CN1297579C - 新型交联聚苯乙烯凝胶与用途 - Google Patents

Abstract

本发明是新型交联聚苯乙烯凝胶与用途。是由双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯作为交联剂与苯乙烯或取代苯乙烯的共聚物凝胶，及其由双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯作为交联剂与苯乙烯的共聚物凝胶的功能基化的衍生物，并作为固相合成的载体。由双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯作为交联剂与苯乙烯或取代苯乙烯的共聚物凝胶可由自由基共聚合得到。带有功能基的凝胶可以用于作为固相多肽合成、固相有机合成和组合化学的固相载体或固相清除剂。本发明固相合成载体集中了现有技术几种交联剂合成的聚苯乙烯固相合成载体的优点，具有化学稳定性好、易合成和合成成本低的优点，是一种理想的固相合成载体。

Description

新型交联聚苯乙烯凝胶与用途

【技术领域】

本发明涉及固相合成载体及其合成方法，具体地说是一类新型交联聚苯乙烯凝胶与用途。

【背景技术】

1963年Merrifield发明了固相多肽合成方法(R.B.Merrifield，J.Am.Chem.Soc.，1963，85，2149)，此后固相合成方法广泛用于固相多肽合成、固相有机合成和组合化学中。固相合成的优点包括：(1)可以用过量的反应试剂使反应完全。(2)每步的产物都固定于不溶于任何溶剂的固相载体上，因此所需产物与其它过量试剂、催化剂等小分子试剂的分离可通过简单的过滤而实现。(3)在裂解前的所有操作步骤中，固相载体始终处于同一容器中，没有任何机械损失。(4)可以用大过量的反应试剂及催化剂，使每一步反应趋于完全，提高产率，使最后的产物的纯化更加容易。(5)容易实现自动化。现已有自动化程度很高的自动固相合成仪。

但是，固相多肽合成法也存在一定的缺点，如存在着产物纯度不如液相法合成高的缺点。如在固相多肽合成中如果把每联接一个氨基酸叫做一个“循环”的话，每个“循环”都要经过几个步骤：脱除保护基、中和、形成肽键的缩合反应、洗涤和过滤。若合成含有100个氨基酸的肽的话，需要几百个步骤，即使每一步收率都是99.5％，在反应百步以后，收率仅为36.6％。除了由于洗涤过滤不彻底而残留的反应试剂和反应副产物，以及其它外源性污染外，还积累了大量结构类似的欠缺肽和空心肽，它们的性质和目的肽非常接近，这给分离带来了很大的困难。在合成某些含有较难缩合的氨基酸序列的多肽时，缩合率往往更低，问题更严重，这不仅大大降低多肽合成的总收率，更严重的是，缩合率低时由最终的产物中很难分离得到目标肽。因此，提高固相合成每一步反应的反应程度是非常重要的。

在固相合成中，载体起着关键的作用。Merrifield最初使用的载体，即用二乙烯苯交联的聚苯乙烯凝胶至今仍是使用最广泛的载体。二乙烯苯交联的聚苯乙烯载体具有机械强度好、在许多固相合成所用的溶剂中有较好的溶胀性能和易引进各种功能基的优点。其缺点是，在某些固相合成中，反应动力学性能较差。这主要是由于其交联剂二乙烯苯本身具有刚性结构，这使得树脂整体的柔性更差，整个体系的强亲脂性本体降低了树脂在极性溶剂中的溶剂化程度；第二是二乙烯苯的分子比较小，形成的交联桥较短，使得交联网络伸展性较差，在交联桥附近的聚合物链的溶剂化程度必然较低，在这些位置进行的反应的反应动力学性能很差。特别是在使用分子量较大的反应物，如固相多肽合成中用到的用Boc或Fmoc(Fmoc为：9-芴甲氧羰基)保护α-氨基的氨基酸，甚至还带有侧链保护基的氨基酸，这样的保护氨基酸的分子量很大，它们有很大的位阻效应，向交联桥附近的反应位点靠近有一定困难，使得其反应很难达到高的反应程度。

通过改进载体的反应动力学性能是提高每一循环各步的反应程度的有效方法之一。为了克服二乙烯苯交联的聚苯乙烯凝胶作为载体的反应动力学差的缺点，同时保留其高机械强度、以及在许多固相合成所用的溶剂中优良的溶胀性能和易功能基化的优点，合成了用双苯乙烯-4-甲基-PEG醚用作交联剂的低交联的聚苯乙烯载体(K.Kamahori，K.Ito，S.Itsuno，J.Org.Chem.1996，61，8321；J.Buchardt，M.Meldal，Tetra.Lett.1998，39，8695)。此载体的缺点是，其交联剂的苄基醚结构对强酸和金属有机化合物不稳定，使其使用受到限制。Janda等合成了双苯乙烯-4-丁二醇醚作为低交联聚苯乙烯载体的交联剂(P.H.Toy，K.D.Janda，Tetra.Lett.1999，40，6329)，此交联剂的缺点是，合成步骤多，合成成本很高，所合成的载体价格昂贵，因此其在固相合成中的大规模推广应用受到限制。Krishnakumar等用双甲基丙烯酸丁二醇酯作为交联剂合成了交联聚苯乙烯载体(I.M.Krishnakumar.B.Mathew，Europ.Polym.J.2002，38，1745)。此交联剂两个双键之间的距离仍较小，且烷烃链在极性有机溶剂中处于卷曲状态，用其合成的交联聚苯乙烯载体的反应动力学性能仍不很理想。

【发明内容】

本发明的目的正是针对上述现有技术的不足，采用双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯作为交联剂，合成交联聚苯乙烯凝胶或交联取代苯乙烯凝胶；对交联聚苯乙烯凝胶进行功能基化得到带功能基的聚苯乙烯凝胶；以及用交联聚苯乙烯凝胶功能基化得到的带功能基的聚苯乙烯凝胶和交联取代苯乙烯凝胶作为固相合成的载体。

本发明通过以下技术方案实现；

一种交联聚苯乙烯凝胶，其特征在于它是双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯作为交联剂与苯乙烯由自由基共聚合得到的共聚物凝胶。

一种交联聚苯乙烯凝胶的功能基化衍生物，其特征在于对由双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯作为交联剂与苯乙烯的共聚物凝胶进行功能基化，功能基化的功能基包括但不限于如下的结构式(R)所示的功能基：

上述交联聚苯乙烯凝胶的功能基化衍生物的用途，其特征在于作为固相多肽合成、固相有机合成和组合化学的固相载体或固相清除剂。

一种交联的取代苯乙烯凝胶，其特征在于它是双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯作为交联剂与苯乙烯和取代苯乙烯的三元共聚物(共聚中可以存在或不存在作为第三共聚单体的苯乙烯)。

上述交联的取代苯乙烯凝胶的用途，其特征在于作为固相多肽合成、固相有机合成和组合化学的固相载体或固相清除剂。

本发明用双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯交联剂交联的聚苯乙烯凝胶，具有化学稳定性高(与双苯乙烯-4-甲基-PEG醚相比)、交联桥长且柔顺性好(与双苯乙烯-4-丁二醇醚和双甲基丙烯酸丁二醇酯相比)因而反应动力学好、廉价(与双苯乙烯-4-丁二醇醚相比)等优点。用双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯交联的聚苯乙烯凝胶作为固相合成的载体，在保留了二乙烯苯交联的聚苯乙烯载体的高机械强度、在许多固相合成所用的溶剂中的优良的溶胀性能和易功能基化的优点的同时，克服了二乙烯苯交联的聚苯乙烯凝胶的反应动力学性能差的缺点，而且具有化学稳定性好、易合成和合成成本低的优点。即由本发明所用的两种交联剂合成的聚苯乙烯固相合成载体集中了用二乙烯苯或上述的文献报道的几种交联剂合成的聚苯乙烯固相合成载体的优点，并克服了它们各自存在的缺点。是一种理想的固相合成载体。

【具体实施方式】

以下将结合实施例对本发明进行详细叙述。

本发明用双甲基丙烯酸二乙二醇酯(结构式1)或双甲基丙烯酸三乙二醇酯(结构式2)

作为交联剂，合成交联聚苯乙烯凝胶或交联取代苯乙烯凝胶；对交联聚苯乙烯凝胶进行功能基化得到带有功能基的聚苯乙烯凝胶；以及用交联聚苯乙烯凝胶功能基得到的带有功能基的聚苯乙烯凝胶和交联取代苯乙烯凝胶作为固相合成的载体。其中：

第一种方式是用双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯与苯乙烯进行自由基共聚合，得到交联聚苯乙烯凝胶，组成凝胶的两种共聚单体：双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯与苯乙烯的重量比范围为：0.5-10∶90-99.5。

然后通过共聚物凝胶的功能基化，可衍生出已报道的所有以二乙烯苯交联的聚苯乙烯凝胶为基体的、功能基化的固相合成载体。功能基包括但不限于下列单体中的任何一种：苄基氯、苄基氨、苄基醇、4-苄氧苯甲醇基、二苯基甲胺基、4-甲基二苯基甲胺基、2-氯三苯基甲基氯、Rink酸或Rink酰胺基等。在进行这些功能基化反应时，其反应速度和反应程度都高于以二乙烯苯交联的聚苯乙烯凝胶的相应的反应。

第二种方式为用双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯与带功能基的苯乙烯(取代苯乙烯)进行自由基共聚合(可以包含第三共聚单体苯乙烯)，直接得到带有功能基的固相合成载体。交联剂双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯、取代苯乙烯和苯乙烯的重量比范围为：0.5-10∶1-99.5∶0-98.5。在双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯与带功能基的苯乙烯的共聚中，以适当比例的无功能基的苯乙烯作为第三共聚单体，来调节所合成的凝胶所需的交联度和功能基负载量。带功能基的苯乙烯包括但不限于下列单体中的任何一种：氯甲基苯乙烯、溴甲基苯乙烯、羟甲基苯乙烯、羟甲基苯氧基甲基苯乙烯、乙酰氧基苯乙烯、乙烯基苯甲酸。用这两种方式得到的功能基载体在固相合成中都有比二乙烯苯交联的相应载体更好的反应动力学性能。

上述自由基聚合的引发剂可以是任何可引发苯乙烯聚合的自由基引发剂如偶氮类引发剂、过氧化类引发剂，最常用的引发剂是过氧化苯甲酰或偶氮二异丁腈；聚合方法可以是本体聚合、溶液聚合或悬浮聚合；最后交联聚合物的形态可以是珠状、粒状或薄膜状；用悬浮聚合可直接得到珠状聚合物；如果需要片状或薄膜状聚合物，则可通过本体或溶液聚合直接成型得到；粒状聚合物可由本体聚合或溶液聚合后粉碎所得。

本发明所合成的交联聚苯乙烯或带有功能基的聚合物凝胶与二乙烯苯交联的聚苯乙烯或带有功能基的聚合物凝胶具有相同的反应性，只是其反应动力学性能更好。

实施例1：

双甲基丙烯酸二乙二醇酯交联的聚苯乙烯凝胶的制备：

在1000ml三口瓶中加入450ml含0.5％聚乙烯醇的水溶液，加入由39.2g苯乙烯、0.8g双甲基丙烯酸二乙二醇酯和0.2g过氧化苯甲酰组成的有机相溶液，调整搅拌速度，使水相中的有机相液珠直径在100-200目之间，在此搅拌速度下升温到80℃并维持8小时。将所得珠状聚合物用热水洗涤数次，晾干，筛分取100-200目的凝胶。

实施例2：

双甲基丙烯酸三乙二醇酯交联的聚苯乙烯凝胶的制备：

在1000ml三口瓶中加入450ml含0.5％聚乙烯醇的水溶液，加入由38g苯乙烯、2g双甲基丙烯酸三乙二醇酯和0.2g过氧化苯甲酰组成的有机相溶液，调整搅拌速度，使水相中的有机相液珠直径在200-400目之间，在此搅拌速度下升温到80℃并维持8小时。将所得珠状聚合物用热水洗涤数次，晾干，筛分取200-400目的凝胶。

实施例3：

双甲基丙烯酸二乙二醇酯交联的聚苯乙烯凝胶的氯甲基化：

将10g 100-200目双甲基丙烯酸二乙二醇酯交联的聚苯乙烯凝胶(含双甲基丙烯酸三乙二醇酯3％，重量百分比)加入到100ml二氯甲烷中溶胀1小时，冷却到-4℃，加入10ml氯甲醚，于-4℃下滴加1.2ml无水四氯化锡，在0--4℃下反应50分钟。用四氢呋喃：0.5mol/L HCl(体积比为1∶1)充分洗涤所得树脂，然后用四氢呋喃和蒸馏水充分洗涤树脂，直至用AgNO₃检测无氯离子，真空干燥所得树脂。测得所得树脂的氯含量为1.32mmol/g。

实施例4：

双甲基丙烯酸三乙二醇酯交联的聚苯乙烯凝胶的氯甲基化：

将10g 200-400目双甲基丙烯酸三乙二醇酯交联的聚苯乙烯凝胶(含双甲基丙烯酸三乙二醇酯5％，重量百分比)加入到100ml二氯甲烷中溶胀1小时，冷却到-4℃，加入10ml氯甲醚，于-4℃下滴加1.2ml无水四氯化锡，在0--4℃下反应50分钟。用四氢呋喃：0.5mol/L HCl(体积比为1∶1)充分洗涤所得树脂，然后用四氢呋喃和蒸馏水充分洗涤树脂，直至用AgNO₃检测无氯离子，真空干燥所得树脂。测得树脂的氯含量为0.96mmol/g。

实施例5：

含4-苄氧苯甲醇基凝胶的制备：

将5g由实施例3得到的凝胶和25ml二甲基乙酰胺加入到100ml三口瓶中，搅拌1小时。然后将1.5g对羟基苄醇用15ml二甲基乙酰胺溶解，将其转移到上述的三口瓶中，搅拌并在氮气流保护下将0.5g甲醇钠加入三口瓶中。用水浴使反应体系加热到50℃并保持8小时。过滤，树脂用水洗至中性，而后用水洗涤3次，二氧六环洗涤3次，无水乙醇洗涤3次，真空干燥。测得所得树脂的氯含量为0，羟基含量为1.18mmol/g。

实施例6：

含2-氯三苯基甲基氯凝胶的制备：

(1)2-氯二苯酮树脂的制备

将5.3g无水AlCl₃和30ml二氯甲烷依次加入到50ml的反应瓶中，20-30℃下搅拌30-40分钟，滴加4.6g邻氯苯甲酰氯，控制反应体系温度不高于30℃，滴加毕后，在20-30℃搅拌1小时，至AlCl₃全部溶解，制备成混合液。

将10g 200-400目双甲基丙烯酸三乙二醇酯交联的聚苯乙烯凝胶(含双甲基丙烯酸三乙二醇酯3％，重量百分比)和80ml二氯甲烷加入到200ml反应瓶中，20-30℃搅拌2小时。将上述的制备的混合液滴加入体系中，控制反应体系温度不高于30℃，滴加完毕，使反应体系回流4小时后降至室温。将反应混合物在搅拌下加入已配好的315ml的二氧六环∶水∶盐酸＝5∶1∶1的混合溶液中，在20-30℃下搅拌1小时。抽滤，然后，按下列次序和遍数进行洗涤：(二氧六环∶水＝5∶1)90ml×1，丙酮60ml×2，水50ml×3，二甲基甲酰胺70ml×4，丙酮60ml×2，甲醇60ml×2，洗涤干净并抽滤，40-50℃真空干燥6小时。测得所得树脂的氯含量为2.5mmol/g。

(2)2-氯二苯甲醇树脂的制备

将20ml四氢呋喃与3.5g镁屑加入到反应瓶中，18-22℃搅拌下滴加20ml溴苯和20ml四氢呋喃配成的混合溶液。控制体系温度在40-45℃左右。滴加完成后，控温55-60℃反应1小时，然后降温至0℃左右，搅拌下加入10g干燥的上述的2-氯二苯酮树脂与100ml四氢呋喃的混合液，回流48小时。降温后，将反应混合物加入385ml二氧六环∶水∶盐酸＝5∶1∶1的混合溶液中，搅拌2小时，抽干。然后，按下列次序和遍数进行洗涤：二氧六环∶H₂O∶HCl＝5∶2∶1(×1)，丙酮(×2)，水(×1)，DMF(×1)甲醇(×2)。抽干，于40-50℃真空干燥6小时。测得所得树脂的氯含量为2.0mmol/g。

(3)2-氯三苯基氯树脂的制备

在反应瓶中，加入上述的2-氯二苯甲醇树脂10g、甲苯120ml，在80℃搅拌1小时；然后滴加乙酰氯20ml，保温反应约4小时，降至室温，抽滤，依次以甲苯×2，二氯甲烷×2，石油醚(30-60℃)×2洗涤，真空干燥，得到2-氯三苯基氯树脂，测得所得树脂的活泼氯含量为1.2mmol/g。

实施例7：

含4-甲基二苯基甲胺基凝胶的制备：

第一步反应：

将2.67g无水AlCl₃和3.09g对甲苯甲酰氯依次加入到60ml二氯乙烷中，降温到0℃以下搅拌30分钟。将10g 100-200目双甲基丙烯酸二乙二醇酯交联的聚苯乙烯凝胶(含双甲基丙烯酸三乙二醇酯3％，重量百分比)加入到140ml二氯乙烷中室温搅拌1小时，降温到-15℃。将上述溶液加入，保持-12℃左右1小时，然后自然升温到20℃，反应14小时。过滤，洗涤。洗涤顺序：二氯甲烷三遍，甲醇三遍，水二遍，甲醇一遍，晾干。

第二步反应：

将10g第一步产品树脂、100ml硝基苯、20g甲酸铵、20g甲酸溶液、30g甲酰胺加入反应瓶中，通氮气，搅拌，加热回流分水，反应40小时。降温过滤。搅拌下，重复第一步洗涤过程，最后水洗结束。抽干。

第三步反应：

10g第二步产品树脂、20ml盐酸、10ml乙醇加入反应瓶中，搅拌升温到75-80℃，反应6小时，降温过滤。洗涤：甲醇二遍，二氯甲烷二遍，甲醇二遍，乙醇一遍，水洗3次。最后以水洗为结束，抽干，50℃干燥。测得所得树脂的氨基含量为1.0mmol/g。

实施例8：

含Rink酸和Rink酰胺基凝胶的制备：

第一步反应：

将6g 100-200目氯甲基化(氯含量为1.46mmol/g)的由双甲基丙烯酸三乙二醇酯交联的聚苯乙烯凝胶(含双甲基丙烯酸三乙二醇酯3％，重量百分比)加入到30ml的二甲基乙酰胺中搅拌1小时，然后加入2，4-二甲氧基-4’羟基二苯酮3.85g溶解于20ml二甲基乙酰胺的溶液，加入1.06g碳酸钾并通氮气，加热至50℃搅拌反应。1小时后加入0.06g碘化钾及0.33g甲醇钠，继续搅拌反应10-16小时。降温后，滤出母液，所得树脂用二甲基乙酰胺洗涤2次，用约50℃水洗至中性；再用水洗；甲醇洗；二甲基甲酰胺洗三次；甲醇洗三次；晾干。

第二步反应：

7.8g第一步得到的酮树脂加入40ml四氢呋喃搅拌2小时；加入3.5g的NaBH₄溶解于1N NaOH的溶液，通氮气，控制体系温度＜8℃，搅拌下分批加入AlCl₃，50℃搅拌反应12小时，过滤，树脂用水洗至中性，搅拌下加入0.5N的盐酸20ml，反应1小时，抽干，再用0.5N的盐酸洗涤一次，抽干，水洗至中性，水洗三次，甲醇洗一次，THF洗三次，甲醇洗三次，40℃真空干燥。得到Rink酸树脂，测得树脂的羟基含量为1.0mmol/g。

第三步反应：

7.8g第二步得到的Rink酸树脂加入65ml二甲基甲酰胺搅拌1小时，15℃以下搅拌下加入9.2g的Fmoc-NH2溶于40ml DMF的溶液，加入0.24g苯磺酸，通氮气，50℃反应6小时，降温，过滤，DMF洗三次，甲醇洗三次，二氯甲烷洗三次。晾干，40℃真空干燥。得Rink酰胺树脂，测得Fmoc含量为0.69mmol/g。

实施例9：

双甲基丙烯酸三乙二醇酯与氯甲基苯乙烯的共聚：

在1000ml三口瓶中加入450ml含有5％氯化钠和0.5％聚乙烯醇的水溶液，加入由12g 4-氯甲基苯乙烯、26.8g苯乙烯、1.2g双甲基丙烯酸三乙二醇酯和0.2g过氧化苯甲酰组成的有机相溶液，调整搅拌速度，使水相中的有机相液珠直径在200-400目之间，在此搅拌速度下升温到80℃并维持8小时。将所得珠状聚合物用热水洗涤数次，晾干，筛分取200-400目树脂。测得所得树脂的氯含量为1.5mmol/g。

实施例10：

双甲基丙烯酸二乙二醇酯与羟甲基苯氧基甲基苯乙烯的共聚：

在1000ml三口瓶中加入450ml含有5％氯化钠和0.5％聚乙烯醇的水溶液，加入由14.4g 4-(4-羟甲基苯氧甲基)苯乙烯、24g苯乙烯、1.6g双甲基丙烯酸二乙二醇酯和0.2g过氧化苯甲酰组成的有机相溶液，调整搅拌速度，使水相中的有机相液珠直径在100-200目之间，在此搅拌速度下升温到80℃并维持8小时。将所得珠状聚合物用热水洗涤数次，晾干，筛分取100-200目树脂。测得所得树脂的羟基含量为1.2mmol/g。

实施例11：

双甲基丙烯酸二乙二醇酯与乙酰氧基苯乙烯的共聚：

在1000ml三口瓶中加入450ml含有5％氯化钠和0.5％聚乙烯醇的水溶液，加入由37.6g 4-乙酰氧基苯乙烯和2.4g双甲基丙烯酸二乙二醇酯和0.2g过氧化苯甲酰组成的有机相溶液，调整搅拌速度，使水相中的有机相液珠直径在100-200目之间，在此搅拌速度下升温到80℃并维持8小时。将所得珠状聚合物用热水洗涤数次，晾干，筛分取100-200目树脂。测得所得树脂的乙酰氧基含量为5.6mmol/g。

实施例12：

双甲基丙烯酸三乙二醇酯与乙烯基苯甲酸的共聚：

在1000ml三口瓶中加入450ml含有5％氯化钠和0.5％聚乙烯醇的水溶液，加入由30g 4-乙烯基苯甲酸、6g苯乙烯和4g双甲基丙烯酸三乙二醇酯和0.2g过氧化苯甲酰组成的有机相溶液，调整搅拌速度，使水相中的有机相液珠直径在100-200目之间，在此搅拌速度下升温到80℃并维持8小时。将所得珠状聚合物用热水洗涤数次，晾干，筛分取100-200目树脂。测得所得树脂的羧基含量为4.4mmol/g。

