CN1401761A - 液体培养虫草子实体及利用其培养液制备虫草素的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种液体培养虫草子实体及利用其培养液制备虫草素的方法，无菌条件下将虫草菌种接入液体培养基中，在静止条件下，不需搅拌，培养40天左右，得生长虫草子实体；然后取其培养液，加热浓缩至原体积的1～5/10，上离子柱用碱性洗液洗脱除掉杂质，收集洗脱液进行再浓缩，0℃冷藏析出结晶，用正丁醇重结晶，得虫草素。利用液体培养基培养虫草，不但收获了虫草子实体，还可从其培养液中制备虫草素，充分利用生物资源，大大降低了制备工艺的成本。
Description
技术领域：
本发明公开一种液体培养虫草子实体及利用其培养液制备虫草素的方法，属于虫草素提取方法技术领域。
背景技术：
通常虫草素是从虫草子实体(包括冬虫夏草、蛹虫草等)中进行提取，由于虫草子实体价格昂贵，因此，虫草素生产成本较高，影响了虫草素的应用。
发明内容：
本发明的目的是提供一种液体制备虫草子实体的方法，本发明的另一个目的是从上述虫草培养液中提取虫草素，从而大大降低了虫草素的生产成本。
本发明的解决方案如下：
无菌条件下虫草菌种接入生物液体培养液中，在静止条件下，不需搅拌，培养得虫草子实体；取收获虫草子实体后的培养液1000ml，加热浓缩至原体积的1～5/10，上离子柱用碱性洗液洗脱除掉杂质，收集洗脱液进行再浓缩为原体积的1/10左右，0℃冷藏析出结晶，用正丁醇重结晶，得虫草素。
培养液是由以下物质按重量份数比配制成的：葡萄糖35～45、蛋白胨15～25、硫酸镁0.3～0.6、磷酸二氢钾0.8～1.2、加入2000毫升水加热熔化，经100℃高温高压灭菌，制成液体培养液；
上述的培养液也可以选择通用的菌类培养液。
上述的虫草包括冬虫草、蛹虫草等虫草类。
本发明的药物含有治疗有效量的提取物为活性成分，以及含有一种或多种药学上可接受的载体。
上文的载体是指药学领域常规的药物载体，包括稀释剂、赋形剂，填充剂，粘合剂，湿润剂，崩解剂，吸收促进剂，表面活性剂，吸附载体。
本发明的提取物可用于制备抗癌、抑制肿瘤的药品使用。
本发明可以组合物的形式通过口服、直肠、静脉、肌肉注射或胃肠外给药方式施用于这种治疗的患者。按照药学领域的常规生产方法制备各种剂型如片剂、颗粒剂、冲剂、胶囊、缓释剂和注射剂。也可使其活性成分与一种或多种载体或药物混合，制成所需剂型。
本发明的药物组合物优选重量比为0.1％～99.5％活性成分，优选含有10-90％，更优选20-80％，最好为70％的本发明化合物。
本发明的施药量可根据用药途径、患者年龄、体重、疾病类型和严重程度等变化，日剂量为0.02～0.05mg/kg。
本发明方法与现有提取虫草素的方法相比具有以下积极效果：利用液体培养基培养虫草，不但收获了虫草子实体，还可从其培养液中制备虫草素，充分利用生物资源，大大降低了制备工艺的成本，工艺简单，适合于工艺化生产。
具体实施方式：
实施例1
取葡萄糖40g、蛋白胨20g、硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾1g，加入2000毫升水加热熔化，经100℃高温高压灭菌，制成液体培养液；无菌条件下接入虫草菌种，在静止条件下培养40～50天，待长出虫草子实体；
实施例2
取实施例1培养虫草子实体后的培养液1000ml，加热浓缩至原体积的1/10，上离子柱用碱性洗液(0.5N的氨水)洗脱除掉杂质，收集洗脱液进行再浓缩为原体积的1/10，0℃冷藏析出结晶，用正丁醇重结晶，得虫草素50mg。
实用例1
粉针注射剂：虫草素(实施例2所得)2mg
氯化纳 2.5g
注射用水 250ml
制备过程：将虫草素、氯化纳溶解与适量的注射用蒸馏水中，用1～5％的氢氧化钠溶液调PH8.5，加注射用水至1000ml，通过0.2μm的微孔滤膜过滤所得溶液，在无菌条件下装入安瓶，冷冻干燥。
实用例2
胶囊：虫草子实体(实施例1所得) 10g
玉米淀粉 1000g
制备方法：将虫草子实体粉碎与玉米淀粉混合搅拌均匀，加入适量70％乙醇湿润制粒，干燥装入硬胶囊中，制成胶囊1000粒，每个胶囊0.3克。其它项目应符合中华人民共和国药典2000版胶囊项目有关要求。
Claims (5)
1、一种从液体培养液中培养虫草子实体的方法，用常规的生物技术将虫草菌种接种在生物液体培养基中，其特征在于：静止培养，不许搅拌，待生长出虫草子实体。
2、一种从虫草液体培养基中提取虫草素的方法，其特征在于：取培养虫草子实体后的培养液1000ml，加热浓缩至原体积的1～5/10，上离子柱用碱性洗液洗脱除掉杂质，收集洗脱液进行再浓缩，0℃冷藏析出结晶，用正丁醇重结晶，得虫草素。
3、根据权利要求2所得提取物和药学上可接受的载体。
4、根据权利要求2、3所述的药物组合物，优选重量比为0.1％～99.5％活性成分，优选含有10-90％，更优选20-80％，最好为70％的本发明化合物。
5、一种液体培养基，其特征在于由以下物质按重量份数比构成：葡萄糖35～45、蛋白胨15～25、硫酸镁0.3～0.6、磷酸二氢钾0.8～1.2、水2000。
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|---|---|
| CN1401761A true CN1401761A (zh) | 2003-03-12 |
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| CN 02133167 Pending CN1401761A (zh) | 2002-10-11 | 2002-10-11 | 液体培养虫草子实体及利用其培养液制备虫草素的方法 |
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|---|---|
| CN (1) | CN1401761A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1323157C (zh) * | 2005-09-23 | 2007-06-27 | 田向荣 | 冬虫夏草菌的一种仿生学培养方法 |
| CN101423835B (zh) * | 2005-09-06 | 2011-01-12 | 中炬高新技术实业（集团）股份有限公司 | 与虫草素生物合成相关的基因序列 |
| CN102318544A (zh) * | 2011-05-28 | 2012-01-18 | 镇江市食用菌研究所 | 一种北虫草水培方法 |
-
2002
- 2002-10-11 CN CN 02133167 patent/CN1401761A/zh active Pending
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| CN101423835B (zh) * | 2005-09-06 | 2011-01-12 | 中炬高新技术实业（集团）股份有限公司 | 与虫草素生物合成相关的基因序列 |
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |