CN1304428C - 一种利用水华蓝藻提取多糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用水华蓝藻提取多糖的方法。首先是水华蓝藻的机械收获、经浓缩、脱水、干燥、粉碎；其次是多糖的提取；第三是收集藻多糖溶液；第四是多糖的纯化；第五是多糖的干燥。本发明方法易行、操作方便、设备简单、产量高、产品质量好、安全可靠。
Description
技术领域
本发明涉及环境保护、生物技术和资源利用领域，更具体涉及一种利用水华蓝藻提取多糖的方法。
背景技术
近年来，我国很多河流和湖泊都不同程度地受到了污染，如江苏的太湖，安徽的巢湖，云南的滇池，它们在不同季节都不同程度地爆发蓝藻水华。蓝藻水华不仅直接影响水质和水体的可利用性，而且危害周边人类和禽畜的健康，损害水生态系统。去除水面的大量藻类生物量，既可以削减湖内的二次污染，又可以将其利用作为资源，从而变废为宝。其中，水华蓝藻多糖的提取是一个有应用前景的方向。
藻类多糖可以改变溶液流动学特征，增加溶液的粘度，形成稳定凝胶，可以作为絮凝剂；多糖大分子的亲水性和疏水性，可以作为乳化剂或生物凝聚剂，其结合电荷的能力，可用于去除废水中的重金属离子。因此，它们可以用于食品工业、制药工业、化妆品工业、纺织品工业和石油工业等。
目前利用的藻多糖大多从大型海藻和螺旋藻中提取得到，这些藻的生产成本较高或很高，从而抬高了藻多糖的价格。经检索未见到一种利用水华蓝藻提取多糖的方法被公开使用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用水华蓝藻提取多糖的方法，此方法简便，操作方便、设备简单、安全可靠，成本低，产量高，产品质量好，适宜于工业化生产。
为了达到上述目的，本发明采用了以下技术措施：
从水华蓝藻中提取多糖的具体步骤如下：
1、水华蓝藻粉的制备：
采用从富营养湖泊或水库、河道等水体中收获的水华蓝藻，经浓缩、脱水、干燥、粉碎后得到的蓝藻粉。
2、蓝藻粉中抽提多糖：
在蓝藻藻粉中加入15-20倍重量的蒸馏水，充分湿润，浸泡2-3小时，然后在78-82℃下，利用搅拌器不停地搅拌抽提3-5小时，在离心机中，5000-8000g离心10-15min，收集上清液，向上清液中加入等体积的氯仿-正丁醇(4-7∶1，v/v)溶液，振荡20-30min，5000-8000g离心10-15min，下层为有机溶剂，中层为藻蛋白沉淀，上层即为藻多糖溶液。
3、收集藻多糖溶液：在多糖溶液中加入3-5倍体积的预先在0℃下冷冻40-60min后的无水乙醇，摇匀，静置10-20min，析出的白色絮状沉淀物即为水华蓝藻多糖，5000-8000g离心5-10min收集多糖。
4、纯化：将上述所得粗多糖溶于4-6倍蒸馏水(w/v)中，用10-15倍(w/v)0℃冷的无水乙醇洗涤后，5000-8000g离心5-10min收集多糖沉淀物。
5、干燥：将收集到的多糖沉淀物在-60--110℃下冷冻干燥即得到多糖产品。
本发明与现有技术相比，具有以下优点和显著的效果：方法易行、操作方便、设备简单、经济快捷、产量高、产品质量好、安全可靠，适用于工业化规模生产。
具体实施方式
提取水华蓝藻多糖的具体实施步骤如下：
A、水华蓝藻粉制备：采用从富营养湖泊或水库、河道等水体中收获的水华蓝藻，经浓缩、脱水、干燥、粉碎后得到的蓝藻粉。
B、在蓝藻粉中抽提多糖：
称取蓝藻粉，在蓝藻粉中加入20倍重量的蒸馏水，充分湿润，在20-25℃下浸泡3小时。然后在80℃下，利用搅拌器不停地搅拌抽提4小时。利用大型离心机8000g离心10-15min，收集上清液。向上清液中加入等体积的氯仿-正丁醇(5∶1，v/v)溶液，振荡20-30min，振荡过程中注意整个溶液必须充分振荡。8000g离心10-15min。下层为有机溶剂，中层为藻类蛋白沉淀，上层即为藻多糖溶液。
C、收集藻多糖溶液：在多糖溶液中加入3-5倍体积的预先在0℃下冷冻60min后的无水乙醇，充分摇匀，静置10-20min，析出的白色絮状沉淀物即为水华蓝藻多糖。8000g离心5-10min收集多糖。
D、纯化：将上述所得粗多糖溶于5倍蒸馏水(w/v)中，用10-15倍(w/v)0℃冷的无水乙醇洗涤后，5000-8000g离心5-10min收集多糖沉淀物。
E、干燥：将收集到的多糖沉淀物在-100℃下冷冻干燥即得到多糖产品。
Claims (1)
1、一种利用水华蓝藻提取多糖的方法，包括下列步骤：
A、水华蓝藻粉的制备：采用从富营养湖泊或水库、河道水体中收获的水华蓝藻，经浓缩、脱水、干燥、粉碎后得到的蓝藻粉；
B、蓝藻粉中抽提多糖：在蓝藻藻粉中加入15-20倍重量的蒸馏水，充分湿润，浸泡2-3小时，然后在78-82℃下，利用搅拌器不停地搅拌抽提3-5小时，在离心机中，5000-8000g离心10-15min，收集上清液，向上清液中加入等体积的氯仿-正丁醇5∶1，v/v溶液，振荡20-30min，5000-8000g离心10-15min，收集上层溶液，该溶液即为粗多糖溶液；
C、收集粗藻多糖溶液：在粗多糖溶液中加入3-5倍体积的预先在0℃下冷冻40-60min后的无水乙醇，摇匀，静置10-20min，析出的白色絮状沉淀物即为水华蓝藻粗多糖，5000-8000g离心5-10min收集粗多糖；
D、纯化：将上述所得粗多糖溶于4-6倍蒸馏水中，用10-15倍0℃冷的无水乙醇洗涤后，5000-8000g离心5-10min收集多糖沉淀物；
E、干燥：将收集到的多糖沉淀物在-60--110℃下冷冻干燥即得到多糖产品。
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