CN106701311A - 一种采用湿藻、一步法制备微藻油及蛋白多糖的方法 - Google Patents
一种采用湿藻、一步法制备微藻油及蛋白多糖的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106701311A CN106701311A CN201611239076.5A CN201611239076A CN106701311A CN 106701311 A CN106701311 A CN 106701311A CN 201611239076 A CN201611239076 A CN 201611239076A CN 106701311 A CN106701311 A CN 106701311A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- algae
- ethanol
- microalgae
- grease
- residue
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 87
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 title claims abstract description 65
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title abstract description 10
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title abstract description 10
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title abstract description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title abstract description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title abstract description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 95
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 43
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 36
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 33
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 18
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 15
- 241000180279 Chlorococcum Species 0.000 claims description 11
- 241001060422 Picochlorum Species 0.000 claims description 11
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 claims description 8
- 241000159660 Nannochloropsis oculata Species 0.000 claims description 6
- 241000195649 Chlorella <Chlorellales> Species 0.000 claims description 5
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000013517 stratification Methods 0.000 claims description 4
- 241000196305 Nannochloris Species 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 241000195628 Chlorophyta Species 0.000 claims description 2
- 241000224474 Nannochloropsis Species 0.000 claims description 2
- 239000004519 grease Substances 0.000 abstract description 66
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 abstract description 47
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 14
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 13
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 abstract description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 abstract 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 abstract 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000005188 flotation Methods 0.000 abstract 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 25
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 17
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 12
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 12
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 8
- 125000005909 ethyl alcohol group Chemical group 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 239000003225 biodiesel Substances 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 239000002893 slag Substances 0.000 description 2
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- ALSTYHKOOCGGFT-KTKRTIGZSA-N (9Z)-octadecen-1-ol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCO ALSTYHKOOCGGFT-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000195651 Chlorella sp. Species 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000509521 Nannochloropsis sp. Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000206744 Phaeodactylum tricornutum Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- -1 egg White polysaccharide Chemical class 0.000 description 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 1
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 229940055577 oleyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- XMLQWXUVTXCDDL-UHFFFAOYSA-N oleyl alcohol Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCCCCO XMLQWXUVTXCDDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 238000009704 powder extrusion Methods 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003466 welding Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B1/00—Production of fats or fatty oils from raw materials
- C11B1/10—Production of fats or fatty oils from raw materials by extracting
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种采用湿藻、一步法制备微藻油及蛋白多糖的方法。将乙醇或乙醇溶液加入到含水微藻泥中，然后搅拌提取，采用过滤法、静置分层或离心分层分离藻渣，收集上层液，上层液浓缩后得到粗油脂，藻渣经清洗、干燥得到蛋白多糖粗品。本发明采用了脂溶性较强的有机溶剂乙醇提取油脂，对人体和环境无污染，有利于保持微藻高附加值活性物质的活性，以便于进一步开发利用藻渣，降低生产成本；所使用的藻泥含水量高，通过简单的离心或气浮采收方式就能获得，不需要进行干燥处理，减少了干燥脱水能量输出；破壁和提取同时进行，处理时间短、操作简便、提取效率高，便于大规模提取油脂。
Description
技术领域
本发明属于生物领域，具体涉及一种采用湿藻、一步法制备微藻油及蛋白多糖的方法。
背景技术
微藻是一类体积较小、可进行光合作用的低等植物，其油脂可以作为生物柴油、医药保健品、化妆品、功能性食品等的重要原料，但缺乏高效、低成本的提油技术，限制了微藻作为油脂原料的商业化应用。传统提油方法采用有机溶剂从干藻粉中提取油脂，该方法虽然有较高的提油效率，但是提油前需要对藻粉进行干燥处理，这就意味着大量时间、能量、人力将被消耗，据统计湿藻泥干燥所消耗的能量占整个提油能量的80％以上。此外，传统方法所使用的有机溶剂大多数毒性较高，如氯仿、甲醇等，对人体和环境有一定的危害，如果有毒溶剂在后续油脂精炼过程无法完全除去，生产的油脂将难以应用在功能性食品、保健品、化妆品等领域。传统的大宗油料植物压榨提取法也无法应用在微藻油脂的提取中。综上所述，目前传统方法均无法简单复制并应用在微藻油提取过程中，提油技术成为阻碍微藻油商业化应用的主要瓶颈。因此，开发一种高效、低成本的微藻油制备技术是实现其商业化应用的关键环节。
与传统的干法提油方法相比，湿法提油是一种更理想的提取方式，因为湿法提油不需要对藻泥进行干燥处理，可大幅降低能量消耗量。近年来，已有部分报道研究了微藻湿法提油技术。如超声波辅助有机溶剂的方法可以从藻泥中提取油脂；微波、有机溶剂结合，实现了微藻一步湿法提油；超临界萃取法从湿藻中提取油脂，也取得了非常好的效果。但是这些方法仍然存在提取温度高、耗时长、成本高等问题，难以实现工业化生产。迄今为止，世界上仍没有建立起任何一种适用于大规模微藻油提取的方法。
乙醇作为一种安全有效的有机溶剂，对人和环境无害，而且对脂溶性物质具有较强的亲和力，可有效地用于提取油脂。据报道乙醇在提取三角褐指藻粉油脂的过程中，具有较高的提取效率。但目前为止还没有研究报道过在常温常压下采用乙醇有效地将湿藻中微藻油提取出来的方法。本专利通过大量的研究，提出一种常温常压下采用无毒性的有机溶剂—乙醇提取微藻油的工艺，该工艺操作简便、安全有效、成本低廉，此外，还可以同步获得蛋白多糖制品。
如何有效提取微藻细胞中的油脂，目前国内外已公布了若干相关技术发明，但这些技术并不能很好的进行推广和使用，现举例对已公开的代表性技术发明进行描述：
(1)一种微藻油脂的提取方法(CN201410585382.9)，本发明公开了一种微藻油脂的提取方法，包括：1)将微藻原料与低碳醇混合均匀，然后进行微波处理，将微藻细胞破碎，得到处理后的混合物料；2)向步骤1)得到的物料中加入多羟基聚糖类,混合反应，固液分离，得到液相(低碳醇相和水相)；3)对步骤2)得到的液相进行蒸馏提纯，得到微藻油脂，低碳醇可回收循环使用。该工艺过程复杂，同时微波处理过程耗能巨大的，因此，并不容易进行规模化推广。
(2)微藻油脂提取方法(CN201110433196.X)，本发明提供了一种微藻油脂提取方法，包括调节微藻藻液的pH值，加热加压处理，随后恢复到常压状态，加入生物酶混合，所述生物酶分两步加入，先加入非蛋白酶，再加入蛋白酶。该工艺规模放大存在较大问题，同时酶的活性也是影响提取的重要环节，难以进行精确控制。
(3)一种从微藻提取油脂的方法(CN201110352665.5)，本发明提供一种从微藻提取油脂的方法，其包括下列步骤：1)将微藻藻粉挤压膨化；2)将步骤1)中得到的藻粉通过亚临界流体萃取方法进行提取，以得到混合油和除油藻粕。本发明用到亚临界流体萃取技术，亚临界萃取设备成本较高，难以进行低成本推广。
(4)一种微藻油脂的提取方法(CN201110313829.3)，本发明公开一种微藻油脂的提取方法，包括如下内容：以藻泥或干粉形态的微藻为原料，在采用微波辐射破碎预处理后的微藻的同时利用有机溶剂进行萃取，萃取结束后分离各物质得到微藻油脂。本发明同样用到耗能巨大的微波处理工艺，能耗和设备投入较大，难以进行低成本推广。
(5)一种利用亚临界醇类从微藻湿藻泥中提取油脂的方法(CN201010136309.5)，本发明公开一种从微藻湿藻泥中提取油脂的方法：加入低级醇类溶剂润洗，利用醇水的完全互溶性实现微藻细胞的脱水，离心后获得的微藻细胞加入低级醇类溶剂，于高压反应釜内将体系加热到亚临界状态，降低低级醇的极性，提高其对微藻油脂的溶解度，微藻细胞内的油脂因溶解而浸出，再降至室温或低温，微藻油脂因在低级醇中的溶解度降低而从醇油互溶体系中析出,实现油醇分离获得微藻油脂。该工艺虽然具有较高的创新性，但后续大规模推广存在较大问题，同时工艺中用到高压反应装置，对设备建造和厂区规划具有较高的要求。
(6)微藻油脂的提取方法(CN201010607927.3)。本发明提供一种微藻油脂的提取方法，将微藻粉在甲醇、乙酸或者它们的混合溶剂中浸取，然后将甲醇、乙酸或者它们的混合物蒸发，以得到微藻油脂。本技术中以甲醇作为提取剂，生产出的油脂将难以应用在医药保健品、化妆品、功能性食品等领域。
(7)一种同时提取微藻油脂及微藻多糖的方法(CN201410754045.8)，本发明提供一种同时提取微藻油脂及微藻多糖的方法，将微藻用植物细胞壁降解酶进行处理获得微藻预处理物；将所述微藻预处理物在温度为80-120℃和压强为0.05-0.25MPa的条件下处理10-30min获得微藻二级预处理物，将所述微藻二级预处理物用于提取微藻油脂及微藻多糖。该技术仅仅获得制备微藻油脂和多糖的原料，属于微藻细胞破碎工艺。
(8)微波辅助绿色溶剂微藻湿法提油方法(CN201210506773.8)，该发明公开了一种微藻湿法提油的方法，其包括在微藻泥中加入中等极性溶剂并进行微波加热萃取。该发明利用到微波辅助工艺，存在耗能大的缺点。
(9)一种湿法提取纯化微藻藻油的方法(CN201410312879.3)，该发明提供一种湿法来提取纯化微藻藻油的方法，包括如下步骤：1)向采收的微藻藻泥中加入乙醇溶液，快速搅拌均匀，离心，收集沉淀，获得脱水处理后的藻泥；2)向步骤1)获得的脱水处理后的藻泥中加入无毒性或微毒性的有机溶剂或其水溶液，同时对藻泥进行细胞破壁处理，提取微藻中的粗油；3)离心，收集步骤2)提取得到的粗油，向其中加入水和无机盐，搅拌均匀，形成粗油水溶液，再向粗油水溶液中加入正己烷，混合均匀后静置分层或离心分层，收集上层溶液；4)将上层溶液进行脱溶剂处理，获得微藻藻油。该工艺存在乙醇脱水的过程，同时还存在细胞破碎处理的高耗能过程，并不是最优的油脂制备工艺。
通过对现有发明的分析发现：已经公开的微藻油提取技术大多存在不足，并不能很好地进行推广和使用。
发明内容
本发明的目的是提供一种高效、低成本、绿色环保的新型采用湿藻、一步法制备微藻油及蛋白多糖的方法。
微藻细胞壁具有非常好的溶剂穿透性，在用有机溶剂处理细胞后，通过电镜下观察发现细胞表面出现明显的穿孔，这些穿孔有利于脂类物质释放至胞外，综合考虑微藻细胞的上述特性，本发明提出一种常温常压下利用无毒性的有机溶剂—乙醇提取微藻油的工艺，该工艺操作简便、安全有效、成本低廉，此外，还可以同步获得蛋白多糖制品，获得的油脂和蛋白多糖产品可用于保健品、化妆品、生物能源、饲料、饵料等的开发，从而实现了本发明的目的。
本发明的采用湿藻、一步法制备微藻油及蛋白多糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：
将乙醇或乙醇溶液加入到含水微藻泥中，然后搅拌提取，采用过滤法、静置分层或离心分层分离藻渣，收集上层液，上层液浓缩后得到粗油脂，藻渣经清洗、干燥得到蛋白多糖粗品。
优选，所述的藻渣再次加入到乙醇或乙醇溶液中，然后搅拌提取，采用过滤法、静置分层或离心分层分离藻渣，收集上层液，藻渣如此重复用乙醇或乙醇溶液提取若干次，最后剩下的藻渣经清洗、干燥得到蛋白多糖粗品，所有的上层液合并经浓缩后得到粗油脂。
所述的乙醇溶液可以为不同浓度的乙醇水溶液。考虑到后续油脂的用途，乙醇可以选用食用级乙醇和工业级乙醇。工业级乙醇提取的油脂用于生物柴油的原料，食品级乙醇提取的油脂可用于保健品、化妆品、医药和饲料保健品的生产，乙醇浓度为80～100％。
所述的乙醇或乙醇溶液的加入量为每克含水微藻泥加入2-6毫升乙醇或乙醇溶液，优选为4-5毫升。
所述的提取条件为常温、常压，温度范围为25-35℃，提取时间10-50min，优选地40min。
所述的含水微藻泥的含水量在70～95％。
所述藻种为但不限于绿藻门中的小球藻(Chlorella)、微绿球藻(Nannochloris)、皮克绿球藻(Picochlorum)，真眼点藻纲中的拟微绿球藻(Nannochloropsis)。
所述上层液浓缩获得粗油脂的过程，浓缩可以采用减压蒸发的方法，回收的乙醇可以循环利用。
所述的藻渣的清洗过程，采用去离子水或蒸馏水反复冲洗，然后通过晒干、烘干或冷冻干燥的方法获得脱脂脱色的蛋白多糖粗品。
本发明的有益效果是：
本发明采用了脂溶性较强的有机溶剂乙醇提取油脂，对人体和环境无污染，有利于保持微藻高附加值活性物质的活性，以便于进一步开发利用藻渣，降低生产成本；所使用的藻泥含水量高，通过简单的离心或气浮采收方式就能获得，不需要进行干燥处理，减少了干燥脱水能量输出；破壁和提取同时进行，处理时间短、操作简便、提取效率高，便于大规模提取油脂。
具体实施方式：
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1
培养得到的皮克绿球藻(Picochlorum sp.)藻泥1g(含水量90.02wt％，油脂含量为33.18％wt％)，将藻泥放在10ml试管中，加入2ml无水乙醇，溶剂比为2:1(ml/g)。在室温条件下(25℃)搅拌处理10min，离心后收集上层液，上层液吹干后所得到的油脂产量为22.62g/100g，计算得到提取效率为68.17％，下层的脱脂藻渣经去离子水反复清洗后、晒干制备获得蛋白多糖粗品。
实施例2
培养得到的皮克绿球藻(Picochlorum sp.)藻泥1g(含水量90.02wt％，油脂含量为33.18％wt％)，将藻泥放在10ml试管中，加入2ml无水乙醇，溶剂比为2:1(ml/g)。在25℃搅拌处理40min，离心后收集上层液，上层液吹干后所得到的油脂产量为25.20g/100g，计算得到提取效率为75.95％，下层的脱脂藻渣经去离子水反复清洗后、晒干制备获得蛋白多糖粗品。
实施例3
培养得到的皮克绿球藻(Picochlorum sp.)藻泥1g(含水量90.02wt％，油脂含量为33.18％wt％)，将藻泥放在10ml试管中，加入6ml无水乙醇，溶剂比为6:1(ml/g)。在25℃搅拌处理10min，离心后收集上层液，上层液吹干后所得到的油脂产量为30.84g/100g，计算得到提取效率为92.95％，下层的脱脂藻渣经去离子水反复清洗后、烘干制备获得蛋白多糖粗品。
实施例4
培养得到的皮克绿球藻(Picochlorum sp.)藻泥1g(含水量90.02wt％，油脂含量为33.18％wt％)，将藻泥放在10ml试管中，加入6ml无水乙醇，溶剂比为6:1(ml/g)。在25℃搅拌处理40min，离心后收集上层液，上层液吹干后所得到的油脂产量为32.81g/100g，计算得到提取效率为98.88％，下层的脱脂藻渣经去离子水反复清洗后、晒干制备获得蛋白多糖粗品。
实施例5
培养得到的皮克绿球藻(Picochlorum sp.)藻泥1g(含水量90.02wt％，油脂含量为33.18％wt％)，将藻泥放在10ml试管中，加入4ml无水乙醇，溶剂比为4:1(ml/g)。在35℃搅拌处理2.5min，离心后收集上层液，上层液减压浓缩所得到的油脂产量为27.73g/100g，计算得到提取效率为83.57％，下层的脱脂藻渣经去离子水反复清洗后、冷冻干燥制备获得蛋白多糖粗品。
实施例6
培养得到的皮克绿球藻(Picochlorum sp.)藻泥1g(含水量90.02wt％，油脂含量为33.18％wt％)，将藻泥放在10ml试管中，加入4ml无水乙醇，溶剂比为4:1(ml/g)。在35℃搅拌处理47.5min，离心后收集上层液，上层液吹干后所得到的油脂产量为31.51g/100g，计算得到提取效率为94.97％，下层的脱脂藻渣经去离子水反复清洗后、冷冻干燥制备获得蛋白多糖粗品。
实施例7
培养得到的皮克绿球藻(Picochlorum sp.)藻泥1g(含水量90.02wt％，油脂含量为33.18％wt％)，将藻泥放在10ml试管中，加入4ml无水乙醇，溶剂比为4:1(ml/g)。在35℃搅拌处理25min，离心后收集上层液，减压浓缩后所得到的油脂产量为31.64g/100g，计算得到提取效率为95.36％，下层的脱脂藻渣经去离子水反复清洗后、冷冻干燥制备获得蛋白多糖粗品。
实施例8
培养得到的皮克绿球藻(Picochlorum sp.)藻泥1g(含水量90.02wt％，油脂含量为33.18％wt％)，将藻泥放在10ml试管中，加入5ml无水乙醇，溶剂比为5:1(ml/g)。在26℃搅拌处理37min，离心后收集上层液，上层液吹干后所得到的油脂产量为33.04g/100g，计算得到提取效率为99.58％，下层的脱脂藻渣经去离子水反复清洗后、冷冻干燥制备获得蛋白多糖粗品。
实施例9
培养得到的皮克绿球藻(Picochlorum sp.)藻泥250g(含水量90.02wt％，油脂含量为33.18％wt％)，将藻泥放入烧杯中，加入纯度为体积分数93％乙醇水溶液，溶剂比为5:1(ml/g)。在26℃搅拌处理37min，收集上层液进行浓缩得到第一次提取所得的油脂，下层的藻渣采用相同的方法重复提取一次，所得油脂与第一次提取所得的油脂合并，减压浓缩后所得到的油脂产量为32.97g/100g，计算得到提取效率为99.37％，剩下的藻渣即为脱脂藻渣，经去离子水反复清洗后、冷冻干燥后获得蛋白多糖粗品，测定蛋白多糖粗品中蛋白质含量为57.8g/100g，多糖含量为37.8g/100g。
实施例10
培养得到的小球藻(Chlorella sp.)藻泥250g(含水量89.51wt％，油脂含量为36.21％wt％)，将藻泥放入烧杯中，加入体积分数93％乙醇水溶液，溶剂比为4:1(ml/g)，在26℃搅拌处理40min，收集上层液进行浓缩得到第一次提取所得的油脂，下层的藻渣采用相同的方法重复一次，所得油脂与第一次提取所得的油脂合并，吹干后所得到的油脂产量为31.23g/100g，计算得到提取效率为86.27％，剩下的藻渣即为脱脂藻渣，经去离子水反复清洗后、冷冻干燥后获得蛋白多糖粗品，测定蛋白多糖粗品中蛋白质含量为58.9g/100g，多糖含量为27.7g/100g。
实施例11
培养得到的拟微绿球藻(Nannochloropsis sp.)藻泥250g(含水量92.02wt％，油脂含量为45.35％wt％)，将藻泥放入烧杯中，加入93％乙醇，溶剂比为5:1(ml/g)，在35℃搅拌处理40min，收集上层液进行浓缩得到第一次提取所得的油脂，下层的藻渣采用相同的方法重复一次，所得油脂与第一次提取所得的油脂合并，减压浓缩后所得到的油脂产量为39.89g/100g，计算得到提取效率为87.96％，剩下的藻渣即为脱脂藻渣，经去离子水反复清洗后、冷冻干燥后获得蛋白多糖粗品，测定蛋白多糖粗品中蛋白质含量为22.3g/100g，多糖含量为62.5g/100g。
实施例12
培养得到的微绿球藻(Nannochloris sp.)藻泥250g(含水量95.02wt％，油脂含量为16.35％wt％)，将藻泥放入烧杯中，加入93％乙醇，溶剂比为5:1(ml/g)，在30℃搅拌处理35min，收集上层液进行浓缩，收集上层液进行浓缩得到第一次提取所得的油脂，下层的藻渣采用相同的方法重复一次，所得油脂与第一次提取所得的油脂合并，减压浓缩后所得到的油脂产量为12.29g/100g，计算得到提取效率为75.19％，剩下的藻渣即为脱脂藻渣，经去离子水反复清洗后、冷冻干燥后获得蛋白多糖粗品，测定蛋白多糖粗品中蛋白质含量为35.5g/100g，多糖含量为40.9g/100g。
Claims (10)
1.一种采用湿藻、一步法制备微藻油及蛋白多糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：
将乙醇或乙醇溶液加入到含水微藻泥中，然后搅拌提取，采用过滤法、静置分层或离心分层分离藻渣，收集上层液，上层液浓缩后得到粗油脂，藻渣经清洗、干燥得到蛋白多糖粗品。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的藻渣再次加入到乙醇或乙醇溶液中，然后搅拌提取，采用过滤法、静置分层或离心分层分离藻渣，收集上层液，藻渣如此重复用乙醇或乙醇溶液提取若干次，最后剩下的藻渣经清洗、干燥得到蛋白多糖粗品，所有的上层液合并经浓缩后得到粗油脂。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的乙醇溶液为不同浓度的乙醇水溶液。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的乙醇水溶液为体积分数80～100％乙醇水溶液。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的乙醇或乙醇溶液的加入量为每克含水微藻泥加入2-6毫升乙醇或乙醇溶液。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的乙醇或乙醇溶液的加入量为每克含水微藻泥加入4-5毫升乙醇或乙醇溶液。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的提取，其温度范围为25-35℃，提取时间10-50min。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的含水微藻泥的含水量在70～95％。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述藻种为但不限于绿藻门中的小球藻(Chlorella)、微绿球藻(Nannochloris)、皮克绿球藻(Picochlorum)或真眼点藻纲中的拟微绿球藻(Nannochloropsis)。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的浓缩是采用减压蒸发的方法浓缩。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201611239076.5A CN106701311A (zh) | 2016-12-28 | 2016-12-28 | 一种采用湿藻、一步法制备微藻油及蛋白多糖的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201611239076.5A CN106701311A (zh) | 2016-12-28 | 2016-12-28 | 一种采用湿藻、一步法制备微藻油及蛋白多糖的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106701311A true CN106701311A (zh) | 2017-05-24 |
Family
ID=58896900
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201611239076.5A Pending CN106701311A (zh) | 2016-12-28 | 2016-12-28 | 一种采用湿藻、一步法制备微藻油及蛋白多糖的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106701311A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110540896A (zh) * | 2019-09-29 | 2019-12-06 | 武汉轻工大学 | 一种含epa微拟球藻藻油的制备方法 |
| CN110669581A (zh) * | 2019-11-04 | 2020-01-10 | 中粮工科(西安)国际工程有限公司 | 一种微藻总脂和微藻蛋白粕的提取方法 |
| CN111718856A (zh) * | 2020-06-29 | 2020-09-29 | 重庆工商大学 | 一种大量筛选蓝藻门含油微藻制备生物柴油的方法 |
| CN112538122A (zh) * | 2020-12-16 | 2021-03-23 | 华润环保发展有限公司 | 一种从活性污泥中提取海藻多糖的方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102875658A (zh) * | 2012-10-15 | 2013-01-16 | 北京化工大学 | 一种产油微生物能源微藻的高值化利用分离方法 |
| CN104293473A (zh) * | 2013-07-19 | 2015-01-21 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种从产油微生物中提取油脂的方法 |
| CN104531342A (zh) * | 2014-12-18 | 2015-04-22 | 北京化工大学 | 一种温和高效提取微生物油脂的方法 |
| CN104560375A (zh) * | 2013-10-22 | 2015-04-29 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种微藻油脂的提取方法 |
-
2016
- 2016-12-28 CN CN201611239076.5A patent/CN106701311A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102875658A (zh) * | 2012-10-15 | 2013-01-16 | 北京化工大学 | 一种产油微生物能源微藻的高值化利用分离方法 |
| CN104293473A (zh) * | 2013-07-19 | 2015-01-21 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种从产油微生物中提取油脂的方法 |
| CN104560375A (zh) * | 2013-10-22 | 2015-04-29 | 中国石油化工股份有限公司 | 一种微藻油脂的提取方法 |
| CN104531342A (zh) * | 2014-12-18 | 2015-04-22 | 北京化工大学 | 一种温和高效提取微生物油脂的方法 |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110540896A (zh) * | 2019-09-29 | 2019-12-06 | 武汉轻工大学 | 一种含epa微拟球藻藻油的制备方法 |
| CN110669581A (zh) * | 2019-11-04 | 2020-01-10 | 中粮工科(西安)国际工程有限公司 | 一种微藻总脂和微藻蛋白粕的提取方法 |
| CN111718856A (zh) * | 2020-06-29 | 2020-09-29 | 重庆工商大学 | 一种大量筛选蓝藻门含油微藻制备生物柴油的方法 |
| CN112538122A (zh) * | 2020-12-16 | 2021-03-23 | 华润环保发展有限公司 | 一种从活性污泥中提取海藻多糖的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| e Silva et al. | Microwave-assisted extraction of polysaccharides from Arthrospira (Spirulina) platensis using the concept of green chemistry | |
| CN106701311A (zh) | 一种采用湿藻、一步法制备微藻油及蛋白多糖的方法 | |
| CN103265645B (zh) | 一种超声波辅助提取海藻多糖的装置及方法 | |
| CN103588856B (zh) | 一种超声辅助水酶法提取花生油脂和蛋白质的方法 | |
| CN102206539B (zh) | 一种利用亚临界醇类从微藻湿藻泥中提取油脂的方法 | |
| CN102277230B (zh) | 一种最佳化快速溶剂萃取处理提高微藻油脂萃取量的方法 | |
| CN103059162B (zh) | 一种高效提取香菇多糖的新方法 | |
| CN103981021A (zh) | 一种从南极磷虾粉中精制磷虾油的方法 | |
| CN102295983A (zh) | 一种综合利用含油微藻的生产方法 | |
| CN103320217A (zh) | 一种从南极磷虾中提取富含磷脂的磷虾油的方法 | |
| CN108822230A (zh) | 一种超声提取刺梨果渣的多糖 | |
| CN101181080A (zh) | 以虾、蟹为原料提取甲壳素、脂肪、蛋白粉的方法 | |
| CN105601666B (zh) | 一种从鲢鱼鱼头中提取磷脂的方法及其产品 | |
| CN102453601B (zh) | 超声波辅助复合酶提取香樟籽油的方法 | |
| CN104531342B (zh) | 一种提取微生物油脂的方法 | |
| CN103509047B (zh) | 一种南极磷虾来源的磷脂酰胆碱的提取工艺和磷脂酰丝氨酸的制备方法 | |
| CN103012468A (zh) | 一种低温溶剂沉淀法制备高纯度蛋黄磷脂的方法 | |
| CN102887821B (zh) | 一种萃取分离海洋微藻发酵液提取dha的方法 | |
| CN101838585A (zh) | 一种从卤虫或卤虫卵中提取油脂的方法 | |
| CN105505553A (zh) | 一种微藻干藻粉直接皂化高效提取脂肪酸的方法 | |
| CN102863470B (zh) | 蛋黄卵磷脂、脑磷脂、蛋黄油及低变性蛋白粉的联产方法 | |
| CN113234525A (zh) | 一种低温生产黄粉虫虫油的方法 | |
| CN104560375B (zh) | 一种微藻油脂的提取方法 | |
| CN106923350A (zh) | 一种用玉米须制备水溶性膳食纤维的方法 | |
| CN106833866A (zh) | 一种生物酶解提取高ufa含量鱼油的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170524 |