CN1258368C - 治疗高热症药物及其制造方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种治疗高热症的药物及其制备方法，其中的活性成分包括柴胡挥发油、白芷挥发油、葛根提取物和白芷提取物，该药物为中药复方制剂，具有明显的解热、镇痛、抗炎、抗细菌和抗病毒作用，该药物的制备方法包括了以柴胡、白芷、葛根为原料提取其中的活性成分的过程，并通过特殊工艺过程实现原料药挥发油的稳定，本发明尤其提供了该药物的注射针剂和冻干粉针剂型。

Description

治疗高热症药物及其制造方法

技术领域

本发明涉及中医药领域，涉及一种治疗高热症的药物及其制造方法，尤其涉及以中药材为原料提取其中有效成分而得到的治疗高热症的中药制剂及其制造方法。

技术背景

高热是医院内科急症之一，临床以体温持续高于39℃为主要特征，常见于急性感染性疾病、急性传染病、某些风湿性疾病、胶原性疾病、部分急性血液肿瘤性疾病、严重灼伤、中暑、阿托品中毒等疾病，发病率极高，全国每年因高热而入院急诊的病人高达上亿人次。因此，安全有效的优良退热药剂存在非常大的需求。

由于高热常可引起循环系统、中枢神经系统、血液系统、肝肾功能等的病理改变，长时间高热不退将造成对机体的巨大损害，故作为临床常见急症，虽起因复杂，在治疗中首要考虑的是退热。西医除物理降温外，药物降温多使用抗生素，或阿司匹林、扑热息痛、安乃近等解热镇痛剂，但由于机体耐药性的增强，使得抗生素的用量越来越大；而其他解热镇痛剂在应用时如剂量不合适，或间隔过短，则会引起虚脱等较严重的副作用，更不利于疾病的治疗。多数高烧的起因是病毒性或细菌性炎症，虽然首要的处理手段是退热，但单纯退热只能暂时见效，必须及时配合有效的抗病毒或抗细菌药物控制反复高烧，如果在出现发烧症状的初期只进行退热处理，而药物本身不具备抗病毒或抗细菌功效，则有可能延误了病情，产生令人遗憾的后果。

中医治疗历史悠久，副作用小已成为公认的，但仍然让患者将配好的原料药自己煎煮服用已无法满足要求，近年来已有用于退热中成药被开发出来，但数量有限，且多为口服制剂，疗效虽好但起效较慢。自“清开灵注射液”和“双黄连粉针”问世以来，使中医治疗高热有了较大的突破。但随着二者的应用日广，其副作用也日益显露，主要为过敏反应，包括皮疹、皮炎、荨麻疹等皮肤反应，严重者还有过敏性休克发生，副作用发生率约在2％左右，对于注射剂而言，其副作用发生率已属比较高了，从而限制了部分患者的使用。

发明概述

针对上述退热药物存在的问题，本发明提供了一种治疗高热症的退热药物，该药物的有效成分为中药材提取物，经过合理组配，在解热镇痛的同时还具有一定的抗菌、抗病毒功效，且毒性小，作用强。

本发明还提供了该退热药物的制备方法，包括有效成分的提取精制过程，进一步保证了治疗效果。

在上述内容基础上，本发明还进一步提供了该药物的剂型，尤其是针剂和冻干粉针剂。

本发明提供的治疗高热症药物是一种中药复方制剂，采用含有柴胡挥发油、白芷挥发油、葛根异黄酮提取物和白芷香豆素提取物为主要活性成分，通过有效组配而成，经药效和毒理研究，结果显示具有明显的解热、镇痛、抗炎、抗细菌和抗病毒作用，并且退热起效时间短，无毒性反应，本发明尤其提供了上述药物的注射针剂和冻干粉针剂型，在临床治疗中更加安全有效。

为达到上述目的，本发明还有针对性地提出了适用于工业化生产的制备工艺，以天然中药材柴胡、白芷和葛根(一般使用含水量8-12％的中药饮片)为原料，通过提取精制工艺的设计研究和组配，保证了药剂的质量，从而按照要求制备出口服制剂和注射制剂。

发明详述

本发明提供的治疗高热症药物，是一种复方中药剂，其每200mg活性成分中包含0.0003-0.0005ml的柴胡挥发油，0.0004-0.00055ml的白芷挥发油，187-198mg葛根提取物、1.5-2.0mg白芷提取物，其中，

所述葛根提取物中主要是以葛根素为标准的葛根异黄酮组合物，其中的葛根素(puerarin)含量应在2.4％以上，优选在2.4％-2.8％；

所述白芷提取物主要是以欧前胡素为标准的白芷香豆素化合物，其中的欧前胡素(imperatorin)含量应在0.2％以上，优选在0.2％-0.35％。

根据本发明的优选方案，每1600mg活性成分来自8-12g柴胡药材饮片、12-18g葛根药材饮片和5-10g白芷药材饮片。

所述葛根素含量在2.4％-2.8％w/w以上的葛根提取物是采用葛根饮片为原料，用90-95％乙醇回流提取后的浓缩物；而欧前胡素含量在0.2％-0.35％w/w以上的白芷提取物则为经提取挥发油后的白芷饮片顺序使用70-75％乙醇、乙酸乙酯和环己烷提取并精制得到的产物。

本发明的药物中除上述活性成分外，还包括有医药学上可接受的药物辅剂，成为不同的药物剂型，例如包括冻干粉针剂、针剂或口服制剂剂型等。从临床使用角度，优选注射针剂，尤其是静脉注射粉针剂。

本发明药物的制备方法则包括以下过程：

1)取柴胡饮片在pH2-3的酸性水中加热回流并收集含有挥发油的蒸馏液；

2)葛根饮片用90-95％的乙醇回流提取，提取液在低于60℃温度下除去溶剂后在pH2-3的水中除去沉淀，上清液在低于60℃温度下浓缩后用无水乙醇回流提取，提取液在40-60℃蒸干，得到葛根异黄酮提取物；

3)取白芷饮片经水蒸馏收集挥发油，蒸馏物干燥后用70-75％的乙醇回流，并于70-80℃下浓缩回流液，得到的浓缩物顺序用乙酸乙酯和环己烷进行萃取精制，得到白芷提取物；

4)将羟丙基-β-环糊精加入含有配方量柴胡挥发油的柴胡蒸馏液中溶解制成羟丙基-β-环糊精的饱和溶液，加入白芷挥发油加热并搅拌成为包合物溶液；

5)将上述葛根提取物和白芷提取物在加热搅拌的条件下加入该包合物溶液中，调节pH至中性或弱碱性，按照药剂学方法制备成制剂。

作为活性成分之一的柴胡挥发油，是柴胡原料药的主要解热作用成分，根据本发明的制造方法，在实际生产中可直接使用含有挥发油的柴胡蒸馏液，由于柴胡药材中的主要成分是生物碱和皂苷，而皂苷本身有严重的溶血作用，不宜存在于药物中，尤其是在用于注射剂的制备中更是严禁被蒸馏出来，根据本发明方法，控制蒸馏物料的pH在2-3，就是因为在此pH范围内生物碱可成盐，而皂苷不易起泡，从而避免这些无效成分随挥发油被蒸馏，影响药剂的功效。优选的方法是将含有挥发油的柴胡蒸馏液收集后再进行重蒸馏，收集与原料药材重量比在1.0-1.5倍(即1.0-1.5ml/g原料药)的蒸馏液，除去不必要蒸馏物，同时减少柴胡蒸馏液的体积，利于后面工序操作。

白芷挥发油的制取则可将白芷饮片先浸泡适当时间，然后采用隔水水蒸汽蒸馏法来获得。

在实际生产中，要求使用的柴胡和白芷原料药中挥发油含量应在0.03％v/wt和0.04％v/wt，并尽可能全部蒸馏出来，即，按照每100g原料药收集0.03ml或0.04ml以上的柴胡挥发油或白芷挥发油，以保证药剂的治疗效果。根据本发明的复配比例，每200mg活性成分中可以包括约1.00-1.45ml上述柴胡蒸馏液。

根据本发明的制备方法，使用葛根饮片通过1次以上90-95％乙醇提取的提取液，除去乙醇后加水调整pH至酸性使沉淀溶解，取上清液在中性条件下浓缩至相对密度d_50℃在1.09-1.12，先喷雾干燥成粉末，然后再以无水乙醇提取该粉末，提取物回收乙醇至干得到葛根提取物。如以上所述，葛根中的主要活性成分是葛根异黄酮组合物，所以应反复提取，直至提取完全。为避免有效成分被破坏，提取液合并后减压回收乙醇，此时葛根异黄酮会沉淀出来，加入适量水并调整pH至酸性，最好在pH2-3，葛根异黄酮变成强酸弱碱盐而溶解，经高速离心去除不溶成分，进一步经喷雾干燥，得到初步精制的葛根提取物(葛根异黄酮)。为保证药剂，尤其是注射针剂的纯度，该喷雾干燥的粉末再以无水乙醇提取精制。

葛根提取过程中的喷雾干燥的目的是为了减少葛根异黄酮的损失和破坏，操作条件可以无特别要求，但优选采用压力喷雾干燥，喷雾压力600-800mmHg，塔内干燥温度80-100℃，风速每秒5-8立方米，进料量1-5公斤/小时。

根据本发明的制备方法，另一原料药白芷饮片经70-75％乙醇提取后的浓缩物的精制过程包括：使该浓缩物在酸性条件下沉淀，取沉淀物用乙酸乙酯热回流提取若干次，用碱液，例如氢氧化钠溶液，萃取除去乙酸乙酯液中的杂质，回收溶剂(乙酸乙酯层)收集提取物，保持酸性条件下再使用环己烷进行热回流提取，提取物减压除去溶剂后溶于弱减性溶液中，过滤后的滤液调整至酸性收集沉淀物。

根据本发明的制备方法，上述白芷提取物的精制过程还包括：乙酸乙酯提取后的提取液用碱液洗后除去不溶物，向溶剂层先加入多孔微粒物，例如细砂、细陶瓷颗粒等，对提取物中的有效成分形成吸附，除去乙酸乙酯后加入环己烷热回流提取2次以上，分离提取液，收集残留物用碱洗后调整滤液的pH到酸性，用环己烷重复提取2次以上，分离提取液，将全部提取液合并，除去溶剂后用弱碱洗去沉淀，滤液调整至酸性，收集沉淀物即为白芷香豆素提取物。

根据提取物的理化性质，上述葛根和白芷提取物精制过程的各步骤中调整滤液到酸性一般是指调整pH到2-3。

本发明的制造方法使用了羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)对挥发油进行包合，使之在药剂中稳定存在。在包合过程中，优选的包合温度在40-60℃，以HP-β-CD能完全溶解为宜。为使挥发油最大可能地被包合进HP-β-CD的空腔结构中，可以先用少量柴胡蒸馏液溶解羟丙基-β-环糊精，加入白芷挥发油搅拌包合1小时以上，再加入剩余柴胡蒸馏液继续搅拌包合0.5小时以上。也可使用作用相同的其它壁材物质代替HP-β-CD对挥发油进行包埋，实现挥发油成分的稳定。

根据本发明的制备方法，其还包括将所述包合物溶液与分别制备的葛根提取物和白芷提取物的混合物按照药剂学方法制备成注射剂和口服制剂的过程。其中，优选按照下述制备冻干粉针剂的过程：所述包合物溶液用碱液调整至pH7-8，加入辅剂于40-60℃保温溶解后，置于5-10℃保藏12-48小时，滤去沉淀，使滤液通过分子量10000-30000的超滤膜进行超滤，超滤液经灭菌后冻干，经检验包装，即为成品。其中，所述辅剂包括常规量的甘露醇和葡萄糖，或其它常规辅剂。

除上述注射制剂的制备，在制备其它口服制剂时，选用的辅型剂还可以是淀粉、糊精或环糊精、蔗糖等常规充填剂，该后期的制备工艺及设备均属制药领域的常规技术，本发明对此不作限定，故在此不予详述。

本发明是通过将该处方药的药理研究与化学成分的研究相结合而研制开发的退热新药，在此基础上摸索并确定了生产工艺，所以说本发明上述提取工艺的确定是以将原料药中活性成分有效地提取出来并科学复配为目的。为实现工业化生产，在实际生产中要求使用的原料药具有一定的质量标准，柴胡饮片中挥发油含量在0.03％v/w以上，葛根饮片中葛根素含量在2.4％以上，白芷饮片中挥发油含量在0.04％v/w以上，欧前胡素含量在0.2％以上。这些要求可以通过原料的质量监控实现。

当然，本发明提出的原料药处方是基于所用原料药中有效成分含量基本上满足上述要求为前提(通常得到的原料药均可满足该要求)，如果原料药的质量有出入，也可通过调整原料药处方来满足本发明药物的有效成分的组配比例。

所以，在确定各组分及本发明药物的制取工艺同时，还提出了挥发油及葛根异黄酮和白芷香豆素提取物的质量检测方法。

1、柴胡、白芷挥发油指纹图谱

采用1-奈酚内标物作参比，绘制出柴胡和白芷挥发油的液相谱图，借助该色谱图可以确定药剂中的挥发油含量。

1)检测条件：

色谱柱：Diamonsil^TM(钻石)C₁₈，150×4.6mm，5μm

流动相：乙腈-甲醇-水(10∶40∶50)

流速：

起止时间(min)	0-8	8-30	30-45	45-60
					流速(ml/min)	0.5	1.5	2.0	2.5

柱温：25℃

检测波长：250nm

记录时间：1小时

2)1-奈酚内标物溶液制备：

精密称取1-奈酚25mg，置25ml量瓶中，用正己烷溶解，定容为50ml，得到0.5mg/ml的1-奈酚内标物正己烷溶液。再取1ml，稀释到10ml，即得0.05mg/ml的1-奈酚内标物溶液。

待测溶液制备：

取柴胡药材饮片(2-4mm)5g，置100ml烧瓶内，加5倍量(25ml)pH2-3的酸水，连接挥发油测定器，自测定器上端加水，使之充满刻度部分，并溢流入烧瓶为止，再加入正己烷(气相色谱级，纯度不低于99.9％)4ml，然后连接冷凝管，加热至烧瓶中水沸腾，并继续蒸馏，速度以保持冷凝管中部呈冷却状态为度，4h后停止加热，放置15min以上，待冷却后小心移出正己烷，并用少量正己烷洗涤挥发油测定器刻度部分，一并移入5ml量瓶中，定容。加入0.5mg/ml的1-奈酚内标物溶液0.5ml，摇匀，微孔滤膜过滤。

取白芷药材饮片(2-4mm)5g，置100ml烧瓶内，加8倍量(40ml)的蒸馏水，连接挥发油测定器，同样方法制备白芷挥发油待测溶液。

3)分别精密吸取0.05mg/ml的1-萘酚内标物溶液、柴胡挥发油待测溶液和白芷挥发油待测溶液各20μl，注入液相色谱仪中，按上述检测条件记录色谱图。

2、葛根异黄酮指纹图谱

葛根总提取物是葛根异黄酮，也是葛根中主要活性成分，而葛根异黄酮在提取物中的含量评定是以葛根素的含量表示，所以采用葛根素标准品作对照，可以测定原料药和提取物中的葛根素含量。

有关提取物中葛根素的测定可参见2000年版《中国药典》一部，葛根项下。

3、白芷香豆素指纹图谱

白芷中主要成分是白芷香豆素，而白芷香豆素中的主要测定指标是欧前胡素，即，用欧前胡素的含量多少来确定白芷及白芷提取物中有效成分的含量。

以欧前胡素标准品的谱图作为对照，按照本发明下述的方法或任何可行的已知或未知方法均可对白芷提取物的质量加以检测和控制。

精密称取欧前胡素标准品10mg，置于10ml量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，再吸取1ml稀释成10ml，成为0.1mg/ml的欧前胡素对照品溶液。

称取相当于1-2g白芷生药量的白芷香豆素提取物，用甲醇溶解并定容至10ml，摇匀后经微孔滤膜过滤，制备成白芷香豆素提取物待测溶液。

分别精密吸取欧前胡素对照品溶液和白芷香豆素提取物待测溶液各20μl，注入高效液相色谱仪中，按下列条件记录色谱图。

色谱柱：Diamonsil^TM(钻石)C₁₈，150×4.6mm，5μm

流动相：乙腈-甲醇-水(10∶40∶50)

流速：

起止时间(min)	0-20	20-40	40-60
				流速(ml/min)	0.3	1.2	2.5

柱温：25℃

检测波长：254nm

记录时间：1小时

欧前胡素标准品：中国药品生物制品检定所提供。

药效学和毒理学研究

采用按照前述实施方案或以后的实施例1的注射针剂(药品名“高热清”)进行了如下药效学和毒理学试验。

安全性试验：对大鼠和Beagle犬反复给药一个月后，无毒性反应；通过采用豚鼠、家兔进行过敏和刺激性试验，结果显示，无局部刺激性和血管刺激性，未见全身过敏反应和被动过敏反应的发生。

急性毒性试验：小鼠静脉注射，半数致死量LD₅₀为7.7g/kg。

药效学试验结果分别显示：(均以双黄连作阳性对照)

1、对内毒素诱发的家兔发热模型具有明显的解热作用；对干酵母诱发的大鼠发热模型具有明显的解热作用。

家兔静脉注射1g/kg.2g/kg.4g/kg(以生药量计)，对内毒素引起的发热模型具有明显的解热作用，于空白对照组比较有显著性差异(p＜0.05--0.01)；与阳性药(双黄连32mg/kg)比较解热作用明显强，且维持时间长。

表1.对内毒素致家兔发热模型的作用(n＝8  x±S)

	时间(H)	空白对照组	高热清组(g/kg)
						高剂量(4)	中剂量(2)	低剂量(I)
			正常	0	39.10±0.10				39.26±0.18	39.14±0.26	39.23±0.06
给致热剂后	1234567	40.20±0.1040.53±0.0640.58±0.1240.60±0.2040.70±0.2640.74±0.2040.13±0.26				40.04±0.0540.22±0.2840.64±0.3039.42±0.26**39.56±0.41**38.90±0.32**38.62±0.28**	40.10±0.3040.44±0.5540.62±0.6139.64±0.48**39.60±0.45**39.14±0.35**38.86±0.36**	40.00±0.4440.37±0.6540.93±0.7139.97±0.57*39.87±0.38**39.50±0.36**39.33±0.65*

注：大肠杆菌内毒素剂量：250ng/Kg，给致热剂后随即给药，

与同一时间对照组相比*P＜0.05  **P＜0.01

大鼠静脉注射高热清2g/kg.4g/kg.8g/kg(为含生药量)，对干酵母诱发的大鼠发热模型具有明显的解热作用，于空白对照组比较有显著性差异(p＜0.05--0.01)；与阳性药(双黄连64mg/kg制剂量)比较解热作用明显强，且维持时间长。

表2.高热清对干酵母诱发大鼠发热模型的解热作用(n＝10  x±S)

	时间(h)	空白对照组	阳性对照组(64mg/kg)	高热清组(g/kg)
							高剂量(8)	中剂量(4)	低剂量(2)
				正常	0	37.72±0.39				37.63±0.39	37.71±0.47	37.84±0.35	37.66±0.38
给致热剂后	12345★5.5678910	37.38±0.2637.41±0.2037.54±0.1338.05±0.4138.91±0.4539.69±0.2939.61±0.3139.55±0.3639.66±0.3439.77±0.4639.62±0.29	37.41±0.2637.38±0.3437.59±0.2638.12±0.4039.12±0.4039.47±0.3239.40±0.2939.23±0.19*39.37±0.3239.61±0.4339.47±0.33				37.65±0.3137.57±0.2237.79±0.32*38.58±0.45*39.13±0.3939.48±0.2839.34±0.3738.92±0.47**38.70±0.68**38.67±0.63**38.91±0.87*	37.57±0.1637.60±0.3337.58±0.3838.31±0.4539.22±0.4339.84±0.2439.47±0.2739.24±0.4839.08±0.30**38.89±0.50**39.17±0.49*	37.73±0.32*37.53±0.2237.76±0.29*38.50±0.44*39.29±0.4539.65±0.3639.78±0.2339.68±0.4239.47±0.4039.28±0.47*39.56±0.46

注：^★表示在这一时间给药；与对照组相比*P＜0.05  **P＜0.01

2、对角叉菜胶诱发的大鼠足肿胀，二甲苯诱发的耳肿胀具有显著的抗炎作用。

大鼠静脉注射高热清2mg/kg.4mg/kg.8mg/kg，对角叉菜胶诱发的大鼠足肿胀模型具有消肿作用，与空白对照组比较有明显的消肿作用；与阳性药(双黄连64mg/kg)比较作用相似。

表3.高热清对角叉菜胶诱发的大鼠足肿胀模型的作用(n＝10  x±S)

	时间(H)	空白对照组	阳性对照组(64mg/kg)	高热清组(mg/kg)
							高剂量(8)	中剂量(4)	低剂量(2)
				正常	0	0.94±0.16				0.97±0.20	0.92±0.22	0.88±0.16	0.93±0.19
给角叉菜胶后	0.51245.57.59.511.5	1.40±0.231.50±0.151.63±0.161.76±0.131.72±0.121.59±0.191.64±0.231.42±0.15	1.50±0.291.54±0.251.82±0.241.86±0.281.69±0.331.60±0.251.52±0.281.44±0.30				1.42±0.241.54±0.251.71±0.151.85±0.271.55±0.231.54±0.181.55±0.171.40±0.16	1.38±0.181.44±0.221.65±0.161.64±0.181.42±0.19**1.49±0.171.49±0.201.31±0.17	1.30±0.201.44±0.381.80±0.14*1.81±0.221.59±0.281.51±0.311.50±0.311.44±0.26

注：给角叉菜胶5小时后给药；与对照组相比*P＜0.05  **P＜0.01

小鼠腹腔注射高热清2.8g/kg.6g/kg.8g/kg(以生药量计)，对二甲苯诱发的小鼠的耳肿胀模型具有明显的消肿作用，于空白对照组比较有显著性差异(p＜0.05---0.01)；与阳性药(双黄连94mg/kg)比较解热作用明显强，且维持时间长。

表4.高热清对二甲苯诱发小鼠耳肿胀模型的作用(n＝10)

组别	剂量(g/kg)	肿胀度(g)x±S
			空白对照组高剂量组中剂量组低剂量组阳性对照组	0862.894mg/kg	0.0144±0.00260.0060±0.0053**0.0081±0.0042**0.0098±0.0054*0.0084±0.0046**

注：与空白对照组相比*P＜0.05  **P＜0.01

3、对化学刺激引起疼痛具有明显的镇痛作用。

4、明显杀灭和抑制多种呼吸道细菌。

体外抑菌试验表明，高热清对化脓性链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形链球菌、肺炎球菌有明显的抑菌作用，对变形杆菌、铜绿假单胞菌、肠球菌有一定的抑制作用，但抑制作用没有对上述细菌明显。

体外抑菌试验结果表明，高热清对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌菌株所致小鼠感染有明显保护作用，其ED50和95％可信限分别为0.1552g/kg，229.3737-421.3597g/kg；0.1457g/kg，301.3706-488.6162g/kg。

5、抗病毒试验结果显示：高热清在体外有明显的抑制流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒3型和麻疹病毒的作用，对柯萨奇B4病毒、单纯疱疹病毒也有一定的抑制作用；高热清还可有效的抑制流行性感冒病毒所致的病毒性肺炎。

从上述结果可以得出结论，本发明提供的的退热药物具有明显的解热、镇痛、抗炎、抗细菌和抗病毒作用，并且具有毒性小，用量少，作用强，维持时间长等优点。

总之，本发明是针对目前高热症的高发病率提出的一种有效退热药物，是一种适用于临床治疗高热症的新的纯中药制剂，药效学研究证明，本发明药物具有毒性小，疗效高的特点，药理试验显示，在临床等效剂量下，本发明药物对动物降温起效时间、降温强度、持续时间均优于双黄连粉针剂；急性毒性显示本发明药物的LD50剂量是双黄连粉针剂的3倍，即毒性大约仅为双黄连粉针剂的1/3，使用安全性大大高于双黄连粉针剂；原料药的成本也显著低于双黄连粉针剂；本发明同时提出了一套科学可行的制备工艺和质量检测标准，保证了疗效的稳定和治疗安全性，尤其是其注射针剂(粉针剂)，将成为目前使用最多，但已过了市场应用高峰期的“柴胡注射液”、“清开灵注射液”和“双黄连注射液”的更新换代产品。

具体实施方案

实施例1

处方组成：柴胡饮片9kg    葛根饮片15kg    白芷饮片6kg。

原料药规格：经检测，柴胡饮片中挥发油约0.034％v/w；白芷饮片中挥发油含量约0.052％v/w。

半成品制备

1、柴胡蒸馏液(芳香水)制备

称取洁净干燥的柴胡药材饮片，加5倍量(约45L)pH2-3的酸水，直接加热回流4h后，开始收集芳香水至原料药的2.5倍量(约22.5L)，再将芳香水重蒸馏，收集1.2倍(约10.8L)蒸馏液，其中含挥发油约3ml备用。

2、葛根异黄酮提取物制备

取洁净干燥的葛根药材饮片，加95％乙醇12倍量(约180L)浸泡5h后，加热回流提取2h，滤过，药渣加95％乙醇8倍量(约120L)，热回流提取1h，滤过，药渣再加95％乙醇5倍量(约75L)热回流提取0.5h，过滤，合并95％乙醇提取液，低于60℃减压回收乙醇至无醇味，提取物中加水至原料的4倍量(约60L)，调整PH至2-3，高速离心(12000转/分)，取上清液，调pH7，并减压浓缩至相对密度为1.09-1.12(50℃)，喷雾干燥，条件：压力650mmHg，塔内温度80-90℃，风速每秒5-8立方米，进料量2-3公斤/小时。喷雾产物再用无水乙醇热回流提取三次，乙醇加入量和回流时间分别为：150L，0.5h、150L，0.5h、120L，0.5h，合并三次的无水乙醇提取药液，50℃减压回收乙醇至干，即得葛根异黄酮提取物。

经高效液相色谱检测，其中的葛根素含量约2.5％。

3、白芷挥发油和白芷香豆素提取物制备

取洁净干燥的白芷药材饮片(厚片，2-4mm)加4倍量水(约24L)，浸泡5h，隔水水蒸汽蒸馏提取7h，即得挥发油(约3.6ml)。

将白芷提取挥发油后的药液滚筒干燥，药渣80℃烘干，合并；加入原料药10倍量70％乙醇(约60L)，热回流提取2h，分出提取液，药渣再加入原料6倍量(约36L)的乙醇(70％)热回流1.5h，过滤，合并两次提取液在70℃的条件下减压回收乙醇至无醇味，并继续浓缩至约6L，冷却，调整pH2-3，高速离心(12000转/分)，取沉淀；用乙酸乙酯热回流提取沉淀2次，两次的溶剂用量和回流时间分别为250ml/Kg，30min、150ml/Kg，20min)，静置后，分出乙酸乙酯液，用乙酸乙酯液1/2体积的0.5％NaOH溶液进行萃取除去杂质，取乙酸乙酯层，加乙酸乙酯体积1/10量的洁净陶瓷颗粒(40-60目)，减压(400-600Kpa)回收乙酸乙酯，被陶瓷颗粒吸附的残留物用环己烷热回流提取3次：第一次是与药材等量(6L)，45min、第二次和第三次均为药材量的2/3量(4L)，20min；被陶瓷颗粒吸附的残留物用0.5％NaOH溶液热回流提取2次，第一次加入约1.2L，回流20min，第二次加入约1L，再回流20min，过滤后将二次滤液合并，调整pH2-3，马上用环己烷萃取3次，加入量与前述三次回流提取相同；合并6次环己烷提取液(萃取液)，减压(Kpa＝400-600)回收至无环己烷味，残留物用pH8的碱水加热溶解，过滤，滤液调整至pH2-3进行酸沉，取沉淀，即得白芷香豆素的半成品。高效液相色谱检测，其中含欧前胡素约0.25％。

4、挥发油-HP-β-CD包合物溶液制备

称取HP-β-CD 151.2g加入到50℃保温的柴胡芳香水2L中，溶解后，取白芷挥发油3.6ml，在搅拌(转速800转/分)的条件下，慢慢加入到50℃的HP-β-CD的柴胡芳香水溶液中，继续包合2h后，再将剩余的柴胡芳香水(约8.8L)加入到上述挥发油-HP-β-CD包合物溶液中，继续包含1h，加入NaHCO₃ 180g，搅拌至溶解后，停止加热，继续搅拌至室温，备用。

5、制备冻干粉针剂

取葛根异黄酮提取物1.5kg、白芷香豆素提取物12g，在加热(50℃)搅拌的条件下，加入到挥发油-HP-β-CD包合物溶液中，用NaOH溶液调PH7-8，溶解后，加入甘露醇7.997kg、葡萄糖2.666kg，继续保温搅拌0.5h左右待全部溶解后，停止加热，继续搅拌至室温，取出，冰箱中(6-8℃)冷藏24h，滤过(粗滤)，滤液再超滤(分子量10000-30000)，超滤液100℃流通蒸汽灭菌1h，灌装2ml西林瓿，冷冻干燥，轧盖，质检，贴签，包装，即得粉针剂成品8000支，每支600mg，包括有效成分200mg。

实施例2

原料药处方及各有效成分的提取制备过程均同实施例1，并按实施例1的方法配制挥发油-HP-β-CD包合物溶液。

取葛根异黄酮提取物1.5kg、白芷香豆素提取物12g，在加热(50℃)搅拌的条件下，加入到挥发油-HP-β-CD包合物溶液中，用NaOH溶液调PH7-8，溶解后，加入甘露醇7.997kg、葡萄糖2.666kg，继续保温搅拌0.5h左右待全部溶解后，停止加热，继续搅拌至室温，取出，冰箱中(6-8℃)冷藏24h，滤过(粗滤)，滤液再超滤(分子量10000-30000)，超滤液100℃流通蒸汽灭菌1h，灌装2ml安瓿，质检，贴签，包装，即得针剂成品。

实施例3

原料药处方及各有效成分的提取制备过程均同实施例1，并按实施例1的方法配制挥发油-HP-β-CD包合物溶液。

取葛根异黄酮提取物1.5kg、白芷香豆素提取物12g，在加热(50℃)搅拌的条件下，加入到挥发油-HP-β-CD包合物溶液中，用NaOH溶液调PH7-8，溶解后，加入淀粉制粒、干燥，再加入硬脂酸镁混合搅拌均匀，压片，每片含有效成分200mg。

实施例4

原料药处方及各有效成分的提取制备过程均同实施例1，并按实施例1的方法配制挥发油-HP-β-CD包合物溶液。

取葛根异黄酮提取物1.5kg、白芷香豆素提取物12g，在加热(50℃)搅拌的条件下，加入到挥发油-HP-β-CD包合物溶液中，用NaOH溶液调PH7-8，溶解后，加入赋形剂(蔗糖、调味剂)，加蒸馏水稀释到定量体积，灭菌，灌装，质检，贴签，包装，即得口服液体制剂。

实施例5

原料药处方及各有效成分的提取制备过程均同实施例1，并按实施例1的方法配制挥发油-HP-β-CD包合物溶液。

取葛根异黄酮提取物1.5kg、白芷香豆素提取物12g，在加热(50℃)搅拌的条件下，加入到挥发油-HP-β-CD包合物溶液中，用NaOH溶液调PH7-8，溶解后，加入可溶性淀粉制粒、干燥，即成颗粒剂，分装成胶囊即成胶囊剂。

Claims (13)

1、一种治疗高热症的药物，其每200mg活性成分中包含0.0003-0.0005ml的柴胡挥发油，0.0004-0.00055ml的白芷挥发油，187-198mg葛根提取物、1.5-2.0mg白芷提取物，其中，

所述葛根提取物是对葛根饮片用90-95％乙醇回流提取后的浓缩物，其中主要是以葛根素为标准的葛根异黄酮组合物，且葛根素含量在2.4％-2.8％；

所述白芷提取物为对经提取挥发油后的白芷饮片顺序使用70-75％乙醇、乙酸乙酯和环己烷提取并精制得到的产物，主要是以欧前胡素为标准的白芷香豆素化合物，且欧前胡素含量在0.2％-0.35％。

2、权利要求1所述的药物，其中，该药物每1600mg活性成分来自8-12g柴胡药材饮片、12-18g葛根药材饮片和5-10g白芷药材饮片的挥发油或提取物。

3、权利要求1或2所述的药物，其中，所述0.0003-0.0005ml柴胡挥发油以原料药经水蒸馏收集的含柴胡挥发油的蒸馏液的形式被使用，该蒸馏液的量与原料药的比例为1.0-1.5毫升/克原料药。

4、权利要求1所述的药物，其包括针剂、冻干粉针剂、口服剂型。

5、权利要求1所述治疗高热症药物的制备方法，其包括以下过程：

1)取柴胡饮片在pH2-3的酸性水中加热回流并收集含有挥发油的蒸馏液；

2)葛根饮片用90-95％的乙醇回流提取，提取液在低于60℃温度下除去溶剂后在pH2-3的水中除去沉淀，上清液在低于60℃温度下浓缩后用无水乙醇回流提取，提取液在40-60℃蒸干，得到葛根提取物；

3)取白芷饮片经水蒸馏收集挥发油，蒸馏物干燥后用70-75％的乙醇回流，并于70-80℃下浓缩，得到的浓缩物顺序用乙酸乙酯和环己烷进行萃取精制，得到白芷提取物；

4)将羟丙基-β-环糊精加入含有配方量柴胡挥发油的柴胡蒸馏液中溶解制成羟丙基-β-环糊精的饱和溶液，加入白芷挥发油加热并搅拌成为包合物溶液；

5)将上述葛根提取物和白芷提取物在加热搅拌的条件下加入所述包合物溶液中，调节pH至中性或弱碱性，按照药剂学方法制备成制剂。

6、权利要求5所述的制备方法，其中，含有挥发油的柴胡蒸馏液再进行重蒸馏，收集与柴胡原料药重量比为1.0-1.5毫升/克原料药的蒸馏液。

7、权利要求5所述的制备方法，其中，葛根饮片进行1次以上90-95％乙醇提取的提取液，除去乙醇后加水调整pH至酸性使沉淀溶解，取上清液在中性条件下浓缩至相对密度d50℃在1.09-1.12，先喷雾干燥成粉末，然后再以无水乙醇提取该粉末，提取液回收乙醇至干。

8、权利要求5所述的制备方法，其中，白芷饮片经70-75％乙醇提取后的浓缩物的精制过程包括：使该浓缩物在酸性条件下沉淀，取沉淀物用乙酸乙酯热回流提取，用碱液萃取除去乙酸乙酯液中的杂质，回收溶剂收集提取物，保持酸性条件下再使用环己烷进行热回流提取，提取物减压除去溶剂后溶于弱碱性溶液中，过滤后的滤液调整至酸性收集沉淀物。

9、权利要求8所述的制备方法，其中，白芷提取物的精制过程还包括：乙酸乙酯提取1次以上的提取液用碱液洗后除去不溶物，向溶剂层先加入多孔微粒物，除去乙酸乙酯后加入环己烷热回流提取2次以上，分离提取液，收集残留物用碱洗后调整滤液的pH到酸性，用环己烷重复热回流2次以上，分离提取液，将全部提取液合并，除去溶剂后用弱碱洗去沉淀，滤液调整至酸性，收集沉淀物。

10、权利要求7-9任一项所述的制备方法，葛根和白芷提取物精制过程的各步骤中调整滤液到酸性是指调整pH到2-3。

11、权利要求5所述的制备方法，过程4)中，包合温度在40-60℃，先用少量柴胡蒸馏液溶解羟丙基-β-环糊精，加入白芷挥发油搅拌包合1小时以上，再加入剩余柴胡蒸馏液继续搅拌包合0.5-6小时。

12、权利要求5所述的制备方法，其还包括将所述包合物溶液与葛根、白芷提取物的混合物按照药剂学方法制备成针剂、冻干粉针剂和口服制剂的过程。

13、权利要求5所述的制备方法，其还包括下述制备冻干粉针剂的过程：所述包合物溶液用碱液调整至pH7-8，加入辅剂于40-60℃保温溶解后，置于5-10℃保藏12-48小时，滤去沉淀，使滤液通过分子量10000-30000的超滤膜进行超滤，超滤液加入辅形剂及骨架剂，分装，冻干。