CN1281956C - 色谱定量测定装置及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及的色谱定量测定装置及其制备方法，如图1所示，由不能润湿的反应层载体支持体1、将液体试样添加到其上部的试样添加部分2、保持有标记试剂的标记试剂保持部分3、反应层4的区域中固定有特异性蛋白质的抗体固定部5和吸收液体试样的吸水部分6构成，上述反应层载体除添加液体试样的一部分之外，被不透液性片材7密合。另外，片材7为了提高密合性能也可以使用粘合剂，另外不透液性片材7的材料使用不透液性材料，其材质是半透明或不透明时，在检测区也可以设置窗口。这种结构的色谱定量测定装置及其制备方法可以缩短定量检测液体试样中分析对象物的测定时间，提高测定性能。
Description
技术区域
本发明涉及利用抗原抗体反应定量测定被测物质的色谱定量测定装置及其制备方法，特别是具有不透液性片材的色谱定量测定装置及其制备方法。
背景技术
以前，作为实施水质检查、尿检查等液体试样的化学试验或临床试验的方法，广泛采用利用抗原抗体反应的免疫色谱法进行测定。一般，色谱法是指将混合物根据其构成成分进行分离的方法，由包括添加液体试样的部分、保持有随液体试样浸透可以移动的标记试剂的部分、具有与流动的分析对象物特异性结合的物质与标记试剂发生结合反应的部分、吸收流动试样的部分的试件构成。该色谱测定装置的测定方法可以将液体试样添加在试件上放置，经过一定时间后发生显色反应引起显色或变色，通过目视检测方式进行判断。
免疫色谱测定原理是利用抗原抗体反应的特异性，鉴定抗原或抗体的测定方法。其操作是将液体试样添加到免疫色谱试件上，由液体试样溶解的标记试剂向浸透方向展开，与液体试样中的分析对象物能够特异性结合的物质被固定，在测定区域发生显色。另外，免疫色谱的分析结果是通过显色反应进行判断，因此是通过目视检测方式进行记录。也就是说，由于检测结果的判断非常容易，具有用途范围广的特色。
这种采用免疫色谱法的测定可以用于各种分析对象物的检查。但是，对于分析对象物不仅需要定性检测，而且需要定量解答时，有时虽然也可以采用这种测定方法，但只能得出半定量的结果。因此，期望提供一种能得到定量分析结果的手段。
为了改善这一问题，在特开平8-240591号报告中公开了免疫色谱试件。该免疫色谱试件的测定方法是添加试样进行反应后，用检测仪器测定显色部分的吸收或反射等信号，确定试件上检测出的显色程度。此外，特开平8-334511号公报公开的免疫色谱试件的测定方法是使用图象传感器给显色的免疫色谱试件摄像，对图象转换出的色调图象进行解析处理，求出显色程度进行定量测定。
但是，使用免疫色谱试件进行定量测定时，如特开平8-240591号或特开平8-334511号列举的实施例那样，由于其显色反应伴有的显色程度的强弱或浓淡，采用分别相应的检测仪器进行定量测定。以前，一般的免疫色谱试件由于没有机械控制，且不能人为控制，液体试样的浸透速度会左右试件的浸透性。例如，由于液体试样从试件的侧面蒸发，测定区域流出的分析对象物的量不均一。另外，每次测定使用的各个免疫色谱试件有时添加的液体试样量和标记试剂量并不是恒定的。因此，存在这些原因会导致一定时间后的定量测定值差异大的问题。
而且，免疫色谱试件是添加液体试样后，经过一定时间后进行测定的，这种情况下有时浸透的标记试剂一起溶出，作为背景残留在反应层上。如果该背景的值加在显色程度上，则检测仪器的测定包含了这种误差。因此，免疫色谱试件难以在短时间内进行定量测定，另外流到反应层上的标记试剂残留量并不是恒定的，每次测定或者每个使用的试件不同，导致这时显色程度的读数误差较大。
由于以上问题，采用免疫色谱法定量测定的性能根据试件的规格和添加的液体试样量的差异，或背景带来的误差，只不过是半定量。因此，为了更准确地进行测定，强烈希望提高试件的性能。
另外，使用以前的免疫色谱试件，测定全血或细菌溶液等含有细胞成分的液体试样时，液体试样的粘性、细胞成分的存在会使反应层载体出现堵塞。结果导致测定时间长，其间出现液体试样的干燥等，造成反应的精度或定量性能差。因此，强烈需要即使在全血或细菌溶液等的测定中，也能简便而容易地测定的免疫色谱定量测定装置。
本发明的目的在于解决上述问题，提供一种色谱定量测定装置及其制备方法，测定精度不受添加的液体试样的性质影响，能够准确读取作为分析对象物的液体试样与标记试剂反应结果的显色程度，而且不受背景带来的标记试剂残留量的影响。
发明公开
本发明(权利要求1)涉及的色谱定量测定装置具有不能润湿的反应层载体支持体、该支持体上部形成的1至任意数量的部件构成的可以润湿的层，该可以润湿的层由添加液体试样的部分、保持有可以移动的标记试剂的部分、能够与具有与液体试样中的分析对象物特异性结合的物质的标记试剂进行结合反应的部分以及吸收液体试样的部分构成，其特征在于在该色谱定量测定装置中，在除添加液体试样的部分之外的表面和侧面上以密合状态设置不透液性片材。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外一定时间内流过的液体试样与标记试剂以均一的浓度流出。
本发明(权利要求2)涉及的色谱定量测定装置具有不能润湿的反应层载体支持体、该支持体上部形成的1至任意数量的部件构成的可以润湿的层，该可以润湿的层由添加液体试样的部分、保持有一定量可以移动的预先制备的分析对象物与标记试剂形成的结合体试剂的部分、能够与具有与液体试样中的分析对象物特异性结合的物质的上述结合体试剂与上述液体试样中的分析对象物进行竞争性结合反应的部分以及吸收液体试样的部分构成，其特征在于在该色谱定量测定装置中，在除添加液体试样的部分之外的表面和侧面上以密合状态设置不透液性片材。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外一定时间内流过的液体试样与标记试剂以均一的浓度流出。
本发明(权利要求3)涉及的色谱定量测定装置具有不能润湿的反应层载体支持体、该支持体上部形成的1至任意数量的部件构成的可以润湿的层，该可以润湿的层由添加了保持有破坏液体试样中细胞成分的物质的液体试样的部分、保持有可以移动的标记试剂的部分、能够与具有与液体试样中的分析对象物特异性结合的物质的标记试剂进行结合反应的部分以及吸收液体试样的部分构成，其特征在于在该色谱定量测定装置中，在除添加液体试样的部分之外的表面和侧面上以密合的状态设置不透液性片材。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，通过破坏液体试样中的细胞成分，使液体试样的浸透状况均一，而且可以控制一定时间内流过的试样量与标记试剂量。
本发明(权利要求4)涉及的色谱定量测定装置具有不能润湿的反应层载体支持体、该支持体上部形成的1至任意数量的部件构成的可以润湿的层，该可以润湿的层由添加了保持有破坏液体试样中细胞成分的物质的液体试样的部分、保持有一定量可以移动的预先制备的分析对象物与标记试剂形成的结合体试剂的部分、能够与具有与液体试样中的分析对象物特异性结合的物质的上述结合体试剂和上述液体试样中的分析对象物进行竞争性结合反应的部分以及吸收液体试样的部分构成，其特征在于在该色谱定量测定装置中，在除添加液体试样的部分之外的表面和侧面上以密合的状态设置不透液性片材。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透状况均一，而且可以控制一定时间内流过的试样量与结合体试剂量。
本发明(权利要求5)是权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于除添加液体试样的部分之外的表面，或者表面至反面均具备不透液性片材。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透状况均一。而且，标记试剂也能够以均一的浓度流出，可以将显色部分加上的背景值的影响抑制到很低。
本发明(权利要求6)是权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于结构中除去了上述反应层载体支持体，除添加液体试样的部分之外的周围具备上述不透液性片材。
这种结构的色谱定量测定装置可以减少材料的数量。而且，可以使液体试样的浸透状况均一，控制一定时间内流过的试样量和标记试剂量。另外，液体试样不会从间隙漏出，同时液体试样不会由试样添加部分以外的外部侵入。
本发明(权利要求7)是权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于相对于添加的液体试样浸透的方向，上述不透液性片材的垂直侧面开放。
这种结构的色谱定量测定装置可以将液体浸透时空气的排放仅限定于浸透方向，使液体试样与标记试剂以均一的浓度流出。
本发明(权利要求8)是权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于对于添加的液体试样浸透的方向，上述不透液性片材的端部在上述色谱定量测定装置端部的任意场所开放。
这种结构的色谱定量测定装置可以将液体浸透时空气的排放仅限定于浸透方向，使液体试样与标记试剂以均一的浓度流出。
本发明(权利要求9)是权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述不透液性片材通过任意粘着性物质构成的粘合剂附着。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且不透液性片材不会由于液体试样的浸透剥离。
本发明(权利要求10)是权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述不透液性片材通过任意粘着后固化的粘合剂附着。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅能使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且不透液性片材不会由于液体试样的浸透而剥离。此外，由于粘合剂在粘着后固化，检测器切割时不会有糊状材料附着在切割器具上，不仅容易大量生产，而且糊状材料不会浸透反应层，可以防止反应层载体或特异性蛋白质的变性，从而长时间保持色谱定量测定装置的性能。
本发明(权利要求11)是权利要求9所述的色谱定量测定装置，其特征在于用于不透液性片材的粘合剂由热塑性树脂构成。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且不透液性片材不会由于液体试样的浸透剥离。此外，由于粘合剂在粘着后通过冷却固化，检测器切割时不会有糊状材料附着在切割器具上，不仅容易大量生产，而且糊状材料不会浸透反应层，可以防止反应层载体或特异性蛋白质的变性，从而长时间保持色谱定量测定装置的性能。
另外，这里所说的热塑性树脂是指具有下述性质的树脂，即常温时为固体，通过加热可以使之软化进行加工，之后冷却即可固化，也就是说通过反复冷却和加热，可逆地保持塑性的性质。这种热塑性树脂有聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚偏二氯乙烯、氟树脂、聚甲基丙烯酸甲酯、聚酰胺、聚酯、聚碳酸酯、聚苯醚、聚氨酯、聚缩醛等。
本发明(权利要求12)是权利要求9所述的色谱定量测定装置，其特征在于用于不透液性片材的粘合剂由热固性树脂构成。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且不透液性片材不会由于液体试样的浸透而剥离。此外，由于粘合剂在粘着后固化，检测器切割时不会有糊状材料附着在切割器具上，不仅容易大量生产，而且糊状材料不会浸透反应层，可以防止反应层载体或特异性蛋白质的变性，从而长时间保持色谱定量测定装置的性能。
另外，这里所说的热固化树脂是指具有下述性质的树脂，即通过加热可以使之软化进行加工，但是继续加热则固化，因而不能再次软化，这种热固性树脂有尿素树脂、三聚氰胺树脂、酚醛树脂等。
本发明(权利要求13)是权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述不透液性片材由透明或半透明的任意不透液性材料构成。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且从外部测定检测区的结果时，由于可以通过目视进行检测，容易测量。
本发明(权利要求14)是权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述不透液性片材由半透明或不透明的任意不透液性材料构成，在检测区具备透明窗。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且从外部测定检测区的结果时，由于可以通过目视进行检测，容易测量。
本发明(权利要求15)是权利要求3或4所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述添加液体试样的部分所保持的破坏细胞成分的物质为表面活性剂。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且可以避免全血或细菌溶液等液体试样发生的细胞成分堵塞，使浸透状况均一，可以在短时间内更准确地定量测定。
本发明(权利要求16)是权利要求3或4所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述添加液体试样的部分保持的破坏细胞成分的物质由氯化钠或氯化钾等氯化物构成。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且可以避免全血或细菌溶液等液体试样发生的细胞成分堵塞，使浸透状况均一，不抑制结合反应，能够在短时间内更准确地定量测定。
本发明(权利要求17)是权利要求3或4所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述添加液体试样的部分保持的破坏细胞成分的物质是皂甙类。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且可以避免全血或细菌溶液等液体试样发生的细胞成分堵塞，使浸透状况均一，能够在短时间内更准确地定量测定。
本发明(权利要求18)是权利要求3或4所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述添加液体试样的部分保持的破坏细胞成分的物质是溶菌酶等具有溶菌效果的物质。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且可以避免细菌溶液等液体试样发生的细胞成分堵塞，使浸透状况均一，能够在短时间内更准确地定量测定。
本发明(权利要求19)是权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置的制备方法，其特征在于预先将上述不透液性片材在任意温度下熟化后，使之密合在色谱定量测定装置的表面和侧面。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且通过熟化可以促进不透液性片材的粘合剂等含有的对蛋白质或反应层有不良影响的有机溶剂的挥发，可以更长时间的稳定保存。
另外，这里所说的熟化是指在任意的一定环境下，将不透液性片材放置任意的时间。
本发明(权利要求20)是权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置的制备方法，其特征在于配置上述不透液性片材，在任意的温度和压力下将不透液性片材密合在色谱定量测定装置的表面和侧面。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且可以使不透液性片材更牢固的结合在色谱测定装置的表面和侧面。
另外，这里所说的不透液性片材例如热封型粘合片材，通过热压胶合等中常见的层压加工可以使片材粘合。
本发明(权利要求21)是权利要求19或20所述的色谱定量测定装置的制备方法，其特征在于将用于上述不透液性片材的粘合剂在高于常温的温度下熔融，达到带有粘性的性状，粘着后固化使之附着。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且不透液性片材不会由于液体试样的浸透而剥离。此外，由于粘合剂在粘着后固化，检测器切割时不会有糊状材料附着在切割器具上，不仅容易大量生产，而且可以防止反应层载体或特异性蛋白质的变性，从而提供能够长时间保持色谱定量测定装置性能的试件的制备方法。
另外，这里所说的粘合剂是通过加热使糊状材料软化，粘合后冷却则固化的物质，优选在常温下不软化，在更低温度下可以熔融的低熔点粘合剂。
本发明(权利要求22)是权利要求21所述的色谱定量测定装置的制备方法，其特征在于用于不透液性片材的粘合剂由热塑性树脂构成。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且不透液性片材不会由于液体试样的浸透而剥离。此外，由于粘合剂在粘着后通过冷却固化，检测器切割时不会有糊状材料附着在切割器具上，不仅容易大量生产，而且糊状材料不会浸透反应层，可以防止反应层载体或特异性蛋白质的变性，从而长时间保持色谱定量测定装置的性能。
本发明(权利要求23)是权利要求21所述的色谱定量测定装置的制备方法，其特征在于用于不透液性片材的粘合剂由热固性树脂构成。
这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外，不仅使一定时间内流过的液体试样和标记试剂以均一的浓度流出，而且不透液性片材不会由于液体试样的浸透而剥离。此外，由于粘合剂在粘着后固化不熔融，检测器切割时不会有糊状材料附着在切割器具上，不仅容易大量生产，而且糊状材料不会浸透反应层，可以防止反应层载体或特异性蛋白质的变性，从而长时间保持色谱定量测定装置的性能。
图面的简单说明
图1表示本发明实施方式中色谱定量测定装置的结构。
图2是除去本发明实施方式中色谱定量测定装置的不透液性片材后的免疫色谱试件。
图3表示本发明实施方式5中色谱定量测定装置的结构。
图4表示同一色谱定量测定装置中，从垂直于浸透方向的侧面见到的剖面图。
图5表示本发明实施方式6的色谱定量测定装置中，不透液性片材同时构成反应层载体支持体的结构。
图6表示同一色谱定量测定装置中，从垂直于浸透方向的侧面可见的剖面图。
图7表示试验例中用不透液性片材粘合被覆在反应层载体上的场合(a)以及没有不透液性片材的场合(b)的定量性能。发明的发明最佳实施方式
(实施方式1)
以下参照图1和图2说明本发明权利要求1记载的发明的实施方式1。
图1表示本发明实施方式中色谱定量测定装置的结构，图2是构成图1的色谱定量测定装置的不透液性片材后的免疫色谱试件。
图2中，1是支持色谱材料的由塑料等构成的反应层载体支持体。2是由吸收性大的无纺布等构成的用于添加或涂敷液体试样的试样添加部，3是在无纺布等上面保持有可以溶解的标记试剂的标记物保持部位，4是硝化纤维素等形成的反应层，5是反应层4的区域上固定有特异性蛋白质的抗体固定部位，6是最终吸收液体试样的吸水部位。以上2～6的各部位均在反应层载体支持体1的上部形成。另外，图1中，7是被覆在图2的试件表面上由塑料带等构成的不透液性片材。
以下，对于这种结构的色谱定量测定装置，说明其测定方法。
开始测定时，由于液体试样添加部2的一部分没有被不透液性片材7覆盖，将液体试样添加到该没有覆盖的部位。添加到试样添加部2的液体试样到达标记物保持部位3的区域，标记物保持部位3的区域保持的标记试剂被液体试样浸透溶解，浸透到反应层4的区域。在反应层4的区域上具有固定有特异性蛋白质的抗体固定部位5，与从标记物保持部位3的区域溶出的标记试剂进行结合反应。这时，液体试样中如果存在分析对象物，在抗体固定部5的区域可见某些显色反应。最终，液体试样被吸水部6吸收，结束反应。这里，抗体固定部5出现的显色反应可以通过任意的检测仪器测量，进行定量测定。
另外，抗体固定部位5的区域不一定必须是一个，可以在反应层4的区域上存在任意多个特异性蛋白质区域。另外，反应层载体支持体1例如是由塑料等构成的，但也可以是任意的不透液性材料。而且，试样添加部2、标记物保持部位3、反应层4、吸水部6例如是由无纺布或硝化纤维素构成，但即使由任意的多孔性载体构成也没有问题。
这样，采用本实施方式1的色谱定量测定装置，除添加液体试样的部分之外，不透液性片材7以密合的状态覆盖在色谱定量测定装置的表面或侧面，因此可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透均一。也就是说，一定时间内流过的液体试样与标记试剂能够以均一的浓度流出。另外，在以前的方法中，由于标记试剂集中在浸透的液体试样的前端，高浓度的标记试剂一次流出，产生未反应的标记试剂，而在本实施方式1中，可以抑制未反应标记试剂的残留量，降低由残留标记试剂产生测定误差的背景值的影响。因此，由于也降低了加在显色部分上的背景值的影响，可以在短时间内进行测定，实现更高灵敏度、更高性能的色谱定量测定。
(实施方式2)
以下参照实施方式1说明的图1和图2，对本发明权利要求2记载的发明实施方式2进行说明。
图2中的3是无纺布等保持有一定量可以溶解的预先制备的分析对象物与标记试剂形成的结合体试剂的标记物结合体试剂保持部位。另外，图1和图2中与上述实施方式1相同的结构使用同样的符号，在此省略说明。
以下，对于这种结构的色谱定量测定装置，说明其测定方法。
开始测定时，由于液体试样添加部2的一部分没有被不透液性片材7覆盖，将液体试样添加到该没有覆盖的部位。添加到试样添加部2的液体试样到达标记物结合体试剂保持部位3的区域，分析对象物和标记物结合体试剂保持部位3的区域保持的结合体试剂被液体试样浸透溶解，浸透到反应层4的区域。在反应层4的区域上具有固定有特异性蛋白质的抗体固定部5，从标记物结合体试剂保持部位3的区域溶出的结合体试剂和液体试样中的分析对象物进行竞争性结合反应。这时，液体试样中如果不存在分析对象物，在抗体固定部位5的区域可见显色反应。另外，如果存在分析对象物，在抗体固定部位5的区域与液体试样中分析对象物的浓度成比例可见显色反应。最终，液体试样被吸水部位6吸收，结束反应。这里，抗体固定部位5出现的显色反应可以通过任意的检测仪器测量，进行定量测定。
另外，抗体固定部位5的区域不一定必须是一个，可以在反应层4的区域上存在任意多个特异性蛋白质区域。另外，反应层载体支持体1例如是由塑料构成的，但也可以是任意的不透液性材料。而且，试样添加部位2、标记物结合体试剂保持部位3、反应层4、吸水部6例如是由无纺布或硝化纤维素构成的，但即使由任意的多孔性载体构成也没有问题。
这样，采用本实施方式2的色谱定量测定装置，除添加液体试样的部分之外，不透液性片材7以密合的状态覆盖在色谱定量测定装置的表面或侧面，因此可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透均一。也就是说，一定时间内流出的液体试样与结合体试剂能够以均一的浓度流出。另外，在以前的方法中，由于结合体试剂集中在浸透的液体试样的前端，高浓度的结合体试剂一次流出，产生未反应的结合体试剂，而在本实施方式2中，可以抑制未反应结合体试剂的残留量，降低由残留结合体试剂产生测定误差的背景值与空白值的影响。因此，由于也降低了加在显色部分上的背景值与空白值的影响，可以在短时间内进行测定，实现更高灵敏度、更高性能的竞争结合型色谱定量测定。
(实施方式3)
以下参照实施方式1说明的图1和图2，对本发明权利要求3记载的发明实施方式3进行说明。
图2中的2是保持有破坏细胞成分的物质由吸收性大的无纺布等构成的添加或涂敷液体试样的试样添加部位。3是无纺布等保持有可以溶解的标记试剂的标记物保持部位。另外，图1和图2中与上述实施方式1相同的结构使用同样的符号，在此省略说明。
以下，对于这种结构的色谱定量测定装置，说明其测定方法。
开始测定时，由于液体试样添加部位2的一部分没有被不透液性片材7覆盖，将液体试样添加到该没有覆盖的部位。添加到试样添加部位2的液体试样通过试样添加部位2所含有的细胞成分破坏物质的作用，液体试样中的细胞成分被破坏。这种细胞成分被破坏了的液体试样到达标记物保持部位3的区域，标记物保持部位3的区域保持的标记试剂被液体试样浸透溶解，浸透到反应层4的区域。在反应层4的区域上具有固定有特异性蛋白质的抗体固定部5，与标记物保持部位3的区域溶出的标记试剂进行结合反应。这时，液体试样中如果存在分析对象物，在抗体固定部5的区域可见显色反应。最终，液体试样被吸水部6吸收，结束反应。这里，抗体固定部5出现的显色反应可以通过任意的检测仪器测量，进行定量测定。
另外，抗体固定部5的区域不一定必须是一个，可以在反应层4的区域上存在任意多个特异性蛋白质区域。另外，反应层载体支持体1例如是由塑料构成的，但也可以是任意的不透液性材料。而且，试样添加部2、标记物保持部位3、反应层4、吸水部6例如是由无纺布或硝化纤维素构成的，但即使由任意的多孔性载体构成也没有问题。
这样，采用本实施方式3的色谱定量测定装置，由于在试样添加部位2上设有保持破坏细胞成分的物质的部分，液体试样中的细胞成分被破坏，在反应层载体上的浸透可以顺利进行。另外，除添加液体试样的一部分之外，不透液性片材7以密合的状态覆盖在色谱定量测定装置的表面或侧面，因此可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透均一。也就是说，一定时间内流过的液体试样与结合体试剂能够以均一的浓度流出。另外，在以前的方法中，液体试样中的细胞成分增高了液体试样的粘度，在浸透反应层载体的过程中细胞成分引起堵塞，浸透速度显著恶化。另外，标记试剂集中在浸透的液体试样的前端，高浓度的标记试剂一次流出，产生未反应的标记试剂，而在本实施方式3中，可以破坏液体试样中的细胞成分，防止反应层载体堵塞，保持一定的浸透速度。另外，可以抑制未反应标记试剂的残留量，降低由残留标记试剂产生测定误差的背景值的影响。因此，由于可以防止细胞成分的堵塞，也降低了加在显色部分上的背景值的影响，使用含有细胞成分的液体试样时使测定时间变短，实现更高灵敏度、更高性能的色谱定量测定。
(实施方式4)
以下参照实施方式1说明的图1和图2，对本发明权利要求4记载的发明实施方式4进行说明。
图2中，2是保持有破坏细胞成分的物质的由吸收性大的无纺布等构成的添加或涂敷液体试样的试样添加部。3是无纺布等保持有一定量可以溶解的预先制备的由分析对象物与标记试剂形成的结合体试剂的标记物结合体试剂保持部位。另外，图1和图2中与上述实施方式1相同的结构使用同样的符号，在此省略说明。
以下，对于装置结构的色谱定量测定装置，说明其测定方法。
开始测定时，由于液体试样添加部位2的一部分没有被不透液性片材7覆盖，将液体试样添加到该没有覆盖的部位。添加到试样添加部位2的液体试样通过试样添加部位2所含有的细胞成分破坏物质的作用，液体试样中的细胞成分被破坏。这种细胞成分被破坏了的液体试样到达标记物保持部位3的区域，分析对象物和标记物结合体试剂保持部位3的区域保持的结合体试剂被液体试样浸透溶解，浸透到反应层4的区域。在反应层4的区域上具有固定有特异性蛋白质的抗体固定部5，标记物结合体试剂保持部位3的区域溶出的结合体试剂和液体试样中的分析对象物进行竞争性结合反应。这时，液体试样中如果不存在分析对象物，在抗体固定部5的区域可见显色反应。另外，如果存在分析对象物，在抗体固定部5的区域与液体试样中分析对象物的浓度成比例地可见显色反应。最终，液体试样被吸水部6吸收，结束反应。这里，抗体固定部5出现的显色反应可以通过任意的检测仪器测量，进行定量测定。
另外，抗体固定部位5的区域不一定必须是一个，可以在反应层4的区域上存在任意多个特异性蛋白质区域。另外，反应层载体支持体1例如是由塑料构成的，但也可以是任意的不透液性材料。而且，试样添加部2、标记物保持部位3、反应层4、吸水部6例如是由无纺布或硝化纤维素构成的，但即使由任意的多孔性载体构成也没有问题。
这样，采用本实施方式4的色谱定量测定装置，由于设有保持破坏细胞成分的物质的部分，液体试样中的细胞成分被破坏，在反应层载体上的浸透可以顺利进行。另外，除添加液体试样的部分之外，不透液性片材7以密合的状态覆盖在色谱定量测定装置的表面或侧面，因此可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透均一。也就是说，一定时间内流过的液体试样与结合体试剂能够以均一的浓度流出。另外，在以前的方法中，由于液体试样中的细胞成分增高了液体试样的粘性，在浸透反应层载体的过程中细胞成分引起堵塞，浸透速度显著恶化。另外，标记试剂集中在浸透的液体试样的前端，高浓度的标记试剂一次流出，产生未反应的标记试剂，而在本实施方式4中，液体试样中的细胞成分被破坏，可以防止反应层载体的堵塞，保持一定的浸透速度。另外，可以抑制未反应标记试剂的残留量，降低由残留标记试剂产生测定误差的背景值的影响。因此，由于可以防止细胞成分的堵塞，也降低了加在显色部分上的背景值的影响，使用含有细胞成分的液体试样时可以在短时间内进行测定，实现更高灵敏度、更高性能的竞争结合型色谱定量测定。
(实施方式5)
以下参照图3和图4，对本发明权利要求5记载的发明实施方式5进行说明。
图3表示本发明实施方式5的色谱定量测定装置的结构，图4是图3的色谱定量测定装置从垂直于浸透方向的侧面见到的剖面图。另外，图4中，反应层支持体1与不透液性片材7之间夹着试样添加部2，从另一垂直侧面看的场合，该试样添加部2成为吸水部6。
图3和图4中，不透液性片材7相对于液体试样的浸透方向密合在反应层载体的表面、平行侧面和反面。这时，色谱定量测定装置由于液体试样添加部位2的一部分没有被不透液性片材7覆盖，从没有覆盖的部分添加液体试样进行测定。另外，图3和图4中与上述实施方式1相同的结构使用同样的符号，在此省略说明。
这样，采用本实施方式5的色谱定量测定装置，除添加液体试样的部分之外，不透液性片材7以密合的状态覆盖在色谱定量测定装置的表面或表面乃至反面，因此可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透均一，一定时间内流过的液体试样与结合体试剂能够以均一的浓度流出。而且，由于可以将加在显色部分上的背景值的影响抑制到很低，可以在短时间内进行测定，实现更高灵敏度、更高性能的色谱定量测定。另外，液体试样不会从间隙漏出，而且液体试样也不会从试样添加部2以外的外部侵入。
(实施方式6)
以下参照图5和图6，对本发明权利要求6记载的发明实施方式6进行说明。
图5表示本发明实施方式6的色谱定量测定装置的结构，图6表示图5的色谱定量测定装置从垂直于浸透方向的侧面见到的剖面图。另外，图6中，不透液性片材7之间夹着试样添加部2，从另一垂直侧面看的场合，该试样添加部2成为吸水部6。
图5和图6中，色谱定量测定装置除去了支持的反应层载体支持体1(参照图1)，不透液性片材7相对于液体试样的浸透方向密合在反应层载体的周围。也就是说，不透液性片材7同时构成了反应层载体支持体1。这时，色谱定量测定装置由于液体试样添加部位2的一部分没有被不透液性片材7覆盖，从没有覆盖的部分添加液体试样进行测定。另外，与上述实施方式1相同的结构使用同样的符号，在此省略说明。
这样，采用本实施方式6的色谱定量测定装置，由于不透液性片材7同时构成了反应层载体支持体，可以削减色谱定量测定装置的材料数。另外，不透液性片材7以密合的状态覆盖在色谱定量测定装置的周围，可以防止水分的蒸发，在液体浸透时将空气的排放仅限定于浸透方向，使液体试样的浸透均一，一定时间内流过的液体试样与结合体试剂能够以均一的浓度流出。而且，由于可以将加在显色部分上的背景值的影响抑制到很低，可以在短时间内进行测定，实现更高灵敏度、更高性能的色谱定量测定。另外，液体试样不会从间隙漏出，而且液体试样也不会从试样添加部位2以外的外部侵入。
(实施方式7)
以下参照实施方式1说明的图1，对本发明权利要求7和8记载的发明的实施方式7进行说明。
图1表示本发明实施方式7的色谱定量测定装置的结构。另外，图1中与上述实施方式1相同的结构使用同样的符号，在此省略说明。
图1中，不透液性片材7相对于色谱定量测定装置中液体试样浸透的方向，在垂直侧面或端部的任意场所开放。
这样，采用本实施方式7的色谱定量测定装置，由于色谱定量测定装置被不透液性片材7覆盖时，其两端部开放，可以将液体浸透时空气的排放仅限定于浸透方向，使液体试样与标记试剂以均一的浓度流出。
(实施方式8)
以下对本发明权利要求9记载的发明的实施方式8进行说明。
本实施方式8中，不透液性片材密合在色谱定量测定装置上时，通过丙烯酸树脂等粘着性物质构成的粘合剂使之粘着。
这样，采用本实施方式8的色谱定量测定装置，由于不透液性片材通过任意的粘合剂密合在色谱定量测定装置上，液体试样浸透时，片材不会从密合的面上剥离，可以增加粘着强度。
(实施方式9)
以下，对本发明权利要求10～12记载的发明的实施方式9进行说明。
本实施方式9中，不透液性片材密合在色谱定量测定装置上时，通过粘着后固化的粘合剂附着。
这样，采用本实施方式9的色谱定量测定装置，由于不透液性片材通过粘着后固化的粘合剂密合在色谱定量测定装置上，粘着后糊状材料不会向反应层载体转移，可以防止反应层的变色或变性、固定的特异性蛋白质变性或失活。
(实施方式10)
以下，对本发明权利要求13记载的发明的实施方式10进行说明。
本实施方式10中，不透液性片材的材料不仅可以使用塑料，也可以使用乙烯胶带(vinyl tape)或PET(PolyethyleneTerephthalate)等任意的不透液性材料。
这样，采用本实施方式10的色谱定量测定装置，由于不透液性片材是透明或半透明材料制成的，从外部测定检测区的结果时，由于可以通过目视进行检测，容易测量。
(实施方式11)
以下，对本发明权利要求14记载的发明的实施方式11进行说明。
本发明的实施方式11中，不透液性片材使用的材料为半透明或不透明的任意不透液性材料，为了容易从外部测定反应结果，在成为测定部位的抗体固定部5(参照图1)的区域上设置透明窗。另外，该窗部分的材料可以使用塑料、乙烯胶带或PET等任意的不透液性材料。
这样，采用本实施方式11的色谱定量测定装置，由于不透液性片材使用半透明或不透明的材料，在检测区的任意部位设置透明窗，从外部测定检测区的结果时，由于可以通过目视进行检测，容易测量。
(实施方式12)
以下，对本发明权利要求15～18记载的发明的实施方式12进行说明。
本实施方式12中，使用的细胞成分破坏物质为表面活性剂、氯化钠、氯化钾这种任意的氯化物、皂甙、溶菌酶等任意具有溶菌效果的物质。
这样，采用本实施方式12的色谱定量测定装置，由于试样添加部位保持有上述细胞成分破坏物质，即使添加全血或细菌溶液等含有细胞成分的液体试样时，也不会由于细胞成分堵塞导致浸透恶化，可以在短时间内定量测定。
(实施方式13)
以下，对于本发明权利要求19记载的发明的实施方式13进行说明。
本实施方式13中，色谱定量测定装置是将预先在任意温度下熟化的不透液性片材密合在色谱定量测定装置的表面和侧面得到的。
这样，采用本实施方式13的色谱定量测定装置的制备方法，由于预先将不透液性片材在任意温度下熟化，可以促进对蛋白质或反应层有不良影响的有机溶剂挥发，因此可以更长时间地稳定保存测定装置。
(实施方式14)
以下，对本权利要求20记载的发明的实施方式14进行说明。
本实施方式14中，色谱定量测定装置是使预先配置在色谱定量测定装置上的不透液性片材，在任意的温度和压力下密合在色谱定量测定装置的表面和侧面。
这样，采用本实施方式14的色谱定量测定装置的制备方法，由于同时加温加压使不透液性片材密合在色谱定量测定装置的表面和侧面，可以使不透液性片材更牢固的结合在色谱测定装置上。
(实施方式15)
以下，对本发明权利要求21～23记载的发明的实施方式15进行说明。
本实施方式15中，色谱定量测定装置是使用具有下述性质的粘合剂使不透液性片材附着得到的，所使用的粘合剂通过加热熔融，具有带粘性的性状，粘着后固化。
这样，采用本实施方式15的色谱定量测定装置的制备方法，由于用于不透液性片材的粘合剂通过加热熔融，成为带有粘性的性状，不透液性片材粘着后固化，通过这种粘合剂将不透液性片材附着在色谱定量测定装置表面，在保存期中糊状材料不会向色谱定量测定装置浸透，能够以长时间稳定的状态保持色谱定量测定装置的性能。
(实施例)
结合实施例更具体地说明本发明。另外，本发明不受下述实施例的任何制约。
(尿中hCG的定量)
制备硝化纤维素膜中含有抗hCG-β抗体固定线、以及抗hCG-α抗体与金胶体复合体的宽带的免疫色谱试件。该试件如图2所示。图中，试件包括抗体固定部5、处于其前部的含有抗hCG-α与金胶体复合体的区域——标记物保持部位3、试样添加部2。这些试件如下所述进行制备。
实施例1
色谱试件的制备
