CN1301718C - 白首乌多糖的提取及其口含片制备 - Google Patents

Abstract

本发明涉及白首乌多糖的提取及其口含片的制备技术。用粉碎机将白首乌粉碎(颗粒＜4mm)，用3～10倍乙醇回流提取2～3次。乙醇提取液经浓缩回收乙醇，浓缩物另作它用。提取后固体残渣按一定料水比1∶8～20、温度80℃～100℃、时间1～3h，提取1～3次，合并水提取液。水提取液经浓缩、乙醇沉淀和干燥得白首乌粗多糖；水提取液经酶法去除淀粉、氯仿-正丁醇法去蛋白质、乙醇沉淀和干燥等步骤，得白首乌总多糖。经动物体外和体内实验证明粗多糖和总多糖都具有免疫调节作用。粗多糖和总多糖可以作为免疫调节功能成分制成药物或保健品，如口含片型、口服液型等。

Description

白首乌多糖的提取及其口含片制备

(一)技术领域

本发明涉及白首乌多糖的提取及其口含片的制备技术。

(二)背景技术

植物多糖，特别是滋补类中药来源的植物多糖，具有多种生理功能。因而，这类多糖倍受重视，药物和保健品开发市场前景良好。

中药白首乌主要来源于萝摩科鹅绒藤属3种植物的块根。其一为白首乌(Cynanchum bungei Decne)，又名泰山何首乌、戟叶牛皮消等，为泰山四大名药之首，以白首乌正品收入中华人民共和国药典；其二为耳叶牛皮消(C.auriculatum Royle ex Wight)，市场中以此种白首乌为主要产品；其三为隔山消(C.wifordii Hemsl)，在朝鲜、韩国、日本亦作白首乌。白首乌具有乌发养颜、延缓衰老、养血益肝、固肾益精的作用，强壮筋骨的作用优于蓼科的何首乌，近年来研究发现白首乌还具有抗肿瘤、调节免疫等功能。三种白首乌市场需求不断增加，并出口日、韩、东南亚、北美等国家和地区。

目前，市场上白首乌主要以原料和白首乌粉为主，深加工较少。关于白首乌多糖的提取工艺、生理功能、产品制备等属于空白。

(三)发明内容

本发明目的是从白首乌中提取白首乌多糖和开发有关产品，如白首乌口含片。

多糖的提取中脂溶性成分和色素较难除去，本办法采用先用乙醇提取的办法去脂溶性成分和色素。白首乌中淀粉较多，在水提取过程中与多糖一同提取，本发明采用酶法水解淀粉，在经过乙醇沉淀多糖的办法，除去淀粉。白首乌多糖提取条件，如溶剂、温度、料液比、提取时间和次数等，经过单因素实验和多因素正交实验获得，并根据生产实际制定。

经动物体外和体内实验证明白首乌粗多糖和总多糖都具有免疫调节作用。粗多糖和总多糖可以作为功能成分制成药物或保健品，如口含片等。

具体发明内容为：

1、白首乌多糖的制备工艺

前处理与提取：白首乌去外栓皮，洗净，切片后烘干或晒干。用粉碎机将白首乌粉碎得白首乌粉，颗粒以＜4mm为好，按照3～10倍于白首乌的75％～95％乙醇回流提取2～3次，每次1～3h。乙醇提取液经浓缩回收乙醇，浓缩物另作它用。提取后固体残渣按照料水1∶8～20、温度80℃～100℃、时间1～3h，提取1～3次，合并水提取液，即为多糖水提取液。

白首乌粗多糖制备：所得水提取液经浓缩后，按浓缩液3～5倍体积加入80％～95％乙醇，沉淀多糖，减压过滤或离心，并用85％～95％乙醇洗涤2次，沉淀用真空烘干法(50℃～70℃)或真空冷冻干燥法干燥，得白首乌粗多糖。白首乌粗多糖中含有淀粉和蛋白质等非多糖成分，颜色为淡褐色固体。

白首乌总多糖制备：所得水提取液，按18U/g加入液化酶，在pH6，85℃条件下处理1.5h，用I₂/KI溶液检验直到碘液不变色，接着按200U/g加入糖化酶，在pH6，温度60℃处理1h，抽滤去掉酶渣，这样淀粉变成了醇溶性的低分子糖，可在下面乙醇沉淀多糖的过程中除去。按体积比1∶2～4加入氯仿-正丁醇混合物(1∶4)，充分摇匀后放置，使蛋白质沉淀，离心除去蛋白质，收集上清液，用氯仿-正丁醇混合物进一步除去蛋白质，至无蛋白质沉淀，约需重复6～10次。除去蛋白质后的上清液浓缩，按浓缩液3～5倍体积加入85％～95％乙醇，沉淀多糖，减压过滤或离心，并用85％～95％乙醇洗涤2次，沉淀用真空烘干法(50℃～70℃)或真空冷冻干燥法干燥，得白首乌总多糖。白首乌总多糖中不含淀粉或蛋白质等非多糖成分，颜色为淡褐色或白色固体。

2、白首乌多糖的免疫调节功能评价说明

按照常规的免疫调节功能评价方法，经动物体外和体内实验证明粗多糖和总多糖都具有免疫调节作用。这些实验有白首乌多糖体外对兔子T淋巴细胞的作用、对小白鼠免疫器官(胸腺、脾脏)的影响、对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能的影响、对绵羊红细胞诱导小鼠DTH-足趾增厚实验的影响(迟发型超敏反应)、对小鼠碳廓清实验的影响。

3、口含片制备

粗多糖和总多糖可以作为功能成分制成药物或保健品，如口含片型、胶囊型、口服液型等。

口含片的制备：按5～20份多糖粉，糊精40～60份，蔗糖30～60份，水分80～100份，风味物质若干份，混匀、压片、烘干、包装。其中风味物质可以根据需要添加，制成不同风味类型。如柠檬酸型，则加柠檬酸2～4份；如薄荷风味则加薄荷醇0.2～0.4份；因为白首乌多糖无特殊异味，所以也可以不添加风味物质。

(四)附图说明

图1白首乌多糖提取工艺流程

图1中1是白首乌粉，2是乙醇，3是加热回流，4是过滤，5是固体残渣，6滤液，7是水，8是加热提取，9是过滤，10是提取的多糖水溶液。

图2白首乌粗多糖的制备流程

图2中10是图1中提取的多糖水溶液，11是减压浓缩，12是浓缩液，13是乙醇，14是计量，15是离心，16是多糖沉淀，17是乙醇洗涤二次，18是多糖沉淀，19是真空干燥，20是粉碎，21是粗多糖粉。

图3白首乌总多糖的制备流程

图3中10是图1中提取的多糖水溶液，22是液化酶，23是计量，24是调pH6，25是85℃下处理，26是糖化酶，27是计量，28是调pH6，29是60℃下处理，30是过滤，31是滤液，32是真空浓缩，33是氯仿-正丁醇法沉淀蛋白质(数次)，34是离心，35是上清液，36是乙醇，37是计量，38离心，39是沉淀，40是干燥，41是粉碎，42是白首乌总多糖粉。

图4柠檬酸型白首乌多糖口含片制备

图4中43是是图2中的21或图3中的42，44是糊精，45是蔗糖，46是水分，47是柠檬酸，48是混匀，49是压片，50是烘干，51是包装，52是口含片成品。

(五)具体实施方式

1、白首乌粗多糖制备

取白首乌粉100g(1)，用500ml 95％乙醇(2)回流提取2次，每次2h，减压过滤，固体残渣加水1000ml、在100℃下提取2h，提取1次。提取液在60℃下经减压浓缩至60ml，加入250ml 95％乙醇，4000r/min离心，得多糖沉淀，沉淀用95％乙醇洗涤2次，沉淀用真空烘干法60℃干燥至干(19)，粉碎(20)后得白首乌粗多糖粉(21)，提取率9％，收率82％。

2、白首乌总多糖制备

取白首乌粉100g，用500ml 95％乙醇回流提取2次，每次2h，减压过滤；固体残渣加水1000ml、在100℃下提取2h；稍冷，按18U/g加入液化酶(22)，调pH6，85℃条件下处理2h，用I₂/KI溶液检验不变色，接着按200U/g加入糖化酶(26)，调pH6，温度60℃处理1h，抽滤去掉酶渣。在60℃下真空浓缩提取液至80ml，加入30ml氯仿-正丁醇混合物(1∶4)(33)，充分摇匀，使蛋白质沉淀，4000r/min离心除去蛋白质，重复去蛋白质8次。除蛋白质后的上清液浓缩至30ml，加入120ml 95％乙醇沉淀多糖，4000r/min离心，用95％乙醇80ml洗涤沉淀2次，沉淀在-56℃下冷冻，真空冷冻干燥法干燥(40)，粉碎后得白首乌总多糖粉，提取率6％。

3、柠檬酸型口含片制备

取白首乌总多糖粉10份(43)，糊精60份(44)，蔗糖60份(45)，水分100份(46)，柠檬酸2份(48)，混匀、压片(49)、烘干(50)、包装(51)。

Claims (3)

1、一种白首乌多糖的提取方法，其特征在于用粉碎机将白首乌粉碎得白首乌粉，颗粒大小＜4mm，按照3～10倍于白首乌粉的75～95％乙醇回流提取2～3次，每次1～3h，提取后固体残渣按照料水1∶8～20，温度80℃～100℃，时间1～3h，提取1～3次，得白首乌多糖水提取液。

2、根据权利要求1所述白首乌多糖的提取方法，其特征在于将白首乌多糖水提取液经浓缩后，按浓缩液3～5倍体积加入80～95％乙醇，沉淀多糖，减压过滤或离心，并用85～95％乙醇洗涤2次，沉淀物用真空烘干法，保持50～70℃，或真空冷冻干燥法干燥，得白首乌粗多糖。

3、根据权利要求1所述白首乌多糖的提取方法，其特征在于将白首乌多糖水提取液，按18U/g加入液化酶，在pH6，温度85℃条件下处理1.5h，用I₂/KI溶液检验直到碘液不变色，再按200U/g加入糖化酶，在pH6，温度60℃处理1h，抽滤去掉酶渣，真空浓缩提取液至小体积，按体积比1∶2～4加入氯仿-正丁醇混合物，充分摇匀后，离心除去蛋白质，收集上清液，重复6～10次至无蛋白质沉淀，除去蛋白质后的上清液浓缩，按浓缩液3～5倍体积加入85～95％乙醇，沉淀多糖，减压过滤或离心，再用85～95％乙醇洗涤2次，沉淀物用真空烘干法，温度50～70℃，或真空冷冻干燥法干燥，得白首乌总多糖。

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