实施例13：

由双甲基丙烯酸二乙二醇酯交联的聚苯乙烯凝胶或双甲基丙烯酸三乙二醇酯交联的聚苯乙烯凝胶衍生的含有4-苄氧苯甲醇基的树脂作为固相载体合成多肽，合成了文献报道较难合成的肽段ACP(65-74)(W.S.Hancock，D.J.Prescott，P.R.Vagelos，G.Marshall，J.Org.Chem.1973，38，774)，ACP(65-74)的氨基酸序列为Val-Gln-Ala-Ala-Ile-Asp-Tyr-Ile-Asn-Gly。采用常规的Fmoc固相肽合成策略进行合成。以DMF为溶剂，树脂与相当与树脂功能基量3倍的保护氨基酸和3倍的苯并三氮唑-N，N，N′，N′，-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)/1-羟基苯骈三氮唑(HOBt)缩合2小时。树脂用DMF充分洗涤后用20％哌啶/DMF处理30分钟脱保护。然后进行下一循环，直至合成所需的肽序列。最后树脂用三氟乙酸/苯甲硫醚/水(95∶2.5∶2.5，体积比)处理4小时，将多肽从树脂上裂解下来。

经HPLC分析(柱：ZORBAX SB-C18(Agilent)，流动相：0.05％TFA/18％乙腈/％82水，流速：0.8毫升/分钟，检测波长：220nm)，采用双甲基丙烯酸二乙二醇酯交联(3％，重量比)的聚苯乙烯树脂衍生的含有4-苄氧苯甲醇基的树脂作为载体合成的ACP(65-74)的纯度为85.7％；采用双甲基丙烯酸三乙二醇酯交联(3％，重量比)的聚苯乙烯树脂衍生的含有4-苄氧苯甲醇基的树脂作为载体合成的ACP(65-74)的纯度为88.1％；而用Wang树脂(1％DVB-St共聚物)在相同条件下合成的ACP(65-74)的纯度为73.3％。

Claims (9)

1.一种新型交联聚苯乙烯凝胶，其特征在于它是双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯作为交联剂与苯乙烯由自由基共聚合得到的共聚物凝胶。

2.按照权利要求1所述的凝胶，其特征在于组成凝胶的两种共聚单体：双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯与苯乙烯的重量比范围为：0.5-10∶90-99.5。

3.一种交联聚苯乙烯凝胶的功能基化的衍生物，其特征在于对由双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯作为交联剂与苯乙烯由自由基共聚合得到的共聚物凝胶进行功能基化，功能基化的功能基包括如下的结构式R所示的功能基：

4.权利要求3的交联聚苯乙烯凝胶的功能基化衍生物的用途，其特征在于作为固相多肽合成、固相有机合成和组合化学的固相载体或固相清除剂。

5.一种交联的取代苯乙烯凝胶，其特征在于它是双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯作为交联剂与苯乙烯和取代苯乙烯由自由基共聚合得到的三元共聚物。

6.按照权利要求5所述的凝胶，其特征在于组成凝胶的三种共聚单体：双甲基丙烯酸二乙二醇酯或双甲基丙烯酸三乙二醇酯、取代苯乙烯和苯乙烯的重量比范围为：0.5-10∶1-99.5∶0-98.5。

7.按照权利要求5或6所述的凝胶，其特征在于取代苯乙烯包括氯甲基苯乙烯、溴甲基苯乙烯、羟甲基苯乙烯、羟甲基苯氧基甲基苯乙烯、乙酰氧基苯乙烯、或乙烯基苯甲酸。

8.一种权利要求5的交联的取代苯乙烯凝胶的用途，其特征在于作为固相多肽合成、固相有机合成和组合化学的固相载体或固相清除剂。

9.按照权利要求1或4所述的凝胶，其特征在于所说的凝胶可由本体聚合、溶液聚合、或悬浮聚合得到。