中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为8.2%、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为2.3%、迷迭香酸的质量百分含量为8.0%、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为7.5%、田蓟苷的质量百分含量为13.1%、刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为12.0%、总黄酮的质量百分含量为53%。
实施例9，该香青兰提取物按下述制备方法得到：第一步，取50g香青兰粉碎后得到香青兰药材粉，香青兰药材粉用体积百分比为45%的乙醇水溶液回流提取2次，每次回流提取温度为50℃，每次回流提取时间为2.5h，每次回流提取时乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的50倍，回流提取后合并提取液得到提取混合液；第二步，将提取混合液浓缩至香青兰药材粉重量的20倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为70%，在温度为4℃下静置24h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的15倍后得到第二浓缩液；第三步，将1.3倍柱体积的第二浓缩液通过大孔树脂进行吸附，吸附后弃去吸附残液，接着用4倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用5倍柱体积的体积百分比为6%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用5倍柱体积的体积百分比为35%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用6倍柱体积的体积百分比为65%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.18的稠膏，然后在温度为60℃下干燥8h，干燥后得到香青兰提取物。本实施例中大孔吸附树脂为LX-17。本实施例的香青兰提取物中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为9.0%、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为2.0%、迷迭香酸的质量百分含量为11.3%、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为8.5%、田蓟苷的质量百分含量为13.3%、刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为13.5%、总黄酮的质量百分含量为57%。
实施例10，该香青兰提取物按下述制备方法得到：第一步，取50g香青兰粉碎后得到香青兰药材粉，香青兰药材粉用体积百分比为60%的乙醇水溶液回流提取2次，每次回流提取温度为50℃，每次回流提取时间为1.5h，每次回流提取时乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的60倍，回流提取后合并提取液得到提取混合液；第二步，将提取混合液浓缩至香青兰药材粉重量的6倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为50%，在温度为0℃下静置12h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的15倍后得到第二浓缩液；第三步，将0.5倍柱体积的第二浓缩液通过大孔树脂进行吸附，吸附后弃去吸附残液，接着用4倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用6倍柱体积的体积百分比为5%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用5倍柱体积的体积百分比为25%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用6倍柱体积的体积百分比为70%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.10的稠膏，然后在温度为60℃下干燥8h，干燥后得到香青兰提取物。本实施例中大孔吸附树脂为HPD600。本实施例的香青兰提取物中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为8.0%、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为2.1%、迷迭香酸的质量百分含量为8.2%、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为7.0%、田蓟苷的质量百分含量为13.0%、刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸的质量百分含量为12.0%、总黄酮的质量百分含量为51%。
本发明上述实施例得到的香青兰提取物中各组分的含量按下述方法测定：
（1）本发明香青兰提取物中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、田蓟苷和刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的高效液相测定方法：
（2）香青兰提取物中总黄酮的含量测定：采用紫外比色法，以田蓟苷为对照品，测定香青兰提取物中总黄酮含量。
对照品溶液的制备：
精密量取已配制好的200.4μg/mL田蓟苷对照品储备液1mL，置于25mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，备用。
供试品溶液的制备：
称本发明取香青兰提取物1.0g，置于25mL量瓶中，甲醇超声溶解30min，放凉，用甲醇定容至刻度，摇匀，备用。
将以上配制好的溶液以甲醇为空白溶液，采用紫外分光光度计分别于200nm至700nm的波长范围进行扫描，确定测定最大吸收波长。结果表明，本发明香青兰提取物的总黄酮和田蓟苷在324nm有最大吸收。
标准曲线的制备：
精密吸取田蓟苷对照品储备液0.30 mL、0.50 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL置25mL量瓶中，加甲醇至刻度，配制成浓度分别为2.405μg/mL、4.008 μg/mL、8.016 μg/mL、16.03μg/mL和24.05μg/mL的溶液，于最大吸收波长处测定吸收度，以吸收度(A)对浓度(C)作线性回归，得标准曲线方程。标准曲线方程为y=0.0493x－0.0002 (r=0.9999)；田蓟苷线性范围为2.405μg/mL至24.05 μg/mL。
实施例11，该香青兰提取物作为制备治疗冠心病、动脉硬化和心绞痛药物的应用。
本发明上述实施例得到的香青兰提取物的药效学试验如下：
本发明香青兰提取物对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用
1试验材料
1.1 仪器与试剂 HX-300 动物呼吸机(成都泰盟科技有限公司)；power wave XS2酶标仪(美国BIO-RAD公司)；DEM-Ⅱ型自动酶标洗板机(北京楠化科技开发有限公司)；TDZS-WS 多管架自动平衡离心机(湘仪离心机仪器有限公司)；HH-2数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)。
乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)试剂盒(均购自南京建成生物工程研究所)。
本发明香青兰提取物(由试验室自唇形科青兰属一年生草本植物香青兰中提取)。
益心巴迪然吉布亚颗粒由新疆维吾尔药业有限责任公司提供，1g相当于1g生药，12g/袋，批号140436。
动物
清洁级健康雄性Wistar大鼠，体重(200±50) g，由新疆医科大学试验动物中心提供。
试验方法
取60只雄性Wistar大鼠，随机分为假手术组、模型组、本发明香青兰提取物高剂量组、本发明香青兰提取物中剂量组、本发明香青兰提取物低剂量组、益心巴迪然吉布亚颗粒组，每组10只。受试药物组分别给予本发明香青兰提取物15 mg/(kg·d)、30 mg/(kg·d)和60mg/(kg·d)，阳性药物组给予益心巴迪然吉布亚颗粒120 mg/(kg·d)，连续给药7 d。假手术组和模型组同时给予0.5% CMC-Na灌胃，并于第8天给药后10min后行手术。大鼠戊巴比妥钠麻醉，仰卧位固定。将银针电极插入四肢皮下，连接BL-420E生物机能试验系统，监测Ⅱ肢体导联心电图。行气管插管，接小型动物呼吸机。左侧第三肋间开胸，暴露心脏，于左心耳下缘，冠状动脉左前降支主干上1/3处，用无创缝针和00号丝线穿入血管(包括静脉)下浅层心肌，以备阻断冠脉。待情况稳定后，牵拉备用线，造成心肌缺血。除假手术组不结扎外，其余组均结扎，缺血30min后松开阻断线再灌注120min。以心电图ST段抬高、T波高耸作为心肌缺血的标志，以抬高的ST段下降，T波逐渐恢复确定再灌注的成功。观察并记录心肌缺血和再灌注时ST段的变化。试验结束后，腹主动脉取血，静置30min后，离心(0℃-4℃，3000 r/min，10min），测定血清学指标。
指标检测
3.1 心电图ST段抬高情况
记录肢体标准Ⅱ导联心电图，观察并记录心肌缺血和再灌注时ST段的变化。结果见表1。
血清心肌酶的检测
检测各组血清中LDH，CK-MB和AST的活性，试验操作方法严格按照试剂盒说明书进行，结果见表2。
统计学分析
采用SPSS 10.0统计学软件统计数据，所有试验数据均以
±s表示，组间比较用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。
试验结果显示：
由表1可知，大鼠冠脉前降支结扎后，与假手术组比较，其余各组缺血期的S-T段明显抬高（P<0.01），呈现明显的缺血性损伤表现；与模型组比较，大鼠灌服本发明香青兰提取物高剂量组和中剂量组在心肌缺血-再灌注过程中S-T段抬高均显著低于模型组(P<0.01)，本发明香青兰提取物低剂量组、益心巴迪然吉布亚颗粒组相对效果较差。
由表2可知，大鼠冠脉前降支结扎后，血清AST、LDH、CK-MB均显著升高，与假手术组比较，模型组血清心肌酶活性明显升高(P<0.01)；本发明香青兰提取物高剂量组和中剂量组，均可使AST、LDH、CK-MB显著降低，即本发明香青兰提取物高剂量组和中剂量组，可显著抑制AST，LDH，CK-MB因心肌缺血导致的升高(P<0.01或P<0.05)。
药效学研究表明，对大鼠心肌缺血损伤，本发明香青兰提取物可降低ST段电压而缓解心肌缺血，并能减少血清心肌酶的释放。本发明香青兰提取物高剂量组和中剂量组对心肌缺血的疗效较益心巴迪然吉布亚颗粒好，说明本发明香青兰提取物对大鼠心肌缺血性损伤产生一定的保护作用。本发明香青兰提取物中剂量组和低剂量组的服用剂量仅为益心巴迪然吉布亚颗粒服用剂量的25%和12.5%，大大降低了本发明香青兰提取物的服用量。
现有香青兰提取物中总黄酮的质量百分含量小于50%，本发明香青兰提取物中总黄酮的质量百分含量为50.3%至58.5%，且本发明香青兰提取物中的木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、田蓟苷和刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量总和为50%至65%。
综上所述，本发明香青兰提取物中总黄酮含量较现有香青兰提取物中总黄酮含量有较大幅度提高；同时本发明香青兰提取物高剂量组和中剂量组对心肌缺血的疗效较益心巴迪然吉布亚颗粒好，说明本发明香青兰提取物对大鼠心肌缺血性损伤产生一定的保护作用，本发明香青兰提取物中剂量组和低剂量组的服用剂量仅为益心巴迪然吉布亚颗粒服用剂量的25%和12.5%，从而大大降低了服用量。
以上技术特征构成了本发明的实施例，其具有较强的适应性和实施效果，可根据实际需要增减非必要的技术特征，来满足不同情况的需求。
Claims (5)
1.一种香青兰提取物，其特征在于香青兰提取物中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为8.0%至9.0%、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为2.0%至3.0%、迷迭香酸的质量百分含量为8.0%至11.3%、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量为7.0%至8.6%、田蓟苷的质量百分含量为13.0%至17.0%、刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的质量百分含量10.0%至13.5%；总黄酮的质量百分含量为50.3%至58.5%；
所述的香青兰提取物的制备方法为：
第一步，取适量香青兰粉碎后得到香青兰药材粉，香青兰药材粉用水或体积百分比为30%至60%的乙醇水溶液回流提取1次至2次，每次回流提取温度为30℃至70℃，每次回流提取时间为3h至6h，每次回流提取时水或乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的30倍至60倍，回流提取后合并提取液得到提取混合液；第二步，将提取混合液浓缩至香青兰药材粉重量的5倍至25倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为50%至80%，在温度为0℃至4℃下静置12h至24h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的8倍至15倍后得到第二浓缩液；第三步，将0.5倍至1.5倍柱体积的第二浓缩液通过大孔树脂进行吸附，吸附后弃去吸附残液，接着用2倍至7倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用2倍至6倍柱体积的体积百分比为2%至8%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用4倍至10倍柱体积的体积百分比为20%至40%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用4倍至10倍柱体积的体积百分比为50%至80%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.05至1.20的稠膏，然后干燥后得到香青兰提取物；
第三步中，所述大孔吸附树脂为HPD600或HPD826或XDA-6或LX-11或LX-17。
2.根据权利要求1所述的香青兰提取物，其特征在于，所述香青兰为香青兰地上部分，所述香青兰药材粉为香青兰最粗粉。
3.根据权利要求1所述的香青兰提取物，其特征在于，所述第一步中，香青兰药材粉用水或体积百分比为40%的乙醇水溶液回流提取1次，回流提取温度为30℃至70℃，回流提取时间为5h，回流提取时，水或乙醇水溶液的量为香青兰药材粉重量的50倍；或/和，第二步中，将提取混合液浓缩至香青兰药材粉重量的20倍后得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇得到混合液，混合液中乙醇的质量百分含量为70%，在温度为4℃下静置24h，静置后过滤，滤液浓缩至香青兰药材粉重量的10倍后得到第二浓缩液。
4.根据权利要求1所述的香青兰提取物，其特征在于，第三步中，所述大孔吸附树脂为LX-11；或/和，第三步中，用4倍柱体积的去离子水对大孔树脂进行洗脱，水洗后弃去水洗液，再用5倍柱体积的体积百分比为8%的乙醇水溶液进行乙醇一次洗脱，洗脱后弃去乙醇一次洗脱液，然后用5倍柱体积的体积百分比为30%的乙醇水溶液进行乙醇二次洗脱，最后用5倍柱体积的体积百分比为60%的乙醇水溶液进行乙醇三次洗脱，收集乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液，乙醇二次洗脱液和乙醇三次洗脱液混合后浓缩至在20℃相对密度为1.20的稠膏，然后干燥后得到香青兰提取物；或/和，第三步中，干燥温度为50℃至70℃，干燥时间为6h至10h。
5.一种根据权利要求1-4任一项所述的香青兰提取物作为制备治疗冠心病、动脉硬化和心绞痛药物的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510652848.7A CN105250366B (zh) | 2015-10-10 | 2015-10-10 | 香青兰提取物及其制备方法和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510652848.7A CN105250366B (zh) | 2015-10-10 | 2015-10-10 | 香青兰提取物及其制备方法和用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105250366A CN105250366A (zh) | 2016-01-20 |
| CN105250366B true CN105250366B (zh) | 2020-03-13 |
Family
ID=55090502
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510652848.7A Expired - Fee Related CN105250366B (zh) | 2015-10-10 | 2015-10-10 | 香青兰提取物及其制备方法和用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105250366B (zh) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106749455B (zh) * | 2015-11-24 | 2019-11-08 | 石河子大学医学院第一附属医院 | 刺槐素-7-o-葡萄糖醛酸苷的制备方法 |
| CN107586311B (zh) * | 2017-07-25 | 2018-10-09 | 贵州维康子帆药业股份有限公司 | 酢浆草中提取刺槐素-6-C-β-D-葡萄糖苷的方法 |
| RU2695328C1 (ru) * | 2018-09-25 | 2019-07-23 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений (ФГБНУ ВИЛАР) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СУБСТАНЦИЙ ИЗ ЗМЕЕГОЛОВНИКА МОЛДАВСКОГО (Dracocephalum moldavica L.) |
| CN109810158B (zh) * | 2019-03-01 | 2021-06-11 | 新疆维吾尔自治区药物研究所 | 香叶木素-7-o-葡萄糖醛酸苷的制备方法 |
| CN113633675A (zh) * | 2021-09-28 | 2021-11-12 | 新疆维吾尔自治区药物研究所 | 香青兰提取物在制备抗心脏毒性作用药物中的应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1488638A (zh) * | 2002-10-10 | 2004-04-14 | 上海海天医药科技开发有限公司 | 淫羊藿总黄酮的提取方法及其提取物所制成的产品 |
| CN101219161A (zh) * | 2007-12-25 | 2008-07-16 | 新疆维吾尔自治区药物研究所 | 香青兰提取物和香青兰滴丸及其生产方法 |
-
2015
- 2015-10-10 CN CN201510652848.7A patent/CN105250366B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1488638A (zh) * | 2002-10-10 | 2004-04-14 | 上海海天医药科技开发有限公司 | 淫羊藿总黄酮的提取方法及其提取物所制成的产品 |
| CN101219161A (zh) * | 2007-12-25 | 2008-07-16 | 新疆维吾尔自治区药物研究所 | 香青兰提取物和香青兰滴丸及其生产方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 于宁等.香青兰提取物中苯丙素类和黄酮类3个化合物的含量测定.《中国药学杂志》.2015,第50卷(第13期),第1138页第1段、第1139页左栏第1段、第1节、第2.1.1小节、第1141页表3. * |
| 维药香青兰研究新进展;翁剑锋等;《江西中医学院学报》;20110430;第23卷(第2期);第81-84页 * |
| 香青兰提取物中苯丙素类和黄酮类3个化合物的含量测定;于宁等;《中国药学杂志》;20150731;第50卷(第13期);第1138页第1段、第1139页左栏第1段、第1节、第2.1.1小节、第1141页表3 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105250366A (zh) | 2016-01-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105250366B (zh) | 香青兰提取物及其制备方法和用途 | |
| JP5675839B2 (ja) | ヒマワリ抽出物を含む医薬組成物、その調製方法及び使用 | |
| UA81124C2 (en) | Composition for heart disease treatment based on extracts of radix salviae and panax notogingseng roots, method to prepare and uses thereof | |
| CN107648430A (zh) | 一种含延龄草甾体皂苷类有效成分胶囊制剂的制备方法及其在制备各类药物中的应用 | |
| CN104435034B (zh) | 一种三七总皂苷及其制备方法 | |
| KR100529793B1 (ko) | 솔잎 추출물 및 이것의 용도 | |
| JP2002538214A (ja) | 心血管疾病治療用薬剤組成物及びその製造方法 | |
| WO2018133563A1 (zh) | 一种人参属植物提取物及其药物组合物和应用 | |
| CN103977180B (zh) | 一种具有抗抑郁作用的中药物质组方及其制备方法与应用 | |
| CN100467025C (zh) | 积雪草总苷、积雪草苷或羟基积雪草苷在制备防治心、脑血管疾病药物中的用途 | |
| CN100377731C (zh) | 一种中药及其制备方法和用途 | |
| CN1698717B (zh) | 一种中药复方脂肪乳注射液及其制备方法 | |
| CN101974011B (zh) | 一种具有药用活性的新化合物灯盏细辛酸甲酯 | |
| CN101703561A (zh) | 一种治疗骨质疏松症的杜仲有效部位及其制备方法 | |
| CN101428050A (zh) | 一种用于治疗血栓、心脑血管系统疾病的活性组合物 | |
| CN1994277B (zh) | 一种丹参丹酚酸a固体制剂及其制备方法 | |
| CN102670865A (zh) | 红葱的活性成分提取工艺 | |
| CN113384641A (zh) | 用于治疗冠心病的小红蒜有效部位的提取纯化方法及其产品和应用 | |
| CN101974012B (zh) | 一种具有药用活性的新化合物灯盏细辛酸乙酯 | |
| CN101176751B (zh) | 丹参和桂枝的药物组合物 | |
| CN110448651A (zh) | 一种治疗肝病的藏中药组合物的制备方法、该组合物及包含其的颗粒剂 | |
| CN1927289A (zh) | 一种治疗糖尿病及糖耐量低减的药物组合物及制备方法 | |
| KR20040043707A (ko) | 인진쑥, 애엽, 유근피, 적양, 오가피, 대두 lph펩타이드, 백석목, 메밀을 주성분으로 함유하는 숙취제거, 간염, 간암 치료의 의약 조성물 | |
| CN113398186B (zh) | 一种紫花地丁提取物及其制备方法和应用 | |
| CN101974010B (zh) | 一种具有药用活性的新化合物灯盏细辛酸 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Xing Jianguo Inventor after: He Chenghui Inventor after: Yu Ning Inventor after: Zheng Ruifang Inventor after: Liu Xuanlin Inventor after: Ruxian Guli. Yiming Inventor before: Xing Jianguo Inventor before: He Chenghui Inventor before: Yu Ning Inventor before: Jiang Wen Inventor before: Liu Xuanlin Inventor before: Ruxian Guli. Yiming |
|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20200313 |