准备用磷酸缓冲液稀释调整浓度后的抗hCG-β抗体溶液。使用溶液排出装置，将该抗体溶液涂敷在硝化纤维素膜上。这样，就在硝化纤维素膜上形成了检测用抗体固定线。将该硝化纤维素膜干燥后，浸渍于含有1％脱脂乳的Tris-HCl缓冲溶液中，缓慢振动30分钟。30分钟后，将膜转移至Tris-HCl缓冲溶液槽中，缓慢振动10分钟后，再在另一Tris-HCl缓冲溶液槽中缓慢振动10分钟，洗涤膜。洗涤2次后，将膜从洗涤液中取出，在室温下干燥。
金胶体通过在回流中向0.01％氯金酸的100℃溶液中加入1％柠檬酸溶液配制。接着，继续回流30分钟后，冷却。通过0.2M的碳酸钾溶液将金胶体溶液调节为pH9，向其中加入抗hCG-α抗体，搅拌数分钟后，加入10％BSA(牛血清白蛋白)溶液pH9，最终达到1％，通过搅拌，配制抗体金胶体复合体(标记抗体)。4℃下以20000G将该标记抗体溶液离心分离50分钟，分离出标记抗体，将其悬浊于洗涤缓冲液(1％BSA·磷酸缓冲液)中后，进行离心分离，洗涤并分离标记抗体。用洗涤缓冲液悬浊该标记抗体，用0.8μm的滤器过滤后，调制成最初金胶体溶液量的10分之1，在4℃下贮藏。
将标记抗体溶液装在溶液排出装置中，在固定有抗hCG-β抗体的干燥膜上离开抗体固定位置的位置涂敷后，将膜干燥。这样，在固定化膜上就形成了标记抗体保持部位。
将这样制得的带有标记抗体保持部位的抗体固定膜贴付在反应层载体支持体上，贴付无纺布作为试样添加部，贴付玻璃纤维滤纸作为吸水部后，切割成0.5cm宽的细片，制作除去一半试样添加部之外该试件的整个表面均贴有透明带的试件。
实施例2
试样的配制
通过向男子的尿液中加入已知浓度的hCG溶液，配制各种已知浓度的hCG溶液。
实施例3
显色程度的测定
将含有0、100、1000、10000U/1 hCG的男子尿液添加到试件上，进行展开处理。用反射型分光光度计测定各种hCG浓度的男子尿液在试件上抗体固定部位的显色状况。测量520nm波长的吸光度，代入预先作出的表示hCG浓度与吸光度关系的标准曲线。其结果如图7所示。本来，例如测定含有1000U/1 hCG的男子尿液的吸光度，如果将该吸光度代入标准曲线，hCG浓度应当为1000U/1，但实际上稍有偏差，根据其偏差的大小，可以得知测定的准确程度。
图7(a)表示不透液性片材密合在色谱定量测定装置上时的定量性能，图7(b)表示没有不透液性片材时的定量性能。
图7中表示在色谱定量测定装置上添加液体试样，基于3分钟后显色程度的测定值，换算分析对象物浓度的结果。首先，有片材时(图7(a))，CV值(变动系数)为0～10％，与此相对没有片材时(图7(b))，CV值为27～42％，显示出较大的差异，定量性能差。以上结果可以理解为用不透液性片材覆盖色谱定量测定装置与提高定量性能有很大关系。
另外，作为本发明实施方式中的色谱定量测定装置，使用硝化纤维素或玻璃纤维滤纸等任意的多孔性载体构成的色谱材料形成的试件。这些材料形成的试件例如利用抗原抗体反应等任意的测定原理，分析检测某种特定物质，具有定量功能。另外，作为测定的液体试样，例如有水、水溶液、尿、血液、体液、溶解有固体以及粉体或气体的溶液等，作为其用途，例如有尿检查、妊娠检查、水质检查、便检查、土壤分析、食品分析等。
采用这种结构，可以简单而且准确地在短时间内定量测定任意被检溶液的液体试样中存在的分析对象物。
工业实用性
如上所述，本发明涉及的色谱定量测定装置及其制备方法在将液体试样添加到试件上开始测定时，可以防止液体试样的蒸发，在液体试样浸透时可以将空气的排放仅限定于浸透方向，使液体试样的浸透均一。也就是说，可以使一定时间内流出的液体试样与标记试剂以均一的浓度流出。而且，由于可以将加在显色部分上的背景值的影响抑制到很低，能够在短时间内进行测定，可以实现更高灵敏度、更高性能的色谱定量测定装置。
Claims (23)
1、色谱定量测定装置，具有不能润湿的反应层载体支持体、该支持体上部形成的1至任意数量的部件构成的可以润湿的层，该可以润湿的层由添加液体试样的部分、保持有可以移动的标记试剂的部分、能够与具有与液体试样中的分析对象物特异性结合的物质的标记试剂进行结合反应的部分以及吸收液体试样的部分构成，其特征在于在该色谱定量测定装置中，在除添加液体试样的部分之外，具有在表面和侧面上覆盖的不透液性片材，在上述可以润湿的层中，上述添加液体试样的部分和端部以外的部分，由上述不透液性片材和反应性载体支持体而呈密合状态。
2、色谱定量测定装置，具有不能润湿的反应层载体支持体、该支持体上部形成的1至任意数量的部件构成的可以润湿的层，该可以润湿的层由添加液体试样的部分、保持有一定量可以移动的预先制备的分析对象物与标记试剂形成的结合体试剂的部分、能够与具有与液体试样中的分析对象物特异性结合的物质的上述结合体试剂和上述液体试样中的分析对象物进行竞争性结合反应的部分以及吸收液体试样的部分构成，其特征在于在该色谱定量测定装置中，在除添加液体试样的部分之外，具有表面和侧面上覆盖的不透液性片材，在上述可以润湿的层中，上述添加液体试样的部分和端部以外的部分，由上述不透液性片材和反应性载体支持体而呈密合状态。
3、色谱定量测定装置，具有不能润湿的反应层载体支持体、该支持体上部形成的1至任意数量的部件构成的可以润湿的层，该可以润湿的层由添加了保持有破坏液体试样中细胞成分的物质的液体试样的部分、保持有可以移动的标记试剂的部分、能够与具有与液体试样中的分析对象物特异性结合的物质的标记试剂进行结合反应的部分以及吸收液体试样的部分构成，其特征在于在该色谱定量测定装置中，在除添加液体试样的部分之外，具有表面和侧面上覆盖的不透液性片材，在上述可以润湿的层中，上述添加液体试样的部分和端部以外的部分，由上述不透液性片材和反应性载体支持体而呈密合状态。
4、色谱定量测定装置，具有不能润湿的反应层载体支持体、该支持体上部形成的1至任意数量的部件构成的可以润湿的层，该可以润湿的层由添加了保持有破坏液体试样中细胞成分的物质的液体试样的部分、保持有一定量可以移动的预先制备的分析对象物与标记试剂形成的结合体试剂的部分、能够与具有与液体试样中的分析对象物特异性结合的物质的上述结合体试剂和上述液体试样中的分析对象物进行竞争性结合反应的部分以及吸收液体试样的部分构成，其特征在于在该色谱定量测定装置中，在除添加液体试样的部分之外，具有表面和侧面上覆盖的不透液性片材，在上述可以润湿的层中，上述添加液体试样的部分和端部以外的部分，由上述不透液性片材和反应性载体支持体而呈密合状态。
5、如权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于在除添加液体试样的部分之外的表面至反面均具备不透液性片材。
6、如权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于结构中除去了上述反应层载体支持体，在除添加液体试样的部分之外的周围具备上述不透液性片材。
7、如权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于相对于添加的液体试样浸透的方向，上述不透液性片材的垂直侧面开放。
8、如权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于对于添加的液体试样浸透的方向，上述不透液性片材的端部在上述色谱定量测定装置端部的任意场所开放。
9、如权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述不透液性片材通过任意粘着性物质构成的粘合剂附着。
10、如权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述不透液性片材通过任意粘着后固化的粘合剂附着。
11、如权利要求9所述的色谱定量测定装置，其特征在于用于不透液性片材的粘合剂由热塑性树脂构成。
12、如权利要求9所述的色谱定量测定装置，其特征在于用于不透液性片材的粘合剂由热固性树脂构成。
13、如权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述不透液性片材由透明或半透明的任意不透液性材料构成。
14、如权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述不透液性片材由半透明或不透明的任意不透液性材料构成，在检测区具备透明窗。
15、如权利要求3或4所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述添加液体试样的部分所保持的破坏细胞成分的物质为表面活性剂。
16、如权利要求3或4所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述添加液体试样的部分保持的破坏细胞成分的物质由氯化物构成。
17、如权利要求3或4所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述添加液体试样的部分保持的破坏细胞成分的物质是皂甙类。
18、如权利要求3或4所述的色谱定量测定装置，其特征在于上述添加液体试样的部分保持的破坏细胞成分的物质是具有溶菌效果的物质。
19、如权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置的制备方法，其特征在于预先将上述不透液性片材在任意温度下熟化后，使之密合在色谱定量测定装置的表面和侧面。
20、如权利要求1至4中任意一项所述的色谱定量测定装置的制备方法，其特征在于配置上述不透液性片材，在任意的温度和压力下将不透液性片材密合在色谱定量测定装置的表面和侧面。
21、如权利要求19或20所述的色谱定量测定装置的制备方法，其特征在于，在将上述不透液性片材用粘合剂进行密合时，将用于上述不透液性片材的粘合剂在高于常温的温度下熔融，成为带有粘性的性状，粘着后固化使之附着。
22、如权利要求21所述的色谱定量测定装置的制备方法，其特征在于用于不透液性片材的粘合剂由热塑性树脂构成。
23、如权利要求21所述的色谱定量测定装置的制备方法，其特征在于用于不透液性片材的粘合剂由热固性树脂构成。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: PANASONIC HEALTHCARE + MEDICAL EQUIPMENT CO., LTD. Free format text: FORMER OWNER: MATSUSHITA ELECTRIC INDUSTRIAL CO, LTD. Effective date: 20140520 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20140520 Address after: Ehime Prefecture, Japan Patentee after: Panasonic Healthcare Co., Ltd Address before: Osaka Japan Patentee before: Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. |
|
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: PANASONIC HEALTHCARE HOLDINGS CO., LTD. Free format text: FORMER OWNER: PANASONIC HEALTHCARE + MEDICAL EQUIPMENT CO., LTD. Effective date: 20150410 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20150410 Address after: Tokyo, Japan Patentee after: Panasonic's health medical treatment is controlled interest Co., Ltd. Address before: Ehime Prefecture, Japan Patentee before: Panasonic Healthcare Co., Ltd |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20061025 Termination date: 20160621 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |