CN1286835C - 苯乙酰氨基噻唑衍生物、它们的制备方法和它们作为抗肿瘤剂的用途 - Google Patents

Abstract

公开了如说明书所定义的由式(I)代表的化合物，其中R是氢原子或甲基，R₁是如说明书所定义的基团，或其药学上可接受的盐；所述化合物可用于治疗与改变的细胞周期依赖性激酶活性有关的细胞增殖性障碍，例如癌症。

Description

苯乙酰氨基噻唑衍生物、 它们的制备方法和它们作为抗肿瘤剂的用途

发明背景

发明领域

本发明涉及苯乙酰氨基噻唑衍生物、它们的制备方法、含有它们的药物组合物和它们作为治疗剂的用途，特别是在癌症和细胞增殖障碍治疗中的用途。

背景讨论

几种细胞毒性药物——例如氟尿嘧啶(5-FU)、阿霉素和喜树碱——损害DNA或者影响细胞代谢途径，从而在很多情况下间接地阻滞细胞周期。因此，这些药物对正常细胞和肿瘤细胞都产生不可逆的损害，导致显著的毒性和副作用。

在这一点上，能够充当高度特异性抗肿瘤剂的化合物是可取的，它们选择性引导肿瘤细胞抑制和细胞程序死亡，与目前可用的药物相比，具有相当的功效，但是减少了毒性。

众所周知，细胞周期的进展受到一系列关卡的控制，也称之为限制点，它们受到一个已知称为细胞周期蛋白依赖性激酶(cdk)的酶家族的调节。继而，cdk本身在很多水平上都受到调节，例如与细胞周期蛋白的结合。

不同细胞周期蛋白/cdk配合物的活化与失活作用的协调是细胞周期的正常进展所必需的。决定性G1-S与G2-M转变都受到不同细胞周期蛋白/cdk活性的活化作用的控制。在G1中，CdK4/细胞周期蛋白D和CdK2/细胞周期蛋白E被认为介导S期的开始。S期的进展需要CdK2/细胞周期蛋白A的活性，而cdc2(cdk1)/细胞周期蛋白A和cdc2/细胞周期蛋白B的活化作用是有丝分裂的开始所需的。关于细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶的一般性介绍，例如参见Kevin R.Webster et al，Exp.Opin.Invest.Drugs，1998，Vol.7(6)，865-887。

关卡控制在肿瘤细胞中是有缺陷的，部分原因是cdk活性的去调节作用。例如，已经在肿瘤细胞中观察到改变了的细胞周期蛋白E和cdk的表达，已经在小鼠中显示cddk抑制性p27 KIP基因的缺失导致更高的癌症发病率。

越来越多的证据支持这样一种观点，cdk是细胞周期进展中的限速酶，因此代表了治疗性干预的分子靶。特别地，直接抑制cdk/细胞周期蛋白激酶的活性应当有助于限制失调了的肿瘤细胞增殖。

发明概述

本发明的目的是提供化合物，它们可用于治疗与改变的细胞周期依赖性激酶活性有关的细胞增殖性障碍。另一目的是提供化合物，它们具有cdk/细胞周期蛋白激酶抑制活性。

本发明人现已发现，某些苯乙酰氨基噻唑被赋予cdK/细胞周期蛋白激酶抑制活性，因而在疗法中可用作抗肿瘤剂，并且在毒性和副作用方面缺少上述与目前可利用的抗肿瘤药有关的缺点。

更具体而言，本发明的苯乙酰氨基噻唑可用于治疗各种癌症，包括但不限于：癌，例如膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌(包括小细胞肺癌)、食管癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌和皮肤癌(包括鳞状细胞癌)；淋巴系的造血系统肿瘤，包括白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病、B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、何杰金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、毛发细胞淋巴瘤和Burkett氏淋巴瘤；骨髓系的造血系统肿瘤，包括急性与慢性骨髓性白血病、脊髓发育不良综合征和早幼粒细胞白血病；间充质来源的肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；中枢与外周神经系统的肿瘤，包括星形细胞瘤、成神经细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；其它肿瘤，包括黑瘤、精原细胞瘤、畸胎样癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角化棘皮瘤、甲状腺滤泡癌和卡波济氏肉瘤。

由于cdk在细胞增殖调节作用中的关键角色，这些苯乙酰氨基噻唑衍生物还可用于治疗各种细胞增殖性障碍，例如良性前列腺增生、家族性腺瘤病息肉病、神经纤维瘤病、牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌细胞增殖、肺纤维变性、关节炎、肾小球性肾炎和手术后狭窄与再狭窄。

本发明的化合物可以用于治疗阿尔茨海默氏病，这受cdk5参与τ蛋白的磷酸化作用这一事实的启发(J.Biochem.117，741-749，1995).

本发明的化合物作为细胞程序死亡的调制剂，还可以用于治疗癌症、病毒感染、HIV感染的个体向AIDS发展的预防、自身免疫疾病和神经变性性障碍。

本发明的化合物可以用于抑制肿瘤的血管生成和转移。

本发明的化合物还可以充当其他蛋白激酶的抑制剂，例如不同异构形式(isoform)的蛋白激酶C、Met、PAK-4、PAK-5、ZC-1、STLK-2、DDR-2、Aurora 1、Aurora 2、Bub-1、PLK、Chk1、Chk2、HER2、rafl、MEK1、MAPK、EGF-R、PDGF-R、FGF-R、IGF-R、PI3K、weel激酶、Src、Abl、Akt、MAPK、ILK、MK-2、IKK-2、Cdc7、Nek，因而有效地治疗与其它蛋白激酶有关的疾病。

本发明的化合物还可用于治疗和预防放疗诱发的或化疗诱发的脱发。

因此，本发明提供治疗与改变的细胞周期依赖性激酶活性有关的细胞增殖性障碍的方法，该方法对需要的哺乳动物给以有效量的由通式(I)代表的苯乙酰氨基噻唑衍生物

其中：

R是氢原子或者直链或支链C₁-C₄烷基；

R₁是式(IIa-e)基团

其中R₂是氢或者直链或支链C₁-C₆烷基，环(IIc)上的羟基位于任意一个空位(free position)上；

R₃选自由氨基、氨甲基(-CH₂-NH₂)、羟甲基(-CH₂OH)、直链或支链C₁-C₄烷基组成的组，或者它是具有1或2个选自氮、氧和硫的杂原子的5或6元杂环；

其条件是若R是氢，则R₃不是甲基或吡啶-3-基；

或其药学上可接受的盐。

在上述方法的优选实施方式中，细胞增殖性障碍选自由癌症、阿尔茨海默氏病、病毒感染、自身免疫疾病和神经变性障碍组成的组。

可以治疗的具体癌症类型包括癌、鳞状细胞癌、骨髓或淋巴系的造血系统肿瘤、间充质来源的肿瘤、中枢与外周神经系统的肿瘤、黑瘤、精原细胞瘤、畸胎样癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角化棘皮瘤、甲状腺滤泡癌和卡波济氏肉瘤。

在上述方法的另一优选实施方式中，细胞增殖性障碍选自由良性前列腺增生、家族性腺瘤病息肉病、神经纤维瘤病、牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌细胞增殖、肺纤维变性、关节炎、肾小球性肾炎和手术后狭窄与再狭窄组成的组。

另外，本发明方法提供对肿瘤血管生成和转移的抑制作用。本发明方法还可以提供对细胞周期的抑制作用或cdk/细胞周期蛋白依赖性抑制作用。

除了上述以外，本发明的方法客体提供对放疗诱发的或化疗诱发的脱发的治疗和预防。

本发明还提供由通式(I)代表的苯乙酰氨基噻唑衍生物

其中：

R是氢原子或甲基；

R₁是式(IIa-e)基团

其中R₂是氢或者直链或支链C₁-C₆烷基，环(IIc)上的羟基位于任意一个空位上；

R₃选自由氨基、氨甲基(-CH₂-NH₂)、羟甲基(-CH₂OH)、直链或支链C₁-C₄烷基组成的组，或者它是具有1或2个选自氮、氧和硫的杂原子的5或6元杂环；

其条件是若R是氢，则R₃不是甲基或吡啶-3-基；

或其药学上可接受的盐。

本发明还包括合成由式(I)代表的苯乙酰氨基噻唑衍生物的方法。在本发明中还包括包含由式(I)代表的苯乙酰氨基噻唑衍生物的药物组合物。

将会容易获得对发明及其很多附带优点的更完整的领会，因为参照下列详细说明这些将变得更好理解。

发明的详细说明

几种氨基噻唑是本领域已知的，例如作为除草剂、合成中间体或者甚至是治疗剂。其中，作为实例，有抗变态反应剂2-苯甲酰氨基-1，3-噻唑(EP-A-261503，Valeas S.p.A.)；蛋白激酶C抑制剂5-烷基-2-苯基烷基羰基氨基-1，3-噻唑(WO 98/04536，Otsuka Pharmaceutical Co.)；抗肿瘤剂5-芳硫基-2-酰氨基-1，3-噻唑(EP-A-412404，Fuiisawa Pharm.Co.)；细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂4-氨基-2-羰基氨基-1，3-噻唑(WO 99/21845，Agouron Pharmaceutical Inc.)；氨基噻唑，其中有细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂5-链烯基-2-酰氨基噻唑(WO 99/65884，Bristol-Myers Squibb Co.)；葡糖激酶活化剂被环烷基烷基取代的苯乙酰氨基噻唑，其可用于治疗II型糖尿病(WO 01/85707，Hoffinann-LaRoche AG)。

另外，两份同属Pharmacia & Upjohn S.p.A.名下的国际专利申请WO 00/26202和WO 01/14353(US 6,114,365)及其中引用的参考文献都公开了一大类具有细胞依赖性激酶抑制活性的酰氨基噻唑衍生物。

本发明的化合物客体落入WO 00/26202和WO 01/14353的通式范围，但是其中没有具体例证。

式(I)化合物可以具有不对称的碳原子，因此可以存在外消旋混合物或单独的旋光异构体，它们都属于本发明的范围。

作为实例，当R不是氢时，与R本身连接的碳原子是不对称的碳原子，因此，式(I)化合物的(R)与(S)旋光异构体以及外消旋(R，S)混合物或任意其它包含两种旋光(R)或(S)异构体之一为主的混合物都属于本发明的范围。

同样，式(I)化合物的全部可能的异构体及其混合物和代谢产物与药学上可接受的生物前体(也称之为前体药物)作为抗肿瘤剂的用途也属于本发明的范围。

本说明书中，正如技术人员所清楚的，作为式(IIa)、(IIb)、(IIc)、(IId)与(IIe)R₁基团一部分的氮原子在式(I)中是直接与亚苯基部分键合的。

另外，除非另有指定，在提到其中R₁是基团(IIc)的式(I)化合物时，2-氧代吡咯烷-1-基部分进一步在环的3、4或5位被羟基取代，以致得到3-羟基-、4-羟基-或5-羟基-2-氧代吡咯烷-1-基。

本说明书中，除非另有指定，术语直链或支链C₁-C₄烷基表示任意的甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基和仲丁基。

术语具有1或2个选自氮、氧或硫的杂原子的5或6元杂环表示这样一种基团，例如呋喃、吡咯、咪唑、吡唑、噻吩、噻唑、异噻唑、唑、异唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、咪唑啉、吡唑烷、吡唑啉、哌啶、哌嗪、吗啉等。

式(I)化合物的药学上可接受的盐包括分别与无机或有机酸或碱所生成的酸与碱加成盐。上述酸的实例例如包括硝酸、盐酸、氢溴酸、硫酸、高氯酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、乳酸、草酸、丙二酸、苹果酸、马来酸、酒石酸、枸橼酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、羟乙磺酸和水杨酸。

同样，适合的碱例如有碱金属或碱土金属氢氧化物以及有机胺，例如脂族胺、哌啶等。

一类优选的本发明式(I)化合物是其中R是甲基的那些。

在这类优选的式(I)化合物中，最优选的是其中R₁是式(IIa)、(IIb)或(IIc)基团的那些，其中羟基取代基位于吡咯烷环的3位，或者它是式(IId)基团，其中R₂是氢或甲基，或者它是式(IIe)基团，其中R₃是甲基或吡啶基，因此包括吡啶-4-基、吡啶-3-基或吡啶-2-基。

在这类中进而更优选的是其中R₁是式(IIa)或(IIe)基团的式(I)化合物。

还优选的是其中R是氢原子的式(I)化合物。

进而更优选的是其中上述特征组合在一起的化合物，以致得到其中R是氢且R₁是式(IIa)基团的式(I)化合物，也就是化合物N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]乙酰胺，或者其中R是甲基且R₃是甲基、吡啶-3-基或吡啶-4-基的式(I)化合物，为它们的(S)构型，也就是(2S)-2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺、N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺和N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺。

本发明的式(I)化合物任选地是药学上可接受的盐的形式，实例有：

1.N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]乙酰胺；

2.N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]丙酰胺；

3.(2R)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]丙酰胺；

4.(2S)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]丙酰胺；

5.2-[4-(3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；

6.2-{4-[(3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；

7.2-{4-[(3R)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；

8.2-[4-(3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

9.2-{4-[(3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

10.2-{4-[(3R)-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

11.(2R)-2-{4-[(3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

12.(2S)-2-{4-[(3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

13.(2R)-2-{4-[(3R)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

14.(2S)-2-{4-[(3R)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

15.N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]乙酰胺；

16.N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酰胺；

17.(2R)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酰胺；

18.(2S)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酰胺；

19.N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]乙酰胺；

20.N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

21.(2R)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

22.(2S)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

23.N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]乙酰胺；

24.N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

25.(2R)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

26.(2S)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

27.(2S)-2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

28.(2R)-2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

29.2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

30.(2S)-2-{4-[(氨基羰基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

31.(2R)-2-{4-[(氨基羰基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

32.2-{4-[(氨基羰基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

33.2-{4-[(氨基羰基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；

34.(2S)-2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

35.(2R)-2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

36.2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

37.N-1-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)甘氨酰胺；

38.N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺；

39.N-(4-{(1R)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺；

40.N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺；

41.N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)吡啶-2-甲酰胺；

42.N-(4-{(1R)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)吡啶-2-甲酰胺；

43.N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)吡啶-2-甲酰胺；

44.N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)吡啶-2-甲酰胺；

45.N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺；

46.N-(4-{(1R)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺；

47.N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺；

48.N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺。

式(I)化合物、即本发明客体可以借助这样一种方法获得，包含使2-氨基-5-异丙基-1，3-噻唑与式(III)化合物反应，

其中R和R₁是如上所定义的，R’是羟基或适合的离去基团，

任选地，再转化它们为其药学上可接受的盐。

作为替代选择，其中R₁是式(IIe)基团的式(I)化合物可以借助这样一种方法获得，包含：

a’)当R₃不是氨基时，使式(IV)化合物

与式(V)化合物反应，

R₃-COX              (V)

其中R和R₃是如上所定义的，X是羟基或适合的离去基团；

a”)当R₃是氨基时，使式(IV)化合物与氰酸钾反应；

任选地，再转化任何一个步骤a’)或a”)所得式(I)化合物为其药学上可接受的盐。

上述方法是可以按照本领域熟知的方法进行的类似方法。

2-氨基-5-异丙基-1，3-噻唑与其中R’是羟基的式(III)化合物之间的反应可以这样进行，在偶联剂的存在下，例如碳化二亚胺，也就是1，3-二环己基碳化二亚胺、1，3-二异丙基碳化二亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺、N-环己基碳化二亚胺或N’-甲基聚苯乙烯，任选地在叔碱的存在下、例如三乙胺、N-甲基吗啉、N，N-二异丙基乙胺、吡啶或二乙氨基甲基聚苯乙烯进行。

反应发生在适合的溶剂中，例如乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二乙醚、1，4-二烷、乙腈、甲苯或N，N-二甲基甲酰胺，反应温度从约-10℃至回流，优选从0℃至室温，适合的反应时间从约30分钟至约8天。

作为替代选择，这种相同的反应也可以按照混合酸酐法进行，也就是使用氯代甲酸烷基酯，例如氯甲酸乙基、异丁基或异丙基酯，在叔碱的存在下、例如三乙胺、N，N-二异丙基乙胺或吡啶进行。

该反应也是在适合的溶剂中进行的，例如甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙腈、二乙醚、1，4-二烷或N，N-二甲基甲酰胺，反应温度从约-30℃至室温。

2-氨基-5-异丙基-1，3-噻唑与其中R’是适合的离去基团、例如卤原子的式(III)化合物之间的反应可以这样进行，在叔碱的存在下、例如三乙胺、N，N-二异丙基乙胺或吡啶，在适合的溶剂中、例如乙酸乙酯、甲苯、二氯甲烷、氯仿、二乙醚、四氢呋喃、乙腈或N，N-二甲基甲酰胺，在约-10℃至回流的温度下进行。

按照优选的发明实施方式，制备式(I)化合物的方法是利用其中R’是羟基或卤原子、优选氯的式(III)化合物进行的。

对技术人员而言清楚的是，根据该方法步骤a’)的酰胺化反应是按类似方式、在式(IV)氨基衍生物与式(V)羧酸衍生物之间进行的，基本上如上所述。

作为实例，按照步骤a’)，其中R₃是甲基的式(I)化合物的制备是这样进行的，使式(IV)衍生物与乙酰氯(V)反应，或者可能的话与类似的酰化剂反应，例如乙酸酐。

反应是这样进行的，在适合的碱的存在下、例如三乙胺、N-甲基吗啉、N，N-二异丙基乙胺、吡啶或二乙氨基聚苯乙烯，在适合的溶剂中、例如乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃或乙腈，在0℃至室温的温度下进行。

在式(V)化合物中，X是羟基或适合的离去基团，例如卤原子。优选地，X是羟基或氯原子。

按照该方法的步骤a”)，在适合的溶剂中，例如乙腈，在三氟乙酸的存在下，按照用于制备脲基衍生物(其中R₃是氨基的式(I)化合物)的常规方法，使式(IV)中间体化合物与氰酸钾反应。

式(I)化合物的可选成盐作用或者其盐向游离化合物的转化都可以按照常规方法进行。

起始的2-氨基-5-异丙基-1，3-噻唑是已知的化合物，它们容易按照已知方法获得，例如实施例中的报道。

同样，其中R’是羟基或适合的离去基团的式(III)化合物是已知的，或者可以按照常规方法制备。

作为实例，其中R’是羟基、R是如上所述的且R₁是式(IIa)基团的式(III)化合物可以这样制备，在适合的溶剂中、例如甲苯、二甲苯或N，N-二甲基甲酰胺，在回流温度下，使其中R是如上所述的式(VI)化合物

与6，6-二甲基-5，7-二氧杂螺(2，5)辛烷-4，8-二酮反应约2至约6小时。作为替代选择，这些相同的化合物可以这样制备，在适合的溶剂中、例如冰乙酸或盐酸，在150℃至200℃的温度下，使上述式(VI)化合物与γ-丁内酯进行反应。

按照另一种替代方法，这些化合物可以这样制备，在适合的溶剂中、例如氯仿、二氯甲烷、N，N-二甲基乙酰胺，在室温下，使式(VI)化合物与4-氯丁酰氯反应，随后在室温下与无机碱、例如氢氧化钠或氢氧化钾进行反应。

其中R₁是式(IIe)基团的式(III)化合物可以这样制备，使其中R是如上所述的式(VI)化合物与适合的式(V)羧酸衍生物反应，以便得到任何其中R₃不是氨基的式(III)衍生物，或者与氰酸钾反应，以便得到其中R₃是氨基的式(III)衍生物。这里所采用的操作条件是常规的，相当于以前报道的那些，分别涉及酰胺化反应或脲基的制备。

其中R’是羟基、R是如上所述的且R₁是基团(IIb)的式(III)化合物可以借助这样一种方法制备，包含：

a)在适合的溶剂中，例如氯仿或二氯甲烷，在0℃至室温的温度下，使式(VI)化合物与氯代甲酸2-氯乙基酯反应，随后用磷酸钠处理，从而得到其中R是如上所述的式(VII)化合物

b)在适合的无机碱的存在下，例如碳酸钾或碳酸钠，在N，N-二甲基甲酰胺中，或者在有机碱的存在下、例如1，5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯或1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯，在室温下，环化式(VII)化合物。

其中R’是羟基、R是如上所述的、R₁是基团(IId)且R₂是氢的式(III)化合物可以借助这样一种方法制备，包含：

a)借助下列常规方法，将其中R是如上所述的式(VI)化合物转化为其中R是如上所述的对应的甲基酯衍生物(VIII)

b)在适合的溶剂中，例如氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃、1，4-二烷，在约0℃至约室温的温度下，使其中R是如上所述的式(VIII)化合物与异氰酸氯乙酯反应，从而得到其中R是如上所述的式(IX)化合物

c)在适合的无机碱的存在下，例如碳酸钾或碳酸钠，在N，N-二甲基甲酰胺中，或者在有机碱的存在下，例如1，5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯或1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯，在室温下，环化式(IX)化合物，从而得到其中R是如上所述的式(X)化合物

d)在适合的溶剂中，例如水-甲醇或水-四氢呋喃混合物，在室温下，将式(X)化合物用碱、例如碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钠或氢氧化锂水解。

其中R’是羟基、R是如上所述的、R₁是基团(IId)且R₂是烷基的式(III)化合物可以借助这样一种方法制备，包含：

a)在碱的存在下，例如叔丁醇钾或氢化钠，在适合的溶剂中，例如四氢呋喃、乙腈、1，4-二烷或N，N-二甲基甲酰胺，在约0℃至室温的温度下，使式(X)化合物与式(XI)化合物反应，

R₂-X                (XI)

其中R₂是烷基，X是卤素，

从而得到其中R和R₂是如上所述的式(XII)化合物

b)在适合的溶剂中，例如水-甲醇或水-四氢呋喃混合物，在室温下，将式(XII)化合物用碱、例如碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钠或氢氧化锂水解。

其中R是如上所述的且R₁是基团(IIc)的式(I)化合物可以这样制备，在氰基硼氢化钠或氰基硼氢化(聚苯乙烯基甲基)三甲铵的存在下，在适合的溶剂中，例如冰乙酸或三氟乙醇，在室温下，使其中R是如上所述的式(IV)化合物与2，2-二甲基-4-氧代-1，3-二氧戊环-5-乙醛反应，后者例如是如Tetrahedron Lett.，39，(1998)，5313-5316所述制备的。

其中R是如上所述的式(IV)化合物可以借助这样一种方法制备，包含：

a)在适合的偶联剂的存在下，如碳化二亚胺，例如二环己基碳化二亚胺、二异丙基碳化二亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺，使其中R是如上所述的式(XIII)化合物

与5-异丙基-2-氨基-1，3-噻唑反应，后者是借助常规方法制备的，得到其中R是如上所述的式(XIV)化合物

b)在酸性介质中，例如在盐酸或硫酸的存在下，在乙醇中，或者在甲酸或三氟乙酸的存在下，在二氯甲烷中，在室温下水解式(XIV)化合物，时间为约2小时至约12小时。

根据上步a)的反应发生在适合的溶剂中，例如二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二乙醚、1，4-二烷、乙腈、甲苯或N，N-二甲基甲酰胺，反应温度从-10℃至室温。作为替代选择，式(XIV)化合物可以这样制备，在适合的溶剂中，例如甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯，在约0℃至室温的温度下，将式(XIII)化合物用亚硫酰氯或草酰氯转化为对应的酰氯衍生物，随后在适合的碱的存在下，例如三乙胺、甲基吗啉、N，N-二异丙基乙胺或吡啶，在适合的溶剂中，例如乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺，在0℃至室温的温度下，使它们与5-异丙基-2-氨基-1，3-噻唑反应。

其中R是如上所述的式(XIII)化合物可以这样制备，在适合的溶剂中，例如水/1，4-二烷混合物，在碱的存在下，例如碳酸钠，在室温下，使式(VI)化合物与叔丁氧羰基酸酐反应约4至约12小时。

其中R’是离去基团的式(III)化合物适宜按照已知方法制备，从其中R’是羟基的对应的式(III)羧酸衍生物开始。

作为实例，其中R’是卤原子、例如氯的化合物是这样制备的，按照制备酰卤的常规方法，使其中R’是羟基的式(III)衍生物与草酰氯或亚硫酰氯反应。该反应通常是这样进行的，在催化量N，N-二甲基甲酰胺的存在下，在适合的溶剂的存在下、例如二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯或甲苯，在0℃至回流的温度下进行。

式(IV)化合物也可以通过如上所报道的酰胺化反应加以制备，使2-氨基-5-异丙基-1，3-噻唑与式(VIII)化合物反应。

轮到式(VIII)和(V)化合物，如果本身不是商业上可得到的，那么也是已知的或者容易按照已知方法制备。

综上所述，对技术人员而言清楚的是，当按照任何一种上述方法变体制备式(I)化合物时，原料或其中间体内可能引起所不希望的副反应的可选官能团需要按照常规技术加以适当保护。

同样，后者向游离的脱保护的化合物的转化可以按照已知工艺进行。

举例来说，在适合的溶剂中，例如水/1，4-二烷混合物，在碱的存在下，例如碳酸钠，在室温下，通过与二碳酸二叔丁酯反应，时间从约4小时至约12小时不等，可以将氨基例行保护为(BOC)叔丁氧羰基氨基。

随后可以借助酸水解进行任何脱保护作用，例如在盐酸或硫酸的存在下，在乙醇中，或者在甲酸或三氟乙酸的存在下，在二氯甲烷中，在室温下，时间从约2小时至约12小时不等。

正如将被容易领会的是，如果按照上述方法制备的式(I)化合物是异构体的混合物，那么按照常规技术分离为单一的式(I)异构体也属于本发明的范围。

常规外消旋物拆分技术例如包括非对映异构盐衍生物的分步结晶或制备型手性HPLC。

药理学

式(I)化合物作为cdk/细胞周期蛋白抑制剂是有活性的，它们可以用于治疗各种肿瘤，例如癌，例如乳腺癌、肺癌、膀胱癌、结肠癌、卵巢与子宫内膜肿瘤，肉瘤，例如软组织与骨肉瘤，和血液学恶性肿瘤，例如白血病。

另外，式(I)化合物还可用于治疗其他细胞增殖性障碍，例如牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌细胞增殖、手术后狭窄与再狭窄和阿尔茨海默氏病。

公认的cdk/细胞周期蛋白抑制剂的抑制活性最初是利用基于MultiScreen-PH 96孔平板(Millipore)的方法测定的，其中将磷酸纤维素滤纸置于每孔底部，以便在洗涤/过滤步骤之后结合带正电的底物。当放射性标记的磷酸盐部分被丝氨酸/苏氨酸激酶转移至与滤纸结合的组蛋白时，在闪烁计数器中测量所发出的光，方案如下：

激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入100μl缓冲液(TRIS HCl10mM pH 7.5，MgCl₂ 10mM，7.5mM DTT)，其中含有1.5μM组蛋白H1底物、25μM ATP(0.5μCi P³³γ-ATP)、100ng细胞周期蛋白A/cdk2配合物、10μM抑制剂。在37℃下培育10分钟后，利用20μl EDTA120mM终止反应。

捕获：从每孔MultiScreen平板转移100μl，以便底物与磷酸纤维素滤纸结合。然后将平板用150μl/孔不含Ca++/Mg++的PBS洗涤3次，利用MultiScreen过滤系统过滤。

检测：使滤纸在37℃下干燥，然后加入100μl/孔闪烁剂，通过在Top-Count仪器中计数放射性，检测³³P标记的组蛋白H1。

结果：分析数据，以总的酶活性(＝100％)的抑制％表示。

当供试化合物的数量变得一致时，对快速均匀的筛选测定法的需求也增加了。因而，建立起基于SPA技术(Amersham PharmaciaBiotech)的测定方法。该测定法中，放射性标记的磷酸盐部分被激酶转移至生物素基化的底物。使所得33P-标记的生物素化产物与涂有链霉抗生物素的SPA珠粒(生物素容量130pmol/mg)结合，在闪烁计数器中测量所发出的光。

cdk2/细胞周期蛋白A活性的抑制作用测定

激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入30μl缓冲液(TRIS HCl10mM pH 7.5，MgCl₂10mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)，其中含有4μM生物素化组蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、10μM ATP(0.1μCiP³³γ-ATP)、4.2ng cdk2/细胞周期蛋白A配合物、抑制剂。在室温下培育30分钟后，利用含有1mg SPA珠粒的100μl PBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP终止反应。然后将110μl转移至Optiplate。

为捕获底物而培育20分钟后，加入100μl 5M CsCl，以便珠粒statification至平板顶部，放置4小时，然后在Top-Count仪器中计数放射性。

IC₅₀测定：在0.0015至10μM的不同浓度下测试抑制剂。利用计算机程序GraphPad Prizm分析实验数据，其中使用四参数逻辑方程：

y＝底部+(顶部-底部)/(1+10^((1ogIC₅₀-x)*斜率))

其中x是抑制剂浓度的对数，y是响应值；y始于底部，到达顶部斜率呈S形。

关于cdk2/细胞周期蛋白A的Ki

实验方法：在缓冲液(10mM Tris，pH 7.5，10mM MgCl₂，0.2mg/mlBSA，7.5mM DTT)中进行反应，其中含有3.7nM酶、组蛋白和ATP(冷/标记ATP之比恒定为1/3000)。利用EDTA终止反应，底部被捕获在磷酸膜上(Multiscree 96孔平板来自Millipore)。充分洗涤后，在Top-Count上读取Multiscreen平板。测量关于每种ATP与组蛋白浓度的对照(时间为零)。

实验设计：在四种不同的ATP、底物(组蛋白)与抑制剂浓度下测量反应速度。设计一种80点的浓度矩阵，分布在各自ATP与底物的Km值和抑制剂的IC₅₀值附近(Km或IC₅₀值的0.3、1、3、9倍)。在没有抑制剂的存在下，在不同的ATP和底物浓度下，进行初步时间过程实验，以便在Ki测定实验反应的线性范围内选择单一的终点时间(10min)。

动力学参数估算：利用[Eq.1]借助同时进行的非线性最小平方回归法估算动力学参数(关于ATP的竞争性抑制剂，随机机理)，其中使用完整的数据组(80点)：

$v=\frac{\mathrm{Vm}\·A\·B}{\mathrm{\α}\·\mathrm{Ka}\·\mathrm{Kb}+\mathrm{\α}\·\mathrm{Ka}\·B+a\·\mathrm{Kb}\·A+A\·B+\mathrm{\α}\·\frac{\mathrm{Ka}}{\mathrm{Ki}}\·I\·(\mathrm{Kb}+\frac{B}{\mathrm{\β}})}---[\mathrm{Eq}.1]$

其中A＝[ATP]，B＝[底物]，I＝[抑制剂]，Vm＝最大速度，Ka、Kb、Ki分别是ATP、底物和抑制剂的离解常数，α和β分别是底物与ATP结合和底物与抑制剂结合之间的协同性因子。

另外，还已经在与细胞周期严格相关的丝氨酸/苏氨酸激酶(cdk2/细胞周期蛋白E、cdk1/细胞周期蛋白B1、cdk5/p25、cdk4/细胞周期蛋白D1)水平上鉴别了所选择的化合物。

cdk2/细胞周期蛋白E活性的抑制作用测定

激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入30μl缓冲液(TRIS HCl10mM pH 7.5，MgCl₂ 10mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)，其中含有10μM生物素基化组蛋白H1(Sigma #H-5505)底物、30μM ATP(0.3μCi P³³γ-ATP)、4ng GST-细胞周期蛋白E/cdk2配合物、抑制剂。在室温下培育60分钟后，利用含有1mg SPA珠粒的100μl PBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP终止反应。然后将110μl转移至Optiplate。

为捕获底物而培育20分钟后，加入100μl 5M CsCl，以便珠粒statification至平板顶部，放置4小时，然后在Top-Count仪器中计数放射性。

IC₅₀测定：见上。

cdk1/细胞周期蛋白B1活性的抑制作用测定

激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入30μl缓冲液(TRIS HCl10mM pH 7.5，MgCl₂10mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)，其中含有4μM生物素基化组蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、20μM ATP(0.2μCiP³³γ-ATP)、3ng cdk1/细胞周期蛋白B配合物、抑制剂。在室温下培育20分钟后，利用含有1mg SPA珠粒的100μl PBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP终止反应。然后将110μl转移至Optiplate。

为捕获底物而培育20分钟后，加入100μl 5M CsCl，以便珠粒statification至平板顶部，放置4小时，然后在Top-Count仪器中计数放射性。

IC₅₀测定：见上。

cdk5/p25活性的抑制作用测定

按照下列方案进行cdk5/p25活性的抑制作用测定。

激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入30μl缓冲液(TRIS HCl10mM pH 7.5，MgCl₂ 10mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)，其中含有10μM生物素基化组蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、30μM ATP(0.3μCi P³³γ-ATP)、15ng cdk5/p25配合物、抑制剂。在室温下培育30分钟后，利用含有1mg SPA珠粒的100μl PBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP终止反应。然后将110μl转移至Optiplate。

为捕获底物而培育20分钟后，加入100μl 5M CsCl，以便珠粒statification至平板顶部，放置4小时，然后在Top-Count仪器中计数放射性。

IC₅₀测定：见上。

cdk4/细胞周期蛋白D1活性的抑制作用测定

激酶反应：向96孔U形底平板的每孔加入50μl缓冲液(TRIS HCl10mM pH 7.5，MgCl₂10mM，DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)，其中含有0.4μM小鼠GST-Rb(769-921)(# sc-4112，Santa Cruz)底物、10μMATP(0.5μCi P³³γ-ATP)、100ng被杆状病毒表达的GST-cdk4/GST-细胞周期蛋白D1、适合浓度的抑制剂。在37℃下培育40分钟后，利用20μl EDTA 120mM终止反应。

捕获：从每孔转移60μl至MultiScreen平板，以便底物与磷酸纤维素滤纸结合。然后将平板用不含Ca++/Mg++的150μl/孔PBS洗涤3次，利用MultiScreen过滤系统过滤。

检测：将滤纸在37℃下干燥，然后加入100μl/孔闪烁剂，通过在Top-Count仪器中计数放射性，检测³³P标记的Rb片段。

IC₅₀测定：见上。

上述抑制测定法证明，本发明的式(I)化合物具有显著的cdk抑制活性。

作为实例，当测试cdk2/细胞周期蛋白A时，本发明的代表性化合物(2S)-2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺显示抑制活性，以IC₅₀表示，为11nM。

惊人地，所述抑制活性显著优于供对比的非常接近的现有技术化合物。事实上，当如前面所报道的那样测试cdk2/细胞周期蛋白A时，WO 01/14353的化合物N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(乙酰氨基)苯基]乙酰胺(见该文实施例4，跨越第32、33页的段落)显示110nM的IC₅₀值。

在测试cdk2/细胞周期蛋白A时，本发明的另一种代表性化合物、即N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]乙酰胺显示近似的显著优异的活性。

迄今为止，新颖的本发明化合物意外地被赋予cdk抑制活性，明显高于最接近的现有技术WO 01/14353的化合物，因而在疗法中特别有利于对抗与改变的细胞周期依赖性激酶活性有关的增殖性障碍。

限于失调的肿瘤细胞增殖而言，式(I)化合物因此在疗法中可用于治疗各种肿瘤，例如癌，例如乳腺癌、膀胱癌、结肠癌、卵巢与子宫内膜肿瘤，肉瘤，例如软组织与骨肉瘤，和血液学恶性肿瘤，例如白血病。

另外，式(I)化合物还可用于治疗其他细胞增殖性障碍，例如牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌细胞增殖、手术后狭窄与再狭窄和阿尔茨海默氏病。

本发明的化合物能够作为单一的成分给药，或者与已知的抗癌治疗措施联用，例如放射疗法或化疗方案，其中联合细胞抑制剂或细胞毒剂、抗生素型药、烷基化剂、抗代谢剂、激素药、免疫药、干扰素型药、环加氧酶抑制剂(例如COX-2抑制剂)、基质金属蛋白酶抑制剂、端粒酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂、抗生长因子受体剂、抗HER剂、抗EGFR剂、抗血管生成剂(例如血管生成抑制剂)、法尼基转移酶抑制剂、ras-raf信号转导途径抑制剂、细胞周期抑制剂、其它cdk抑制剂、微管蛋白结合剂、拓扑异构酶I抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂等。

作为实例，本发明的化合物可以与一种或多种化疗剂联合给药，例如依西美坦，福美坦，阿那曲唑，来曲唑，法倔唑，紫杉烷与衍生物，例如紫杉醇或多西他赛，包封的紫杉烷，CPT-11，喜树碱衍生物，蒽环糖苷，例如阿霉素，伊达比星，表柔比星，依托泊苷，异长春碱，长春碱，卡铂，顺铂，磷酸雌莫司汀，塞来昔布，他莫昔芬，雷洛昔芬，Sugen SU-5416，Sugen SU-6668，Herceptin等，任选为它们的脂质体制剂。

如果配制成固定剂量，这类组合产物采用在下述剂量范围内的本发明化合物和在许可剂量范围内的其它药物活性成分。

若组合制剂是不适合的，式(I)化合物可以与已知抗癌剂先后使用。

适合于对哺乳动物、例如人类给药的本发明式(I)化合物可以借助通常的途径给药，剂量水平依赖于患者的年龄、体重、条件，和给药途径。

例如，适合于式(I)化合物口服给药的剂量可以从约10至约500mg每剂，每日1至5次。本发明的化合物可以按各种剂型给药，例如口服方式的片剂、胶囊剂、糖衣或膜衣片剂、液体溶液剂或混悬剂；直肠方式的栓剂；肠胃外方式，例如肌内或通过静脉内和/或鞘内和/或脊柱内注射或输注。

本发明还包括药物组合物，包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂，后者可以是载体或稀释剂。

含有本发明化合物的药物组合物通常是遵照常规方法制备的，按适合的药物剂型给药。

例如，固体口服剂型可以含有活性化合物，以及稀释剂，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖(saccharose)、蔗糖(sucrose)、纤维素、玉米淀粉或马铃薯淀粉；润滑剂，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁或硬脂酸钙、和/或聚乙二醇；粘合剂，例如淀粉、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂，例如淀粉、藻酸、藻酸盐或淀粉羟乙酸钠；泡腾混合物；染料；甜味剂；润湿剂，例如卵磷脂、聚山梨醇酯、月桂基硫酸盐；和一般用在药物制剂中的无毒与无药理活性的物质。这些药物制剂可以按照已知方式制造，例如借助混合、造粒、压片、包糖衣或包膜衣过程。

用于口服给药的液体分散系例如可以是糖浆剂、乳剂和混悬剂。

作为实例，糖浆剂可以含有蔗糖或蔗糖与甘油和/或甘露糖醇与山梨糖醇作为载体。

作为载体的实例，混悬剂和乳剂可以含有天然树胶、琼脂、藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯醇。

用于肌内注射的混悬剂或溶液剂可以含有活性化合物以及药学上可接受的载体，例如无菌的水、橄榄油、油酸乙酯、二醇(例如丙二醇)，并且，如果需要的话，适量的盐酸利多卡因。

用于静脉内注射或输注的溶液剂可以含有无菌的水作为载体，或者它们可以是无菌的、含水的、等渗的盐水溶液的形式，或者它们可以含有丙二醇作为载体。

栓剂可以含有活性化合物以及药学上可接受的载体，例如可可脂、聚乙二醇、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂或卵磷脂。

为了更好地理解本发明，但不对其造成任何限制，现给出下列实施例。

实施例1

2-氨基-5-异丙基-1，3-噻唑的制备

将3-甲基丁醛(2ml，18.6mmol)溶于15ml 1，4-二烷。在0℃下向其中滴加2％v/v溴的1，4-二烷溶液(40.4ml，18.6mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时，然后加入2.83g(37.2mmol)硫脲和5ml乙醇。在室温下6小时后，蒸发溶液至干，将残余物溶于CH₂Cl₂，产物用1M盐酸萃取；将含水层用30％氢氧化铵调至碱性，再次用CH₂Cl₂萃取。将有机相经硫酸钠干燥，在真空下蒸发。残余物经过硅胶柱色谱纯化，用环己烷-乙酸乙酯洗脱，得到1.1g(42％收率)标题化合物。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δppm：6.6(s，2H，NH₂)；6.58(s，1H，噻唑CH)；2.9(m，1H，CHMe₂)；1.18(s，3H，MeCHMe)；1.17(s，3H，MeCHMe).

实施例2

2-(4-氨基苯基)丙酸

将10g(0.05mol)2-(4-硝基苯基)丙酸溶于5ml水与100ml甲醇的混合物，加入0.65g Pd/C 5％。使混合物在60psi和室温下氢化2小时。在C盐上过滤分离催化剂后，在真空下蒸发甲醇，经过冷却从水中结晶出标题化合物(7g；85％收率)。

ESI(+)MS：m/z 166(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.08-6.71(2d，4H，CH-苯基，J＝7.1Hz)，3.76(q，1H，CH-Me，J＝7.6Hz)，1.53(d，3H，CH₃，7.6Hz).

实施例3

(2S)-2-(4-氨基苯基)丙酸和(2R)-2-(4-氨基苯基)丙酸

向4.34g 2-(4-氨基苯基)丙酸加入26ml水和3.94g L-(+)-酒石酸。将混合物在80℃下加热、搅拌，直至完全溶解。然后停止加热，使溶液自然冷却。24小时后，过滤出3.8g左旋酒石酸盐，干燥。在40℃真空下浓缩含有右旋酒石酸盐的溶液，以蒸发约10ml水。然后在30℃下冷却溶液，加入1.047g氢氧化钠。过滤收集(+)-(2S)-2-(4-氨基苯基)丙酸，干燥，得到1.36g(α_D ²⁰＝+73.0；C＝0.1％，甲醇)。将左旋酒石酸盐用氢氧化钠处理，得到(-)-(2R)-2-(4-氨基苯基)丙酸。

实施例4

[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]乙酸

将8.8g(0.058mol)4-氨基苯乙酸溶于350ml N，N-二甲基甲酰胺，加入10g(0.058mol)6，6-二甲基-5，7-二氧杂螺(2，5)辛烷-4，8-二酮，将混合物在回流下搅拌8小时。然后在真空下蒸发溶剂，粗产物经过硅胶柱色谱纯化，使用己烷-乙酸乙酯7/3混合物作为洗脱剂，从而得到6.53g(51％收率)标题化合物。

ESI(+)MS：m/z 220(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.19-7.68(2d，4H，CH-苯基，J＝8.7Hz)，3.43(s，2H，CH₂Ph)，3.85(m，2H，CH₂N)，2.57(m，2H，CH₂CO)，2.10(m，2H，CH₂).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从适当的羧酸衍生物开始：

2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]丙酸；

ESI(+)MS：m/z 234(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.17-7.66(2d，4H，CH-苯基，J＝8.6Hz)，3.76(q，1H，CHMe，J＝7.6Hz)，1.53(d，3H，CH₃，J＝7.6Hz)，3.84(m，2H，CH₂N)，2.61(m，2H，CH₂CO)，2.15(m，2H，CH₂).

(2R)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]丙酸；

(2S)-(4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]丙酸。

实施例5

N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]乙酰胺

将2.5g(11.4mmol)[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]乙酸溶于150ml二氯甲烷，在0℃下连续加入1.54g(11.4mmol)N-羟基苯并三唑和2.18g(11.4mmol)1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺。在相同温度下30分钟后，滴加1.35g(5.7mmol)5-异丙基-2-氨基-1，3-噻唑的40ml二氯甲烷溶液。在室温下6小时后，将混合物用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。分离有机层，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩。粗产物经过硅胶柱色谱纯化(己烷-乙酸乙酯7/3)，得到1.17g(60％收率)标题化合物。

ESI(+)MS：m/z 344(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.48-7.51(m，4H，CH-苯基)，3.68(s，2H，CH₂Ph)，7.51(s，1H，CH-噻唑)，3.91(m，1H，CH-异丙基)，1.39(d，6H，CH₃，J＝7.1Hz)3.83(m，2H，CH₂N)，2.60(m，2H，CH₂CO)，2.15(m，2H，CH₂).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从适当的羧酸衍生物开始：

N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]丙酰胺；

(2R)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]丙酰胺；

(2S)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]丙酰胺；

N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]乙酰胺；

N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

(2R)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

(2S)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺。

实施例6

(2S)-2-{4-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基}丙酸

将12g(73mmol)(2S)-2-(4-氨基苯基)丙酸悬浮在140ml 1，4-二烷与140ml水中，用7.6g(73mmol)碳酸钠的70ml水溶液处理。将所得溶液冷却至4℃，用17.2g(79mmol)叔丁氧基羰基酸酐(tertbutoxycarbonylanhydride)处理，搅拌过夜，使温度达到室温。蒸发溶剂，将含水相用150ml乙酸乙酯洗涤，用200ml相同的溶剂稀释，在搅拌的同时用130ml 1M含水硫酸氢钾处理。分离有机层，含水相用更多的乙酸乙酯萃取。合并有机萃取液，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，蒸发，用己烷研制，过滤，得到18.18g(94％收率)标题化合物。

ESI(+)MS：m/z 266(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.47-7.52(m，4H，CH-苯基)，3.76(q，1H，CHMe，J＝7.6Hz)，1.53(d，3H，CH₃，J＝7.6)，1.51(s，9H，叔丁基).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从适当的羧酸衍生物开始：

(2R)-2-{4-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基}丙酸；

2-{4-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基}丙酸；

4-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基乙酸；

ESI(+)MS：m/z 252(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.45-7.51(2d，4H，CH-苯基，J＝8.8Hz)，3.43(s，2H，CH₂Ph)，1.51(s，9H，叔丁基).

实施例7

(2S)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺

在4℃下，将265mg(1mmol)(2S)-2-{4-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基}丙酸用0.146ml(2mmol)亚硫酰氯处理。将反应混合物搅拌2.5小时，使反应温度逐渐升至室温。将混合物蒸发至干，溶于四氢呋喃，彻底蒸发。该粗产物无需进一步纯化即可用于下面的步骤。将其溶于3ml无水四氢呋喃，在室温下滴加到113mg(0.8mmol)5-异丙基-2-氨基-1，3-噻唑与0.14ml(1mmol)三乙胺的5ml四氢呋喃溶液中。3小时后，蒸发溶剂，将粗产物重新溶于5ml二氯甲烷，加入1ml三氟乙酸。将混合物在室温下搅拌4小时。蒸发溶剂，得到油，用饱和碳酸氢钠溶液处理，用二氯甲烷萃取若干次。合并有机萃取液，经硫酸钠干燥，蒸发，得到115mg(50％总收率)标题化合物。

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从适当的羧酸衍生物开始：

(2R)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺。

实施例8

2-(4-{[(2-氯乙氧基)羰基]氨基}苯基)丙酸

将1g(6mmol)2-(4-氨基苯基)丙酸溶于30ml二氯甲烷。将混合物冷却至0℃，加入1.24ml(12mmol)氯代甲酸2-氯乙基酯。30分钟后，分批加入2.27g(12mmol)磷酸钠十二水合物，将反应混合物保持搅拌3小时。然后加入0.5N盐酸，直至pH为酸性，用二氯甲烷萃取产物。将有机层经硫酸钠干燥，蒸发，得到油，从二异丙醚中结晶后，得到1.3g(93％收率)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.47-7.58(2d，4H，CH-苯基，J＝9.0Hz)，3.75(q，1H，CH-Me，J＝7.6Hz)，4.31(m，2H，CH₂Cl)，3.62(m，2H，CH₂O)，1.53(d，3H，CH₃，7.6Hz).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从适当的羧酸衍生物开始：

(2R)-2-(4-{[(2-氯乙氧基)羰基]氨基}苯基)丙酸；

(2S)-2-(4-{[(2-氯乙氧基)羰基]氨基}苯基)丙酸；

(4-{[(2-氯乙氧基)羰基]氨基}苯基)乙酸；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.44-7.60(2d，4H，CH-苯基，J＝8.8Hz)，3.43(s，2H，CH₂Ph)，4.30(m，2H，CH₂Cl)，3.63(m，2H，CH₂O).

实施例9

2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酸

将500mg(1.85mmol)2-(4-{[(2-氯乙氧基)羰基]氨基}苯基)丙酸溶于10ml N，N-二甲基甲酰胺，在室温下加入0.55ml(3.7mmol)1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯。搅拌2小时后，将混合物倒入150ml水中，用1N盐酸酸化，用乙酸乙酯彻底萃取。将有机萃取液经硫酸钠干燥，蒸发至干，得到350mg(80％收率)标题化合物，从乙酸乙酯-二异丙醚混合物中结晶。

ESI(+)MS：m/z 236(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.08-7.35(2d，4H，CH-苯基，J＝8.6Hz)，3.76(q，1H，CH-Me，J＝7.6Hz)，3.80(m，2H，CH₂N)，4.45(m，2H，CH₂O)，1.53(d，3H，CH₃，7.6Hz).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从适当的氯代衍生物开始：

(2R)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酸；

(2S)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酸；

[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]乙酸；

ESI(+)MS：m/z 222(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.10-7.38(2d，4H，CH-苯基，J＝8.7Hz)，3.43(s，2H，CH₂Ph)，3.79(m，2H，CH₂N)，4.45(m，2H，CH₂O).

实施例10

N-(4-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酰胺

将460mg(1.96mmol)2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酸悬浮在15ml二氯甲烷中，在0℃下加入0.22ml(2.5mmol)草酰氯和一滴N，N-二甲基甲酰胺。搅拌2小时后，蒸发溶剂，将粗产物重新溶于15ml四氢呋喃，在0℃下滴加到250mg(1.764mmol)5-异丙基-2-氨基-1，3-噻唑与2.2ml(11.76mmol)N，N-二异丙基乙胺在11ml相同溶剂中的溶液中。使反应温度逐渐升至室温，5小时后，在真空下蒸发溶剂，将粗产物重新溶于二氯甲烷，用水洗涤。有机层最后经硫酸钠干燥，蒸发，残余物经过硅胶柱色谱纯化，得到450mg(71％总收率)标题化合物。

ESI(+)MS：m/z 360(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：6.88(s，4H，CH-苯基)，3.85(q，1H，CHMe，J＝6.8Hz)，1.25(d，3H，CH₃，J＝6.8Hz)，7.55(s，1H，CH-噻唑)，3.90(m，1H，CH异丙基)，1.38(d，6H，CH₃-异丙基，J＝7.0Hz)，3.80(m，2H，CH₂N)，4.40(m，2H，CH₂O).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从适当的羧酸衍生物开始：

N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]乙酰胺；

ESI(+)MS：m/z 346(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.58(m，4H，CH-苯基)，3.66(s，2H，CH₂)，7.51(s，1H，CH-噻唑)，3.91(m，1H，CH-异丙基)，1.39(d，6H，CH₃-异丙基，J＝7.1Hz)，3.79(m，2H，CH₂N)，4.45(m，2H，CH₂O).

(2R)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酰胺；

(2S)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酰胺；

N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]乙酰胺；

N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

(2R)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

(2S)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺。

实施例11

2-(4-氨基苯基)丙酸甲酯

将10g(0.06mol)4-氨基苯基丙酸悬浮在100ml甲醇中。将反应混合物冷却至0℃，滴加10ml 96％硫酸。将所得溶液保持在室温下过夜，然后倒入冰水中，用30％氢氧化铵碱化，用二氯甲烷萃取若干次。有机相经硫酸钠干燥，得到10g(93％收率)标题化合物，为一种油。

ESI(+)MS：m/z 180(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：6.50-6.94(2d，4H，CH-苯基，J＝8.6Hz)，3.70(q，1H，CHMe，J＝7.2Hz)，1.48(d，3H，CH₃，J＝7.2Hz)，3.50(s，3H，CH₃O).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从适当的羧酸衍生物开始：

(2R)-2-(4-氨基苯基)丙酸甲酯；

(2S)-2-(4-氨基苯基)丙酸甲酯；

2-(4-氨基苯基)乙酸甲酯；

ESI(+)MS：m/z 166(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：6.49-7.00(2d，4H，CH-苯基，J＝8.0Hz)，3.55(s，2H，CH₂Ph)，3.48(s，3H，CH₃O).

实施例12

2-[4-({[(2-氯乙基)氨基]羰基}氨基)苯基]丙酸甲酯

将700mg(3.9mmol)2-(4-氨基苯基)丙酸甲酯溶于10ml二氯甲烷，在室温下加入0.4ml(4.68mmol)异氰酸2-氯乙基酯。2小时后，过滤收集所生成的沉淀，在真空下essicate，得到1g(90％收率)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.28-7.53(2d，4H，CH-苯基，J＝9.0Hz)，3.69(q，1H，CHMe，J＝7.1Hz)，1.44(d，3H，CH₃，J＝7.1Hz)，3.48(s，3H，CH₃O)，3.50(m，2H，CH₂Cl)，3.31(m，2H，CH₂N).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从适当的氨基衍生物开始：

(2R)-2-[4-({[(2-氯乙基)氨基]羰基}氨基)苯基]丙酸甲酯；

(2S)-2-(4-({[(2-氯乙基)氨基]羰基}氨基)苯基]丙酸甲酯；

2-[4-({((2-氯乙基)氨基]羰基}氨基)苯基]乙酸甲酯。

实施例13

2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸甲酯

将950mg(3.3mmol)2-[4-({[(2-氯乙基)氨基]羰基}氨基)苯基]丙酸甲酯溶于20ml N，N-二甲基甲酰胺，加入2ml 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯。将反应混合物保持在室温下达6小时。加入500ml 1/1己烷/乙酸乙酯混合物，将有机相用1N盐酸、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，蒸发至干，得到760mg(92％收率)标题化合物。

ESI(+)MS：m/z 249(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.19-6.82(2d，4H，CH-苯基，J＝8.6Hz)，3.69(q，1H，CHMe，J＝7.2Hz)，1.48(d，3H，CH₃，J＝7.2Hz)，3.50(s，3H，CH₃O)，3.85(m，2H，CH₂N)，3.48(m，2H，CH₂NH).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从适当的氯代衍生物开始：

(2R)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸甲酯；

(2S)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸甲酯；

2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]乙酸甲酯。

实施例14

2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸

将850mg(3.42mmol)2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸甲酯溶于30ml甲醇，加入10ml饱和碳酸钠溶液。在室温下过夜后，蒸发甲醇，将含水相用乙酸乙酯萃取，用1N盐酸酸化，用二氯甲烷再次萃取。将有机层经硫酸钠干燥，蒸发，得到400mg(50％收率％)标题化合物。

ESI(+)MS：m/z 235(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.03-7.33(2d，4H，CH-苯基，J＝8.6Hz)，3.76(q，1H，CHMe，J＝7.6Hz)，1.53(d，3H，CH₃，J＝7.6Hz)，3.84(m，2H，CH₂N)，3.48(m，2H，CH₂NH).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从适当的酯衍生物开始：

(2R)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸；

(2S)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸；

2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]乙酸；

(2R)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸；

(2S)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸；

2-(4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸；

ESI(+)MS：m/z 249(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：7.14-7.35(2d，4H，CH-苯基，J＝8.5Hz)，3.76(q，1H，CHMe，J＝7.6Hz)，1.52(d，3H，CH₃，J＝7.6Hz)，3.20(m，2H，CH₂NMe)，3.70(m，2H，CH₂NPh)，2.75(s，3H，CH₃N)；

2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]乙酸。

实施例15

2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸甲酯

在氩气氛下，将248mg(1mmol)2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸甲酯的N，N-二甲基甲酰胺溶液用120mg(3mmol)氢化钠60％处理。20分钟后，加入0.068ml(1.1mmol)甲基碘。2小时后，将反应物倒入冰水中，用10ml己烷-乙酸乙酯1/1稀释，用2N盐酸洗涤两次。将有机相经硫酸钠干燥，蒸发，经过色谱纯化(己烷-乙酸乙酯6/4)，得到105mg(40％收率)标题化合物。

ESI(+)MS：m/z 263(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)ppm：6.93-7.19(2d，4H，CH-苯基，J＝8.4Hz)，3.69(q，1H，CHMe，J＝7.2Hz)，1.48(d，3H，CH₃，J＝7.2Hz)，3.35(m，2H，CH₂NMe)，3.70(m，2H，CH₂NPh)，2.74(s，3H，CH₃N)，3.44(s，3H，CH₃O).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从适当的酯衍生物开始：

(2R)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸甲酯；

(2S)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酸甲酯；

2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]乙酸甲酯。

实施例16

(2S)-2-{4-[(3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺

将158mg(1mmol)[(4S)-2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧戊环-4-基]乙醛和290mg(1mmol)(2S)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺溶于10ml三氟乙醇，用氰基硼氢化(聚苯乙烯基甲基)三甲铵(Novabiochem，负载率3.0-4.5mmol/g)处理，在室温下搅拌过夜。在这些条件下，从还原性胺化作用衍生的仲胺自发地生成γ-内酰胺。滤出树脂，用甲醇洗涤。蒸发滤液，粗产物经过闪式色谱纯化，得到269mg(72％收率)标题化合物。

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的氨基衍生物和适合的(2，2-二甲基-5-氧代-1，3-二氧戊环-4-基)乙醛开始：

2-[4-(3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；

2-{4-[(3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；

2-{4-[(3R)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；

2-[4-(3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

2-{4-[(3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

2-{4-[(3R)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

(2R)-2-{4-[(3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

(2S)-2-{4-((3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

(2R)-2-{4-[(3R)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

(2S)-2-{4-[(3R)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺。

实施例17

4-[(1S)-2-氯-1-甲基-2-氧代乙基]苯基氨基甲酸叔丁酯

将(2S)-2-{4-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基}丙酸(4.2g，15.85mmol)溶于无水四氢呋喃(48ml)，加入一滴N，N-二甲基甲酰胺，在+4℃氩气氛下滴加净草酰氯(1.49ml，17.43mmol)。将反应混合物搅拌2小时，使反应温度逐渐升至室温。蒸发混合物至干；将灰白色固体溶于环己烷，过滤，用环己烷彻底洗涤，在真空下干燥。得到酰氯，收率84％，无需进一步纯化即可用于下面的步骤。

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的酸衍生物开始：

4-((1R)-2-氯-1-甲基-2-氧代乙基]苯基氨基甲酸叔丁酯；

4-(2-氯-1-甲基-2-氧代乙基)苯基氨基甲酸叔丁酯；

4-(2-氯-2-氧代乙基)苯基氨基甲酸叔丁酯。

实施例18

4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基氨基甲酸叔丁酯

向2-氨基-5-异丙基-1，3-噻唑(1.63g，11.48mmol)的无水四氢呋喃(50ml)溶液加入二乙氨基甲基-聚苯乙烯(Fluka，负载率3.2mmol/g，3.98g)。轻轻地搅拌反应混合物，在+4℃氩气氛下用4-[(1S)-2-氯-1-甲基-2-氧代乙基]苯基氨基甲酸叔丁酯(3.61g，12.756mmol)的四氢呋喃(40ml)溶液滴加处理。在+4℃下1小时继之以在室温下2小时后，加入三(2-氨基乙基)胺聚苯乙烯(Novabiochem，负载率3.2mmol/g，2.3g)，以螯合所有未反应的酰氯及其对应的酸。搅拌1小时后，过滤树脂，用二氯甲烷和甲醇洗涤若干次。蒸发挥发物，留下浅黄色无定形固体，无需进一步纯化即可用于下一步。

ESI(+)MS：m/z 390(100，MH+)；

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δppm：11.98(s，1H)，9.24(s，1H)，7.35(d，2H，J＝8.7Hz)，7.2(d，2H，J＝8.7Hz)，7.10(s，1H)，3.85(q，1H，J＝7.0Hz)，3.1(m，1H，J＝6.8Hz)，1.44(s，9H)，1.36，(d，3H，J＝7.0Hz)，1.22(d，6H，J＝6.8Hz).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的酰氯衍生物开始：

4-{(1R)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基氨基甲酸叔丁酯；

4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基氨基甲酸叔丁酯；

4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基氨基甲酸叔丁酯；

m.p.179-180℃；

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δppm：12.1(s，1H)，9.22(s，1H)，7.35(d，2H)，7.19(s，1H)，7.15(d，2H)，3.6(s，2H)，1.43(s，9H)，1.11(d，6H).

实施例19

(2S)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺

将粗品4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基氨基甲酸叔丁酯用二氯甲烷与三氟乙酸的8∶2混合物(130ml)处理，同时在室温下搅拌。2.5小时后，蒸发挥发物，将粗产物溶于少量甲醇(～15ml)，滴加到饱和碳酸氢钠水溶液(200ml)中，同时搅拌。有白色固体沉淀出来，过滤，用水洗涤若干次。在40℃真空下干燥后，得到2.96g灰白色结晶性固体(TLC：二氯甲烷/甲醇95∶5)，收率89％(两步)。

ESI(+)MS：m/z 290(100，MH+)；

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ11.86(s，1H)，7.10(s，1H)，6.97(d，2H，J＝2.0Hz)，6.47(d，2H，J＝2.0Hz)，4.92(s，2H)，3.85(q，1H，J＝7.0Hz)，3.1(m，1H，J＝6.8Hz)，1.31(d，3H，7.0Hz)，1.22(d，6H，J＝6.8Hz)；

C₁₅H₁₉N₃OS的元素分析：理论值：C，62.25；H，6.62；N，14.52；S，11.08.实测值：C，57.93；H，6.16；N，13.07；S，9.53.

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的氨基甲酸叔丁酯开始：

(2R)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；

m.p.165-166℃；

1H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δppm：11.98(s，1H)，7.13(s，1H)，7-6.6(m，4H)，5.9(s，2H)，3.55(s，2H)，3.08(m，1H)，1.12(d，6H).

实施例20

(2S)-2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺

将(2S)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺(1.6g，5.54mmol)溶于吡啶(18ml)，在+4℃氩气氛下用净乙酸酐(627μl，6.648mmol)逐滴处理。1.5小时后，使温度升至室温，另外1.5小时后，将反应混合物缓慢加入到300ml冰水中，同时搅拌。有粘性固体沉淀出来。含水相用二氯甲烷萃取(300ml，100ml×2)，然后将有机相先用2N HCl(200ml)洗涤，再用饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)洗涤，最后用少量盐水洗至中性，经硫酸钠干燥，蒸发挥发物，得到1.62g粗产物。进一步经过柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇95∶5)，得到1.58g纯化合物，为灰白色无定形固体(86％收率)。

ESI(+)MS：m/z 332(100，MH+)；

1H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ12.00(s，1H)，9.95(s，1H)，7.48(d，2H，J＝8.2Hz)，7.24(d，2H，J＝8.2Hz)，7.10(s，1H)，3.87(q，1H，7.1Hz)，3.05(m，1H，J＝6.8Hz)，1.99(s，3H)，1.37(d，3H，J＝7.1Hz)，1.21(d，6H，J＝6.8Hz)；

C₁₇H₂₁N₃O₂S的元素分析：理论值：C，61.61；H，6.39；N，12.68；S，9.67.实测值：C，61.11；H，6.45；N，12.48；S，9.31；

对映体过量：99.5％(手性HPLC).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的氨基衍生物开始：

(2R)-2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺。

实施例21

(2S)-2-{4-[(氨基羰基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺

将(2S)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺(289mg，1mmol)溶于乙腈，在室温下用三氟乙酸(153μl，2mmol)和氰酸钾(162mg，2mmol)处理，搅拌直至均匀，放置过夜。蒸发溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯。将有机相先用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，再用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，蒸发。所得黄色的油经过柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇96∶4)，得到205mg标题化合物，为白色固体(收率：62％)。

ESI(+)MS：m/z 333(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ11.95(s，1H)，8.6(s，1H)，7.30(d，2H，J＝8.7Hz)，7.17(d，2H，J＝8.7Hz)，7.10(s，1H)，5.75(s，2H)，3.83(q，1H，J＝6.9Hz)，3.07(m，1H，J＝6.8Hz)，1.36(d，3H，J＝6.9Hz)，1.22(d，6H，J＝6.8Hz)；

C₁₆H₂₀N₄O₂S的元素分析：理论值：C，57.81；H，6.06；N，16.85；S，9.65.实测值：C，56.73；H，6.06；N，16.28；S，7.54.

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的氨基衍生物开始：

(2R)-2-{4-[(氨基羰基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

2-{4-[(氨基羰基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

2-{4-[(氨基羰基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺。

实施例22

({4-[(S)-1-(5-异丙基-噻唑-2-基氨基甲酰基)乙基]苯基氨基甲酰基}甲基)氨基甲酸叔丁基酯

将(2S)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺(289mg，1mmol)与Boc-gly-OH(210mg，1.2mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液用N-环己基碳化二亚胺-N’-甲基聚苯乙烯(Novabiochem，负载率1.93mmol/g，1.04g)处理。将混合物轻轻搅拌1小时，然后在+4℃下放置过夜。过滤树脂，用二氯甲烷彻底洗涤。蒸发溶剂，留下黄色的油(HPLC纯度93％，在254nm下测量)，无需进一步纯化即可进行下一步转化。

ESI(+)MS：m/z 447(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：12.00(s，1H)，9.95(s，1H)，7.49(d，2H，8.5Hz)，7.26(d，2H，J＝8.5)，7.11(s，1H)，6.96(t，1H，J＝6.1Hz)，3.7(q，1H，J＝7.1Hz)，3.26(d，2H，J＝6.1Hz)，3.06(m，1H，J＝6.8Hz)，1.35(s，9H)，1.37(d，3H，J＝7.1Hz)，δ1.21(d，6H，J＝6.8Hz).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的氨基衍生物开始：

({4-[(R)-1-(5-异丙基-噻唑-2-基氨基甲酰基)乙基]苯基氨基甲酰基}甲基)氨基甲酸叔丁基酯；

({4-[1-(5-异丙基-噻唑-2-基氨基甲酰基)乙基]苯基氨基甲酰基}甲基)氨基甲酸叔丁基酯；

({4-[(5-异丙基-噻唑-2-基氨基甲酰基)甲基]苯基氨基甲酰基}甲基)氨基甲酸叔丁基酯。

实施例23

(2S)-2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺

在室温下，将({4-[(S)-1-(5-异丙基-噻唑-2-基氨基甲酰基)乙基]苯基氨基甲酰基}甲基)氨基甲酸叔丁基酯用二氯甲烷与三氟乙酸的9∶1混合物(10ml)处理，搅拌1.5小时，然后蒸发。将剩余的油溶于少量绝对乙醇(～5ml)，滴加到饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)中，同时搅拌。将含水相用二氯甲烷萃取，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，蒸发。粗产物经过柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇9∶1+1％TEA)，得到217mg纯化合物(总收率：63％)。

ESI(+)MS：m/z 347(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ7.54(d，2H，J＝8.7Hz)，7.26(d，2H，J＝8.7Hz)，7.11(s，1H)，1.21(d，6H，J＝6.8Hz)，3.88(q，1H，J＝7.1Hz)，3.05(m，1H，J＝6.8Hz)，1.37(d，3H，J＝7.1Hz)；

C₁₇H₂₂N₄O₂S的元素分析：理论值：C，58.94；H，6.40；N，16.17；S，9.25.实测值：C，56.88；H，6.56；N，15.07；S，7.69.

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的氨基甲酸叔丁基酯开始：

(2R)-2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)甘氨酰胺。

实施例24

N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺

在+4℃惰性气氛下，将盐酸烟酰氯(762mg，4.15mmol)的吡啶(30ml)溶液用(2S)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺(800mg，2.77mmol)的吡啶(19ml)溶液处理，同时搅拌。2小时后，使反应物达到室温，放置过夜。第二天，加入更多的盐酸烟酰氯(254mg)使反应进行完全。将反应混合物滴加到碎冰与水(600ml)中，同时搅拌，但是所生成的沉淀是相当有粘性的。含水相用乙酸乙酯萃取(300ml，100ml×2)。合并有机萃取液，经硫酸钠干燥，蒸发挥发物，留下1.56g黄色的油。进一步经过色谱纯化(二氯甲烷/甲醇95∶5)，得到967mg标题化合物(收率：89％)。

ESI(+)MS：m/z 395(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ12.05(s，1H)，10.40(s，1H)，9.04-9.09(m，1H)，8.70-8.76(m，1H)，8.22-8.28(m，1H)，7.69(d，2H，J＝8.5Hz)，7.50-7.57(m，1H)，7.33(d，2H，J＝8.5Hz)，7.12(s，1H)，3.92(q，1H，J＝7.1Hz)，3.07(m，1H，J＝6.8Hz)，1.40(d，3H，J＝7.1Hz)，1.22(d，6H，J＝6.8Hz)；

C₂₁H₂₂N₄O2S的元素分析：理论值：C，63.94；H，5.62；N，14.20；S，8.13.实测值：C，63.49；H，5.65；N，14.10；S，8.10.

对映体过量：99.5％(手性HPLC).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的氨基衍生物开始：

N-(4-{(1R)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺；

N-(4-{2-((5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺。

实施例25

N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)吡啶-2-甲酰胺

将(2S)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺(289mg，1mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，先用吡啶甲酸(148mg，1.2mmol)在少量DMF中的溶液处理，再用N-环己基碳化二亚胺-N’-甲基聚苯乙烯(Novabiochem，负载率1.93mmol/g，1.04g)处理，在轨道摇动器上搅拌过周末。由于起始的氨基衍生物仍然存在，分批加入更多的吡啶甲酸(148mg×3)以及更多的N-环己基碳化二亚胺-N’-甲基聚苯乙烯(1g)。第二天，蒸发溶剂，粗产物经过色谱纯化(二氯甲烷/乙酸乙酯8∶2)，得到231mg纯化合物，为灰白色无定形固体(收率：59％)。

ESI(+)MS：m/z 395(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ12.04(s，1H)，10.57(s，1H)，8.70(m，1H)，8.12(m，1H)，8.04(m，1H)，7.80(d，2H，J＝8.5Hz)，7.66(m，1H)，7.33(d，2H，J＝8.5Hz)，7.11(s，1H)，3.91(q，1H，J＝7.1Hz)，3.07(m，1H，J＝6.8Hz)，1.41(d，3H，J＝7.1Hz)，1.22(d，6H，J＝6.8Hz)；

C₂₁H₂₂N₄O₂S的元素分析：理论值：C，63.94；H，5.62；N，14.20；S，8.13.实测值：C，61.91；H，5.71；N，13.92；S，7.31.

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的氨基衍生物开始：

N-(4-{(1R)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)吡啶-2-甲酰胺；

N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)吡啶-2-甲酰胺；

N-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)吡啶-2-甲酰胺。

实施例26

N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺

将(2S)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺(289mg，1mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，先用异烟酸(148mg，1.2mmol)在少量DMF中的溶液处理，再用N-环己基碳化二亚胺-N’-甲基聚苯乙烯(Novabiochem，负载率1.93mmol/g，1.04g)处理，在轨道摇动器上搅拌过周末。由于起始的氨基衍生物(2S)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺仍然存在，分批加入更多的异烟酸(148mg×3)以及更多的N-环己基碳化二亚胺-N’-甲基聚苯乙烯(1g，0.5g)。两天后，蒸发溶剂，粗产物经过色谱纯化(二氯甲烷/乙酸乙酯9∶1)，得到231mg纯化合物，为灰白色无定形固体(收率：59％)。

ESI(+)MS：m/z 395(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ12.04(s，1H)，10.45(s，1H)，8.75(d，2H，J＝6.1Hz)，7.83(d，2H，J＝6.1Hz)，7.68(d，2H，J＝8.5Hz)，7.35(d，2H，J＝8.5)，7.12(s，1H)，3.91(q，1H，J＝7.1Hz)，3.07(m，1H，J＝6.8Hz)，1.41(d，3H，J＝7.1Hz)，1.23(d，6H，J＝6.8Hz)；

C₂₁H₂₂N₄O₂S的元素分析：理论值：C，63.94；H，5.62；N，14.20；S，8.13.实测值：C，62.74；H，5.75；N，13.94；S，8.13.

对映体过量：99.5％(手性HPLC).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的氨基衍生物开始：

N-(4-{(1R)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺；

N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺；

N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺。

实施例27

2-[(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)氨基]-2-氧代乙基乙酸酯

将(2S)-2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺(3.6g，12.46mmol)溶于二氯甲烷(60ml)，先用N，N-二异丙基乙胺(2.6ml，14.95mmol)处理，再在+4℃氩气氛下用乙酰氧基乙酰氯(1.61ml，14.95mmol)的二氯甲烷(40ml)溶液处理。1小时后，将反应物用二氯甲烷稀释，用1N HCl洗涤，再用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，最后用少量盐水洗至中性。经硫酸钠干燥，蒸发挥发物，以定量收率和纯的形式得到所需化合物，为黄色无定形固体。

ESI(+)MS：m/z 390(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ10.01(s，1H)，7.49(d，2H，J＝8.8Hz)，7.28(d，2H，J＝8.8Hz)，7.11(s，1H)，4.60(s，2H)，3.88(q，1H，J＝6.9Hz)，3.06(m，1H，J＝6.8Hz)，2.09(s，3H)，1.38(d，3H，J＝6.9Hz)，1.22(d，6H，J＝6.8Hz).

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的氨基衍生物开始：

2-[(4-{(1R)-2-((5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)氨基]-2-氧代乙基乙酸酯；

2-[(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)氨基]-2-氧代乙基乙酸酯；

2-[(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)氨基]-2-氧代乙基乙酸酯。

实施例28

(2S)-2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺

在室温下，将2-[(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-氧代乙基}苯基)氨基]-2-氧代乙基乙酸酯(5g，12.85mmol)的四氢呋喃(80ml)溶液用氢氧化锂一水合物(1.08g，25.27mmol)的水(80ml)溶液处理。1小时后，部分地蒸发反应物，将含水相用1M含水硫酸氢钾中和，用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，蒸发。粗产物经过闪式色谱纯化(二氯甲烷/丙酮9∶1)，得到3.82g标题化合物，为白色固体(收率：86％)。

ESI(+)MS：m/z 348(100，MH+)；

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ12.01(s，1H)，9.58(s，1H)，7.60(d，2H，J＝8.5Hz)，7.25(d，2H，J＝8.5Hz)，7.11(d，1H，J＝1.0Hz)，5.59(t，1H，J＝5.9Hz)，3.93(d，2H，J＝5.9Hz)，3.88(q，1H，J＝7.1Hz)，3.05(m，1H，J＝6.9Hz，J＝10Hz)，1.38(d，3H，J＝7.1Hz)，1.21(d，6H，J＝6.9Hz)；

对映体过量：99.5％(手性HPLC)；

[α]_D+207°(C＝1，CH₃OH)；

C₁₇H₂₁N₃O₃S的元素分析：理论值：C，58.77；H，6.09；N，12.09；S，9.23.实测值：C，58.58；H，6.25；N，11.65；S，9.12.

按照类似的方式操作，可以制备下列化合物，从对应的氨基衍生物开始：

(2R)-2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺。

Claims (26)

1、由通式(I)代表的苯乙酰氨基噻唑衍生物或其药学上可接受的盐用于制备治疗哺乳动物中与改变的细胞周期依赖性激酶活性有关的细胞增殖性障碍的药物的用途：

其中：

R是氢原子或者直链或支链C₁-C₄烷基；

R₁是式(IIa-e)基团

其中R₂是氢或者直链或支链C₁-C₆烷基，环(IIc)上的羟基位于任意一个空位上；

R₃选自由氨基、氨甲基、羟甲基、直链或支链C₁-C₄烷基组成的组，或者它是具有1或2个选自氮、氧和硫的杂原子的5或6元杂环；

其条件是若R是氢，则R₃不是甲基或吡啶-3-基。

2、根据权利要求1的用途，其中细胞增殖性障碍选自由癌症、阿尔茨海默氏病病毒感染、自身免疫疾病和神经变性障碍组成的组

3、根据权利要求2的用途，其中癌症选自由癌、鳞状细胞癌、骨髓或淋巴系的造血系统肿瘤、间充质来源的肿瘤、中枢与外周神经系统的肿瘤、黑瘤、精原细胞瘤、畸胎样癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角化棘皮瘤、甲状腺滤泡癌和卡波济氏肉瘤组成的组。

4、根据权利要求1的用途，其中细胞增殖性障碍选自由良性前列腺增生、家族性腺瘤病息肉病、神经纤维瘤病、牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌细胞增殖、肺纤维变性、关节炎、肾小球性肾炎和手术后狭窄与再狭窄组成的组。

5、根据权利要求1的用途，其中所述药物用于抑制肿瘤血管生成和转移。

6、根据权利要求1的用途，其中所述药物用于治疗或预防放疗诱发的或化疗诱发的脱发。

7、根据权利要求1的用途，其中所述药物用于对需要的哺乳动物联合使用放射疗法或化疗方案及至少一种细胞抑制剂或细胞毒剂。

8、根据权利要求1的用途，其中所述的哺乳动物是人。

9、根据权利要求1的用途，其中所述的式(I)化合物选自由N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]乙酰胺、(2S)-2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺、N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺和N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺组成的组。

10、由通式(I)代表的苯乙酰氨基噻唑衍生物

其中：

R是氢原子或者直链或支链C₁-C₄烷基；

R₁是式(IIa-e)基团

其中R₂是氢或者直链或支链C₁-C₆烷基，环(IIc)上的羟基位于任意一个空位上；

R₃选自由氨基、氨甲基、羟甲基、直链或支链C₁-C₄烷基组成的组，或者它是具有1或2个选自氮、氧和硫的杂原子的5或6元杂环；

其条件是若R是氢，则R₃不是甲基或吡啶-3-基；

或其药学上可接受的盐。

11、根据权利要求10的式(I)苯乙酰氨基噻唑衍生物，其中R是甲基。

12、根据权利要求10的式(I)苯乙酰氨基噻唑衍生物，其中R₁是式(IIa)或(IIb)基团。

13、根据权利要求10的式(I)苯乙酰氨基噻唑衍生物，其中R₁是式(IIc)基团，其羟基位于吡咯烷环的3-位。

14、根据权利要求10的式(I)苯乙酰氨基噻唑衍生物，其中R₁是式(IIe)基团，其中R₃选自由甲基、吡啶-4-基或吡啶-3-基组成的组。

15、根据权利要求10的式(I)苯乙酰氨基噻唑衍生物，其中R是氢原子。

16、根据权利要求10的式(I)苯乙酰氨基噻唑衍生物，其中R是氢原子，R₁是式(IIa)基团，该衍生物是N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]乙酰胺。

17、根据权利要求10的式(I)苯乙酰氨基噻唑衍生物，选自由(2S)-2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺、N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺和N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺组成的组。

18、根据权利要求10的式(I)苯乙酰氨基噻唑衍生物，任选为药学上可接受的盐的形式，选自下组：

1).N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]乙酰胺；

2).N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]丙酰胺；

3).(2R)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]丙酰胺；

4).(2S)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]丙酰胺；

5).2-[4-(3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；

6).2-{4-[(3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；

7).2-{4-[(3R)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；

8).2-[4-(3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

9).2-{4-[(3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

10).2-{4-[(3R)-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

11).(2R)-2-{4-[(3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

12).(2S)-2-{4-[(3S)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

13).(2R)-2-{4-[(3R)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

14).(2S)-2-{4-[(3R)-3-羟基-2-氧代-1-吡咯烷基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

15).N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]乙酰胺；

16).N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酰胺；

17).(2R)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酰胺；

18).(2S)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1，3-唑烷-3-基)苯基]丙酰胺；

19).N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]乙酰胺；

20).N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

21).(2R)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

22).(2S)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

23).N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]乙酰胺；

24).N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

25).(2R)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

26).(2S)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)苯基]丙酰胺；

27).(2S)-2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

28).(2R)-2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

29).2-[4-(乙酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

30).(2S)-2-{4-[(氨基羰基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

31).(2R)-2-{4-[(氨基羰基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

32).2-{4-[(氨基羰基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

33).2-{4-[(氨基羰基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；

34).(2S)-2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

35).(2R)-2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

36).2-[4-(甘氨酰氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；

37).N-1-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)甘氨酰胺；

38).N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺；

39).N-(4-{(1R)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺；

40).N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺；

41).N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)吡啶-2-甲酰胺；

42).N-(4-{(1R)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)吡啶-2-甲酰胺；

43).N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)吡啶-2-甲酰胺；

44).N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)吡啶-2-甲酰胺；

45).N-(4-{(1S)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺；

46).N-(4-{(1R)-2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺；

47).N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-1-甲基-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺；

48).N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)异烟酰胺。

19、制备如权利要求10所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐的方法，该方法包含使2-氨基-5-异丙基-1，3-噻唑与式(III)化合物反应，

其中R和R₁是如权利要求10所定义的，R’是羟基或适合的离去基团，

任选地，再转化它们为其药学上可接受的盐。

20、根据权利要求19的方法，其中R’是羟基或卤原子。

21、根据权利要求20的方法，其中R’是羟基或氯原子。

22、药物组合物，包含治疗有效量的如权利要求10所定义的式(I)苯乙酰氨基噻唑衍生物和至少一种药学上可接受的赋形剂、载体和/或稀释剂。

23、根据权利要求22的药物组合物，进一步包含一种或多种化疗剂。

24、产品或试剂盒，包含联合制剂的形式的如权利要求10所定义的式(I)化合物或如权利要求22所定义的其药物组合物，以及一种或多种化疗剂，在抗癌疗法中同时、单独或先后使用。

25、权利要求10所定义的式(I)化合物用于制备具有细胞周期依赖性激酶活性的药物的用途。

26、权利要求10所定义的式(I)化合物用于制备具有抗肿瘤活性的药物的用途。