JP5675839B2

JP5675839B2 - ヒマワリ抽出物を含む医薬組成物、その調製方法及び使用

Info

Publication number: JP5675839B2
Application number: JP2012545045A
Authority: JP
Inventors: ペイスーリン; リンツァン; チェンレイシャオ; タオジ; リシアシャン; ツィピンファン
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2009-12-28
Filing date: 2009-12-28
Publication date: 2015-02-25
Anticipated expiration: 2029-12-28
Also published as: JP2013515680A; US20120315332A1; KR20120123064A; EP2520305A1; EP2520305A4; WO2011079410A1; EP2520305B1

Description

本発明は、植物抽出物を含む医薬組成物、その調製方法及び使用に関する。特に、本発明は、ヒマワリ抽出物を含む医薬組成物、その調製方法及び使用に関する。より具体的には、本発明は、ヒマワリの葉、頭花又は茎の抽出物を含む医薬組成物、その調製方法及び使用に関する。

本態性高血圧は、臨床診療において、高頻度でよく起こる疾患であり、その病因は、まだそれほど明確になっておらず、高い血圧が、この疾患の主な臨床症状である。高血圧は、疾患の分類において比較的独立性を有しているが、高血圧は、卒中、冠動脈性心疾患、腎不全及び網膜症の重要な危険因子であり、ヒトの健康を重大な危険にさらし、生活の質に影響を及ぼす疾患である。統計によると、高血圧の有病率は、１８歳を超える中国在住者のうちの１８．８％を占め、これは１９９１年に比べて３１％増加しており、現在、中国における高血圧患者の数は、１億６千万人まで達している。したがって、高血圧をいかにして予防し治療するかは、重要な意味を持つ。危険因子としての高血圧に対する介入は、心血管疾患及び脳血管疾患、糖尿病、がん並びに幾つかの他の慢性疾患の危険性を同時に低減することができるという事実が判明している。高血圧患者の拡張期血圧を平均でそれぞれ３ｍｍＨｇ下げると、卒中の危険性は３２％減少し、冠動脈性心疾患の危険性は１９％減少する。したがって、高血圧を管理することは、医療費及び社会的負担を効果的に削減させ得る、有効な一次予防策である。拡張期血圧を平均で３ｍｍＨｇ下げることによって計算すれば、中国は、毎年４８７０００例の卒中及び１４４０００例の冠動脈性心疾患を減らすことができ、数十億の資金を国のために蓄えることができる。

現在では、高血圧の治療は、主に、漢方薬及び西洋医薬の経口投与に依存している。抗高血圧薬の西洋医薬は１００種類まで達し、抗高血圧薬の市場を独占しており、この抗高血圧薬は、主に、血液量を減らし、血管を拡張することによって、血圧を下げるものであり、その利点は、血圧を迅速に下げることを特徴とする。しかし、低カリウム血症、高コレステロール血症、性的機能障害、刺激性咳嗽、血管神経性浮腫等の明白な副作用も存在し、これらの副作用によって、一部の患者に対する長期使用が完全に制限される。西洋医薬に比べて、漢方医学は、高血圧の治療に対して弁証的な診断を行い、これは高血圧の異質性及び個々の治療を重視するのみならず、全身症状を改善するために、身体の陰及び陽、気を調整するものでもあり、さらに、漢方薬は、比較的副作用が少なく、長期間使用することができ、このことは、西洋医薬にはない特有の利点である。

ヒマワリの葉は、キク科（Compositae）ヒマワリ、ヘリアンサスアナスＬ．（Helianthus annuus L.）の乾燥葉であり、これは、"Chinese Materia Medica Standards of Shandong Province", 2002の９６頁に、以下のように記録されている：ヒマワリの葉は、性質については無味であり、苦味があり、滑らかであり、非毒性であり、肝臓及び胃に入ることができる。その上、ヒマワリの葉は、肝臓を鎮静化し、昂進性の陽を抑制し、食物の消化を助け、胃を健康にすることができる。ヒマワリの葉は、高血圧、頭痛及び目まいを治療するのに使用することができる。古代中国の民間において、高血圧の治療にヒマワリの葉を使用するという記録が存在した：例えば、３０ｇのヒマワリの葉（６０ｇの新鮮な葉）を煮て濃い汁にし、各患者が、毎晩及び毎朝１回、７日間継続して１回ずつ服用するというものであり、服用することで、良好な抗高血圧効果が得られると強調している。臨床適用のための漢方薬としてのヒマワリの葉についての報告はほとんどなく、血圧を下げるためのその適用は、"Heilongjiang Medicine Journal" (Vol. 8, Issue 1, 1995, page 57)に報告されており、ヒマワリの頭花から作られる「Kui pan jiang ya pian」は、抗高血圧効果を示したが、この参考文献における製剤は、原料としてヒマワリの頭花の粗抽出物又は化合物を使用する錠剤のみであり、この製剤の臨床での使用及び販売はこれまでに知られていない。

ヒマワリの葉は、中国の全土で広く分布しており、ヒマワリの葉の化学組成並びに化学活性及び生物活性についての外国の研究が、多数報告されている。特に、生物活性を有する、ヒマワリの葉由来の幾つかの新規化合物が、近年になって報告されているが、ヒマワリの葉、頭花及び茎の他の活性、特に、民間に広く使用されてきた抗高血圧活性については、研究はほとんど皆無である。

"Hypertension treating traditional Chinese medicine preparation and its preparing process"の表題を有する中国特許出願第２００３１０１０５３９８．７号では、ヒマワリの葉が、伝統的な漢方薬の抗高血圧性化合物に適用され、血圧を下げることが開示された。しかし、これまでのところ、ヒマワリの葉、頭花及び茎の抽出物の活性成分又は有効成分を使用する、高血圧を治療するための適用についての報告は存在せず、ヒマワリの葉、頭花及び茎の抽出物の活性成分又は有効部分を、市場を開拓し、食品又は機能性食品、特に、高血圧患者のための食品又は機能性食品を大規模に調製するための、医薬及び食用の新規供給源として使用することについての報告も存在しない。

中国特許出願第２００３１０１０５３９８．７号

"Chinese Materia Medica Standards of Shandong Province", 2002 "Heilongjiang Medicine Journal" (Vol. 8, Issue 1, 1995, page 57)

本発明をより良く理解するために、幾つかの用語を以下に定義する。本発明において定義されている用語は、関連分野の当業者には一般的な意味を有する。

他に特に規定がなければ、用語「総フラボノイドの抽出物」は、ヒマワリの葉、頭花又は茎の抽出、分離及び精製によって得られる、総フラボノイドの含量が５０％を超える抽出物である。

他に特に規定がなければ、用語「総テルペンの抽出物」は、ヒマワリの葉、頭花又は茎の抽出、分離及び精製によって得られる、総テルペンの含量が５０％を超える抽出物である。

他に特に規定がなければ、用語「総有機酸の抽出物」は、ヒマワリの葉、頭花又は茎の抽出、分離及び精製によって得られる、総有機酸の含量が５０％を超える抽出物である。

本発明の一態様によると、本発明は、ヒマワリの葉、頭花又は茎由来の総フラボノイドの抽出物を含む、ヒマワリの抽出物を含有する医薬組成物を提供する。医薬組成物中、総フラボノイドの含量は、３０〜７０重量％である。

本発明において、総フラボノイドの抽出物が、ネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、スダキチン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８，３’−トリメトキシフラボン）、スダキチンデメトキシ（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８−ジメトキシフラボン）、ヒメノキシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，３’，４’−テトラメトキシフラボン）、ヒスピズリン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６−メトキシフラボン）、アセロシン（５，７，３’−トリヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、７，４’−ジヒドロキシフラボン等を主に含有し；好ましくは、総フラボノイドの抽出物中のネバデンシンの含量が、０．５〜６０重量％であり；より好ましくは、総フラボノイドの抽出物中のネバデンシンの含量が、２０〜６０重量％である。

本発明において、医薬組成物が、ヒマワリの葉、頭花又は茎由来の、総テルペンの抽出物及び総有機酸の抽出物の１種類又は２種類をさらに含み；総テルペンの抽出物が、セスキテルペノイド及びセスキテルペンラクトン、例えば、グアイアノリド、ゲルマクラノリド（Garmacranolide）、ヘリアンゴリド及びオイデスマン（Edudesmane）；テルペンチンアルキル及びカウラン等のジテルペン及びジテルペン酸；並びにオレアノール酸サポニン及び転位テルペンチン（転位３，４−セコ−チルカラン（tirueallane）型トリテルペノイド）等のトリテルペンを主に含有し；総有機酸の抽出物は、クロロゲン酸、クエン酸、リンゴ酸及びフマル酸を主に含有し、好ましくは、総有機酸の抽出物中のクロロゲン酸の含量が、１０〜６０重量％である。前記医薬組成物中、総テルペンの抽出物の含量が、１０〜４０重量％であり、総有機酸の抽出物の含量が、１０〜３０重量％である。

本発明において、総フラボノイドの抽出物が、以下のステップ、
（１）ヒマワリの葉、頭花又は茎を、溶媒として水又はエタノール溶液（１０〜９５％、ｖ／ｖ）を用いて抽出し、抽出物溶液を０．５〜２ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮するステップ；
（２）ステップ（１）における医薬液を、ＡＤＳ−１７型、ＡＤＳ−Ｆ８型又はＬＳ−３００型等のマクロポーラス吸着樹脂カラムに通し、水を用いて溶出し、次いで、５〜９５％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を用いて、好ましくは１０％〜７０％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を用いて勾配溶出を行い、エタノール溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総フラボノイドの抽出物を得るステップ
により調製される。

総テルペンの抽出物が、以下のステップ、
（１）ヒマワリの葉、頭花又は茎を、溶媒として水又はエタノール溶液（１０〜９５％、ｖ／ｖ）を用いて抽出し、抽出物溶液を０．５〜２ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮するステップ；
（２）ステップ（１）における医薬液を、クロロホルム等の有機溶媒によって抽出し、抽出液を合わせ、濃縮し、水に溶解させ、ポリアミドカラムに通し、５〜９５％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を用いて、好ましくは１０％〜７０％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を用いて勾配溶出処理を行い、溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総テルペンの抽出物を得るステップ
により調製される。

本発明において、総有機酸の抽出物が、以下のステップ、
（１）ヒマワリの葉、頭花又は茎を、溶媒として水又は１０〜９５％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を用いて抽出し、抽出物溶液を０．５〜２ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮するステップ；
（２）ステップ（１）における医薬液を、ＡＤＳ−１７型、ＡＤＳ−Ｆ８型、ＡＢ−８型又はＬＳ−３００型等のマクロポーラス吸着樹脂カラムに通し、水を用いて溶出し、マクロポーラス吸着樹脂の流出液及び水溶離液を合わせ、２０１Ｘ７強塩基性スチレン型陰イオン交換樹脂等の陰イオン交換樹脂に通し、アンモニア性エタノールを用いて溶出し、溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総有機酸の抽出物を得るステップ
により調製される。

本発明の別の態様によると、本発明は、ヒマワリから総フラボノイドの抽出物を抽出するステップを含み、ヒマワリから総フラボノイドの抽出物を抽出するステップが、以下の通り：
ヒマワリの葉、頭花又は茎を、溶媒として水又はエタノール溶液を用いて抽出し、抽出物溶液を濃縮し、次いで、マクロポーラス吸着樹脂カラムに通し、水を用いて溶出し、次いで、エタノール溶液を用いて勾配溶出を行い、エタノール溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総フラボノイドの抽出物を得るステップ
である、上記医薬組成物を製造するための方法を提供する。

好ましくは、前記方法が、ヒマワリから総テルペン及び／又は総有機酸の抽出物を抽出するステップをさらに含み、総テルペンの抽出物を抽出するステップが、以下の通り：
ヒマワリの葉、頭花又は茎を、溶媒として水又はエタノール溶液を用いて抽出し、抽出物溶液を濃縮し、次いで、有機溶媒によって抽出し、抽出液を合わせ、濃縮し、水に溶解させ、ポリアミドカラムに通し、エタノール溶液を用いて勾配溶出処理を行い、溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総テルペンの抽出物を得るステップ
である。

ヒマワリから総有機酸の抽出物を抽出するステップが、以下の通り：
ヒマワリの葉、頭花又は茎を、溶媒として水又はエタノール溶液を用いて抽出し、抽出物溶液を濃縮し、次いで、マクロポーラス吸着樹脂カラムに通し、水を用いて溶出し、マクロポーラス吸着樹脂の流出液及び水溶離液を合わせ、陰イオン交換樹脂に通し、アンモニア性エタノールを用いて溶出し、溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総有機酸の抽出物を得るステップ
である。

本発明の別の態様によると、本発明は、上記医薬組成物並びに薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤を含む医薬調製物であって、好ましくは、医薬調製物の製剤が、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、丸剤、経口液剤、シロップ剤、注射剤、徐放性製剤、制御放出性製剤、標的化送達製剤及び他の薬学的に許容される製剤を含有し；錠剤が、経口錠剤、トローチ剤、分散錠、発泡錠、ゲル錠、徐放性錠剤及び制御放出性錠剤を含み；注射剤が、小容量注射剤、大容量注射剤、粉末注射剤及び乳剤を含む、医薬調製物を提供する。

本発明の別の態様によると、本発明は、高血圧疾患の予防及び治療における医薬品を調製するための並びに血圧の低下を補助する食品及び機能性食品を調製するための、上記医薬組成物又は医薬調製物の使用を提供する。

本発明の別の態様によると、本発明は、上記医薬組成物又は医薬調製物を、個体に投与するステップを含む、高血圧疾患を予防及び治療するための方法を提供する。

本発明の別の態様によると、本発明は、医薬組成物又は医薬調製物を含有する上記機能性食品を、個体に与えるステップを含む、高血圧疾患に適したヘルスケア食品療法を提供する。

本発明を、以下に詳しく記載する。

本発明は、ヒマワリの葉由来の抽出物を含有する医薬組成物を提供し、医薬組成物が、ヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物を含有し、総フラボノイドの含量が、５０〜９９％である。本医薬組成物はまた、ヒマワリの葉由来の、総テルペンの抽出物及び総有機酸の抽出物の１種類又は２種類を含み得る。

本発明における、ヒマワリの葉由来の抽出物を含有する医薬組成物の場合、抽出物を調製する際の原料は、ヒマワリの頭花又は茎からも選択され得る。

種々の薬学的に許容される製剤は、種々の薬学的に許容されるアジュバントを、本発明におけるヒマワリの葉由来の抽出物を含有する医薬組成物に加えることによって製造される。製剤は、通常の錠剤（一般的な錠剤、腸溶性コーティング錠、フィルムコーティング錠、糖衣錠、エキス錠、分散錠、スクラッチ錠、チュアブル錠、トローチ剤、舌下錠及び経口発泡錠）、通常のカプセル剤（硬カプセル剤、軟カプセル剤、丸薬カプセル剤及び腸溶性コーティングカプセル剤）；徐放性錠剤、徐放性コーティング錠、制御放出性錠剤（速放性錠剤等）、徐放性カプセル剤、制御放出性カプセル剤を含む徐放性及び／又は制御放出性製剤；経口液剤、経口懸濁剤、経口乳剤、経口糊製剤、経口液剤、乳化液、乳剤製剤、コロイド溶液、合剤、チンキ剤、ドロップ剤、懸濁液ドロップ剤、煎剤を含む経口液体製剤；ペレット剤及びドロップ丸剤を含む丸剤；糖衣顆粒剤、非糖衣顆粒剤、腸溶性コーティング顆粒剤、経口懸濁剤用の顆粒剤及び経口散剤を含む顆粒剤；液体注射剤及び粉末注射剤を含む注射剤を含む。

本発明における医薬組成物は、以下の技術的解決法：
（１）ヒマワリの葉を、溶媒として水又はエタノール溶液（１０〜９５％、ｖ／ｖ）を用いて抽出し、抽出物溶液を０．５〜２ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮するステップ；
（２）医薬液を、マクロポーラス吸着樹脂カラムに通し、水を用いて溶出し、次いで、５％〜９５％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を用いて勾配溶出を行い、エタノール溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総フラボノイドの抽出物を得るステップ
に従って調製される、ヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物を含む。

ヒマワリの葉からの総フラボノイドの抽出において、１０％〜７０％（ｖ／ｖ）エタノール溶液が、マクロポーラス樹脂上で勾配溶出を行う際に使用される。

医薬組成物におけるヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物の調製において、ヒマワリの葉中の総フラボノイドの含量が、０．５〜２５％である。

医薬組成物におけるヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物が、ネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、スダキチン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８，３’−トリメトキシフラボン）、スダキチンデメトキシ（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８−ジメトキシフラボン）、ヒメノキシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，３’，４’−テトラメトキシフラボン）、ヒスピズリン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６−メトキシフラボン）、アセロシン（５，７，３’−トリヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、７，４’−ジヒドロキシフラボン及び他の１０種類を超えるフラボノイドを主に含み、総フラボノイドの抽出物中のネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）の含量が、２０〜６０重量％である。

上記フラボノイドは、以下の構造式（Ｉ）

（Ｉ）

［式中、Ｒ１は、ＯＭｅ、ＯＨを表し；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＭｅ、ＯＨを表し；
Ｒ３は、ＯＭｅ、Ｈを表し；
Ｒ４は、ＯＨを表し；
Ｒ５は、ＯＭｅ、Ｈを表し；
Ｒ６は、ＯＨ、Ｈを表す］
を有し；
Ｒ１＝ＯＭｅ、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ＯＭｅ、Ｒ４＝ＯＨ、Ｒ５＝ＯＭｅ、Ｒ６＝ＯＨの場合、式（Ｉ）は、ネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）を表し；
Ｒ１＝ＯＨ、Ｒ２＝ＯＭｅ、Ｒ３＝ＯＭｅ、Ｒ４＝ＯＨ、Ｒ５＝ＯＭｅ、Ｒ６＝ＯＨの場合、式（Ｉ）は、スダキチン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８，３’−トリメトキシフラボン）を表し；
Ｒ１＝ＯＨ、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ＯＭｅ、Ｒ４＝ＯＨ、Ｒ５＝ＯＭｅ、Ｒ６＝ＯＨの場合、式（Ｉ）は、スダキチンデメトキシ（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８−ジメトキシフラボン）を表し；
Ｒ１＝ＯＭｅ、Ｒ２＝ＯＭｅ、Ｒ３＝ＯＭｅ、Ｒ４＝ＯＨ、Ｒ５＝ＯＭｅ、Ｒ６＝ＯＨの場合、式（Ｉ）は、ヒメノキシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，３’，４’−テトラメトキシフラボン）を表し；
Ｒ１＝ＯＨ、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｈ、Ｒ４＝ＯＨ、Ｒ５＝ＯＭｅ、Ｒ６＝ＯＨの場合、式（Ｉ）は、ヒスピズリン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６−メトキシフラボン）を表し；
Ｒ１＝ＯＭｅ、Ｒ２＝ＯＨ、Ｒ３＝ＯＭｅ、Ｒ４＝ＯＨ、Ｒ５＝ＯＭｅ、Ｒ６＝ＯＨの場合、式（Ｉ）は、アセロシン（５，７，３’−トリヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）を表し；
Ｒ１＝ＯＨ、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｈ、Ｒ４＝ＯＨ、Ｒ５＝Ｈ、Ｒ６＝Ｈの場合、式（Ｉ）は、７，４’−ジヒドロキシフラボンを表す。

総フラボノイドの抽出物中のネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）の含量が、０．５〜６０重量％である。

本発明における医薬組成物はまた、ヒマワリの葉由来の、総テルペンの抽出物及び総有機酸の抽出物の１種類又は２種類を含有してもよく、ヒマワリの葉由来の総テルペンの抽出物が、以下の通りに調製される：ヒマワリの葉を、溶媒として水又はエタノール溶液（１０〜９５％、ｖ／ｖ）を用いて抽出し、抽出物溶液を０．５〜２ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮し、医薬液を有機溶媒によって抽出し、抽出液を合わせ、濃縮し、水に溶解させ、ポリアミドカラムに通し、５〜９５％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を用いて勾配溶出処理を行い、溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総テルペンの抽出物を得る。ヒマワリの葉由来の総有機酸の抽出物が、以下のステップ：総フラボノイドの抽出物を調製するステップ（２）におけるマクロポーラス吸着樹脂の流出液及び水溶離液を合わせ、陰イオン交換樹脂に通し、アンモニア性エタノールを用いて溶出し、溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総有機酸の抽出物を得るステップにより調製される。

ヒマワリの葉からの総テルペンの抽出において、抽出液を濃縮し、ポリアミドカラムに通し、１０％〜７０％（ｖ／ｖ）エタノール溶液が、勾配溶出を行う際に使用される。

ヒマワリの葉由来の総テルペンの抽出物の調製において、ヒマワリの葉中の総テルペンの含量が、３〜２０重量％である。

医薬組成物におけるヒマワリの葉の総テルペンの抽出物が、セスキテルペノイド及びセスキテルペンラクトン、例えば、グアイアノリド、ゲルマクラノリド（Garmacranolide）、ヘリアンゴリド及びオイデスマン（Edudesmane）；テルペンチンアルキル及びカウラン等のジテルペン及びジテルペン酸；並びにオレアノール酸サポニン及び転位テルペンチン（転位３，４−セコ−チルカラン型トリテルペノイド）等のトリテルペンを主に含む。

本発明における医薬組成物はまた、ヒマワリの葉由来の総有機酸の抽出物を含み得る。ヒマワリの葉由来の総有機酸の抽出物の調製において、ヒマワリの葉中の総有機酸の含量が、２％〜２５重量％である。

医薬組成物におけるヒマワリの葉由来の総有機酸の抽出物が、クロロゲン酸、クエン酸、リンゴ酸及びフマル酸を主に含み、総有機酸の抽出物中のクロロゲン酸の含量が、１０〜６０重量％である。

高血圧疾患の予防及び治療における医薬品を調製するための、ヒマワリの抽出物を含有する医薬組成物の使用も、本発明において提供される。

血圧の低下を補助する食品及び機能性食品を調製するための、ヒマワリの抽出物を含有する医薬組成物の使用も、本発明において提供される。

臨床では、本発明におけるヒマワリの抽出物を含有する医薬組成物の投与量は、１回当たり０．３〜０．８ｇを、１日３回であり得る。

総フラボノイドの含量が５０％を超える有効な総フラボノイド成分を有する、抗高血圧活性を有するヒマワリの葉の抽出物が、生物活性の指針の下で、探索、調査及び分離されており、その調製は容易であり、低コストであり、工業的な大規模プロセスに適している。さらに、有効な総テルペン成分の含量が５０％を超えるヒマワリの葉由来の総テルペンの抽出物及び有効な総有機酸成分の含量が５０％を超える総有機酸の抽出物が本発明において分離され、上記２種の抽出物の１種類又は２種類を総フラボノイド抽出物に加えると、得られる医薬組成物によって、有効な抗高血圧効果もまた示される。実験によると、ヒマワリの頭花及び茎も、ヒマワリの葉のものと同様のフラボノイド、テルペン及び有機酸を含有し、抽出、分離及び決定後の抽出物中のそれらの成分は、ヒマワリの葉の抽出物中の成分と基本的に同一である。したがって、本発明における、ヒマワリの葉の抽出物を含有する組成物について、抽出物を調製する際の原料は、ヒマワリの頭花又は茎からも選択され得る。本発明における、ヒマワリの葉由来の抽出物を含有する医薬組成物は、高血圧疾患を予防及び治療するための漢方薬を調製するため並びに血圧の低下を補助する食品又は機能性食品を調製するために使用することができ、しかも、品質管理され、有効な効果及び良好な安全性を有する。

腎血管性高血圧ラットに及ぼす血圧効果の試験によって判明したことだが、本発明における、ヒマワリの葉の抽出物を含有する医薬組成物を投与した後、収縮期血圧及び拡張期血圧は、有意に減少する（Ｐ＜０．０５）。この結果は、ヒマワリの葉由来の抽出物を含有する医薬組成物が、高血圧疾患を予防及び治療するための医薬品を調製する際の並びに血圧の低下を補助する食品又は機能性食品を調製する際の、活性成分として使用される可能性を喚起するものであり、したがってその薬学的使用及び食用での使用が実現される。

本発明の実施形態に従って、ヒマワリの葉から総フラボノイド及び総有機酸を抽出する調製方法を示す図である。本発明の実施形態に従って、ヒマワリの葉から総テルペンを抽出する調製方法を示す図である。

さらなる説明が、以下の実施形態と組み合わせて詳述されるが、これらの実施形態は、本発明を説明するためだけのものであり、本発明の範囲が、これらの実施形態によって限定されるものでないことを理解されたい。

本発明において、言及されているが詳述されていない方法、プロセス、デバイス、装置、材料等について、当業者は、当技術分野においてよく知られている方法、プロセス、デバイス、装置、材料等又は当技術分野における従来の知識及び技術を使用して利用可能であることを理解されたい。

以下において、ヒマワリの葉の抽出物を含有する医薬組成物の調製方法及び医薬組成物の生物活性についての実施形態を詳しく説明する。

ヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物の調製
図１に表されているフローチャートに従って、ヒマワリの葉２０ｋｇ及び１２倍の８０％エタノール溶液を抽出槽に加え、ヒマワリの葉を２回、毎回１時間抽出し、抽出物溶液を合わせ、ろ過し、１ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮した。医薬液を、ＡＤＳ−１７型マクロポーラス吸着樹脂カラム（Anhui Sanxing Resin Technology Company Limited社製）に通し、３ｂｖの水を用いて溶出し、次いで、３ｂｖの１０％エタノール溶液及び３ｂｖの３０％エタノール溶液を用いて溶出し、エタノール溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、０．３２ｋｇの総フラボノイドの抽出物を得た。

ＵＶ分光光度法によって決定したところ、総フラボノイドのこの抽出物中の総フラボノイドの含量は、５２．２％であり、総フラボノイドは、ネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、スダキチン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８，３’−トリメトキシフラボン）、スダキチンデメトキシ（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８−ジメトキシフラボン）、ヒメノキシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，３’，４’−テトラメトキシフラボン）、ヒスピズリン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６−メトキシフラボン）、アセロシン（５，７，３’−トリヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、７，４’−ジヒドロキシフラボン及び他の１０種類を超えるフラボノイドを含み、総フラボノイドの抽出物中のネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）の含量は、１．８重量％である。

ヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物の調製
図１に表されているフローチャートに従って、ヒマワリの葉２０ｋｇ及び１２倍の５０％エタノール溶液を抽出槽に加え、ヒマワリの葉を２時間抽出し、残渣にさらに１０倍の５０％エタノール溶液を加えた後、残渣を１時間抽出し、抽出物溶液を合わせ、ろ過し、０．８ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮した。医薬液を、ＡＤＳ−Ｆ８型マクロポーラス吸着樹脂カラム（Chemical Factory of Nankai University製）に通し、３ｂｖの水を用いて溶出し、次いで、３ｂｖの１０％エタノール溶液及び３ｂｖの７０％エタノール溶液を用いて溶出し、エタノール溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、０．２９ｋｇの総フラボノイドの抽出物を得た。

ＵＶ分光光度法によって決定したところ、総フラボノイドのこの抽出物中の総フラボノイドの含量は、６３．２％であり、総フラボノイドは、ネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、スダキチン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８，３’−トリメトキシフラボン）、スダキチンデメトキシ（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８−ジメトキシフラボン）、ヒメノキシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，３’，４’−テトラメトキシフラボン）、ヒスピズリン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６−メトキシフラボン）、アセロシン（５，７，３’−トリヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、７，４’−ジヒドロキシフラボン及び他の１０種類を超えるフラボノイドを含み、総フラボノイドの抽出物中のネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）の含量は、２８．６重量％である。

ヒマワリの頭花由来の総フラボノイドの抽出物の調製
図１に表されているフローチャートに従って、ヒマワリの頭花２０ｋｇ及び１０倍の５０％エタノール溶液を抽出槽に加え、ヒマワリの頭花を２時間抽出し、残渣にさらに１０倍の５０％エタノール溶液を加えた後、残渣を１時間抽出し、抽出物溶液を合わせ、ろ過し、０．８ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮した。医薬液を、ＬＳ−３００型マクロポーラス吸着樹脂カラム（Xi'an Lanshen Resin Limited Company社製）に通し、３ｂｖの水を用いて溶出し、次いで、３ｂｖの１０％エタノール溶液及び３ｂｖの７０％エタノール溶液を用いて溶出し、７０％エタノール溶液の溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、０．２１ｋｇの総フラボノイドの抽出物を得た。

ＵＶ分光光度法によって決定したところ、総フラボノイドのこの抽出物中の総フラボノイドの含量は、５８．４％であり、総フラボノイドは、ネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、スダキチン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８，３’−トリメトキシフラボン）、スダキチンデメトキシ（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８−ジメトキシフラボン）、ヒメノキシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，３’，４’−テトラメトキシフラボン）、ヒスピズリン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６−メトキシフラボン）、アセロシン（５，７，３’−トリヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、７，４’−ジヒドロキシフラボン及び他の１０種類を超えるフラボノイドを含み、総フラボノイドの抽出物中のネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）の含量は、１９．６重量％である。

ヒマワリの茎由来の総フラボノイドの抽出物の調製
図１に表されているフローチャートに従って、ヒマワリの茎２０ｋｇ及び１０倍の９０％エタノール溶液を抽出槽に加え、ヒマワリの茎を２時間抽出し、残渣にさらに１０倍の５０％エタノール溶液を加えた後、残渣を１時間抽出し、抽出物溶液を合わせ、ろ過し、０．８ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮した。医薬液を、ＬＳ−３００型マクロポーラス吸着樹脂カラム（Xi'an Lanshen Resin Limited Company社製）に通し、３ｂｖの水を用いて溶出し、次いで、３ｂｖの１０％エタノール溶液及び３ｂｖの５０％エタノール溶液を用いて溶出し、５０％エタノール溶液の溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、０．１６ｋｇの総フラボノイドの抽出物を得た。

ＵＶ分光光度法によって決定したところ、総フラボノイドのこの抽出物中の総フラボノイドの含量は、５１．４％であり、総フラボノイドは、ネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、スダキチン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８，３’−トリメトキシフラボン）、スダキチンデメトキシ（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８−ジメトキシフラボン）、ヒメノキシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，３’，４’−テトラメトキシフラボン）、ヒスピズリン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６−メトキシフラボン）、アセロシン（５，７，３’−トリヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、７，４’−ジヒドロキシフラボン及び他の１０種類を超えるフラボノイドを含み、総フラボノイドの抽出物中のネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）の含量は、１０．６重量％である。

ヒマワリの葉由来の総テルペンの抽出物の調製
図２に表されているフローチャートに従って、ヒマワリの葉４０ｋｇを抽出槽に加え、７０％エタノール溶液を用いて、ヒマワリの葉を２回抽出し、７０％エタノール溶液の量は、１回当たり１２倍であり、毎回の抽出時間は２時間であった。抽出物溶液を合わせ、ろ過し、１ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮した。医薬液を、同量のクロロホルムによって５回抽出し、抽出液を合わせ、濃縮し、ポリアミドカラムに通し、１ｂｖの水を用いて溶出し、次いで、３ｂｖの３０％エタノール溶液及び２ｂｖの７０％エタノール溶液を用いて溶出し、溶離液を合わせ、濃縮し、乾燥させて、０．５１ｋｇの総テルペンの抽出物を得た。

ＵＶ分光光度法によって決定したところ、総テルペンのこの抽出物中の総テルペンの含量は、５１．４％である。

ヒマワリの茎由来の総テルペンの抽出物の調製
図２に表されているフローチャートに従って、ヒマワリの茎２５ｋｇを抽出槽に加え、３０％エタノール溶液を用いて、ヒマワリの茎を２回抽出し、３０％エタノール溶液の量は、１回当たり１２倍であり、毎回の抽出時間は２時間であった。抽出物溶液を合わせ、ろ過し、１ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮した。医薬液を、同量のクロロホルムによって５回抽出し、抽出液を合わせ、濃縮し、ポリアミドカラムに通し、１ｂｖの水を用いて溶出し、次いで、３ｂｖの３０％エタノール溶液及び２ｂｖの７０％エタノール溶液を用いて溶出し、溶離液を合わせ、濃縮し、乾燥させて、０．２１ｋｇの総テルペンの抽出物を得た。

ヒマワリの葉由来の総有機酸の抽出物の調製
ヒマワリの葉５０ｋｇを抽出槽に加え、３０％エタノール溶液を用いて、ヒマワリの葉を２回抽出し、３０％エタノール溶液の量は、１回当たり１０倍であり、毎回の抽出時間は２時間であった。抽出物溶液を合わせ、ろ過し、１ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮した。医薬液を、ＡＢ−８型マクロポーラス吸着樹脂カラム（Anhui Sanxing Resin Technology Company Limited社製）に通し、３ｂｖの水を用いて溶出し、マクロポーラス吸着樹脂の流出液及び水溶離液を合わせ、２０１Ｘ７強塩基性スチレン型陰イオン交換樹脂（Beijing Research Institute of Chemical Engineering and Metallurgy社製）に通し、４ｂｖの２０％アンモニア性エタノールを用いて溶出し、溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、０．６２ｋｇの総有機酸の抽出物を得た。

ＵＶ分光光度法によって決定したところ、総有機酸のこの抽出物中の総有機酸の含量は、６１．７％である。

ヒマワリの頭花の総有機酸の抽出物の調製
ヒマワリの頭花３０ｋｇを抽出槽に加え、８０％エタノール溶液を用いて、ヒマワリの頭花を２回抽出し、８０％エタノール溶液の量は、１回当たり１０倍であり、毎回の抽出時間は２時間であった。抽出物溶液を合わせ、ろ過し、１ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮した。医薬液を、ＡＢ−８型マクロポーラス吸着樹脂カラム（Anhui Sanxing Resin Technology Company Limited社製）に通し、３ｂｖの水を用いて溶出し、マクロポーラス吸着樹脂の流出液及び水溶離液を合わせ、２０１Ｘ７強塩基性スチレン型陰イオン交換樹脂（Beijing Research Institute of Chemical Engineering and Metallurgy社製）に通し、４ｂｖの２０％アンモニア性エタノールを用いて溶出し、溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、０．４２ｋｇの総有機酸の抽出物を得た。

ヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物中の総フラボノイドの含量の決定
ＵＶ分光光度法を使用して、本発明における、総フラボノイドの抽出物中の総フラボノイドの含量を決定するステップは、以下の通りである。

１．対照溶液の調製
対照サンプルとして、ネバデンシン２ｍｇを正確に採り、１０ｍｌ容量フラスコ中に入れ、サンプルを溶解させるためのメタノールを印まで加えて振盪した。

２．標準曲線の作成
対照サンプルの０．１ｍｌ、０．２ｍｌ、０．３ｍｌ、０．４ｍｌ、０．５ｍｌ及び０．６ｍｌ溶液を正確に採り、それぞれ２５ｍｌ容量フラスコ中に入れ、それぞれに１％塩化アルミニウム水溶液５ｍｌを正確に加えて振盪し、次いで、１ｍｏｌ／Ｌ酢酸カリウム水溶液８ｍｌを正確に加えて振盪し、水を印まで加えて振盪した。ＵＶ−可視分光光度法（Chinese Pharmacopoeia, one appendix V A , 2005）に準拠して、ブランクとして関連試薬を使用し、上記サンプルについて、２２８ｎｍの波長での吸光度を測定し、次いで、縦軸に吸光度及び横軸に濃度を使用して、標準曲線を作成した。

３．決定
本発明における試験粉（power）３ｍｇを正確に採り、１０ｍｌ容量フラスコ中に入れ、７０％エタノール溶液８ｍｌを加え、超音波で３０分間処理し（１００Ｗ、４０ｋＨｚ）、冷却後、７０％エタノール溶液を印まで加え、振盪し、ろ過した。ろ過した溶液１．０ｍｌを正確に採り、２５ｍｌ容量フラスコ中に入れ、それぞれに１％塩化アルミニウム水溶液５ｍｌを正確に加えて振盪し、次いで、１ｍｏｌ／Ｌ酢酸ナトリウム水溶液８ｍｌを正確に加えて振盪し、水を印まで加えて振盪した。ＵＶ−可視分光光度法（Chinese Pharmacopoeia, one appendix V A , 2005）に準拠して、ブランクとして関連試薬を使用し、上記サンプルについて、２２８ｎｍの波長での吸光度を測定し、次いで、試験サンプル中のネバデンシンの量を標準曲線から読み取り、計算して、サンプル１ｇは、ネバデンシンを基準として総フラボノイド６２０ｍｇを含有することが分かった。

ヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物中のネバデンシンの含量の決定
高速液体クロマトグラフィーを使用して、本発明における、総フラボノイドの抽出物中のネバデンシンの含量を決定するステップは、以下の通りである。

１．クロマトグラフ条件及びシステムの適合性の実験
オクタデシル結合シリカを充填剤とし、アセトニトリル−０．４％クエン酸アンモニウム（４０：６０）が移動相であり、検出波長は２８４ｎｍである。

２．対照サンプルの溶液の調製
対照サンプルとして、適正な量のネバデンシンを正確に採り、メタノールを加えて、５０μｇ／ｍｌの濃度を有する溶液を得た。

３．試験サンプルの溶液の調製
本発明における試験粉１５ｍｇを正確に採り、１０ｍｌ容量フラスコ中に入れ、７０％エタノール溶液８ｍｌを加え、超音波で３０分間処理し（１００Ｗ、４０ｋＨｚ）、冷却後、７０％エタノール溶液を印まで加え、振盪し、ろ過した。

４．決定
対照サンプルの溶液１０μｌ及び試験サンプルの溶液１０μｌを、それぞれ正確に採り、溶液を液体クロマトグラフに注入して決定した。ネバデンシン２０ｍｇが、本発明の試験粉１ｇ中に含有されていた。

ヒマワリの葉由来の総テルペンの抽出物中の総テルペンの含量の決定
ＵＶ分光光度法を使用して、本発明における、総テルペンの抽出物中の総テルペンの含量を決定するステップは、以下の通りである。

１．対照サンプル溶液の調製
対照サンプルとして、パナキサジオール２ｍｇを正確に採り、５ｍｌ容量フラスコ中に入れ、サンプルを溶解させるためのメタノールを印まで加えて振盪した。

２．標準曲線の作成
対照サンプルの０．１ｍｌ、０．２ｍｌ、０．３ｍｌ、０．４ｍｌ、０．５ｍｌ及び０．６ｍｌ溶液を正確に採り、それぞれ２５ｍｌ容量フラスコ中に入れ、それぞれにバニリンの新鮮な５％酢酸溶液０．２ｍｌ及び過塩素酸０．８ｍｌを正確に加えて振盪し、７０℃で１５分間加熱し、振盪し、次いで、酢酸を印まで加えて振盪した。ＵＶ−可視分光光度法（Chinese Pharmacopoeia, one appendix V A , 2005）に準拠して、ブランクとして関連試薬を使用し、上記サンプルについて、５５０ｎｍの波長での吸光度を測定し、次いで、縦軸に吸光度及び横軸に濃度を使用して、標準曲線を作成した。

３．決定
本発明における試験粉３ｍｇを正確に採り、１０ｍｌ容量フラスコ中に入れ、７０％エタノール溶液８ｍｌを加え、超音波で３０分間処理し（１００Ｗ、４０ｋＨｚ）、冷却後、７０％エタノール溶液を印まで加え、振盪し、ろ過した。ろ過した溶液１．０ｍｌを正確に採り、２５ｍｌ容量フラスコ中に入れ、それぞれにバニリンの新鮮な５％酢酸溶液０．２ｍｌ及び過塩素酸０．８ｍｌを正確に加えて振盪し、７０℃で１５分間加熱し、振盪し、次いで、酢酸を印まで加えて振盪した。ＵＶ−可視分光光度法（Chinese Pharmacopoeia, one appendix V A , 2005）に準拠して、ブランクとして関連試薬を使用し、上記サンプルについて、５５０ｎｍの波長での吸光度を測定し、次いで、試験サンプル中のパナキサジオールの量を標準曲線から読み取り、計算して、サンプル１ｇは、パナキサジオールを基準として総テルペン５６０ｍｇを含有することが分かった。

ヒマワリの葉由来の総有機酸の抽出物中の総有機酸の含量の決定
ＵＶ分光光度法を使用して、本発明における、総有機酸の抽出物中の総有機酸の含量を決定するステップは、以下の通りである。

１．対照サンプルの溶液の調製
対照サンプルとして、クロロゲン酸２ｍｇを正確に採り、５ｍｌ容量フラスコ中に入れ、サンプルを溶解させるためのメタノールを印まで加えて振盪した。

２．標準曲線の作成
対照サンプルの０．１ｍｌ、０．２ｍｌ、０．３ｍｌ、０．４ｍｌ、０．５ｍｌ及び０．６ｍｌ溶液を正確に採り、それぞれ２５ｍｌ容量フラスコ中に入れ、それぞれに新鮮なフロログルシノール溶液０．８ｍｌを正確に加えて振盪し、沸騰浴で４０分間加熱し、振盪し、次いで、冷却後、酢酸を印まで加えて振盪した。ＵＶ−可視分光光度法（Chinese Pharmacopoeia, one appendix V A , 2005）に準拠して、ブランクとして関連試薬を使用し、上記サンプルについて、４４３ｎｍの波長での吸光度を測定し、次いで、縦軸に吸光度及び横軸に濃度を使用して、標準曲線を作成した。

３．決定
本発明における試験粉３ｍｇを正確に採り、１０ｍｌ容量フラスコ中に入れ、７０％エタノール溶液８ｍｌを加え、超音波で３０分間処理し（１００Ｗ、４０ｋＨｚ）、冷却後、７０％エタノール溶液を印まで加え、振盪し、ろ過した。ろ過した溶液１．０ｍｌを正確に採り、２５ｍｌ容量フラスコ中に入れ、それぞれに新鮮なフロログルシノール溶液０．８ｍｌを正確に加えて振盪し、沸騰浴で４０分間加熱し、振盪し、次いで、冷却後、酢酸を印まで加えて振盪した。ＵＶ−可視分光光度法（Chinese Pharmacopoeia, one appendix V A , 2005）に準拠して、ブランクとして関連試薬を使用し、上記サンプルについて、４４３ｎｍの波長での吸光度を測定し、次いで、試験サンプル中のクロロゲン酸の量を標準曲線から読み取り、計算して、サンプル１ｇは、クロロゲン酸を基準として総有機酸５６０ｍｇを含有することが分かった。

腎血管性高血圧ラットに対するヒマワリの葉由来の抽出物を含有する医薬組成物の抗高血圧効果
腎血管性高血圧ラットに及ぼす抗高血圧効果の試験によって判明したことだが、ヒマワリの葉の抽出物を含有する医薬組成物は、抗高血圧活性を示す。

１．試験材料
抗高血圧性サンプル１（ヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物、ヒマワリの葉の総フラボノイドの含量は６３．２％であり、人への投与量は、０．２５ｇ／人／日である）、褐色粉末。
抗高血圧性サンプル２（ヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物及び総有機酸の抽出物の混合物（１：０．８）、人への投与量は、０．３５ｇ／人／日である）、暗褐色粉末。
抗高血圧性サンプル３（ヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物及び総テルペンの抽出物の混合物（１：０．６）、人への投与量は、０．４０ｇ／人／日である）、暗褐色粉末。
抗高血圧性サンプル４（ヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物、総テルペンの抽出物及び総有機酸の抽出物の混合物（１：０．８：０．６）、人への投与量は、０．５ｇ／人／日である）、暗褐色粉末。
陽性対照サンプル：Compound Kendir Leaves I（人には丸剤６個／日）、丸剤１００個／瓶。

２．実験動物及び機器
腎血管性高血圧ラット２５匹、クリーングレード、体重３５７±４２ｇ、Shandong Lukang Pharmaceutical Co., Ltd.社製、認可番号：ＳＣＸＫＬｕ２００８０００２。
主要機器：非観血的尾動脈血圧測定及び分析システム、ＡＬＣ−ＮＩＢＰ型、Shanghai Alcott Biotech. Co., Ltd.社製。

３．試験方法
腎血管性高血圧ラット２５匹を、無作為に５群、すなわち、抗高血圧性サンプル１、１００ｍｇ／ｋｇの群、抗高血圧性サンプル２、１５０ｍｇ／ｋｇの群、抗高血圧性サンプル３、５０ｍｇ／ｋｇの群、抗高血圧性サンプル４、２００ｍｇ／ｋｇの群、陽性対照Compound Kendir Leaves I、丸剤３個／ｋｇの群に分け、すべての群はラット５匹を有した。薬物評価前としてのラットの血圧を、医薬投与前に、非観血的尾動脈血圧測定及び分析システムによって決定した。次いで、１回胃内投与を行い、各処置群に、異なる濃度を有する薬液を、ラット２００ｇ当たり２ｍｌとして投与した。ラットの尾動脈血圧の変化を、医薬投与から２．０時間後に、非観血的尾動脈血圧測定及び分析システムによって決定した。

４．統計及び結果
実験データを、平均値±標準偏差（Ｘ±ｓ）として表した。それら自体の前後は、統計解析のｔ−検定を使用して比較した。

５．結果を表１にまとめた。

結果は、抗高血圧性サンプル１及び３が、腎血管性高血圧ラットの拡張期血圧及び平均動脈圧に対する抗高血圧活性を明らかに示し、統計上、収縮期血圧に対する有意な効果は存在しなかったが、血圧は減少傾向を示した。抗高血圧性サンプル２及び４は両方とも、腎血管性高血圧ラットの血圧に対する抗高血圧活性を明らかに示した。

ヒマワリの葉由来の抽出物を含有する医薬組成物の錠剤の調製
本発明の錠剤は、以下の通りに調製される。実施例１におけるヒマワリの葉の総フラボノイドの抽出物２０５ｇを採り、デンプン９５ｇを加え、混合し、造粒し、ふるい分けし、微結晶性セルロース２ｇ、ステアリン酸マグネシウム０．５ｇを加え、混合し、加圧して１０００個の丸剤にする。

ヒマワリの葉由来の抽出物を含有する医薬組成物の顆粒剤の調製
本発明の顆粒剤は、以下の通りに調製される。実施例１及び２における、ヒマワリの葉の総フラボノイド及び総有機酸の抽出物４０５ｇを採り、ラクトース２００ｇ、デキストリン４００ｇを加え、ペレット成形し、造粒し、ふるい分けして１０００ｇの顆粒剤にする。

ヒマワリの葉の総フラボノイドの抽出物を含有する錠剤を使用した、肝臓陽活動亢進及び本態性高血圧を有する患者に対する臨床的観察の試験
１．一般情報
患者４６例はすべて循環器科の患者であり、患者を無作為に実験群及び対照群に分けた。実験群は、患者２６例を有し、このうち男性１２例及び女性１４例、平均年齢は５５．１４±１１．４５歳であり、平均疾病期間は１０．８７±７．１３年であり；対照群は、患者２０例を有し、男性１１例及び女性９例、平均年齢は５５．９７±１０．８５歳であり、平均疾病期間は１１．４６±６．９８年であった。性別、年齢、疾病期間、治療前血圧値及び個々の症状に対する漢方薬の比較等において、２群間の有意差はなかった。（Ｐ＞０．０５）

２．治療方法
実験群に、ヒマワリの葉由来の総フラボノイドの抽出物の錠剤を、毎回丸剤２個ずつ、１日３回投与し；対照群に、Compound Kendir Leavesの錠剤を、毎回丸剤４個ずつ、１日３回投与した。２群両方の治療コースが４週であり、１コースの治療後に、血圧及び治療効果を収集して統計データとした。

３．評価基準
抗高血圧効果の評価基準：Chinese cardiovascular epidemiology and crowd prevention, 1979のフォーラムにおいて策定された基準を参照した；ＴＣＭ症状の評価基準：２００２年に中国衛生部によって公布された＜＜New Drugs of Traditional Chinese Drug Guidelines for Clinical Research＞＞の中の規定を参照した。

４．統計
リジットｔ検定の解析。

５．治療結果
（１）２群の抗高血圧効果及び程度を、表２〜４にまとめた。

リジットの解析、Ｐ＜０．０５によって、実験群の結果は、対照群のものに比べてより良好であった。

表２によると、実験群の２６例において、１０例が著効であり、１２例が有効であり、総有効率は８４．６％であり、これは、対照群のものに比べてより良好であり、リジットの解析によって、２群の効果間に有意差が存在した（Ｐ＜０．０５）。表３及び４によると、２群の治療前後の収縮期血圧及び拡張期血圧は、それぞれ自己比較して、有意差を示し（Ｐ＜０．０１）、治療後の実験群及び対照群の値の間でも、有意差（Ｐ＜０．０１）が存在した。

（２）ＴＣＭ症状の有効性：
目まい、頭痛、目まい及び筋伸張、首筋の痙攣、顔面紅潮及び眼の充血、動悸、胸部圧迫感、胸部痛、不眠並びに耳鳴り等の個々の症状に対する伝統的な漢方薬を改良することにおいて、実験群の結果は、対照群のものに比べて良好であった（神経過敏性及びかすみ目は除く）。有意差が、２群の値の間で存在した（Ｐ＜０．０５又はＰ＜０．０１）。結果は、本発明における、ヒマワリの葉の総フラボノイドの抽出物を含有する錠剤が、有効な抗高血圧活性を示すのみならず、症状を有意に改善し、治療中に副作用が見られないことを示した。

Claims

ヒマワリ（Helianthus annuus L.）の葉、頭花又は茎由来の総フラボノイドの抽出物を含み、該抽出物中の総フラボノイドの含量が５０％を超える、ヒマワリ抽出物を含有する医薬組成物であって、前記総フラボノイドの抽出物が、以下のステップにより調製される医薬組成物。
（１）ヒマワリの葉、頭花又は茎を、溶媒として水又はエタノール溶液（１０〜９５％、ｖ／ｖ）を用いて抽出し、抽出物溶液を０．５〜２ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮するステップ；
（２）ステップ（１）における前記医薬液を、マクロポーラス吸着樹脂カラムに通し、水を用いて溶出し、次いで、５〜９５％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を用いて勾配溶出を行い、エタノール溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、前記総フラボノイドの抽出物を得るステップ
総フラボノイドの抽出物が、ネバデンシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、スダキチン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８，３’−トリメトキシフラボン）、スダキチンデメトキシ（５，７，４’−トリヒドロキシ−６，８−ジメトキシフラボン）、ヒメノキシン（５，７−ジヒドロキシ−６，８，３’，４’−テトラメトキシフラボン）、ヒスピズリン（５，７，４’−トリヒドロキシ−６−メトキシフラボン）、アセロシン（５，７，３’−トリヒドロキシ−６，８，４’−トリメトキシフラボン）、及び７，４’−ジヒドロキシフラボンを主に含有する、請求項１に記載の医薬組成物。
総フラボノイドの抽出物中のネバデンシンの含量が、０．５〜６０重量％である、請求項２に記載の医薬組成物。
総フラボノイドの抽出物中のネバデンシンの含量が、２０〜６０重量％である、請求項３に記載の医薬組成物。
ヒマワリの葉、頭花又は茎由来の、総テルペンの含量が５０％を超える総テルペンの抽出物及び総有機酸の含量が５０％を超える総有機酸の抽出物の１種類又は２種類をさらに含む医薬組成物であって；総テルペンの前記抽出物が、セスキテルペノイド及びセスキテルペンラクトン；ジテルペン及びジテルペン酸；及びトリテルペンを主に含有し；総有機酸の前記抽出物が、クロロゲン酸、クエン酸、リンゴ酸及びフマル酸を主に含有する、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
セスキテルペノイド及びセスキテルペンラクトンが、グアイアノリド、ゲルマクラノリド（Garmacranolide）、ヘリアンゴリド若しくはオイデスマン（Edudesmane）であり；ジテルペン及びジテルペン酸が、テルペンチンアルキル若しくはカウランであり；及び／又は、トリテルペンが、オレアノール酸サポニン若しくは転位テルペンチン（転位３，４−セコ−チルカラン型トリテルペノイド）である、請求項５に記載の医薬組成物。
総有機酸の抽出物中のクロロゲン酸の含量が、１０〜６０重量％である、請求項５又は６に記載の医薬組成物。
マクロポーラス吸着樹脂カラムがＡＤＳ−１７型、ＡＤＳ−Ｆ８型又はＬＳ−３００型である、請求項１に記載の医薬組成物。
ステップ（２）において、勾配溶出が１０％〜７０％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を用いて行われる、請求項１に記載の医薬組成物。
総テルペンの抽出物が、以下のステップ、
（１）ヒマワリの葉、頭花又は茎を、溶媒として水又はエタノール溶液（１０〜９５％、ｖ／ｖ）を用いて抽出し、抽出物溶液を０．５〜２ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮するステップ；
（２）ステップ（１）における前記医薬液を、有機溶媒によって抽出し、抽出液を合わせ、濃縮し、水に溶解させ、ポリアミドカラムに通し、５〜９５％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を用いて勾配溶出処理を行い、溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総テルペンの前記抽出物を得るステップ
により調製される、請求項５又は６に記載の医薬組成物。
ステップ（２）において、有機溶媒がクロロホルムである、請求項１０に記載の医薬組成物。
ステップ（２）において、勾配溶出が１０％〜７０％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を用いて行われる、請求項１０に記載の医薬組成物。
総有機酸の抽出物が、以下のステップ、
（１）ヒマワリの葉、頭花又は茎を、溶媒として水又は１０〜９５％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を用いて抽出し、抽出物溶液を０．５〜２ｇ／ｍｌの医薬液に濃縮するステップ；
（２）ステップ（１）における前記医薬液をマクロポーラス吸着樹脂カラムに通し、水を用いて溶出し、マクロポーラス吸着樹脂の流出液及び水溶離液を合わせ、陰イオン交換樹脂に通し、アンモニア性エタノールを用いて溶出し、溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総有機酸の前記抽出物を得るステップ
により調製される、請求項５又は６に記載の医薬組成物。
マクロポーラス吸着樹脂カラムがＡＤＳ−１７型、ＡＤＳ−Ｆ８型、ＡＢ−８型又はＬＳ−３００型である、請求項１３に記載の医薬組成物。
陰イオン交換樹脂が２０１Ｘ７強塩基性スチレン型陰イオン交換樹脂である、請求項１３に記載の医薬組成物。
ヒマワリ（Helianthus annuus L.）から総フラボノイドの抽出物を抽出するステップを含み、ヒマワリから総フラボノイドの前記抽出物を抽出する前記ステップが、
ヒマワリの葉、頭花又は茎を、溶媒として水又はエタノール溶液を用いて抽出し、抽出物溶液を濃縮し、次いで、マクロポーラス吸着樹脂カラムに通し、水を用いて溶出し、次いで、エタノール溶液を用いて勾配溶出を行い、エタノール溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総フラボノイドの前記抽出物を得るステップである、請求項１〜１５のいずれかに記載の医薬組成物の調製方法。
ヒマワリから総テルペン及び／又は総有機酸の抽出物を抽出するステップをさらに含み、総テルペンの前記抽出物を抽出する前記ステップが、
ヒマワリの葉、頭花又は茎を、溶媒として水又はエタノール溶液を用いて抽出し、抽出物溶液を濃縮し、次いで、有機溶媒によって抽出し、抽出液を合わせ、濃縮し、水に溶解させ、ポリアミドカラムに通し、エタノール溶液を用いて勾配溶出処理を行い、溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総テルペンの前記抽出物を得るステップであり、
ヒマワリから総有機酸の前記抽出物を抽出する前記ステップが、
ヒマワリの葉、頭花又は茎を、溶媒として水又はエタノール溶液を用いて抽出し、抽出物溶液を濃縮し、次いで、マクロポーラス吸着樹脂カラムに通し、水を用いて溶出し、マクロポーラス吸着樹脂の流出液及び水溶離液を合わせ、陰イオン交換樹脂に通し、アンモニア性エタノールを用いて溶出し、溶離液を回収し、濃縮し、乾燥させて、総有機酸の前記抽出物を得るステップである、請求項１６に記載の医薬組成物の調製方法。
請求項１〜１５のいずれかに記載の医薬組成物並びに薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤を含有する医薬調製物。
医薬調製物の製剤が、通常の錠剤（一般的な錠剤、腸溶性コーティング錠、フィルムコーティング錠、糖衣錠、エキス錠、分散錠、スクラッチ錠、チュアブル錠、トローチ剤、舌下錠及び経口発泡錠）、通常のカプセル剤（硬カプセル剤、軟カプセル剤、丸薬カプセル剤及び腸溶性コーティングカプセル剤）；徐放性錠剤、徐放性コーティング錠剤、制御放出性錠剤（速放性錠剤を含む）、徐放性カプセル剤及び制御放出性カプセル剤を含む徐放性及び／又は制御放出性製剤；経口液剤、経口懸濁剤、経口乳剤、経口糊製剤、経口液剤、乳化液、乳剤製剤、コロイド溶液、合剤、チンキ剤、ドロップ剤、懸濁液ドロップ剤及び煎剤を含む経口液体製剤；ペレット剤及びドロップ丸剤を含む丸剤；糖衣顆粒剤、非糖衣顆粒剤、腸溶性コーティング顆粒剤、経口懸濁剤用の顆粒剤及び経口散剤を含む顆粒剤；液体注射剤及び粉末注射剤を含む注射剤を含む、請求項１８に記載の医薬調製物。
高血圧疾患の予防及び治療における医薬品を調製するための並びに血圧の低下を補助する食品及び機能性食品を調製するための、請求項１〜１５のいずれかに記載の医薬組成物又は請求項１８若しくは１９に記載の医薬調製物の使用。
請求項１〜１５のいずれかに記載の医薬組成物又は請求項１８若しくは１９に記載の医薬調製物を含む、高血圧疾患の予防又は治療剤。
請求項１〜１５のいずれかに記載の医薬組成物又は請求項１８若しくは１９に記載の医薬調製物を含有する、高血圧疾患に適したヘルスケア食品。