CN1385438A - 一种以大豆粕、玉米胚粕为原料生产分离蛋白过程中提取核酸的方法 - Google Patents
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Abstract
一种以大豆、玉米胚为原料生产分离蛋白过程中提取核酸的方法。是在现有的以大豆、玉米胚生产分离蛋白的全部工艺基础上,通过用超声波处理萃取蛋白时的固液混合物,大幅度提高了细胞的破壁率和细胞核的破膜率。使细胞中的DNA和RNA充分溶出。再将含核酸的溶液加酸使pH值调整到核酸的等电点,即可把这两种原料中所含核酸的60%以上提取出来。使在生产分离蛋白过程中同时提取核酸变得有经济上的实际意义。
Description
本发明属于食用保健物质核酸的提取方法技术领域。
核酸，包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)，是重要的食品添加与药用物质。现有的核酸是以动物细胞或人工繁殖的酵母细胞为原料，用水解盐析，生物酶解等方法将细胞破壁后提取的。这种核酸的生产方法存在着成本高和排放含有酸、盐、酶等污染环境的废水的缺点。
从事大豆、玉米深加工的技术人员都清楚，用大豆粕、玉米胚粕生产分离蛋白时，蛋白沉析后分离出的上清液中含有核酸。但因含量低，实测最高只有0.08％，提取的意义不大，故直接作废水废弃。而实际上大豆含核酸为1.0％，玉米胚中约含0.5％。以此推算，沉析蛋白后的上清液理论上核酸含量以大豆为原料的应为0.2％，玉米胚为原料的应为0.1％。达不到这个含量比例的原因在于用以往的工艺生产分离蛋白工艺中大豆或玉米胚细胞的细胞壁有一部分没有破裂，细胞核膜有一半以上未破裂。在这些细胞和细胞核中的核酸不能充分溶出，所以使溶液中的核酸含量与原料中含量的比例偏低。
本发明的目的是提出一种在以往大豆粕、玉米胚粕为原料生产分离蛋白过程中促进细胞壁和细胞核膜破裂的方法和选择核酸沉析的最佳条件，使在生产分离蛋白过程中得到一种有实际意义的以植物籽粒的原料的核酸制取方法，用以替代现有的动物细胞为原料制取核酸的工艺，克服现有技术的缺点。
本发明的技术方案是，在以大豆粕、玉米胚为原料生产分离蛋白全部工艺的基础上，在萃取蛋白时用超声波处理固液混合物。在沉析蛋白后分离出的上清液中加酸将其PH值调整到核酸的等电点沉析核酸，再将分离出的核酸凝乳加碱使PH值上升到蛋白质的等电点，析出混在核酸中的水溶性蛋白，再用酒精清洗，去除醇溶性蛋白。使核酸达到纯度要求。再用通常的方法低温干燥后得成品。
本发明超声波较佳参数是频率15-30KHz，声强1-3W/cm2。处理1m3固液混合物超声波总电功率为8-12KW。核酸的PH值等电点经测为2.0-3.0。
用本发明带来的效果是大豆、玉米的细胞破壁率达80％以上，细胞核破膜率80％以上，原料中核酸溶出率达60％以上。使利用大豆粕、玉米胚生产分离蛋白同时生产核酸，在经济上变得有利可图。得到了一种核酸生产的新途径，克服了已有的核酸生产存在的高成本有污染的问题。
实施例：
1、大豆清选去杂，用溶剂冷浸出并分离脂肪，豆粕粉碎40-60目，在装1.0KL固液混合物的容器内用微碱性水萃取蛋白。在萃取过程中用超声波处理固液混合物。超声波频率为15KHz，声强1W/cm2，超声波的总电功率选择10KW。超声波发生器可去厂家定做。每台功率为1-2KW。本实施例共用6-10个超场发生器。均匀的将发射头固定在固液混合物内四周，向中心发射超声波。处理时间30分钟。萃取完成后的蛋白提取和现有技术相同。将蛋白沉析后分离出的上清液加盐酸将PH值调至2.0，使核酸沉析。用离心机分离出核酸净乳后，再加碱使PH值回升至4.2，再一次沉析出核酸中残存的水溶性蛋白质。后加95％的酒精洗去醇溶性蛋白，再经低温干燥，即得符合纯度要求的核酸。
2、将萃取蛋白过程的超声波的频度选择在20KHz，声强2W/cm2，处理时间为20分钟。分离出蛋白后的上清液加盐酸将PH值调至2.5，沉析核酸。其他同实施例1。
3、将超声波频率选择在25KHz，声强3W/cm2，处理时间15分钟，分离出蛋白后的上清液PH值调至3.0。其他 他同实施例1。
4、以脱脂后的玉米胚粕为原料，其他同实施例1、2或3。
Claims (1)
- 一种以大豆粕、玉米胚粕为原料生产分离蛋白过程中提取核酸的方法，包括已有的生产分离蛋白的全部工艺，其特征是在萃取蛋白质时用超声波处理固液混合物，并将分离沉析蛋白后的上清液加酸调整PH值至核酸等电点，沉析核酸，再将与水分离后的核酸凝乳加碱使PH值回升至蛋白质等电点，沉析清除核酸中残存的水溶性蛋白质，再加酒精清洗，去除残留的醇溶蛋白，最后经通常的低温干燥得核酸成品。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100345493C (zh) * | 2005-09-23 | 2007-10-31 | 中国农业大学 | 一种增味剂及其制备方法与应用 |
| CN103189512A (zh) * | 2010-10-29 | 2013-07-03 | 先正达参股股份有限公司 | 用于寄生体控制的植物miRNA的过表达 |
| CN105660987A (zh) * | 2016-01-20 | 2016-06-15 | 山东禹王生态食业有限公司 | 一种超声波辅助萃取管束装置及萃取大豆分离蛋白的方法 |
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2001
- 2001-05-10 CN CN 01113946 patent/CN1385438A/zh active Pending
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| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |