CN1475219A - 一种治疗心血管疾病的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种预防治疗心血管疾病的药物组合物，该组合物以黄芩甙及生理可接受盐为主要成分与药物可接受的赋形剂、载体或稀释剂配制成不同的药物剂型，它们具有升高高密度脂蛋白胆固醇，降低低密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯活性，可在预防治疗心血管疾病(例如：外周血管疾病、冠心病、中风疾病、动脉粥样硬化和血管再狭窄等)的药物中应用。

Description

一种治疗心血管疾病的药物组合物

技术领域

本发明涉及一种具有生物活性的药物组合物，更具体地说是具有升高高密度脂蛋白胆固醇，降低低密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯的活性在治疗心血管疾病药物中应用的黄酮类化合物的药物组合物。

背景技术

由血脂异常，如高低密度脂蛋白胆固醇血症、高甘油三酯血症、尤其低高密度脂蛋白胆固醇血症引起的血管疾病，如外周血管疾病、冠心病、中风疾病、血管再狭窄等血管疾病是中国和西方国家致死疾病中的头号杀手。在中国，冠心病、中风疾病、血管再狭窄等血管疾病发病率占总人口的4％以上，在美国为43％。该病最早的病因学原理起源于50、60年代，当时认为是体内过量的甘油三酯所致，所以第一代抗该类疾病药的主要机理是降血浆甘油三酯，其代表是Fibrate类药。进入70年代，科学家们发现，高血浆甘油三酯只是此类疾病形成的一个重要原因，并非主要病因。该病主要病因是高血清总胆固醇或高低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)(Gordon et al.1981；Stamler et al.1986；Pooling Project Research Group 1978；Anderson et al.1987)。流行病学调查揭示，血清总胆固醇每增加1％，冠心病危险因素增加2％(NCEPR 1991)。临床研究发现，降低血清胆固醇水平可以减少冠心病的发病率，阻滞此类疾病的发展(LPCP 1984；Frick 1987)。胆固醇不溶于水，它们必需与脂蛋白结合才能在血液里转运。人血液里有四种脂蛋白负责胆固醇的运载，它们是低密度脂蛋白(LDL)，高密度脂蛋白(HDL)，极低密度脂蛋白质(VLDL)和中间密度脂蛋白(IDL)。在正常人中，三分之二的总胆固醇由LDL运载。LDL携带内源或外源胆固醇，穿过血管壁，进入内皮下(subendothelium)。在内皮下，LDL胆固醇被氧化成氧化型LDL胆固醇(oxLDL)，并通过清道夫受体被巨噬细胞以胆固醇酯的形式在细胞内积聚。大量胆固醇酯积聚在巨噬细胞内形成了泡沫细胞，这些泡沫细胞沉积在血管内皮下，形成了血管壁硬化斑块核心。资料表明，由LDL运载的胆固醇是导致冠心病、中风疾病、血管再狭窄等血管病的主要根源(Goldstein 1989；Vega1986；Innerarity 1990；Rauth 1992)。所以LDL胆固醇被称为坏胆固醇。由高血清胆固醇引起的血管壁硬化斑块不但是冠心病的主要根源，同时也是脑血管疾病，如脑血栓形成和中风的重要病因。此外人脑细胞内积聚的高胆固醇酯还可能和老年性痴呆症的形成有关。体内胆固醇来源有内源和外源，外源胆固醇来自于饮食，内源胆固醇是自体合成的结果。内源胆固醇合成亢进和家族性高胆固醇血症在西方国家较为普遍，这种疾病必须通过药物控制。在美国，40％以上的成年人的LDL胆固醇(坏胆固醇)含量超过正常水平。由于胆固醇在形成心脑血管疾病中的重要作用，近十多年来，美国及欧洲制药公司都将抗冠心病、中风疾病、血管再狭窄等血管病药的研究和开发放到降低血清总胆固醇及LDL胆固醇上，这就形成了第二代抗心脑血管病治疗药。这些药中疗效最显著的有Merck药厂的Zocor和Wamer-Lambert/Parke-Davis 1997年上市的Lipitor。这些药的作用机理都是抑制人体胆固醇合成的关键酶HMG-辅酶A还原酶。虽然HMG-辅酶A还原酶抑制剂能显著地降低血清总胆固醇，阻止血管壁硬化形成与发展，从而降低心脑血管病发病和死亡，但它只能减少内源性胆固醇合成及降低家族性高胆固醇血症引起的冠心病的发展或恶化。对于治疗外源性胆固醇增多引起的心脑血管疾病，对于治疗低高密度脂蛋白引起的心脑血管疾病，对于消除已进入巨噬细胞内的内源和外源胆固醇和抑制由此导致的血管壁硬化斑块形成，对于去除血管壁硬化斑块中积聚的胆固醇，使硬化血管回复正常，则作用不大。

医学研究证明，巨噬细胞吞噬和积聚胆固醇，转换成泡沫细胞，沉积在血管壁内皮下是血管壁硬化斑块形成的基础。清除积聚在血管壁巨噬细胞/泡沫细胞内的胆固醇，将其转运到肝脏分解，是根治冠心病、中风疾病、血管再狭窄等血管病的最新的有效手段(Francis and Perry 1999；Duriez andFruchart 1999；Dansky et al.1999)，是单纯降低血清胆固醇所不能达到的。清除巨噬细胞/泡沫细胞及血管壁硬化斑块内胆固醇的唯一有效武器是HDL。近年来，西方制药公司及心血管疾病研究人员开始把研究方向放到另一类抗血管壁硬化斑块形成药，即升高密度脂蛋白(HDL)药上来。高密度脂蛋白(HDL)是另一重要的胆固醇载体，它在运载胆固醇方面的功能与LDL截然相反。HDL可以刺激血管内皮下巨噬细胞内胆固醇酯水解，并将水解的非酯化胆固醇从巨噬细胞内转运至肝脏分解。更为重要的是，HDL能刺激沉积于血管壁和血管壁硬化斑块中巨噬细胞/泡沫细胞和平滑肌细胞内胆固醇酯水解。非酯化胆固醇被HDL从泡沫细胞转运至肝脏分解(Alan et al.1996)，从而去除了血管壁硬化斑块赖以形成的基础，HDL的这一重要功能被称为胆固醇逆相转运(Reverse Cholesterol Transportation)。胆固醇逆相转运的结果是①抑制胆固醇酯在巨噬细胞内累积，阻止其转化为泡沫细胞，从而防止了血管壁硬化斑块的形成；②HDL转运血管壁硬化斑块内巨噬细胞/泡沫细胞和平滑肌细胞里胆固醇至肝脏分解，从而使硬化血管壁逐步回复正常。HDL的此二项功能一直是西方医学界在治疗冠心病、中风疾病、血管再狭窄等血管病中梦寐以求的效果。此外，HDL含有paraoxonase(PON)。PON可以抑制LDL氧化，防止LDL被巨噬细胞吞噬，产生泡沫细胞。HDL还可以刺激内皮细胞释放前列腺素(PI)，增加胆固醇酯水解和胆固醇转运出细胞。HDL的作用对象不分内源或外源胆固醇。基础及临床研究证实，每增加1mg/dl HDL胆固醇，冠心病死亡危险即下降2.5％(Alan etal.1996)，因此低血浆HDL是比高低血浆胆固醇(LDL)更重要的致冠心病的危险因子(Alan et al.1996)。升高血浆HDL就成为消除血管壁硬化斑块、治疗冠心病、中风疾病、血管再狭窄等血管病的重要手段。

发明内容

本发明目的是寻找一种具有升高高密度脂蛋白胆固醇、降低低密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯活性的黄酮衍生物组成的药物组合物。

本发明的另一目的是公开该药物组合物不同剂型的制备方法。

本发明所述的具有升高高密度脂蛋白胆固醇、降低低密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯活性的黄酮类衍生物为黄芩甙，它的具体化学结构如下：

黄芩甙(化合物I)及其生理可接受的盐采用激发人PPARα，通过PPARα调控激发人载脂蛋白AI(ApoAI)promotor的方法，调控提高人肝细胞ApoAI表达，激发人肝细胞ABCl基因，升高人肝细胞ApoAII表达，抑制人肝细胞ApoCIII表达，增加人肝脏细胞清道夫受体BI(SRBI)表达，I化合物并能通过激发人肝细胞肝X受体α(LXRα)的方法来达到调节血脂变化和治疗诸如外周血管疾病、冠心病、中风疾病和血管再狭窄等血管疾病的目的。

本发明应用上述化合物I进行调节大鼠血脂研究。

从西普尔-必凯实验动物有限公司(SIPPR/BK Ltd.)获得雄性清洁级Sprague-Dawley大鼠，体重在180-200g之间(动物合格证号：沪动合证字152号)，饲养于室温22-24℃，湿度50-70％，常压环境，自然昼夜。每笼3-4只大鼠，给予西普尔-必凯公司的基础大鼠饲料，自由进水(除菌纯净水)。预养一周后，下午(5:00-7:00)大鼠眼眶后采血，血样4℃放置30分钟后，在4℃环境中，5000转/分钟离心15分钟，取血清，4℃冰箱保存，次日送上海市临床检验中心测定血脂。根据血脂水平随机分组，15只/组，使每组动物达到均衡随机。每天上午6:00至8:00和下午4:00至6:00分别腹腔注射I(I溶于0.1N NaOH水溶液中，用0.1N HCL调至PH＝7.4(室温配制))，阴性对照组仅腹腔注射等容量的生理盐水(相当于体重0.5％)，同时设立gemfibrozil(100mg/kg/day)作为阳性对照组。gemfibrozil是国际医学界公认的有效调节血脂药，其主要作用在于降低血清甘油三酯。大鼠给药14天后，禁食12小时以上，于下午(5:00-7:00)眼眶后采血，按上述同样方法得血清，4℃冰箱保存，次日送上海市临床检验中心测定血脂。动物无痛苦(乙醚吸入法)处死后立即取肝，除去残血，称肝重和体重，计算肝重/体重比率。

血样分析血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸转移酶、门冬氨酸转移酶。给药前后各测定血样一次。由上海市临床检验中心用DAKE-RXL全自动生化分析仪测定血样品。使用试剂为原装定标液、质控、测试试剂盒(酶学法)。

I化合物给动物剂量为20，80，240mg/公斤体重/天，分两次给药，上下午各一次。能显著降低血清甘油三酯，降低程度随剂量升高而有下降，三个剂量的降低百分率分别为56％，49％，46％，远远高于阳性对照组gemfibrozil，阳性对照组gemfibrozil仅降低36％；I化合物能显著降低LDL-C，降低程度呈剂量依赖型，三个剂量的降低百分率分别为14％，14％，22％，阳性对照组gemfibrozil仅降低15％；I化合物能显著升高HDL-C，升高程度呈剂量依赖型，升高百分率分别为23％、30％、47％，而阳性对照组gemfibeozil则基本无升高HDL作用。I化合物能显著长高HDL-C/TC比值。I化合物80mg/公斤体重/天剂量升高LCAT活性，升高百分率达36.7％。I在显著调节血脂含量的同时，与阳性对照药gemfibrozil相比，它不增大肝脏/体重比系数，而gemfibrozil显著升高肝脏/体重比系数，即对肝脏无损伤功能。

以上这些血样分析数据显示I化合物具有重要的预防和治疗外周血管疾病、冠心病、中风疾病和血管再狭窄等血管疾病的作用。本发明的另一实施方案为治疗和预防外周血管疾病、冠心病、中风疾病和血管再狭窄等血管疾病。它包括对需要治疗的哺乳动物给予化合物I的有效剂量。有效剂量是指治疗或预防哺乳动物血管病所需要的剂量。该化合物通常以约50mg至2500mg/天给药，每天分一至四次给药。这些相同的剂量水平可用于血管疾病的治疗和预防，用于升HDL-C、降LDL-C和TG。

本发明含有有效量化合物I及生理可接受的盐与药物可接受的赋形剂、载体或稀释剂配制成不同的药物剂型，它可将化合物I及生理可接受的盐与口服制剂中的典型药物载体和赋形剂制成口服剂，药物载体和赋形剂包括乳糖；淀粉及其衍生物类如玉米淀粉、羧甲基淀粉钠等；纤维素衍生物，诸如甲基和乙基纤维素；明胶；无机类化合物如轻质氧化镁、滑石粉等；油，诸如植物油、芝麻油等；包合剂如β-环糊精；以及二元醇类如聚乙二醇。口服制剂的可做成片剂、胶囊、乳剂、溶液等，也可应用于固体分散片、脂质体制剂、靶向制剂和控释制剂等。典型的制剂所含与赋形剂或载体一起给药的化合物I及生理可接受的盐的重量大约为5-95重量份。可加入矫味剂，诸如柠檬香料等。用于治疗的剂量范围为黄芩甙每天0.2-2.5克。

用作口服的黄芩甙组合物为

      黄芩甙及生理可接受的盐          5-95重量份

      淀粉                            2-55重量份

      淀粉浆10％                      适量

      硬脂酸镁                        适量

      制成                            1000片

它的制备方法可将一定量的黄芩甙与淀粉混均，加淀粉糊继续搅拌制成软材，用尼龙筛制粒，干燥，干粒加入硬脂酸镁和淀粉，经筛，整粒均匀压片。

同样含有有效量的化合物I及生理可接受的盐与典型的药物可接受的赋形载体或稀释剂配制成注射剂包括等渗盐水、5％葡萄糖水溶液、注射用水、茶油、大豆油、麻油、乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、苯甲酸苄酯；吐温80、卵磷脂、脱氧胆酸钠、蛋黄磷脂、聚乙烯吡咯烷酮；醋酸、醋酸钠、枸橼酸及钠盐、乳酸、酒石酸及钠盐、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、碳酸氢钠和碳酸钠；明胶、羧甲基纤维素钠、果胶、山梨醇溶液；肌酐、甘氨酸；亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚磷酸钠、硫代硫酸钠、苯甲醇、对羟基苯甲酸丁酯及乙酯酚、三氯叔丁醇；利多卡因；脑磷脂、大豆磷脂等。注射制剂的典型形式为粉针剂、混悬型注射剂等，以便于肌肉内和静脉内给药。典型的制剂与所含赋形剂或载体一起给药的I的重量大约为5-95重量份。用治疗的剂量(有效剂量)范围为黄芩甙每天0.2-2.5克。

用作针剂的黄芩甙组合物为

          黄芩甙及生理可接受的盐     5-95重量份

          4％氢钠化钠溶液            800毫升

          3.65％盐酸水溶液           适量

          生理盐水加至               1000毫升

将一定量黄岑甙及生理可接受的盐，搅拌溶解于4％的氢氧化钠溶液中，待全部溶解后，搅拌下缓慢滴加3.65％盐酸水溶液，使PH调节至7.4，加生理盐水至1000毫升，过滤，分装，冷冻干燥，得冻干粉针剂。

应用含有效剂量的化合物I及生理可接受的盐与外用制剂中典型药物载体和赋形剂包括可可豆脂、半合成椰油酯、半合成山苍子油酯、半合成棕榈油酯、硬脂酸丙二醇酯、甘油明胶、聚乙二醇、聚氧乙烯、泊洛沙姆等；凡士林、石蜡、羊毛脂、蜂蜡、二甲基硅油等；甘油、丙二醇、山梨醇；月桂醇硫酸钠、聚乙二醇醚、硬脂酸；明胶、虫胶、阿拉伯胶、琼脂、淀粉、糊精、聚乙二醇、EVA等；聚山梨醇80、十二烷基硫酸钠、豆磷脂等；碳酸钙、二氧化硅、液体石蜡等。外用制剂可做成栓剂、膏剂、糊剂、膜剂、涂膜剂等。典型的制剂所含与赋形剂或载体一起给药的黄芩甙的重量大约为5％至约95％。用于治疗的剂量范围为黄芩甙每天200毫克至2500毫克。

用作栓剂的黄芩甙组合物为

          黄芩甙及生理可接受的盐        5-95重量份

          可可豆脂                      20-380重量份

          羊毛脂                        0.2-3.8重量份

          共制                          500枚

将一定量的可可豆脂在水浴上加热融化，将研细的黄岑甙及生理可接受的盐，加入到融化的可可豆脂基质中去，研磨均匀，保温灌模即得。本发明的具体有益效果：

1、本发明所述的药物组合物能清除积聚在血管壁巨噬细胞/泡沫细胞内的胆固醇，将其转运到肝脏分解，是治疗单纯降血清胆固醇所不能达到的，它是根治寇心疾病、中风疾病、降低血管粥样硬化等血管疾病的最有效手段。

2、本发明黄岑甙及生理可接受的盐本身能起到升高用HDL水平，而HDL的重要功能是胆固醇逆向转运，从而防止血管壁硬化斑块的形成。

3、由于HDL具有独特的转运血管壁硬化斑块内巨噬细胞/泡沫细胞和平滑肌细胞里胆固醇至肝脏分解的作用，从而使硬化血管壁逐步恢复正常。

实施方法

结合具本的实施例对本发明作进一步的详细描述，但不限制本发明。

实施例1

                 组分                    量

           黄芩甙及生理可接受的盐       6.9克

           4％氢氧化钠水溶液            800ml

           3.65％盐酸水溶液              适量

           生理盐水加至                1000ml

将6.9克黄芩甙搅拌下溶解于800毫升的氢氧化钠水溶液中，再在搅拌下缓慢加入3.65％盐酸水溶液调pH至7.4，加生理盐水至1000毫升，用0.45um、0.22um的滤膜过滤后灌装在7毫升的安培瓶中，-45度下冷冻干燥，即得冻干粉针。将此针用注射用水溶解后对成人肌注或静脉注射，一日两次，每次两针，每天剂量192毫克，可达到升HDL-C、降LDL-C和TG，从而可降低动脉粥样硬化程度。

实施例2

                    组分                    量

            黄芩甙及生理可接受的盐         27.5克

            4％氢氧化钠水溶液               800ml

            3.65％盐酸水溶液                 适量

            生理盐水加至                   1000ml

将27.5克黄芩甙搅拌下溶解于800毫升0.1mol/L的氢氧化钠水溶液中，再在搅拌下缓慢加入3.65％盐酸水溶液调pH至7.4，加生理盐水至1000毫升，用0.45um、0.22um的滤膜过滤后灌装在7毫升的安培瓶中，-45度下冷冻干燥，即得冻干粉针。将此针用注射用水溶解后对成人肌注或静脉注射，一日两次，每次两针，每天剂量768毫克，可达到升HDL-C、降LDL-C和TG，从而可降低动脉粥样硬化程度。

实施例3

                   组分                    量

           黄芩甙及生理可接受的盐        41.25克

           4％氢氧化钠水溶液               800ml

           3.65％盐酸水溶液                 适量

           生理盐水加至                   1000ml

将41.25克黄芩甙搅拌下溶解于800毫升的氢氧化钠水溶液中，再在搅拌下缓慢加入3.65％盐酸水溶液调pH至7.4，加生理盐水至1000毫升，用0.45um、0.22um的滤膜过滤后灌装在7毫升的安培瓶中，-45度下冷冻干燥，即得冻干粉针。将此针用注射用水溶解后对成人肌注或静脉注射，一日两次，每次两针，每天剂量1152毫克，可达到升HDL-C、降LDL-C和TG，从而可降低动脉粥样硬化程度。

实施例4

                   组分                 量

           黄芩甙及生理可接受的盐     61.88克

           4％氢氧化钠水溶液            800ml

           3.65％盐酸水溶液              适量

           生理盐水加至                1000ml

将61.88克黄芩甙搅拌下溶解于800毫升的氢氧化钠水溶液中，再在搅拌下缓慢加入3.65％盐酸水溶液调pH至7.4，加生理盐水至1000毫升，用0.45um、0.22um的滤膜过滤后灌装在7毫升的安培瓶中，-45度下冷冻干燥，即得冻干粉针。将此针用注射用水溶解后对成人肌注或静脉注射，一日两次，每次两针，每天剂量1728毫克，可达到升HDL-C、降LDL-C和TG，从而可降低动脉粥样硬化程度。

实施例5

                     组分                   量

              黄芩甙及生理可接受的盐      82.5克

              4％氢氧化钠水溶液            800ml

              3.65％盐酸水溶液              适量

              生理盐水加至                1000ml

将82.5克黄芩甙搅拌下溶解于800毫升的氢氧化钠水溶液中，再在搅拌下缓慢加入3.65％盐酸水溶液调pH至7.4，加生理盐水至1000毫升，用0.45um、0.22um的滤膜过滤后灌装在7毫升的安培瓶中，-45度下冷冻干燥，即得冻干粉针。将此针用注射用水溶解后对成人肌注或静脉注射，一日两次，每次两针，每天剂量2304毫克，可达到升HDL-C、降LDL-C和TG，从而可降低动脉粥样硬化程度。

实施例6

                      组分                 量

              黄芩甙及生理可接受的盐      27.5克

              羧甲基纤维素钠                  5g

              吐温80                         5ml

              注射用水加至                1000ml

将吐温80和羧甲基纤维素钠在室温下搅拌混匀溶解，高压灭菌，将27.5克无菌黄芩甙粉末溶解于1000毫升该溶液中，无菌条件下搅拌混匀，灌装在7毫升的安培瓶中，即得混悬型注射剂。此针剂一日两次，每次两针，每天剂量768毫克，可达到升HDL-C、降LDL-C和TG，从而可降低动脉粥样硬化程度。

实施例7

                   组分                 量

           黄芩甙及生进可接受的盐      250克

           淀粉                     143.75克

           淀粉浆(10％)                 25克

           硬脂酸镁                      9克

           共制                       1000片

将250克黄芩甙与118.75克淀粉混匀，加淀粉浆继续搅拌使成软材，用10目尼龙筛制粒，70度通风干燥，干粒加入硬脂酸镁和25克淀粉，经12目筛整粒，混匀，压片。成人服用此片，一日两次，每次4片，每天剂量2克，可降低动脉粥样硬化程度。

实施例8

                   组分                 量

           黄芩甙及生理可接受的盐      250克

           共制                       1000片

将250克黄芩甙及生理可接受的盐研细，过80目筛。取10％淀粉糊与黄芩甙混匀制成软材，经14目尼龙筛制粒，于70度干燥至水分在3％以下，装入胶囊。成人服用此胶囊，一日两次，每次4粒，每天剂量2克，可达到升HDL-C、降LDL-C和TG，从而可降低动脉粥样硬化程度。

实施例9

                    组分                 量

            黄芩甙及生理可接受的盐      200克

            可可豆脂                    800克

            羊毛脂                        8克

            共制                        500枚

将800克可可豆脂在水浴上加热融化，黄芩甙研细，加入上述融化的基质研磨均匀，保温灌模即得。成人使用此栓剂，一日一次，每次一枚，每天剂量2克，可达到升HDL-C、降LDL-C和TG，可达到升HDL-C、降LDL-C和TG，从而可降低动脉粥样硬化程度。

实施例10

                     组分               量

             黄芩甙及生理可接受的盐    250克

             淀粉                      250克

             凡士林                    500克

取凡士林加热融化，加入黄芩甙及生理可接受的盐，搅拌均匀，待温度降至50度以下时加入淀粉，搅拌均匀，冷凝即得。每天涂抹三次，可达到升HDL-C、降LDL-C和TG，从而降低动脉粥样硬化程度。

Claims (5)

1、一种治疗心血管疾病的药物组合物，其特征在于由含有有效量的黄芩甙及生理可接受的盐和赋形剂组成。

2、根据权利要求1所述的药物组合物其特征在于黄芩甙  及生理可接受的盐的有效剂量为0.2-2.5克。

3、根据权利要求1所述的药物组合物其特征在于当制备或口服片剂时它的组成成分为：

             黄芩甙及生理可接受的盐    5-95重量份

             淀粉                      2-55重量份

             淀粉浆10％                适量

             硬脂酸镁                  适量

             制成                      1000片

4、根据权利要求1所述的药物组合物其特征在于当制备成针剂时，它的组成成分为：

             黄芩甙及生理可接受的盐    5-95重量份

             4％氢钠化钠溶液           800毫升

             3.65％盐酸水溶液          适量

             生理盐水加至              1000毫升

5、根据权利要求1所述的药物组合物其特征在于当制备成栓剂时它的组成成分为：

             黄芩甙及生理可接受的盐    5-95重量份

             可可豆脂                  20-380重量份

             羊毛脂                    0.2-3.8重量份

             共制                      500枚