CN1456344A - 一种治疗咽喉炎的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种治疗咽喉炎的药物组合物，它包含下列成份及质量组分：金银花100～500份、菊花100～400份、胖大海50～200份以及桔梗100～400份、麦冬100～400份、玄参100～400份三种药材的水提取物。本发明的治疗咽喉炎的药物组合物能迅速缓解咽喉肿痛、干燥、灼热等症状，疗效快捷确切，对平素肺胃蕴热的易感人群，经常服用还能起到预防咽喉炎的作用。

Description

一种治疗咽喉炎的药物组合物及其制备方法

一、技术领域

本发明涉及动植物为原材料的药物组合物及其制备方法。

二、技术背景

咽喉炎表现为声音嘶哑，中医药理论认为：声音出于喉咙，喉咙与肺相通，肺呼吸之气贯喉咙而出声音，声音之强弱，与肺的关系最为密切，肺属金，若钟，肺气充实，则金钟之鸣声响亮，故有将声音嘶哑的病因、病机归纳为“金实不鸣，金破不鸣”。现代医学研究认为：咽炎是咽粘膜及粘膜下组织和淋巴组织的炎症，病因多为以溶血性链球菌为主的细菌感染和病毒感染，诱因多为全身抵抗力减弱、邻近器官病变，而喉炎是喉粘膜的炎症，常为上呼吸道感染的一部分，继发于咽炎，病毒、细菌感染是疾病的主要原因，受凉、疲劳、烟酒过度、发音不当等因素为本病的诱因。

咽喉炎是比较常见的疾病，特别是对广大教育工作者、声乐工作者、驾驶员以及平素有肺胃蕴热体质的人员，发病率有上升的趋势，因而治疗咽喉炎药物需求量较大。目前市场上治疗咽喉炎的中成药品种较少，且起效较慢，疗效不够确切，故急需研制一些高效和速效的治疗咽喉炎的药物。

三、发明内容

本发明的目的是提供一种治疗咽喉炎的高效、速效的药物组合物及其制剂。

本发明的技术方案如下：

一种治疗咽喉炎的药物组合物，它包含下列成份及质量组分：金银花100～500份、菊花100～400份、胖大海50～200份，以及桔梗100～400份、麦冬100～400份、玄参100～400份三种药材的水提取物。

上述的治疗咽喉炎的药物组合物，它还可以是包含桔梗、麦冬、玄参和质量组分的蝉蜕50～200份、或木蝴蝶50～200份、或甘草50～200份四种药材的水提取物。

上述的治疗咽喉炎的药物组合物，它还可以是包含桔梗、麦冬、玄参、蝉蜕和质量组分的甘草50～200份，或者包含桔梗、麦冬、玄参、木蝴蝶和质量组分的甘草50～200份，或者包含桔梗、麦冬、玄参、蝉蜕和质量组分的木蝴蝶50～200份五种药材的水提取物。

上述的治疗咽喉炎的药物组合物，它还可以是包含桔梗、麦冬、玄参、蝉蜕、甘草和质量组分的木蝴蝶50～200份六种药材的水提取物。

蝉蜕其功用是散风热、退目翳，宣肺透疹，主治外感。木蝴蝶也称“千张纸”、“玉蝴蝶”，它有清肺利咽，疏肝和胃的功用，主治肺热咳嗽、咽痛、音哑。甘草性平、味甘，它有缓中补虚，泻火解毒，调和诸药的功能，生用能治咽痛。因此加入这些药物能提高本发明药物组合物的疗效。

一种制备上述的治疗咽喉炎的药物组合物的方法，它由下列步骤组成：

步骤一、在处方质量组分的桔梗、麦冬和玄参中加入药材总质量4～12倍质量的水煎煮提取0.5～3小时，如此提取2～4次，合并水提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.05～1.20(50℃)的清膏，

步骤二、在步骤一所制得的清膏中加入乙醇，使乙醇含量达40～90％，搅匀，静置12～36小时，过滤，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10～1.30(50℃)的稠膏，

步骤三、取处方质量组分的金银花、菊花、胖大海粉碎成细粉，

步骤四、将步骤三所制得的细粉加入到步骤二所制得的稠膏中，混匀，制成颗粒，干燥，即得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。

上述药物组合物的制备方法，可以在步骤一中加入处方质量组分的蝉蜕、或木蝴蝶、或甘草，一起加水提取，制成清膏，然后按上述方法的步骤二至步骤四，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。

上述药物组合物的制备方法，可以在步骤一中加入处方质量组分的蝉蜕和木蝴蝶，或者蝉蜕和甘草，或者木蝴蝶和甘草，一起加水提取，制成清膏，然后按上述方法的步骤二至步骤四，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。

上述药物组合物的制备方法，可以在步骤一中加入处方质量组分的蝉蜕、木蝴蝶和甘草，一起加水提取，制成清膏，然后按上述方法的步骤二至步骤四，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。

一种治疗咽喉炎的药物组合物袋泡剂，它是将本发明的药物组合物颗粒，加矫味剂，混匀，装入纸袋中，制成的本发明的治疗咽喉炎的药物组合物袋泡剂。

一种治疗咽喉炎的药物组合物胶囊或片剂，它是将本发明的药物组合物颗粒与附加剂混合，装入胶囊或压制成片，制成的本发明的药物组合物胶囊或片剂。

本发明的治疗咽喉炎的药物组合物对于有效成分难以溶出的桔梗、麦冬、玄参、甘草、蝉蜕以及木蝴蝶，采取先行用水提取制成稠膏，再与有效成分容易溶出的金银花、菊花、胖大海的细粉混合，制成颗粒，因此本发明的药物组合物服用时有效成分都能迅速提取溶解，达到速效、高效的目的。

本发明的治疗咽喉炎的药物组合物是由六味至九味天然中药组成，能迅速缓解咽喉肿痛、干燥、灼热等症状，疗效确切。由于本发明的药物组合物药性平和，对平素肺胃蕴热的易感人群，经常服用还能起到预防咽喉炎的作用。

四、具体实施方式实施例1  本发明的治疗咽喉炎的药物组合物的制备

取桔梗200克，麦冬400克、玄参350克，加水8400克煎煮提取1小时，取出药渣，保留水提取液，药渣再重复加水8400克提取2次，合并三次水提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度50℃时为1.10的清膏，在清膏中加入95％乙醇，至乙醇含量达到60％，搅匀，静置24小时，过滤，滤液蒸馏回收乙醇后继续浓缩至相对密度50℃时为1.20的稠膏。

另取金银花300克，菊花400克，胖大海120克，粉碎成细粉，将细粉和上述制得的稠膏混匀，制成颗粒，60℃以下干燥，即得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。实施例2  本发明的治疗咽喉炎的药物组合物的制备

取桔梗400克，麦冬100克、玄参200克，加水5000克煎煮提取0.5小时，如此提取4次，按实施例1的步骤制成稠膏。

另取金银花500克，菊花200克，胖大海50克粉碎成细粉，其它步骤同实施例1，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。实施例3  本发明的治疗咽喉炎的药物组合物的制备

取蝉蜕200克、桔梗100克、麦冬300克、玄参300克，加水10000克煎煮提取，其它步骤同实施例1，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。实施例4  本发明的治疗咽喉炎的药物组合物的制备

取木蝴蝶200克、桔梗300克、麦冬100克、玄参300克，加水12000克煎煮提取3小时，如此提取2次，其它步骤同实施例1，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。实施例5  本发明的治疗咽喉炎的药物组合物的制备

取甘草200克、桔梗300克、麦冬200克、玄参100克，加水12000克煎煮提取，其它步骤同实施例1，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。实施例6  本发明的治疗咽喉炎的药物组合物的制备

取蝉蜕50克、桔梗300克、麦冬300克、玄参300克，木蝴蝶200克，加水11000克煎煮提取，按实施例1的步骤制成稠膏。另取金银花400克、菊花100克、胖大海200克粉碎成细粉，将细粉和上述稠膏混匀，其它步骤同实施例1，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。实施例7  本发明的治疗咽喉炎的药物组合物的制备

取蝉蜕200克、桔梗150克、麦冬250克、玄参400克、甘草50克，加水9000克煎煮提取，按实施例1的步骤制成稠膏。另取金银花100克、菊花350克、胖大海150克粉碎成细粉，将细粉和上述稠膏混匀，其它步骤同实施例1，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。实施例8  本发明的治疗咽喉炎的药物组合物的制备

取木蝴蝶200克、桔梗300克、麦冬300克、玄参300克、甘草100克，加水13000克煎煮提取，按实施例1的步骤制成稠膏。另取金银花400克、菊花350克、胖大海150克粉碎成细粉，将细粉和上述稠膏混匀，其它步骤同实施例1，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。实施例9  本发明的治疗咽喉炎的药物组合物的制备

取蝉蜕200克、桔梗300克、麦冬250克、玄参250克、甘草150克、木蝴蝶50克，加水12000克煎煮提取，按实施例1的步骤制成稠膏。另取金银花350克、菊花250克、胖大海150克粉碎成细粉，将细粉和上述稠膏混匀，其它步骤同实施例1，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。实施例10  本发明的治疗咽喉炎的药物组合物袋泡剂

取实施例1至9制得的任一种本发明的治疗咽喉炎的药物组合物1000克，加入2克甜叶菊素，再喷加3克薄荷油，混匀，装入薄滤纸制成的纸袋，每袋4克，即得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物袋泡剂。成人每日泡饮2～4袋。实施例11  本发明的治疗咽喉炎的药物组合物胶囊

取实施例1至9制得的任一种本发明的治疗咽喉炎的药物组合物，与附加剂混匀，装入胶囊，即制得本发明的药物组合物胶囊。实施例12  本发明的治疗咽喉炎的药物组合物片剂

取实施例1至9制得的任一种本发明的治疗咽喉炎的药物组合物，与辅料混匀，压制成片剂，即制得本发明的药物组合物片剂。

本发明的治疗咽喉炎的药物组合物袋泡剂(以下简称袋泡剂)的药效试验如下：1试验药品：

本发明袋泡剂，按实施例1制备；清音片，天津同仁堂制药厂，生产批号960939。药品配制：取袋泡剂加开水(以淹没药即可)，加盖，浸泡1h，并适时振摇，然后倒出药液过滤，得滤液1，另放。再加开水(药物∶水为1∶40)加盖浸泡1h，适当振摇，倒出药液过滤得滤液2，再按滤液2方法得滤液3。合并滤液2、3，浓缩至适当浓度，冷却，再加滤液1，混匀，即得实验用药液。2   试验动物：

青紫兰家兔、昆明种小鼠和Wister大鼠，均由安徽省医学研究所动物中心提

供，其中昆明种小鼠和Wister大鼠，动物号分别为皖医实动准第01和03号。3   试验条件：室温20～25℃，湿度50～60％。4   溶剂：蒸馏水。5   动物分组及剂量5.1动物分组：试验动物共分为5组，即蒸馏水空白对照组(简称蒸馏水组)，清音片阳性对照组(简称清音片组)，袋泡剂小、中、大剂量组。5.2剂量：清音片组3g生药/kg(1.6g片重/kg)，按公斤体重计算相当于临床成人日用量的20倍，袋泡剂组小：1.32g生药/kg、中：2.64g生药/kg、大：5.28g生药/kg，按公斤体重计算，相当于临床成人日用量的5、10和20倍。6   试验方法与结果6.1抗病毒试验6.1.1体外抗病毒作用6.1.1.1对流感病毒的抵制作用6.1.1.1.1病毒及来源：流行性感冒病毒A3/汉防/359195(H₃N₂)，引自国家流感中心。6.1.1.1.2药物：袋泡剂浸泡浓缩液(3.5g生药/mL)，清音片浸泡液(5.4g生药/mL)直接过滤除菌，病毒唑注射液(江苏连水制药厂生产，批号9703245，0.1g/mL)，实验时三种药物均用RPMI 1640稀释，pH约为7.2。6.1.1.1.3细胞：狗肾传代细胞(MDCK)，引自国家流感中心。6.1.1.1.4试验方法：参照中华人民共和国卫生部药政局《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》(93年版)进行。6.1.1.1.5试验过程

在病毒毒力和药物毒性测定的基础上，在MDCK细胞96孔培养板中，加入10病毒半数感染量(TCID50)病毒液(病毒液作1∶100稀释，在35℃，5％CO₂吸附2h)，吸去病毒液，加入最大无毒浓度药液2倍系列稀释液7个浓度，每一稀释度3孔，35℃，5％CO₂培养3天，观察细胞病变(CPE)，测定药物对CPE的抑制。同时设病毒对照(不加药液)，细胞对照(不加病毒)、药物对照(细胞不加病毒，加不同浓度药液)，结果见表1。

表1    袋泡剂对流感病毒CPE抑制测定

                            CPE抑制孔比例药物稀释度

                                                      对照

           袋泡剂          清音片             病毒唑1∶512          3/3            3/3                 3/3    (-)1∶1024         3/3            3/3                 3/3    (-)1∶2048         3/3            0/3                 3/3    (-)1∶4096         3/3            0/3                 3/3    (-)1∶8192         0/3            0/3                 3/3    (-)注：1、病毒对照(+)，细胞对照(-)

2、(+)表示细胞出现CPE；(-)表示未见CPE

6.1.1.1.6试验结果

由表1可得袋泡剂对流感病毒抑菌浓度为1∶8192，清音片为1∶2048。50％抑制病毒浓度(IC₅₀)前者为1∶6144，后者为1∶3072。

6.1.1.2对腺病毒的抑制作用

6.1.1.2.1病毒及来源：腺病毒(7型)，中国药品生物制品检定所惠赠。

6.1.1.2.2药物：同上。

6.1.1.2.3细胞：为人宫颈癌上皮细胞(HeLa)由安徽省医学研究所病毒室保存。

6.1.1.2.4实验方法：同上。

6.1.1.2.5试验过程

在病毒毒力测定基础上，于HeLa单层细胞96孔板中加入100病毒半数感染量(TCID50)病毒液(病毒液作1∶1000稀释)，37℃、5％CO₂吸附1h，弃去病毒液，分别加入袋泡剂及清音片8个浓度(1∶64～1∶8192)，每稀释度3孔，同时设病毒对照药物及正常细胞对照，置37℃、5％CO₂培养箱中培养3d，观察细胞病变(CPE)，测定药物对CPE的抑制，以不出现CPE的最低药物浓度为该药抗病毒有效浓度，结果见表2。

  表2     袋泡剂对腺病毒CPE抑制测定

                               CPE抑制孔比例药物稀释浓度

              袋泡剂                      清音片1∶64             3/3                         3/31∶128            3/3                         3/31∶256            3/3                         0/31∶512            3/3                         0/31∶1024           3/3                         0/31∶2048           3/3                         0/31∶4096           0/3                         0/31∶8192           0/3                         0/3注：病毒对照为(+)；药物对照为(-)，细胞对照为(-)

6.1.1.2.6试验结果：由表2试验可见，袋泡剂有效抗腺病毒(7型)浓度为1∶2048，清音片为1∶128。袋泡剂50％抑制病毒浓度(IC₅₀)为1∶3072，后者为1∶192。

6.1.2体内抗病毒作用

6.1.2.1病毒来源：流感病毒肺适应株(FM₁)，血凝效价E＝1∶1280，由安徽省医学研究所病毒室提供。

6.1.2.2方法与结果

6.1.2.2.1预试验

取昆明种小鼠40只，体重18～22g，雌雄各半，雌性未孕。将小鼠随机分为4组，每组10只，其中雌雄各5只。乙醚浅麻醉状态下，以25、50、75和100μL/只的剂量，分别自鼻腔给各组小鼠滴入上述病毒。自感染病毒日起，逐日观察并记录动物死亡数，连续14天。结果发现各剂量组小鼠的死亡率分别为10％、70％、100％和100％。初步确定：流感病毒肺适应株(FM₁)的最小致死量为75μL/只，推测最大安全剂量约为12.5μL/只。

6.1.2.2.2流感病毒肺适应株(FM₁)LD₅₀的测定

取昆明种小鼠60只，规格及要求同上。将小鼠随机分为6组，每组10只，设公比为1.43(1∶0.7)，乙醚浅麻醉状态下，按表3中剂量，分别自鼻腔给各组小鼠滴入上述病毒。自感染病毒日起，逐日观察并记录动物发病症状和死亡数，连续观察14天。结果见表3，按Bliss法计算LD₅₀。

  表3  流感病毒肺适应株(FM₁)LD₅₀的测定剂量                      动物数   死亡数  死亡率        死  亡  分  布                LD₅₀及95％组别        对数剂量                                                                     可信限

   (μL/只)            (只)     (只)    (％)  1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14(d)   (μL/只)1      74.8      1.8739    10       10      100   / / / 1 2 5 / 1 1  /  /  /  /  /      31.622      52.3      1.7185    10       8       80    / / / 1 1 2 1 2 1  /  /  /  /  /3      36.6      1.5638    10       6       60    / / / / / 1 2 1 1  1  /  /  /  /      23.404      25.6      1.4082    10       4       40    / / / / / / 1 2 /  1  /  /  /  /       |5      17.9      1.2528    10       1       10    / / / / / / / / /  1  /  /  /  /      39.846      12.5      1.0969    10       0       0     / / / / / / / / /  /  /  /  /  /6.1.2.2.3  袋泡剂对流感病毒感染所致病毒性肺炎小鼠的保护作用6.1.2.2.3.1  对流感病毒感染后小鼠死亡率及生存时间的影响

