CN1305903C - 一种从沉淀组分ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ中回收白蛋白的方法 - Google Patents

一种从沉淀组分ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ中回收白蛋白的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1305903C
CN1305903C CN 200410077497 CN200410077497A CN1305903C CN 1305903 C CN1305903 C CN 1305903C CN 200410077497 CN200410077497 CN 200410077497 CN 200410077497 A CN200410077497 A CN 200410077497A CN 1305903 C CN1305903 C CN 1305903C
Authority
CN
China
Prior art keywords
albumin
iii
liquid
deposited components
protein
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN 200410077497
Other languages
English (en)
Other versions
CN1660903A (zh
Inventor
朱光祖
梅伟伶
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
GUANGDONG SHUANGLIN BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO., LTD.
Original Assignee
SHUANGLIN PHARMACY Co Ltd ZHANGJIANG DEVELOPMENT ZONE SANJIU GROUP
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SHUANGLIN PHARMACY Co Ltd ZHANGJIANG DEVELOPMENT ZONE SANJIU GROUP filed Critical SHUANGLIN PHARMACY Co Ltd ZHANGJIANG DEVELOPMENT ZONE SANJIU GROUP
Priority to CN 200410077497 priority Critical patent/CN1305903C/zh
Publication of CN1660903A publication Critical patent/CN1660903A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1305903C publication Critical patent/CN1305903C/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明公开了一种从沉淀组分I、II、III、IV中回收白蛋白的方法，首先用生理盐水溶解沉淀组分I、II、III、IV配制成蛋白液，然后加热处理使蛋白液中的杂蛋白变性，再通过加压过滤使固液分离，将上清液超滤浓缩得到白蛋白粗制品。本发明通过调整蛋白液的pH值、温度、蛋白浓度、离子强度、乙醇浓度，采用热处理除掉杂蛋白结合加压过滤分离技术，使残留在沉淀组分中的白蛋白能有效回收，回收量约为0.4-0.8千克白蛋白/吨血浆。采用本方法克服传统回收工艺中层析柱处理量小、离心分离固液投资大、能耗高的缺点，能有效提高白蛋白的总收得率，降低了生产成本，提高了生产利润。

Description

一种从沉淀组分I、II、III、IV中回收白蛋白的方法
技术领域
本发明涉及一种从制备人血浆蛋白的废弃沉淀中回收残留白蛋白的工艺。
背景技术
白蛋白是人血浆中含量最高的蛋白质，白蛋白作为治疗及营养补充剂在国内外已经大量应用。从人血浆中分离纯化白蛋白经典方法是E.J.Cohn教授创立的低温乙醇分级沉淀技术。该技术通过有效控制蛋白质沉淀的五个因素：pH值、温度、蛋白浓度、离子强度、乙醇浓度来逐级沉淀血浆中的不同蛋白质，一般步骤是首先沉淀组分I、II、III，然后沉淀组分IV，最后沉淀组分V即白蛋白粗制品。也可一步反应沉淀出组分I、II、III、IV，然后沉淀组分V得到白蛋白粗制品。
然而由于白蛋白的分离沉淀影响因素多，血浆中的白蛋白往往在分级沉淀的过程中有大量损失，损失率一般在40％，部分白蛋白夹带在组分沉淀I、II、III中，还有部颁白蛋白夹带在组分沉淀IV中，采用一步反应沉淀组分I、II、III、IV的白蛋白损失更多。
因此从组分沉淀中回收白蛋白是一项具有实际意义的工作。传统的白蛋白回收一般采用改变沉淀条件结合柱层析的方法，从组分沉淀中选择性吸附白蛋白从而达到回收的目的。
发明内容
为解决上述问题，本发明的目的是提供一种从沉淀组分I、II、III、IV中回收白蛋白的方法，其克服了传统回收工艺中层析柱处理量小、离心分离固液投资大、能耗高的缺点。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种从沉淀组分I、II、III、IV中回收白蛋白的方法，其特征在于包括以下步骤：①用生理盐水溶解沉淀组分I、II、III、IV配制成蛋白液；②加入稳定剂，加热处理使蛋白液中的杂蛋白变性；③通过加压过滤使固液分离；④将上清液超滤浓缩得到白蛋白粗制品；⑤进一步提纯，除去杂蛋白，制成白蛋白成品。
本发明通过调整蛋白液的pH值、温度、蛋白浓度、离子强度、乙醇浓度，采用热处理除掉杂蛋白结合加压过滤分离技术，使残留在组分I、II、III、IV中的白蛋白能有效回收，回收量约为0.4-0.8千克白蛋白/吨血浆。采用本方法克服传统回收工艺中层析柱处理量小、离心分离固液投资大、能耗高的缺点，能有效提高白蛋白的总收得率，降低了生产成本，提高了生产利润。
具体实施方式
以下通过详细的白蛋白回收步骤进一步阐述本发明的技术方案，包括以下顺序步骤(按照吨血浆产生的组分沉淀I、II、III、IV计算)：
首先，将组分沉淀I、II、III、IV用10-12倍重量的生理盐水溶解，配制成蛋白含量3-4％的蛋白液，要保证足够的时间使白蛋白充分溶解。
向上述蛋白液按照每吨血浆添加600-750克稳定剂的比例添加稳定剂，稳定剂可选用辛酸钠，调节pH6.2-6.6，添加乙醇到溶液的百分比含量的6-10％。
然后，将蛋白液加入恒温水箱热处理40-60min，恒温温度控制在63±1.5℃。热处理结束后快速冷却到10-18℃，搅拌一小时以上，调节pH4.0-4.4。
然后进行压滤。压滤前压滤机用含硅藻土的洗液预处理，洗液用蒸馏水300升，酒精28±3升，氯化钠3000克配制成，温度10-18℃。向待压滤的蛋白液中按照每千克血浆添加50克助滤剂硅藻土，然后将其泵入压滤机中过滤，收集滤出液。过滤完毕按照每吨血浆600升洗液的比例用洗液冲洗压滤机，洗出液和滤出液合并。
滤液调节pH7.0-7.2，用规格为NMWL10000的超滤机浓缩到蛋白含量10％即回收白蛋白的粗制品。
最后调整参数进一步除去杂蛋白提高白蛋白的纯度，制成白蛋白的最终成品。

Claims (6)

1.一种从沉淀组分I、II、III、IV中回收白蛋白的方法，其特征在于包括以下步骤：
①用生理盐水溶解沉淀组分I、II、III、IV配制成蛋白液，蛋白液的蛋白含量为3-4％；
②加入稳定剂后将蛋白液pH调节至6.2～6.6，并添加乙醇到百分比含量的6～10％，加热处理使蛋白液中的杂蛋白变性，其中加热温度为63±1.5℃，加热时间为40～60分钟，加热处理后，快速冷却蛋白液至10～18℃，搅拌1小时以上，并调节pH至4.0～4.4；
③通过加压过滤使固液分离；
④将上清液超滤浓缩得到白蛋白粗制品；
⑤进一步提纯，除去杂蛋白，制成白蛋白成品。
2.根据权利要求1所述的一种从沉淀组分I、II、III、IV中回收白蛋白的方法，其特征在于：所述步骤②中的稳定剂为辛酸钠。
3.根据权利要求1所述的一种从沉淀组分I、II、III、IV中回收白蛋白的方法，其特征在于：所述步骤③中，向蛋白液中按照每千克血浆添加50克助滤剂硅藻土后，泵入压滤机中过滤，收集滤出液。
4.根据权利要求1所述的一种从沉淀组分I、II、III、IV中回收白蛋白的方法，其特征在于：所述步骤③中，压滤前的压滤机先用含硅藻土的洗液进行预处理。
5.根据权利要求4所述的一种从沉淀组分I、II、III、IV中回收白蛋白的方法，其特征在于：所述的洗液配比为每300升蒸馏水加入酒精28±3升，氯化钠3000克。
6.根据权利要求1所述的一种从沉淀组分I、II、III、IV中回收白蛋白的方法，其特征在于：所述步骤④中进行超滤浓缩的溶液pH调节至7.0～7.2。
CN 200410077497 2004-12-22 2004-12-22 一种从沉淀组分ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ中回收白蛋白的方法 Active CN1305903C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 200410077497 CN1305903C (zh) 2004-12-22 2004-12-22 一种从沉淀组分ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ中回收白蛋白的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 200410077497 CN1305903C (zh) 2004-12-22 2004-12-22 一种从沉淀组分ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ中回收白蛋白的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1660903A CN1660903A (zh) 2005-08-31
CN1305903C true CN1305903C (zh) 2007-03-21

Family

ID=35010483

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN 200410077497 Active CN1305903C (zh) 2004-12-22 2004-12-22 一种从沉淀组分ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ中回收白蛋白的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN1305903C (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101792490B (zh) * 2010-01-19 2012-06-13 广东卫伦生物制药有限公司 回收Cohn氏组分Ⅳ沉淀中白蛋白的方法
CN101851604B (zh) * 2010-04-20 2012-04-18 熊军 一种人血白蛋白的生产方法
CN102552906B (zh) * 2012-01-11 2013-11-06 西安回天血液制品有限责任公司 静注人免疫球蛋白的生产工艺

Also Published As

Publication number Publication date
CN1660903A (zh) 2005-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102115774B (zh) 一种酶法制备植物多肽的方法
CN109761833B (zh) 一种l-亮氨酸的分离纯化方法
CN102178951A (zh) 一种生产静注人免疫球蛋白的方法
SU1590031A3 (ru) Способ получени альбумина и гемоглобина
CN1740189A (zh) 一种提取大豆分离蛋白的方法
CN102552906B (zh) 静注人免疫球蛋白的生产工艺
CN1175753C (zh) 无苦味大豆多肽粉的生产方法
CN102311496B (zh) 一种从低温乙醇法组份ⅰ+ⅱ+ⅲ沉淀中回收白蛋白的方法
CN111418700A (zh) 一种金枪鱼肽、其提取方法及作为降压剂的应用
CN1305903C (zh) 一种从沉淀组分ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ中回收白蛋白的方法
CN101333245B (zh) 一种人血白蛋白的分离方法
CN1058278C (zh) 甜菜红色素的制备
CN103772186A (zh) 一种发酵有机酸的精制方法
CN106666755A (zh) 一种蚕蛹复合蛋白肽口服液的制备方法
CN104004084A (zh) 一种人血白蛋白的生产方法
CN112521487A (zh) 一种改进的人血白蛋白生产工艺
CN110759959A (zh) 一种从发酵液中分离提取维生素b12的方法
CN1313488C (zh) 从组分沉淀123中回收白蛋白的方法
CN1220094A (zh) 一种亚麻籽综合利用方法
CN116281907A (zh) 一种利用玉米浸泡水制备磷酸二氢钾和磷酸氢镁的工艺方法
CN108191868B (zh) 一种核黄素酸溶精制母液的处理方法
CN104004090A (zh) 一种人免疫球蛋白的制备方法
CN1775744A (zh) 一种提取亮氨酸的方法
CN104004091A (zh) 一种人免疫球蛋白的制备工艺
CN1273964A (zh) 杜仲叶制备绿原酸工艺

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C56 Change in the name or address of the patentee

Owner name: GUANGDONG SHUANGLIN BIO-PHARMACEUTICAL CO., LTD.

Free format text: FORMER NAME: SHUANG-LIN PHARMACEUTICAL CO., LTD., SANJIU GROUP ZHANJIANG DEVELOPMENT ZONE

CP03 Change of name, title or address

Address after: No. three, No. 40, Haibin Road, Guangdong, Zhanjiang

Patentee after: GUANGDONG SHUANGLIN BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO., LTD.

Address before: No. three, No. 40, Haibin Road, Guangdong, Zhanjiang

Patentee before: Shuanglin Pharmacy Co., Ltd., Zhangjiang Development Zone, Sanjiu Group

EE01 Entry into force of recordation of patent licensing contract

Assignee: Zhengzhou Banghe Bio-Pharmaceutical Corporation

Assignor: GUANGDONG SHUANGLIN BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO., LTD.

Contract fulfillment period: 2007.7.1 to 2014.7.1 contract change

Contract record no.: 2009440001505

Denomination of invention: Method for recovering albumin from precipitation component I, II, III and IV

Granted publication date: 20070321

License type: Exclusive license

Record date: 20091010

LIC Patent licence contract for exploitation submitted for record

Free format text: EXCLUSIVE LICENSE; TIME LIMIT OF IMPLEMENTING CONTACT: 2007.7.1 TO 2014.7.1; CHANGE OF CONTRACT

Name of requester: ZHENGZHOU BANGHE BIO-PHARMACEUTICAL CO., LTD.

Effective date: 20091010

EM01 Change of recordation of patent licensing contract

Change date: 20100607

Contract record no.: 2009440001505

Assignee after: Banghe Pharmaceutical Co., Ltd.

Assignee before: Zhengzhou Banghe Bio-Pharmaceutical Corporation

PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right

Denomination of invention: Method for recovering albumin from precipitation component I, II, III and IV

Effective date of registration: 20100803

Granted publication date: 20070321

Pledgee: Zhanjiang commercial bank Limited by Share Ltd Jinxiu branch

Pledgor: GUANGDONG SHUANGLIN BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO., LTD.

Registration number: 2010990000834

EC01 Cancellation of recordation of patent licensing contract

Assignee: Banghe Pharmaceutical Co., Ltd.

Assignor: GUANGDONG SHUANGLIN BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO., LTD.

Contract record no.: 2009440001505

Date of cancellation: 20120824

PLDC Enforcement, change and cancellation of contracts on pledge of patent right or utility model
PM01 Change of the registration of the contract for pledge of patent right

Change date: 20150624

Registration number: 2010990000834

Pledgee after: Guangdong City branch of the Limited by Share Ltd Guangdong Bank Holiday

Pledgee before: Zhanjiang commercial bank Limited by Share Ltd Jinxiu branch

PC01 Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right

Date of cancellation: 20150814

Granted publication date: 20070321

Pledgee: Guangdong City branch of the Limited by Share Ltd Guangdong Bank Holiday

Pledgor: GUANGDONG SHUANGLIN BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO., LTD.

Registration number: 2010990000834

PLDC Enforcement, change and cancellation of contracts on pledge of patent right or utility model