取昆明种小鼠72只，规格及要求同上。将小鼠随机分为6组，分别为正常对照组、病毒组、病毒+袋泡剂小、中、大剂量组和病毒+清音片组，每组小鼠12只。袋泡剂小、中、大组剂量含生药量为1.32、2.64和5.28/Kg，分别相当于临床成人(60kg)用量的5、10和20倍；清音片含生药量为3.60g/kg，相当于临床成人用量的20倍。各给药组于病毒感染前一天起灌胃给药，0.25mL/10g体重，每日一次；正常对照组及病毒组等容积灌胃给予生理盐水，连续给药7天。此外，于给药第2日，除正常组外，乙醚浅麻醉状态下，以相当于2倍LD₅₀量的病毒液60μL自小鼠鼻腔滴入。正常对照组滴入等量生理盐水溶液。自感染病毒日起，逐日观察并记录动物发病症状和死亡数，连续观察14天，结果见表4。

表4  袋泡剂对流感病毒感染小鼠死亡率及生存时间的影响( x±s)组别      剂量(g/kg)    死亡率(％)    保护率(％)    生存时间(天)正常组    等容量           0          /             14.00±0.00病毒组    等容量           100ΔΔ           /             6.00±1.48ΔΔ袋泡剂    1.32             83.3*      16.7          8.75±2.96*袋泡剂    2.64             58.3**     47.7          9.67±3.92**袋泡剂    5.28             50.0**     50.0          11.00±3.44**清音片    3.60             66.7**     33.3          9.33±3.89*与正常组相比：ΔΔP＜0.01与病毒组相比：*P＜0.05，**P＜0.01

表4结果显示：病毒组小鼠于病毒感染后一周内全部死亡，给予不同剂量的袋泡剂后，小鼠的死亡率显著减少，中、大剂量组作用极为显著；此外，袋泡剂对病毒感染后小鼠的存活时间明显延长，与病毒组相比，统计学意义显著。清音片对小鼠死亡率也具有显著降低作用，并可延长小鼠的存活时间，作用与中剂量的袋泡剂基本一致。

6.1.2.2.3.2对流感病毒感染后小鼠肺指数及病变程度的影响

实验期间逐只称取记录死亡小鼠的体重和肺重量，实验结束时，处死剩余小鼠，称取体重和肺脏重量。并且，肉眼大体观察肺脏改变情况，计算肺脏病变程度。肺脏无病变者，记0分；肺脏病变在1/4以下者，记1分；病变面积占全肺的1/4者，记2分；病变面积占全肺的1/2者，记3分；病变面积占全肺的3/4者，记4分；病变面积几乎占肺的全部者，记5分；因病死亡而解剖小鼠的肺病变，记6分。各组小鼠的肺脏病变积分值及肺脏指数见表5。

表5袋泡剂对流感病毒感染小鼠肺指数及病变程序的影响( x±s)组别     剂量(g/kg)    肺指数         改善率    病变积分值正常组    等容量      0.92±0.15      /            /病毒组    等容量      4.36±0.35ΔΔ      /         6.00±0.00ΔΔ袋泡剂    1.32        3.55±1.07**    18.6％    5.08±2.15袋泡剂    2.64        2.94±1.25**    32.6％    4.42±2.39**袋泡剂    5.28        2.47±1.31**    43.3％    3.17±2.98**清音片    3.60        3.36±1.04**    22.9％    4.92±2.07*

与正常组相比：ΔΔP＜0.01

与病毒组相比：*P＜0.05，**P＜0.01

表5结果显示：与正常组相比，病毒组小鼠的肺指数明显增加，统计学意义显著。给予不同剂量的袋泡剂后，小鼠的肺指数明显降低，中、大剂量组特别显著；此外，与病毒组相比，袋泡剂组小鼠的肺病变平均积分值也有明显减少，中、大剂量组作用有显著意义。清音片对病毒感染小鼠的肺指数和肺病变平均积分值也显著降低，作用接近于袋泡剂中剂量组。

6.2抗菌试验

6.2.1体外抗菌试验

6.2.1.1细菌来源：由安徽中医学院第二附院细菌室经临床分离鉴定。

6.2.1.2培养基：采用MH(Mueller-Hinton)培养基。

6.2.1.3 MIC测定：采用试管法，菌液浓度为10⁷CFU/mL，37℃培养24h，肉眼观察无细菌生长的最低药物浓度为该菌的MIC，结果见表6。

                          表6    袋泡剂体外抑菌试验菌种                                 抑菌浓度(g/mL)

          菌株数

                         袋泡剂                    清音片10⁷CFU/mL         MIC₅₀  MIC₉₀   MIC范围          MIC₅₀  MIC₉₀   MIC范围金黄色葡萄球菌  5  0.03125 0.04688  0.01563-0.0625   0.03125 0.0625   0.03125-0.0625甲链            5  0.25    0.375    0.25-0.5         0.25    0.375    0.25-0.5乙链            5  0.125   0.25     0.125-0.25       0.25    0.25     0.125-0.25肺炎球菌        5  0.5     0.5      0.25-0.5         0.25    0.5      0.25-0.5大肠杆菌        5  1       1        0.5-1            1       1.5      0.125-2肺炎克雷伯菌    5  0.125   0.1875   0.125-0.25       0.25    0.25     0.125-0.25

由表6可见，袋泡剂体外有明显抑菌作用，其中对金黄色葡萄球菌作用最强，MIC₅₀为0.03125，对大肠杆菌最弱MIC₅₀为1。

6.2.2体内抗菌试验

6.2.2.1对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用

6.2.2.1.1试验菌株配制  所用试验菌株金黄色葡萄球菌由安徽中医学院第二附院细菌室提供，用5％无菌干酵母液稀释至所需浓度。

6.2.2.1.2试验方法及结果

经预试验得出小鼠100％死亡的最小致死菌量(100％MLD)为4×10⁷CFU/mL，再以MLD的感染菌量给小鼠ip 0.5mL/只，感染小鼠。于感染后立即和4h按表7、8中剂量ig给药，正常饲养，连续观察7d，并记录各组动物死亡数。根据表7、8中数据用Bliss法计算半数有效量(ED₅₀)和95％可信限，结果见表7、8。

表7  袋泡剂对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用组   剂量   对数     动物数 存活数 存活率    死亡分布          ED₅₀及95％可信别  (g/kg)  剂量      (n)    (n)    (％)    1 2 3 4 5 6 7(d)       限(g/kg)1    5.000  0.6990    10      9     90      / 1 / / / / /           3.3652    4.000  0.6021    10      7     70      / 2 1 / / / /           (2.9663    3.200  0.5051    10      4     40      2 2 1 1 / / /             |4    2.560  0.4082    10      3     30      3 / 4 / / / /             |5    2.048  0.3319    10      0     0       4 2 2 2 / / /            3.818)蒸馏水等容量  -       10      0     0       8 1 1 / / / /表8  清音片对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用组   剂量    对数    动物数  存活数  存活率    死亡分布        ED₅₀及95％可信别  (g/kg)   剂量      (n)   (n)     (％)    1 2 3 4 5 6 7(d)      限(g/kg)1    4.69    0.6712    10    10      100     / / / / / / /          3.0022    3.75    0.5740    10    8       80      1 1 / / / / /          (2.6893    3.00    0.4771    10    5       50      2 2 1 / / / /            |4    2.40    0.3802    10    2       20      3 2 2 1 / / /            |5    1.92    0.2833    10    0       0       5 2 2 1 / / /          3.351)蒸馏水等容量  -        10    0       0       8 2 / / / / /

6.2.2.2对肺炎克雷伯菌感染小鼠的保护作用

6.2.2.2.1试验菌株配制  同上。

6.2.2.2.2试验方法及结果

经预试验得出引起小鼠100％死亡的最小致死菌量(100％MLD)为1.5×10⁷CFU/mL，再以MLD给小鼠ip 0.5mL/只，感染小鼠。于感染后立即和4h ig给药，连续观察7d，并记录各组动物死亡数。根据表9、10中数据用Bliss法计算半数有效量(ED₅₀)和95％可信限，结果见表9、10。

表9  袋泡剂对肺炎克雷伯菌感染小鼠的保护作用组  剂量     对数    动物数  存活数存活率    死亡分布         ED₅₀及95％可信别  (g/kg)   剂量      (n)    (n)    (％)    1 2 3 4 5 6 7(d)    限(g/kg)1    8.000   0.9031    10      10    100     / / / / / / /       4.1892    6.400   0.8062    10      9    90       1 / / / / / /       (3.7083    5.120   0.7084    10      7    70       1 2 / / / / /         |4    4.096   0.6123    10      6    60       2 1 1 / / / /         |5    3.277   0.5154    10      2    20       5 2 / 1 / / /         |6    2.621   0.4185    10      0    0        5 1 3 1 / / /       4.733)蒸馏水等容量  -        10      0    0        10/ / / / / /表10  清音片对肺炎克雷伯菌感染小鼠的保护作用组  剂量    对数      动物数 存活数 存活率    死亡分布        ED₅₀及95％可信别  (g/kg)   剂量     (n)    (n)    (％)   1 2 3 4 5 6 7(d)     限(g/kg)1    3.75    0.5740    10    10      100   /  / / / / / /        2.1952    3.00    0.4771    10    8       80    1  1 / / / / /        (1.9383    2.40    0.3802    10    6       60    3  1 / / / / /           |4    1.92    0.2833    10    4       40    3  1 2 / / / /           |5    1.54    0.1875    10    1       10    4  2 2 1 / / /           |6    1.23    0.0899    10    0       0     4  5 / 1 / / /        2.486)蒸馏水等容量  -        10    0       0     10 / / / / / /由上述试验结果可见袋泡剂对金葡菌和肺炎克雷伯菌感染小鼠有明显保护作用。6.3袋泡剂抗炎作用6.3.1对醋酸致血管通透性抑制作用

取小鼠50只，随机均分成5组，按表11中剂量给药，连续7d，末次给药后40min，尾静脉注射0.5％伊文思蓝0.1mL/10g体重，并立即ip 0.8％HAc 0.1mL/10g体重，30min后处死小鼠，向腹腔注射5mL生理盐水，再注入1mL空气，轻轻按摩腹部，打开腹腔，收集约5mL溶液，离心。在721分光光度计590nm处测吸收值(OD)，结果见表11。

表11  袋泡剂对醋酸致血管通透性抑制作用( x±s)

组别       动物(n)  剂量(g/kg)    OD值          抑制率(％)蒸馏水组      10      等容量    0.472±0.076      -清音片组      10      3.00      0.325±0.046**    31.14袋泡剂组(小)    10      1.32      0.295±0.079**    37.50袋泡剂组(中)    10      2.64      0.233±0.048**    50.64袋泡剂组(大)    10      5.28      0.257±0.041**    45.55与蒸馏水组比：*P＜0.05，**P＜0.01，以下相同。

由表11可见，袋泡剂明显抑制由HAc所致血管通透性增加，与蒸馏水组比，有非常显著性差异，与清音片组比，无明显差异。6.3.2对二甲苯致耳肿胀的抑制作用

取体重18～22g小鼠50只，雌雄各半，分组同上，连续给药7d，末次给药后45min，在每只小鼠右耳涂二甲苯0.05mL。1h后颈椎脱臼处死小鼠，剪下耳片用0.8cm打孔器在小鼠两耳相同部位各取一耳片，于扭力天平称重，以两耳片重量差作为肿胀度，结果见表12。

    表12  袋泡剂对二甲苯所致小鼠耳肿胀的抑制作用( x±s)

    组别     动物(n)    剂量(g/kg)  耳肿胀度(mg)

  蒸馏水组    10        等容量      9.88±1.23

  清音片组    10        3.00        6.52±1.17**

袋泡剂组(小)  10        1.32        7.27±1.25**

袋泡剂组(中)  10        2.64        6.38±1.13**

袋泡剂组(大)  10        5.28        5.89±1.00**

由表12可见，袋泡剂明显抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀，与蒸馏水组比，有非常显著性差异；与清音片组比，无明显差异。

6.3.3对蛋清致大鼠足肿胀的抑制作用

取体重180～200g雄性大鼠50只，随机均分成蒸馏水组，清音片组和袋泡剂大、中、小剂量组，按表13中剂量给药，1mL/100g体重，连续7d。用容量法测右后足容积，然后于末次给药后40min，每鼠右后足趾腱膜下注入0.1mL 100％蛋清致炎，分别于注入蛋清后0.5、1、1.5、2、3、4h测量足容积，结果见表13。

由表13可见，袋泡剂明显抑制蛋清致大鼠足肿胀，与蒸馏水组比，有显著性差异，与清音片组比，无明显差异。

6.3.4对棉球植入法所致肉芽增生的抑制作用

取体重180～200g雄性大鼠50只，随机均分成5组(同上)，在乙醚麻醉无菌条件下，将已称重的棉球，经高压灭菌，每个棉球加入氨苄青霉素1mg 0.1mL，150℃烘箱烤干后，植入大鼠两侧腹股沟皮下，当动物清醒后，按表14中剂量ig给药，1mL/100g体重，连续7d。最后一次给药后40min处死大鼠，剥离并取出肉芽组织，于90℃烘箱内干燥4h后称重，并减去原棉球重量，即为肉芽净重，结果见表14。

    表14  袋泡剂对大鼠棉球致肉芽增生的抑制作用( x±s)

    组别      动物(n)  剂量(g/kg)    肉芽重(mg)    抑制率(％)

  蒸馏水组      10     等容量     136.20±42.27     -

  清音片组      10     3.60       36.42±23.28**    73.26

袋泡剂组(小)    10     1.32       67.07±38.10**    50.76

袋泡剂组(中)    10     2.64       42.04±16.10**    69.13

袋泡剂组(大)    10     5.28       15.61±12.87**    88.54

        表13袋泡剂对蛋清致大鼠足肿胀的抑制作用( x±s)

        鼠数     剂量                   肿胀度(ml)组别

        (n)   (g/kg)        0.5          1                   1.5            2                3            ^*4(h)蒸馏水组    10    等容量  1.110±0.074    1.130±0.111      1.085±0.097    1.025±0.160    0.895±0.123    0.775±0.116清音片组    10    3       0.685±0.144^** 0.695±0.109^**   0.605±0.155^** 0.525±0.138^** 0.475±0.129^** 0.415±0.108^**袋泡剂组(小)10    1.32    0.835±0.138^** 0.665±0.226^**   0.685±0.197^** 0.565±0.245^** 0.505±0.161^** 0.465±0.167^**袋泡剂组(中)10    2.64    0.685±0.129^** 0.675±0.139^**   0.635±0.183^** 0.465±0.186^** 0.405±0.112^** 0.365±0.120^**袋泡剂组(大)10    5.28    0.660±0.081^** 0.640±0.0.081^** 0.560±0.141^** 0.420±0.351^** 0.360±0.094^** 0.260±0.150^**

                 表15袋泡剂对家兔体温的影响(n＝10， x±s)

                                                     药后体温(℃)

         正常体温组别

            (℃)

                              0           0.5            1             1.5              2              3              4              5              6(h)蒸馏水组    38.78±0.38  39.63±0.24  40.05±0.81   40.29±0.65    40.58±0.97     40.26±0.98    39.99±0.82    39.67±0.74    39.33±0.34    39.17±0.41清音片组    38.70±0.35  39.73±0.68  39.34±0.38^* 39.06±0.39^** 38.87±0.44^** 38.91±0.38^** 38.79±0.38^** 38.79±0.35^** 38.73±0.41^** 38.75±0.34^**袋泡剂组(小)38.70±0.37  39.54±0.30  39.40±0.19^* 39.06±0.47^** 38.99±0.47^** 38.80±0.56^** 38.83±0.52^** 38.66±0.48^** 38.71±0.45^** 38.60±0.44^**袋泡剂组(中)38.78±0.34  39.69±0.50  39.38±0.30^* 39.12±0.36^** 38.94±0.45^** 38.77±0.50^** 38.71±0.44^** 38.73±0.37^** 38.78±0.44^** 38.65±0.43^**袋泡剂组(大)38.75±0.35  39.65±0.28  39.12±0.32^* 38.99±0.40^** 38.84±0.44^** 38.77±0.43^** 38.74±0.37^** 38.69±0.34^** 38.71±0.25^** 38.65±0.28^**

由表14可见，袋泡剂明显抑制棉球所致肉芽增生，与蒸馏水组比，有非常明显性差异，与清音片组比：大剂量组有明显差异，且与剂量有关，剂量越大，作用越强。6.4袋泡剂的解热作用6.4.1对百、白、破类毒素致家兔体温升高的抑制作用

选体温在38～39℃的家兔50只，体重1.5～2Kg，雌雄兼用，分组同上。测量正常体温后，经兔耳缘静脉注射百、白、破类毒素混悬剂(卫生部上海生物制品研究所生产，批号：970611.6)1mL/Kg，当体温升高超过0.5℃后，按剂量分别ig给药2mL/Kg，并分别于给药后0.5、1、1.5、2、3、4、5和6h测体温1次，结果见表15。

由表15可见，袋泡剂明显抑制百、白、破类毒素所致家兔体温升高，与蒸馏水组比，有非常显著性差异；与清音片组比，无明显差异。6.4.2对大鼠体温的影响

取体重160-200g大鼠50只，雌雄兼用，随机均分成5组，测正常体温后，各组大鼠背部皮下注射2、4-二硝基酚30mg/Kg，0.1mL/100g体重，当体温升高超过0.5℃以上后，按剂量ig给药，分别于给药后0.5、1、1.5、2、3、4、5和6h测量体温，结果见表16。

由表16可见，袋泡剂明显抑制2，4-二硝基酚致大鼠体温升高，大剂量组从0.5小时后作用明显，而其他组3h后作用明显，与蒸馏水组比，有非常显著性差别。6.5袋泡剂镇痛作用6.5.1  热板法

取经过筛选(二次痛阈均不超过30s者)体重18～22g雌性小鼠50只，随机均分成5组(同上)，将恒温水浴锅水温调至55±0.5℃，玻璃烧杯底部接触水面，加热后作为热刺激板。用秒表记录小鼠自投入烧杯内至出现舔后足的时间(s)作为该鼠痛阈值。按剂量分别ig给药0.25mL/10g体重。分别于给药后0.5、1、1.5、2、2.5、3、4h测一次痛阈值，超过60s，即停止测试，按60s计，结果见表17、18。

            表18袋泡剂对热板法的痛阈提高百分率

                               痛阈提高百分率(％)组  别

               0.5      1     1.5      2      2.5      3        4(h)蒸馏水组           -        -      -       -       -       -         -清音片组          69.94    81.68  94.89   126.71  134.57   141.55   95.86袋泡剂组(小)      26.61    45.65  48.98   64.99   70.66    54.62    78.07袋泡剂组(中)      44.85    77.56  103.58  99.33   96.90    79.35    60.18袋泡剂组(大)      70.78    87.71  102.25  122.06  147.36   151.85   143.03

   表16袋泡剂对2，4-二硝基酚致热大鼠的解热作用( x±s)

                               药后体温(℃)组别

          正常体温

            (℃)

                               0          0.5           1              1.5             2              3              4             5              6(h)蒸馏水组    38.01±0.59  38.69±0.61  38.83±0.58   38.84±0.45    38.73±0.41    38.65±0.71    38.56±0.52    38.46±0.65   38.39±0.61   38.20±0.58清音片组    38.04±0.57  38.88±0.41  38.60±0.49   38.50±0.51    38.38±0.49    38.24±0.48    38.07±0.44^*  38.01±0.54   37.95±0.48   38.04±0.54袋泡剂组(小)38.07±0.48  38.85±0.43  38.73±0.59   38.39±0.65    38.23±0.74    38.15±0.58    37.92±0.56^*  37.88±0.52   38.01±0.52   37.88±0.51袋泡剂组(中)38.04±0.64  38.80±0.62  38.57±0.64   38.38±0.71    38.26±0.74    38.15±0.68    38.01±0.64^*  37.96±0.69   37.96±0.69   37.92±0.64袋泡剂组(大)38.02±0.53  38.70±0.56  38.44±0.62^* 38.15±0.72^* 37.87±0.79^**  37.75±0.69^** 37.80±0.73^** 37.67±0.63^* 37.76±0.71^* 37.85±0.63

        表17袋泡剂对热板法的镇痛作用(n＝10， x±s)

                                                        痛阈值  (S)组别

               0           0.5             1             1.5            2                2.5              3            4(h)蒸馏水组     18.53±3.34  19.30±3.57    19.43±4.92    19.80±3.48    19.54±2.54     19.70±2.42     20.58±4.17    21.75±3.44清音片组     19.18±4.28  32.51±6.17^** 35.30±6.27^** 36.16±8.24^** 44.30±10.94^** 46.21±10.63^** 49.71±9.76^** 42.60±11.06^**袋泡剂组(小) 21.37±7.68  24.22±5.79^** 28.30±5.08^** 29.17±3.51^** 32.64±4.87^**  33.62±5.52^**  31.82±5.03^** 38.73±5.18^**袋泡剂组(中) 18.97±4.01  27.71±5.17^** 34.50±3.43^** 39.86±8.06^** 38.95±8.28^**  38.79±6.04^**  36.91±9.70^** 34.84±9.42^**袋泡剂组(大) 19.66±4.48  32.67±7.23^** 36.36±9.03^** 39.60±8.67^** 43.39±9.16^**  48.73±9.06^**  51.83±7.53^** 52.86±9.23^**

由表17、18可知，袋泡剂对热致痛有明显抑制作用，与蒸馏水组比有显著性差异，且剂量越大作用越强。6.5.2扭体法

取体重18～22g小鼠50只，雌雄兼用，随机均分成5组(同上)，分别按表19中剂量灌胃给药，连续5d，末次给药后40min，各组小鼠ip 0.7％醋酸溶液0.1mL/10g体重，分别记录注射醋酸后10min和20min内各组小鼠扭体次数，以及疼痛抑制百分率，结果见表19。

表19  袋泡剂对扭体法的镇痛作用(x±s)组别          动物       剂量            扭体数(次)             抑制率(10％)

          (n)       (g/kg)     10min          20min         10min    20min蒸馏水组      10        等容量    19.50±5.93     42.80±8.78     -      -清音片组      10        3.00      12.90±2.60**  26.00±5.03** 33.85   39.25袋泡剂组(小)  10        1.32      16.80±3.91    32.60±7.55*  13.85   23.83袋泡剂组(中)  10        2.64      13.30±6.06*   26.70±4.92** 31.79   37.62袋泡剂组(大)  10        5.28      6.00±2.91**   14.40±4.58** 69.23   66.36

由表19可见，袋泡剂明显抑制由醋酸所致疼痛，小鼠扭体次数明显减少，与蒸馏水组比，有非常显著性差异。6.5.3甩尾法

取体重18～22g小鼠50只，雌雄兼用，随机均分成5组。分别将小鼠的尾部(从尾尖到末端5cm处)，浸入48℃恒温水浴锅热水中，观察和记录小鼠尾从放入水中到甩尾潜伏期，然后按表中剂量ig给药0.25mL/10g体重，连续5d，末次给药后40min，再按上方法进行，结果见表20。

       表20袋泡剂对甩尾法的镇痛作用(n＝10，X±s)组             剂量                     痛阈反应潜伏期(S)别            (g/kg)         药               药        后

                         前                1             2              3             4(h)蒸馏水组      等容量      7.22±1.38      7.23±1.98    7.02±1.76     7.94±1.87     6.56±2.04清音片组      3.00        6.76±1.89      7.23±2.10    9.54±2.64*    8.48±3.38     6.57±1.88袋泡剂组(小)  1.32        7.17±1.54      7.14±2.31    9.52±3.24     10.11±3.20    5.62±1.64袋泡剂组(中)  2.64        7.33±1.49      7.30±2.38    9.76±2.83*    11.92±5.54    6.70±1.62袋泡剂组(大)  5.28        7.43±1.84      8.05±3.14    9.43±2.39*    10.56±3.35    5.79±2.21

由表20可见，连续用药5d后，小鼠对热刺激引起的疼痛有一定抑制作用，尤其是药后2h，与蒸馏水组比，有显著性差异。

小结

由实验结果可见，本发明的袋泡剂体外能抑制流感病毒As和腺病毒(7型)的生长繁殖，显著降低流感病毒适应株(FM1)所致小鼠病毒性肺炎死亡率，减少肺指数并抑制肺脏病变程度，体外明显抑制肺炎球菌、金黄色葡萄球菌、甲链、乙链、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌生长，体内对金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌感染的小鼠有明显的保护作用；对抗醋酸致血管通透性增加、二甲苯致小鼠耳肿胀、蛋清致大鼠足肿胀和棉球致肉芽增生；降低百、白、破类毒素和2，4-二硝基酚致家兔和大鼠的体温升高；还能抑制热和醋酸所产生的疼痛，说明本发明的药物组合物有良好的清热解毒、利咽开音之功效。

Claims (10)

1.一种治疗咽喉炎的药物组合物，其特征是它包含下列成份及质量组分：金银花100～500份、菊花100～400份、胖大海50～200份，以及桔梗100～400份、麦冬100～400份、玄参100～400份三种药材的水提取物。

2.根据权利要求1所述的治疗咽喉炎的药物组合物，其特征是它包含桔梗、麦冬、玄参和质量组分的蝉蜕50～200份、或木蝴蝶50～200份、或甘草50～200份四种药材的水提取物。

3.根据权利要求2所述的治疗咽喉炎的药物组合物，其特征是它包含桔梗、麦冬、玄参、蝉蜕和质量组分的甘草50～200份，或者包括含桔梗、麦冬、玄参、木蝴蝶和质量组分的甘草50～200份，或者包括含桔梗、麦冬、玄参、蝉蜕和质量组分的木蝴蝶50～200份五种药材的水提取物。

4.根据权利要求3所述的治疗咽喉炎的药物组合物，其特征是它包含桔梗、麦冬、玄参、蝉蜕、甘草和质量组分的木蝴蝶50～200份六种药材的水提取物。

5.一种制备权利要求1所述的治疗咽喉炎的药物组合物的方法，其特征是它由下列步骤组成：

步骤一、在处方质量组分的桔梗、麦冬和玄参中加入药材总质量4～12倍质量的水煎煮提取0.5～3小时，如此提取2～4次，合并水提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.05～1.20(50℃)的清膏，

步骤二、在步骤一所制得的清膏中加入乙醇，使乙醇含量达40～90％，搅匀，静置12～36小时，过滤，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10～1.30(50℃)的稠膏，

步骤三、取处方质量组分的金银花、菊花、胖大海粉碎成细粉，

步骤四、将步骤三所制得的细粉加入到步骤二所制得的稠膏中，混匀，制成颗粒，干燥，即得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。

6.一种制备权利要求2所述药物组合物的方法，其特征是在权利要求5所述方法的步骤一中加入处方质量组分的蝉蜕、或木蝴蝶、或甘草，一起加水提取，制成清膏，然后按权利要求5所述方法的步骤二至步骤四，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。

7.一种制备权利要求3所述药物组合物的方法，其特征是在权利要求5所述方法的步骤一中加入处方质量组分的蝉蜕和甘草，或者木蝴蝶和甘草，或者蝉蜕和木蝴蝶，一起加水提取，制成清膏，然后按权利要求5所述方法的步骤二至步骤四，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。

8.一种制备权利要求4所述药物组合物的方法，其特征是在权利要求5所述方法的步骤一中加入处方质量组分的蝉蜕、木蝴蝶和甘草，一起加水提取，制成清膏，然后按权利要求5所述方法的步骤二至步骤四，制得本发明的治疗咽喉炎的药物组合物。

9.一种治疗咽喉炎的药物组合物的袋泡剂，其特征是将本发明的药物组合物颗粒，加矫味剂，混匀，装入纸袋中，制成的本发明治疗咽喉炎的药物组合物袋泡剂。

10.一种治疗咽喉炎的药物组合物胶囊或片剂，其特征是将本发明的药物组合物颗粒与附加剂混合，装入胶囊或压制成片，制成的本发明药物组合物的胶囊或片剂。